本发明属于中药技术领域，尤其涉及一种中药组合物、其用途及饲料。
背景技术：
饲料中添加抗生素能促进动物生长这一现象是美国科学家在1945年发现的，后来，抗生素在全世界就逐渐地广泛用在饲料中，对畜牧业发展起到一定的推动作用。然而，抗生素长期不合理使用的弊端日益显现，不仅造成畜产品和环境中抗生素残留超标问题，还增加了病原菌抗药性的产生频率，使禽畜机体的免疫力下降。另外，抗生素作用于病原菌的同时也会影响体内益生菌群的生长。
中草药作为饲料添加剂在我国已有几千年的历史，因其安全有效、无残留、无毒副作用、无污染并兼具免疫调节功能的特点正展示出其独特的优势和发展前景。现有技术公开了多种可替代抗生素用于饲料中的中药组合物，如公开号为cn103355483a的中国专利文献公开了一种替代饲用抗生素的复方中草药的提取物，包括20％的五倍子、15％的马齿苋、15％的大青叶、10％的野菊花、10％的鱼腥草、8％的柴胡、8％的黄柏、7％的香薷和7％的生地；公开号为cn102552525a的中国专利文献公开的替代饲用抗生素的中药草配方包括：25％的乌梅、20％的马齿苋、15％的大青叶、10％的野菊花、10％的鱼腥草、5％的柴胡、5％的黄柏、5％的香薷和5％的生地。上述中草药对大肠杆菌、肠炎沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等致病菌具有抑制作用，但是效果不及常用的金霉素、黄霉素等饲用抗生素。而且，上述中草药对动物嗜酸乳杆菌、双歧杆菌等益生菌也有轻微抑制作用。
技术实现要素：
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种中药组合物、其用途及饲料，本发明提供中药组合物对大肠杆菌、肠炎沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等致病菌具有较强的抑制作用，而且对动物嗜酸乳杆菌、双歧杆菌等益生菌有促进作用。
本发明提供了一种中药组合物，由以下原料制成：
25wt％～35wt％的乌梅；
25wt％～35wt％的大青叶；
15wt％～25wt％的香薷；
10wt％～15wt％的野菊花；
5wt％～10wt％的柴胡。
本发明以乌梅、大青叶、香薷、野菊花和柴胡复配，不仅对大肠杆菌、肠炎沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等致病菌具有较强的抑制作用，而且对动物嗜酸乳杆菌、双歧杆菌等益生菌有促进作用。
在一个实施例中，所述中药组合物由以下原料制成：
30wt％的乌梅；
30wt％的大青叶；
20wt％的香薷；
13wt％的野菊花；
7wt％的柴胡。
本发明提供的中药组合物实际上为上述中药组分的水提物，其按照以下方法提取：
取中药粉末10g，按照1：:1料液比加入100ml蒸馏水，水提浸泡1h。浸提后转至超声波震荡处理20min，然后加热至沸腾，保持沸腾状态10min，活驴药汤，滤渣进行二次提取，方法同前，两次滤液合并待用。将滤液转至60℃水浴锅中进行浓缩，浓缩至0.5g/ml。
本发明提供的中药组合物具有抑制致病菌、促进益生菌的作用，可以用于制备抗菌剂。
本发明提供的中药组合物可以代替抗生素用于鸡饲料的添加，不仅具有抑制致病菌、促进益生菌的作用，而且对肉鸡的生长发育具有促进作用，提高肉鸡免疫力，改善肉鸡肠道菌群，改善鸡肉品质。
本发明还提供了一种饲料，包括：上述技术方案所述的中药组合物。上述中药组合物代替抗生素使用，对其添加量本发明并无特殊限制。
实验结果表明，本发明提供的复方中草药提取物具有以下特点：
1、具有选择性抑菌功效：对致病菌的抑制作用优于抗生素，而对益生菌具有促进作用。
2、对肉鸡生长发育具有促进作用：可显著提高肉鸡的平均日增重，与金霉素组均无显著差异；降低肉鸡的平均日采食；降低肉鸡的料重比，提高饲料转化率。
3、可改善鸡肉品质：各试验组与空白对照组相比，胸肉硬度都有一定的上升趋势，各剂量组显著提高了鸡胸肉的弹性，并且与金霉素组差异显著(p＜0.05)；各组在胶黏性上无显著差异(p＞0.05)；高剂量组的鸡胸肉咀嚼性分别显著高于空白、金霉素对照组(p＜0.05)。
4、提高肉鸡的免疫功能。
5、具有改善肉鸡肠道菌群的作用。
具体实施方式
实施例1
分别将乌梅、大青叶、香薷、野菊花和柴胡按照以下方法进行提取：
取中药粉末10g，按照1：:1料液比加入100ml蒸馏水，水提浸泡1h。浸提后转至超声波震荡处理20min，然后加热至沸腾，保持沸腾状态10min，活驴药汤，滤渣进行二次提取，方法同前，两次滤液合并待用。将滤液转至60℃水浴锅中进行浓缩，浓缩至0.5g/ml。
将乌梅提取物、大青叶提取物、香薷提取物、野菊花提取物和柴胡提取物按照30wt％、30wt％、20wt％、13wt％和7wt％的比例混合，得到中药组合物。
比较例1
按照实施例1的方法制备中药组合物，区别在于，组分及含量如下：
20％的五倍子、15％的马齿苋、15％的大青叶、10％的野菊花、10％的鱼腥草、8％的柴胡、8％的黄柏、7％的香薷和7％的生地。
比较例2
按照实施例1的方法制备中药组合物，区别在于，组分及含量如下：
25％的乌梅、20％的马齿苋、15％的大青叶、10％的野菊花、10％的鱼腥草、5％的柴胡、5％的黄柏、5％的香薷和5％的生地。
应用例1
1.1培养基的制备
营养肉汤的制备：用蒸馏水1000ml溶解蛋白胨5.0g、牛肉膏1.0g、酵母浸粉2.0g、氯化钠5.0g，待完全溶解后调ph值为7.2，分装121℃高压灭菌15min，灭菌后4℃保存备用。
普通营养琼脂的制备：用蒸馏水1000ml溶解蛋白胨10g、牛肉膏3g，氯化钠5g，校正至7.2～7.4.加入琼脂20g，加热煮沸，使琼脂熔化，分装121℃高压灭菌15min，灭菌后4℃保存备用。
mrs固体培养基的制备：用蒸馏水1000ml溶解蛋白胨10g、牛肉膏10g、酵母浸出物5g、葡萄糖20g、玉米浆3g、柠檬酸二胺2g、乙酸钠5g、磷酸氢二钾2g、吐温801ml、mgso4·7h2o0.2g、mnso4·4h2o0.2g、l-半胱氨酸盐酸盐0.4g，待完全溶解后调ph值为7.2，加入琼脂18g加热熬开，分装5ml于厌氧管中，充氮气排出氧气，121℃高压灭菌15min，灭菌后4℃保存备用。
生理盐水的制备：用蒸馏水1000ml溶解氯化钠0.9g，分装9ml于厌氧管中，充氮气排出氧气，121℃高压灭菌15min，灭菌后4℃保存备用。
1.2培养板的制备
将培养皿密封包好后放入电热恒温干燥箱中，170℃高温灭菌2h。灭菌后在无菌条件下将无菌营养琼脂趁热倒入培养皿中，每个培养皿约加155.0ml琼脂，待凝固后倒扣在37℃生化培养箱中培养24h，去除培养基上水分。
1.3供试菌液的配置
受试菌种：四种致病菌，包括大肠杆菌(escherichiacoli)、肠炎沙门氏菌(salmonellaenteritidis)、鼠伤寒沙门氏菌(salmonellatyphimurium)、金黄色葡萄球菌(staphylococcusaureus)；两种益生菌，包括动物嗜酸乳杆菌(lactobacillusacidophilus)和双歧杆菌(bifudobacterium)。
致病菌菌液的制备：无菌条件下，挑取2～3环菌种接种到10ml营养肉汤中，37℃活化培养24h，活化后在4支无菌试管中将菌液吸湿，制成含菌量为105～106cfu/ml的菌悬液，置于4℃下冷藏保存；
益生菌菌液的制备：无菌条件下，取2ml药液(浓度为0.5g/ml)注入含有8mlmrs基础培养基的厌氧管中，充氮气加盖密封，115℃灭菌20min，待冷却后加入已活化完全的菌液0.05ml，混匀后置于37℃生化培养箱中培养17h。
1.4致病菌药物敏感性实验
实验采用牛津杯法：在无菌条件下，用棉棒蘸取目标菌液并均匀涂抹于营养琼脂表面，牛津杯轻放在培养基上，使其与培养基接触无空隙。向牛津杯中轻轻注入无菌药液200μl，置于37℃生化培养箱中培养18～24h；平板取出后，观察孔周围是否有透明圈，若有，测量其大小，若没有，表明药液对菌没有抑制作用。
1.5益生菌药物敏感性实验
采用亨盖特厌氧滚管技术法：无菌条件下，用无菌注射器吸取1ml混合均匀的药菌液样品，加入装有生理盐水的厌氧管中，用振荡器将其混合均匀，制成10-1稀释液。用无菌注射器吸取1ml稀释液至另一装有9ml生理盐水的厌氧管中，制成10-2稀释液，依次稀释至10-7。动物嗜酸乳杆菌选取10-4、10-5和10-6三个稀释度，双歧杆菌选取10-5、10-6和10-7三个稀释度进行滚管计数。将无氧无菌的mrs琼脂培养基在沸水浴中熔化后，置于46～50℃恒温水浴锅中待用，用无菌注射器分别吸取两种菌液不同稀释梯度各0.1ml，分别注入待用的试管中，然后将其平放于盛有冰水的磁盘中迅速滚动，带菌的熔化琼脂在试管内壁会立即形成凝固层。将厌氧管斜放于恒温培养箱中37℃培养48h，取出后记录菌落数量。
1.6结果与分析
1.6.1致病菌敏感性实验结果
结果参见表1。
表1对致病菌的抑菌圈直径
注：与实施例比较，*p＜0.05，**p＜0.01
由表1可知，本发明提供的复方中药草对致病菌大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌和金黄色沙门氏菌的抑菌圈直径显著大于金霉素和黄霉素，其对致病菌的抑制效果较好。
1.6.2益生菌敏感性实验结果
结果参见表2和表3。
表2对不同稀释浓度的动物嗜酸乳杆菌菌落数目的影响(单位：个)
注：与空白组比较，**p＜0.01
由表2可知，本发明提供的复方中药草对益生菌动物嗜酸乳杆菌不仅无抑制作用，反而具有促进作用。
表3对不同稀释浓度的双歧杆菌菌菌落数目的影响(单位：个)
注：与空白组比较，*p＜0.05,**p＜0.01
由表3可知，本发明提供的复方中药草对益生菌双歧杆菌不仅无抑制作用，反而具有促进作用。
应用例2
2.1
选取1日龄健康罗斯308肉鸡140只，购自保定市浔源禽业有限公司。经常规饲养至7日龄备用。参照《家禽营养需要》(nrc，1994)标准，配制玉米-豆粕型基础饲粮。将经预备饲养至7日龄的100只雏鸡，随机分为5组(空白对照，金霉素对照和低、中、高三个剂量组)，每组2个重复，每个重复10只鸡，雌雄各半。
试验鸡采用叠层式笼养，进雏前对鸡舍及设备进行消毒。试验舍初始温度控制在32～34℃。1～21d喂前期料，22～42d喂后期料，每组所备料槽和水槽位数相同，自由采食和饮水，24h光照，定时清扫卫生，定期对舍内消毒。按常规免疫程序进行疫苗接种。
试验期间及试验末期，按常规方法进行相关指标测定，结果见表4-10。
表4肉鸡日增重的影响(单位：g)
注：同列肩标不同小写字母表示差异显著(p＜0.05)，不同大写字母表示差异极显著(p＜0.01)，相同字母表示差异不显著(p＞0.05)
表5肉鸡平均日采食量的影响(单位：g)
注：同列肩标不同小写字母表示差异显著(p＜0.05)，不同大写字母表示差异极显著(p＜0.01)，相同字母表示差异不显著(p＞0.05)
表6肉鸡料重比的影响(单位：g/g)
注：同列肩标不同小写字母表示差异显著(p＜0.05)，不同大写字母表示差异极显著(p＜0.01)，相同字母表示差异不显著(p＞0.05)
由表4、表5和表6可知，本发明提供的复方中草药提取物可显著提高肉鸡的平均日增重，与金霉素组均无显著差异；降低肉鸡的平均日采食；降低肉鸡的料重比，提高饲料转化率。
表7肉鸡胸肉质构的影响
注：同列肩标不同小写字母表示差异显著(p＜0.05)，不同大写字母表示差异极显著(p＜0.01)，相同字母表示差异不显著(p＞0.05)
由表7可知，本发明提供的复方中草药可改善鸡肉品质。各试验组与空白对照组相比，胸肉硬度都有一定的上升趋势，各剂量组显著提高了鸡胸肉的弹性，并且与金霉素组差异显著(p＜0.05)；各组在胶黏性上无显著差异(p＞0.05)；高剂量组的鸡胸肉咀嚼性分别显著高于空白、金霉素对照组(p＜0.05)。
表8新城疫抗体效价的影响(单位：nlog2)
注：同列肩标不同小写字母表示差异显著(p＜0.05)，不同大写字母表示差异极显著(p＜0.01)，相同字母表示差异不显著(p＞0.05)
表9肉鸡脾淋巴增值能力的影响
注：同列肩标不同小写字母表示差异显著(p＜0.05)，不同大写字母表示差异极显著(p＜0.01)，相同字母表示差异不显著(p＞0.05)
由表8和表9可知，本发明提供的复方中草药可提高鸡只的免疫功能。
表10对肉鸡肠道菌群的影响(单位：lgcfu/g)
注：同列肩标不同小写字母表示差异显著(p＜0.05)，不同大写字母表示差异极显著(p＜0.01)，相同字母表示差异不显著(p＞0.05)
由表10可知，本发明提供的复方中草药提取物具有改善肉鸡肠道菌群的作用。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。