专利名称：用于治疗眼部神经变性疾病的gaba-受体-调节剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及药物组合物用以预防和/或治疗眼部神经变性疾病的用途，同时涉及用于此用途的适宜的药物组合物。
众所周知，眼睛中谷氨酸盐水平的升高会导致眼部神经组织产生严重的损伤。眼睛中谷氨酸盐水平的升高导致视觉能力下降，包括导致失明。例如缺氧和/或眼内压增大都可以引发眼内谷氨酸盐水平的升高。
由此，眼内谷氨酸盐水平是导致众多眼睛疾病，诸如与年龄相关的黄斑变性、糖尿病性视网膜炎、青光眼、和眼局部缺血综合征的主要原因。
病理学上最重要的谷氨酸盐受体是NMDA受体。NMDA受体以电压-依赖型和配体-依赖型的形式同时起作用。在神经元正常的休止电位-60mV时，受体的离子通道被Mg2+离子封堵，配体不能激活该受体。当膜去极化时，Mg2+离开离子通道，受体就可以被配体激活，从而导致Ca2+和Na+的流入及K+的流出。
Ca2+对触发细胞内的瀑流起了主要的作用，高浓度的Ca2+对细胞具有毒性。本文中也按照惯例使用术语“兴奋性毒性”。NMDA受体——此处指导致大量神经变性疾病的谷氨酸盐受体——过渡的激活导致Ca2+流入增加，如上文所述，对细胞具有毒性。由于所述Ca2+的流入，触发细胞凋亡及此后的坏死，从而最终导致细胞死亡。
在神经变性疾病的晚期，被NMDA受体占据的细胞大部分都会死亡。使用NMDA受体拮抗剂进行治疗使NMDA受体再也不能进入这些细胞，从而随着渐进性的神经变性，导致NMDA受体拮抗剂失去越来越多的有效性。
尽管人们希望给予NMDA受体拮抗剂以达到神经-保护目的，但是临床试验显示在这种情况下会产生严重的副作用，从而使该方法不能在临床上采用。此外，几乎所有的NMDA受体拮抗剂都可导致中度至重度的精神病副作用。
因此，非常需要一种药物组合物，它可用于眼睛的神经-保护治疗，并能防止上述现有技术中的缺点。特别是，需要一种适用于神经-保护治疗的药物组合物，它能明显降低或预防神经细胞的损伤和失活。
人们发现，使用含有GABA-受体-调节剂的药物组合物可以克服上述在现有技术中已经知道，使用GABA激动剂可降低眼内压力。GABA激动剂有很大的缺点，而且，即使在没有神经递质时也会产生作用。因此激动剂具有很高的潜在毒性，激动剂剂量的增加可线性地导致抑制的增强，直至感觉丧失和呼吸抑制。调节剂效果的增加受到存在的介质数量的限制，并且不能任意地增加。
根据本发明，通过在眼科学中使用GABA-受体-调节剂以预防和/或治疗眼部神经变性疾病可实现本发明目的，GABA-受体-调节剂选自包括以下物质的组苯并二氮类、苯并二氮-受体的各种结构的配体、β-咔啉、巴比妥酸盐、巴比妥酸衍生物和/或神经甾体。因此，本发明的目的是通过调节反相递质系统，也就是GABA-能体系来实现谷氨酸盐保护。
为实现本发明目的，可采用被认为是神经-保护性疗法的方法，这些处置方法可降低或预防神经细胞损害和失活。
“GABA”表示γ-氨基-丁酸。GABA产生于谷氨酸盐的代谢中，并且是哺乳动物神经系统中最重要的抑制性递质。缺乏GABA或者GABA-能体系被抑制在大多数情况下将导致痉挛和癫痫性惊厥，直至细胞死亡。
GABA是谷氨酸盐的生理性拮抗剂。激活GABA-受体将导致Cl-离子流入，它能改变逆向膜电位，并降低动作电位的概率。因此，GABA被描述为一种抑制性递质。
为了不被任一特定理论所束缚，人们设想加强GABA-能体系可导致细胞的超极化。这将使得去极化或传递动作电位变得更为困难。只要当细胞膜去极化时，NMDA受体才对Ca2+而言是可透过的。换句话说，依据该理论，使用GABA-增强剂可抑制NMDA受体。通过细胞膜的超极化，可以阻止谷氨酸盐受体-非依赖型、电位-依赖型Ca2+通道被激活。上述通道不被NMDA-受体拮抗剂所覆盖。除其它因素之外，上述两种作用是GABA-受体-调节剂根据本发明可用于眼部神经变性疾病的用途的原因。
由此，GABA-受体-调节剂可改变GABA对受体的亲和力和有效性。缺乏GABA时，GABA-受体-调节剂是无效的。因此与激动剂相比，给予GABA-受体-调节剂是无害的，这是因为激动剂随着给药浓度的增加将逐渐的增加其作用效果，而不依赖于存在的神经递质的量，从而导致细胞损伤直至细胞死亡。因此，与GABA激动剂相比，给予GABA-受体-调节剂所具有的毒性要小得多。
用于本发明目的的GABA-受体-调节剂是一些可以调节位于突触状GABA-受体上的GABA的亲和力/有效性的物质。本发明所使用的GABA-受体-调节剂由此称为正调节剂，即，它们可增强GABA的突触亲和力/有效性。
本发明要求保护的GABA-受体-调节剂的药学可接受盐包括，特别是苯二氮类、β-咔啉、巴比妥酸盐、巴比妥酸衍生物和/或神经甾体的盐。
根据本发明，特别适宜的是使用选自包括下列物质的组的苯二氮衍生物阿普唑仑、苯噻氮、溴吡二氮、溴替唑仑、咔吗西泮(carmazepam)、甲氨二氮、氯巴占、氯硝西泮、西诺西泮、氯硫西泮(clotiazepam)、氯羟喹、氯扎平、地洛西泮、苯甲二氮、二苯氮、氯氮二钾、艾司唑仑、乙基氯氟(ethyl-loflazepat)、依替唑仑、氟地西泮、氟马西尼、氟硝西泮、氟西泮-一盐酸盐、氟托西泮、哈拉西泮、哈洛沙唑仑(haloxazolam)、凯他唑仑、劳拉西泮、氯普唑仑、氯甲西泮、美达西泮、美他可拉西泮(metaclazepam)、美克索唑仑(mexozolam)、咪达唑仑盐酸盐、硝甲西泮、硝西泮、去甲西泮、奥沙西泮-他西泮(tazepam)、奥沙唑仑、匹那西泮、普拉西泮、四氟硫安定、羟基安定、四氢西泮、托非索泮、三唑仑和唑拉西泮以及它们的药学可相容的盐类。
根据本发明，特别适宜的是使用各种化学结构的苯二氮-受体-配体，选自包括RWJ-46771(一种吡啶并-[1，2-a]-苯并咪唑)、SX-3228(一种1，6-萘啶-2(1H)-酮衍生物)、Y-23684(一种哒嗪酮)、溴他西尼、依咪达折尼(imidazenil)、大麻折尼、沙马西尼、扎里普隆(zaleplon)、唑吡坦和唑吡克隆的组。
本发明中使用的特别适宜的β-咔啉包括阿比卡尼、3，4-二氢-β-咔啉、吉多卡奈、1-甲基-1-乙烯基-2，3，4-三氢-β-咔啉-3-羧酸、6-甲氧基-1，2，3，4-四氢-β-咔啉、N-BOC-L-1，2，3，4-四氢-β-咔啉-3-羧酸、替普他啉(tryptoline)、派诺啉(pinoline)、甲氧哈梅蓝、四氢-β-咔啉(THBC)、1-甲基-THBC、6-甲氧基-THBC、6-羟基-THBC、6-甲氧哈梅蓝、去甲哈尔满(norharman)和/或3，4-二氢-β-咔啉以及它们的药学可相容盐。
根据本发明，特别适用的巴比妥酸盐或巴比妥酸衍生物选自包括下列物质的组巴比克索克隆(barbexaclon)、二丙基巴比妥酸、优纳康、环己烯巴比妥、甲基苯巴比妥、甲乙炔巴比妥、甲乙炔巴比妥钠、戊巴比妥、苯巴比妥、去氧苯巴比妥、2，4，6(1H，3H，5)-普米定纯(pyrimidintrion)、仲丁巴比妥和/或硫喷妥以及它们的药学可相容的盐。
根据本发明，特别适用的神经甾体选自包括下列物质的组别孕烯醇酮、3-β-羟雄甾(hydroxyandrost)-5-烯-17-酮-3-硫酸酯、脱氢表雄甾酮、乙他诺龙、炔雌醇、5-孕烯-3-β-醇-20-酮-硫酸酯、孕烯醇酮和/或黄体酮以及它们的药学可相容的盐类。
本发明最适用的GABA-受体-调节剂是氟硝西泮、咪达唑仑、苯巴比妥、阿比卡尼和/或脱氢表雄甾酮以及它们的药学可相容的盐类。
本文中药学可相容的盐类应当理解为在现有技术中所知的其药学作用不会不利地影响活性成分的有效性，即不会以危及健康的方式减弱其活性的所有盐类。
根据本发明，特别适用的药学可相容盐选自包括有机酸和/或无机酸以及它们衍生而来的碱类的组。根据本发明，可以使用的是单价、二价和/或多价离子。特别优选的是碱金属和碱土金属，诸如Na+、Ca2+、K+和/或Mg2+。也可以使用有机胺类诸如单、二和三胺和乙醇胺的盐。也可与咖啡因、氨丁三醇和/或相似的物质成盐。当需要将硝基成盐时，可以与任意的有机和/或无机物质诸如甲基亚碘盐酸成盐。更优选的盐是与无机酸诸如氯酸、硫酸和/或磷酸形成的盐。由此可形成1-、2-和3-元酸。
此外，本发明可用的所有可能的GABA-受体-调节剂的物理/化学异构体也是要求保护的。
根据本发明，GABA-受体-调节剂可用于眼科以预防和/或治疗神经变性疾病。
GABA-受体-调节剂在视网膜疾病上的用途是特别优选的。
根据本发明，使用GABA-受体-调节剂治疗早产儿视网膜病变，诸如早产儿视网膜视乳头炎(retinopathia praematurorum)和/或治疗晶状体后纤维素增生是适用的。
根据本发明，GABA-受体-调节剂可用于治疗视网膜的血管性疾病，诸如血管痉挛性视网膜病、动脉硬化性视网膜病、惊厥性视网膜病、由主动脉颈动脉闭合引起的疾病、静脉周炎性视网膜、糖尿病性视网膜病、非增生性糖尿病性视网膜病、增生性糖尿病性视网膜病、糖尿病性黄斑、由放疗创伤引起的与癌症-关联的视网膜病和/或视网膜病。
根据本发明，GABA-受体-调节剂也可用于由静脉和/或动脉血管闭塞引起的疾病，诸如由脑静脉闭塞、中央静脉闭塞、动脉闭塞、一时性黑蒙、视网膜小静脉闭塞、慢性眼局部缺血、镰刀状细胞性视网膜病、眼部局部缺血综合征和/或渗出性视网膜炎(retinitis exsudativa)引起的疾病。
GABA-受体-调节剂还可用于预防和/或治疗视网膜黄斑变性，诸如湿性和干性视网膜黄斑变性、获得性视网膜黄斑变性、年龄相关性视网膜黄斑变性、中央浆膜视网膜病(retinopathia centralis serosa)、近视性黄斑变性、囊状黄斑水肿、脉管状条纹、中毒性黄斑病、黄斑小孔、其它原因导致的渗出性黄斑病、中央浆膜氯视网膜病(chlorioretinopathy centralisserosa)、囊状黄斑水肿、亚黄斑渗血(submacular bleeding)、遗传性黄斑及视网膜变性、青少年视网膜黄斑变性、卵黄性视网膜黄斑变性、白化病、贮积病、黑蒙性痴呆、神经酰胺类失常、泰萨氏幼年型黑朦白痴病、尼曼-皮克(Niemann-Pick)病、神经节苷脂沉淀症、高雪氏病、斯皮梅尔-沃格特-斯托克(Spielmeyer-Vogt-Stock)病和/或山霍夫氏病。
根据本发明，GABA-受体-调节剂也可用于预防和/或治疗创伤性视网膜变化，诸如眼睛挫伤、穿孔性眼睛损伤、铁质沉着/偏身穿出性供给失调、铜屑沉着、烧伤、创伤性视网膜疾病和/或光线引起的视网膜损伤。
此外，根据本发明，GABA-受体-调节剂也可用于视网膜劈裂。
根据本发明，GABA-受体-调节剂也适用于预防和/或治疗脉络膜疾病，诸如玻璃样沉积(hyalin deposits)和/或无脉络膜。
根据本发明，GABA-受体-调节剂也可用于视神经疾病，包括中毒导致的视神经损伤，诸如烟酒损伤、甲醇导致的损伤、乙胺丁醇导致的损伤、奎宁、砷、铅和/或溴导致的损伤。
根据本发明，GABA-受体-调节剂也可用于前局部缺血性视神经病，诸如乳头卒中和/或霍尔顿氏综合征。
GABA-受体-调节剂也可用于预防和/或治疗视神经萎缩，诸如创伤性视神经萎缩、肿瘤压迫导致的视神经萎缩、遗传性视神经萎缩、肝脏性视神经萎缩、继发性视神经萎缩、视神经乳头/球后视神经炎导致的视神经萎缩、原因不明的视神经萎缩、青光眼性视神经萎缩和/或视神经乳头变性。
在一个较优选的具体实施方式
中，根据本发明，GABA-受体-调节剂用于治疗青光眼，诸如原发性青光眼、东德斯(Donders′)青光眼、原发性东德斯(Donders′)青光眼、血压正常型青光眼、角闭型青光眼、急性角闭型青光眼、间歇性角闭型青光眼、亚急性角闭型青光眼、慢性角闭型青光眼、高原虹膜症和/或小眼球。
根据本发明，GABA-受体-调节剂也可用于先天性青光眼和早产儿青光眼，诸如房室虹膜发育不全的角度改变、洛氏(Lowe′s)综合征、斯特奇-韦博(Sturge-Weber)综合征、多发性神经纤维瘤、鲁宾施泰因-塔伊贝(Rubinstein-Taybi)综合征、皮埃尔·鲁宾(Pierre Rubin)综合征、奥塔氏(Ota′s)痣、三体症(trisomy)、马尔凡(Marfan)综合征、特纳(Turner′s)综合征、无虹膜、高胱氨酸、眼内肿瘤、眼眶内淋巴管瘤、普拉马图若姆(praematurorum)视网膜病、顽固性原发性玻璃体增生、晶状体异位、眼内炎症、可的松疗法、近视伴随色素层青光眼、风疹性胚胎病(rubellaembryopathy)、内障摘出术和/或用于麻醉治或急性创伤。
根据本发明，GABA-受体-调节剂的应用也适用于治疗青光眼综合征，诸如青光眼伴随无晶状体和假性无晶状体、糖尿病伴随青光眼、青光眼和内皮性营养不良(dystrophia endotheliasis)、分泌过多型青光眼、妊娠期青光眼、高度近视和/或青少年青光眼。
根据本发明，GABA-受体-调节剂还可用于治疗继发性青光眼，诸如创伤性及术后青光眼、继发性东德斯(Donders′)青光眼、继发性角闭型青光眼、类固醇-诱发青光眼、炎症后青光眼、晶状体溶液性青光眼、波斯纳-施洛斯曼(Posner-Schlossman)综合征、异色性睫状体炎、影细胞青光眼、溶血性青光眼、多发性神经纤维瘤、铁质沉着病、脉管再生导致的青光眼、给予可的松导致的青光眼、色素层青光眼、假性剥脱性青光眼，前眼色素层炎伴随青光眼、富克斯(Fuchs)异色伴随青光眼、格兰特(Grant′s)综合征、挫伤后青光眼、非-创伤性房室角度异常、虹膜细胞破碎性青光眼、硅青光眼、晶状体-相关的青光眼、晶状体局部性青光眼、晶状体形态性青光眼、由游离透镜材料导致的青光眼、假性剥脱性青光眼、晶状体源性葡萄膜盐、前葡萄膜炎伴随青光眼、恶性青光眼和/或用于治疗巩膜血管压增加导致的青光眼。
根据本发明，还发现GABA-受体-调节剂适用于治疗眼压过高，例如原发性和继发性的眼压过高。
根据本发明，含GABA-受体-调节剂的药物组合物可以液体、凝胶和/或固体形式给药。优选地，如果含GABA-受体-调节剂的药物组合物是以自由流动的形式存在的，则可以滴剂的形式给药；如果是以固体的形式存在的，则可以局部地或全身性地给药。优选地，按照整个组合物的量计，提供给适于使用的药物组合物浓度为0.0001-5(重量)％的GABA-受体-调节剂。
根据本发明，局部给药优于全身给药，因为局部给药的话，实际上更高浓度的活性成分可以直接作用于眼睛发挥作用。
本发明中可用的含GABA-受体-调节剂的眼科组合物可含有防腐剂、肌肉弹性调节剂、调节pH值的缓冲剂、抗氧剂、粘度-调节物质和/或其它常规使用的辅料。
优选的防腐剂选自包括苯扎氯铵、氯丁醇、硫柳汞、乙酸苯汞、溴化十六烷基三甲铵、EDTA和/或硝酸苯汞的组。
根据本发明，适宜的辅助物料选自包括聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素、泊洛沙姆、羧甲基纤维素、羟乙基纤维素、环糊精和/或水的组。
肌肉弹性调节剂选自包括盐类，优选氯化钠和/或氯化钾、甘露糖醇、甘油以及相似物质的组。
可使用乙酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐以及硼酸盐缓冲剂调节pH值。如果需要，也可以自然地使用酸和/或碱。
眼科可接受的抗氧化剂选自包括偏亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠、乙酰半胱氨酸、丁醇改性的羟基苯甲醚和/或丁醇改性的羟基甲苯的组。
卡波沫特别适用于可用作粘度调节物质。
根据本发明，在使用含GABA-受体-调节剂的药物组合物时，GABA-受体-调节剂可以局部和/或全身性给药用以进行神经保护性的预防和/或用以治疗哺乳动物，特别是人类的眼睛。在局部使用时，所述含GABA-受体-调节剂的药物组合物以眼科可相容的制剂形式，如滴眼剂、眼用凝胶或眼用软膏的形式使用。如果药物组合物在急性或慢性的使用中都不会对眼睛产生有害或危险的影响，那么该药物组合物是非常适用的。特别优选的药物组合物是那些不会引起眼睛刺激，诸如炎症、骚痒等类似反应的药物组合物。
特别优选在眼睛上使用一种溶液或凝胶形式的含GABA-受体-调节剂的药物组合物。
在细胞培养物中以及刚刚制备的大鼠和兔子视网膜细胞中，实验显示，使用GABA-受体-调节剂可使由于兴奋性毒性发作而失活的细胞数量显著下降。
图1显示，在给予氟硝西泮10、30和60分钟后，与对照组相比，经培养的大鼠皮质细胞培养物中临死细胞数量的减少情况。
图2显示，在给予阿比卡尼10、30和60分钟后，与对照组相比，经培养的大鼠皮质细胞培养物中临死细胞数量的减少情况。
图3-5显示，在向麻醉大鼠眼球注射100nM的NMDA溶液后，再给予苯巴比妥(图3)、脱氢表雄甾酮(DHEA；图4)和咪达唑仑(图5)之后，大鼠视网膜标本中死亡细胞的数量。
本发明适用的药物组合物含有0.0001-5(重量)％，优选0.001-3(重量)％，更优选0.01-2(重量)％，进一步优选0.05-1.5(重量)％，最优选0.1-1(重量)％的活性成分，以整个药物组合物计。
防腐剂的比例为0-0.5(重量)％，优选＞0-0.1(重量)％，优选0.001-0.3(重量)％，更优选0.01-0.05(重量)％，以整个药物组合物计。
辅助物料的比例为0-99(重量)％，优选＞0-80(重量)％，优选1-50(重量)％，更优选为5-40(重量)％，最优选10-30(重量)％，以整个药物组合物计。
调整等渗性的物质的比例为1-10(重量)％，优选2-8(重量)％，更优选3-5(重量)％，以整个药物组合物计。
缓冲物质的比例为0.01-10(重量)％，优选0.05-5(重量)％，优选0.01-3(重量)％，更优选0.1-2(重量)％，以整个药物组合物计。
含GABA-受体-调节剂的药物组合物的pH值优选在4.5-7.5之间，优选在5-7.3之间，优选在6-7.1之间，更优选在6.5-7.0之间。
抗氧剂的比例优选为0-10(重量)％，优选＞0-8(重量)％，优选为0.005-5(重量)％，更优选0.05-2(重量)％，进一步优选0.1-1(重量)％，以整个药物组合物计。
适宜的含GABA-受体-调节剂的药物组合物列于以下实施例中本发明中使用的活性成分的性质苯并二氮为亲脂性的咪达唑仑为水溶性的β-咔啉是亲脂性的苯巴比妥钠和戊巴比妥钠是亲水性的甾体是亲脂性的实施例1滴眼剂(常规配方)药物0.0001-5％防腐剂 0-0.1％辅料0-40％
等渗性调节物质 1-10％缓冲剂 0.01-10％将pH值调节至4.5-7.5的物质适量抗氧剂 适量实施例2油性地西泮滴眼剂地西泮 0.5二氯酸汞 0.04乙醇 1.0蓖麻油 98.46实施例3油性地西泮滴眼剂地西泮 1.0棕榈酰抗坏血酸 0.01无菌蓖麻油 加至100ml实施例4水性滴眼剂1ml溶液中含有药物，如咪达唑仑 3.42BAC 0.1二水合磷酸二氢钠 8.15十二水合磷酸氢二钠 29.21注射用水 加至1000实施例5眼用软膏地西泮 2.0硫柳汞溶液0.002％15.0单纯眼膏 加至100
「单纯眼膏克拉斯特洛姆(Cholesterolum) 1.0亚液体状石蜡 42.5白凡士林 加至100.0 实施例6眼用凝胶苯巴比妥钠 0.001羟乙基纤维素 20BAC 0.1Na-EDTA 1NaCI 9NaOH(1摩尔溶液) 适量注射液 加至1000实施例7非肠道劳拉西泮溶液1mg劳拉西泮 2mg苯甲醇 20.9mg聚乙二醇400 202.5mg丙二醇 加至1000mg实施例8泡腾片咪达唑仑 5mg无水柠檬酸二氢钠 1200mg抗坏血酸 240mg无水柠檬酸 240mg碳酸氢钠 920mg无水碳酸钠 200mg
实施例9片剂阿比卡尼 200咖啡因50.00mg玉米淀粉 340mg微晶纤维素60mg棕榈酸硬脂精 5mg总计655.00mg测试1从16-18天大的大鼠胎儿上分离出来的皮质细胞在35mm的培养皿上培养。在开始的7天内所含的营养介质是L-谷氨酸盐(4mM)、葡萄糖(6g/l)、青霉素(100U/ml)、链霉素(100μg/ml)以及10％的富含激素的基质，该基质中含转铁蛋白(1mg/ml)、胰岛素(250μg/ml)、腐胺(600μM)、亚硒酸钠(0.3μM)、黄体酮(0.2μM)和雌二醇(0.1μM)。培养皿储存在加热到37℃的空气(5％CO2和95％O2)中。7天以后，将富含激素的营养基质虹吸除去，换以另一种除了不含激素之外其它含量都相同的基质。
为了制备对照组(组1)，在一半的培养皿中再添加营养基质10nm L-谷氨酸盐，并在正常有毒条件下培养4小时。
为了确定神经保护性作用，向另一半的培养皿再添加营养基质氟硝西泮500nm和10nm L-谷氨酸盐(组2)，同样也在相同正常有毒条件下培养。
通过确定注入到细胞间质中的乳酸-脱氢酶(LDH)的量来确定存活或失活细胞的数量。通过光谱测定法测定NADH在340nm处的代谢，来确定LDH的活性。
测试2测试2按照测试1的方法进行，但是将氟硝西泮替换为500nM的活性成分阿比卡尼。
在图1和图2的图表中，所测定的数值情况如下所测定的值描述了测试后死亡细胞的数量与测试前细胞数量的百分比关系。数值比例越大表明失活细胞的比例越高，100％的数值则表示所有细胞都失活。
测试3为了避免系统误差，在每个动物的右眼上进行对照测定(组1)，在左眼上进行物质测定(组2)。
组1在对照组(右眼)中，使用与组2中相同的剂量，除了将其中的含500nM活性成分苯巴比妥的药物溶液替换为不含活性成分的相同的药物溶液进行注射，在向眼球注射时，向对照眼睛注射不含药物成分含100nM NMDA的5μl磷酸钠缓冲液。
组2在给予NMDA注射的前一天，向50％重量为200-250g的大鼠(雌性同胞)给予5μl药物溶液的药滴两次，一次在清晨，一次在傍晚，均向左眼给药。每次给药时在给予一滴药物溶液后过30分钟后再给第二滴。在注射谷氨酸盐的早晨，先给大鼠注射5μl药物溶液，然后用0.3ml kg-1海波诺姆(Hyponorm)(Janssen，Grove，U.K.)麻醉。30分钟后，再次向每只眼球中注射5μl药物溶液。15分钟后，将含100nM NMDA的5μl磷酸钠溶液缓冲液注射到玻璃体中。在同一天的中午，给每只眼睛注射2滴药物溶液。在以后的4天里，分别在早上和晚上向眼睛注射2滴药物溶液。
在第四天中午，再次将动物麻醉(0.3ml kg-1Hyponorm，Janssen，Grove，U.K.)并摘除视网膜以作进一步的免疫组织学检查。操作最后将视网膜置于2％多聚甲醛溶液中45分钟，然后在30％的蔗糖溶液中冷冻。切取距离视神经约5mm的冰冻切片(10μm)，再放在明胶包裹的载玻片上观察。然后将切片进一步地进行提(Thy)-1定位。
测试4测试4按照测试3的方式进行，除了将500nM的苯巴比妥替换为500nM的活性成分脱氢表雄甾酮(DHEA)。
测试5测试5按照测试4的方法进行，除了将500nM的脱氢表雄甾酮(DHEA)替换为500nM的活性成分咪达唑仑。
在图3、4和5的图表中，测定值情况如下测定值描述了试验后死亡细胞的数量与测试前细胞总数量的百分比关系。数值越大表明失活细胞的比例越高，100％的数值则表示细胞完全失活。
权利要求
1.GABA-受体-调节剂在制备眼科领域中用于预防和/或治疗眼部神经变性疾病的药物组合物中的应用，其特征在于，GABA-受体-调节剂选自包括苯并二氮类药物、苯并二氮-受体的各种结构的配体、β-咔啉、巴比妥酸盐、巴比妥酸衍生物和/或神经甾体的组。
2.含权利要求1所述的GABA-受体-调节剂的药物组合物用于治疗神经变性疾病的应用，这些疾病包括视网膜病、视网膜血管病、静脉和动脉血管闭塞导致的疾病、黄斑变性、创伤性视网膜改变、视网膜劈裂、脉络膜疾病、视神经疾病、前局部缺血性视神经病、青光眼、原发性青光眼、先天性青光眼、早产儿青光眼、单纯性青光眼、继发性青光眼和/或眼压过高。
3.含权利要求1或2所述的GABA-受体-调节剂的药物组合物的应用，其中GABA-受体-调节剂优选包括氟硝西泮、咪达唑仑盐酸盐、苯巴比妥和/或去氢表雄酮以及它们的药学可接受的盐类。
4.如前述任一项权利要求所述的药物组合物的应用，其中GABA-受体-调节剂的含量为0.0001-10(重量)％，优选0.01-5(重量)％，更优选0.1-3(重量)％，以整个药物组合物计。
5.含前述任一权利要求所述的GABA-受体-调节剂的药物组合物的应用，其中以药物上的活性量存在的GABA-受体-调节剂的含量为0.001g-1g，优选0.01-0.8g，特别优选0.05-0.6g。
6.含前述任一项权利要求所述的GABA-受体-调节剂的药物组合物的应用，用于全身性和/或局部给药，其中药物组合物以液体、凝胶和/或固体的形式存在。
7.含前述任一项权利要求所述的GABA-受体-调节剂的药物组合物的应用，其中药物组合物含有用于调节肌肉弹性的添加剂、调节pH值的缓冲剂、眼科可接受的抗氧化剂、凝胶、防腐剂和/或调节粘度的物质。
8.含前述任一项权利要求所述的至少一种GABA-受体-调节剂的药物组合物，它用于治疗神经变性疾病，特别是眼部神经变性疾病。
全文摘要
本发明涉及含GABA－受体－调节剂的药物组合物在眼科领域用于预防和/或治疗眼部神经变性疾病中的应用，该GABA－受体－调节剂选自包括苯并二氮类、苯并二氮－受体的各种结构的配体、β－咔啉、巴比妥酸盐、巴比妥酸衍生物和/或神经甾体的组。
文档编号A61P35/00GK1501795SQ02804901
公开日2004年6月2日 申请日期2002年2月13日 优先权日2001年2月13日
发明者克里斯托费尔·布鲁克纳, 克里斯托夫·凯斯勒, 科妮莉亚·赖默尔－埃维亚, 赫尔穆特·阿尔米尔, 亚 赖默尔-埃维亚, 克里斯托费尔 布鲁克纳, 托夫 凯斯勒, 特 阿尔米尔 申请人:曼·格哈德博士化学药物制造股份有限公司, 曼 格哈德博士化学药物制造股份有限