9 %、或100%的序列一致性的多 肽。在另一个具体的实施例中，该氧化酶是直立枝顶孢霉碳水化合物氧化酶，并且更具体地 为披露为SEQ ID N0:4的成熟多肽的氧化酶，具体地为具有碳水化合物氧化酶活性的SEQ ID N0:4的氨基酸20-499或与SEQ ID N0:4的氨基酸20-499具有至少85%、至少90%、至少 91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96 %、至少97 %、至少98 %、至少99%、 或100 %的序列一致性的多肽。
[0067] 由于颜色稳定性是一个问题，尤其针对于苹果汁浓缩物AJC，伴随着在若干月的长 期存储过程中发生的浓缩物变黑，本发明的一方面是避免在存储过程中颜色形成。因此，在 另一方面，本发明涉及一种用于在冷藏果汁浓缩物的过程中防止颜色形成的方法，其中将 该果汁浓缩物用氧化还原酶进行酶法处理。
[0068] 针对果汁，在一个实施例中，颜色去除可以导致例如多酚形式的有色化合物的沉 淀，这些化合物可以随后通过分离步骤去除。因此，在一个实施例中，在酶处理后包括分离 步骤。在一个具体实施例中，该分离步骤是过滤。
[0069] 在一个具体实施例中，该果汁浓缩物是苹果汁浓缩物。
[0070] 本发明进一步由下述编号的段落描述：
[0071] [1]-种用于对获得自糖料作物的糖溶液进行脱色的方法，其中将该溶液用氧化 还原酶进行酶法处理，导致该溶液的颜色和/或浊度的减少。
[0072] [2]根据段落1所述的方法，其中该糖溶液获得自任何含蔗糖的糖料作物，如，甘 蔗、甜菜、甜高粱。
[0073] [3]根据段落1或2所述的方法，其中该糖溶液选自下组，该组包括以下各项:原汁、 初级汁、次级汁、混合汁、亚硫酸化汁、石灰处理汁、倾析汁、清汁、浮汁、澄清汁、原糖溶液、 和/或VHP、VVHP、晶体、白糖溶液。
[0074] [4]根据段落1-3中任一项所述的方法，其中该氧化还原酶选自氧化酶或脱氢酶。
[0075] [5]根据段落4所述的方法，其中这些氧化酶选自下组，该组由以下各项组成：葡萄 糖氧化酶(EC 1.1.3.4)、或碳水化合物氧化酶(EC 1.1.3)。
[0076] [6]根据段落4所述的方法，其中该脱氢酶选自下组，该组由以下各项组成:葡萄糖 脱氢酶（EC 1.1.99.10)、纤维二糖脱氢酶（EC 1.1.99.18)、葡萄寡糖氧化酶（EC 1.1.99. B3)或其他适合的碳水化合物脱氢酶(EC1.1.99)。
[0077] [7]根据上述段落中任一项所述的方法，其中去除了至少20%、至少25%、至少 30%、至少35%、特别是至少40%、更特别是45%、甚至更特别是至少50%的颜色。
[0078] [8]根据上述段落中任一项所述的方法，其中当在糖生产过程中在蒸发之前的任 何步骤处添加该葡萄糖氧化酶、碳水化合物氧化酶、或脱氢酶时，该颜色减少是可以实现 的。
[0079] [9]根据上述段落中任一项所述的方法，其中通过去除不是类黑精的颜色获得颜 色的减少。
[0080] [10]根据段落5所述的方法，其中该葡萄糖氧化酶是黑曲霉葡萄糖氧化酶，并且优 选地为披露为SEQ ID N0: 2的成熟多肽的氧化酶，具体地为具有葡萄糖氧化酶活性的SEQ ID N0: 2的氨基酸17-605或与SEQ ID N0:2的氨基酸17-605具有至少85%、至少90%、至少 91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96 %、至少97 %、至少98 %、至少99%、 或100 %的序列一致性的多肽。
[0081] [11]根据段落5所述的方法，其中该葡萄糖氧化酶是直立枝顶孢霉碳水化合物氧 化酶，并且更具体地为披露为SEQ ID N0:4的成熟多肽的氧化酶，具体地为具有碳水化合物 氧化酶活性的SEQ ID N0:4的氨基酸20-499或与SEQ ID N0: 4的氨基酸20-499具有至少 85 %、至少90 %、至少91 %、至少92 %、至少93 %、至少94 %、至少95 %、至少96 %、至少97 %、 至少98%、至少99%、或100%的序列一致性的多肽。
[0082] [12]根据段落6所述的方法，其中该脱氢酶选自下组，该组由以下各项组成:特异 腐质霉纤维二糖脱氢酶，具体地为披露为SEQ ID N0:6的成熟纤维二糖脱氢酶的纤维二糖 脱氢酶，具体地为具有纤维二糖脱氢酶活性的SEQ ID N0:6的氨基酸24-785或与SEQ ID NO:6的氨基酸24-785具有至少85%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、 至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%的序列一致性的多肽。
[0083] [13]根据段落6所述的方法，其中该脱氢酶选自下组，该组由以下各项组成：嗜热 毁丝霉纤维二糖脱氢酶，具体地为披露为SEQ ID N0:8的成熟纤维二糖脱氢酶的纤维二糖 脱氢酶，具体地为具有纤维二糖脱氢酶活性的SEQ ID N0:8的氨基酸22-828或与SEQ ID NO:8的氨基酸22-828具有至少85%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、 至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%的序列一致性的多肽。
[0084] [14]根据段落6所述的方法，其中该脱氢酶选自下组，该组由以下各项组成：围小 丛壳菌葡萄糖脱氢酶，具体地为披露为SEQ ID N0:10的成熟葡萄糖脱氢酶的葡萄糖脱氢 酶，具体地为具有葡萄糖脱氢酶活性的SEQ ID N0:10的氨基酸17-600或与SEQ ID N0:10的 氨基酸17-600具有至少85 %、至少90 %、至少91 %、至少92 %、至少93 %、至少94 %、至少 95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%的序列一致性的多肽。
[0085] [15]根据上述段落中任一项所述的方法，其中该酶法生产的过氧化氢不足以导致 等效的颜色和/或浊度的减少。
[0086] [16]根据上述段落中任一项所述的方法，其中在酶处理过程中该pH是在从3-7的 范围内。
[0087] [17]-种用于对果汁或果汁浓缩物进行脱色的方法，其中将该果汁或果汁浓缩物 用氧化还原酶进行酶法处理，导致该果汁或果汁浓缩物的颜色减少。
[0088] [18]根据段落17所述的方法，其中该果汁或果汁浓缩物获得自苹果、梨、菠萝或番 木瓜。
[0089] [19]根据段落17-18中任一项所述的方法，其中该氧化还原酶选自氧化酶。
[0090] [20]根据段落19所述的方法，其中氧化酶选自下组，该组由以下各项组成:葡萄糖 氧化酶(EC 1.1.3.4)、或其他适合的碳水化合物氧化酶(EC 1.1.3)。
[0091] [21]根据段落20所述的方法，其中该葡萄糖氧化酶是黑曲霉葡萄糖氧化酶，并且 优选地为披露为SEQ ID N0: 2的成熟多肽的氧化酶，具体地为具有葡萄糖氧化酶活性的SEQ ID N0: 2的氨基酸17-605或与SEQ ID N0:2的氨基酸17-605具有至少85%、至少90%、至少 91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96 %、至少97 %、至少98 %、至少99%、 或100 %的序列一致性的多肽。
[0092] [22]根据段落20所述的方法，其中该葡萄糖氧化酶是直立枝顶孢霉碳水化合物氧 化酶，并且更具体地为披露为SEQ ID N0:4的成熟多肽的氧化酶，具体地为具有碳水化合物 氧化酶活性的SEQ ID N0:4的氨基酸20-499或与SEQ ID N0: 4的氨基酸20-499具有至少 85 %、至少90 %、至少91 %、至少92 %、至少93 %、至少94 %、至少95 %、至少96 %、至少97 %、 至少98%、至少99%、或100%的序列一致性的多肽。
[0093] [23]根据段落20所述的方法，其中该碳水化合物氧化酶是来自雪霉微座孢 (Microdochium nivale)。
[0094] [24]根据段落17-23中任一项所述的方法，其中在酶处理后包括分离步骤，以便去 除颜色沉淀。
[0095] [25]根据段落24所述的方法，其中该分离步骤是过滤。
[0096] [26]-种用于在冷藏果汁浓缩物的过程中防止颜色形成的方法，其中将该果汁浓 缩物用氧化还原酶进行酶法处理。
[0097] [27]根据段落26所述的方法，其中该果汁浓缩物是苹果汁浓缩物。
[0098] [28]根据段落26所述的方法，其中该氧化还原酶是黑曲霉葡萄糖氧化酶，并且优 选地为披露为SEQ ID N0: 2的成熟多肽的氧化酶，具体地为具有葡萄糖氧化酶活性的SEQ ID N0: 2的氨基酸17-605或与SEQ ID N0:2的氨基酸17-605具有至少85%、至少90%、至少 91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96 %、至少97 %、至少98 %、至少99%、 或100 %的序列一致性的多肽。
[0099] [29]根据段落26所述的方法，其中该葡萄糖氧化酶是直立枝顶孢霉碳水化合物氧 化酶，并且更具体地为披露为SEQ ID N0:4的成熟多肽的氧化酶，具体地为具有碳水化合物 氧化酶活性的SEQ ID N0:4的氨基酸20-499或与SEQ ID N0: 4的氨基酸20-499具有至少 85 %、至少90 %、至少91 %、至少92 %、至少93 %、至少94 %、至少95 %、至少96 %、至少97 %、 至少98%、至少99%、或100%的序列一致性的多肽。
[0100] [30]根据段落26所述的方法，其中该碳水化合物氧化酶是来自雪霉微座孢。
[0101] [31]根据段落17-28中任一项所述的方法，其中通过去除不是类黑精的颜色获得 颜色减少。
[0102] 实例 [0103] 方法
[0104] 葡萄糖氧化酶活性
[0105] 在G0DUF中测量葡萄糖氧化酶活性。
[0106] 1个葡萄糖氧化酶FIA单位(glucose 2xiiase FIA unit)(G0DUF)是在标准条件下 每分钟产生lMlol过氧化氢的酶的量。
[0107] 在氧的存在下，葡萄糖氧化酶(0-D-葡萄糖:氧-1-氧化还原酶，EC 1.1.3.4.)氧化 0-D-葡萄糖，以形成葡萄糖酸内酯和过氧化氢。在过氧化物酶的存在下，这种过氧化氢氧化 了ABTS-R(2，2 ' -连氮基-二-[3-乙基苯噻唑啉-6-磺酸盐])。这产生了一种蓝-绿颜色，将其 在418nm下使用光度计进行测量。
[0108]
[0109]
[0110]反应条件：
[0111] 底物:葡萄糖，15.3g/l，90mM
[0112] 缓冲液：乙酸盐，0.1M
[0113] pH:5.6±0.05
[0114] 孵育温度：30°C±1
[0115] 反应时间：34秒
[0116] 根据ICUMSA标准进行颜色和浊度的确定
[0117] 由于化合物的复杂性和难以量化，将颜色测量为所有色素对吸光度的总作用。浊 度被指定为浊度指数，一种对因在汁液和浆液中有悬浮固体而导致的吸光度的量度。
[0118]仪器与试剂
[0119]超声波浴(或真空栗）；分光光度计;pH计(O.OlpH);折射计;膜滤器支架;分析天 平。
[0120] 娃藻土（1(1686]^11111')(或娃藻土（〇6 1；[丨6));蒸馏水；盐酸（0.110;氢氧化钠 (0? 1M);膜滤器(0.45WI1);分光光度计比色皿(推荐1.0cm的比色皿长度）；
[0121] 程序
[0122]