莪术组培快繁培养基的制作方法

文档序号:15296451发布日期:2018-08-31 19:24阅读:541来源:国知局

本发明涉及植物的组织培养技术,具体涉及莪术组培快繁培养基。



背景技术:

莪术为姜科姜黄属多年生草本植物。中药莪术已具有上千年的历史,在医学上应用非常广泛。唐《药性论》及李时珍《本草纲目》均有记载,莪术具有行气破血、消食化积之功效,被称为血中之气药。

莪术的药用部位主要是根茎和块根,主要含挥发油类和姜黄素类成分,此外还有树脂类和糖类等。在栽培生产上以根茎进行营养繁殖,耗种量大,且病毒化严重,品质下降,广西莪术开花少,开花多不结果实,根茎繁殖耗种量大,且病毒化严重,品质下降。为了解决莪术生产上存在的问题,利用莪术一部分在人工控制的营养和环境条件下快繁,达到取材少、繁殖速度快、增殖倍数高,生长周期短、保持品种原有中药特性的目的,使莪术生产得到发展。



技术实现要素:

本发明要解决的技术问题是提供一种能够在较短时间内培育得到大量莪术种苗的莪术组培快繁培养基。

本发明所述的莪术组培快繁培养基,包括初代培养基,继代及生根培养基,其特征在于:

所述初代培养基的配方为:

硝酸钾5-15mg/l、一水硝酸钙5-15mg/l、七水硫酸亚铁5-15mg/l、硝酸铵3-8mg/l、无水硫酸镁3-8mg/l、磷酸二氢钾3-8mg/l、6-ba10-20mg/l、naa1-3mg/l、葡萄糖25-35mg/l、琼脂3-6mg/l;

所述继代及生根培养基的配方为:

ms+2,4-d1-2mg/l+kt0.2-0.5mg/l。

上述技术方案中,所述初代培养基的配方优选为:

硝酸钾10mg/l、一水硝酸钙10mg/l、七水硫酸亚铁10mg/l、硝酸铵5mg/l、无水硫酸镁5mg/l、磷酸二氢钾5mg/l、6-ba4mg/l、naa2mg/l、葡萄糖30mg/l、琼脂4.8mg/l;

所述继代及生根培养基的配方优选为:

ms+2,4-d1.5mg/l+kt0.4mg/l。

上述技术方案中,莪术在初代培养基中先进行暗培养3-5天,然后再进行光照培养;在继代及生根培养基中进行光照培养;所述暗培养的培养条件为:温度为25±5℃,相对湿度为40-60%;所述光照培养的培养条件为:温度为25±5℃,相对湿度为40-60%,光照时间为12-18h/d,光照强度为1500-3000lx。在上述条件下,莪术在初代培养基中先暗培养3-5天,之后再进行光照培养20-40天,即可得到嫩芽;在继代及生根培养基中培养10-15天,即可得到丛生苗,继续培养10-20天,即可得到长有3-5条根的生根苗。

上述技术方案中,以莪术的茎尖或茎段作为外植体,经消毒处理后接种于初代培养基中进行培养,直至在外植体上诱导形成嫩芽。所述的消毒处理与现有技术相同。

与现有技术相比,本发明的特点在于:采用大量元素、营养物质、6-ba和naa生长激素等进行特定搭配组合作为初代培养基,可将外植体快速诱导得到嫩芽;进一步地,在继代培养和生根培养时采用同一培养基,方便省事;本发明采用上述初代培养基结合特定的继代及生根培养基进行培养,获得生根苗的时间短,生根率高,可获得大量整齐一致的无菌种苗,解决了传统莪术种苗繁殖效率低、劳动强度大等不足,而且培育得到的莪术种苗无菌健壮,移栽后成活率高。

附图说明

图1为本发明实施例1中在继代及生根培养基中培养得到的生根苗的照片。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步的详述,以更好地理解本发明的内容,但本发明并不限于以下实施例。

实施例1

1)选取无病虫害、生长健壮的莪术茎段作为外植体,用洗衣粉或洗涤剂清洗表面的灰尘,再放置在自来水冲洗2h,在超净工作台用75%酒精处理60s,再用无菌水冲洗3次,再用5%的次氯酸钠(naclo)加入2滴吐温试剂消毒10min;最后用无菌水冲洗5遍;按生长极性的上、下端,正放在培养基上进行接种;

2)将消毒后的外植体接种于初代培养基中,进行暗培养5天,之后正常光照培养30天,在外植体上诱导形成嫩芽,所得嫩芽呈淡绿色,粗壮,生长良好;其中,所述的初代培养基配方为:硝酸钾10mg/l、一水硝酸钙10mg/l、七水硫酸亚铁10mg/l、硝酸铵5mg/l、无水硫酸镁5mg/l、磷酸二氢钾5mg/l、6-ba4mg/l、naa2mg/l、葡萄糖30mg/l、琼脂4.8mg/l,ph5.8;光照培养条件为温度为25±1℃,光照时间为16h/d,光照强度为2000lx;

3)将所得嫩芽分切成数段转入继代及生根培养基中,先光照培养10天,得到高度为4-5cm的丛生苗,所得丛生苗呈淡绿色,生长良好;之后继续光照培养10天,每株长根3-5条,根长2-3cm,生根率99.7%,得到生根苗(如图1所示);其中:所述的继代及生根培养基配方为:ms+2,4-d1.5mg/l+kt0.4mg/l,ph5.8;光照培养条件为:温度为25±1℃,光照时间为12h/d,光照强度为2000lx;

5)将所得生根苗按常规方法进行炼苗,即得到莪术种苗。

实施例2

重复实施例1,不同的是:

将步骤2)中的初代培养基配方修改为:硝酸钾5mg/l、一水硝酸钙15mg/l、七水硫酸亚铁15mg/l、硝酸铵3mg/l、无水硫酸镁3mg/l、磷酸二氢钾8mg/l、6-ba20mg/l、naa1mg/l、葡萄糖25mg/l、琼脂6mg/l,ph5.8;光照培养条件改为:温度为25±1℃,光照时间为18h/d,光照强度为1500lx,培养时间为25天,所得嫩芽呈淡绿色,较粗壮;

将步骤3)中的继代及生根培养基配方修改为:ms+kt1.0mg+naa0.2mg/l,ph5.8;光照培养时间共计25天,最后所得生根苗的主根壮、须根多,植株较粗壮;经统计,生根率为98.2%。

实施例3

重复实施例1,不同的是:

将步骤2)中的初代培养基配方修改为:硝酸钾15mg/l、一水硝酸钙5mg/l、七水硫酸亚铁5mg/l、硝酸铵8mg/l、无水硫酸镁8mg/l、磷酸二氢钾3mg/l、6-ba10mg/l、naa3mg/l、葡萄糖35mg/l、琼脂3mg/l,ph5.8;光照培养条件不变,培养时间为30天,所得嫩芽呈淡绿色,粗壮;

将步骤3)中的继代及生根培养基配方修改为:ms+kt2.0mg+naa0.5mg/l,ph5.8;光照培养时间共计20天,所得生根苗的主根壮、须根多,植株较粗壮;经统计,生根率为97.8%。

田间实验:

2017年3月,按本发明实施例1所述的培养基及方法培育莪术种苗,将得到的莪术种苗直接移栽于实验田(2亩,行距90cm,株距10cm)中,之后按常规管理方式进行管理,移栽成活率≥99%(移植莪术种苗成活株数/莪术种苗的总移植株数×100%)。于2017年12月收成,期间一直按现有常规管理方式进行管理,经统计,莪葶亩产量约为2121kg,莪术亩产量约为415kg。

2017年3月,以茎段以茎扦插极易生根。选择一年生以上莪术肉茎,切成20-30cm的茎段,在实验田(2亩)中斜插入土,插入深度为5-10cm,扦插时行距90cm,株距10cm。扦插完成至收成期间(2017年12月收成)的管理按现有常规管理方式进行管理,整个栽培过程中没有发生病害。经统计,莪葶亩产量约为1867kg,莪术亩产量约为379kg。

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