一种能够提高老年人机体免疫功能的脾脏提取物冻干食品的制作方法

文档序号:14270863阅读:288来源:国知局
本发明涉及食品加工
技术领域
,具体涉及一种能够提高老年人机体免疫功能的脾脏提取物冻干食品。
背景技术
:随着社会的快速发展,我国人口逐渐进入老龄化阶段,老年人占比逐步加大,2010年我国老年人口(≥65岁)占总人口比重8.9%;2011年我国老年人口比重达9.1%;2012年我国老年人口比重达9.4%。截至2014年底,我国80岁以上的老年人达2400多万。老年人由于生理性衰老,人体各器官及组织细胞逐渐发生形态、功能和代谢等一系列变化,这个时候,各种老年疾病也会乘虚而入,从而危害老人们的健康。老年病大多是由于长期积损退化,内分泌功能失调,机体免疫功能低下所致。老年病的防治已经逐渐得到了广泛的关注,但是目前的治疗方式都是针对具体的症状对症治疗,尚无有效的辅助调理手段。目前,在起到辅助调理作用的保健食品中,都含有动物组织的小肽。但是现有的保健食品的效果都不好。这是因为,为了得到小肽,现有技术中都是通过动物组织的水解来实现。而现有技术中的水解,都是通过蛋白酶来实现的。在现有技术的蛋白酶水解过程中,不同的蛋白酶对氨基酸序列的不同位置进行切断,进而得到序列较短的小肽。经过上述蛋白酶水解之后得到的小肽已经不是完整的氨基酸序列,不再具有原始的活性和功能。技术实现要素:本发明的目的是提供一种能够提高老年人机体免疫功能的脾脏提取物冻干食品,该冻干食品能够显著提高老年人的机体免疫功能,增强老年人体质。为了实现上述目的,本发明的技术方案具体如下:一种能够提高老年人机体免疫功能的脾脏提取物冻干食品,是由下列重量份的组分组成:β-葡聚糖20-100份,淀粉糊精20-100份,脾脏提取物1.5-2.5份;所述脾脏提取物的分子量在3000-50000道尔顿之间;所述脾脏提取物是由下述方法制备得到:(1)取小牛脾脏,加入10倍于脾脏体积的生理盐水洗净,清除结缔组织;(2)将洗净的小牛脾脏在水中水解,然后磨碎;(3)对磨碎的小牛脾脏在-25℃以下进行冷冻贮藏24小时以上;(4)对经过冷冻处理的小牛脾脏解冻;(5)对步骤(4)得到的小牛脾脏水溶液进行离心处理,得到上清液;(6)将步骤(5)得到的上清液用截流分子量为3000和50000的超滤膜分别进行超滤,收取分子量在3000-50000道尔顿的脾脏提取物。在上述技术方案中,所述脾脏提取物冻干食品是由下列重量份的组分组成:β-葡聚糖30份,淀粉糊精50份,脾脏提取物1.7份。在上述技术方案中,所述脾脏提取物冻干食品是由下列重量份的组分组成:β-葡聚糖80份,淀粉糊精70份,脾脏提取物2.0份。在上述技术方案中,所述脾脏提取物冻干食品是由下列重量份的组分组成:β-葡聚糖20份,淀粉糊精60份,脾脏提取物2.3份。在上述技术方案中,所述脾脏提取物冻干食品是由下列重量份的组分组成:β-葡聚糖40份,淀粉糊精100份,脾脏提取物1.5份。在上述技术方案中,所述脾脏提取物冻干食品是由下列重量份的组分组成:β-葡聚糖50份,淀粉糊精40份,脾脏提取物2.5份。本发明的有益效果是:本发明的脾脏提取物冻干食品,通过添加一定量的分子量在3000-50000道尔顿的小牛的脾脏提取物,得到一种具有保健功能的冻干食品,该脾脏提取物冻干食品能够显著提高老年人的机体免疫功能,增强老年人体质。本发明的脾脏提取物冻干食品,通过对磨碎的小牛脾脏进行冻融处理,通过冷冻和解冻,实现了小牛脾脏中的细胞壁的破裂,从而释放出了序列完整的小肽,进而得到的冻干食品能够显著提高老年人的机体免疫功能。现有技术中的水解,都是通过蛋白酶来实现的。在现有技术的蛋白酶水解过程中,不同的蛋白酶对氨基酸序列的不同位置进行切断,进而得到序列较短的小肽。经过上述蛋白酶水解之后得到的小肽已经不是完整的氨基酸序列,不再具有原始的活性和功能。本发明的脾脏提取物冻干食品,不通过蛋白酶水解,不破坏完整的氨基酸序列,而是通过冷冻和解冻的步骤得到完整的小肽,保留了小牛脾脏中的氨基酸原有的活性和功能。具体实施方式本发明的冻干食品中将采用到β-葡聚糖和淀粉糊精。其中,β-葡聚糖,又称右旋糖酐,是一种活性结构是由葡萄糖单位组成的多聚糖。β-葡聚糖能够活化巨噬细胞、嗜中性白血球等,从而提高白细胞素、细胞分裂素和特殊抗体的含量,全面刺激机体的免疫系统。淀粉糊精,其可用于制备各种液体或固体的胶粘剂,常常用来作为食品香料的载体。本发明提供的一种能够提高老年人机体免疫功能的脾脏提取物冻干食品,其是由下列重量份的组分组成:β-葡聚糖20-100份,淀粉糊精20-100份,脾脏提取物1.5-2.5份;所述脾脏提取物的分子量在3000-50000道尔顿之间。所述脾脏提取物是由下述方法制备得到:(1)取小牛脾脏,加入10倍于脾脏体积的生理盐水洗净,清除结缔组织;(2)将洗净的小牛脾脏在水中水解,然后磨碎;(3)对磨碎的小牛脾脏在-25℃以下进行冷冻贮藏24小时以上;(4)对经过冷冻处理的小牛脾脏解冻;(5)对步骤(4)得到的小牛脾脏水溶液进行离心处理,得到上清液;(6)将步骤(5)得到的上清液用截流分子量为3000和50000的超滤膜分别进行超滤,收取分子量在3000-50000道尔顿的脾脏提取物。冻干食品下述实施例中所用的脾脏提取物均是按照上述方法制备得到的。实施例1按照β-葡聚糖30份,淀粉糊精50份,脾脏提取物1.7份的配比称量β-葡聚糖、淀粉糊精和脾脏提取物,并混合均匀后冷冻即可。实施例2按照β-葡聚糖80份,淀粉糊精70份,脾脏提取物2.0份的配比称量β-葡聚糖、淀粉糊精和脾脏提取物,并混合均匀后冷冻即可。实施例3按照β-葡聚糖20份,淀粉糊精60份,脾脏提取物2.3份的配比称量β-葡聚糖、淀粉糊精和脾脏提取物,并混合均匀后冷冻即可。实施例4按照β-葡聚糖40份,淀粉糊精100份,脾脏提取物1.5份的配比称量β-葡聚糖、淀粉糊精和脾脏提取物,并混合均匀后冷冻即可。实施例5按照β-葡聚糖50份,淀粉糊精40份,脾脏提取物2.5份的配比称量β-葡聚糖、淀粉糊精和脾脏提取物,并混合均匀后冷冻即可。免疫试验如下:balb/c小鼠70只,腹腔注射环磷酰胺溶液,第一天按120mg/kg剂量注射,第三天按100mg/kg剂量注射,制备免疫低下小鼠模型。将小鼠随机分成7组,每组10只,依次为空白组、对照组、试验1组、试验2组、试验3组、试验4组、试验5组。每组小鼠灌胃期均为28天,每只小鼠每天的灌胃量为300μl/日。空白组的小鼠灌胃0.85%的无菌生理盐水,对照组的小鼠按照5g/kg的剂量灌胃奶粉,试验1组-试验5组的小鼠分别按照5g/kg的剂量灌胃实施例1-5制备的冻干食品。1、体液免疫功能的测定-血清溶血素实验试剂:20%压积绵羊红细胞(srbc)生理盐水细胞混悬液,10%srb混悬液,生理盐水,以生理盐水1:10稀释的豚鼠血清,都氏试剂(碳酸氢钠1.0g、氰化钾0.05g、高铁氰化钾0.2g、蒸馏水1000ml);在灌胃第28天时,每鼠腹腔注射0.2ml20%的srbc,连续给药5天,于最后一次给药后1h,从小鼠眼眶静脉中取血,离心分离血清,取血清用生理盐水稀释500倍,取稀释血清1ml置试管中,加10%srbc混悬液0.5ml,置冰浴,再加入以生理盐水1:10稀释的豚鼠血清1ml混合,另设不加血清的空白对照。移置37℃恒温水浴保温10min后,立即移冰浴终止反应。用2000r/min离心10min,取上清1ml,加都氏试剂3ml,混匀放置10分钟,取上清液用96孔板于扫描酶标分光光度仪540nm处比色,测吸光度值(od)。另取10%srbc混悬液0.25ml加都氏试剂3.75ml,同上测定od值,作为半数溶血值。血清溶血素含量以半数溶血值(hc50)表示。按下式计算:hc50=样品的od值/srbc半数溶血时的od值×稀释倍数。实验结果见表1。表1组别剂量血清溶血素空白组0.85%生理盐水160.59±7.86对照组5g/kg168.21±4.21a试验1组5g/kg170.25±2.36ab试验2组5g/kg170.01±2.16ab试验3组5g/kg172.25±5.14ab试验4组5g/kg174.01±2.31ab试验5组5g/kg175.20±2.06aba表示与空白组相比,p<0.05,b表示与对照组相比,p<0.05;表1结果表明:在小鼠血清溶血素产生方面,与生理盐水空白组相比,对照组与试验组均具有显著差异,但试验组相比于对照组能更显著的增加血清溶血素的产生,试验组中,试验3、4、5的效果较佳。2、nk细胞活性的测定-乳酸脱氢酶(ldh)测定法在96孔细胞培养板上,实验孔中加入效应细胞(2×107个/ml)和靶细胞(4×105个/ml)各100μl(效靶比为50:1),靶细胞自然释放孔中加靶细胞和培养液各100μl,靶细胞最大释放孔中加靶细胞和2.5%triton各100μl,上述各项均设三个平行孔。于37℃,5%co2培养箱中培养4h;将96孔培养板以1500r/min离心10min,每孔吸取上清100μl,同时加入ldh基质液100μl,反应10min后每孔加入30μl的hcl(1m),在酶标仪570nm处测定od值并记录。nk细胞活性按照下式计算:nk细胞活性(%)=[(实验组od值-自然释放对照组od值)/(最大释放对照组od值-自然释放对照组od值)]×100%;实验结果见表2。表2a表示与空白组相比,p<0.05,b表示与对照组相比,p<0.05;表2结果表明:试验组对小鼠nk细胞杀伤活性具有显著地增强作用(p<0.05),试验3、4、5的增强作用较佳,而对照组虽能提高nk细胞杀伤活性,但效果缺不显著。3、cona诱导小鼠脾淋巴细胞转化实验对各组小鼠无菌取脾,制备细胞悬液,用rpmi1640完全培养液调整脾细胞浓度为3×109个/l,按照程序中mtr法进行淋巴细胞增殖反应,最后用紫外可见分光光度计测定570nm波长处的吸光od值,进行方差分析。实验结果见表3。表3a表示与空白组相比,p<0.05,b表示与对照组相比,p<0.05;表3实验结果表明:与空白组相比,对照组不能提高脾淋巴细胞的转化率,而试验组小鼠的脾淋巴细胞转化率显著高于空白组小鼠的脾淋巴细胞的转化率,试验3、4、5的转化率较佳。显然,上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例,而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说,在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。当前第1页12
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