本发明涉及一种益生菌发酵的即冲枇杷叶袋泡茶的制备方法，属于枇杷叶袋泡茶的制备方法技术领域。
背景技术：
枇杷叶系蔷薇科植物枇杷Eriobotryajaponiea(Tllunb.)Lindl的叶子，枇杷叶收载于历版中国药典中，具有良好的抗炎和止咳作用，临床常用于治疗急、慢性呼吸道疾病。枇杷叶不仅富含黄酮类、三萜酸类、多糖类及挥发油等功能化合物，而且含有无机盐、蛋白质、维生素及氨基酸等营养物质。枇杷叶常年四季生长，目前，一部分叶子用于分离提取有效功能成分，多数枇杷落叶作为垃圾焚烧，造成资源浪费。2014年12月，国家卫生计生委发布，关于批准枇杷叶可以作为新资源食品原料的公告，至此，枇杷叶不仅仅是药物原料，又可以是食品生产原料。
民间早有饮枇杷叶茶的习惯，但其方法是将枇杷叶洗净、晾干后，沸水熬煮30分钟或更长时间，这样，不仅繁琐，还会破坏枇杷叶中的维生素等高温易分解的营养成分。
技术实现要素：
本发明的目的是为了解决上述现有技术存在的问题，进而提供一种益生菌发酵的即冲枇杷叶袋泡茶的制备方法。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的：
一种益生菌发酵的即冲枇杷叶袋泡茶的制备方法，步骤如下：
步骤一、原料预处理：选取同一生长时期的鲜枇杷叶，放入7.5％的碳酸氢钠水溶液中，浸泡1h，清洗去绒毛，中性清水冲洗，去梗，用组织捣碎机搅碎，得80％叶片为5mm以下碎片停止捣碎。
步骤二、菌种活化：采用三种乳杆菌冻干菌粉，鼠李糖乳杆菌(L.rhamnosus)、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)和两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)；配制MRS培养基，MRS培养基分装在10mL的三支试管中，121℃高压灭菌20min。冷却至37℃，在无菌操作台上，三支试管，每支试管中接入一种菌粉，菌粉重量均为0.5g，摇匀，放置在37℃恒温培养箱中活化20～28h，使活菌数达到1x105cfu/mL。
步骤三、接种发酵：取步骤一搅碎的枇杷叶，经75％酒精消毒的托盘中，三种乳杆菌菌液按1:1:1体积比混合，每100g枇杷叶，共计接菌液10mL，搅拌均匀，摊成厚度为4～5cm的饼状，盖上保鲜膜，置于37℃、相对湿度95％的恒温恒湿培养箱中培养5～8h后，用75％酒精棉擦拭过的双手，将全部发酵枇杷叶碎片，反复翻伴、反复揉搓，绿叶逐渐变褐色。
步骤四、烘干粉碎过筛：待发酵枇杷叶碎片全部由绿色变为褐色，放置鼓风干燥箱内，60℃条件下干燥3～4h，干燥后经摇摆式中药粉碎机粉碎后，过40目的筛子，分装每袋1.0g的即冲茶袋中。
所述MRS培养基由蛋白陈0.30g；牛肉粉0.15g；酵母粉0.12g；葡萄糖0.60g；吐温80 0.03mL；磷酸氢二钾0.06g；乙酸钠0.15g；柠檬酸三铵0.06g；硫酸镁0.006g；硫酸锰0.0015g和蒸馏水30mL组成。
步骤二中，恒温培养箱中活化24h。
步骤三中，恒温恒湿培养箱中培养6h。
步骤三中，接种发酵时间共计48h，其中每间隔4h揉搓1次，且取样测定pH值，控制为4.5～5之间。
步骤四中，60℃条件下干燥3.5h。
本发明的有益效果：
发酵枇杷叶茶是将枇杷叶搅碎后，枇杷叶的液胞膜受损伤之后，液泡内的多酚类、氨基酸等物质释放，以枇杷叶内含成分为基础，在微生物分泌胞外酶和枇杷叶中所含酶的协同作用下，发生以茶多酚转化为主体的化学变化，生成氧化产物茶黄素、茶红素和茶褐素，茶黄素对茶汤的明亮度和鲜爽度有着影响，茶红素则决定着茶汤的浓度和色泽。
益生菌是一种可以抵御病菌侵害人体肠道的有益菌群，乳杆菌可以代谢乳糖生成大量乳酸，促进肠道蠕动，尽快排除宿便，防止肠道吸收有害物质。接入乳杆菌发酵枇杷叶可以迅速增加枇杷叶表面的乳酸菌数目，使乳酸发酵占主导地位，从而可以降低pH值，抑制有害微生物的生长，提高枇杷叶发酵茶的品质。
本发明在枇杷叶加工中，选取肠道益生菌群中的鼠李糖乳杆菌(L.rhamnosus)、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)和两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)三种乳杆菌的混合菌粉，接种于搅碎的枇杷叶中，采用恒温恒湿发酵培养，可以抑制有害微生物生长，最大限度地把枇杷叶的功效成分浸出，发酵过程可控，开发出贮存、携带、食用均方便的功能饮品----即冲袋泡枇杷叶茶，将是天然植物加工研究领域的一项重大突破。
具体实施方式
下面将对本发明做进一步的详细说明：本实施例在以本发明技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式，但本发明的保护范围不限于下述实施例。
本实施例所涉及的一种益生菌发酵的即冲枇杷叶袋泡茶的制备方法，步骤如下：
1、选取同一生长时期的鲜枇杷叶，称取100g，放入7.5％的碳酸氢钠水溶液中，浸泡1h，清洗去绒毛，中性清水冲洗，去梗，用组织捣碎机搅碎，得80％叶片为5mm以下碎片停止捣碎。
2、选取三种乳杆菌冻干菌粉，鼠李糖乳杆菌(L.rhamnosus)、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)和两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)。
3、配制MRS培养基：(蛋白陈0.30g；牛肉粉0.15g；酵母粉0.12g；葡萄糖0.60g；吐温80 0.03mL；磷酸氢二钾0.06g；乙酸钠0.15g；柠檬酸三铵0.06g；硫酸镁0.006g；硫酸锰0.0015g；蒸馏水30mL，)分装10mL的三支试管中，121℃高压灭菌20min。冷却至37℃，在无菌操作台上，分别向每支试管中接入0.5g菌粉，摇匀，放置37℃恒温培养箱中活化24h，使活菌数达到1x105cfu/mL。
4、取搅碎枇杷叶，经75％酒精消毒的托盘中，三种乳杆菌菌液按1:1:1体积比混合，每100g枇杷叶，每支试管中取3.3mL，共计接菌液10mL，搅拌均匀，摊成4～5cm厚层，盖上保鲜膜，置于37℃、相对湿度95％的恒温恒湿培养箱中培养6h后，用75％酒精棉擦拭过的双手，将全部发酵枇杷叶碎片，反复翻伴、反复揉搓，绿叶逐渐变褐色。共计发酵48h，其中每间隔4h，揉搓1次，且取样测定pH值，控制pH值在4.5～5之间。
5、待发酵枇杷叶碎片全部由绿色变为褐色，放置鼓风干燥箱内，60℃3.5h，干燥后经摇摆式中药粉碎机粉碎后，过40目的筛子，分装每袋1.0g的即冲茶袋中。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，这些具体实施方式都是基于本发明整体构思下的不同实现方式，而且本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应该以权利要求书的保护范围为准。