纳豆菌发酵制备菜籽多肽的方法
【专利摘要】本发明涉及一种纳豆菌发酵制备菜籽多肽的方法，将菜籽粕微粉碎后，分别用纳豆菌发酵处理和用蛋白酶水解处理，最后喷雾干燥得菜籽粉。本发明利用纳豆菌发酵联合蛋白酶法水解制备的营养菜籽粉富含纳豆激酶和多肽，使菜籽饼的附加值产品大幅度提高；该菜籽粉可以常规方法制备成胶囊、片剂和颗粒剂，可作为保健食品，在辅助溶解血栓、降血脂和保护肝损伤等方面具有明显效果。
【专利说明】納豆菌发酵制备菜籽多肽的方法
【技术领域】
[0001]本发明属于食品加工领域，涉及ー种纳豆菌发酵制备菜籽多肽的方法。
【背景技术】
[0002]油菜是重要的油料作物之一，我国油菜产量居世界第一位。一般情况下，油菜籽经加工可得约3506菜籽油和65%左右菜籽柏。菜籽柏中富含粗蛋白质，粗脂肪，卵磷脂，多种维生素，氨基酸等，其蛋白质中可消化蛋白质含量可达27.8%。此外，菜籽柏中还含有较高胆碱，生物素，叶酸，烟酸及硫氨素，核黄素等B族维生素和Ca、P、Fe、Se、Cu、Zn、Mn等多种微量元素。菜籽柏的粗蛋白质含量一般在35%-45%，为优质的全价植物蛋白，对其进行开发利用具有重要的经济意义与社会意义。但是，目前我国对菜籽柏的利用相当有限，仅用作肥料或按少量比例添加到反刍动物和淡水鱼类的养殖饲料中，这造成了一定的资源浪费。
[0003]多肽具有良好的持水力，凝胶性，表面活性等物理功能特性及抗氧化、降血脂、调节免疫力等多种生理功能；纳豆菌发酵可产生大量的纳豆激酶，具有稀血液、溶血栓、痩身美容等功效，菜籽饼营养丰富，目前还未应用于纳豆菌发酵，菜籽柏富含蛋白质，利用納豆菌发酵联合蛋白酶法水解制备的营养菜籽粉富含納豆激酶、多肽等营养成分，使菜籽饼的附加值产品大幅度提高，具有显著的社会意义和经济意义。
【发明内容】
[0004]本发明的目的是提供一种纳豆菌发酵制备菜籽多肽的方法，解决目前菜籽柏中的粗蛋白质不能得到充分利用的问题。
[0005]本发明通过以下技术方案来实现:
納豆菌发酵制备菜籽多肽的方法，该方法包括以下步骤:
(1)微粉碎:将菜籽柏粉碎至过60目筛网；
(2)淀粉酶蒸煮:加入物料重量3-6倍的去离子水，加入淀粉酶10u/g，于110-121°C条件下蒸煮30min,冷却备用；
(3)纳豆菌发酵:纳豆菌采用土豆液体培养基扩大培养24h，将扩大的纳豆菌接种至灭菌后的物料，在温度为30°C，摇床转速为160rpm条件下培养1_5天；此步骤中土豆液体培养基指的是PDA液体培养基，为现有技术，不做其他严格限制；
(4)复合酶酶解:发酵结束后，加入去离子水，使发酵液中料液比达到1:10，调整pH至
6.0-8.0，加入纤维素酶10u/g，木瓜蛋白酶20U/g，溶菌酶20U/g，在温度为30-45°C条件下，酶解 0.5-6h ；
(5)喷雾干燥:将酶解液物料喷雾干燥，得营养粉，喷雾干燥エ艺參数为:进风温度>150°C，出风温度く 100°C。
[0006]本发明的エ艺方法，步骤(2)中加入的去离子水量为菜籽粉的4-5倍，蒸煮温度为115-120°C。
[0007]本发明的エ艺方法，步骤(2)中加入的去离子水量为菜籽粉的4.5倍，蒸煮温度为118°C。
[0008]本发明的エ艺方法，步骤(3)中培养时间为2-4天。
[0009]本发明的エ艺方法，步骤(3)中培养时间为3天。
[0010]本发明的エ艺方法，步骤(4)中pH调整至6.5-7.5，酶解温度为35_40°C，酶解时间为l-5h。
[0011]本发明的エ艺方法，步骤(4)中pH调整至7.0，酶解温度为38°C，酶解时间为3h。
[0012]本发明的エ艺方法，步骤(5)中进风温度为160_180°C，出风温度为60_80°C。
[0013]本发明的エ艺方法，步骤(5)中进风温度为180°C，出风温度为60°C。
[0014]作为本发明的最佳实施方式，納豆菌发酵制备菜籽多肽的方法，该方法包括以下步骤:
(1)微粉碎:将菜籽柏粉碎至过60目筛网；
(2)淀粉酶蒸煮:加入物料重量4.5倍的去离子水，加入淀粉酶lOu/g，于118°C条件下蒸煮30min,冷却备用；
(3)纳豆菌发酵:纳豆菌采用土豆液体培养基扩大培养24h，将扩大的纳豆菌接种至灭菌后的物料，在温度为30°C，摇床转速为160rpm条件下培养3天；
(4)复合酶酶解:发酵结束后，加入去离子水，使发酵液中料液比达到1:10，调整pH至7.0，加入纤维素酶10u/g，木瓜蛋白酶20U/g，溶菌酶20U/g，在温度为38°C条件下，酶解3h ；
(5)喷雾干燥:将酶解液物料喷雾干燥，得营养粉，喷雾干燥エ艺參数为:进风温度180°C，出风温度60°C。
[0015]采用上述技术方案的积极效果:本发明利用纳豆菌发酵联合蛋白酶法水解制备的营养菜籽粉富含納豆激酶和多肽，エ艺合理、营养丰富、质细、溶解性好、保存期长，使菜籽饼的附加值产品大幅度提高；该菜籽粉可以常规方法制备成胶囊、片剂和颗粒剂，可作为保健食品，在辅助溶解血栓、降血脂和保护肝损伤等方面具有明显效果，具有显著的社会意义和经济意义。
【具体实施方式】
[0016]下面结合实施例对本发明的技术方案做进ー步的说明，但不应理解为对本发明的限制:
本发明中生物材料的来源:
1、纳豆菌CICC N0.10459购于中国エ业微生物菌种保藏中心。
[0017]实施例1
称取500克菜籽柏，粉碎至过60目筛网；加入物料重量4倍的去离子水，加入淀粉酶10u/g,于115°C条件下蒸煮30min,冷却后,接入纳豆菌,在温度为30°C,摇床转速为160rpm条件下发酵3天，发酵结束后，加入一定量的去离子水，使发酵液中料液比达到1:10，调整pH至8.0，加入纤维素酶10u/g，木瓜蛋白酶20U/g，溶菌酶20U/g，在温度为45°C条件下，酶解2h ;将酶解液物料喷雾干燥，喷雾干燥的エ艺參数为进风温度170°C，出风温度90°C，得营养粉。
[0018]实施例2 称取500克菜籽柏，粉碎至过60目筛网；加入物料重量5倍的去离子水，加入淀粉酶10u/g,于120°C条件下蒸煮30min,冷却后,接入纳豆菌,在温度为30°C,摇床转速为160rpm条件下发酵5天，发酵结束后，加入一定量的去离子水，使发酵液中料液比达到1:10，调整pH至8.0，加入纤维素酶10u/g，木瓜蛋白酶20U/g，溶菌酶20U/g，在温度为45°C条件下，酶解0.5h ;将酶解液物料喷雾干燥，喷雾干燥的エ艺參数为进风温度155°C，出风温度70°C，得营养粉。
[0019]实施例3
称取500克菜籽柏，粉碎至过60目筛网；加入物料重量4倍的去离子水，加入淀粉酶10u/g,于115°C条件下蒸煮30min,冷却后,接入纳豆菌,在温度为30°C,摇床转速为160rpm条件下发酵4天，发酵结束后，加入一定量的去离子水，使发酵液中料液比达到1:10，调整PH至7.5，加入纤维素酶10u/g，木瓜蛋白酶20U/g，溶菌酶20U/g，在温度为40°C条件下，酶解Ih ;将酶解液物料喷雾干燥，喷雾干燥的エ艺參数为进风温度160°C，出风温度80°C，得营养粉。
[0020]实施例4
称取500克菜籽柏，粉碎至过60目筛网；加入物料重量4.5倍的去离子水，加入淀粉酶10u/g,于118°C条件下蒸煮30min,冷却后,接入纳豆菌,在温度为30°C,摇床转速为160rpm条件下发酵3天，发酵结束后，加入一定量的去离子水，使发酵液中料液比达到1:10，调整PH至7.0，加入纤维素酶10u/g，木瓜蛋白酶20U/g，溶菌酶20U/g，在温度为38°C条件下，酶解3h ;将酶解液物料喷雾干燥，喷雾干燥的エ艺參数为进风温度180°C，出风温度60°C，得营养粉。
[0021]实施例5
称取500克菜籽柏，粉碎至过60目筛网；加入物料重量6倍的去离子水，加入淀粉酶10u/g,于121°C条件下蒸煮30min,冷却后,接入纳豆菌,在温度为30°C,摇床转速为160rpm条件下发酵I天，发酵结束后，加入一定量的去离子水，使发酵液中料液比达到1:10，调整PH至6.0，加入纤维素酶10u/g，木瓜蛋白酶20U/g，溶菌酶20U/g，在温度为30°C条件下，酶解6h ;将酶解液物料喷雾干燥，喷雾干燥的エ艺參数为进风温度155°C，出风温度80°C，得营养粉。
[0022]实施例6
称取500克菜籽柏，粉碎至过60目筛网；加入物料重量3倍的去离子水，加入淀粉酶10u/g,于110°C条件下蒸煮30min,冷却后,接入纳豆菌,在温度为30°C,摇床转速为160rpm条件下发酵2天，发酵结束后，加入一定量的去离子水，使发酵液中料液比达到1:10，调整PH至6.5，加入纤维素酶10u/g，木瓜蛋白酶20U/g，溶菌酶20U/g，在温度为35°C条件下，酶解5h ;将酶解液物料喷雾干燥，喷雾干燥的エ艺參数为进风温度170°C，出风温度70°C，得营养粉。
[0023]对比例
中国专利CN101610689A制备高蛋白菜籽粉，粉细度为32-60目，蛋白质达到40%，主要应用于饲料和肥料，目前还未见利用菜籽柏制备营养粉作为ー种食品原料出售。
[0024]实施例3中所制得的菜籽多肽营养粉，采用双缩脲法检测营养粉中多肽的含量，多肽的转化率为87.2%。[0025]转化率的检测方法:游离氨基酸采用甲醛滴定法；蛋白质采用凯氏定氮法。多肽采用双缩脲法检测。
[0026]多肽转化率计算公式:转化率=(T2-T1) / (P1-P2)。
[0027]式中:T2为酶解后多肽含量；T1为酶解前多肽含量；P1为酶解前总蛋白含量；P2为酶解前酸溶性蛋白含量。
[0028]本发明生产得到的营养多肽粉的技术指标如表1:
表I菜籽多肽营养粉技术指标
【权利要求】
1.一种纳豆菌发酵制备菜籽多肽的方法，其特征在于:该方法包括以下步骤: (1)微粉碎:将菜籽柏粉碎至过60目筛网； (2)淀粉酶蒸煮:加入物料重量3-6倍的去离子水，加入淀粉酶10u/g，于110-121°C条件下蒸煮30min,冷却备用； (3)纳豆菌发酵:纳豆菌采用土豆液体培养基扩大培养24h，将扩大的纳豆菌接种至灭菌后的物料，在温度为30°C，摇床转速为160rpm条件下培养1_5天； (4)复合酶酶解:发酵结束后，加入去离子水，使发酵液中料液比达到1:10，调整pH至6.0-8.0，加入纤维素酶10u/g，木瓜蛋白酶20U/g，溶菌酶20U/g，在温度为30-45°C条件下，酶解 0.5-6h ； (5)喷雾干燥:将酶解液物料喷雾干燥，得营养粉，喷雾干燥エ艺參数为:进风温度>150°C，出风温度く 100°C。
2.根据权利要求1所述的纳豆菌发酵制备菜籽多肽的方法，其特征在于:步骤(2)中加入的去离子水量为菜籽粉重量的4-5倍，蒸煮温度为115-120°C。
3.根据权利要求2所述的纳豆菌发酵制备菜籽多肽的方法，其特征在于:步骤(2)中加入的去离子水量为菜籽粉重量的4.5倍，蒸煮温度为118°C。
4.根据权利要求1所述的纳豆菌发酵制备菜籽多肽的方法，其特征在于:步骤(3)中培养时间为2-4天。
5.根据权利要求4所述的纳豆菌发酵制备菜籽多肽的方法，其特征在于:步骤(3)中培养时间为3天。
6.根据权利要求1所述的纳豆菌发酵制备菜籽多肽的方法，其特征在于:步骤(4)中pH调整至6.5-7.5，酶解温度为35-40°C，酶解时间为l_5h。
7.根据权利要求6所述的纳豆菌发酵制备菜籽多肽的方法，其特征在于:步骤(4)中pH调整至7.0，酶解温度为38°C，酶解时间为3h。
8.根据权利要求1所述的纳豆菌发酵制备菜籽多肽的方法，其特征在于:步骤(5)中进风温度为160-180°C，出风温度为60-80°C。
9.根据权利要求8所述的纳豆菌发酵制备菜籽多肽的方法，其特征在于:步骤(5)中进风温度为180°C，出风温度为60°C。
10.根据权利要求1所述的纳豆菌发酵制备菜籽多肽的方法，其特征在于:该方法包括以下步骤: (1)微粉碎:将菜籽柏粉碎至过60目筛网； (2)淀粉酶蒸煮:加入物料重量4.5倍的去离子水，加入淀粉酶lOu/g，于118°C条件下蒸煮30min,冷却备用； (3)纳豆菌发酵:纳豆菌采用土豆液体培养基扩大培养24h，将扩大的纳豆菌接种至灭菌后的物料，在温度为30°C，摇床转速为160rpm条件下培养3天； (4)复合酶酶解:发酵结束后，加入去离子水，使发酵液中料液比达到1:10，调整pH至7.0，加入纤维素酶10u/g，木瓜蛋白酶20U/g，溶菌酶20U/g，在温度为38°C条件下，酶解3h ； (5)喷雾干燥:将酶解液物料喷雾干燥，得营养粉，喷雾干燥エ艺參数为:进风温度180°C，出风温度60°C。
【文档编号】A23J3/14GK103431154SQ201310405557
【公开日】2013年12月11日 申请日期:2013年9月9日 优先权日:2013年9月9日
【发明者】庄义庆, 吴琴燕, 杨敬辉 申请人:江苏丘陵地区镇江农业科学研究所