酸2. Omg/L; FeS〇4 · 7出Ο 27.8mg/L、化2-邸ΤΑ · 2出Ο 37.3mg/L。
[0019] W下具体实施例对本发明的应用原理作进一步描述： 实施例1 MS培养基的配制： 工作液浓度含(单位mg/L): 大量元素：硝酸锭NH2NO3 1650、硝酸钟KN03 1900、氯化巧CaCl2.2H2〇 440、硫酸儀 MgS〇4 · 7出0 370、憐酸二氨钟KH2PO4 170 微量元素：舰化钟1(10.83、棚酸出8〇3 6.2、硫酸儘1115〇4.4此0 22.3、硫酸锋211504.7 出0 8.6、钢酸钢化2]?〇04.2出0 0.25、硫酸铜加504.5出0 0.0025、氯化钻(：〇(：12.6出0 0.0025 肌醇：100 有机溶液:烟酸0.5、盐酸化唉醇(维生素 B6)0.5、盐酸硫胺素(维生素 B1)0.5、甘氨酸 2.0 铁盐：尸65〇4*7出0 27.8、化2-邸了4*2出0 37.3。
[0020] 将大量元素放大至10倍浓度配制成母液1L备用，微量元素、肌醇溶液、有机溶液、 铁盐溶液分别放大至100倍浓度配制成母液1L备用。
[0021 ]大量元素母液配制:称取上述大量元素原料含量的10倍药品，各自溶解，然后混合 均匀，容量瓶定容1L。
[0022] 微量元素母液配制：称取上述微量元素原料含量的100倍药品，各自溶解，然后混 合均匀，容量瓶定容1L。
[0023] 肌醇母液配制:称取上述肌醇溶液原料含量的100倍药品，溶解，然后混合均匀，容 量瓶定容1L。
[0024] 有机母液配制：称取上述有机溶液原料含量的100倍药品，各自溶解，然后混合均 匀，容量瓶定容1L。
[0025] 铁盐母液配制：称取上述铁盐溶液原料含量的100倍药品，各自溶解，然后混合均 匀，容量瓶定容1L。
[0026] 量取上述大量元素母液100ml的量，其它各母液各10ml的量，混合均匀，稀释，容量 瓶定容至1L即得MS。
[0027] 实施例2观赏石恼组培用诱导培养基 将实施例1制备的各母液量取大量元素母液100ml的量，其它各母液各10ml的量，加入 6-节氨基嚷岭 0.6mg/L、糞乙酸 0.3mg/L、薦糖 30000mg/L、琼脂 10000-15000mg/l;PH 值 5.8-6.0。将上述原料混合均匀，稀释至1L，琼脂粉煮沸，使得琼脂粉溶解即得。
[0028] 实施例3观赏石恼组培用增殖培养基 将实施例1制备的各母液量取大量元素母液100ml的量，其它各母液各10ml的量，加入 6-节氨基嚷岭 l.Omg/L、糞乙酸 0.3mg/L、薦糖 30000mg/L、琼脂 10000-15000mg/l;PH 值 5.8-6.0。将上述原料混合均匀，稀释至1L，琼脂粉煮沸，使得琼脂粉溶解即得。
[0029] 实施例4观赏石恼组培用生根培养基 将实施例1制备的各母液量取大量元素母液50ml的量，其它各母液各5ml的量，加入吗I 噪下酸0.5mg/L、糞乙酸0.1 mg/L、薦糖30000mg/L、琼脂 10000-15000mg/l;PH值5.8-6.0。将 上述原料混合均匀，稀释至1L，琼脂粉煮沸，使得琼脂粉溶解即得。
[0030] 实施例5 1) 、选择植物早春发芽时连续3天无雨后，采集健壮的无病虫害观赏石恼的嫩茎段，作 为组织培养的外植体，将采集到的外植体用洗衣粉水清洗干净，再放在流水下冲洗30min， 在超净工作台上用75%酒精消毒10-60S，再用无菌水冲洗3-5遍，之后用0.1%(质量百分比） 升隶消毒3-lOmin，无菌水冲洗3-5遍； 2) 、将消毒后的外植体接种到诱导培养基(实施例2)上，送入培养室进行无菌培养，培 养室的条件为溫度:25 ± rC，光照强度：150化X-2000LX，光照时间：12h/d。在此过程中观察 外植体分化和诱导情况，筛选出最佳的外植体种类和培养基配方，将分化幼芽多的外植体 块转接到增殖培养基(实施例3)上，经过30d培养即可增殖3-5倍，得到分花苗。
[0031] 3)、将生长健壮、旺盛的分花苗转接在生根培养基(实施例4)上诱导生根，诱导生 根先暗培养8-14d，然后光照培养3周，得到生根幼苗，可W准备移栽了。
[0032] 4)、将生根幼苗先进行炼苗，然后移栽。把生根后的组培苗移出培养瓶，借助毛刷 洗净根部的培养基，放在盛满水的小盒中，借助橡皮筋固定小苗，水面高度W不超过根部为 宜，置于炼苗室炼苗3-5d，上覆透明塑料薄膜，然后移栽到W赔石为基质的育苗盘中，移栽 成活率达到95%左右。
[0033] 移栽过程中注意几点：Φ移栽前覆盖拱棚、透明塑料薄膜，拱棚内用百菌清消毒， 育苗盘也要消毒；思借助綴子将小苗根部上的±捏实，让根和基质充分接触;盛育苗盘移 栽上组培苗后放在拱棚中，喷水，使得拱棚内湿度100%，一个星期后慢慢通风，炼苗，然后去 掉透明塑料薄膜。蛋去掉透明塑料薄膜后喷稀释500倍MS营养液(不含薦糖和琼脂的），W后 每周喷施一次。W上几点均提高移栽苗的成活率。
[0034] W上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用W限制本发明，凡在本发明的精 神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1. 一种观赏石榴培养基，其特征在于，该观赏石榴培养基包括诱导培养基、增殖培养基 和生根培养基； 所述诱导培养基包括：1L培养基中含有MS基础培养基各工作液原料、6-苄氨基嘌呤0.6mg/L、萘乙酸0· 3mg/L、鹿糖30000mg/L、琼脂10000_15000mg/L; 所述增殖培养基包括：1L培养基中含有MS基础培养基各工作液原料、6-苄氨基嘌呤1 .Omg/L、萘乙酸0· 3mg/L、鹿糖30000mg/L、琼脂10000_15000mg/L; 所述生根培养基包括：1L培养基中含有1/2MS基础培养基各工作液原料、吲哚丁酸 0· 5mg/L、萘乙酸0·lmg/L、鹿糖30000mg/L、琼脂 10000_15000mg/L。2. 如权利要求1所述的观赏石榴培养基，其特征在于，所述的MS培养基的工作液包括： 大量元素、微量元素、肌醇、有机溶液和铁盐； 所述大量元素包括硝酸铵NH2N〇3、硝酸钾KN〇3、氯化钙CaCl2 · 2H20、硫酸镁MgS〇4 · 7H20 和磷酸二氢钾KH2PO4; 所述微量元素包括碘化钾ΚΙ、硼酸H3B〇3、硫酸猛MnS〇4 · 4H20、硫酸锌ZnS〇4 · 7H20、钼酸 钠Na2Mo〇4 · 2H20、硫酸铜CuS〇4 · 5H20和氯化钴CoCl2 · 6H20; 所述有机溶液包括烟酸、盐酸吡哆醇和甘氨酸； 所述铁盐包括FeS〇4 · 7H20 和Na2_EDTA· 2H20。3. 如权利要求1所述的观赏石榴培养基，其特征在于，所述的MS培养基的工作液浓度 为：硝酸铵NH2N〇3 1650mg/L、硝酸钾KN〇3 1900mg/L、氯化钙CaCl2,2H20 440mg/L、硫酸镁 MgS〇4,7H20 370mg/L、磷酸二氢钾KH2PO4170mg/L; 碘化钾KI0.83mg/L、硼酸H3B〇3 6.2mg/L、硫酸锰MnS〇4.4H20 22.3mg/L、硫酸锌ZnS〇4 · 7H20 8.6mg/L、钼酸钠Na2Mo〇4 · 2H20 0.25mg/L、硫酸铜CuS〇4 · 5H20 0.0025mg/L和 氯化钴CoCl2 · 6H20 0.0025mg/L; 肌醇：l〇〇mg/L; 烟酸0 · 5mg/L、盐酸吡咳醇0 · 5mg/L、盐酸硫胺素0 · 5mg/L、甘氨酸2 · Omg/L; FeS〇4 ·7H2O 27.8mg/L、Na2-EDTA ·2H2O 37.3mg/L。4. 如权利要求1所述的观赏石榴培养基，其特征在于，所述诱导培养基pH值5.8-6.0， 增殖培养基pH值5.8-6.0，生根培养基pH值5.8-6.0。5. -种利用权利要求1所述的观赏石榴培养基进行观赏石榴组培的方法，其特征在于， 该观赏石榴组培方法包括： 步骤一，在植物早春发芽时连续3天无雨后，采集健壮的无病虫害观赏石榴的嫩茎段， 作为组织培养的外植体，将采集到的外植体用洗衣粉水清洗干净，再放在流水下冲洗 30min，在工作台上于培养皿中用75%酒精消毒10-60s，再用无菌水冲洗3-5遍，之后用质量 百分比为0.1%的升萊消毒3-10min，无菌水冲洗3-5遍； 步骤二，将消毒后的外植体接种到诱导培养基上，送入培养室进行无菌培养，培养基为MS+6-BA0 · 6mg/L+NAA0 · 3mg/L+蔗糖30000mg/L+琼脂10000-15000mg/L;经诱导分化后，得到 分化苗，将分化苗转移到增殖培养基中进行增殖培养，得到大量分化苗幼苗，增殖培养基为 MS+6-BA1 · 0mg/L+NAA0 · 3mg/L+蔗糖30000mg/L+琼脂10000-15000mg/L; 步骤三，将分化苗幼苗接种在生根培养基中进行生根培养，生根培养基为1/2MS+ 18八0.511^/1+熟40.111^/1+蔗糖3000011^/1+琼脂10000-1500011^/1，暗培养8-14(1，再光照培 养3周，得到扎根的组培苗； 步骤四，将扎根后的组培苗炼苗3-5d，移栽到蛭石为基质的栽培盘中在拱棚内锻炼，当 组培苗移栽成活后40-60d，移栽到大田中。
【专利摘要】本发明公开了一种观赏石榴组培方法及培养基，该培养方法包括外植体的采取、分化苗的诱导、分花苗的增殖培养、分花苗的生根培养以及组培苗的大田移栽。该培养基包括诱导培养基、增殖培养基和生根培养基，以及观赏石榴组培诱导方法，三种培养基分别配制、配套应用。本发明方法提高了观赏石榴的繁殖系数，弥补了传统组织培养技术的一些不足，降低了外植体的污染率、提高了芽的分化率和移栽成活率等；诱导培养基、增殖培养基和生根培养基配制方法能缩短培养组培苗周期，没有变异，苗子整齐度高；快速增殖，提高繁殖系数；生根率高，根和苗之间没有愈伤，均是正常根，三种培养基配合能大大提高驯化成活率，增殖系数，降低组培苗的成本。
【IPC分类】A01H4/00
【公开号】CN105454044
【申请号】CN201510814101
【发明人】王跃华, 张慧, 许杰
【申请人】枣庄市农业科学研究院
【公开日】2016年4月6日
【申请日】2015年11月23日