专利名称：黄连素作为胰岛素增敏剂的用途的制作方法
本项发明涉及中药黄连的单体成份黄连素作为胰岛素增敏剂的新用途，更具体讲本发明涉及黄连素作为II型糖尿病的胰岛素增敏剂用途，含黄连素及胰岛素的药物组合物，及黄连素和胰岛素或其它II型糖尿病的胰岛素增敏剂联合用于降低血糖或治疗糖尿病的方法。。
糖尿病是危害人类健康的重大疾病，并随着社会经济的发展呈上升趋势。糖尿病分为两种I型和II型。I型糖尿病占糖尿病人数的5％，有明显的遗传和早发倾向，病人主要因为胰岛素生成障碍而致病；II型糖尿病占糖尿病总体患者的95％，为散发型，发病率与年龄成正比，病人体内有正常水平的胰岛素，β-胰岛细胞生成胰岛素的功能通常也正常，发病的原因主要是胰岛素受体或与胰岛素作用相关的受体功能低下，造成胰岛素抵抗状态。对于II型糖尿病的病人，提高胰岛素受体及相关受体的表达，将有助于胰岛素(内源的和外源的)发挥作用，从而产生降低病人血糖的效果，因此也是人们寻找治疗II型糖尿病药物的一个重要靶点。
黄连素为一种常用的已知抗菌药物，其最大的特点为副作用极为少见，在临床上主要用于治疗细菌性痢疾和肠炎。黄连素分子量为408，分子式为C20H16ClNO4·2H2O，它的分子结构见下式。在理化性状上黄连素为黄色结晶性粉末，无嗅，味极苦。 本发明的目的是寻找新的胰岛素受体增敏剂及治疗糖尿病的药物。
本发明人经研究现已发现黄连素可与胰岛素受体相互作用并显著提高胰岛素受体基因和过氧化酶体增殖因子活化受体(PPARr)基因的表达，从而可为II型糖尿病的胰岛素增敏剂，并可单独或与胰岛素或其它II型糖尿病治疗剂联合用于治疗II型糖尿病，本发明基于上述发现现已完成。
因此，本发明第一方面涉及黄连素作为II型糖尿病的胰岛素受体增敏剂的用途。
本发明另一方面涉及黄连素在制备作为II型糖尿病的胰岛素受体增敏剂中的用途。
本发明再一方面涉及用于治疗II型糖尿病的药物组合物，其包括黄连素，胰岛素或已知治疗II型糖尿病的药物，和/或药用载体或赋形剂。
本发明再一方面涉及用于治疗II型糖尿病的药盒，其包括黄连素和胰岛素或已知用于治疗II型糖尿病的其它药物。
本发明再一方面涉及黄连素与胰岛素或已知治疗II型糖尿病的药物联用用于制备用于治疗II型糖尿病的药物中用途。
本发明再一方面涉及治疗II型糖尿病的方法，其包括将黄连素和胰岛素或已知治疗II型糖尿病的药物给药于II型糖尿病患者。
根据本发明，本发明中所用术语“胰岛素”指天然胰岛素，化学合成或基因工程得到的胰岛素。本发明中的胰岛素是以注射剂或可能的其它剂型如口服制剂等形式使用的。
根据本发明，本发明中所用术语“已知治疗II型糖尿病的药物”指从市场上可得到的治疗II型糖尿病的药物，如以磺脲类或以噻唑烷(如吡格列酮，罗格列酮等)作活性成分的治疗II型糖尿病药物。
根据本发明，当黄连素与胰岛素或已知治疗II型糖尿病药物联用使用时，显示出优良的协同作用，从而使胰岛素或已知治疗II型糖尿病药物的用量明显减少，毒副作用或给药不适显著降低。
根据本发明，优选将黄连素与胰岛素联合用于治疗II型糖尿病。黄连素与胰岛素联合给药顺序可以是同时，或胰岛素在前黄连素在后，或黄连素在前胰岛素在后。
下面的实验实施则用来对本发明做进一步阐述或说明，其不意味着本发明仅限于此。一.黄连素对胰岛素受体基因表达的影响用黄连素(10μg/ml)处理24小时的人淋巴细胞(5×106/ml)，以Trizol药盒提取RNA，并用DNA酶消化去除污染的DNA。RT-PCR所用的引物为如下序列胰岛素受体5’-CCGAAGATTTCCGAGACCTCAG-3’5’-CAAACTGCCCGTTGATGACG-3’RNA在30分钟60℃条件下，由于反转录酶的作用转录为cDNA，再经过25个PCR循环(PCR温度变化循环)，扩增出胰岛素受体基因cDNA，用2％的琼脂电泳检查其产物。并用同位素(32p)标志的分子探针对电泳后转移到膜上的cDNA条带进行分子杂交，分子探针的序列如下32P-(5’-ACACGATGTTATTATCCTCCACG-3’)在两次42℃15分钟的洗膜后，以Kodak X-O mat进行放射自显影、确定受测基因的表达强度。上述实验重复5次，结果见表1。
表1.黄连素在体外对胰岛素受体基因和PPARr基因表达的影响与胰岛素效应 基 因 表 达 强 度*相关的受体 实验1对照组(n＝5)黄连素组(n＝5)胰岛素受体 100165±10PPAR-r100126±7n＝实验次数*P＜0.01上述分子生物学实验及表1数据表明黄连素可以在人淋巴细胞培养中显著增加胰岛素受体基因的表达，并可以同时增加过氧化酶体增殖因子活化受体(PPARr)基因的表达。其中，胰岛素受体存在细胞表面，胰岛素只有与其受体结合后才能激活细胞内的信号通路而发挥作用；而PPARr为细胞核内“孤儿受体”，是已知胰岛素增敏剂罗格列酮结合的靶点。二.黄连素与胰岛素联用的协同作用22位患II型糖尿病的自愿受试者分为两组，一组为13位患II型糖尿病自愿受试者，每人每天分两次给予胰岛素，剂量28u/天；另一组为9位患II型糖尿病的自愿受试者，每人每天口服给予三次黄连素，0.5g/次，同时一天仅给予一次胰岛素，剂量6u/天。分别测定上述受试者在给药前和给药后的餐前血糖值，结果见表2。
表2.黄连素与胰岛素联用的协同作用给药方案 病人数 餐前血糖浓度(mmol/L)给药前 给药后胰岛素28u/天，一日二次 1311.8±3.2 7.7±1.5胰岛素6u/天，一日次 9 12.1±1.9 6.1±1黄连素(口服，一日三次，0.5克一次)正常值 (-) 7.0由表2中数据可看到，黄连素和胰岛素联合用于治疗II型糖尿病与单独用胰岛素治疗II型糖尿病相比，黄连素和胰岛素的联用使胰岛素的用量大大降低同时显示了与单独使用胰岛素相同或更好的降糖效果。因此黄连素和胰岛素联用在治疗II型糖尿病中具有协同作用。
权利要求
1.黄连素作为II型糖尿病的胰岛素受体增敏剂的用途。
2.黄连素在制备作为II型糖尿病的胰岛素受体增敏剂中的用途。
3.用于治疗II型糖尿病的药物组合物，其包括黄连素，胰岛素或已知治疗II型糖尿病的药物，和/或药用载体或赋形剂。
4.用于治疗II型糖尿病的药盒，其包括黄连素和胰岛素或已知治疗II型糖尿病的其它药物。
5.黄连素与胰岛素或已知治疗II型糖尿病的药物联用用于制备用于治疗II型糖尿病的药物中用途。
6.治疗II型糖尿病的方法，其包括将黄连素和胰岛素或已知治疗II型糖尿病的药物给药于II型糖尿病患者。
全文摘要
本发明涉及黄连素作为胰岛素受体或其相关受体增敏剂的用途，含黄连素和胰岛素或已知治疗II型糖尿病的药物组合物。
文档编号A61P3/00GK1393264SQ0112190
公开日2003年1月29日 申请日期2001年6月22日 优先权日2001年6月22日
发明者魏敬, 蒋建东, 王自正, 潘淮宁 申请人:蒋建东, 魏敬