专利名称：：暗红产色链霉菌及其在病害生物防治中的应用的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种微生物新菌株及其应用，具体涉及--种链霉菌属暗红产色链霉菌菌株及其在病害生物防治中的应用。
背景技术：
：番茄灰霉病是一种世界性重要病害，该病菌主要危害果实，对番茄生产构成极大威胁。我国20世纪80年代开始发生蔓延，目前各地均有发生，已经成为番茄设施栽培的限制性障碍，一般可造成番茄减产20%30%，严重时可高达50%以上，严重影响番茄的产量和品质。因此，番茄灰霉病的防治已成为保护生产发展的关键性措施，直接决定着番茄的产量和经济效益。番茄灰霉病是由灰葡萄孢菌(BotrytiscinereaPers.)引起的真菌病害，灰葡萄孢菌属半知菌亚门真菌。孢子梗数根丛生，具隔，褐色，顶端呈卜2次分枝,梗顶稍膨大，呈棒头状，其上密生小柄并着生大量分生孢子，孢梗长短与着生部位有关。分生孢子圆形至椭圆形或水滴形，单细胞，近无色，大小(6.2513.75)微米X(6.2510.0)微米，寄主上通常少见菌核，但当田间条件恶化后，则可产生黑色片状菌核。培养基--匕菌丝透明无色，具隔。病原菌灰葡萄孢(Botrytiscinerea)以菌丝体、分生孢子、菌核随病残体在土壤中越冬，菌核萌发产生大量的分生孢子进行初侵染和重复侵染，侵染的最适温度为1020。C，在2。C和25t;也能侵染。番茄灰霉病主要发生在花期和结果期，可危害花、果实、叶片和茎。采后储藏和运输过程中温度条件适宜时便可大面积发病，是导致果实储藏损失的直接原因。由于目前尚未发现灰霉病的抗原，抗病育种难以进行，国外多采用栽培防治(调控温室的温度、湿度)(MorgenWM，1984)，我国在现有条件很难大范围的实施，因此主要采用化学防治，应用的药剂主要有三类苯并咪唑类(Benzimidazoles)、二甲酰氨类(Dicarboximides)、N-苯氨基甲酸酉旨类(N_phenylcarbamat.es)。生产」二应用的各类化学药剂主要有多菌灵(Carbendazim)、甲基托布津(Thiophanate-methyl)、异菌脲(]:prodione)和乙霉威(Diethofencarb)等。但是在连续使用药剂的情况下，病菌逐渐产生了抗药性，防效逐年下降。此外，由于施药的主体多为果实，所以造成农药高残留的隐患。同时，长时间大量的使用这些化学农药，不仅使灰葡萄孢的高抗菌株成为优势菌株，甚至出现了多重抗药性菌株。结果导致这些化学药剂的防效逐渐下降，同时也造成了环境污染。因此，近年来，人们努力通过寻找对番茄灰霉病菌有抑制作用的有益微生物及其代谢产物，尝试探索出新的对番茄灰霉病有较好防治效果的生物防治途径。采用生物防治的方法控制病虫害，能够减轻环境污染、维护生态平衡、节约能源，尤其是它的生态效益和社会效益，越来越受到社会各界的重视。目前番茄灰霉病的生物防治方法主要是利用拮抗菌来进行防治，包括真菌、细菌和放线菌，其作用方式有竞争、重寄生和抗生作用。用于控制番茄灰霉病的真菌主要有木霉菌(Trichoderma)、酵母菌和粘帚菌(Giocladium)。Newhook将芽枝霉(Cladosporii皿)孢子悬浮液喷洒在番茄植株上，以减3少果实灰霉病的发生，而成为世界上较早用真菌防治灰霉病菌的例子。通过长时间的探索，国内外的许多研究人员均发现木霉(Trichoderma)和粘帚霉(Giocladium)能够有效地抑制灰霉菌。木霉主要有哈茨木霉(T.harzianumT39)、绿色木霉(viride)、钩状木霉(T.haraatura)和拟康氏木霉(T.pseudoningii)等。Elad等在温室中用哈茨木霉防治黄瓜灰霉病和葡萄灰霉病，防治效果达到了90%，由该菌株研制出的商品制剂Trichodex，已经在欧洲和北美等20多个国家注册、推广。我国国内对防病生防真菌研究有赵蕾将筛选出的绿色木霉用于防治黄瓜和番茄灰霉病，其田问防治效果分别为89.97%和74.20%。应用酵母菌防治番茄灰霉病的有黑色酵母菌(Exophialajeanselmei)、浅白隐球酵母菌(Cryptococcusalbidus)和红酵母菌(Rhodotorulaglutinis)等。Redmond等用黑色酵母菌(E.jeanselmei)和浅白隐球酵母菌(C.albidus)防治玫瑰灰霉病，其中黑色酵母菌防治效果达到了63%，这虽然与杀菌剂扑海因(iprodione)74%的防治效果有一定差距，但足可见其良好的防治前景。Elad等也分离出腐生性酵母菌红酵母菌(R.glutinis)和浅白隐球酵母菌(C.albidus)，对菜豆和番茄的灰霉病菌都有很好的防治效果，其在温室内的防治效果已经和哈茨木霉相当。用于控制番茄灰霉病的细菌主要有枯草芽孢杆菌(Bacilussubtilis)、地衣芽孢杆菌(Bacilluslichemformis)禾口荧光假单胞菌(Pseudomonasfluorescens)等。薛德林等分离到的地衣芽孢杆菌，由该菌发酵产生的生物农药宁康霉素，以100ml/亩用量，稀释20-40倍，对防治番茄灰霉病效果可达78.4%-89.2%。用于控制番茄灰霉病的拮抗放线菌主要集中在链霉菌属(Str印tomyces)，由链霉菌产生的武夷菌素(Wuyiencin)、磷氮霉素(PhosPhzaomzin)、白肽霉素(Albop印ttin)、变构霉素(Taut.omycin)、变构菌素(Tautolnycein)和鱼时霉素(EzomycinS)等抗生素对番茄灰霉病均有较好的防治效果。从土壤中分离出可作为果蔬病害生防菌的微生物报道较多。目前微生物中发现的大约80()()中生物活性物质中，近70%为放线菌所产生。利用放线菌的次生代谢产物制备新型防腐剂具有无污染、不易使有害生物产生抗药性等特点，已成为无公害防腐剂的主体和未来果蔬防腐剂的发展方向。但利用暗红产色链霉菌(Str印tomyceserythrochromogenes)应用于蔬菜灰霉病防治还未见报道。
发明内容本发明的目的在于提供一株暗红产色链霉菌(Str印tomyceserythrochromogenes)新菌株及其在植物病害生物防治中的应用。本发明菌株是从山东寿光温室番茄种植田土样中分离得到的暗红产色链霉菌(Str印tomyceseryt.hrochromogenes)新菌株M028。该菌株已于2009年8月17日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(地址北京市朝阳区大屯路甲3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101)保藏，分类命名为暗红产色链霉菌(Str印tomyceserythrochromogenes)，保藏号为CGMCCNO.3228。M028具体通过如下方法分离得到的从温室番茄种植田中采集土样，取10g的土溶解到90ml无菌生理盐水的三角瓶中，振荡15min后静止lmin，取100u1的上清液加入到装有■ii1生理盐水的Eppendorf管中，进行连续梯度稀释。分别取以上土壤悬4浮液和10—2，10—3，10—4倍土壤悬浮液稀释液100u1在改良高氏--号培养基(可溶性淀粉20.0g，KN031.0g，KH2P040.5g，MgS04*7H200.5g，NaClO.5g，FeS040.Olg，琼月旨18.Og，12rC高压灭菌30min,使用前每300ml培养基加入3%重铬酸钾1ml)平板上均匀涂板，超净工作台内吹干，每个浓度重复3次。28。C温箱中培养36小时后，用无菌牙签挑取细菌单菌落划线纯化后，以5mm直径的番茄灰霉病菌Botrytiscinerea为靶标,采用平板对峙培养法以进行拮抗菌的初步筛选；对获得的拮抗菌再将其于PDA液体培养基(马铃薯200g，葡萄糖20g,水lOOOmL)中摇培，每隔12h取出2ml摇匀的菌悬液，13000rpm，25。C离心5min，取上清发酵液用来检测对灰霉病的抑制效果；在番茄离体果实、叶片上获得的菌株对灰霉病的防效检测试验，从而筛选出对番茄灰霉病生防效果较好的生防菌暗红产色链霉菌(Str印tomyceserythrochromogenes)M028(保藏号CGMCCNO.3228)。综合链霉菌的形态学特征、生理生化特性、16SrDNA序列结果，将其鉴定为链霉菌属暗红产色链霉菌(Streptomyceserythrochromogenes)。抑菌试验表明，M028对于部分植物病原真菌具有抑制作用，例如对番茄灰霉病菌(Botryt.iscinerea)、小麦纹枯病菌(Rhizoctoniacerealis)、禾舀癌病菌(Pyriculariaoryzae)、西瓜枯萎病菌(F.oxysporumf.sp.niveum)、百合根腐病菌(Rhizoctoniasolani)、桃褐腐病菌(Moniliniafructicola)、番茄早疫病菌(Alternariasolani)，小长喙霉病菌、串珠镰刀病菌(Fussariummoniliforme)，水稻纹枯病菌(RhizoctoniasolaniKtihn)等均有平板抑制作用。对部分植物病原细菌也具有抑制作用，例如对茄青枯(Ralstoniasolanacearum)、棉角斑(Xanthomonas)、丁香假单胞(Pseudomonassyringae)、K27(Agrobacteriumrhizogenes)、葡萄根癌病菌K308(Agrobacteriuravitis)、樱杉^根癌病菌C58(Agrobact.eriumtumefaciens)、铍纹假单胞菌5819(Pseudomonascorr卿ta)、洋葱伯克霍尔德病菌ICPM8796(Burkholderiac印acia)等均有抑制作用。在番茄离体果实、叶片上对灰霉病生防效果检测试验中，M028对离体果实、叶片灰霉病的防治效果分别为96.56%、78.26%，其中M028对番茄离体果实、叶片灰霉病的防治效果与灰霉尽无显著性差异。温室防效检测结果显示M028对番茄灰霉、辣椒灰霉、黄瓜灰霉病、茄子灰霉病、草莓灰霉病防治效果为63%77%，与灰霉尽无显著性差异。本领域技术人员很容易想到将本发明菌株发酵液或菌悬液作为农药的有效成分用于植物病害的生物防治，或者将本发明菌株制备成菌剂用于植物病害的生物防治。因而，本发明还包括含有所述菌株或者其发酵液的生物农药，以及含有所述菌株的微生物菌剂。本发明还提供了M028发酵培养方法，包括菌种活化、种子液培养、发酵罐发酵等步骤，具体包括如下步骤[酬1、菌种活化使用PDA培养基，培养基配方为马铃薯200g,葡萄糖20g,琼脂15g，水1000mL。将暗红产色链霉菌M028接种于PM培养基斜面」:l，28"C培养48h。[,]2、种子液培养种子液培养用高氏一号培养基,培养基配方为(可溶性淀粉20.()g，KN()3l.()g，KH2P040.5g，MgS04*7H200.5g，NaCl0.5g，FeS040.Olg，121。C高压灭菌30min)。将活化好的暗红产色链霉菌M028用生理盐水配制出108cfu/ml的菌悬液，以1%的接种量接种于液体培养基中，28。C摇床震荡培养，转速为180-200rpm,培养时间为48-h。[酬3、发酵罐发酵发酵培养基配方为葡萄糖5g，玉米粉15g，可溶性淀粉5g，黄豆粉15g，KH2P040.5g，CaC033g，MgS040.5g,FeS040.Olg,水1000ml。将培养好的M028种子液以2%的接种量接入发酵罐中，28°C,搅拌速度为16()rpm,通气量为1:0.6-0.8(发酵液体积每分钟通气量体积)、罐压1.5-2.0F/cm2。发酵96h获得M028发酵液。本发明链霉菌属暗红产色链霉菌M028除了对番茄灰霉病、辣椒灰霉病和草莓灰霉病具有较好的防治效果外，对小麦纹枯病病菌、稻瘟病菌、西瓜枯萎病菌、百合根腐病菌、桃褐腐病菌、番茄早疫病菌，小长喙霉病菌、串珠镰刀病菌，水稻纹枯病菌等由植物病原真菌引起的病害和对茄青枯病菌、棉角斑病菌、丁香假单胞病菌、发根土壤杆菌、葡萄根癌病菌、土壤根癌病菌、皱纹假单胞菌病菌、洋葱伯克霍尔德病菌等由植物病原细菌引起的病害均有潜在的防治效果，具有很高的研究和应用价值。图1显示的是菌株M028的形态特征，其中A:基内菌丝，B:气生菌丝，C:孢子丝，D:孢子链，E，F:菌落；图2显示的是菌株M028的平板抑菌作用，其中，A:番茄灰霉病菌(B.ci證ea)B:西瓜枯妻病菌(F.oxysporumf.sp.niveum)C:小麦纹枯病菌(R.cerealis)D:小长嫁毒病菌E:番茄早疫病菌(Alternariasolani)F:串珠镰刀菌(F.Monilofprme)G:百合根腐病菌(R.solani)H:桃褐腐病菌(M.fructicola)I:稻瘟病菌(P.oryzae)J:水稻纹枯病菌(R.Ktihn);图3菌株M028对番茄果实灰霉病的防效,其中，A阳性对照，B阴性对照，C灰霉尽+灰霉病菌，DM028+灰霉病菌。图4M028对番茄叶片灰霉病的防效,其中，A:阳性对照，B:阴性对照，C:灰霉尽，D:M()28。具体实施方法以下实施例进一步说明本发明的内容，但不应理解为对本发明的限制。在不背离本发明精神和实质的情况下,对本发明方法、步骤或条件所作的修改或替换,均属于本发明的范围。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。[,]实施例1M028的鉴定综合链霉菌的形态特征、生理生化特性、16SrDNA序列等，将其鉴定为链霉菌属暗红产色链霉菌(Str印tomyceserythrochromogenes)。具体鉴定结果如下1.菌体形态菌株M028在高氏一号培养基上生长良好，菌落呈椭圆形，深红褐色，边缘不规则，气生菌丝初为白色,23天后呈淡黄灰色，日久呈灰色,基内菌丝无横隔，不断裂；气生菌丝柔曲，多分枝,孢子丝直形、钩状、顶端初旋或少数几个松散螺旋,孢子卵圆形(见图1)。2.生理生化特性菌株M028生理生化特性如F三个表格(表1、2、3)所示M028菌株可产生4S;明胶液化非常缓慢；牛奶凝固胨化反应呈阴性；不能产生淀粉酶水解淀粉；硝酸盐还原反应呈阴性。pH值在412的范围内均能生长并产孢子；在温度为22t:37t:均能生长并产生孢子，在45。C无法生长。表1菌株M028的生理生化性状<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>注"+"表示生长，"-"表示不生长表3菌株M028的生长温度范围温度值(M028)生长情况22'C+28。C+37。C+45。C注"+"表示生长，"-"表示不生长3.16SrDNA鉴定提取暗红产色链霉菌(Str印tomyceserythrochromogenes)M028菌株的基因组，方法是将菌株M028接种于液体LB培养基中摇培24h后，取1mL菌液于1.5离心管中，12000rZmin离心5min后收集菌体；将菌体加500"LTE缓冲液，漩涡振荡悬起沉淀并充分混匀反应液;加入5liL浓度的10mg/ml的溶菌酶，5uL浓度的20mg/ml蛋白酶K倒管并充分混匀，37°C反应30min;加入50yL的10%SDS和0.5mol/LEDTA，倒管充分混匀,55°C反应lh;加入2/3体积7M预冷乙酸铵溶液,倒管充分混匀,l謹0r/min离心5rain，保留上清;加入2倍体积无水乙醇，-2(TC醇沉30min，12000r/min离心5min，小心弃上清；加入70%乙醇倒管洗沉淀2次(lml/次)，12000r/min离心5min，小心弃上清；真空抽千沉淀并溶于50ii1TE获得M028基因组。PCR扩增获得M02816SrDNA,扩增选用通用引物8F:5'CGGGATCCAGAGTTTGATCCTGGCTCAGAACGAACGCT3一和1506R:5—CGGGATCCTACGGCTACCTTGTTACGACTTCACCCC3—，PCR反应体系为10XPCRbuffer(TaKaRa)5y1,dNTP2y1，10pM的引物0.5u1，TaqDNA聚合酶(TaKaRa)O.4ul，基因组模板0.4u1，ddH2041u1。PCR反应条件94。C5min预变性，94。C变性30s,55。C退火lmin,72。C延伸2min,30个循环后；72。C充分延伸5min，(C保存。PCR扩增产物用1%的琼脂糖凝胶电泳分析，将所获得的:PCR产物用GelExtractionKit(0MEGA)回收后由北京诺塞基因组研究中心有限公司测序，将测序结果用BLAST程序在GenBank中进行序列比对分析。结果显示菌株M028与链霉菌属暗红产色链霉菌(Str印tomyceserythrochromogenes)的16SrDNA序列相似性达100%(16SrDNA序列见序列表)。综合菌体形态、生理生化性状及其16SrDNA序列结果，将生防菌株M028鉴定为链霉菌属暗纟匸产色链霉菌(Streptomyceserythrochromogenes)。实施例2抑菌谱分析对病原真菌的平板抑制检测采用平板对峙法检测M028对病原真菌的抑制情况。将M028菌株LB培养基28°C,160rpm摇培培养48h后吸取100"1菌悬液涂高氏一号培养基平板，待M028长满培养皿后用打孔器打取5mm的M028菌饼；在PM平板上距中央25mm处接种打取的M028菌饼，每皿2个菌饼，2『C培养2天后在平板中央接种直径5mm的待测病原真菌菌饼，使三个菌饼成一条直线。以只接种靶标病原菌而不接种生防菌的平板为对照，每个处理重复3次,于25t:培养至对照处理长满整个培养皿,测量病原真菌菌落直径，计算生长抑制率。生长抑制率=[(C-T)/C]X100%C:对照真菌菌落直径T:接种生防菌后真菌菌落直径对病原细菌的平板抑制检测采用双层培养法检测M028对病原细菌的抑制情况。制备M028菌饼方法同病原真菌抑制检测，将制备好的M028菌饼放在PM培养基平板中央，培养72h后用3.5ml的氯仿以其蒸汽杀死菌体过夜。将活化好的靶标细菌配成108cfU/mi的菌悬液，吸取sou:[菌悬液加入到加入3m:i.融化后冷却到5(rc的水琼脂(0.7%琼脂，pH7.0)中，迅速混匀，立即倒入三氯甲烷杀死M028菌体的培养基上，铺成均匀的薄层，28t:培养36小时，观察抑菌圈的情况。链霉菌属暗红产色链霉菌(Str印tomyceserythrochromogenes)菌株M028对三个亚门九个属的1()种病原真菌都有一定的抑制作用，对5个属的病原细菌也有很好的抑制效果。其中对番茄灰霉病菌、西瓜枯萎病菌、串珠镰刀病菌、番茄早疫病菌、百合根腐病菌的抑制作用均在65%以上，对茄青枯病菌的抑菌圈直径能达到50.5mm，对棉角斑病菌的抑菌圈达到46.3mm,对丁香假单胞病菌的抑菌圈达到53.7mm,对葡萄根癌k308病菌的抑菌圈达到45.3mm。结果如表4和表5所示，见图2。8表4生防菌M028对部分植物病原真菌的平板抑制<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>表5生防菌M028对部分植物病原细菌的平板抑制<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>实施例3M028在番茄离体果实上对灰霉病的防效检测室内检测对番茄果实灰霉病的防治效果。选取番茄离体健康果实，M028在PDA培养基中28°C，160rpm培养96h后12000rpm离心10min,取上清为M028发酵液上清；将番茄灰霉病菌在PDA平板上培养7d后,用无菌水冲洗灰霉病菌孢子，用血球计数板标定到1()6个孢子/mL，制备成灰霉病菌(B.cinerea)孢子悬浮液。检测M028对番茄果实灰霉病防效设置处理如F:阳性对照(仅接种灰霉病菌)、阴性对照(仅接无菌水)、菌株M028发酵液--匕清+灰霉病菌,28%灰霉尽可湿性粉剂誦倍稀释液+灰霉病菌。每个处理10个番茄果实，实验设置5个重复。先用接种针在番茄果实腰部剌1个4鹏(深)X3mm(宽)X3咖(长)的伤口，伤口晾干后，接种M028发酵液上清或28%灰霉尽可湿性粉剂1000倍液各10"L，待接种液被完全吸收后分别接种10liL浓度为106个孢子/mL的B.cinerea孢子悬浮液；阳性对照接种无菌水后接种灰霉菌孢子悬浮液，阴性对照仅接种无菌水；各处理接种番茄后25'C保湿培养3天后，测量发病面积并计算M028对番茄灰霉病的防治效果。试验结果表明，M028对番茄果实灰霉病的防治效果为96.56%,M028对番茄果实灰霉病的防治效果与灰霉尽无显著性差异。(见图3)防治效果:阳性对照发病面积-处理发病而积xl0线阳性对照发病面积实施例4M028在番茄离体叶片上对灰霉病的防效检测选用叶龄相同、叶片大小基本一致的健康番茄叶片，用无菌水清洗干净备用；M02S发酵液上清制备同M028番茄离体果实上对灰霉病的防效检领U。设置菌株M028发酵上清液、28%灰霉尽可湿性粉剂1000倍液、阳性对照(只接种病菌,不接种药剂)和阴性对照(只接无菌水，不接病菌和药剂)4个处理，每个处理含8个叶片，重复5次。先将各处理均匀喷洒于叶片上，以叶面刚好溢水为准；晾干后，在每个叶片中间接种1个直径为5mm的番茄灰霉病菌菌饼，25。C保湿培养3天后，观察发病情况，统计发病面积，计算防治效果。结果表明，M028对番茄叶片灰霉病的防治效果为78.26%图4)防治效果=阳性对照发病面积-处理发病面积xl00%阳性对照发病面积实施例5温室检测M028对番茄灰霉病、辣椒灰霉、黄瓜灰霉病、茄子灰霉病、草莓灰霉病防效测定用7()%乙醇对番茄、辣椒、黄瓜、茄子的种子表面消毒后催芽育苗,待各作物生长至15cm备用，取草莓生长1个月的扦插苗备用。M028发酵液上清和灰霉病孢子悬浮液制备同M028番茄离体果实....匕对灰霉病的防效检测。在各作物上对灰霉病防效检测设置处理与接种方法同M028在番茄离体叶片上对灰霉病的防效检测；接种M028及灰霉病菌孢子后各作物生长条件为温室温度22-25。C，相对湿度70%85%,12h光照；接种7d后调查病情，以叶片为单位，计算病株率、病情指数和防治效果。[固]发病率(％)=发病叶数/调查总叶数X100病情指数=E[(病级叶数X代表数值)]X发病最重级的代表数值/调查的总叶数防治效果(％)=[(对照病情指数-处理病情指数)/对照病情指数]X100病害分级标准0级-无病斑；单叶片有病斑3个；单叶片有病斑46个;单叶片有病斑710个；单叶片有病斑1120个，部分密集成片；单叶片病斑密集占叶面积1/4以上。结果显示附)28对番茄灰霉病温室防治效果为72.3%，对黄瓜灰霉病的防治效果为67.4%，对辣椒灰霉病的防治效果为75.5%，对茄子灰霉病的防治效果为77.3%，对草莓灰霉病的防效效果为63.1%。序列表〈11()〉中国农业大学〈120〉暗红产色链霉菌及其在病害生物防治中的应用l级3级5级7级9级1009600608Z099009o寸s08寸。9e08T09.BC-c-.B一c-c-器一FB一器器一器C-SBSBSSSPc-.:ps.:f4c-。。，c-器，4c-一PSc>OSOSdp器，c-一c-一.ssc-:14c-OSS0139e〈T3e〈0T"s〈oo寸〉「一iwHY〈〇〉VN。〈〇〉8e〈TT2〉3:I4。。。。。P833c-0著iII03313Koo寸〉8SW(SU①S0曰0J1P0J1I一1.Ss①c-旨(nd①J4s)輕,製必UJnl继<X-T2〉0eeT〈TS9-.eUOIS該！5U92〈0卜1:〉e〈09T〉〔025〕〔6呈〔8U0〕〔i〕〔9110〕〔g呈〔寸呈〔s呈〔215〕呈〔ouo〕〔6星〔8010〕〔510〕〔905〕〔solou〔寸olo〕〔510〕〔0010〕〔6600〕〔8600〕〔z-600u9600〕〔寸600〕〔2600〕〔1600〕〔0600〕〔6800〕〔8800〕〔z,800u〔9800〕寸800〕〔e800u〔2800〕試01/6VZS869I0IN3〈212>DNA〈213〉人工序列〈400>3cgggatcctacggctaccttgttacgacttcacccc3权利要求暗红产色链霉菌(Streptomyceserythrochromogenes)MO28，保藏号为CGMCCNO.3228。2.权利要求l所述菌株在制备生物农药中的应用。3.含有权利要求1所述菌株或其发酵菌液的生物农药。4.含有权利要求l所述菌株的菌剂。5.权利要求1所述菌株、权利要求3所述的生物农药或权利要求4所述的菌剂在植物病害生物防治中的应用。6.如权利要求5所述的应用，其中所述植物病害为番茄灰霉病、辣椒灰霉病和草莓灰霉病具有较好的防治效果外，对小麦纹枯病、稻瘟病、西瓜枯萎病、百合根腐病、桃褐腐病、番茄早疫病，小长喙霉病菌、串珠镰刀病，水稻纹枯病等由植物病原真菌引起的病害和对茄青枯、棉角斑、丁香假单胞病、发根土壤杆菌、葡萄根癌病、土壤根癌病、皱纹假单胞菌病或洋葱伯克霍尔德病。全文摘要本发明提供了链霉菌属暗红产色链霉菌(Streptomyceserythrochromogenes)MO28，保藏号为CGMCCNo.3228。该菌株具有抑制番茄灰霉病生长的作用。平板抑菌试验结果表明MO28菌株对多种植物病原真菌和植物病原细菌有较强的抑制作用，其中对串珠镰刀病菌的抑制能力最强，抑制率达69.9％，对丁香假单胞病菌的抑制直径可达53.7mm。MO28对番茄果实灰霉病的防治效果为96.56％，对番茄叶片灰霉病的防治效果为78.26％，与灰霉尽相比无显著性差异。温室防效检测结果显示MO28对番茄灰霉、辣椒灰霉、黄瓜灰霉病、茄子灰霉病、草莓灰霉病防治效果为63％～77％。文档编号C12N1/20GK101698827SQ20091009233公开日2010年4月28日申请日期2009年9月10日优先权日2009年9月10日发明者吴文良,夏娜,孟凡乔,焦子伟,郭岩彬,齐琳申请人:中国农业大学