一种混源氯代二苯甲酮的制备方法与作为海洋防污剂的应用的制作方法
【专利摘要】一种混源氯代二苯甲酮化合物的制备方法与作为海洋防污剂的应用，制备时先对真菌Pestalotiopsis?sp.(ZJ-2009-7-6)进行菌种培养，再对该真菌进行发酵培养，将所得菌丝体用氯仿-甲醇混合液(1∶1)浸提3次减压浓缩后，用乙酸乙酯萃取3次得粗浸膏；乙酸乙酯相粗浸膏依次进行正相硅胶柱层析、Sephadex?LH-20凝胶柱层析、HPLC高效液相色谱，即得式I化合物。本发明提供一种海洋生物防污剂，其特征在于以本发明的式I化合物或其药学上可接受的盐，用于防治藤壶附着引起的海洋生物污损。
【专利说明】一种混源氯代二苯甲酮的制备方法与作为海洋防污剂的应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种混源氯代二苯甲酮(hybrid chlorinated benzophenone)的制备方法与应用，特别是涉及一种对海洋污损生物藤壶Balanus amphitrite幼虫具有极强的抑制活性的混源氯代二苯甲酮及其制备方法与应用。
【背景技术】
[0002]海洋生物污损是有机分子、微生物、动物、植物、以及它们的副产物在海洋潜没设施表面的危害性积聚。这种危害性积聚经常发生在没有保护的海洋潜没设施的表面，包括海运和旅游的船舶，海军军舰，热交换器，海洋传感器以及水产养殖基地等。生物污损引起了巨大的经济损失，仅以美国海军军舰为例，每年在这方面的经济损失在18到26亿美元之间，而美国海军军舰数量仅占全球船舶数量的0.5%，因此海洋生物污损是极其严重的自然危害。藤壶因其很强的黏附能力是目前所知的污损生物中非常普遍的代表性生物。自2008年全球取消了有毒防污剂有机锡的使用后，寻找安全高效的海洋防污剂成为国际上急需解决的课题。海洋天然产物被认为是新型海洋防污剂的重要来源。实际上，在过去的几十年里已经从海绵，珊瑚和海藻等海洋生物中发现了很多有强抗污损活性的化合物。然而，从上述大型生物中发现的活性化合物由于受到量的限制而大大影响了其潜在的应用。海洋微生物由于在实验室中可以大规模发酵，不易破坏自然环境，而成为活性海洋化合物的最重要来源。然而，近年来尚未见到从海洋微生物中获得有重要抗污损活性的混源氯代二苯甲酮化合物作为防污剂的使用。(J.A.Callow，Μ.E.Callow, Nat.Commun.2011,2,244-253 ；C.M.Kirschner, A.B.Brennan, Annu.Rev.Mater.Res.2012，42，1-19 ；M.Schultz,J.Bendick, E.Holm，W.Hertel, B1fouling 2011，27，87-98 ；N.Fusetani，Nat.Prod.Rep.2004，21，94-104 ；N.Fusetani，Nat.Prod.Rep.2011，28，400-410 ；P._Y.Qian, Y.Xu,N.Fusetani，B1fouling 2010，26，223-234。)
【发明内容】
[0003]本发明的目的在于提供一种来源于海洋真菌的混源氯代二苯甲酮化合物的制备方法与作为海洋防污剂的应用，它能满足现有技术的上述需求。菌种保藏信息:保藏单位名称:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏单位地址:北京市朝阳区北辰西路I号院3号中国科学院微生物研究所；保藏日期:2012年12月17日；保藏编号:CGMCC6960 ;分类命名=Pestalot1psis sp.。
[0004]本发明提供式I化合物或其药学上可接受的盐:
【权利要求】
1.一种式I结构的混源氯代二苯甲酮化合物，其特征在于包括以下步骤:先在菌种培养基中对真菌Pestalot1psis sp.(ZJ-2009-7-6)进行菌种培养，再在发酵培养基中对该真菌进行发酵培养，将所得菌丝体用氯仿-甲醇混合液(I: I)浸提3次减压浓缩后，用乙酸乙酯萃取3次得粗浸膏；乙酸乙酯相粗浸膏分别进行正相硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析后，再经HPLC高效液相制备色谱，将所得洗脱液浓缩，得到式I化合物；其中式 I化合物的结构为:
其药学上可接受的盐；其中所述菌种培养基中 含有葡萄糖、酵母膏、蛋白胨、琼脂、粗海盐、水；所述的发酵培养基中含有大米、粗海盐、水；所述的色谱分离为正相硅胶柱色谱分离、凝胶柱层析分离和高效液相色谱分离。
2.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于所述菌种培养基优选含有葡萄糖0.1 % -5.0 %、酵母膏 0.01 % -1 %、蛋白胨 0.01 % -1 %、琼脂 0.1 % -3.0 %、氯化钠0.05% _5%，其余为水，上述百分含量均为重量百分比，培养温度优选为0-30°C，培养时间优选为3-15天。
3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于所述发酵培养基优选含有大米1.0% -80.0%、氯化钠0.05% _5%，其余为水，上述百分含量均为重量百分比，培养温度优选为0-30°C，培养时间优选为10-60天。
4.如权利要求2-3任一项所述的制备方法，其特征在于所述的正相硅胶柱层析采用的固定相为200-300目硅胶，流动相为体积比为15% -60%的乙酸乙酯-石油醚混合溶剂；所述Sephadex LH-20凝胶柱层析采用的流动相为体积比为氯仿:甲醇=I: I的混合溶剂；所述HPLC高效液相制备色谱中采用的色谱柱为KromasillOX 250mm，5 μ m,流速为1.0-5.0mL/min，流动相为体积比50% -80%的甲醇-水混合溶剂。
5.一种海洋生物防污剂，其特征在于其含有权利要求1所述的式I化合物或其药学上可接受的盐作为有效成分。
6.权利要求1所述的式I化合物或其药学上可接受的盐在制备海洋防污剂中的应用。
【文档编号】C12R1/645GK104163805SQ201410325117
【公开日】2014年11月26日 申请日期:2014年7月2日 优先权日:2014年7月2日
【发明者】邵长伦, 王长云, 邢倩, 王开玲 申请人:中国海洋大学