蝉花在制备治疗脚气的药物中的新用途的制作方法

文档序号:508089阅读:351来源:国知局
专利名称:蝉花在制备治疗脚气的药物中的新用途的制作方法
技术领域
本发明涉及蝉花的新用途,具体涉及蝉花在制备治疗脚气的药物中的用途。
背景技术
蝶花(Paecilomycescicadae)是由麦角菌科(claviceplaceae)真菌及寄生于蝉类若虫的干燥复合体,属虫生性药用真菌,药用已有1000多年历史,是我国传统的名贵药材之一,具有多方面的药用价值。主要活性成分虫草多糖、虫草酸、腺苷、超氧化物歧化酶(S0D)、留醇、生物碱、维生素等。目前对蝉花药用价值的研究主要集中在其抗氧化、抗辐射、调节人体免疫的功能,提高食欲,促进睡眠,增强自身抗病等方面,其他方面的药用价值鲜见报道。

发明内容
本发明的目的是提供蝉花的新用途,以进ー步提升其药用价值。本发明提供了蝶花Paecilomyces cicadae在制备治疗脚气的药物中的新用途。所述蝶花为天然蝶花或者为蝶拟青霉菌株(Paecilomyces cicadae)经人工培育获得的产物(即人工蝉花)。所述人工蝉花应与天然蝉花具有类似的活性成分。进ー步的,所述脚气即为足癣,是由真菌感染引发的皮肤病。所述真菌为常规引发脚气的真菌,如白色念珠菌、絮状表皮癣菌、羊毛状孢子菌、石膏样毛癣菌和红色毛癣菌。进ー步的,所述治疗脚气的药物主要药效成分为蝉花的有效成分提取物。所述蝉花的有效成分提取物可以为天然的蝉花的有效成分提取物,也可以是蝉拟青霉菌株经人工培育获得的产物(如孢梗束、分生孢子、菌丝体与培养基剩余物质的混合物等)的有效成分提取物。蝉花有效成分的提取方法为常规,如煎煮法等。进ー步的,蝉拟青霉菌株经人工培育方法如下I)菌种制备包括斜面种制备和一级种制备过程;其中,斜面种制备包括如下步骤将分离纯化后的蝉拟青霉菌株移植到PSA培养基斜面试管中,在22°C 25°C下培养5 7天,挑选长势好的种保存备用;ー级种制备包括如下步骤将斜面种接入马铃薯蔗糖培养液中,在22°C 25°C,振荡频率为130 150r/min的条件下培养3 7天,至锥形瓶内出现大量菌丝球后作为ー级种备用;2)接种将步骤I)中制得的一级种接入到固体培养基中;3)发酵接种后的培养盒移至培养室内,在20°C 25°C,相対湿度60% 80%的条件下培养30天 50天;4)采收当培养物的孢梗束高度达9cm左右、表面有少量分生孢子出现时即可采收。较佳的,步骤2)中,所述固体培养基中含有的组分名称及各组分的重量份为基质42 46重量份;甘蔗渣 2 10重量份;贝壳粉 O. I O. 5重量份;蚕蛹粉2 5重量份;硝酸钾O. I O. 5重量份;水44 56重量份;

其中,所述基质选自如下组合中的ー种玉米粉、麸皮和蔗糖的混合物;小麦;大麦;粟和蔗糖的混合物;大米和蔗糖的混合物;高粱和蔗糖的混合物。优选的,所述玉米粉、麸皮和蔗糖的混合物中,以所述玉米粉、麸皮和蔗糖的混合物的总重量计,玉米粉、麸皮和蔗糖的重量百分比分别为玉米粉43% 55%、麸皮44% 55%、鹿糖I % 2%。优选的,所述粟和蔗糖的混合物中,以所述粟和蔗糖的混合物的总重量计,粟和蔗糖的重量百分比分别为粟98% 99%、蔗糖1% 2%。优选的,所述大米和蔗糖的混合物中,以所述大米和蔗糖的混合物的总重量计,大米和蔗糖的重量百分比分别为大米98% 99%、蔗糖优选的,所述高粱和蔗糖的混合物中,以所述高粱和蔗糖的混合物的总重量计,高粱和蔗糖的重量百分比分别为高粱98% 99%、蔗糖I % 2%。

优选的,所述固体培养基的制备方法为先将玉米粉、麸皮或小麦、大麦、粟、大米、高粱煮熟,将蔗糖、硝酸钾在水中溶解,再与甘蔗渣、贝壳粉,蚕蛹粉按照比例混合均匀。优选的,所述固体培养基中还含有蛋白胨(鱼粉),且所述蛋白胨(鱼粉)的重量份为O. 5重量份。优选的,步骤2)中,所述固体培养基的碳氮比为80 98。较佳的,步骤3)中,在固体发酵后期孢梗束生长阶段要求采光,且环境温度相较前期菌丝体生长阶段需低2 3°C,培养过程中需保持空气流通。研究表明,蝉花的水提物对易浅表感染的真菌具有一定的抑菌和杀菌作用,对于脚气具有一定的疗效。本发明采用蝉花的水提物治疗脚气可采用外用方法,利用含有蝉花有效成分提取物的药液或药膏浸泡或涂膜,用量采用常规外用制剂的用量。本发明公开了蝉花在治疗脚气上的新用途,为蝉花的产品开发提供了新的方向。
具体实施例方式以下列举实施例以进ー步阐述本发明,应理解,实例并非用于限制本发明的保护范围。实施例I人工蝉花的培养I)菌种制备斜面种制备将蝉拟青霉菌株移植到PSA培养基斜面试管中,在22°C 25°C下培养5 7天,挑选长势好的种保存备用;ー级种制备将斜面种接入马铃薯蔗糖培养液中,在22°C 25°C,振荡频率为130 150r/min的条件下培养3 7天,至锥形瓶内出现大量菌丝球后作为ー级种备用;所述PSA培养基中含有如下组分(每IOOOml培养基中含有)马铃薯200g、蔗糖20g、琼脂20g,其制备方法为将去皮马铃薯切丁置于容器内加水1000ml,煮沸20min 30min,过滤,加入蔗糖与琼脂,补足水至IOOOml,加热溶解,然后分装至试管内,装量为试管长的1/5 1/4,塞上棉塞,置于灭菌锅内O. 15MPa压カ下灭菌30min,趁热将试管摆放在斜面板上冷却。所述马铃薯蔗糖培养液中含有如下组分(每IOOOml培养液中含有)马铃薯200g、蔗糖20g ;其制备方法为将去皮马铃薯切丁置于容器内加水1000ml,煮沸15min 30min,过滤,加入蔗糖,补足水至IOOOml,加热溶解,然后分装至锥形瓶内,装量为锥形瓶容量的20% 30%,塞上棉塞,再用牛皮纸包裹,置于灭菌锅内O. 15MPa压カ下灭菌30min,取出冷却至20°C以下。

2)接种将步骤I)中制得的一级种接入到固体培养基中当培养盒中的固体培养基的温度冷却至20°C以下后,在无菌条件下接种,按照3 5%的接种量将一级种接入培养盒中。所述固体培养基中含有的组分名称及各组分的重量份为基质44重量份;甘鹿洛 5重量份;贝壳粉 O. 3重量份;蚕蛹粉 4重量份;硝酸钾 O. 3重量份;水50重量份;其中,所述基质为玉米粉、麸皮和蔗糖的混合物,以三者的总重量计,玉米粉、麸皮和蔗糖的重量百分比分别为玉米粉48. 5%、麸皮50%、蔗糖1.5%。固体培养基的制备方法为先将玉米粉、麸皮煮熟,将蔗糖、硝酸钾在水中溶解,再与甘蔗渣、贝壳粉,蚕蛹粉按照比例混合均匀。按照本发明公布的配方与方法,本技术领域的人员也很容易配制获得符合本发明配比要求的其他固体培养基以实现本发明。3)发酵接种后的培养盒移至培养室内,在20°C 25°C,相対湿度60% 80%的条件下培养40天,在固体发酵后期孢梗束生长阶段要求采光,且环境温度相较前期菌丝体生长阶段需低2 3°C,培养过程中需保持空气流通;4)孢梗束的采收当培养物的孢梗束高度达9cm左右、表面有少量分生孢子出现时即采收。采收的具体步骤为去掉透气封ロ膜,用工具将培养物取出分离孢梗束,烘干分级,干燥后用薄膜袋真空包装,菌质置于_20°C贮存。经检测,本实例制得的产物的多糖、腺苷及虫草酸的含量均接近或超过天然蝉花。野生蝉花与人工蝉花成分的比较
权利要求
1.蝶花Paecilomycescicadae在制备治疗脚气的药物中的用途。
2.如权利要求I所述蝉花的用途,其特征在于,所述蝉花为天然蝉花或者为蝉拟青霉菌株经人工培育获得的产物。
3.如权利要求I所述蝉花的用途,其特征在于,所述脚气是由真菌感染引发的皮肤病。
4.如权利要求3所述蝉花的用途,其特征在于,所述真菌选自白色念珠菌、絮状表皮癣菌、羊毛状孢子菌、石膏样毛癣菌和红色毛癣菌。
5.如权利要求I所述蝉花的用途,其特征在于,所述治疗脚气的药物主要药效成分为蝉花的有效成分提取物。
6.如权利要求5所述蝉花的用途,其特征在于,所述蝉花的有效成分提取物为天然的蝉花的有效成分提取物,或者为蝉拟青霉菌株经人工培育获得的产物的有效成分提取物。
7.如权利要求2所述蝉花的用途,其特征在于,所述蝉拟青霉菌株经人工培育获得的产物采用包括下列步骤的方法获得 1)囷种制备包括斜面种制备和一级种制备; 其中,斜面种制备包括如下步骤将分离纯化后的蝉拟青霉菌株移植到PSA培养基斜面试管中,在22°C 25°C下培养5 7天,挑选长势好的种保存备用; 一级种制备包括如下步骤将斜面种接入马铃薯蔗糖培养液中,在22°C 25°C,振荡频率为130 150r/min的条件下培养3 7天,至锥形瓶内出现大量菌丝球后作为一级种备用; 2)接种将步骤I)中制得的一级种接入到固体培养基中; 3)发酵接种后的培养盒移至培养室内,在20°C 25°C,相对湿度60% 80%的条件下培养30天 50天; 4)米收。
8.如权利要求7所述蝉花的用途,其特征在于,步骤2)中,所述固体培养基中含有的组分名称及各组分的重量份为 基质 42 46重量份; 甘蔗渣 2 10重量份; 贝壳粉 0.1 0.5重量份; 蚕蛹粉 2 5重量份; 硝酸钾 0. I 0. 5重量份; 水44 56重量份; 其中,所述基质选自如下组合中的一种玉米粉、麸皮和鹿糖的混合物;小麦;大麦;粟和蔗糖的混合物;大米和蔗糖的混合物;高粱和蔗糖的混合物。
9.如权利要求8所述蝉花的用途,其特征在于,所述玉米粉、麸皮和蔗糖的混合物中,以所述玉米粉、麸皮和蔗糖的混合物的总重量计,玉米粉、麸皮和蔗糖的重量百分比分别为玉米粉43% 55%、麸皮44% 55%、蔗糖I % 2% ;所述粟和蔗糖的混合物中,以所述粟和蔗糖的混合物的总重量计,粟和蔗糖的重量百分比分别为粟98% 99%、蔗糖1% 2% ;所述大米和蔗糖的混合物中,以所述大米和蔗糖的混合物的总重量计,大米和蔗糖的重量百分比分别为大米98% 99%、蔗糖1% 2% ;所述高粱和蔗糖的混合物中,以所述高粱和蔗糖的混合物的总重量计,高粱和蔗糖的重量百分比分别为高粱98% . 99 %、庶糖1 % 2 %。
全文摘要
本发明提供了蝉花在制备治疗脚气的药物中的新用途。研究表明,蝉花的水提物对易浅表感染的真菌具有一定的抑菌和杀菌作用,对于脚气具有一定的疗效。本发明蝉花新用途的公开,为蝉花的产品开发提供了新的方向。
文档编号C12N1/14GK102670658SQ20111006283
公开日2012年9月19日 申请日期2011年3月16日 优先权日2011年3月16日
发明者孙长胜, 王玉芹, 盖悦, 谭悠久 申请人:上海泛亚生命科技有限公司
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