对小鼠黑质部位进行dna甲基化的诱导方法
【专利摘要】本发明公开了对小鼠黑质部位进行DNA甲基化的诱导方法，其特征在于，步骤如下：首先，采用MPTP通过连续腹腔给药的方式，诱导小鼠，观察其行为，检测其TH的表达状况；运用MPTP诱导小脑中脑黑质部分的ＤＮＡ总体甲基化水平；运用荧光定性分析，对甲基化DNA免疫共沉淀；获得甲基化谱；向小鼠注射碳酸钙溶液，观察其表达水平；获得甲基化谱之前，可以运用亚硫酸盐类注射的方法，诱导小鼠。荧光定性分析，主要是采用PCR对MPTP诱导小鼠模型。本发明的有益效果是：操作简单，成本较低，为肿瘤免疫治疗提供新的思路、方法和途径，同时可以促进免疫杀伤作用。
【专利说明】对小鼠黑质部位进行DNA甲基化的诱导方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及生化实验领域，具体涉及对小鼠黑质部位进行DNA甲基化的诱导方法。
【背景技术】
[0002]在细胞凋亡一词出现之前，胚胎学家已观察到动物发育过程中存在着细胞程序性死亡(programmed cell death, P⑶)现象,近年来P⑶和细胞凋亡常被作为同义词使用，但两者实质上是有差异的。首先，PCD是一个功能性概念，描述在一个多细胞生物体中，某些细胞的死亡是个体发育中一个预定的，并受到严格控制的正常组成部分，而凋亡是一个形态学概念，至于细胞坏死不同的受到基因控制的细胞死亡形式；其次，PCD的最终结果是细胞凋亡，但细胞凋亡并非都是程序化的。如果调节细胞“自杀”的基因出了问题，该死亡的细胞没有死亡，反而继续分裂繁殖，便会导致有问题或恶性细胞不受控制地增长，比如癌症；如果基因错向不该死的细胞发出“自杀令”，不让之分裂繁殖，使不该死亡的淋巴细胞大批死亡，便破坏了人体的组织或免疫系统，比如艾滋病。控制“程序性细胞死亡”的基因有两类:一类是抑制细胞死亡的；另一类是启动或促进细胞死亡的。两类基因相互作用控制细胞正常死亡。如果能发现所有的调控基因，分析其功能，研究出能发挥或抑制这些基因功能的药物，那么人类就能够敲响癌症和艾滋病的丧钟。
【发明内容】
[0003]本发明要解决的技术问题在于，针对现有技术缺陷，提供一种技术方案:
对小鼠黑质部位进行DNA甲基化的诱导方法，步骤如下:首先，采用MPTP通过连续腹
腔给药的方式，诱导小鼠，观察其行为，检测其TH的表达状况；运用MPTP诱导小脑中脑黑质部分的DNA总体甲基化水平；运用荧光定`性分析，对甲基化DNA免疫共沉淀；获得甲基化谱；向小鼠注射碳酸钙溶液，观察其表达水平。
[0004]本发明中，获得甲基化谱之前，可以运用亚硫酸盐类注射的方法，诱导小鼠。
[0005]本发明中，荧光定性分析，主要是采用PCR对MPTP诱导小鼠模型。
[0006]本发明的有益效果是:操作简单，成本较低，为肿瘤免疫治疗提供新的思路、方法和途径，同时可以促进免疫杀伤作用。
【具体实施方式】
[0007]对小鼠黑质部位进行DNA甲基化的诱导方法，步骤如下:首先，采用MPTP通过连续腹腔给药的方式，诱导小鼠，观察其行为，检测其TH的表达状况；运用MPTP诱导小脑中脑黑质部分的D N A总体甲基化水平；运用荧光定性分析，对甲基化DNA免疫共沉淀；获得甲基化谱；向小鼠注射碳酸钙溶液，观察其表达水平。获得甲基化谱之前，可以运用亚硫酸盐类注射的方法，诱导小鼠。荧光定性分析，主要是采用PCR对MPTP诱导小鼠模型。
[0008]以上所述，仅为本发明较佳的【具体实施方式】，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本【技术领域】的技术人员在本发明披露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或 改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
【权利要求】
1.对小鼠黑质部位进行DNA甲基化的诱导方法，其特征在于，步骤如下:首先，采用MPTP通过连续腹腔给药的方式，诱导小鼠，观察其行为，检测其TH的表达状况；运用MPTP诱导小脑中脑黑质部分的D N A总体甲基化水平；运用荧光定性分析，对甲基化DNA免疫共沉淀；获得甲基化谱；向小鼠注射碳酸钙溶液，观察其表达水平。
2.如权利要求1所述的对小鼠黑质部位进行DNA甲基化的诱导方法，其特征在于，获得甲基化谱之前，可以运用亚硫酸盐类注射的方法，诱导小鼠。
3.如权利要求1所述的对小鼠黑质部位进行DNA甲基化的诱导方法，其特征在于，荧光定性分析，主要是采用PCR 对MPTP诱导小鼠模型。
【文档编号】C12Q1/68GK103614464SQ201310537871
【公开日】2014年3月5日 申请日期:2013年11月5日 优先权日:2013年11月5日
【发明者】辛竹 申请人:辛竹