专利名称：酶法测定乙酰乙酸试剂盒的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种酶法测定乙酰乙酸试剂盒。
糖尿病酮症酸中毒是临床常见病、多发病，原因是血酮体增高引起，乙酰乙酸是酮体重要组成部分，占酮体总量20％，酮症诊断治疗不及时将有生命危险，乙酰乙酸测定有显色法、气相色谱法、放射化学法、毛细管等速电泳法等。显色法是用硝普钠与乙酰乙酸反应产生紫红色半定量测定，放射化学法因有射线，化验品难于接受，毛细管等速电泳操作时间长，复杂不适于批量检测。气相色谱特导性差。目前，在《临床化学诊断方法大全》中介绍了酶法测定乙酰乙酸方法，但未涉及乙酰乙酸试剂盒，文献介绍的方法只能现配现用，不能长期保存，本试剂盒可冷藏保存一年以上，长期使用。
本发明的目的在于提供一种长期保存的酶法测定乙酰乙酸试剂盒。
本发明技术方案一种酶法测定乙酰乙酸试剂盒，其特征在于含有磷酸氢二钠-磷酸二氢钠、乙二胺四乙酸二钠、β-羟丁酸脱氢酶、氯化镁、叠氮钠、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸、硫酸铵。
本发明的有益效果本发明配方中乙二胺四乙酸二钠可洛合重金属离子，防止对酶的破坏，氯化镁做酶的激活剂、叠氮钠可防腐，本试剂盒使用的保护剂能有效稳定酶与辅酶活性。试剂抗干扰能力强，中等程度溶血，乳靡血，血糖20mmol/l以下，胆红素100umol/l以下对测定不产生干扰，冻干试剂冷藏一年，试剂盒中酶活力小于5％，还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(还原型辅酶I)破坏小于10％，本试剂盒线性范围达5.0mmol/l，正常参考范围0.038-0.286mmol/l，回收率96.5-103.8％，变异系数CV＝5.7％，X＝0.26mmol/l，SD＝0.015，n＝20。溶解后室温稳定72小时，冷藏稳定二周。
下面详述本发明的实施例。
取超纯蒸馏水，用前将水加热至沸，密封备用。将磷酸氢二钠-磷酸二氢钠、乙二胺四乙酸二钠、氯化镁、叠氮钠、硫酸铵加前面所述的蒸馏水调PH值6.4，然后加β-羟丁酸脱氢酶，还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸，此时磷酸氢二钠-磷酸二氢钠为82毫摩尔/升，乙二胺四乙酸二钠22毫摩尔/升，氯化镁5.5毫摩尔/升，叠氮钠0.020毫摩尔/升，硫酸胺55毫摩尔/升，β-羟丁酸脱氢酶30国际单位/升，还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸2.0毫摩尔/升，将试剂溶液分装成5-10毫升/瓶，经低温冷冻干燥后，水份小于3％，使用时加5-10毫升蒸馏水，溶解后即可使用。
权利要求
1.一种酶法测定乙酰乙酸试剂盒，其特征在于含有磷酸氢二钠-磷酸二氢钠、乙二胺四乙酸二钠、β-羟丁酸脱氢酶、氯化镁、叠氮钠、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸、硫酸铵。
2.根据权利要求1所述的酶法测定乙酰乙酸试剂盒，其特征在于各组分含量的摩尔比为磷酸氢二钠-磷酸二氢钠80-100、乙二胺四乙酸二钠20-30、氯化镁5.0-7.0、叠氮钠0.018-0.030、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸1.8-4.0、硫酸铵50-100。
全文摘要
本发明涉及一种酶法测定乙酰乙酸试剂盒,解决了现有测定试剂不易保存的问题。本发明技术方案:一种酶法测定乙酰乙酸试剂盒,其特征在于:含有磷酸氢二钠－磷酸二氢钠、乙二胺四乙酸二钠、β－羟丁酸脱氢酶、氯化镁、叠氮钠、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸、硫酸铵,本发明保存时间长,使用方便。
文档编号C12Q1/32GK1277356SQ9911296
公开日2000年12月20日 申请日期1999年5月28日 优先权日1999年5月28日
发明者于永光, 周艳春 申请人:哈尔滨医科大学第一临床医学院