专利名称：：一株地衣芽孢杆菌及其应用的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一株地衣芽孢杆菌及其应用。技术背景纤维素、半纤维素和木质素等植物纤维类物质，普遍存在于植物当中，由于它们本身的特性，如果作为饲料，其被吸收利用的比率非常低，因此常被当作垃圾而遭废弃。仅拿一年生禾本科玉蜀黍属植物玉米为例，该作物的生命力非常顽强，除极端沙土和黏土外，均可栽培。调查表明，每生产100公斤的玉米，会产生17.5公斤的玉米耳(玉米包皮)及玉米须，100公斤的玉米秆和41公斤的玉米芯。计算可知，玉米秆和玉米芯等副产品的总量为主产量的158.5%，是相当惊人的一个数字。但一般情况下，由于玉米秆和玉米芯的成分很难被利用，因此它们往往被当作了废弃物，其价值仅为主产物的3.4%。目前，由于玉米与黄豆等粮食产品的价格不断提高，有人提出，将一些富含纤维素的植物加工副产品添加到动物饲料当中。但是，其效果并不理想。因为，在饲料中直接添加富含纤维素的植物加工副产品，虽然饲料的成本可以得到降低，但由于动物对这些植物加工副产品的消化利用率较低，致使饲养成本并没有得到相应的同步降低，其直接导致的后果就是幼小动物育成率下降，肥育期禽畜的增肥效果较差，因此使用量受到了很大限制。当前仅少部分用于与苜蓿混合在一起，制成块，供给牛、羊、马等牲畜食用。世界能源短缺使应用酵母菌或其它特殊微生物将高淀粉谷物转化成酒精等来提供能源的技术方案应运而生，相应的，其带来的副产品怎样加以利用也成为了刻不容缓需要解决的问题。对于盛产玉米、高粱、水稻、小麦、大麦、树薯的国家来说，富含植物纤维的副产品非常繁多，如稻秆、玉米秆、高粱秸秆、麦秆及林业加工厂的木屑等废弃物，其原料成本较低，且不受粮食供应及价格影响，具有非常大的开发价值。如何提高高纤维谷物一玉米秸秆等废弃物的利用价值将是未来的一大商机，而提高植物纤维的消化率，首先要将其转化成寡糖或单糖。微生物是自然界分解植物纤维素的酶最大的来源，目前工业用酶生产所用的材再以0.1mol/LHC1溶液滴定接收液，当颜色由翠绿色变为淡粉红色时即为滴定终点。纪录HC1溶液滴定量，并以下面公式计算粗蛋白含量(％)。实验重复性每个试样取两平行样进行测定，以其算术平均值为结果；当粗蛋白质质量含量在25%以上，允许相对偏差为1%;当粗蛋白质质量含量在10-25%，允许相对偏差为2%;当粗蛋白质质量含量在10%以下，允许相对偏差为3%。(a—b)x6.25x0.0014x(HC1标定浓度/0.1)粗蛋白含量(％)=-x100(式I)样品重式I中，a:以0.1mol/LHCl溶液滴定样品所用的毫升数；b:以0.1mol/LHCl滴定空白所用的毫升数；6.25:含氮系数；0.0014:lml0.1mol/LHCl溶液相当于0.0014g的氮量；HC1标定浓度/0.1:0.1mol/LHCl溶液的力价。(2)粗脂肪含量的分析将样品粉末精称l克，包裹入已恒重的滤纸(WhatmanNo.l)，再放入Soxhlet装置的回流冷凝管中，以无水乙醚以回流萃取8小时后，取出滤纸，置于抽气柜中使乙醚挥发，再以红外线水分测定仪(IR-200,DernerInstrumentCompany,USA)快速将滤纸干燥至恒重并记录重量，最后以下面公式计算粗脂肪含量(％)。(样品原重一去除脂肪后样品重)粗脂肪含量(％)=-x100样品原重(3)水分含量测定秤取试样约5公克置于秤量瓶内，在105"C至11(TC干燥箱内烘干，至恒量后秤量，其减量即为水分。水分(。/。)二(A/B)x100A二烘干减量(g)，B^试样重量(g)或以红外线水分测定仪(IR-200,DenverInstrumentCompany,USA)测定其水分含量，并将24小时的数据平均后，得到粪便的水分含量(％)。(4)粗纤维含量测定秤取试样2g，以乙醚抽取后与石棉0.5g同置一烧瓶中，加200ml硫酸液(烧瓶与冷却器直接)随即加热，须1分钟内使瓶中溶液沸腾，每隔5分钟转动烧瓶一次，片图6为地衣芽孢杆菌(5ac/〃船//cAem/onm;0BL57淀粉分解酶活性菌落检测结果照片具体实施方式下述实施例中的方法，如无特别说明，均为常规方法。下述实施例中的百分含量，如无特别说明，均为质量百分含量。实施例1、地衣芽孢杆菌(5ac/〃wW/c/2em/om^)BL57CGMCCJV2.2277的获得及其培养条件检测1、地衣芽孢杆菌(5ac/〃wW/c/zem/w7mi)BL57CGMCCW2.2277的筛选与鉴定1)地衣芽孢杆菌(5ac/〃wWz'c/2em/w7m;y)BL57CGMCCW.2277的获得自台湾省台中县土壤样本三处不同位置各取一克土壤，分别加入10mlTrypticaseSoyBroth(TSB培养液)(每升含有胰蛋白胨(Tryptose)20.0g，葡萄糖(Dextrose)1.0g，磷酸氢二钠(DisodiumPhosphate)2.0g，硝酸钾(PotassiumNitrate)1.0g)中震荡混合均匀后，分别用Mandels-Reese培养基(每升含有蛋白胨(Peptone)1.0g，羧甲基纤维素(CMC,Carboxymethylcellulose)10.0g，(NH4)2S041.4g，Urea0.3g，K2HP042.0g，CaCl2.H200.4g，MgS04.7H200.3g，FeS04.7H205.0mg，MnS04.H201.6mg，ZnS04,7H201.4mg，CoCl2.7H202.0mg，将pH调至7.0，固态培养基则加入1.5%Agar)进行10倍梯度稀释至10"Q分别分装入4支稀释管中，将每个梯度稀释液分别培养于3(TC、40°C、5(TC不同温度培养24小时，进行具有纤维酶活性菌的初步增菌筛选。再自各稀释管取100pl至TSA(Trypticsoyagar,Difco,Sparks,U.S.A.)平板上，并以L型玻棒涂抹均匀，同样分别置回3(TC、40°C、5(TC培养24小时后，再以随机选取方式挑取单一菌落至一新的TSA上，并以三步法划开，重复纯化继代三次以后，于4(TC平板上获得一株具有纤维酶活性和蛋白酶活性的菌株，将其命名为BL57。2)菌种生化鉴定观察BL57纯化的菌落外观型态，并进行革兰氏及芽胞染色，确认细菌染色形态。结果表明，菌落外观型态，革兰氏及芽胞染色，确认细菌染色形态的结果如表1所示。将步骤1)筛选并纯化得到的BL57菌接种于BUGM培养基中培养1824小时,装1820ml灭菌的生理食盐水至透明玻璃管，放入浊度计(Turbidimeter，Biolog，Hayward，California,U.S.A.)内，将O.D.值调到100%，放入浊度标准管(turbiditystandardshighandlowlimits,Biolog,Hayward,California,U.S.A.)，革兰氏阳性菌范围在35%~42%，菌量约为4.5x108/1111。接着使用灭菌棉花棒自培养基上钓取菌落，再涂于玻璃管壁上，务必使O.D.值介于高值至低值(35%~42%)之间，完成后倒入干净的培养皿内，利用八管吸取器(8ChannelPipetman,Biolog,Hayward,California,U.S.A.)吸取菌液，注意必须将第一次吸取量放回培养皿，定量(150pl)放入BiologMicroPlate(Biolog，Hayward，California,U.S.A.)内，以上之动作必须在IO分钟内完成，将完成之BiologMicroPlate放入培养箱内，作用4、6、1624小时后，透过对95种三碳糖、胺基酸或脂肪酸的代谢性，放入BiologMicroStation机器自动判读代谢结果。其结果如表1所示。表1.BL57及地衣芽孢杆菌(Sac/〃ra//c/zem/w7m\y)MTCC429之生化性状比较<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>*资料来源ShivajiS，ChaturvediP，SureshK,ReddyGS,DuttCB，WainwrightM,NarlikarJV,BhargavaPM.Bacillusaeriussp.nov.，Bacillusaerophilussp.nov.,Bacillusstratosphericussp.nov.andBacillusaltitudinissp.nov.,isolatedfromcryogenictubesusedforcollectingairsamplesfromhighaltitudes.InternationalJournalofSystematicandEvolutionaryMicrobiology(2006),56，1465—1473.3)菌种基因型分析鉴定一依据已知细菌的16SrDNA序列保留性区域设计四个引物，正向引物27F:5，-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3，、530F:5'陽GTGCCAGCAGCCGCGG-3，；反向引物907R:5，-CCGTCAATTCCTTTGAGTTT-3，、1492R:5，-TACGGCTACCTTGTTACGACTT-3，。并分别标定700及800nm红外线吸收波长之染剂(IRD7oo标定引物27F、530F，IRD8(K)标定907R、1492R)。PCR扩增以27F及1492R引物，测序以530F及907R引物，反应采用SequiThermExcelIIDNAsequencingKit(EpicentreTechnologies,Madison,Wisconsin,U.S.A.)及Perkin-ElmerkGeneAmp9600PCRsystem。测序条件为先92°C2分钟后，然后92°C30秒、55°C15秒、70°C15秒共30个循环，最后4。C保存；反应结束后于各微量离心管分别加入3piStopsolution,置于92°C加热3分钟，测序产物以5.5%KBplusgel(LI-COR,Inc.,Lincoln,Nebraska,U.S.A.)及LI-COR测序系统(LI-COR，Inc.,Lincoln,Nebraska,U.S.A.)进行分析。利用BaseImageIR(LI-COR，Inc.,Lincoln,Nebraska,U.S.A.)软件撷取电泳之序列，将数据送入GeneBase(AppliedMaths，Belgium)进行排列，构筑得到BL57菌株完整16SrDNA序列，该16SrDNA序列具有序列表中序列1的核苷酸序列，将BL57菌株完整16SrDNA序列与GenBank进行菌种比对，比对结果与地衣芽孢杆菌(5""〃^//c/zem/om^ATCC14580)(GENBANK号为CP000002.31)有100%相似性，将序列比对的结果结合上述形态和生理生化特征，表明BL57菌株属于i也衣芽孢杆菌(5ac/〃wj〃c/zemybrm&)，艮卩土也衣芽包丰干菌(5acZ〃ws//c/zew》nn/s)BL57。地衣芽孢杆菌(5ac/〃^//c/^m/om^)BL57，已于2007年11月30日保藏于中国微生物菌种保藏管委理员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为中国北京市海淀区中关村北一条13号)，保藏号为CGMCCJVf2.2277。2、地衣芽孢杆菌(Bac/〃M//c/^m/w7m;y)BL57CGMCCWs.2277的最适生长温度的测定将步骤1获得的地衣芽孢杆菌(^^"7/^/^/^"^^^)BL57CGMCCJV2.2277，按照106cfu/L的浓度接种于TSB培养液中，分成五份，分别置于30°C、40°C、45°C、50°C、6(TC条件下，摇培，取菌液测定测OD590(以TSB培养液为空白对照)，确定菌种之最适生长温度。结果表明，地衣芽孢杆菌(5ac/〃usfe/zem/w7m;s)BL57CGMCCWs.2277最适生长温度为45°C。各培养温度条件下培养18小时后的OD590值如图1所示，说明地衣芽孢杆菌(Sac/〃M/z'c/zem/ormh)BL57CGMCCW.2277在45。C增值效果最好。3、地衣芽孢杆菌(Bac^/^/Zc/zem/wvmi)BL57CGMCC的最适生长pH值的测定将步骤1获得的地衣芽孢杆菌(5ac///i^//cAem/om^)BL57CGMCCJN"2.2277，按照10、fli/L的浓度接种于TSB培养液中，分成5组，分别调节pH值为6、6.5、7、7.5、8，然后置于45"摇培，摇培过程中每隔30分钟取菌液测定测OD590(以TSB为空白对照)，地衣芽孢杆菌(Sflc/^W/c/^m/wvm;)BL57CGMCC的各培养pH值条件下培养18小时后的OD590值如图2所示，结果表明，地衣芽孢杆菌(5ac/〃w//c/zem/om^)BL57CGMCCW.2277在pH值为6.5条件下增值效果最好。实施例2、地衣芽孢杆菌(万ac/〃M/〖c/2em/w7mi)BL57CGMCC的产生的酶活性检测1、地衣芽孢杆菌(5flc/〃^//c/^m/om^)BL57CGMCCWs.2277的羧甲基纤维素酶活性鉴定，及其酶作用最适pH值确认1)地衣芽孢杆菌(万""7/^/&/^"^^^)BL57CGMCCJV"2.2277产生的酶液样本的制备将地衣芽孢杆菌(5ac/〃M//c/zem/w7m、)BL57CGMCCJVs.2277按照109cfu/L的接种量接种于Mendels-Reese培养液中，于45°(3培养24小时后，将培养得到的地衣芽孢杆菌(5ac/〃w//c/zem/orm^)BL57CGMCCW.2277发酵菌液于4°C12,000rpm离心10分钟后，将上清用滤径为0.45pm过滤膜过滤，得到酶液(发酵液上清液)，保存于-2(TC。2)地衣芽孢杆菌(5Gc/〃^//c/2em/om^)BL57CGMCC产生的酶液的羧甲基纤维素酶鉴定，及其酶作用最适pH值的确认将18mlMandels-Reese培养基分别调整pH值至试验条件(pH5.5、pH6.0、pH6.5、pH7.0、pH7.5、pH8.0或pH8.5)后，与2ml上述步骤l)得到的地衣芽孢杆菌(Sa"7/w//cAem/onm's)BL57酶液混合均匀后，在酶最适温度45。C培养1小时后，以DNS还原糖测定法测定糖生成量，并以葡萄糖制备标准曲线进行比对。纤维素酶相对活性计算，以最高活性pH6.5之活性量为100%进行换算比较。结果如图3所示，结果表明，地衣芽孢杆菌(5ac/〃wW/c/^m/o，&)BL57的发酵液在pH6-8均有良好的羧甲基纤维素酶活性，但以pH6.5为最佳。2、地衣芽孢杆菌(Bac/〃Rs"c/zem:/bm^)BL57CGMCCW.2277的纤维素分解酶活性检测将地衣芽孢杆菌(5ac/〃附//c/zem/w7m;y)BL57CGMCCW2.2277菌分别以穿刺针接种TSA平板中间，分别在培养基表面平铺3.5ml含质量百分含量为1%的羧甲基纤维素(CMC)和质量百分含量为0.7%的琼脂糖的培养基(用于检测葡聚糖内切酶活性)，将培养皿放在45'C隔夜(约18-24小时)培养。在培养后的培养基表面分别加1015ml的质量百分浓度为0.1%刚果红溶液。作用约1015分钟后，倒去多余的溶液，以1015ml之lMNaCl冲洗两次。在红色背景中，有葡聚糖内切酶活性(即培养基中的纤维素被降解)的菌落周围会呈现白色或粉红色。上述实验重复三次。结果表明在含有铺入含质量百分含量为1%的羧甲基纤维素和质量百分含量为0.7%的琼脂糖的培养基的平板的菌落周围呈现淡粉红(结果如图4所示)，结果表明地衣芽孢杆菌(5^///^&/^加:/^附&)BL57对羧甲基纤维素具有水解作用，即具有内切型纤维素分解酶。3、地衣芽孢杆菌(5ac/〃ws//c/^m/om^)BL57CGMCCW2.2277的蛋白水解酶活性检测蛋白水解酶活性检测采用蛋白水解的菌落检测法，以含脱脂乳(skinmilk)基质的培养基，检测菌种蛋白酶(proteinase)活性，具体方法如下所述配置含质量百分含量为1.5%脱脂乳(基质)和质量百分含量为1%的琼脂粉的培养基，倒在培养皿中，制成平板。将20|J地衣芽孢杆菌(Sac/〃w//c/zew/orm&)BL57CGMCCW2.2277菌液接种在上述制备的平板中间，并将培养皿放在45"C做隔夜(约18-24小时)培养。在平板乳白色背景中，有酶活性的菌落周围会呈现透明的水解圈，透过比对透明水解圈的大小，可知其活性差异。结果如图5所示，结果表明，在上述菌落检测法中则可发现地衣芽孢杆菌(5ac/〃w//c/zem/orm&)BL57CGMCCW.2277蛋白酶活性很强，隔夜培养即可水解1/2以上含脱脂乳基质的培养基(图5)。图5中，透明处为酶水解圈。4、地衣芽孢杆菌(Bac/〃z^//c/7em/om^)BL57CGMCC的淀粉酶活性检测将地衣芽孢杆菌(5ac/〃w//c/^m/om^)BL57CGMCC接种到含有质量百分含量为1%的淀粉和质量百分含量为1%的琼脂粉的培养基平板上，培养隔夜(约18-24小时)后，用质量百分浓度为1%的碘溶液进行染色后，淀粉被染成棕黑色，如果菌落产生淀粉酶，菌落周围的淀粉即被降解，而不能被染色。结果如图6所示，结果表明地衣芽孢杆菌(5a"7/w//c/zem/om^)BL57CGMCCW.2277接种到含有淀粉基质的培养基培养隔夜后，以碘溶液进行染色后，在淀粉未分解的棕黑色背景中，可见一个淡黄透明之酶黄色水解圈，表明地衣芽孢杆菌(5ac/〃ws//c/zem/wm/s)BL57CGMCCJVfs.2277有很强的淀粉酶活性。实施例3、地衣芽孢杆菌(Sac/〃w//c/zem/wm^)BL57CGMCCJV2.2277在利用含植物纤维的原料生产饲料中的应用本实施例利用地衣芽孢杆菌(Bac/^s/Zc/zem/wmh)BL57CGMCCW.2277，以葵花盘粉、麦杆、绿豆杆粉、谷子杆粉、向日葵杆粉、玉米芯粉、玉米杆或酒糟为原料，进行发酵生产饲料，具体方法如下所述用500ml烧杯装原料，分别秤10g葵花盘粉、麦杆、绿豆杆粉、谷子杆粉、向日葵杆粉、玉米芯粉、玉米杆或酒糟为原料，分别向各个烧杯中加入10、fu/g原料的地衣芽孢杆菌(5。c"/ws//c/zem/onm's)BL57CGMCCW.2277，并加入50ml去离子7jC，混合均匀后，调节pH值为6.5，静置于45匸恒温箱，发酵24小时。将发酵后的葵花盘粉、麦杆、绿豆杆粉、谷子杆粉、向日葵杆粉、玉米芯粉、玉米杆或酒糟平铺在不锈钢盘上，厚度愈薄愈好，置6(TC烘箱吹风烘干，至水分含量为8%以下。用电动粉碎机粉碎即为饲料的原料，可用于猪鸡牛羊全价料中取代玉米粉(淀粉)原料。发酵前后，分别按照下述方法测定原料发酵前后成分(1)粗蛋白含量的分析将样品粉末精称0.5克，放入分解管中，并加入15ml浓硫酸(8mol/L)及1颗催化剂(Kjeltabcatalyst)，以粗蛋白测定仪(B-435,Biichi,Switzerland)加热消化分解2小时，至溶液澄清为止。冷却后，加入50ml蒸馏7K，以粗蛋白蒸馏装置(B-316，Btichi,Switzerland)蒸馏消化液，并以50ml的质量百分浓度为4%硼酸溶液加入2滴混合指示剂(methylred:methylblue=3:2)做为接收液，蒸馏时间为5分钟，再以0.1mol/LHCl溶液滴定接收液，当颜色由翠绿色变为淡粉红色时即为滴定终点。纪录HC1溶液滴定量，并以下面公式计算粗蛋白含量(％)。实验重复性每个试样取两平行样进行测定，以其算术平均值为结果；当粗蛋白质质量含量在25%以上，允许相对偏差为1。/^当粗蛋白质质量含量在10-25%，允许相对偏差为2%;当粗蛋白质质量含量在10%以下，允许相对偏差为3%。(a—b)x6.25x0.0014x(HC1标定浓度/O.l)粗蛋白含量(％)=-x100(式I)样品重式I中，a:以0.1mol/LHCl溶液滴定样品所用的毫升数；b:以0.1mol/LHCl滴定空白所用的毫升数；6.25:含氮系数；0.0014:1ml0.1mol/LHC1溶液相当于0.0014g的氮量；HC1标定浓度/0.1:0.1mol/LHCl溶液的力价。(2)粗脂肪含量的分析将样品粉末精称l克，包裹入已恒重的滤纸(WhatmanNo.1)，再放入Soxhlet装置的回流冷凝管中，以无水乙醚以回流萃取8小时后，取出滤纸，置于抽气柜中使乙醚挥发，再以红外线水分测定仪(IR-200,DernerInstrumentCompany,USA)快速将滤纸干燥至恒重并记录重量，最后以下面公式计算粗脂肪含量(％)。(样品原重一去除脂肪后样品重)粗脂肪含量(％)=-x100样品原重(3)水分含量测定秤取试样约5公克置于秤量瓶内，在105'C至11(TC干燥箱内烘干，至恒量后秤量，其减量即为水分。水分(。/。)二(A/B)x100A二烘干减量(g)，B二试样重量(g)或以红外线水分测定仪(IR-200,DenverInstrumentCompany,USA)测定其水分含量，并将24小时的数据平均后，得到粪便的水分含量(％)。(4)粗纤维含量测定秤取试样2g，以乙醚抽取后与石棉0.5g同置一烧瓶中，力f]200ml硫酸液(烧瓶与冷却器直接)随即加热，须1分钟内使瓶中溶液沸腾，每隔5分钟转动烧瓶一次，俾瓶内溶液能够充分混合，并须注意瓶内液面上，不可粘有试样。吹入空气以除泡沫，煮沸30分钟后以置石棉薄层的古氏坩埚滤之，用沸水冲洗，至不含酸性为止，次用氢氧化钠溶液200ml，将沉淀物及石棉洗回烧瓶中，与冷却器连接后煮沸30分钟移开烧瓶，再用原来之古氏坩埚过滤，用沸水冲洗至不含酸性为止，再用95%酒精15ml，然后用乙醚10ml洗涤之。置古氏坩埚及其内容于烘箱中以温度110±2t:烘干，待冷却后秤之。再移于烧灰炉上烧约至红烧约20分钟以除去碳，冷却后再秤之，计算所损失之重量，即为粗纤维量。粗纤维(％)=(A/B)xlOOA二灰分减量(g)，B二试样重量(g)(5)粗灰分测定秤量试样5至10g于瓷坩埚中，于600°C温度灼热至恒重，所残留之量即为粗灰分。粗灰分(％)=(A/B)xlOOA二残留物重量(g)，B二试样重量(g)(6)发酵后糖类生成分析测定方法以Miller,1959所开发之DNS还原糖测定法测定，并以葡萄糖制备标准曲线进行比对。侦测的总还原糖量为1克原料所含还原糖量，经公式换算求得酶作用释放的还原糖量(释放还原糖量=实验组(发酵后原料)还原糖量一对照组(未发酵原料)还原糖量)，并以各原料原始还原糖量作为对照，以计算其利用率和作用效力。葵花盘粉、麦杆、绿豆杆粉、谷子杆粉、向日葵杆粉、玉米芯粉、玉米杆或酒糟原料主要成份，纤维含量分析结果如下表2所示表2.原料发酵前成分<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>利用步骤(6)检测的不同原料处理后还原糖产生量如表3所示，表3中的还原糖增长率计算公式为(发酵后的总还原糖含量一发酵前的总还原糖含量)还原糖增长率(％)=-xlOO发酵前的总还原糖含量<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>*作用效力以玉米粉原始还原糖量为100%，将原料发酵作用后总还原糖量除以玉米粉还原糖量(123mg)即得。序列表<160>1<210>1〈211〉413<212>DNA〈213〉地衣芽f包杆菌(丑acW/ws/fc/zemybrm&)<400〉1gtgccagcagccgcggtaat3Cgt3ggtggcaagcgttgtccggaattattgggcgtaaa60gcgcgcgcaggcggtttcttaagtctga_tgtgaaagcccccggctcaaccggggagggtc120attggaaactggggaacttgagtgCagg3gaggagggtggaattccacgtgtagcggtga180a_atgcgtagagstgtggaggaacaccagtggcgaaggcgactctctggtctgtaactgac240gctgaggcgcgag3gCgtggggagcgaacaggattagataccctggtagtccacgccgta300aacgatgagtgctaagtgttagggggtttccgccctttagtgctgcagca360gcactccgcctggggagtacggtcgcaaggCtg333CtCElcgg41权利要求1、地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)BL57CGMCC№.2277。2、地衣芽孢杆菌(5""7/i//c/zem:/bw^)BL57CGMCC在降解含植物纤维素的物质中的应用。3、根据权利要求2所述的应用，其特征在于所述含植物纤维素的物质为农业废弃植物组织和/或工业原料废弃物。4、根据权利要求3所述的应用，其特征在于所述降解含植物纤维素的物质的方法是在含有纤维素的工业和/或农业生产废弃物中接种地衣芽孢杆菌(5flC/〃M//c/zem/om^)BL57CGMCCWs.2277，进行发酵培养。5、根据权利要求4所述的应用，其特征在于所述发酵培养的温度条件为30一5(TC;所述发酵培养的pH值为6—8。6、根据权利要求5所述的应用，其特征在于所述发酵培养的温度条件为45°C;所述发酵培养的pH值为6.5。7、地衣芽孢杆菌(Sflc/〃ws"c/^m/om^)BL57CGMCCJY2.2277在制备纤维素酶中的应用。8、地衣芽孢杆菌(^^/〃^/^/^"^，/5)BL57CGMCCW2.2277在制备蛋白酶中的应用。9、地衣芽孢杆菌(^7c/〃M//c/^m;/bm^)BL57CGMCC在制备淀粉酶中的应用。全文摘要本发明公开了一株地衣芽孢杆菌及其应用。该地衣芽孢杆菌为地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)BL57CGMCC№.2277。本发明的地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)BL57可利用含纤维素的工农业废弃物为原料，如植物秸秆、叶片、其它农业废弃组织、酒糟等，将这些原料其中的纤维素转化为还原糖，大大提高了废弃物的利用价值。文档编号C12N1/20GK101215538SQ200710308538公开日2008年7月9日申请日期2007年12月29日优先权日2007年12月29日发明者干小英,萍张,徐庆霖,汪志阳,王昭闵,程景章,邱云棕申请人:北京欣博阳科技有限公司