一种厚皮香的快速繁殖方法
【专利摘要】本发明涉及一种厚皮香的快速繁殖方法，包括外植体的消毒、芽诱导培养、丛生芽增殖、生根培养和炼苗移栽。本发明厚皮香组培方法操作简便，生长周期短，成活率高，遗传性状稳定，可以短期内获得大量的厚皮香幼苗。
【专利说明】
一种厚皮香的快速繁殖方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及厚皮香组织培养的快繁方法，属于植物【技术领域】。
【背景技术】
[0002]厚皮香,Tkmsgymnanthera(Wight et Am.) Beddome.，山茶科，灌木或小乔木，又名白花果，称杆红，莫红砍，山茶树，猪血柴，气血藤。分布于湖北、湖南、贵州、云南、广西、福建、广东、台湾等省。日本、柬埔寨、印度也有分布。多生于酸性黄壤、黄棕壤的常绿阔叶林中或林缘，垂直分布海拔700?3500m之间。厚皮香适应性强，又耐阴，树冠浑圆，枝叶层次感强，叶肥厚入冬转绯红，是较优良的下木，适宜种植在林下、林缘等处，为基础栽植材料。喜阴湿环境，在常绿阔叶树下生长旺盛。也喜光，较耐寒，能忍受-1o°c低温。喜酸性土，也能适应中性土和微碱性土。根系发达，抗风力强，萌芽力弱，生长缓慢，不耐强度修剪，但仍可进行轻度修剪，抗污染力强厚皮香生长较慢，原皮香为半阳性树种，抗有害气体性强，又是厂矿区的绿化树种，也是一种中药材，花可入药，可清热解毒，散瘀消肿，主治疥癣瘙痒，感冒等症。目前主要的繁殖方法是播种和扦插繁殖，发芽率较低，只有50%?60%。利用组培方法可以有效的提高厚皮香的繁殖效率，但目前国内外尚无研究。
【发明内容】
[0003]本发明所要解决的技术问题是提供一种厚皮香的快速繁殖方法，采用本发明方法繁殖的厚皮香组培方法简便，生长周期短，成活率高，遗传性状稳定，可以短期内获得大量的厚皮香幼苗。
[0004]本发明所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的:
取厚皮香带芽茎段，先在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污溃，流水冲洗25min，超净工作台上75%酒精处理30s，次氯酸钠处理12min，无菌水冲洗5_7遍，灭菌处理过的厚皮香带芽茎段接入培养基配方为B5+IAA0.2mg/L+IBA0.5mg/l诱导培养基中进行芽诱导培养，附加蔗糖30g/L，琼脂8g/L，PH5，光照ΙΟΟΟΙχ，诱导出来的芽放入增殖培养基B5+2，4-D0.2mg/L+TDZ0.3mg/L+ABAlmg/L,附加蔗糖 30g/L，琼脂 8g/L，PH5，光照 ΙΟΟΟΙχ，光期10h,暗期14h，增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基White +ΝΑΑ0.2mg/L,生根培养条件为蔗糖20g/L，琼脂6.5g/L，PH5，光照ΙΟΟΟΙχ，湿度60_70%，然后将试管苗进行炼苗移栽，小心取出长约5cm的试管苗，洗净根部培养基，栽植于珍珠岩:泥炭土 =1:1的基质中培养，放置温室，用高锰酸钾溶液定期喷洒，培养20d后，移栽入大田，30d统计成活率。
[0005]采用本发明制备的厚皮香成活率为95%，周期短，产量大，能耗少，利于大规模种植。
[0006]下面将结合【具体实施方式】对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
[0007]实施例1
取厚皮香带芽茎段，先在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污溃，流水冲洗25min，超净工作台上75%酒精处理30s，次氯酸钠处理12min，无菌水冲洗5_7遍，灭菌处理过的厚皮香带芽茎段接入培养基配方为MS +ΙΑΑ0.2mg/L+IBA0.5mg/l诱导培养基中进行芽诱导培养，附加蔗糖30g/L，琼脂8g/L，PH5，光照ΙΟΟΟΙχ，诱导出来的芽放入增殖培养基B5+2，4-D0.lmg/L+TDZ0.2mg/L+ABAlmg/L,附加蔗糖 30g/L,琼脂 8g/L，PH5，光照 ΙΟΟΟΙχ，光期1h,暗期14h，增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基White +NAA0.lmg/L,生根培养条件为蔗糖20g/L，琼脂6.5g/L，PH5，光照ΙΟΟΟΙχ，湿度60_70%，然后将试管苗进行炼苗移栽，厚皮香成活率为90%。
[0008]实施例2
取厚皮香带芽茎段，先在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污溃，流水冲洗25min，超净工作台上75%酒精处理30s，次氯酸钠处理12min，无菌水冲洗5_7遍，灭菌处理过的厚皮香带芽茎段接入培养基配方为White+IAA0.2mg/L+IBA0.5mg/l诱导培养基中进行芽诱导培养，附加蔗糖30g/L，琼脂8g/L，PH5，光照ΙΟΟΟΙχ，诱导出来的芽放入增殖培养基B5+2，4-D0.2mg/L+TDZ0.5mg/L+ABAlmg/L,附加蔗糖 30g/L，琼脂 8g/L，PH5，光照 ΙΟΟΟΙχ，光期10h，暗期14h，增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基White +NAA0.2mg/L,生根培养条件为蔗糖20g/L，琼脂6.5g/L，PH5，光照ΙΟΟΟΙχ，湿度60_70%，然后将试管苗进行炼苗移栽，厚皮香成活率为91%。
[0009]实施例3
取厚皮香带芽茎段，先在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污溃，流水冲洗25min，超净工作台上75%酒精处理30s，次氯酸钠处理12min，无菌水冲洗5_7遍，灭菌处理过的厚皮香带芽茎段接入培养基配方为White +ΙΑΑ0.2mg/L+IBA0.5mg/l诱导培养基中进行芽诱导培养，附加蔗糖30g/L，琼脂8g/L，PH5，光照ΙΟΟΟΙχ，诱导出来的芽放入增殖培养基B5+2，4-D0.2mg/L+TDZ0.2mg/L+ABAlmg/L,附加蔗糖 30g/L，琼脂 8g/L，PH5，光照 ΙΟΟΟΙχ，光期10h，暗期14h，增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基White +NAA0.lmg/L,生根培养条件为蔗糖20g/L，琼脂6.5g/L，PH5，光照ΙΟΟΟΙχ，湿度60_70%，然后将试管苗进行炼苗移栽，厚皮香成活率为92%。
[0010]实施例4
取厚皮香带芽茎段，先在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污溃，流水冲洗25min，超净工作台上75%酒精处理30s，次氯酸钠处理12min，无菌水冲洗5_7遍，灭菌处理过的厚皮香带芽茎段接入培养基配方为MS +ΙΑΑ0.2mg/L+IBA0.5mg/l诱导培养基中进行芽诱导培养，附加蔗糖30g/L，琼脂8g/L，PH5，光照ΙΟΟΟΙχ，诱导出来的芽放入增殖培养基B5+2，
4-D0.lmg/L+TDZ0.5mg/L+ABAlmg/L，附加蔗糖 30g/L,琼脂 8g/L，PH5，光照 ΙΟΟΟΙχ，光期10h，暗期14h，增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基White +NAA0.lmg/L,生根培养条件为蔗糖20g/L，琼脂6.5g/L，PH5，光照ΙΟΟΟΙχ，湿度60_70%，然后将试管苗进行炼苗移栽，厚皮香成活率为93%。
【权利要求】
1.一种厚皮香的快速繁殖方法，包括无菌外植体的获得、芽的诱导、丛生芽的增殖、生根诱导、野外炼苗移栽，其主要步骤如下: (1)取厚皮香带芽茎段，按照常规的消毒方法对其进行灭菌处理； (2)将步骤(I)灭菌处理过的厚皮香带芽茎段接入培养基配方为MS/White/B5+IAA0.2mg/L+IBA0.5mg/l诱导培养基中进行芽诱导培养，附加蔗糖30g/L，琼脂8g/L，PH5，光照 100lx ； (3)取步骤(2)诱导出来的芽放入增殖培养基化+2，4-00.1-0.2mg/L+TDZ0.2-0.5mg/L+ABAlmg/L,附加蔗糖 30g/L，琼脂 8g/L，PH5，光照 ΙΟΟΟΙχ，光期 10h，暗期 14h ； (4)取步骤(3)增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基White+ΝΑΑ0.1-0.2mg/L ； (5)取步骤(4)生根后的厚皮香试管苗先进行室内炼苗培养，然后移栽到大田进行培养。
2.按照权利要求1所述的一种厚皮香的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(I)中所述厚皮香无菌芽的获得为，取厚皮香带芽茎段，先在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污溃，流水冲洗25min，超净工作台上75%酒精处理30s，次氯酸钠处理12min，无菌水冲洗5_7遍。
3.按照权利要求1所述的一种厚皮香的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(2)诱导培养基采用了三种培养基MS、White、B5筛选其诱导效果。
4.按照权利要求1所述的一种厚皮香的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(3)增殖培养基中附加了 ABAlmg/L，能促进丛生芽的增殖。
5.按照权利要求1所述的一种厚皮香的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(4)中的生根培养条件为蔗糖20g/L，琼脂6.5g/L，PH5，光照ΙΟΟΟΙχ，湿度60_70%。
6.按照权利要求1所述的一种厚皮香的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(5)中厚皮香的炼苗培养方法为小心取出长约5cm的试管苗,洗净根部培养基,栽植于珍珠岩:泥炭土=1:1的基质中培养，放置温室，用高锰酸钾溶液定期喷洒，培养20d后，移栽入大田，30d统计成活率。
【文档编号】A01H4/00GK104255450SQ201410445989
【公开日】2015年1月7日 申请日期:2014年9月4日 优先权日:2014年9月4日
【发明者】张金芳, 杨存 申请人:南京标科生物科技有限公司