本发明涉及石斛培植技术领域，尤其是涉及石斛的有性快速繁殖及组培相结合的开放性培育方法。
背景技术：
公知的，石斛种子的有性繁殖开放性组培方法要经过很多不同的步骤，但是只有采用种子有性繁殖才能充分保证石斛遗传性状的多元性，但是目前市场上对石斛种子有性快速繁殖以及开放性组培方面处于一个初级阶段，因此满足不了市场的需求，从而造成了大量人力物力和财力的浪费，极大的影响了石斛市场的发展，进一步阻碍了行业的进步。
石斛为兰科石斛属多年生附生草本植物，为国家二级保护植物，有较高的观赏、药用和保健价值，由于其对生态环境要求严格，喜欢阴凉湿润，温差大的环境，且石斛属植物种子细小，无胚乳，需要真菌共生萌发，自然萌发率极低，再加上人类的过度采集，环境的恶化，生境的破坏造成野生资源枯竭，市场价格飙升，因此人工繁育已成主流趋势，但是组培技术门槛高，专业性强，技术性强，投资大，周期长，运行资本大，故组培技术无法大面积推广，成为制约规模化栽培的瓶颈，基于现行技术的缺陷，本发明专利即是解决了这一难题。
技术实现要素：
为了克服背景技术中的不足，本发明公开了石斛的有性快速繁殖及组培相结合的开放性培育方法，本发明的目的在于通过石斛种子快速的繁育出批量而廉价的优质石斛种苗，即该技术主要是利用石斛种子，在特制培养基下，并适当控制温度、光照等条件，使石斛达到开放性、有性快繁及组培增殖的目的。
为了实现所述发明目的，本发明采用如下技术方案：
石斛的有性快速繁殖及组培相结合的开放性培育方法，包括圆球茎诱导培养、圆球茎增殖分化、丛生芽诱导培养和生根培养四个步骤，具体操作如下：
第一步，圆球茎诱导培养：采集新鲜的石斛蒴果，酒精清洗表面灰尘，将蒴果剖开，取出种子，把石斛种子播种到圆球茎诱导培养基上，在夜温18~23℃，日温22~29℃，光照1800~2300勒克斯的光照下，每日8~14小时的条件下进行诱导培养，7-10天种子开始膨大变绿，再过30天，种子形成直径2-3mm的绿色小颗粒；
第二步，圆球茎增殖分化：将种子萌发后形成的绿色小颗粒转移到增殖分化培养基上，在夜温18~23℃，日温22~29℃，光照1800~2300勒克斯，每日8~14小时的条件下进行增殖分化培养，7-10天以后，圆球茎已经适应新的环境，开始增殖，变成桑葚状，再过40天左右，桑葚状的圆球茎表面开始分化出芽点，再过25天左右，开始分叶，再过30天左右，形成丛生状芽苗；
第三步，生根培养:当丛生芽长到3-4cm时，将其切分成单芽，接种到生根培养基上，进行诱导生根培养，在夜温15~22℃，日温22~33℃，光照3300~3800勒克斯，每日15~20个小时的条件下进行诱导生根，20天后芽苗开始生根，初生根白色，多毛，有较强活力，接触到培养基后，迅速蔓延，60天后平均每株有根3-5条，每条3-5cm，此时植株发育完整，即可用来炼苗栽培。
所述圆球茎诱导培养基:½ms+琼脂5g+蔗糖30g+naa0.5mg+6-ba0.5mg+土豆汁200ml+四霉素2-6ml.ph5.8。
所述圆球茎增殖分化培养基:½ms+琼脂5g+蔗糖30g+naa0.5mg+6-ba2mg+土豆汁200ml+四霉素2-6ml.ph5.8。
所述生根培养基:½ms+琼脂5g+蔗糖30g+naa2mg+香蕉泥50g+土豆汁100ml+四霉素2-6ml.ph5.8。
所述改良½ms培养基的组分为:mg/l
大量元素：nh4no3800
kno32200
cacl２•2h2o800
mgso4•7h2o370
kh2po4700
微量元素：ki0.83
h3bo36.2
mnso4•4h2o22.3
znso4•7h2o8.6
na2mno4•2h2o0.25
cuso4•5h2o0.025
cocl2•6h2o0.025
feso4•7h2o（27.8）+na2-edta•2h2o（37.3）
有机成分：肌醇100烟酸0.5盐酸硫胺素100盐酸吡哆醇100
甘氨酸200萘乙酸钠1cdpta10复硝酚钠0.1土豆汁200ml香蕉汁100ml。
由于采用了上述技术方案，本发明具有如下有益效果：采用种子有性繁殖，能充分保证石斛遗传性状的多元性，对新品种的培育有积极意义。同时本发明还大大缩短了石斛的繁殖周期，省去了复杂的操作及设备，减少了大量的人力，物力及财力。
【具体实施方式】
通过下面的实施例子可以详细的解释本发明，公开本发明的目的旨在保护本发明范围内的一切技术改进。
实施例1：实施本发明所述的石斛的有性快速繁殖及组培相结合的开放性培育方法，包括圆球茎诱导培养、圆球茎增殖分化、丛生芽诱导培养和生根培养四个步骤，具体操作如下：
第一步，圆球茎诱导培养：采集新鲜的石斛蒴果，酒精清洗表面灰尘，将蒴果剖开，取出种子，把石斛种子播种到圆球茎诱导培养基上，在夜温20℃，日温25℃，光照2000勒克斯的光照下，每日12小时的条件下进行诱导培养，7-10天种子开始膨大变绿，再过30天，种子形成直径2-3mm的绿色小颗粒；
第二步，圆球茎增殖分化：将种子萌发后形成的绿色小颗粒转移到增殖分化培养基上，在夜温20℃，日温25℃，光照2000勒克斯，每日12小时的条件下进行增殖分化培养，7-10天以后，圆球茎已经适应新的环境，开始增殖，变成桑葚状。再过40天左右，桑葚状的圆球茎表面开始分化出芽点，再过25天左右，开始分叶，再过30天左右，形成丛生状芽苗；
第三步，生根培养:当丛生芽长到3-4cm时，将其切分成单芽，接种到生根培养基上，进行诱导生根培养，在夜温18℃，日温28℃，光照3500勒克斯，每日18个小时的条件下进行诱导生根，20后芽苗开始生根，初生根白色，多毛，有较强活力，接触到培养基后，迅速蔓延，60天后平均每株有根3-5条，每条3-5cm，此时植株发育完整，即可用来栽培。
实施例2：实施本发明所述的石斛的有性快速繁殖及组培相结合的开放性培育方法，包括圆球茎诱导培养、圆球茎增殖分化、丛生芽诱导培养和生根培养四个步骤，具体操作如下：
第一步，圆球茎诱导培养：采集新鲜的石斛蒴果，酒精清洗表面灰尘，将蒴果剖开，取出种子，把石斛种子播种到圆球茎诱导培养基上，在夜温18℃，日温22℃，光照1800勒克斯的光照下，每日8小时的条件下进行诱导培养，7-10天种子开始膨大变绿，再过30天，种子形成直径2-3mm的绿色小颗粒；
第二步，圆球茎增殖分化：将种子萌发后形成的绿色小颗粒转移到增殖分化培养基上，在夜温18℃，日温22℃，光照1800勒克斯，每日8小时的条件下进行增殖分化培养，7天以后，圆球茎已经适应新的环境，开始增殖，变成桑葚状，再过40天左右，桑葚状的圆球茎表面开始分化出芽点，再过25天左右，开始分叶，再过30天左右，形成丛生状芽苗；
第三步，生根培养:当丛生芽长到3-4cm时，将其切分成单芽，接种到生根培养基上，进行诱导生根培养，在夜温15℃，日温22℃，光照3000勒克斯，每日15个小时的条件下进行诱导生根，20天后芽苗开始生根，初生根白色，多毛，有较强活力，接触到培养基后，迅速蔓延，60天后平均每株有根3-5条，每条3-5cm，此时植株发育完整，即可用来栽培。
实施例3：实施本发明所述的石斛的有性快速繁殖及组培相结合的开放性培育方法，包括圆球茎诱导培养、圆球茎增殖分化、丛生芽诱导培养和生根培养四个步骤，具体操作如下：
第一步，圆球茎诱导培养：采集新鲜的石斛蒴果，酒精清洗表面灰尘，将蒴果剖开，取出种子，把石斛种子播种到圆球茎诱导培养基上，在夜温23℃，日温29℃，光照2300勒克斯的光照下，每日14小时的条件下进行诱导培养，7-10天种子开始膨大变绿，再过30天，种子形成直径2-3mm的绿色小颗粒；
第二步，圆球茎增殖分化：将种子萌发后形成的绿色小颗粒转移到增殖分化培养基上，在夜温23℃，日温29℃，光照2300勒克斯，每日14小时的条件下进行增殖分化培养，10天以后，圆球茎已经适应新的环境，开始增殖，变成桑葚状，再过40天左右，桑葚状的圆球茎表面开始分化出芽点，再过25天左右，开始分叶，再过30天左右，形成丛生状芽苗；
第三步，生根培养:当丛生芽长到3-4cm时，将其切分成单芽，接种到生根培养基上，进行诱导生根培养，在夜温22℃，日温33℃，光照3800勒克斯，每日20个小时的条件下进行诱导生根，20天后芽苗开始生根，初生根白色，多毛，有较强活力，接触到培养基后，迅速蔓延，60天后平均每株有根3-5条，每条3-5cm，此时植株发育完整，即可用来栽培。
本发明未详述部分为现有技术，尽管结合优选实施方案具体展示和介绍了本发明，具体实现该技术方案方法和途径很多，以上所述仅是本发明的优选实施方式，但所属领域的技术人员应该明白，在不脱离所附权利要求书所限定的本发明的精神和范围内，在形式上和细节上可以对本发明做出各种变化，均为本发明的保护范围。