菌根真菌菌种快速扩繁方法
【专利摘要】本发明公开了一种菌根真菌菌种快速扩繁方法，包括基质准备、菌种接种、宿主播种、培养管理及收获保藏。本发明所需材料常见，操作过程简单，省时，省力，所扩繁菌种三个月就能达到常规扩繁技术五个月的效果，此扩繁技术较常规扩繁技术缩短了两个月甚至于三个月的时间；本发明扩繁的菌根真菌运用于试验的同时，也可以在生物防治、保护生态环境和现代化高科技农业领域得到广泛的应用。
【专利说明】菌根真菌菌种快速扩繁方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于微生物领域，具体而言，涉及一种土壤有益微生物快速高效扩繁菌根 真菌的方法。
【背景技术】
[0002] 目前，常规的菌根真菌扩繁技术存在以下不足：（1)需要4-5个月才能完成一个扩 繁周期，耗时较长；（2)扩繁所用基质以砂石为主，持水性差，需每隔2-3天浇一次水，耗时 费水；（3)扩繁过程中基质极易被暴露在空气中的杂菌污染，导致菌种纯度下降，甚至导致 扩繁失败。
【发明内容】
[0003] 为了快速高效地扩繁菌根真菌，满足试验和实际使用的需要，本发明提供一种省 时、省力、节水、有效的菌根真菌扩繁技术。为了实现本发明的目的，拟采用如下技术方案：
[0004] 本发明涉及一种菌根真菌菌种快速扩繁方法，其特征在于包括如下步骤：
[0005] (1)将灭菌基质砂石装入容器中至3/5处，加入接种菌剂平铺在基质上，接着再覆 一层灭菌基质至容器4/5处，浇透水后每盆播种宿主植物种子15-20粒，然后再覆0. 5-1 cm 的灭菌沙，最后将容器移入温室内，在上面覆盖一层保鲜膜来保水保温；（2)培养管理期间 温室温度控制在20_35°C，等种子发芽出苗顶着保鲜膜时在膜上扎个洞，将苗放出来生长， 此后每隔一周烧一次水，植株叶片开始发黄时加入适量Hoagland营养液，烧水或营养液时 直接将其洒在膜上，顺着膜孔即可流入容器内；（3)宿主植物生长到90天左右时，揭去保鲜 膜，剪去地上部分，干燥2周，将容器中所有培养物收获，即获得大量菌根真菌菌剂。
[0006] 在本发明的一个优选实施方式中，所述的宿主植物种子是高粱和/或玉米。
[0007] 在本发明的一个优选实施方式中，所述的菌根真菌菌种快速扩繁方法周期不超过 3个月。
[0008] 本发明所需材料常见，操作过程简单，省时，省力，所扩繁菌种三个月就能达到常 规扩繁技术五个月的效果，此扩繁技术较常规扩繁技术缩短了两个月甚至于三个月的时 间；本发明扩繁的菌根真菌运用于试验的同时，也可以在生物防治、保护生态环境和现代化 高科技农业领域得到广泛的应用。
[0009] 本发明的方法运用具有保水功能容易在花盆上黏着固定的保鲜膜，使本来持水性 很差的砂石培养基质的水分得到很好地保持；同时此保鲜膜还可以较好地保持基质相对较 高的温度，使植物在较适宜且稳定的温度下较快的生长；另外运用保鲜膜使基质与空气直 接接触面积大大减少，只有通过膜孔接触和交换空气，这样就有效地避免了杂菌的。
[0010] 本发明的有益效果是：
[0011] 本发明的有益效果是：宿主种子播种2天即可发芽出土，发芽率达到95%以上；力口 快植株生长时间，缩短扩繁时间1-2个月；节约水资源40-50% ;避免了杂菌污染。由此快 速高效地完成菌根真菌菌种的扩繁。
【专利附图】
【附图说明】
[0012] 图1是本发明播完种子，覆盖好保鲜膜的示意图。
[0013] 图2是种子发芽出苗后，把苗放出来生长的示意图。
[0014] 图3是培养管理的整体效果示意图。
[0015] 图中1代表保鲜膜；2代表砂石基质；3代表花盆；
[0016] 4代表宿主植物（高粱和玉米）；5代表膜孔。
【具体实施方式】
[0017] 下面结合附图和实施例对本发明进一步说明。
[0018] 图1中在完成了灭菌砂石基质的称装，菌种接种，宿主植物（高粱和玉米）的播种 以及浇水覆沙后，将花盆移入温室，最后在花盆上面覆盖一层保鲜膜来保水保温。
[0019] 具体操作步骤是：（1)将灭菌基质（砂石）装入花盆至3/5处，加入接种菌剂 l〇_15g平铺在基质上，接着再覆一层灭菌基质至花盆4/5处，浇透水后每盆播种宿主植物 (高粱、玉米）种子15-20粒，然后再覆0.5-1 cm的灭菌沙，最后将花盆移入温室内，在上 面覆盖一层保鲜膜来保水保温，促进种子快速萌发、提高种子发芽率和促进植株快速生长； (2)培养管理期间温室温度控制在20-35°C，等种子发芽出苗顶着保鲜膜时在膜上扎个洞， 将苗放出来生长，此后每隔一周烧一次水，植株叶片开始发黄时加入l〇〇mlHoagland营养 液，浇水和营养液时时直接将其洒在膜上，顺着膜孔即可流入盆内。（3)宿主植物生长到 90天左右时，孢子密度达到50个/ cm 3以上，揭去保鲜膜，剪去地上部分，干燥2周，将盆中 所有培养物收获，即获得大量菌根真菌菌剂，装袋，写好标签，将其保藏在阴凉干燥处即可。 经检测，宿主植物生长到两个月左右时，检测孢子密度时有些已经达到50个/ cm 3 ;生长到 两个半月时再检测，孢子密度大部分达到50个/ cm 3,有些达到80个/ cm 3,甚至超过100 个/ cm 3 ;生长到90天时，经检测孢子密度最少的是50个/ cm 3,大部分已经达到100个/ cm 3。扩繁完成的标志就是所有扩繁菌种孢子密度最少达到50个/ cm 3,由此可见，本发明 的方法通过不到3个月就可以完成扩繁。
[0020] 图2中当种子发芽出苗顶着保鲜膜时应立即在膜上扎个洞，将苗放出来生长。在 培养管理期间浇水和营养液时，将其洒在膜上顺着膜孔即可流入。
[0021] 以上所述是本发明的优选实施例，应当指出，对于本【技术领域】的普通技术人员来 说，在不脱离本发明所述原理的前提下，还可以作出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应 视为本发明的保护范围。
【权利要求】
1. 一种菌根真菌菌种快速扩繁方法，其特征在于包括如下步骤： (1)将灭菌基质砂石装入容器中至3/5处，加入接种菌剂平铺在基质上，接着再覆一层 灭菌基质至容器4/5处，浇透水后每盆播种宿主植物种子15-20粒，然后再覆0. 5-1 cm的灭 菌沙，最后将容器移入温室内，在上面覆盖一层保鲜膜来保水保温；（2)培养管理期间温室 温度控制在20-35°C，等种子发芽出苗顶着保鲜膜时在膜上扎个洞，将苗放出来生长，此后 每隔一周烧一次水，植株叶片开始发黄时加入适量Hoagland营养液，烧水或营养液时直接 将其洒在膜上，顺着膜孔即可流入容器内；（3)宿主植物生长到85-95天左右时，揭去保鲜 膜，剪去地上部分，干燥2周，将容器中所有培养物收获，即获得大量菌根真菌菌剂。
2. 根据权利要求1所述的方法，所述的宿主植物种子是高粱和/或玉米。
3. 根据权利要求1或2所述的方法，所述的菌根真菌菌种快速扩繁方法周期不超过3 个月。
【文档编号】A01G31/00GK104041393SQ201410263983
【公开日】2014年9月17日 申请日期:2014年6月13日 优先权日:2014年6月13日
【发明者】张峰, 段延玉, 南志标, 高鹏, 闫飞扬, 李芳
申请人:兰州大学