技术领域
本发明涉及食品领域，具体涉及一种含雪莲花提取物的具有改善睡眠作用的食品添加剂。
背景技术：
人一生中有三分之一的时间是在睡眠中度过的，五天不睡就会影响人的生存，可见睡眠是人重要的生理需要之一。睡眠是生命所必需的过程，是机体复原、整合和巩固记忆的重要环节，是健康不可缺少的组成部分。据调查，近年随着我国经济的发展，国人中有45％存在着不同程度的睡眠障碍。睡眠障碍中尤以失眠问题最为严重，失眠的危害从短期效应来看，直接影响的是第二天的工作与学习，精神萎靡，疲惫无力，情绪不稳注意力不集中等。而从长远的角度来看，失眠具有更加巨大和深远的危害，大多数患者长期失眠，越想睡越睡不着，越急越睡不下，易引发焦虑症；同时失眠也是诱发其它疾病的潜在因素，如植物神经功能紊乱，易患神经功能亢进等，出现手脚心多汗，心悸，心跳快，呼吸急促，肌肉收缩，颤抖，尿急尿频，胸部有压迫感，腹胀而泻，咽部阻碍感，多汗、四肢没力麻木等症状。因此，失眠对社会造成极大的危害，由于长期陷入对于睡眠的担心与恐慌中，人会变得多疑、敏感、易怒，以及相当的缺乏自信，这些势必影响其在家庭和工作中各方面的人际关系，从而产生孤独感、挫败感，严重时会导致抑郁及其它疾病。
雪莲花为菊科植物绵头雪莲花、大苞雪莲花、水母雪莲花等的带花全株。6～7月间开花时采收，拔起全株，除去泥沙，晾干。
香茅为禾本科植物香茅的全草。全年可采，采得后洗净，晒干。栽植于耕地、园中或坡地。广东、广西、云南、四川、福建、中国台湾、浙江、上海等地均有。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种含雪莲花提取物的具有改善睡眠作用的食品添加剂。雪莲花提取物具有良好的改善睡眠作用。
上述目的是通过如下技术方案得以实现的：
一种具有改善睡眠作用的食品添加剂，通过如下方法制备：(a)将干燥的雪莲花和香茅混合，粉碎，用70～80％乙醇溶液热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液；(b)将步骤(a)所得乙醇提取浓缩液用水稀释，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(c)正丁醇萃取物用水溶解，过滤，用AB-8型大孔树脂富集活性成分，先用5～15％乙醇冲洗6～10个柱体积除去大极性成分，再用50～60％乙醇洗脱8～12个柱体积，收集50～60％乙醇洗脱液，减压浓缩；其中，香茅占雪莲花与香茅总重的5％～15％。
进一步地，所述的具有改善睡眠作用的食品添加剂通过如下方法制备：(a)将干燥的雪莲花和香茅混合，粉碎，用75％乙醇溶液热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液；(b)将步骤(a)所得乙醇提取浓缩液用水稀释，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(c)正丁醇萃取物用水溶解，过滤，用AB-8型大孔树脂富集活性成分，先用10％乙醇冲洗8个柱体积除去大极性成分，再用55％乙醇洗脱10个柱体积，收集55％乙醇洗脱液，减压浓缩；其中，香茅占雪莲花与香茅总重的10％。
进一步地，所述的具有改善睡眠作用的食品添加剂通过如下方法制备：(a)将干燥的雪莲花和香茅混合，粉碎，用70％乙醇溶液热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液；(b)将步骤(a)所得乙醇提取浓缩液用水稀释，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(c)正丁醇萃取物用水溶解，过滤，用AB-8型大孔树脂富集活性成分，先用5％乙醇冲洗10个柱体积除去大极性成分，再用50％乙醇洗脱12个柱体积，收集50％乙醇洗脱液，减压浓缩；其中，香茅占雪莲花与香茅总重的5％。
进一步地，所述的具有改善睡眠作用的食品添加剂通过如下方法制备：(a)将干燥的雪莲花和香茅混合，粉碎，用80％乙醇溶液热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液；(b)将步骤(a)所得乙醇提取浓缩液用水稀释，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(c)正丁醇萃取物用水溶解，过滤，用AB-8型大孔树脂富集活性成分，先用15％乙醇冲洗6个柱体积除去大极性成分，再用60％乙醇洗脱8个柱体积，收集60％乙醇洗脱液，减压浓缩；其中，香茅占雪莲花与香茅总重的15％。
上述食品添加剂在制备改善睡眠的食品中的应用。
本发明的优点：
本发明提供的食品添加剂具有良好的改善睡眠的作用，可以开发成食品添加剂添加到食品中，制备具有改善睡眠作用的食品。
具体实施方式
下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
实施例1：食品添加剂的制备
(a)将5kg干燥的雪莲花和香茅(占总重10％)混合粉碎，用75％乙醇溶液热回流提取(20L×3次)，合并提取液，浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液；(b)将步骤(a)所得乙醇提取浓缩液用水稀释(3L)，依次用石油醚(3L×3次)、乙酸乙酯(3L×3次)和水饱和的正丁醇萃取(3L×3次)，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(c)正丁醇萃取物用水溶解，过滤，用AB-8型大孔树脂富集活性成分，先用10％乙醇冲洗8个柱体积除去大极性成分，再用55％乙醇洗脱10个柱体积，收集55％乙醇洗脱液，减压浓缩即得。
实施例2：食品添加剂的制备
(a)将5kg干燥的雪莲花和香茅(占总重5％)混合粉碎，用70％乙醇溶液热回流提取(20L×3次)，合并提取液，浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液；(b)将步骤(a)所得乙醇提取浓缩液用水稀释(3L)，依次用石油醚(3L×3次)、乙酸乙酯(3L×3次)和水饱和的正丁醇萃取(3L×3次)，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(c)正丁醇萃取物用水溶解，过滤，用AB-8型大孔树脂富集活性成分，先用5％乙醇冲洗10个柱体积除去大极性成分，再用50％乙醇洗脱12个柱体积，收集50％乙醇洗脱液，减压浓缩即得。
实施例3：食品添加剂的制备
(a)将5kg干燥的雪莲花和香茅(占总重15％)混合粉碎，用80％乙醇溶液热回流提取，合并提取液(20L×3次)，浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液；(b)将步骤(a)所得乙醇提取浓缩液用水稀释(3L)，依次用石油醚(3L×3次)、乙酸乙酯(3L×3次)和水饱和的正丁醇(3L×3次)萃取，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(c)正丁醇萃取物用水溶解，过滤，用AB-8型大孔树脂富集活性成分，先用15％乙醇冲洗6个柱体积除去大极性成分，再用60％乙醇洗脱8个柱体积，收集60％乙醇洗脱液，减压浓缩即得。
实施例4：实施例1的对比，不添加香茅
(a)将5kg干燥的雪莲花粉碎，用75％乙醇溶液热回流提取(20L×3次)，合并提取液，浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液；(b)将步骤(a)所得乙醇提取浓缩液用水稀释(3L)，依次用石油醚(3L×3次)、乙酸乙酯(3L×3次)和水饱和的正丁醇萃取(3L×3次)，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(c)正丁醇萃取物用水溶解，过滤，用AB-8型大孔树脂富集活性成分，先用10％乙醇冲洗8个柱体积除去大极性成分，再用55％乙醇洗脱10个柱体积，收集55％乙醇洗脱液，减压浓缩即得。
实施例5：实施例1的对比，香茅占总重20％
(a)将5kg干燥的雪莲花和香茅(占总重20％)混合粉碎，用75％乙醇溶液热回流提取(20L×3次)，合并提取液，浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液；(b)将步骤(a)所得乙醇提取浓缩液用水稀释(3L)，依次用石油醚(3L×3次)、乙酸乙酯(3L×3次)和水饱和的正丁醇萃取(3L×3次)，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(c)正丁醇萃取物用水溶解，过滤，用AB-8型大孔树脂富集活性成分，先用10％乙醇冲洗8个柱体积除去大极性成分，再用55％乙醇洗脱10个柱体积，收集55％乙醇洗脱液，减压浓缩即得。
实施例6：对小鼠睡眠的影响
1、试验样品
分别按照实施例1～5方法制备得到食品添加剂1～5。
2、实验分组、给药方法、灌喂剂量及灌喂时间
小鼠适应性喂养48h之后，应用随机数字表进行完全随机化分组，分为6组，每组12只。空白对照组(蒸馏水)；食品添加剂1～5组(40mg/kg·d)。通过灌胃方式给药，每天灌喂一次，灌喂时间选择在每天晚上8点钟，连续灌胃给药15d。
3、试验方法
3.1阈下值催眠剂量巴比妥钠小鼠入睡率试验
由于巴比妥钠通过肝酶代谢，而对该酶有抑制作用的药物，也能延长巴比妥钠睡眠时间，所以为了排除这种影响，应进行阈下剂量实验。
食品添加剂1～5组给药后，对照组给予等体积蒸馏水，30min后，各组均按150mg/kgbw腹腔注射巴比妥钠，以翻正反射消失30s以上作为入睡判断标准，观察提取物1～5对注射阈下巴比妥钠的小鼠入睡率的影响。
3.2巴比妥钠睡眠潜伏期试验
在巴比妥钠催眠的基础上，观察提取物1～5是否能够缩短动物入睡潜伏期，若潜伏期缩短，则说明提取物1～5与巴比妥钠有协同作用。
食品添加剂1～5组给药后，对照组给予等体积蒸馏水，30min后，各组均按300mg/kgbw腹腔注射巴比妥钠，以翻正反射消失30s以上作为入睡判断标准，从注射巴比妥钠到动物入睡即为睡眠潜伏期，观察受试物对巴比妥钠睡眠潜伏期的影响。
3.3延长巴比妥钠诱导的小鼠睡眠时间试验
在巴比妥钠催眠的基础上，观察提取物1～5能否延长睡眠时间，若睡眠时间延长，则说明提取物1～5与巴比妥钠有协同作用。
食品添加剂1～5组小鼠分别给药后，对照组给予等体积蒸馏水，30min后，各组按300mg/kgbw腹腔注射巴比妥钠，以翻正反射消失30s以上作为入睡判断标准，翻正反射恢复即为动物觉醒，翻正反射消失至恢复这段时间为动物睡眠时间，观察提取物1～5对巴比妥钠睡眠时间的延长作用。
4、试验结果
4.1对阈下催眠剂量巴比妥钠小鼠入睡率的影响
结果见下表。
组别睡(只)未睡(只)有效率(％)空白对照组1118.33食品添加剂1组5741.67食品添加剂2组5741.67食品添加剂3组5741.67食品添加剂4组1118.33食品添加剂5组1118.33上表说明，提取物1～3对注射了阈下剂量巴比妥钠的小鼠入睡率的影响较好，显著好于提取物4和提取物5。
4.2对巴比妥钠睡眠潜伏期的影响
结果见下表。
组别潜伏期(min)睡眠时间(min)空白对照组30.00±2.98209.27±32.51食品添加剂1组24.17±4.18263.42±86.45食品添加剂2组24.54±4.22262.65±79.11食品添加剂3组24.73±3.98262.40±76.32食品添加剂4组28.96±3.14211.33±40.25食品添加剂5组29.08±3.26212.28±39.43上表说明，食品添加剂4和食品添加剂5对小鼠睡眠潜伏期的改善作用与空白组无差异，食品添加剂1～3组与空白组比较均有极显著差异，小鼠睡眠潜伏期缩短；食品添加剂4和食品添加剂5对小鼠睡眠时间的延长作用与空白组无差异，食品添加剂1～3组与空白组比较均有极显著差异，小鼠睡眠时间显著延长。
结果表明，本发明提供的食品添加剂可显著改善小鼠的睡眠质量，改善效果与是否添加香茅以及香茅的添加量有关。
在食品中添加该食品添加剂，可以开发成改善睡眠质量的食品。
上述实施例的作用在于说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明的保护范围。本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和保护范围。