培养红假单胞菌的浓缩培养基及其应用的制作方法
【专利摘要】本发明涉及一种液体培养基及其应用，具体是涉及到一种培养红假单胞菌的浓缩培养基及其应用，浓缩培养基的重量百分比组分为0.8-1%(NH4)2SO4、0.1-0.2%MgSO4、4-5%NaHCO3、0.4-0.5%K2HPO4、0.15-0.2%NaCl、0.15-0.2%NaAc、0.03-0.05%FeSO4·7H2O、1-1.5%酵母膏和0.08-0.1%明胶，其余是水，本发明的培养基成本低，培养的菌株繁殖力强，菌数多。
【专利说明】培养红假单胞菌的浓缩培养基及其应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种液体培养基及其应用，具体是涉及到一种培养红假单胞菌的浓缩培养基及其应用 。
【背景技术】
[0002]微生物，在生态系统中发挥重要的作用，几乎参与了地球上所用的生物化学过程。随着技术的发展及研究的深入，微生物被广泛的应用于各个行业，包括各种酶制剂、医药制剂、食品、燃料等等。此外，大量研究表明，环境中，微生物能够降解多种异生物质，包括许多污染物。大量的降解微生物资源被从各种环境中分离出来，其生物降解各种污染物的机制也逐步被阐明。
[0003]然而，微生物的应用过程中的一个首要的问题，是如何低成本、高效率的发酵培养，从而获得大量的微生物。现有的技术，都需要较好的无菌操作条件和专门的培养设备。
[0004]目前，培养红假单胞菌所采用的培养基主要是MM培养基(NaCllg/L、CaCl20.5g/L、K2HPO40.5g/L、KH2PO40.5g/L、FeCl30.02g/L、NH4NO31g/L, MgSO4.7H200.03g/L, pH7.0-7.2)，或者为MMY培养基，即MM培养基添加一定量的有机物如酵母膏、蛋白胨、胰蛋白胨等，且配制好的培养基需要立即高压灭菌，然后在很短的时间内使用，否则，非常容易污染而无法使用，影响了红假单胞菌的培养效率，且培养的细菌总数不多，严重影响了其推广应用。
【发明内容】
[0005]本发明要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种培养红假单胞菌的浓缩培养基和在红假单胞菌发酵中的应用，其能以低成本、方便快捷的操作实现对红假单胞菌高效率培养，培养的细菌总数多。
[0006]为解决上述技术问题，本发明提出的技术方案为:
[0007]培养红假单胞菌浓缩培养基，重量百分比组分为0.8-1%(NH4)2SO4^0.1-0.2%MgS04、4-5%NaHC03、0.4-0.5%Κ2ΗΡ04、0.15-0.2%NaCl、0.15-0.2%NaAc、0.03-0.05%FeS04.7H20、1_1.5%酵母膏和0.08-0.1%明胶，其余是水。调节pH值为6.5-7.5，优选为6.5-7.0。
[0008]配制好的浓缩培养基，加入到600_1000ml的透明塑料袋或塑料瓶，并在0.04—
0.05Mpa下灭菌20— 30分钟。该透明塑料袋或塑料瓶易于存储和运输，使用方便，开袋或瓶，加入9倍体积的水，即可用于接种培养。
[0009]本发明还提供一种培养红假单胞菌的浓缩培养基在红假单胞菌发酵中的应用，步骤是，将浓缩培养基稀释，最好是10倍，然后接种红假单胞菌，接种量优选为1%，在光源下培养。本发明得到的红假单胞菌的微生物总数可达3.7亿/mL。
[0010]本发明的有益效果是，浓缩后的培养基化学成分浓度高，不易污染，保藏时间长；且所占用体积小，灭菌更加方便彻底。此外，浓缩后的培养基使用方便，培养红假单胞菌生长速率快、使用不受场地限制，降低的了红假单胞菌生产成本。相比现有技术的培养基，本发明的培养基培养的细菌总数多。【具体实施方式】
[0011]实施例1
[0012]培养红假单胞菌浓缩培养基的制备
[0013]重量百分比组分为0.8%(NH4)2S04、0.2%MgS04、5%NaHC03、0.4%Κ2ΗΡ04、0.15%NaCl、0.15%NaAc、0.05%FeS04.7H20、1% 酵母膏和 0.1% 明胶，其余是水。用 5mol/L NaOH 调节pH=7.0。加入到1000ml的透明塑料袋或塑料瓶，并在0.04—0.05Mpa下灭菌20分钟。
[0014]实施例2
[0015]培养红假单胞菌浓缩培养基的制备
[0016]重量百分比组分为1%(NH4)2S04、0.l%MgS04、4%NaHC03、0.5%Κ2ΗΡ04、0.2%NaCl、0.2%NaAc、0.03%FeS04.7H20、1.5% 酵母膏和 0.08% 明胶，其余是水。用 6mol/L NaOH 调节pH=6.5。加入到1000ml的透明塑料袋或塑料瓶，并在0.04—0.05Mpa下灭菌30分钟。
[0017]实施例3
[0018]培养红假单胞菌浓缩培养基应用于培养高效降解有机磷和菊酯类农药残留物的沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris),所述沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCNo:M2012224。
[0019]将实施例1制备的培养基，打开瓶盖，加入9倍体积的水，然后接种1%体积的沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris) CCTCC No:M2012224,所述沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris) CCTCC No:M2012224 公开在中国专利申请号为201210394957.X的专利文献中，然后在自然光照或白炽灯(25W)下培养。
[0020]表1 为沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)CCTCC No:M2012224 分别在本发明培养基和现有技术的MMY培养基中培养得到的菌数，其他培养条件相同。
[0021]表1菌株CCTCC No:M2012224发酵培养菌数(X亿/mL)
【权利要求】
1.一种培养红假单胞菌的浓缩培养基，其特征是，重量百分比组分为0.8-1%(NH4)2SO4,0.1-0.2%MgS04、4-5%NaHC03、0.4-0.5%Κ2ΗΡ04、0.15-0.2%NaCl、0.15-0.2%NaAc、0.03-0.05%FeS04.7Η20、1-1.5% 酵母膏和 0.08-0.1% 明胶，其余是水。
2.如权利要求1所述的培养红假单胞菌的浓缩培养基，其特征是pH为6.5-7.5。
3.—种如权利要求1或2所述的培养红假单胞菌的浓缩培养基在红假单胞菌发酵中的应用。
【文档编号】C12N1/20GK103525737SQ201310503040
【公开日】2014年1月22日 申请日期:2013年10月23日 优先权日:2013年10月23日
【发明者】刘勇, 张松柏, 张德咏, 罗香文, 罗源华, 谭新球, 成飞雪, 程菊娥, 彭静, 朱春晖, 张卓 申请人:湖南省植物保护研究所