益生菌益生元组合物在制备提高肠道益生菌定植的食品中的应用的制作方法

本发明属于医药食品，具体涉及益生菌益生元组合物在制备提高肠道益生菌定植的药物或食品中的应用。

背景技术：

1、益生菌是一种活的微生物且在摄取适当的量下有助于宿主(人体或其他生物)健康。目前，中国对于婴幼儿可食用菌株采取审批制的形式，共有14株菌株被纳入名单中。虽然这些菌株在体外实验中均已被证实对肠道细胞具有一定的粘附能力，但是在临床中大部分菌株定植时间仍然较短，导致临床结果不佳(candela et al.2005；capurso 2019；gopalet al.2001；greene and klaenhammer 1994；jungersen et al.2014；olivares etal.2006；toscano et al.2014；xiao et al.2021)。益生菌定植并不是只是简单得粘附上皮细胞，在粘附之后益生菌会受胃肠道恶劣的环境挑战，如酸性环境、抗生素、致病菌、耐盐、液体的冲刷等。虽然大部分商业化益生菌菌株均进行了大部分的环境耐受力评估，但是在应对抗生素环境压力下，处于安全考虑，我们并不能使用耐药性菌株，因此开发一种安全的方式来提高益生菌环境耐受力及其定植是必要的。

2、生物被膜(biofilm)作为一种新的策略被大量的学者关注，它指的是细菌粘附在某一界面上并且自身分泌胞外基质形成一个封闭空间，内部的细菌相互附着，成为一种细菌群体共同生存的形式，该基质主要有胞外多糖(exopolysaccharides，eps)、蛋白质、胞外dna(extracellular dna,edna)等。大量的研究表明生物被膜具有物理稳定性、表面可感应性、内部环境分布梯度性与多样性等特点，能够使生物被膜内细菌(如益生菌)低于不利环境条件，如抗生素(salas-jara et al.2016)。同时，研究表明与生物被膜形成相关基因(如luxs、rfbp等)的敲除菌株，其在体内定植量显著降低，这表明益生菌的生物被膜形成能力是其定植的关键因素之一(xiao et al.2021)。然而，目前大部分商业菌株并没有进行生物被膜能力的测定，此外少量菌株做了相关的评估，但实验模拟的环境采用普通的碳源(葡萄糖)不符合肠道环境条件，以益生元来模拟胃肠道的碳源更为合理。

3、目前，已被批准使用的益生菌种类繁多，而不同菌株的益生元代谢能力不尽相同，最大的差异在于母乳低聚糖(human milk oligosaccharides，hmo)的代谢能力，仅有少数的益生菌菌株能够代谢，大部分无法利用，因此大部分商业上的益生菌菌株与hmo组合使用时无法发挥hmo的最大作用。为促进hmo健康功效以及大部分无法代谢hmo益生菌的定植量，本发明将通过探索不同益生元下益生菌的相互作用，开发一种益生菌益生元组合hmobiotics应用于胃肠道中益生菌的定植。

4、本发明的难点在于菌株之间存在多种相互作用关系，如协同作用、拮抗作用、共生、竞争等，因此多菌株益生菌产品往往存在菌株之间相互拮抗的潜在风险。过去多篇研究表明，某些菌株的组合在某些功能上并没有发挥协同作用。lynne v.mcfarland通过对临床研究进行meta分析发现，与单一使用相比，鼠李糖乳杆菌gg与混合其他菌株(动物双歧杆菌乳亚种bb-12或hn019，或长双歧杆菌长亚种bb536)联合使用对预防坏死性结肠炎的预防效果更差。相反，与单一菌株相比，鼠李糖乳杆菌gg动物与动物双歧杆菌乳亚种bb-12组合对幽门螺旋杆菌根除率则显著提高。这表明同一益生菌组合在不同的功能方向上，并不能总是维持协同增效的作用，甚至有可能起到拮抗作用。此外，菌株之间的相互作用关系也会随着环境条件的变化而发生变化。目前，对于益生菌相互作用关系研究仍非常有限，少数研究去使用同一菌株来探究两者之间功效上的差异。因此，本发明筛选了不同的益生元与益生菌的组合，开发一种益生菌益生元组合hmobiotics协同增强在胃肠道中益生菌定植的应用。

技术实现思路

1、为了弥补现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种益生菌益生元组合物hmobiotics在提高肠道益生菌定植的应用。为了实现本发明的目的，拟采用如下技术方案：

2、本发明提供了益生菌益生元组合物在在提高肠道益生菌定植的应用，其特征在于所述益生菌益生元组合物中的益生菌为两歧双歧杆菌r0071，所述益生菌益生元组合物中的益生元为2’-岩藻糖基乳糖，所述肠道益生菌为乳杆菌和/或双歧杆菌。

3、根据权利要求1所述的应用，所述乳杆菌或者双歧杆菌选自动物双歧杆菌乳亚种或动物双歧杆菌bb-12(bifidobacterium animalis subsp.lactis或bifidobacteriumanimalis bb-12)、长双歧杆菌婴儿亚种或婴儿双歧杆菌r0033(bifidobacterium longumsubsp.infantis或bifidobacterium infantis r0033)、动物双歧杆菌乳亚种或乳双歧杆菌hn019和bi-07(bifidobacterium animalis subsp.lactis或lactobacillus lactishn019,bifidobacterium animalis subsp.lactis或lactobacillus lactis bi-07)、短双歧杆菌m16v(bifidobacterium breve m16v)，瑞士乳杆菌r0052(lactobacillushelveticus r0052)、鼠李糖乳杆菌lgg或gg(lactobacillus rhamnosus lgg或gg,lactobacillus rhamnosus hn001)、长双歧杆菌长亚种bb536(bifidobacterium longumsubsp.longum bb536)、嗜酸性乳杆菌ncfm(lactobacillus acidophilus ncfm)中的至少一种、两种的组合。

4、在本发明的一个优选实施方式中，所述益生菌的浓度为1×106-1×1014cfu/100g，较佳地为1×108-1×1014cfu/100g。

5、在本发明的一个优选实施方式中，所述食品为配方奶粉或营养组合物。

6、在本发明的一个优选实施方式中，所述的配方奶粉或营养组合物是婴幼儿配方奶粉或婴幼儿用营养组合物产品。

7、在本发明的一个优选实施方式中，所述的婴幼儿奶粉或营养组合物中2’-岩藻糖基乳糖的含量10mg/100g～10×103mg/100g，较佳地为10×101～10×103mg/100g；所述两歧双歧杆菌r0071的含量为1×106-1×1014cfu/100g，较佳地为1×108-1×1014cfu/100g。

8、本发明的优点为：本发明的益生菌益生元组合物通过两歧双歧杆菌r0071与2’-岩藻糖基乳糖组合能够促进大多数母乳低聚糖不代谢菌株的定植，且对母乳低聚糖代谢菌株r0033的定植没有抑制作用，进一步说明两歧双歧杆菌r0071与2’-岩藻糖基乳糖组合可通过促进母乳低聚糖不代谢菌株生长进而促进其定植。