专利名称：从芝麻中提取蛋白质的方法
技术领域：
本发明涉及蛋白的分离纯化方法，特别涉及一种从芝麻中提取蛋白质的方法。
背景技术：
芝麻因其含有丰富的油脂和蛋白质而具有较高的使用价值。但长期以来芝麻的利用仅限于油脂的利用.而取油后主要成分为蛋白质的芝麻柏多用来作为饲料。麻脚中蛋白质含量可达50%，芝麻蛋白的氨基酸组成与FAO HO推荐的人类蛋白质标准具有很好的一致性，芝麻蛋白必需氨基酸含量占氨基酸总量的30%。必需氨基酸除赖氨酸和异亮氨基含量低于FAO HO要求外，其他的氨基酸都可以满足人体的需求。芝麻蛋白NPU为56%，如添加Lys后,则NPU值可提闻至81 %。因此,芝麻蛋白可作为许多食品的添加成分，在提闻食品营养价值、改良品质等方面都起非常重要的作用。传统的芝麻蛋白质的提取一般通过酶法、碱法和层析法分离等方法，这些方法存在分离周期长、过程繁琐和得率低等缺点，且使用有机溶剂，影响环境。
发明内容
为解决上述技术问题，本发明提出了一种表面活性剂用量少，成本低，体系组成简单，分离条件温和，提取率高、制备周期短的从芝麻中提取蛋白质的方法。本发明的技术方案是:一种从芝麻中提取蛋白质的方法，其步骤如下:( I)前处理:将芝麻经超微粉碎磨成细粉。(2)制备芝麻蛋白浸取液:按固液比1:18 20，在步骤(I)所得的芝麻细粉中加入含月桂酸聚氧乙烯醚的缓冲液进行搅拌浸取，浸取I 2小时后过滤，得到芝麻蛋白的浸取液。所述缓冲液为Na2HPO4A溶液。所述月桂酸聚氧乙烯醚用作表面活性剂，其在Na2HPO4缓冲液中所占的质量百分比为1% 4%。(3)浊点分相萃取:分两步进行:按固液比g/ml为I 5:100，向步骤(2)所得的芝麻蛋白浸取液中加入月桂酸聚氧乙烯醚，充分混合形成胶束溶液，再向胶束溶液中滴加HCl溶液调节pH值为4.0 5.0，加热至温度80 85°C，进行分相萃取形成胶束相和水相，离心分离出胶束相。向所得的胶束相中加入Na2HPO4水溶液调节pH至8.0 10.0，水浴50 60°C浸取I 2小时后，加热至温度80 85°C，进行分相萃取形成胶束相和水相，离心分离出水相。(4)透析纯化:将得到的水相溶液倒入截留分子为IOku 50ku的透析袋中，进行充分透析，然后冷却、干燥，即为芝麻蛋白。上述提取芝麻蛋白的方法，优选使用黑芝麻。本发明的有益效果在于:1)利用浊点萃取法提取蛋白质，有机溶剂用量少，操作简单，便于大规模操作。2)充分芝麻蛋白本身的性质，在碱性条件下水溶性强，通过2次浊点萃取，得到杂质少、纯度高的芝麻蛋白。3)表面活性剂用量少，成本低，体系组成简单，提取率高，制备周期短，分离条件温和。
具体实施例方式以下结合实施例具体说明本发明。实施例1从芝麻中提取蛋白质的方法，其步骤如下:1、称取芝麻100克，经超微粉碎，研磨成细粉。2、制备芝麻蛋白浸取液:在步骤I所得的芝麻细粉中加入含2%的月桂酸聚氧乙烯醚的0.lmol/L的Na2HPO4水溶液1800ml，进行搅拌浸取，浸取I小时后过滤，得到芝麻蛋白的浸取液。3、浊点分相萃取:分两步进行:按固液比g/ml为1:100，向步骤2所得的芝麻蛋白浸取液中加入月桂酸聚氧乙烯醚，充分混合形成胶束溶液，向胶束溶液中滴加HCl溶液调节pH值为4.5，加热至温度80°C，进行分相萃取形成胶束相和水相，I小时后离心分离出胶束相。向所得的胶束相中加入0.1moVLNa2HPO4溶液调节pH至9，水浴50°C浸取2小时后，继续加热至温度80°C，进行分相萃取形成胶束相和水相，30分钟后离心分离出水相。4、透析纯化:将得到的水相溶液倒入截留分子为IOku的透析袋中，进行充分透析，然后冷却、干燥，即为芝麻蛋白。实施例2除以下区别外，其他同实施例1。1、称取芝麻100克，经超微粉碎，研磨成细粉。2、制备芝麻蛋白浸取液:在步骤I所得的芝麻细粉中加入含4%的月桂酸聚氧乙烯醚的Na2HPO4水溶液2000ml，进行搅拌浸取，浸取2小时后过滤，得到芝麻蛋白的浸取液。3、浊点分相萃取:分两步进行:按固液比g/ml为5:100，向步骤2所得的芝麻蛋白浸取液中加入月桂酸聚氧乙烯醚，向步骤2所得的芝麻蛋白浸取液中加入月桂酸聚氧乙烯醚，充分混合形成胶束溶液，向所得的胶束溶液中滴加0.2mol/LHCL溶液调节pH至4.6，加热至温度85°C，进行分相萃取形成胶束相和水相，I小时后离心分离出胶束相。向所得的胶束相中加入0.lmol/L Na2HPO4溶液调节pH至8，水浴60°C浸取I小时后，继续加热至温度85°C，进行分相萃取形成胶束相和水相，30分钟后离心分离出水相。4、透析纯化:将得到的水相溶液倒入截留分子为50ku的透析袋中，进行充分透析，然后冷却、干燥，即为芝麻蛋白。实施例3除以下区别外，其他同实施例1。1、称取黑芝麻100克，经超微粉碎，研磨成细粉。2、制备黑芝麻蛋白浸取液:在步骤I所得的黑芝麻细粉中加入含2%的月桂酸聚氧乙烯醚的NaH2PO4水溶液2000ml，进行搅拌浸取，浸取2小时后过滤，得到黑芝麻蛋白的浸取液。
3、池点分相萃取:分两步进行:按固液比g/ml为3:100，向步骤2所得的芝麻蛋白浸取液中加入月桂酸聚氧乙烯醚，充分混合形成胶束溶液，向所得的胶束溶液中滴加0.lmol/L HCL溶液调节pH至5.0加热至温度85°C，进行分相萃取形成胶束相和水相，I小时后离心分离出胶束相。向所得的胶束相中加入0.2mol/L NaH2PO4水溶液溶液调节pH至9.5，水浴60°C浸取1.5小时后，继续加热至温度82°C，进行分相萃取形成胶束相和水相，30分钟后离心分离出水相。4、透析纯化:将得到的水相溶液倒入截留分子为30ku的透析袋中，进行充分透析，然后冷却、干燥，即为黑芝麻蛋白。
权利要求
1.一种从芝麻中提取蛋白质的方法，其步骤如下: (1)前处理:将芝麻经超微粉碎磨成细粉； (2)制备芝麻蛋白浸取液:按固液比1:18 20，在步骤(I)所得的芝麻细粉中加入含月桂酸聚氧乙烯醚的缓冲液进行搅拌浸取，浸取I 2小时后过滤，得到芝麻蛋白的浸取液； (3)浊点分相萃取:分以下两步进行: a、按固液比g/ml为I 5:100，向步骤(2)所得的芝麻蛋白浸取液中加入月桂酸聚氧乙烯醚，充分混合形成胶束溶液，再向胶束溶液中滴加HCl溶液调节pH值为4.0 5.0，加热至温度80 85°C，进行分相萃取形成胶束相和水相，离心分离出胶束相； b、向步骤a所得的胶束相中继续加入缓冲液调节pH至8.0 10.0，水浴50 60°C浸取I 2小时后，加热至温度80 85°C，进行分相萃取形成胶束相和水相，离心分离出水相； (4)透析纯化:将得到的水相溶液倒入截留分子为IOku 50ku的透析袋中，进行充分透析，然后冷却、干燥，即为芝麻蛋白。
2.根据权利要求1所述的从芝麻中提取蛋白质的方法，其特征在于，步骤(2)中缓冲液为Na2HPO4水溶液。
3.根据权利要求1所述的从芝麻中提取蛋白质的方法，其特征在于，所述步骤(2)中月桂酸聚氧乙烯醚在所述缓冲液中所占的质量百分比为1% 4%。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的从芝麻中提取蛋白质的方法，其特征在于，所述芝麻为黑芝麻。
全文摘要
本发明涉及蛋白的分离纯化方法，特别涉及一种从芝麻中提取蛋白质的方法。其步骤包括芝麻经超微粉碎成粉，制备芝麻蛋白浸取液，浊点分相萃取，透析纯化制得芝麻蛋白。本发明利用浊点萃取法提取蛋白质，有机溶剂用量少，操作简单，便于大规模操作；充分芝麻蛋白本身的性质，在碱性条件下水溶性强，通过2次浊点萃取，得到杂质少、纯度高的芝麻蛋白；表面活性剂用量少，成本低，体系组成简单，提取率高，制备周期短，分离条件温和。
文档编号A23J1/14GK103190522SQ20131012821
公开日2013年7月10日 申请日期2013年4月12日 优先权日2013年4月12日
发明者杜新磊, 徐亚娟, 李海燕, 张国印 申请人:山东方健制药有限公司