一种牛樟菌的培养基及培养方法
【专利摘要】本发明涉及一种牛樟菌的培养基。所述的培养基包含以下重量份的组分：牛樟木萃取的营养液5%-10%，碳源10-30%，氮源5-10%，葡萄糖10-15%，酵母粉2-5%，水余量。采用所述的培养基进行牛樟菌培养的方法，包括以下步骤：先用接种针挑取少量在试管斜面培养基上保藏的菌丝体接种到PDA平板培养基上，进行菌株活化，在将活化的菌株接种于培养基中，在光照下培养，得樟芝菌菌丝体原基。采用本发明进行牛樟菌培养，培养得到的樟菌菌丝体可产生种类最多的物质，且产生的物质明显优于黑暗条件下培养的菌丝体。
【专利说明】一种牛樟菌的培养基及培养方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于生物检测领域，具体涉及一种牛樟菌的培养基及培养方法。
【背景技术】
[0002] 牛樟芝（Taiwanofungus camphorates)属樟科樟属植物，又名黑樟，牛樟燕或樟 芝，原产于我国台湾。牛樟木树干通直，树体高耸，具有良好的观赏价值，其具有特殊的香 味，也不易腐朽，且纹理交错、材质细致，为高价值家具最佳素材。樟荥为一种木材腐朽真 菌，味道较苦，具有安神、行气活血、消积解毒、消肿等功效，可谓一种上等的食或药用类真 菌。台湾研究人员进行了多项樟芝毒理试验，结果显示，LDS (下标50)为2000mg/kg，显示 为无毒性物质，且原子光谱分析显示，其中不含有汞、砷及铬等重金属。台北荣民总医院研 究显示，樟芝菌粉无毒副作用，樟芝无致突变及致畸作用。目前由于牛樟天然林过度开发及 人为盗伐，使得牛樟芝仅分布在高海拨地区，且多为高龄老树，结实量少，母树甚为分散，给 授粉带来较大困难，给种子的采集也带来较大困难，而且因树体高大不易攀爬，即使能采摘 种子，发芽或发芽率较低，导致牛樟芝资源严重短缺，价格昂贵，因此，极有必要进行牛樟芝 的人工栽培。
[0003] 野生与人工培育的牛樟芝功效神奇，目前已实现牛樟芝人工培养规模化。樟芝子 实体可加工成各种饮口，便利人们日常饮用，而其液体培养物只能加工成胶囊，而在无牛樟 树条件下，不可能培养出樟芝子实体，而通过液体静置培养术，可生长出厚实的菌丝体原 基，而这种菌丝体原基在品质及实用上均优于液体发酵菌丝体。为此，本发明提供一种能获 得樟芝菌丝体原基的培养基及培养方法。
【发明内容】
[0004] 针对上述现有技术的不足，本发明提供一种能获得樟芝菌丝体原基的培养基及培 养方法。
[0005] 本发明的技术方案如下： 一种牛樟菌的培养基，所述的培养基包含以下重量份的组分： 牛樟木萃取的营养液 5%-10%， 碳源 10-30% 氮源 5-10% 葡萄糖 10-15% 酵母粉 2-5% 水 优选的，所述的碳源选自玉米淀粉、马铃薯淀粉或地瓜淀粉中的一种或多种。
[0006] 优选的，所述的氮源为麸皮浸出液。
[0007] 优选的，所述的培养基为在121°C、0. 10-0. 15Kpa下灭菌15-30min的培养基。 [0008] 优选的，所述的水为二次蒸馏水。
[0009] 优选的，所述的玉米淀粉：水的体积比为（3-4) : (5-7)。
[0010] 采用如上所述的培养基进行牛樟菌培养的方法，包括以下步骤： (1) 菌株活化：用接种针挑取少量在试管斜面培养基上保藏的菌丝体接种到PDA平板 培养基上，培养得活化的樟菌菌株； (2) 取l-2cm2步骤（1)中培养得到的活化樟菌菌落接种于培养基中，在光照下培养，得 樟芝菌菌丝体原基。
[0011] 所述的樟芝菌株为本实验室分离自台湾野生樟芝子实体。
[0012] 步骤（1)中所述的培养温度为25-28°C，所述的培养时间为20-25d。
[0013] 步骤（2)中所述的培养温度为26-30°C，培养时间为55-56d。
[0014] 本发明与现有技术相比，有益效果体现在以下几点： 1. HPLC结果显示，培养55d或以上，培养55天或以上菌丝体产生的物质种类最多。在 菌丝体生长初期，菌丝体只合成本身生长所需要的初级代谢产物，在后期才合成具有生物 活性的次级代谢产物，但是在培养60天时，菌丝体的物质种类少于培养55天的樟芝菌丝 体，说明在培养60天后，菌丝体的物质可能被菌丝体利用。因此，本发明中将樟菌的培养时 间限定为55-56d， 2. 研究显示，HPLC结果显示，樟菌丝体在有光的条件下产生的物质明显优于黑暗条件 下培养的菌丝体。因此，本发明对樟菌在光照下培养。
[0015] 3.牛樟菌可利用玉米淀粉、马铃薯淀粉或地瓜淀粉作为碳源，不能利用大米粉作 为碳源，能利用麸皮作为氮源，不能利用豆饼粉作为氮源，本发明中将玉米淀粉、马铃薯淀 粉、地瓜粉及麸皮作为培养基中成分，以利于牛樟菌的生长。
【具体实施方式】
[0016] 下面结合实施例对本发明做进一步说明。
[0017] 实施例1 一种牛樟菌的培养基，所述的培养基包含以下重量份的组分： 牛樟木萃取的营养液 5%， 玉米淀粉 麸皮浸出液 5% 葡萄糖 10% 酵母粉 2% 二次蒸馏水 所述的培养基为在121°C、0. lOKpa下灭菌15min的培养基。
[0018] 所述的玉米淀粉：水的体积比为3 :5。
[0019] 采用如上所述的培养基进行牛樟菌培养的方法，包括以下步骤： (1) 菌株活化：用接种针挑取少量在试管斜面培养基上保藏的菌丝体接种到PDA平板 培养基上，培养，培养温度为25°C，培养时间为20d，得活化的樟菌菌株； (2) 取lcm2步骤（1)中培养得到的活化樟菌菌落接种于培养基中，在光照下培养，培养 温度为26°C，培养时间为55d，得樟芝菌菌丝体原基。
[0020] 所述的樟芝菌株为本实验室分离自台湾野生樟芝子实体。
[0021] 实施例2 一种牛樟菌的培养基，所述的培养基包含以下重量份的组分： 牛樟木萃取的营养液 1〇%， 马铃薯淀粉 30% 麸皮浸出液 10% 葡萄糖 15% 酵母粉 5% 二次蒸馏水 所述的培养基为在121°C、0. 15Kpa下灭菌30min的培养基。
[0022] 采用如上所述的培养基进行牛樟菌培养的方法，包括以下步骤： (1) 菌株活化：用接种针挑取少量在试管斜面培养基上保藏的菌丝体接种到PDA平板 培养基上，培养，培养温度为28°C，培养时间为25d，得活化的樟菌菌株； (2) 取2cm2步骤（1)中培养得到的活化樟菌菌落接种于培养基中，在光照下培养，培养 温度为30°C，培养时间为56d，得樟芝菌菌丝体原基。
[0023] 所述的樟芝菌株为本实验室分离自台湾野生樟芝子实体。
[0024] 实施例3 一种牛樟菌的培养基，所述的培养基包含以下重量份的组分： 牛樟木萃取的营养液 8%， 地瓜淀粉 20% 麸皮浸出液 8% 葡萄糖 12% 酵母粉 3% 二次蒸馏水 所述的培养基为在121°C、0. 12Kpa下灭菌20min的培养基。
[0025] 采用如上所述的培养基进行牛樟菌培养的方法，包括以下步骤： (1) 菌株活化：用接种针挑取少量在试管斜面培养基上保藏的菌丝体接种到PDA平板 培养基上，培养，培养温度为26°C，培养时间为23d，得活化的樟菌菌株； (2) 取2cm2步骤（1)中培养得到的活化樟菌菌落接种于培养基中，在光照下培养，培养 温度为28°C，培养时间为55d，得樟芝菌菌丝体原基。
[0026] 所述的樟芝菌株为本实验室分离自台湾野生樟芝子实体。
[0027] 上述实施例仅为本发明的优选实施方式，并不应理解为对本发明的限定，本领域 技术人员根据本发明的揭示，不脱离本发明范畴所做出的改进和修改都应该在本发明的保 护范围之内。
【权利要求】
1. 一种牛樟菌的培养基，其特征在于，所述的培养基包含以下重量份的组分： 牛樟木萃取的营养液 5%-10%， 碳源 10-30%， 氮源 5-10%， 匍萄糖 10-15%， 酵母粉 2-5%， 水 余量。
2. 根据权利要求1所述的一种牛樟菌的培养基，其特征在于，所述的碳源选自玉米淀 粉、马铃薯淀粉或地瓜淀粉中的一种或多种。
3. 根据权利要求1所述的一种牛樟菌的培养基，其特征在于，所述的氮源为麸皮浸出 液。
4. 根据权利要求1所述的一种牛樟菌的培养基，其特征在于，所述的培养基为在 121°C、0. 10-0. 15Kpa 下灭菌 15-30min 的培养基。
5. 根据权利要求1所述的一种牛樟菌的培养基，其特征在于，所述的水为二次蒸馏水。
6. 根据权利要求1所述的一种牛樟菌的培养基，其特征在于，所述的玉米淀粉：水的体 积比为（3-4) : (5-7)。
7. 采用如权利要求1-6任一所述的培养基进行牛樟菌培养的方法，其特征在于，包括 以下步骤： (1) 菌株活化：用接种针挑取少量在试管斜面培养基上保藏的菌丝体接种到PDA平板 培养基上，培养得活化的樟菌菌株； (2) 取l-2cm2步骤（1)中培养得到的活化樟菌菌落接种于培养基中，在光照下培养，得 樟芝菌菌丝体原基。
8. 根据权利要求1所述的一种牛樟菌的培养基，其特征在于，所述的樟芝菌株为本实 验室分离自台湾野生樟芝子实体。
9. 根据权利要求1所述的一种牛樟菌的培养基，其特征在于，步骤（1)中所述的培养温 度为25-28°C，所述的培养时间为20-25d。
10. 根据权利要求1所述的一种牛樟菌的培养基，其特征在于，步骤（2)中所述的培养 温度为26-30°C，培养时间为55-56d。
【文档编号】C12N1/14GK104152359SQ201410405485
【公开日】2014年11月19日 申请日期:2014年8月18日 优先权日:2014年8月18日
【发明者】刘巴宁, 郑安乔 申请人:中山安荞生物科技有限公司