一种小球藻活性多肽粉的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及小球藻深加工及生物技术领域，具体涉及一种小球藻活性多肽粉的制 备方法。
【背景技术】
[0002] 小球藻是一类普生性单细胞绿藻，属于绿藻门、小球藻属，生长速度快，易于培养， 应用价值高。小球藻含有丰富的生物活性物质和药用成分，作为一种新型保健食品和药物 蕴藏着巨大潜力。小球藻具有抗肿瘤活性、增加免疫力、解毒保肝、降压作用等，其粗蛋白含 量高（50%左右），品质好，已经成为小球藻应用领域十分活跃、备受重视的一个方面。生 物活性肽是指那些具有特殊生理活性或功能特性的肽类。绝大多数蛋白质都是具有一定功 能作用的生物活性肽的前体物质，其肽链结构中存在着具有一定生物活性的氨基酸序列片 段（功能区），在正常状态下，其功能区肽段隐藏在肽链中，但一旦单独从蛋白质肽链中释 放出来，在适当的环境下，就能显示出独特的生物活性，这个功能肽段就是生物活性肽。现 代生物代谢研究发现：人类摄取的蛋白质经过消化道的多种酶水解后，更多的是以低肽的 形式直接吸收，具有更高的营养价值和生物效价。酶水解法获得生物活性肽已经成为工业 化生产生物活性肽的主要手段。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的是提供一种小球藻活性多肽粉的制备方法，解决了小球藻粗蛋白利 用率低、口味差、有腥味的问题。
[0004] 为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案予以实现：
[0005] -种小球藻活性多肽粉的制备方法，包括以下步骤：
[0006] ⑴备料：含活体小球藻的藻液采用高速离心法分离出小球藻，用去离子水清洗，沥 干处理藻泥至含水量达到45-55%，备用；
[0007] ⑵微生物发酵：将地衣芽胞杆菌接种于扩大培养基上，进行18_24h的扩大培养， 再将扩大的地衣芽胞杆菌转接至步骤⑴所得的藻泥中，调节pH值为6. 5-8. 5,在温度为 25-40°C，摇床转速为120-160rpm条件下培养6-10天；
[0008] ⑶酶解：发酵结束后，加入去离子水，使发酵液中料液比达到1:10,调整pH值 为6. 8-8. 5,加入中性蛋白酶10-30U/g，溶菌酶10-20U/g，在温度为30-45 °C条件下，酶解 7-8h；
[0009] ⑷喷雾干燥：将酶解液物料喷雾干燥，得多肽粉，喷雾干燥工艺参数为：进风温度 185-205°C，出风温度 50-65°C。
[0010] 上述步骤⑴中，所述藻液中小球藻细胞浓度为250-500mg/L。
[0011] 上述步骤⑵中，所述的扩大培养基的配比为玉米浆10_15g、大豆蛋白胨7-10g、葡 萄糖 15-25g、水lL，pH7. 0,在 0.IMPa条件下灭菌 15-20min。
[0012] 上述步骤⑵中，扩大的地衣芽胞杆菌的接种量为藻泥的8-lOwt%。
[0013] 作为优选，上述步骤⑶中，调整pH值为7. 0,加入中性蛋白酶20U/g，溶菌酶15U/g， 在温度为37. 5°C条件下，酶解7. 5h;
[0014] 作为优选，上述步骤⑷中，喷雾干燥工艺参数为：进风温度195°C，出风温度55°C。
[0015] 本发明的有益效果：本发明利用地衣芽胞杆菌发酵联合蛋白酶法水解制备的营养 小球藻粉富含多肽，工艺合理、营养丰富、质细、溶解性好、保存期长，该小球藻多肽粉可以 常规方法制备成胶囊、片剂和颗粒剂，可作为保健食品，可促使机体产生抗菌活性物质、杀 灭致病菌，增强身体免疫力，在降血压、降血脂、抗肿瘤、抗辐射、防治胃溃疡和溃疡性大肠 炎等方面有显著效果，具有显著的社会意义和经济意义。
【具体实施方式】
[0016] 结合实施例对本发明进一步阐述，不构成对本发明的范围限制。
[0017] 实施例1
[0018] 含细胞浓度为500mg/L活体小球藻的藻液采用高速离心法分离出小球藻，用去离 子水清洗，沥干处理藻泥至含水量达到55%，备用。将玉米浆15g、大豆蛋白胨10g、葡萄糖 25g、水1L混合，调节pH7. 0,在0.IMPa条件下灭菌20min得到扩大培养基，将地衣芽胞杆 菌接种于扩大培养基上，进行24h的扩大培养，再将扩大的地衣芽胞杆菌转接至所得的藻 泥中，接种量为l〇wt%，调节pH值为8. 5,在温度为40°C，摇床转速为160rpm条件下培养 10天。发酵结束后，加入去离子水，使发酵液中料液比达到1:10,调整pH值为8. 5,加入中 性蛋白酶30U/g，溶菌酶20U/g，在温度为45°C条件下，酶解8h。将酶解液物料喷雾干燥，得 多肽粉，喷雾干燥工艺参数为：进风温度205°C，出风温度65°C。
[0019] 实施例2
[0020] 含细胞浓度为250mg/L活体小球藻的藻液采用高速离心法分离出小球藻，用去离 子水清洗，沥干处理藻泥至含水量达到45 %，备用。将玉米浆10g、大豆蛋白胨7g、葡萄糖 15g、水1L混合，调节pH7.0,在0.IMPa条件下灭菌15min得到扩大培养基，将地衣芽胞杆 菌接种于扩大培养基上，进行18h的扩大培养，再将扩大的地衣芽胞杆菌转接至所得的藻 泥中，接种量为8wt%，调节pH值为6. 5,在温度为25°C，摇床转速为120rpm条件下培养6 天。发酵结束后，加入去离子水，使发酵液中料液比达到1:10,调整pH值为6. 8,加入中性 蛋白酶10U/g，溶菌酶10U/g，在温度为30°C条件下，酶解7h。将酶解液物料喷雾干燥，得多 肽粉，喷雾干燥工艺参数为：进风温度185°C，出风温度50°C。
[0021] 实施例3
[0022] 含细胞浓度为400mg/L活体小球藻的藻液采用高速离心法分离出小球藻，用去离 子水清洗，沥干处理藻泥至含水量达到50%，备用。将玉米浆12. 5g、大豆蛋白胨8. 5g、葡萄 糖20g、水1L混合，调节pH7. 0,在0.IMPa条件下灭菌17min得到扩大培养基，将地衣芽胞 杆菌接种于扩大培养基上，进行20h的扩大培养，再将扩大的地衣芽胞杆菌转接至所得的 藻泥中，接种量为9wt%，调节pH值为7. 5,在温度为37. 5°C，摇床转速为150rpm条件下培 养8天。发酵结束后，加入去离子水，使发酵液中料液比达到1:10,调整pH值为7. 0,加入 中性蛋白酶20U/g，溶菌酶15U/g，在温度为37. 5°C条件下，酶解7. 5h。将酶解液物料喷雾 干燥，得多肽粉，喷雾干燥工艺参数为：进风温度195°C，出风温度55°C。
[0023] 实验例
[0024] 检测实施例1-3制成的多肽粉中多肽的含量。
[0025] 转化率的检测方法：游离氨基酸采用甲醛滴定法，蛋白质采用凯氏定氮法，多肽采 用双缩脲法检测。
[0026] 多肽转化率计算公式：转化率=(T2-T1V(P1_P2)。式中：T2为酶解后多肽含量； T1为酶解前多肽含量；P1为酶解前总蛋白含量；P2为酶解前酸溶性蛋白含量。
[0027] 实验结果，如下表记录：
[0028]
[0029] 结论：由上述实验结果可知，本发明的小球藻活性多肽粉中所含多肽含量高，转化 率均较高，尤其是实施例3制成的小球藻活性多肽粉，多肽的转化率高达86. 9%。
【主权项】
1. 一种小球藻活性多肽粉的制备方法，其特征在于：包括以下步骤： ⑴备料：含活体小球藻的藻液采用高速离心法分离出小球藻，用去离子水清洗，沥干处 理藻泥至含水量达到45-55%，备用； ⑵微生物发酵：将地衣芽胞杆菌接种于扩大培养基上，进行18-24h的扩大培养，再 将扩大的地衣芽胞杆菌转接至步骤⑴所得的藻泥中，调节pH值为6. 5-8. 5,在温度为 25-40°C，摇床转速为120-160rpm条件下培养6-10天； ⑶酶解：发酵结束后，加入去离子水，使发酵液中料液比达到1:10,调整pH值为 6. 8-8. 5,加入中性蛋白酶10-30U/g，溶菌酶10-20U/g，在温度为30-45°C条件下，酶解 7-8h； ⑷喷雾干燥：将酶解液物料喷雾干燥，得多肽粉，喷雾干燥工艺参数为：进风温度 185-205°C，出风温度 50-65°C。2. 根据权利要求1所述的一种小球藻活性多肽粉的制备方法，其特征在于：上述步骤 ⑴中，所述藻液中小球藻细胞浓度为250-500mg/L。3. 根据权利要求1所述的一种小球藻活性多肽粉的制备方法，其特征在于：上述步骤 ⑵中，所述的扩大培养基的配比为玉米衆10-15g、大豆蛋白胨7-10g、葡萄糖15-25g、水1L， ρΗ7· 0,在 0·IMPa条件下灭菌 15_20min。4. 根据权利要求1所述的一种小球藻活性多肽粉的制备方法，其特征在于：上述步骤 ⑵中，扩大的地衣芽胞杆菌的接种量为藻泥的8-lOwt%。5. 根据权利要求1所述的一种小球藻活性多肽粉的制备方法，其特征在于：上述步骤 ⑶中，调整pH值为7. 0,加入中性蛋白酶20U/g，溶菌酶15U/g，在温度为37. 5°C条件下，酶 解 7. 5h。6. 根据权利要求1所述的一种小球藻活性多肽粉的制备方法，其特征在于：上述步骤 ⑷中，喷雾干燥工艺参数为：进风温度195°C，出风温度55°C。
【专利摘要】本发明公开一种小球藻活性多肽粉的制备方法，涉及小球藻深加工及生物技术领域。本发明利用地衣芽胞杆菌发酵联合蛋白酶法水解制备的营养小球藻粉富含多肽，工艺合理、营养丰富、质细、溶解性好、保存期长，该小球藻多肽粉可以常规方法制备成胶囊、片剂和颗粒剂，可作为保健食品，可促使机体产生抗菌活性物质、杀灭致病菌，增强身体免疫力，在降血压、降血脂、抗肿瘤、抗辐射、防治胃溃疡和溃疡性大肠炎等方面有显著效果，具有显著的社会意义和经济意义。
【IPC分类】A23J3/34
【公开号】CN105248837
【申请号】CN201510782998
【发明人】岳军堂
【申请人】岳军堂
【公开日】2016年1月20日
【申请日】2015年11月16日