专利名称：新型芳杂烷基胺衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及新型芳杂烷基胺(arylheteroalkylamine)衍生物及其制备方法，包含所述化合物的组合物以及它们在治疗中的用途。
背景技术：
在特异性氧化氮合成酶(NOSs)的作用下，氧化氮由哺乳动物细胞中的L-精氨酸生成。这些酶分为完全不同的两类组成型NOS(cNOS)和诱导型NOS(iNOS)。目前已经鉴定出两种组成型NOSs及一种诱导型NOS。在组成型NOS中，内皮型酶(endothelial enzyme，ecNOS)与平滑肌的舒张以及血压和血流的调节有关，而神经元酶(neuronal enzyme，ncNOS)作为神经递质，似乎涉及多种生物功能诸如大脑局部缺血的调节。诱导型NOS具体地参与在炎性疾病中的发病机理。因而这些酶的调节作用应该对很多疾病的治疗具有相当大的可能性(J.E.Macdonald，Ann.Rep.Med.Chem.，1996，31，221-230)。
在鉴别氧化氮合成酶的一或多种同工型(isoform)的特异性抑制剂方面，已经作出相当多的努力。该类化合物在治疗中的应用已经申请很多专利。
发明公开本发明提供了具有式(I)结构的化合物其中X表示H、C1-4烷基、C1-4烷氧基、卤素、CN、C≡CH、NH2、NHCH3、N(CH3)2、NO2、CH2OH、CHO、COCH3或NHCHO；所述烷基或烷氧基任选进一步被一个或多个氟原子取代；
Y表示C1-4烷基、C1-4烷氧基、卤素、CN、C≡CH、NO2、CH2OH、CHO、COCH3或NHCHO；所述烷基或烷氧基任选进一步被一个或多个氟原子取代；T、U及W独立地表示CR7或N；及每个R7基团独立地表示H、F或CH3；当T表示CR7，基团R7可另指OH、Cl、Br、CN、CH2OH、NO2、NHR13、OR14或OSO2CH3；V表示O或S(O)n；n表示整数0、1或2；R1表示H或Me。
R2表示C1-4烷基、C2-4烷基链烯基、C2-4烷基链炔基、C3-6环烷基或包含一个选自O，S及N的原子的4-8员饱和杂环；所述基团中的任何一个任选被C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷硫基、C3-6环烷基、卤素或苯基进一步取代；所述苯基任选被一个或多个取代基取代，该取代基独立地选自卤素、C1-4烷基、C1-4烷氧基、CF3、OCF3、CN或NO2；或R2表示苯基、五或六员芳香杂环，该芳杂环包含1-3个独立地选自O，S及N的杂原子；该苯基或芳香杂环任选被一个或多个取代基取代，这些取代基独立地选自卤素、C1-4烷基、C1-4烷氧基、OH、CN、NO2或NR9R10；该烷基或烷氧基任选进一步被一个或多个氟原子取代；R3表示H、C1-4烷基或C3-6环烷基；该烷基任选被C1-4烷氧基、卤素、羟基、NR11R12、苯基、五或六员芳香或饱和杂环取代，该杂环包含1-3个独立地选自O、S及N的杂原子；该苯基或芳香杂环任选被卤素、C1-4烷基、C1-4烷氧基、CF3、OCF3、CN或NO2进一步取代。
R4、R5、R6、R9、R10、R11、R12、R13及R14独立地表示H或C1-4烷基；或其可药用盐、对映异构体或消旋体。
应当意识到，式(I)化合物(其中U表示N，并且T表示CR7及R7表示OH)可以选择性的互变异构体形式(Ia)存在 应当理解，所有这些可能的互变异构体形式及其混合物均包含在本发明范围之内。
在一个实施方案中，X及Y独立地表示C1-4烷基、C1-4烷氧基、卤素、CN、C≡CH、NO2、CHO、COCH3或NHCHO；该烷基或烷氧基任选进一步被一个或多个氟原子取代；及T、U及W独立地表示CR7或N；及每个R7基团独立地表示H、F或CH3。
具有式(I)结构的化合物及其可药用盐类、对映异构体及消旋体具有特点，其为氧化氮合酶(NOS)抑制剂。特别是，具有式(I)结构的化合物及其可药用盐类、对映异构体及消旋体具有特点，其为诱导型氧化氮合酶(iNOS)抑制剂。
本发明进一步提供了一种用于制备式(I)化合物或其可药用盐、对映异构体或消旋体的方法。
本发明还提供了作为药物使用的式(I)化合物，或其可药用盐、对映异构体或消旋体。
本发明另一方面提供了式(I)化合物或其可药用盐、对映异构体或消旋体在制备用于治疗或预防疾病或病症中的用途，其中所述疾病或病症通过抑制氧化氮合酶活性可以得到有益效果。
本发明更具体地提供了式(I)化合物或其可药用盐、对映异构体或消旋体在制备用于治疗或预防炎性疾病中的用途。
本发明还提供了一种治疗疾病或病症或降低疾病或病症发作风险的方法，其中所述疾病或病症通过抑制氧化氮合酶活性可以得到有益效果，所述方法包括对该疾病或病症的患者或潜在患者施用治疗有效量的式(I)化合物或其可药用盐、对映异构体或消旋体。
更具体地，本发明还提供了一种方法治疗炎性疾病或降低其发作风险的方法，所述方法包括对患者使用治疗有效量的式(I)化合物或其可药用盐、对映异构体或消旋体。
本发明的化合物也可有利地联用第二种药物活性物质；尤其是联用环加氧酶抑制剂；更具体而言是联用诱导型环加氧酶(COX-2)的选择性抑制剂。因而，本发明另一方面提供了式(I)化合物或其可药用盐、对映异构体或消旋体组合COX-2抑制剂，用于治疗炎症、炎性疾病及炎性相关的疾病的用途。还提供了一种治疗患者或潜在患者中的炎症、炎性疾病及炎性相关疾病，或降低该类疾病发作风险的方法，所述方法包括对患者施用治疗有效量的式(I)化合物或其可药用盐、对映异构体或消旋体以及COX-2抑制剂。
在一个实施方案中，V表示S(O)n，并且n表示0。
在另一个实施方案中，V表示O。
在另一个实施方案中，X及Y独立地表示Br、Cl、CH3、CH2F、CHF2、CF3、OCH3或CN。但在另一个实施方案中，Y表示CN。
在一个实施方案中，R1表示H。
在另一个实施方案中，R2表示苯基、包含1-3个独立地选自O、S及N杂原子的五或六员芳香杂环。在更深层次的实施方案中，R2表示苯基、吡啶基、异噁唑基、异噻唑基或噻唑基。
在另一实施方案中，R2表示苯基。
在一个实施方案中，R3表示H。
在另一个实施方案R4、R5及R6各表示H。
在另一个实施方案中，T、U及W独立地表示N、CH或CF。在另一个实施方案中，U表示N或CH。在另一个实施方案中，W表示N或CH。
在一个实施方案中，T、U及W各表示CR7。
在一个实施方案中，T、U及W之一表示N，另两个表示CR7。
在一个具体实施方案中，式(I)化合物具有(1R，3S)的绝对立体化学。
本发明的一个具体方面涉及式(I)化合物，其中V表示O或S；X及Y独立地表示Br、Cl、CH3、CH2F、CHF2、CF3、OCH3或CN；R1、R3、R4、R5及R6各表示H；R2表示苯基、吡啶基、异噁唑基、异噻唑基或噻唑基；T表示N、CH或CF；U表示N或CH；W表示N或CH；化合物具有(1R，3S)绝对构型；及其可药用盐。
本发明的另一个具体方面涉及式(I)化合物，其中V表示O或S；X及Y独立地表示Br、Cl、CH3、CH2F、CHF2、CF3、OCH3或CN；R1、R3、R4、R5及R6各表示H；R2表示苯基、吡啶基、异噁唑基、异噻唑基或噻唑基；T、U及W中之一表示N，另两个表示CR7；及化合物具有(1R，3S)绝对构型；及其可药用盐。
本发明的具体化合物包括2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-甲基-3-吡啶腈；2-[[(3S)-3-氨基-4-羟基-1-(3-异噁唑基)丁基]硫代]-6-甲基-3-吡啶腈；4-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-甲基-3-吡啶腈；3-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-5-(三氟甲基)-2-吡啶腈；
2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-(二氟甲基)-3-吡啶腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-(二氟甲基)-3-吡啶腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-(3-吡啶基)丁基]氧基]-4-氯-5-氟苯甲腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-(2-噻唑基)丁基]氧基]-4-氯-5-氟苯甲腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-(5-异噻唑基)丁基]氧基]-4-氯-5-氟苯甲腈；4-[[(1R，3R)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-甲氧基-3-吡啶腈；4-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-甲氧基-3-吡啶腈；4-[[(1S，3R)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-甲氧基-3-吡啶腈；4-[[(1S，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-甲氧基-3-吡啶腈；4-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-(二氟甲氧基)-3-吡啶腈；2-[[(1R，3R)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-甲基-3-吡啶腈；4-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-(2H3)甲氧基-3-吡啶腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-乙基-3-吡啶腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-(1-甲基乙基)-3-吡啶腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-甲基-3-吡啶甲醇；6-乙酰基-2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-3-吡啶腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-(羟基甲基)-3-吡啶腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-3-吡啶腈；(β1S，δ1R)-β-氨基-δ-[(2，5-二氯-4-吡啶基)硫代苯丁醇]；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-5-氟-6-甲氧基-3-吡啶腈；4-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-(二甲基氨基)-3-吡啶腈；4-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-(甲基氨基)-3-吡啶腈；(β1S，δ1R)-β-氨基-δ-[(5-溴-2-甲氧基-4-吡啶基)硫代]-苯丁醇；(β1S，δ1R)-β-氨基-δ-[(5-氯-2-甲氧基-4-吡啶基)硫代]-苯丁醇；4-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-乙氧基-3-吡啶腈；3-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-5-(三氟甲基)-2-吡啶腈；3-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-1，6-二氢-5-甲基-6-氧代-2-吡啶腈；3-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-5-氯-2-吡啶腈；6-氨基-4-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-3-吡啶腈；3-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-5-甲基-2-吡啶腈；
4-[[(1R，3S)-3-氨基-1-(2-氟苯基)-4-羟丁基]硫代]-6-甲氧基-3-吡啶腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-1-(4-氟苯基)-4-羟丁基]氧基]-6-三氟甲基-3-吡啶腈；2(2S)-氨基-4(4R)-(3-氟苯基)-4-[(4-甲氧基-2-硝基苯基)硫代]丁-1-醇；2(2S)-氨基-4(4R)-(3-氟苯基)-4-[(4-氯-2-硝基苯基)硫代]丁-1-醇；2(2S)-氨基-4(4R)-(3-氟苯基)-4-[(5-氨基-4-氯-2-硝基苯基)硫代]丁-1-醇；2(2S)-氨基-4(4R)-(3-氟苯基)-4-[(4-羟基甲基)-2-硝基苯基)硫代]丁-1-醇；2(2S)-氨基-4(4R)-(3-氟苯基)-4-[(4-氟-2-硝基苯基)硫代]丁-1-醇；2(2S)-氨基-4(4R)-(3-氟苯基)-4-[(3，5-二氯-2-吡啶基)硫代]丁-1-醇；4-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-3-氯苯甲腈；4-氯-2-[[(1R，3S)-3-(乙基氨基)-4-羟基-1-(2-噻唑基)丁基]氧基]-5-氟苯甲腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-(5-噻唑基)丁基]氧基]-5-氟-苯甲腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-甲氧基-1-苯丁基]硫代]-6-甲基-3-吡啶腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-4-甲基-1-苯基戊基]氧基]-4-氯-5-氟苯甲腈；2-[[(1 S，3S)-3-氨基-4-羟基-1-丙基丁基]氧基]-4-氯-5-氟苯甲腈；2-[[(1S)-1-[(2S)-2-氨基-3-羟基丙基]戊基]硫代]-6-甲基-3-吡啶腈；2-[[(1S，3S)-3-氨基-4-羟基-1-(2-甲基丙基)丁基]硫代]-6-甲基-3-吡啶腈；2-[[(3S)-3-氨基-4-羟基-1-(5-异噁唑基)丁基]硫代]-6-甲基-3-吡啶腈；2-[[(3S)-3-氨基-4-羟基-1-(5-异噁唑基)丁基]氧基]-6-(三氟甲基)-3-吡啶腈；2-[[3-(3S)-氨基-4-羟基-1-(1R)-(2-噻吩基)丁基]氧基]-4-氯-5-氟苯甲腈；2-[[3-(3S)-氨基-4-羟基-1(1R)-(3-噻吩基)丁基]氧基]-4-氯-5-氟苯甲腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-(3-吡啶基)丁基]硫代]-4-(三氟甲基)苯甲腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-(5-嘧啶基)丁基]硫代]-4-氯苯甲腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-(3-吡啶基)丁基]硫代]-4-氯-5-氟苯甲腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-(3-吡啶基)丁基]硫代]-4-溴苯甲腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-(2-噻唑基)丁基]氧基]-5-氟-6-甲基-3-吡啶腈；4-[[(1R，3S)-3-氨基-1-(3-氟-2-噻吩基)-4-羟丁基]硫代]-6-甲氧基-3-吡啶腈；
2-[[(1R，3S)-3-氨基-1-(4-氯-5-噻唑基)-4-羟丁基]氧基]-4-氯-5-氟苯甲腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-5-硝基苯甲腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-5-氯-3-吡啶腈；β-氨基-δ-[(4-氨基-2-硝基苯基)硫代]-(β1S，δ1R)-苯丁醇；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-5-溴-苯甲腈；及其可药用盐、对映异构体或消旋体。
除非另有说明，术语″C1-4烷基″此处指具有1-4个碳原子的直或支链烷基。此类基团的实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基及叔丁基。
除非另有说明，术语″C3-6环烷基″此处指具有3-6个碳原子的环烷基。此类基团的实例包括环丙基、环戊基及环己基。
除非另有说明，术语″C2-4链烯基″此处指具有2-4个碳原子且至少包含一个碳-碳双键的直或支链烷基。此类基团的实例包括乙烯基、丙烯基及丁烯基。
除非另有说明，术语″C2-4烷基链炔基″此处指具有2-4个碳原子且至少包含一个碳-碳三键的直或支链烷基。此类基团的实例包括乙炔基、丙炔基及丁炔基。
除非另有说明，术语″C1-4烷氧基″此处指具有1-4个碳原子的直或支链烷氧基。此类基团的实例包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基及叔丁氧基。
术语″C1-4烷硫基″具有类似解释。
除非另有说明，术语″卤素″此处指氟、氯、溴及碘。
任选再包含一个选自O、S或N的杂原子的4-8员饱和氮杂环的实例，包括吡咯烷、哌啶、哌嗪、吗啉及全氢氮杂环庚三烯。
包含一个选自O、S或N的杂原子的4-8员饱和氮杂环的实例，包括吡咯烷、哌啶、四氢呋喃及全氢氮杂环庚三烯。
包含1-3个独立地选自O、S及N的杂原子的五或六员芳香杂环的实例，包括呋喃、噻吩、吡啶、噻唑、咪唑、噁唑、三唑、噁二唑、噻二唑及嘧啶。
包含1-3个独立地选自O、S及N的杂原子的五或六员饱和杂环的实例，包括吡咯烷、四氢呋喃、哌啶及哌嗪。
″任选再被一个或多个氟原子取代的C1-4烷基或C1-4烷氧基″的实例包括CH2F、CHF2、CF3、CF3CF2、CF3CH2、CH2FCH2、CH3CF2、CF3CH2CH2、OCF3及OCH2CF3。
根据本发明，我们提供了具有式(I)结构的化合物，或其可药用盐、对映异构体或消旋体的制备方法，包括(a)将具有式(II)结构的化合物， 其中T、U、X、Y及W如式(I)中所定义，L1表示离去基团，与具有式(III)结构的化合物反应 其中R1、R2、R3、R4、R5、R6及V如式(I)中所定义；或(b)将具有式(IV)结构的化合物 其中T、U、W、X、Y及V如式(I)中所定义，与具有式(V)结构的化合物反应
其中R1、R2、R3、R4、R5及R6如式(I)中所定义，L2为离去基团；并且当期望或必要时，可将具有式(I)结构的产物或其另一种盐转变为其可药用盐；或将一种具有式(I)结构的化合物转变为另一种具有式(I)结构的化合物；以及期望时，可将具有式(I)结构的产物转变为其光学异构体。
方法(a)中，在惰性溶剂中以亲核的式(III)化合物与亲电的式(II)化合物进行反应。合适的离去基团L包括磺酸酯及卤素，尤其为氟或氯。反应通常在非亲核碱，例如氢化钠或碳酸铯的存在下进行。合适的有机溶剂为，例如N，N-二甲基甲酰胺、N-甲基-2-吡咯烷酮、四氢呋喃、乙氰及二甲基亚砜。反应通常在0℃～溶剂沸点温度之间进行。
方法(b)中，采用诸如Mitsunobu条件，反应物(IV)及(V)在合适的惰性溶剂，例如四氢呋喃中偶合。其中，在合适的温度下，通常为0℃～溶剂沸点下以膦衍生物及偶氮衍生物处理反应物。合适的膦衍生物包括三苯基膦及三丁基膦。合适的偶氮衍生物包括偶氮二甲酸二乙酯、偶氮二甲酸二异丙基酯及1，1′-(偶氮二羰基)二哌啶。合适的离去基团L2包括羟基。
或者，在方法(b)中，在惰性溶剂中以亲核的式(IV)化合物与亲电的式(V)化合物进行反应。合适的离去基团L2包括磺酸酯及卤素，尤其为氯或溴。反应通常在非亲核碱，例如氢化钠或碳酸铯的存在下进行。合适的有机溶剂为，例如N，N-二甲基甲酰胺、N-甲基-2-吡咯烷酮、四氢呋喃、乙氰及二甲基亚砜。反应通常在0℃～溶剂沸点温度之间进行。
本领域的技术人员应当明白，在上述方法中，保护胺或羟基或其它具有潜在反应活性的基团是期望的或必须的。合适的保护基及其添加与脱除细节可参见标准文本″Protective Groups in Organic Synthesis″，3rdEdition(1999)byGreene and Wuts。
在一个优选的实施方案中，氨基保护为氨基甲酸酯衍生物，例如，保护为叔丁氧基氨基甲酸酯类。
在另一个具体的优选实施方案中，其中R1表示氢的化合物的氨基及羟基，被同时保护为环状的氨基甲酸酯，例如式(VI)中的结构，或如式(VII)的环状半缩醛胺结构(hemi-aminal)。
使用保护基的具体实例见实施例部分。
本发明包括式(I)化合物的盐形式，特别是酸加成盐。合适的盐包括与有机或无机酸加成的盐。通常，这些酸加成盐可药用，尽管不可药用酸的盐可用于本发明化合物的制备及纯化。其中，优选的盐包括由盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、柠檬酸、酒石酸、乳酸、丙酮酸、乙酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、甲磺酸及苯磺酸形成的盐。
式(I)化合物的盐，可通过游离碱或其盐、对映异构体或消旋体与一个或多个当量的酸反应形成。反应可在盐不溶解的溶剂或介质中进行，或在可溶解盐的溶剂中进行，如水、二噁烷、乙醇、四氢呋喃或乙醚或混合溶剂，其可经真空或冷冻干燥除去。反应可能是复分解过程，或可在离子交换树脂上进行。
或(III)、(V)、(VI)及(VII)的新型中间体形成了本发明另一方面。
式(III)化合物可通过将式(VIII)化合物与有机金属衍生物R2-M反应而进行制备，
其中R1、R3、R4、R5及R6如式(I)中所定义；其中R2如式(I)中所定义，M表示金属残基，例如锂或镁-卤素。其中V表示氧的式(III)化合物，随后可转变为其中V表示硫的式(III)化合物。
或者，式(III)化合物可经式(IX)酰胺与有机金属衍生物R2-M反应而进行制备， 其中R1、R3、R4、R5及R6如式(I)中所定义，其中R2如(I)中所定义，及M表示金属残基，例如锂或镁-卤素，然后将得到的酮还原成相应的醇(III)。
式(II)、(IV)、(VIII)及(IX)化合物为已知的或可按照本领域技术人员熟知的常规方法进行制备。
中间体化合物可直接应用或以保护形式使用。基团的保护及脱除的详细方法可参见标准文本″Protective Groups in Organic Synthesis″，3rdEdition(1999)by Greene and Wuts。
本发明的化合物或其中间体可自反应化合物中分离，若需进一步纯化，可使用标准技术。
式I化合物可以对映异构体形式存在。因此，所有对映异构体、非对映异构体、消旋体及其混合物都包括在本发明范围之内。不同光学异构体可用常规的分离化合物的消旋混合物的技术而进行分离，例如分步结晶或HPLC。
中间体化合物可以对映异构体形式存在，其可以纯化的对映异构体、非对映异构体、消旋体或混合物的形式进行使用。
由于在动物中具有药理活性，式(I)化合物及其可药用盐类、对映异构体及消旋体是有用的。具体地，所述化合物为有效的氧化氮合酶抑制剂。更具体而言，其为诱导型氧化氮合酶抑制剂，并且可预期用用于治疗，如作为消炎药。也用作神经型氧化氮合酶抑制剂。
所述化合物及其可药用盐类、对映异构体及消旋体适合用于治疗或预防疾病或病症，其中氧化氮合酶的合成或过度合成在所述疾病或病症中发挥作用。特别是，化合物适合用于治疗包括人在内的哺乳动物炎症。
特别明确提到的疾病有骨性关节炎、类风湿性关节炎、类风湿性脊柱炎、痛风关节炎及其他关节病、发炎关节；湿疹、牛皮癣、皮炎或其它炎性皮肤病、例如晒斑；炎性眼病、包括葡萄膜炎、青光眼及结膜炎；炎性肺病、例如哮喘、支气管炎、慢性堵塞性肺病、鸽子爱好者疾病、农民肺、急性呼吸窘迫综合征；菌血症、endotoxaemia(脓毒性休克)、口疮性溃疡、齿龈炎、pyresis、疼痛、脑膜炎及胰腺炎；胃肠道疾病包括炎性肠病、节段性肠炎(Crohn′s disease)、萎缩性胃炎、痘疮样胃炎(gastritis varialoforme)、溃疡性结肠炎、下腹病、局部回肠炎、消化性溃疡、过敏性肠道综合征、反流性食管炎、感染对胃肠道的损伤、例如由幽门螺杆菌或非甾体抗炎药治疗引起；及其它炎性疾病。
化合物也可用于治疗及减轻急性疼痛或持续性炎性疼痛或神经病理疼痛或中枢相关疼痛。
我们尤其感兴趣于炎性肠病、类风湿性关节炎、骨性关节炎、慢性堵塞性肺炎及疼痛。
式(I)化合物及其可药用盐、对映异构体及消旋体可用于治疗或预防上述以外的其它疾病或病症。例如，化合物可用于治疗动脉硬化、囊性纤维化、感染性休克和/或中毒性休克关联的低血压、免疫系统功能不良、器官移植中短期使用的免疫抑制佐剂、控制糖尿病的发作、维持糖尿病人胰腺的功能、用于治疗糖尿病血管并发症，以及于细胞因子，例如TNF或白介素联用。
式(I)化合物可用于治疗缺氧，例如心脏病及中风、神经退行性病变，包括神经退化和/或坏死，用于治疗诸如局部缺血、缺氧、缺血(hypoglycaemia)、癫痫症，及用于治疗外伤(例如，脊柱及头损伤)、高压氧惊厥及中毒、痴呆，例如早老性痴呆、阿尔茨海默病及艾滋病相关痴呆、Sydenham舞蹈病、帕金森病、Tourette综合征、亨廷顿舞蹈病、肌萎缩侧索硬化、多发性硬化症、肌营养不良、Korsakoff病、脑血管病所致低能、睡眠病，精神分裂症、抑郁、疼痛、孤独、季节性情感障碍、jet-lag、经期前综合症(PMS)相关的抑郁或其它症状、焦虑及感染性休克。式(I)化合物预期可用于预防及逆转药物成瘾或药物耐受，例如耐受阿片类及二氮杂卓； 治疗药物成瘾；治疗偏头痛及其它血管性头痛、神经炎；治疗胃肠活动病(gastrointestinal motility disorders)，癌症及用于引产。
我们尤其关注中风、阿尔茨海默病、帕金森病、多发性硬化症、精神分裂症、偏头痛、癌症、感染性休克及疼痛。
预期预防特别地涉及对刚遭受或处于上述疾病高风险时刻的相关人员治疗。易患人群一般包括具有该病的家族史，或通过基因测试或筛选已确认为易患该病的人群。
对于上述治疗适应症，使用的剂量当然视使用的化合物、使用方式及期望的治疗而不同。然而，总的来说，当化合物以固体形式使用的剂量在1～2000mg/天时可获满意的效果。
式(I)化合物，及其可药用的衍生物，可以其自身或适合的药物组合物形式应用，药物组合物中化合物或衍生物可与可药用佐剂、稀释剂或载体混合。其应用可为，但不限于肠(包括口、舌下或直肠)、鼻内、吸入、静脉、局部或其它肠道外途经。合适药学制剂的选择或制备的常规方法已在诸如″Pharmaceuticals-The Science of Dosage Form Designs″，M.E.Aulton，ChurchillLivingstone，1988中描述。药物组合物优选包括不少于80％及更优选不少于50％式(I)化合物，或其可药用盐、对映异构体或消旋体。
根据本发明，我们进一步提供一种药学组合物，其包括式(I)化合物或其药用盐、对映异构体或消旋体，以及可药用的佐剂、稀释剂或载体。
本发明还提供了一种制备药物组合物的方法，其包括将组分混合。
式(I)化合物，及其可药用衍生物可有利地与COX抑制剂联用，更具体而言与COX-2抑制剂联用。特别优选的COX-2抑制剂为塞来西布及MK-966。NOS抑制剂及COX-2抑制剂可同时配置在相同的药物组合物中且以单一剂量单位使用，或每种组分单独制剂，分开的剂量可同时或先后使用。
本发明以下列实施例阐明，但不限于这些实施例使用了下述缩写DMSO(二甲基亚砜)，DMF(N，N-二甲基甲酰胺)，THF(四氢呋喃)，NMP(N-甲基吡咯烷酮)。
实施例12-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-甲基-3-吡啶腈乙二酸盐a)(4S)-4-[(2S)-2-羟基-2-苯乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸1，1-二甲基乙基酯及(4S)-4-[(2R)-2-羟基-2-苯乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸1，1-二甲基乙酯在0℃氮气氛围下，将溴化苯基镁(34ml，1M的四氢呋喃溶液)加入至搅拌的1，1-二甲基乙基(4S)-2，2-二甲基-4-(2-氧代乙基)-3噁唑烷羧酸酯(6.9g)干燥四氢呋喃(100ml)溶液中。在加入过程中放热升温至20℃，混合物在该温度下反应3小时。加入5％柠檬酸水溶液(100ml)结束反应，以乙酸乙酯(150ml)萃取产品。有机层经干燥(MgSO4)，浓缩后得油状物。非对映异构体的粗品以层析方法纯化(硅胶，10％乙醚/异己烷作为流动相)得到(4S，2S)目标化合物(3.5g，38％)，为无色固体。
1HNMR 400MHz(CDCl3)δ7.4-7.2(5H，m)，4.88(1H，d)，4.65(1H，m)，4.35(1H，m)，4.0(1H，m)，3.65(1H，d)，2.1-2(1H，m)，1.85-1.95(1H，m)，1.6(3H，s)，1.49(12H，s).
进一步洗脱得到无色固体的(4S，2R)目标化合物(2.5g，27％)。
1HNMR 400MHz(CDCl3)7.4-7.3(5H，brs)，4.77-4.73(1H，m)，4.3-3.7(3H，m)，2.2-2(2H，m)，1.6-1.4(15H，m).
b)(4S)4-[(2R)-2-(苯甲酰基硫代)-2-苯乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸1，1-二甲基乙酯在0℃下，用5分钟将偶氮二甲酸二异丙酯(1.84ml)滴加入步骤(a)制得的(4S，2S)产品(3g)及三(4-氯苯基)膦的干燥四氢呋喃溶液中。加入完毕，搅拌混合物20分钟，然后加入硫代苯甲酸(1.1ml)。撤掉冷却浴，继续搅拌过夜。浓缩混合物，剩余物以层析方法纯化(硅胶，10％乙醚/异己烷作为流动相)得到目标化合物(1.2g，29％)，为黄色固体。
MS APCI+vem/z342([M+H-Boc]+).
c)1，1-二甲基乙基(4S)4-[(2R)-2-[(3-氰基-6-甲基-2-吡啶基)硫代]-2-苯乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯步骤(b)的产物(440mg)、2-氯-6-甲基-3-吡啶腈(229mg)、碳酸钠(159mg)及水(1ml)的甲醇(10ml)混合物在室温搅拌17小时。混合物以水(50ml)稀释，乙醚萃取(2×50ml)。合并萃取物，干燥(MgSO4)后浓缩得油状物，以层析方法纯化(硅胶，10％乙醚/异己烷作为流动相)得到保护的氨基醇。
MS APCI+vem/z454[M+H]+.
d)2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-甲基-3-吡啶腈乙二酸盐步骤(c)的所有产品溶于乙二醇(2ml)中，加入吡啶甲苯磺酸盐晶体，溶液在190℃加热10分钟。混合物冷却至室温，以甲醇(50ml)稀释，用SCX树脂搅拌溶液。过滤，收集树脂并以氨的甲醇溶液处理。将氨溶液浓缩至干，剩余物以层析方法纯化(硅胶，10％7M氨甲醇的二氯甲烷溶液作为流动相)得到游离碱(70mg，22％)。使用等当量的乙二酸乙醇溶液，使胺转化为乙二酸盐，得到目标化合物。
MS APCI+vem/z314[M+H]+.
1HNMR 400MHz(d6-DMSO)8.1-7.2(7H，m)，5.33(1H，t)，3.6-3.4(2H，m)，2.93(1H，br m)，2.59(3H，s)，2.35-2.2(2H，m).
实施例22-[[(3S)-3-氨基-4-羟基-1-(3-异噁唑基)丁基]硫代]-6-甲基-3-吡啶腈乙二酸盐a)(4S)-4-[2-(3-异噁唑基)-2-氧代乙基]-2-噁唑烷酮在氮气氛围下，二溴甲烷(0.4g)加入锌屑(1.3g)的干燥四氢呋喃(4ml)悬液中，升温至约60℃。立即冷至室温后，再加入二溴甲烷(0.4g)，重复升温/冷却循环。加入四氢呋喃(5ml)及三甲基氯硅烷(0.2ml)，混合物搅拌2分钟。将(4R)-4-(碘甲基)-2-噁唑烷酮(2.26g)的四氢呋喃溶液(4ml)滴加入反应液中(有轻微的放热现象)，在30℃加热反应1小时。冷却至室温后，加入四氢呋喃(6ml)，悬液静置1小时。-78℃氮气氛围下，用5分钟用套管将上层液转移至氯化锂(0.84g)及氰化亚铜(0.88g)的四氢呋喃溶液中(盐先前于室温搅拌10分钟)。混合物升温至0℃，再冷却至-78℃，加入3-异噁唑甲酰氯(0.78g)的四氢呋喃(1ml)溶液。1小时后，混合物升温至-10℃，缓慢升至室温，放置16个小时。将反应混合物倾入乙酸乙酯及饱和氯化铵溶液中，滤过Celite。分离有机层，以水及盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸干溶剂，剩余物以层析方法纯化(硅胶，25-100％乙酸乙酯/异己烷作为流动相)得到油状的固体目标化合物(0.82g，70％)。
1HNMR 400MHz(d6-DMSO)9.15(1H，s)，7.71(1H，s)，6.95(1H，s)，4.50(1H，t)，4.26(1H，五重峰)，4.03(1H，dd)，3.44(1H，dd)，3.30(1H，m).
b)(4S)-4-[2-羟基-2-(3-异噁唑基)乙基]-2-噁唑烷酮在0℃将硼烷(4.16ml，1M的四氢呋喃溶液)加入至(R)-2-甲基-CBS-噁唑硼烷(oxazaborolidine)(0.42ml，1M的甲苯溶液)的四氢呋喃(4ml)溶液中。10分钟后，用5分钟加入(4S)-4-[2-(3-异噁唑基)-2-氧代乙基]-2-噁唑烷酮(0.82g)的四氢呋喃(3ml)溶液，所得溶液0℃搅拌1小时，20℃搅拌18小时。加入甲醇(25ml)，搅拌混合物15分钟。浓缩混合物，再溶解于甲醇及真空浓缩，该过程重复2次以上。剩余物以层析方法纯化(硅胶，乙酸乙酯作为流动相)得到无色油状的目标化合物(0.55g)，NMR分析为1.5∶1的非对映异构体混合物。
1HNMR 400MHz(d6-DMSO)(主要非对映异构体)8.27(1H，s)，7.83(1H，s)，6.56(1H，s)，5.70(1H，d)，4.83(1H，m)，4.45-4.37(1H，m)，4.00(2H，m)，2.01-1.82(2H，m).
c)(4S)-4-[2-(苯甲酰基硫代)-2-(3-异噁唑基)乙基]-2-噁唑烷酮在0℃氮气氛围下，将偶氮二甲酸二异丙酯(1.15ml)滴加入三苯基膦(1.45g)的四氢呋喃(30ml)溶液中。45分钟后，滴加入硫代苯甲酸(0.77g)及步骤(a)产品(0.547g)的四氢呋喃(10ml)溶液。将溶液升温至室温，搅拌16小时。蒸干溶剂，剩余物以层析方法纯化(硅胶，2～75％乙酸乙酯/异己烷作为流动相)得到油状固体的目标化合物(1.2g)(1.5∶1非对映异构体混合物)。
1HNMR 400MHz(d6-DMSO)8.91(1H，s)，8.02-7.53(6H，m)，6.71(1H，s)，5.08(1H，dd)，4.33(1H，t)，4.01(1H，dd)，3.76(1H，五重峰)，2.34(1H，m)，2.17(1H，m).
d)2-[[1-(3-异噁唑基)-2-[(4S)-2-氧代噁唑烷基]乙基]硫代]-6-甲基-3吡啶腈将步骤(c)(0.6g)的产物溶于7M氨的甲醇(8ml)溶液中，氮气氛围下室温搅拌2小时，然后蒸干溶剂。剩余物溶于DMF(5ml)中，加入碳酸铯(0.85g)及2-氯-6-甲基-3-吡啶腈(0.2g)的混合物。搅拌3小时后，加入乙酸乙酯及水，分离有机层。水层进一步以乙酸乙酯萃取。合并有机层，以1M氢氧化钠水溶液及盐水洗涤，干燥(Na2SO4)。蒸干溶剂，剩余物以层析方法纯化(硅胶，40～80％乙酸乙酯/异己烷作为流动相)得到目标化合物(0.15g)(3∶1对映异构体混合物)，为油状固体。
1HNMR 400MHz(d6-DMSO)8.92(1H，d)，8.13(1H，d)，8.01(1H，bs)，7.25(1H，d)，6.74(1H，d)，5.45(1H，dd)，4.30(1H，t)，4.00(1H，dd)，3.74(1H，m)，2.58(3H，s)，2.40-2.20(2H，m).
e)1，1-二甲基乙基(4S)-4-[2-[(3-氰基-6-甲基-2-吡啶基)硫代]-2-(3-异噁唑基)乙基-2-氧代-3-噁唑烷羧酸酯依次将三乙胺(0.10ml)、碳酸，(1，1-二甲基乙氧基)羰基1，1-二甲基乙酯(0.15g)及二甲基氨基吡啶(13mg)加入到步骤(d)产物(0.15g)的四氢呋喃(2ml)溶液中，然后搅拌16小时。加入乙醚及水，分离有机层。有机层以硫酸氢钾水溶液及盐水洗涤，干燥(Na2SO4)。蒸干溶剂，剩余物以层析方法纯化(硅胶，40-50％乙酸乙酯的异己烷溶液作为流动相)得到目标化合物(70mg)，为白色固体。
1HNMR 400MHz(d6-DMSO)(主要非对映异构体)8.91(1H，d)，8.15(1H，d)，7.27(1H，d)，6.74(1H，d)，5.47(1H，dd)，4.50-4.30(3H，m)，2.57(3H，s)，2.60-2.40(2H，m)，1.44(9H，s).
f)1，1-二甲基乙基[(1S)-3-[(3-氰基-6-甲基-2-吡啶基)硫代]-1-(羟基甲基)-3(3-异噁唑基)丙基]氨基甲酸酯将碳酸铯(0.01g)加入步骤(e)产品(70mg)的甲醇(2.4ml)溶液中，搅拌溶液3小时。加入乙酸乙酯及水，分离有机层。有机层以盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，浓缩后所得的剩余物以层析方法纯化(硅胶，50-60％乙酸乙酯/异己烷作为流动相)得到目标化合物(54mg)，为白色固体。
1HNMR 400MHz(CDCl3)(主要非对映异构体)8.38(1H，d)，7.72(1H，d)，7.00(1H，d)，6.43(1H，d)，5.42(1H，d)，5.22(1H，s)，3.80-3.67(2H，m)，3.61(1H，dt)，2.66(3H，s)，2.54(2H，m)，2.20(1H，m)，1.45(9H，s).
g)2-[[(3S)-3-氨基-4-羟基-1-(3-异噁唑)丁基]硫代]-6-甲基-3吡啶腈乙二酸盐将步骤(f)的产物(60mg)溶于4M HCl的二噁烷(5ml)中。2小时后，除掉挥发性成份，剩余物溶于甲醇并通过SCX离子交换树脂，先以甲醇洗脱，再以7M氨的甲醇溶液洗脱。除去溶剂，得到目标化合物的游离碱(50mg)。将游离碱溶于乙氰(3ml)及甲醇(1ml)，加入乙二酸(14mg)的乙醚溶液。除去溶剂，加入乙酸乙酯，滤出晶体，干燥得到乳状固体的目标化合物(30mg)，其为80∶20(1R)∶(1S)的对映异构体混合物。
MS APCI+vem/z305[M+H]+.
1HNMR 400MHz(d6-DMSO)8.92(1H，d)，8.16(1H，d)，7.99(ca.2H，vbs)，7.29(1H，d)，6.68(1H，d)，5.55(1H，t)，3.63(1H，dd)，3.52(1H，dd)，3.20(1H，bs)，2.58(3H，s)，2.40-2.20(2H，m).
实施例3
4-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-甲基-3-吡啶腈乙二酸盐a)1，1-二甲基乙基(4S)-4-[(2R)-2-[(5-氰基-2-甲基-4-吡啶基)硫代]-2-苯乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯实施例1步骤(b)的产物(406mg)以7M氨的甲醇(30ml)溶液处理，室温搅拌6小时。蒸干溶剂，剩余物溶于干燥的DMF(25ml)中，先在氮气氛围下以4-氯-6-甲基-3-吡啶腈(154mg)处理，然后以碳酸铯(600mg)处理。搅拌反应混合物24小时，倾入至乙酸乙酯及盐水中，分离有机层，先后以水(5次)及盐水洗涤，干燥(MgSO4)。溶剂蒸干后，剩余物以层析方法纯化(硅胶，5％乙酸乙酯/二氯甲烷作为流动相)得到粘稠油状目标化合物(177mg，42％)。
MS APCI+vem/z454[M+H]+.
b)4-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-苯丁基]硫代]-6-甲基-3-吡啶腈乙二酸盐将实施例3步骤(a)的产物(177mg)在4M HCl的二噁烷(5ml)及甲醇(5ml)溶液中搅拌1小时。浓缩反应混合物，以乙醚共蒸(3次)，然后以等当量乙二酸的乙醇(10ml)溶液处理。所得透明溶液以乙醚处理直至沉淀完全，过滤收集固体，以乙醚洗涤，40℃真空干燥2小时得到淡棕色固体的目标化合物(76mg，48％)。
MS APCI+vem/z14[M+H]+.
1HNMR 300MHz(d6-DMSO)8.7(1H，s)，7.54(3H，m)，7.40(2H，m)，7.31(1H，m)，5.15(1H，t)，3.48(1H，dd)，3.38(1H，m)，2.90(1H，brm)，2.50(3H，s)，2.30(1H，m)，2.14(1H，m).
实施例43-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-5-(三氟甲基)-2-吡啶腈乙二酸盐a)(4S)-4-[(2R)-2-[[2-氰基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]硫代]-2-苯乙基-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸1，1-二甲基乙酯将实施例1步骤(b)的产物(411mg)在7M氨的甲醇(30ml)溶液中搅拌6小时。蒸干溶剂，剩余物溶于干燥的DMF(25ml)中。并在氮气氛围下，先将混合物与3-氯-5-(三氟甲基)-2-吡啶腈(210mg)相搅拌，再以碳酸铯(610mg)处理。将混合物在氮气氛围下室温搅拌过夜，倾入盐水及乙酸乙酯中，分离有机层，先以水(5次)洗，然后以盐水洗，干燥(MgSO4)。蒸干溶剂，剩余物以层析方法纯化(硅胶，5％乙酸乙酯/异己烷作为流动相)得到粘稠油状的目标化合物(190mg，40％)。
MS APCI+vem/z408[M-Boc+1]+.
b)3-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-5-(三氟甲基)-2-吡啶腈乙二酸盐将实施例4步骤a)的产品(190mg)在4M HCl的二噁烷(5ml)及甲醇(5ml)溶液中搅拌1小时。浓缩反应混合物，以碳酸氢钠水溶液及乙酸乙酯处理，然后分离有机层，干燥(MgSO4)。浓缩反应混合物，然后以等当量乙二酸的乙醇(10ml)溶液处理。浓缩溶液，剩余物以乙氰及几滴乙醚处理得到无色固体沉淀，过滤收集固体，以乙醚洗涤，干燥得到淡棕色的目标化合物(133mg，78％)。
MS APCI+vem/z368[M+H]+.
1HNMR 300MHz(d6-DMSO)8.98(1H，s)，8.33(1h，s)，7.34(5H，m)，5.04(1H，t)，3.58(1H，dd)，3.48(1H，m)，3.05(1H，m)，2.33(1H，m)，2.18(1H，m).
实施例52-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-(二氟甲基)-3-吡啶腈(E)-丁烯二酸盐a)6-(二氟甲基)-2-(甲硫基)-3-吡啶腈在氮气氛围下，先将三氟化[双(甲氧基乙基)氨基]硫(2ml)加入到6-甲酰基-2-(甲硫基)-3-吡啶腈(1g)的二氯甲烷溶液中，再加入乙醇(0.05ml)。16小时后，将反应混合物小心倾入饱和的碳酸氢钠水溶液中。分离有机层，水层进一步以二氯甲烷萃取。合并有机层，干燥(硫酸钠)，除去溶剂。剩余物溶于甲醇，通过SCX离子交换树脂，以甲醇洗脱。除去溶剂得到黄色固体的目标产品(1.2g)。
1HNMR 400MHz(CDCl3)7.93(1H，d)，7.38(1H，d)，6.59(1H，t)，2.65(3H，s).
b)6-(二氟甲基)-2-(甲磺酰基)-3-吡啶腈在0℃将3-氯过氧苯甲酸(6.8g，最低57％纯度)加入到实施例5步骤(a)产品(1.2g)的二氯甲烷(12ml)溶液中。反应加热至室温，搅拌2小时。反应混合物以0.5M碳酸氢钠水溶液洗涤，干燥(Na2SO4)。蒸干溶剂，残留物溶于乙醚。有机层以偏亚硫酸氢钠水溶液、冰冷的氢氧化钠水溶液基盐水洗涤，然后干燥(Na2SO4)。蒸干溶剂得到淡黄色油状的目标化合物(0.58g)。
1HNMR 400MHz(CDCl3)8.44(1H，d)，8.03(1H，d)，6.72(1H，t)，3.42(3H，s).
c)(4S)-4-[[(2R)-2-[[3-氰基-6-(二氟甲基)-2-吡啶基]硫代]-2苯乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸1，1-二甲基乙酯根据实施例4步骤(a)的方法，使用实施例1步骤(b)的产物及6-(二氟甲基)-2-(甲磺酰基)-3-吡啶腈制备目标化合物，经层析(硅胶，5％乙酸乙酯的异己烷溶液作为流动相)纯化后，得到粘稠油状的目标化合物(252mg，74％)。
MS APCI+vem/z390[M-Boc+1]+.
d)2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-(二氟甲基)-3吡啶腈(E)-丁烯二酸盐步骤(c)的产物按照实施例4步骤(b)所述的方法脱保护，然后转变为(E)-丁烯二酸盐，通过加入等当量的富马酸得到无色泡沫状的目标化合物(121mg，51％)。
MS APCI+vem/z350[M+H]+.
1HNMR 300MHz(d6-DMSO)8.40(1H，d)，7.59(1H，d)，7.52(2H，d)，7.31(3H，m)，7.10(1H，t)，6.45(2H，s)，5.35H，q)，3.38(2H，m)，2.75(1H，brm)，2.31(1H，m)，2.18(1H，m).
实施例62-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-(氟甲基)-3吡啶腈(E)-丁烯二酸盐a)6-(氟甲基)-2(甲硫基)-3-吡啶腈将硼氢化钠(0.212g)加入到6-甲酰基-2-(甲硫基)-3-吡啶腈(1g)的乙醇(12ml)溶液中。2小时后，除去挥发性物质，加入乙酸乙酯及水。分离有机层，进一步以乙酸乙酯萃取水层。合并有机层，干燥(Na2SO4)，除去溶剂得到6-(羟基甲基)-2-(甲硫基)-3-吡啶腈(1g)，为黄色固体。在氮气氛围下，将该固体溶于二氯甲烷，加入三氟化[双(甲氧基乙基)氨基]硫(1ml)的二氯甲烷(3ml)溶液。反应16小时后，将反应物小心倾入饱和的碳酸氢钠水溶液中。分离有机层，干燥(Na2SO4)，除去溶剂。剩余物溶于甲醇，通过SCX离子交换树脂，以甲醇洗脱。除去溶剂得到目标产物(0.88g)，为黄色固体。
1HNMR 400MHz(CDCl3)7.85(1H，d)，7.23(1H，d)，5.48(2H，d)，2.60(3H，s).
b)6-(氟甲基)-2-(甲磺酰基)-3-吡啶腈利用实施例6步骤(a)的产物及3-氯过氧苯甲酸，按照实施例5步骤(b)所述的方法制备目标化合物。得到的产物为淡绿色油状物，静置即固化。
1HNMR 400MHz(CDCl3)8.33(1H，d)，7.87(1H，d)，5.60(2H，d)，3.37(3H，s).
c)(4S)-4-[[(2R)-2-[[3-氰基-6-(氟甲基)-2-吡啶基]硫代]-2-苯乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸1，1-二甲基乙酯利用实施例1步骤(b)的产物及6-(氟甲基)-2-(甲磺酰基)-3-吡啶腈，按照实施例4步骤(a)所述方法制备目标化合物。层析后得到(硅胶，10-30％乙醚的异己烷溶液作为流动相)白色泡沫状的目标化合物(318mg)。
1HNMR 400MHz(d6-DMSO)8.26(1H，d)，7.46(2H，d)，7.35(3H，m)，7.25(1H，t)，5.76-5.44(2H，m)，5.14(1H，dd)，4.00-3.53(3H，brm)，2.50-2.00(2H，m)，1.46-1.36(15H，m).
d)2-[[(1R，3 S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-(氟甲基)-3吡啶腈(E)-丁烯二酸盐步骤(c)的产物按照实施例4步骤(b)方法进行脱保护，然后转化为(E)-丁烯二酸盐，其通过加入等当量的富马酸得到白色泡沫状的目标化合物(224mg)。
MS APCI+vem/z332[M+H]+.
1HNMR 400MHz(CD3OD)8.07(1H，d)，7.49(2H，m)，7.3 8-7.27(4H，m)，6.68(2H，s)，5.62(1H，q)，5.49(1H，t)，3.69(1H，dd)，3.555(1H，dd)，3.26(1H，m)，2.43(1H，ddd)，2.34(1H，ddd).
实施例72-[[(1R，3S-3-氨基-4-羟基-1-(3-吡啶基)丁基]氧基]-4-氯-5-氟苯甲腈二盐酸盐a)1，1-二甲基乙基(4S)-4-[(2R)-2-羟基-2-(3-吡啶基)乙基]-2，2-二甲基-3噁唑烷羧酸酯目标化合物如实施例1步骤(a)制备，得到无色油状物更强极性的的对映异构体。
MS APCI+ve m/z 222[M+H-Boc]+.
b)1，1-二甲基乙基(4S)-4-[(2R)-2-(5-氯-2-氰基-4-氟苯氧基)-2-(3-吡啶基)乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯将氢化钠(60％，矿物油中)(24mg)小心加入到搅拌的4-氯-2，5-二氟苯甲腈(90mg)及步骤(a)的产物(165mg)的干燥DMF(5ml)溶液中，持续搅拌2小时。加入水结束反应，以乙酸乙酯萃取两次，干燥(Na2SO4)萃取物，浓缩。剩余物以层析方法纯化(硅胶，10％乙酸乙酯/己烷作为流动相)得到无色泡沫状的目标化合物(220mg)。
MS APCI+vem/z376[M+H-Boc]+c)2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-(3-吡啶基)丁基]氧基]-4-氯-5氟苯甲腈二盐酸盐将步骤(b)的产物(220mg)与甲醇(1ml)及4M氯化氢的二噁烷(2ml)混合物搅拌2小时。浓缩反应物，以乙醚研磨得到白色固体目标化合物(130mg)。
MS APCI+vem/z336[M+H]+.
1HNMR 400MHz(d6-DMSO)8.95(1H，s)，8.75(1H，d)，8.27-8.21(4H，m)，8.06(1H，d)，7.81-7.78(1H，t)，7.62(1H，d)，6.23-6.20(1H，m)，3.72-3.65(1H，dd)，3.61-3.58(1H，m)，3.3-3.2(1H，brs)，2.40-2.31(1H，m)，2.27-2.20(1H，m).
实施例82-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-(2-噻唑基)丁基]氧基]-4-氯-5-氟苯甲腈乙二酸盐a)1，1-二甲基乙基(4S)-4-[(2S)-2-羟基-2-(2-噻唑基)乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯及1，1-二甲基乙基(4S)-4-[(2R)-2-羟基-2-(2-噻唑基)乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯在室温氮气氛围下，将2-(三甲基甲硅烷基)噻唑(10.6ml)加入至搅拌下的(4S)-2，2-二甲基-4-(2-氧代乙基)-3-噁唑烷羧酸1，1-二甲基乙酯(10.75g)的干燥二氯甲烷(225ml)溶液中。然后，混合物室温搅拌18小时，将得到的混合物浓缩至干，剩余物溶解在四氢呋喃(27ml)中，加入氟化四丁基铵(1.0M的四氢呋喃溶液，6ml)。然后，反应物室温搅拌2小时。所得混合物蒸干，加入水(80ml)，混合物以二氯甲烷萃取4次。合并有机层，以盐水洗涤，干燥(MgSO4)后浓缩至油状物。非对映异构体粗品混合物以层析方法纯化(硅胶，20-60％乙酸乙酯/异己烷作为流动相)得到淡黄色油状非(4S，2S)异构体(7.6g)。
MSAPCI+vem/z329[M+H]+.
1HNMR 400MHz(CDCl3)7.71(1H，d)，7.28(1H，d)，5.14(1H，m)，5.07(1H，m)，4.20(1H，m)，4.05(1H，m)，3.85(1H，m)，2.20-2.50(2H，m)，1.48(15H，m).
进一步洗脱得到无色固体(4S，2R)异构体(6.4g)。
MS APCI+vem/z329[M+H]+.
1HNMR 400MHz(CDCl3)7.72(1H，d)，7.28(1H，d)，5.68(1H，d)，4.94(1H，m)，4.35(1H，m)，4.04(1H，m)，3.71(1H，d)，2.42(1H，m)，1.90(1H，m)，1.62(3H，s)，1.53(3H，s)，1.51(9H，s).
b)(4S)-4-[(2R)-2-(5-氯-2-氰基-4-氟苯氧基)-2-(2-噻唑基)乙基-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸1，1-二甲基乙酯在室温下，将氢化钠(60％，油中，385mg)加入到步骤(a)(4S，2R)异构体(3g)及4-氯-2，5二氟苯甲腈(1.59g)的包括干燥的DMF(10ml)的干燥四氢呋喃(100ml)中。加入完毕后，混合物搅拌18小时，然后倾入水(60ml)中，以乙醚(3次)萃取。合并有机层，盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸干混合物得到油状物，其经硅胶柱纯化，用20-25％乙酸乙酯异己烷溶液作为流动相。分离得到黄色油状的目标化合物(4.0g，91％)。
MS APCI+vem/z482/4[M+H]+.
c)2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-(2-噻唑基)丁基]氧基]-4-氯-5-氟苯甲腈乙二酸盐将4M HCl的二噁烷溶液加入至步骤(b)产物(4.0g)的甲醇(100ml)溶液中，混合物20℃搅拌1.5小时，然后蒸干。剩余物溶解于碳酸氢钠水溶液中，以乙酸乙酯萃取(四次)。合并萃取物，盐水洗涤，干燥(MgSO4)及以层析纯化(硅胶，乙酸乙酯，然后是10％(7M氨的甲醇溶液)的二氯甲烷溶液作为流动相)得到混合物，其经浓缩溶解于乙醇及乙氰混合物中。将乙二酸(730mg)的乙醚溶液加入到所述混合物，蒸干反应物，然后以乙醇、乙氰及乙醚混合物重结晶，得到白色固体的目标化合物(2.14g)。
MS APCI+vem/z342/4[M+H]+.
1HNMR 400MHz(d6-DMSO)8.07(1H，d)，7.899(1H，d)，7.84(1H，d)，7.70(1H，d)，6.24(1H，m)，3.67(1H，m)，3.55(1H，m)，3.29(1H，m)，2.30-2.44(2H，m).
实施例92-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-(5-异噻唑基)丁基]氧基]-4-氯-5-氟苯甲腈盐酸盐a)1，1-二甲基乙基(4S)-4-[(2S)-2-羟基-2-(5-异噻唑基)乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯及1，1-二甲基乙基(4S)-4-[(2R)-2-羟基-2-(5-异噻唑基)乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯在氮气氛围下，将异噻唑(1.42g)的干燥四氢呋喃(50ml)溶液冷却至-78℃，滴加入丁基锂(1.6M的己烷溶液，10.3ml)同时保持温度低于-70℃。所得红色溶液在-78℃搅拌1小时，然后用5分钟加入1，1-二甲基乙基(4S)-2，2-二甲基-4-(2-氧代乙基)-3-噁唑烷羧酸酯(4g)的干燥四氢呋喃(20ml)溶液。加入完毕后，撤掉冷却设备，搅拌反应物30分钟。将反应物倾入水(150ml)中，以乙醚(2×150ml)萃取产物。合并萃取物，干燥(MgSO4)后浓缩至油状物。层析(硅胶，50％异己烷的乙醚溶液作为流动相)纯化得到无色油状的(4S，2S)目标化合物(600mg)。
MS APCI+vem/z329[M+H]+.
进一步洗脱得到无色油状的(4S，2R)目标化合物(500mg)。
MS APCI+vem/z329[M+H]+.
b)2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-(5-异噻唑基)丁基]氧基]-4-氯-5-氟苯甲腈盐酸盐将步骤(a)的(4S，2R)异构体(500mg)在干燥四氢呋喃(20ml)及干燥DMF(2ml)中的混合溶液，以4-氯-2，5-二氟苯甲腈(416mg)处理。在氮气氛围下，加入氢化钠(60％，分散在矿物油中，91mg)。混合物在20℃搅拌3小时。将反应混合物倾入水(100ml)中，产物以乙醚(2×100ml)萃取。合并萃取物，干燥(MgSO4)，浓缩成油状物。主要产物以硅胶柱层析(25％乙醚/异己烷作为流动相)分离，溶于甲醇(5ml)中。溶液以4M HCl的二噁烷(2ml)溶液处理，搅拌2小时。蒸干溶液，以乙氰研磨，得到无色固体的目标化合物(190mg)。
MS APCI+vem/z342[M+H]+.
1HNMR 400MHz(d6.DMSO)8.57(1H，s)，8.07(1H，d)，8.1(3H，brs)，7.67(1H，d)，7.54(1H，s)，6.5(1H，dd)，5.41(1H，t)，3.7-3.5(2H，m)，3.25(1H，brm)，2.4-2.2(2H，m).
实施例104-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-甲氧基-3-吡啶腈(E)-丁烯二酸盐a)(3S)-3-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-4-羟基-丁酸苯甲酯在5℃用1小时将N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-1-(2，5-二氧代-1-吡咯烷基))L-天冬氨酸4-(苯甲基)酯(75.0g)的四氢呋喃(200ml)溶液加入至硼氢化钠(6.84g)的四氢呋喃(60ml)及水(90ml)悬液中(内温保持在15℃以下)。再加入硼氢化钠(6.8g分成两批)，搅拌45分钟。将混合物倾入搅拌下半饱和的冷氯化铵溶液(600ml)中，以乙酸乙酯萃取(2次)。有机层经干燥(MgSO4)，浓缩得到目标化合物(56.24g)，为蜡状固体。
MS APCI+vem/z210[M+H-BOC]+.
1HNMR 300MHz(CDCl3)7.41-7.27(5H，m)，5.24-5.10(3H，m)，4.15-3.96(1H，m)，3.71(2H，d)，2.69(2H，d)，1.44(9H，s).
b)(4S)-3-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-2，2-二甲基-4-噁唑烷乙酸苯甲酯在0℃下，用20分钟将2-甲氧基丙烯(46ml)加入至步骤a)产物(74.88g)、2，2-二甲氧基丙烷(30ml)及对甲苯磺酸(1.21g)的二氯甲烷(300ml)溶液中，在0℃搅拌1小时，再在20℃搅拌1小时。加入1M NaHCO3，混合物以二氯甲烷萃取(3×200ml)。有机层经干燥(MgSO4)，浓缩后得到无色油状物，将该油状物溶于甲苯(300ml)中，加入2，2-二甲氧基丙烷(45ml)及对甲苯磺酸(1.2g)，将混合物在80℃加热2小时。冷却后，加入碳酸钾，混合物以乙酸乙酯萃取(两次)。有机层经干燥(MgSO4)，浓缩后得到淡黄色油状的目标化合物(83.8g)。
1HNMR 300MHz(CDCl3)7.36-7.28(5H，m)，5.12(2H，d)，4.38-3.97(2H，m)，3.84(1H，d)，3.05-2.48(2H，m)，1.62-1.50(6H，m)，1.46(9H，s).
c)(4S)-3-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-2，2-二甲基-4-噁唑烷乙酸将钯-碳(10％，3.8g)及步骤b)(83.8g)产物的乙醇(250ml)悬液在氢气氛围下搅拌(4个大气压)3.5小时(有5.31氢气被吸收)。混合物滤过Celite，浓缩。加入乙酸乙酯(100ml)及1M K2CO3(200ml)，分离有机层，进一步以1MK2CO3(40ml)及1M NaHCO3(40ml)萃取。水层以乙酸乙酯洗涤，合并，在0℃下滴加4M HCl(130ml)酸化。水层以乙酸乙酯(3×200ml)萃取，有机层经干燥(MgSO4)，浓缩后得到目标化合物(56.24g)，其为缓慢结晶的浅橙色胶状物。
1HNMR 300MHz(CDCl3)4.33-4.12(1H，m)，4.09-4.00(1H，m)，3.86(1H，d)，3.02-2.77(1H，m)，2.62-2.50(1H，m)，1.62-1.54(6H，m)，1.53(9H，s).
d)(4S)-4-[2-(甲氧基甲基氨基)-2-氧代乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸1，1-二甲基乙酯在0℃下，将N，O-二甲基羟胺盐酸盐(21.4g)、EDCI(41.94g)、N-甲基吗啉(24ml)及DMAP(26.4g)加入至步骤c)产物(59.2g)的CH2Cl2(400ml)溶液中，然后在20℃搅拌18小时。加入2M HCl(200ml)，分离有机层，水层再萃取两次。有机层以2M HCl(50ml)及NaHCO3(2×100ml)洗涤，合并，经干燥(MgSO4)后浓缩得到目标化合物(60.2g)。
MS APCI+vem/z303[M+H]+.
1HNMR 300MHz(CDCl3)4.38-4.19(1H，m)，4.08(1H，dd)，3.87(1H，t)，3.70(3H，s)，3.17(3H，s)，3.07-2.45(2H，m)，1.63-1.42(15H，m).
e)(4S)2，2-二甲基-4-(2-氧代-2-苯乙基)-3-噁唑烷羧酸1，1-二甲基乙酯在-10～5℃，用15分钟将溴化苯基镁(231ml，1M的四氢呋喃溶液)加入到步骤d)产物(60.1g)的四氢呋喃(360ml)溶液中，搅拌2小时。再加入溴化苯基镁(7ml，3M的乙醚溶液)，0℃下搅拌1小时，加入饱和的NH4C1(250ml)及2M HCl(150ml)结束反应。混合物以乙酸乙酯萃取(三次)，有机层以盐水洗涤，合并，经干燥(MgSO4)及浓缩得到目标化合物(64.8g)，为灰白色固体。
1HNMR 300MHz(CDCl3)7.98(2H，d)，7.64-7.40(3H，m)，4.50-4.35(1H，m)，4.15-4.05(1H，m)，3.88-3.65(2H，m)，3.49-3.36及3.25-3.01(1H，m)，1.70-1.35(15H，m).
f)(4S)-4-[(2S)-2-羟基-2-苯乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸1，1-二甲基乙酯将硼烷(176ml，1M的四氢呋喃溶液)加入至(R)甲基-CBS-噁唑硼烷(16ml，1M的甲苯溶液)的四氢呋喃(20ml)溶液中，冷却至-20℃。用1.5小时加入步骤e)的产物(64.6g)的四氢呋喃(200ml)溶液，保持内温低于-15℃，然后在该温度下搅拌22小时。缓慢加入甲醇(40ml)，浓缩溶液，然后用甲醇共蒸得到淡黄色油状物(69g)。加入乙醚及1M KHSO4(20ml)，过滤混合物，浓缩。经层析纯化(硅胶，40-60石油醚/乙醚作为流动相)得到白色固体的目标化合物(37.4g)，与实施例1步骤a)主要产物相同。
进一步洗脱得到与实施例1步骤a)次要产物相同(4S，2R)异构体(20.0g)，为白色固体。
g)(4S)4-[(2R)-2-(苯甲酰基硫代)-2-苯乙基]-2，2-二甲基-3噁唑烷羧酸1，1-二甲基乙酯在-10℃，将偶氮二甲酸二异丙酯(21.5ml)的四氢呋喃(20ml)溶液滴加至三苯基膦(28.73g)的四氢呋喃(230ml)溶液，搅拌白色悬液30分钟。于-10℃用45分钟加入步骤f)产物(17.58g)及硫代苯甲酸(12.8ml)的四氢呋喃(100ml)溶液，然后在-10～4℃搅拌18小时。真空去除溶剂，加入乙醚，搅拌直至沉淀形成。过滤混合物，固体以异己烷/乙醚(1∶1)洗涤。溶液以NaHCO3水溶液洗涤，水层以乙醚萃取。合并有机层，干燥(MgSO4)，浓缩后以层析方法纯化(硅胶，40-60石油醚/二氯甲烷(1∶1，然后为0∶1)作为流动相)得到固体。在-78℃以异己烷重结晶得到白色固体的目标化合物(14.76g)，与实施例1步骤b)主要产物相同。
1HNMR 300MHz(CDCl3)7.93(2H，d)，7.61-7.21(8H，m)，4.79(1H，dt)，4.18-3.83(3H，m)，2.64-2.35(1H，m)，2.23-2.09(1H，m)，1.62-1.41(15H，m).
h)2-氯-5-(4.5-二氢-4，4-二甲基-2-噁唑基)-吡啶将2-氯吡啶-4-羧酸(100g)的氯化亚砜(370ml)悬液80℃加热4小时。反应混合物经真空浓缩，所得剩余物与甲苯共蒸，然后溶于二氯甲烷(300ml)中。在0℃下，用1小时将溶液滴加入2-氨基-2-甲基丙醇(118.8g)的二氯甲烷(300ml)溶液中，然后在20℃搅拌16小时。加入水(500ml)，混合物用二氯甲烷(5×500ml)萃取。萃取过程中形成固体悬浮物，其为需要的中间体酰胺，需要充分萃取。有机层经干燥(MgSO4)，浓缩得到中间体酰胺(125.5g)。
在0℃将该中间体悬浮于二氯甲烷(200ml)中，滴加入氯化亚砜(100ml)，搅拌1小时。形成厚层沉淀，加入更多的二氯甲烷(300ml)，再搅拌反应1小时。真空除去溶剂得到产物的盐酸盐(120g)。
1HNMR 300MHz(CD3OD)9.03(1H，t)，8.42(1H，dd)，7.80(1H，dd)，4.96(2H，s)，1.68(6H，s).
将固体悬浮于水(800ml)中，以固体NaHCO3(约70g，分次加入)直至气体释放停止。混合物以二氯甲烷(2×500ml)萃取，干燥(MgSO4)，浓缩得到目标化合物(99.5g)。
1HNMR(CDCl3)8.90(1H，dd)，8.17(1H，dd)，7.37(1H，dd)，4.14(2H，s)，1.39(6H，s).
i)5-(4，5-二氢-4，4-二甲基-2-噁唑基)-2-甲氧基-吡啶将步骤h)产物(99.5g)的甲醇(500ml)溶液以甲醇钠(0.61mol，25wt％的甲醇溶液)处理，加热回流12小时。减压除去溶剂，剩余物溶于水(200ml)中，以二氯甲烷(2×300ml)萃取。萃取物经干燥(MgSO4)后，蒸干得到橙色油状的目标化合物(85g)。
1HNMR 300MHz(CDCl3)8.68(1H，dd)，8.10(1H，dd)，6.75(1H，dd)，4.09(2H，s)，3.98(3H，s)，1.37(6H，s).
j)5-(4，5-二氢-4，4-二甲基-2-噁唑基)-2-甲氧基-4-(甲硫基)-吡啶在0℃氮气氛围下，将正丁基锂(227ml，1.6M的己烷溶液)滴加入2，2，6，6-四甲基哌啶(51.22g)的四氢呋喃溶液中，搅拌15分钟。反应混合物冷却至-78℃，滴加步骤i)产物(43.97g)的四氢呋喃(50ml)溶液。撤掉冷却浴，升温至-20℃，在该温度保持30分钟。然后再冷却至-78℃，滴加入二甲基二硫化物(dimethyldisulphide)(80ml)。加入过程中，反应混合物升温至-30℃。撤掉冷却浴，室温反应12小时。用水中止反应，所得的红色溶液以旋转蒸发仪浓缩至约600ml。加入水(500ml)，以乙酸乙酯(2×600ml)萃取混合物。合并有机层，以柠檬酸洗涤(500ml1M水溶液)，经干燥(MgSO4)，浓缩得到目标化合物(58.5g)，为淡黄色固体。
1HNMR 300MHz(CDCl3)8.50(1H，s)，6.52(1H，s)，4.04(2H，s)，3.97(3H，s)，2.40(3H，s)，1.40(6H，s).
k)6-甲氧基-4-(甲硫基)-3-吡啶腈将步骤j)噁唑啉(45g)的吡啶(350ml)溶液搅拌下以三氯氧磷处理(68ml)，混合物回流搅拌4.5小时。将深棕色溶液冷却至室温，小心倾入冰(1kg)中。过滤所得悬液，固体以水(300ml)、2M HCl(100ml)洗涤后，再以水(300ml)洗涤。湿产物溶于二氯甲烷(600ml)中，干燥(MgSO4)。加入活性炭(15g)，过滤。浓缩滤液，以40-60石油醚研磨固体得到极淡的粉红色的目标化合物固体(26g)。
1HNMR 300MHz(CDCl3)8.31(1H，s)，6.51(1H，s)，3.98(3H，s)，2.52(3H，s).
1)6-甲氧基-4-(甲磺酰基)-3-吡啶腈将步骤k)产物(13g)的二氯甲烷(150ml)溶液冷却至0℃，用10分钟分次加入MCPBA(21.74g，约57％的纯度)处理。混合物缓慢升温至20℃，8小时后，LC/MS指示为亚砜/砜混合物(72∶28)。再加入MCPBA(7.2g)，4小时后，LC/MS指示为亚砜/砜混合物50∶50。再加入MCPBA(12g)，持续搅拌2小时直至反应完全。反应冷却至0℃，以过量的偏亚硫酸氢钠溶液处理。有机层以饱和的NaHCO3(3×200ml)洗涤，干燥(MgSO4)及浓缩后得到白色固体的目标化合物(11.2g)。
1HNMR 300MHz(CDCl3)8.69(1H，s)，7.47(1H，s)，4.09(3H，s)，3.28(3H，s).
m)(4S)-4-[(2R)-2-[(5-氰基-2-甲氧基-4-吡啶基)硫代]-2苯乙基-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸1，1-二甲基乙酯在20℃，将步骤g)产物(10.0g)的甲醇(75ml)溶液以7M氨的甲醇(50ml)溶液处理，每小时处理1次，共处理8小时。浓缩甲醇，剩余物溶于干燥DMF(100ml)中。加入步骤1)产物(4.8g)并使其溶解，然后加入碳酸铯(7.38g)处理，混合物在20℃搅拌18小时。加入乙酸乙酯(200ml)及水(200ml)，分离水层，以乙酸乙酯(2×100ml)洗涤。合并乙酸乙酯层，以水(3×200ml)及盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤后真空浓缩得到黄色胶状粗品。层析纯化(硅胶，30％乙酸乙酯的异己烷溶液作为流动相)得到透明的泡沫状目标化合物(7.4g)。
MS APCI+vem/z470([M(+H)]+).
1H 300MHz(CDCl3)8.51(1H，s)，7.56(2H，d)，7.37(2H，t)，7.27(1H，t)，6.87-6.83(1H，m)，4.98-4.84(1H，m)，4.14-3.60(3H，m)，3.85(3H，s)，2.30-1.85(2H，m)，1.49-1.38(15H，s).
n)4-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-甲氧基-3-吡啶腈(E)-丁烯二酸盐在0℃下，将4M HCl的二噁烷(100ml)溶液加入至步骤m)产物(7.1g)的甲醇(100ml)溶液中。混合物在20℃搅拌2小时，真空除去溶剂。剩余物以碳酸氢钠在水溶液(200ml)及二氯甲烷(200ml)中进行分配。水相以二氯甲烷萃取(2×100ml)，合并萃取物，干燥(MgSO4)，真空浓缩得到目标化合物游离碱(4.8g)，为淡黄色油状物。
MS(APCI+ve)m/z330[M(+H)]+.
1H 300MHz(CDCl3)8.27(1H，s)，7.43(2H，d)，7.34(2H，t)，7.27(1H，t)，6.65(1H，s)，4.75(1H，dd)，3.90(3H，s)，3.51-3.27(2H，m)，2.71-2.63(1H，m)，2.12-1.88(2H，m).
向该化合物的甲醇(50ml)溶液加入富马酸(1.6g)的甲醇(50ml)溶液，并在20℃搅拌。真空除去溶剂，剩余物用乙氰研磨。收集沉淀，以乙氰洗涤，干燥后得到白色固体的目标化合物(5.1g)，m.p.172-173℃.
MS(APCI+ve)m/z330[M(+H)]+.
1H 500MHz(DMSO-d6)8.53(1H，s)，7.55(2H，d)，7.39(2H，t)，7.30(1H，t)，7.00(1H，s)，6.45(2H，s)，5.15(1H，dd)，3.89(3H，s)，3.38(2H，ddd)，2.73-2.65(1H，m)，2.25-2.01(2H，m).
实施例114-[[(1R，3R)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-甲氧基-3-吡啶腈(E)-丁烯二酸盐。
a)(4R)-4-(2-氧代-2-苯乙基)-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸1，1-二甲基乙酯根据实施例10步骤a)-e)的方法，目标化合物可由N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-D-天冬氨酸4-(苯甲基)酯，实施例10步骤a)起始原料的对映异构体反应制备得到。
MS APCI+ve)m/z320[M+H]+.
1HNMR 300MHz(d6-DMSO)7.98(2H，d)，7.61-6.83(3H，m)，4.69(1H，bs)，4.10(1H，t)，3.83-3.68(2H，bm)，3.15(1H，m)，1.66-1.42(15H，m).
b)(4R)-4-[(2R)-2-(苯甲酰基硫代)-2-苯乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸1，1-二甲基乙酯目标化合物的制备根据实施例10步骤f)及g)的方法，其以步骤a)的产物为原料。手性还原操作(步骤f)使用(R)甲基-CBS-噁唑硼烷进行。
MS APCI+vem/z342[M+H]+.
1HNMR 400MHz(d6-DMSO)7.86(2H，d)，7.85-7.24(8H，m)，4.77(1H，m)，4.01-3.87(2H，m)，3.62(1H，bs)，2.16(2H，m)，1.47-1.36(15H，m).
c)4-[[1R，3R)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-甲氧基-3-吡啶腈，(E)-丁烯二酸盐目标产物的制备根据实施例10步骤m)-n)的方法。M.p.221-223℃.
MS APCI+vem/z330[M+H]+.
1HNMR 400MHz(d6-DMSO)(90℃)8.54(1H，s)，7.54(2H，d)，7.39(2H，t)，7.30(1H，t)，6.87(1H，m)，6.45(2H，m)，5.09(1H，m)，3.88(3H，s)，3.61-3.55(2H，m)，2.88(1H，m)，2.33-2.09(2H，m).
实施例124-[[(1S，3R)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-甲氧基-3-吡啶腈，(E)-丁烯二酸盐a)(4R)-4-[(2S)-2-(苯甲酰基硫代)-2-苯乙基-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸1，1-二甲基乙酯。
在根据实施例10步骤f)-g)的方法手性还原实施例11步骤a)的产物时，目标化合物的制备使用(S)甲基-CBS-噁唑硼烷催化剂。
MS APCI+vem/z342[M+H]+.
1HNMR 400MHz(d6-DMSO)7.85(2H，d)，7.63(1H，t)，7.50(2H，t)，7.42(2H，d)，7.34(2H，t)，7.27(1H，t)，4.80(1H，m)，3.95(1H，m)，3.85-3.13(2H，m)，2.14(2H，m)，1.45-1.36(15H，m).
b)4-[[(1S，3R)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-甲氧基-3-吡啶腈，(E)-丁烯二酸盐目标化合物的制备根据实施例10步骤m)-n)的方法，以步骤a)的产物为原料。M.p.162.5-163℃。
MS APCI+ve)m/z330[M+H]+.
1HNMR 400MHz(d6-DMSO)8.53(1H，s)，7.55(2H，d)，7.38(2H，t)，7.30(1H，t)，7.00(1H，s)，6.44(1H，s)，5.12(1H，m)，3.89(3H，s)，3.36-3.26(2H，m)，2.62(1H，m)，2.22-2.08(1H，m)，2.01-1.95(1H，m).
实施例134-[[(1S，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-甲氧基-3-吡啶腈(E)-丁烯二酸盐a)4-[(2S)-2-(苯甲酰基硫代)-2-苯乙基]-2，2-二甲基-1，1-二甲基乙基(4S)-3-噁唑烷羧酸酯目标化合物的制备根据实施例10步骤g)的方法，以实施例1步骤a)的次要异构体为原料。
MS APCI+vem/z342[M+H]+.
1HNMR 300MHz(d6-DMSO)7.91(2H，d)，7.57-7.23(8H，m)，4.76(1H，m)，4.17-3.61(3H，m)，2.50-2.18(2H，m)，1.66-1.41(15H，m).
b)4-[[(1S，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-甲氧基-3吡啶腈，(E)-丁烯二酸盐目标化合物的制备根据实施例10步骤m)-n)方法，原料为步骤a)的产物。M.p.213-228℃。
MS APCI+vem/z330[M+H]+.
1HNMR 400MHz(d6-DMSO)8.53(1H，s)，7.53(2H，d)，7.39(2H，t)，7.30(1H，t)，7.96(1H，s)，6.43(2H，s)，5.08(1H，t)，3.88(3H，s)，3.58(2H，m)，2.86(1H，bs)，2.25-2.28(1H，m)，2.08(1H，m).
实施例144-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-(二氟甲氧基)3-吡啶腈(E)-丁烯二酸盐a)5-(4，5-二氢-4，4-二甲基-2-噁唑基)-3-(甲硫基)-2-吡啶酚(pyridinnol)在0℃氮气氛围下，将正丁基锂(16.4ml，2.5M的己烷溶液)滴加入2，2，6，6-四甲基哌啶(51.22g)的四氢呋喃溶液，搅拌15分钟。反应混合物冷却至-78℃，滴加入5-(4，5-二氢-4，4-二甲基-2-噁唑基)-2-吡啶酚(pyridinol)(2.6g)的四氢呋喃(75ml)溶液。撤掉冷却浴，升温至-20℃，该温度保持2小时。然后再冷却至-78℃，滴加入二甲基二硫化物(4.9ml)。加入过程中，反应混合物升温至-30℃。撤掉冷却浴，20℃反应12小时。加入水(50ml)，所得的红色溶液以二氯甲烷(2×60ml)萃取。合并有机层，以柠檬酸(50ml，1M水溶液)洗涤，经干燥(Na2SO4)，浓缩得到淡黄色固体的目标化合物(3.75g)，经NMR分析其为起始物与产物的50∶50混合物。
MS APCI+vem/z239[M+H]+.
1HNMR 300MHz(d6-DMSO)(产物)；7.92(1H，s)，6.28(1H，s)，4.06(3H，s)，2.50(2H，s)，1.35(6H，s).
b)2-(二氟甲氧基)-5-(4，5-二氢-4，4-二甲基-2-噁唑基)-4-(甲硫基)-吡啶以氢化钠(1.7g，含60％，分散在矿物油中)处理步骤a)产物(2.6g)的NMP(5ml)溶液中，50℃加热3小时。然后，将氯二氟甲烷持续通入反应混合物中1小时。加入水(50ml)，以乙酸乙酯(3×60ml)萃取。合并有机层，以NaHCO3水溶液洗涤，然后再以盐水洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩后得到油状物。剩余物以层析方法纯化(硅胶，异己烷/乙酸乙酯作为流动相)得到油状的目标化合物(0.6g)。
MS APCI+vem/z289[M+H]+.
1HNMR 400MHz(d6-DMSO)8.50(1H，s)，7.50(1H，t)，6.68(1H，s)，4.06(2H，s)，2.43(3H，s)，1.56(6H，s).
c)6-(二氟甲氧基)-4-(甲硫基)-3-吡啶腈目标化合物的制备根据实施例10步骤k)的方法，使用步骤b)的产物为原料。
1HNMR 300MHz(d6-DMSO)8.30(1H，s)，7.49(1H，t)，6.68(1H，s)，2.57(3H，s).
d)6-(二氟甲氧基(甲磺酰基)-3-吡啶腈先以NaHCO3(1.1g)处理步骤c)产物(0.36g)的丙酮(15ml)溶液，然后，滴加入过硫酸氢钾(oxone)(3g)水(15ml)溶液，室温搅拌5小时。加入水，所得混合物以乙酸乙酯(3×50ml)萃取。合并有机层，以水、盐水洗涤，干燥(MgSO4)，然后浓缩得到淡黄色固体的目标化合物(0.25g)。
1HNMR 300MHz(d6-DMSO)8.75(1H，s)，7.67(1H，s)，7.51(1H，t)，3.38(3H，s).
e)4-[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-(二氟甲氧基)3-吡啶腈(E)-丁烯二酸盐目标化合物的制备根据方法实施例10步骤m)-n)的方法，以步骤d)的产物为原料。M.p.144-146℃.
MS APCI+vem/z366[M+H]+.
1HNMR 400MHz(d6-DMSO)8.61(1H，s)，7.65(1H，t)，7.65-7.37(7H，m)，6.54(2H，s)，5.34(1H，m)，3.47(2H，m)，2.88(1H，bs)，2.27(2H，m).
实施例152-[[(1R，3R)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-甲基-3-吡啶腈盐酸盐a)(4R)4-[(2R)-2-[(3-氰基-6-甲基-2-吡啶基)硫代]-2-苯乙基]2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸1，1-二甲基乙酯将实施例11步骤b)的产物(190mg)及2-氯-6-甲基-3吡啶腈(220mg)溶于7M氨的甲醇(5ml)溶液中，室温搅拌18小时。浓缩反应混合物至干，剩余物以层析纯化(硅胶，二氯甲烷作为流动相)得到胶状的目标化合物(110mg)。
MS APCI+vem/z454[M+H]+b)2-[[(1R，3R)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-甲基-3-吡啶腈盐酸盐步骤a)的产物(110mg)的4M HCl二噁烷(2ml)溶液在20℃搅拌2小时。真空除去溶剂，剩余物以乙腈研磨得到为白色固体的目标化合物(42mg)。
MS APCI+vem/z314[M+H]+.
1HNMR 300MHz(d6-DMSO)8.1(1H，d)，7.54-7.28(5H，m)，5.36(1H，t)，5.22-5.17(1H，m)，3.81-3.75(1H，m)，3.62-3.54(1H，m)3.32(3H，s)，2.8-2.7(1H，m)，2.53-2.46(1H，m).
实施例164-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-(2H3)甲氧基-3-吡啶腈(E)-2-丁烯二酸盐a)5-(4，5-二氢-4，4-二甲基-2-噁唑基)-2-(2H3)甲氧基-吡啶将氢化钠(800mg)加入到实施例10步骤h)的产物(2.1g)及甲基-d3-乙醇-d(720mg)的DMF(50ml)溶液中。反应混合物在65℃加热2小时，然后冷却至室温。混合物倾入水(1000ml)中，以乙酸乙酯萃取(两次)。合并有机层，干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩得到目标化合物(2.3g)，为无色油状物。
1HNMR 400MHz(CDCl3)8.68(1H，s)，8.10(1H，d)，6.72(1H，d)，4.09(2H，s)，1.37(6H，s).
b)5-(4，5-二氢-4，4-二甲基-2-噁唑基)-2-(2H3)甲氧基-4-(甲硫基)-吡啶目标化合物的制备根据实施例10步骤j)的方法，使用步骤a)的产物为原料。
MS APCI+vem/z256([M(+H)]+).
c)6-(2H3)甲氧基-4-(甲硫基)-3-吡啶腈目标化合物的制备根据实施例10步骤k)的方法，使用步骤b)的产物为原料进行。
MS APCI+vem/z184([M(+H)]+).
d)6-(2H3)甲氧基-4-(甲磺酰基)-3-吡啶腈将过硫酸氢钾(11.1g)的水(40ml)溶液加入到步骤c)的产物(1.1g)的丙酮(40ml)及碳酸氢钠(4.16g)的悬液中。反应混合物室温搅拌24小时。然后加入水及乙酸乙酯直至成完全溶液。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩得到目标化合物(1.3g)，为无色固体。
MS APCI+vem/z216([M(+H)]+).
e)(4S)-4-[(2R)-2-[(2-(2H3)甲氧基-5-甲基-4-吡啶基)硫代]-2苯乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸1，1-二甲基乙酯目标化合物的制备根据实施例10步骤m)的方法，使用步骤d)的产物为原料。
MS APCI+vem/z373([M(+H)-BOC]+).
f)4-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-(2H3)甲氧基-3-吡啶腈(E)-2-丁烯二酸盐目标化合物的制备根据实施例10步骤n)的方法，使用步骤e)的产物为原料。M.p.181-182℃.
1HNMR 400MHz(d6-DMSO)8.53(1H，s)，7.54(2H，d)，7.38(1H，t)，7.30(1H，t)，7.00(1H，s)，6.45(1H，s)，5.12(1H，m)，3.33(3H，m)，2.64(1H，m)，1.99(1H，m)，1.85(1H，m).
实施例172-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-乙基-3-吡啶腈乙二酸盐a)2-氯-6-乙基-3-吡啶腈在氮气氛围下，向搅拌的2-氯-6-甲基-3-吡啶腈(1.52g)的干燥DMF(10ml)溶液中，加入碘甲烷(2.5ml)。在溶液搅拌下，加入氢化钠(60％分散，400mg)。当初始的放热减弱后，搅拌混合物0.5小时，然后以水(50ml)稀释，产物以乙醚(100ml)萃取。干燥萃取物(MgSO4)，浓缩至干，剩余物以层析方法纯化(硅胶，异己烷/乙醚4∶1)得到目标化合物(700mg)。
1H 400MHz(CDCl3)7.8(1H，d)，7.16(1H，d)，2.81(2H，q)，1.26(3H，t).
b)(4S)4-[(2R)-2-[(3-氰基-6-乙基-2-吡啶基)硫代]-2-苯乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸1，1-二甲基乙酯将步骤a)的产物(200mg)及实施例1步骤b)的产物(442mg)在7M氨的甲醇(15ml)溶液中室温搅拌2小时。混合物浓缩至干，剩余物以层析方法纯化(硅胶，异己烷/乙醚7∶3)得到目标化合物(260mg)。
MS APCI+vem/z468([M+H]+).
c)2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-乙基-3-吡啶腈乙二酸盐由步骤b)的产物制备目标化合物，按照实施例8步骤c)所述的方法进行，分离得到无色固体80mg。
1H 400MHz(DMSO-d6)8.09(1H，d)，7.5(2H，d)，7.37-7.19(4H，m)，5.35(1H，t)，3.58-3.44(2H，m)，3.09-3.04(2H，m)，2.85(2H，q)，2.35-2.25(2H，m)，1.26(3H，t).
MS APCI+vem/z328([M+H]+).
实施例182-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-(1-甲基乙基)-3吡啶腈乙二酸盐a)2-[[(1R)-2-[(4S)-2，2-二甲基-4-噁唑烷基]-1-苯乙基]硫代]-6-(1-甲基乙基)-3-吡啶腈目标化合物由2-氯-6-(1-甲基乙基)-3-吡啶腈，根据实施例17步骤b)所述的方法进行合成。
MS APCI+vem/z382([M+H]+).
b)2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-(1-甲基乙基)-3吡啶腈乙二酸盐目标化合物由步骤a)的产物进行合成，根据实施例8步骤b)所述的方法进行。
MS APCI+vem/z342([M+H]+).
1H 300MHz(DMSO-d6)8.1(1H，d)，7.5-7.19(6H，m)，5.37(1H，t)，3.6-3.4(2H，m)，3.16-3.0(2H，m)，2.28(2H，t)，1.27(3H，d)，1.23(3H，d).
实施例192-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-甲基-3-吡啶甲醇乙二酸盐a)6-甲基-2-(甲磺酰基)吡啶-3-羧酸甲酯2-氯-6-甲基吡啶-3-羧酸甲酯(1g)及甲磺酸钠(1.6g)干燥的DMSO(10ml)的混合物120℃加热4小时。冷却的反应混合物以水(100ml)稀释，产物以乙酸乙酯(2×100ml)萃取。干燥萃取物()，浓缩至干后，剩余物以层析方法纯化(硅胶，乙醚)。分离得淡红色的油状的目标化合物(600mg)。
MS APCI+vem/z230([M+H]+).
b)2-[[(1R)-2-[(4S)-3-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-2，2-二甲基-4-噁唑烷基]-1-苯乙基]硫代]-6-甲基吡啶-3-羧酸甲酯目标化合物由步骤a的产物，根据实施例10步骤m)所述的方法进行制备。
MS APCI+vem/z487([M+H]+).
c)(4S)-4-[(2R)-2-[[R-3-(羟甲基)-6-甲基-2-吡啶基]硫代]-2-苯乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸1，1-二甲基乙酯在室温氮气氛围下，以硼氢化锂(用3天加入2M的四氢呋喃溶液5×5ml等份)处理步骤b)产物(500mg)的干燥四氢呋喃溶液。5天后，混合物以水(100ml)稀释，加入柠檬酸破坏过量的试剂。然后以乙酸乙酯(2×75ml)萃取混合物，合并萃取物，干燥(MgSO4)后浓缩。粗产物以层析方法纯化(硅胶，乙醚/异己烷7∶3)得到无色胶状的目标化合物(400mg)。
MS APCI+vem/z459([M+H]+).
d)2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-甲基-3-吡啶甲醇乙二酸盐目标化合物由步骤c)的产物，如实施例8步骤c)所述的方法进行合成。
1H 300MHz(DMSO-d6/D2O)7.6-7.2(6H，m)，6.97(1H，d)，5.28(1H，t)，4.36(2H，s)，3.63-3.38(2H，m)，3.15(1H，t)，2.5(3H，s)，2.31(2H，t).
MS APCI+vem/z319([M+H]+).
实施例206-乙酰基-2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-3-吡啶腈盐酸盐a)6-乙酰基-2-(甲磺酰基)-3-吡啶腈将6-乙酰基-2-(甲硫基)-3-吡啶腈(170mg)溶于丙酮(40ml)和水(8ml)的溶液中。加入过硫酸氢钾(1.66g)，室温搅拌悬液68小时。加入0.5M硫代硫酸钠水溶液(50ml)，搅拌溶液0.5小时。然后，以乙酸乙酯(3×50ml)萃取反应物，合并有机层并以水洗涤(3×20ml)，干燥(MgSO4)后真空浓缩。剩余物以层析方法纯化(硅胶，己烷/乙酸乙酯作为流动相)得到目标化合物(109mg)，为白色固体。
1HNMR 300MHz(CDCl3)8.40(2H，dd)，3.47(3H，s)，2.78(3H，s).
b)(4S)-1，1-二甲基乙基4-[(2R)-2-[(6-乙酰基-3-氰基-2-吡啶基)硫代]-2-苯乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯目标化合物的制备根据实施例10步骤m)的方法，使用步骤a)产物(100mg)及实施例10步骤g)产物(199mg)。产物以层析方法纯化(硅胶，己烷/乙酸乙酯作为流动相)得到无色油状的目标化合物(125mg)。
1HNMR 400MHz(CDCl3)7.89(1H，s)，7.71(1H，d)，7.46(2H，t)，7.32(2H，t)，7.23(1H，d)，5.16(1H，m)，4.16(1H，m)，3.86(1H，m)，3.51(1H，m)，2.75-2.62(3H，d)，2.60-2.33(1H，m)，2.23-2.10(1H，m)，1.59-1.40(15H，m).
c)6-乙酰基-2-[[(R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-3-吡啶腈盐酸盐将步骤b)的产物(125mg)溶于甲醇(20ml)中，以4M HCI的二噁烷(10ml)溶液处理。室温搅拌反应3小时。真空除去溶剂，剩余物以20％乙酸乙酯的己烷溶液研磨。固体经滤过、干燥后得到目标化合物(75mg)，为淡黄色固体。M.p.78℃.
MS APCI+vem/z342([M+H]+).
1HNMR 300MHz(DMSO-D6)8.41(1H，dd)，8.16(3H，s)，7.76(1H，dd)，7.58(2H，d)，7.39(2H，t)，7.30(1H，m)，5.46(1H，t)，5.35(1H，t)，3.59-3.40(2H，m)，3.07(1H，s)，2.76(3H，d)，2.34(2H，t).
实施例212-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-(羟基甲基)-3-吡啶腈(E)-丁烯二酸盐a)6-(羟甲基)-2-(甲硫基)-3-吡啶腈将6-甲酰基-2-(甲硫基)烟酰腈(nicotinonitrile)(500mg)溶于乙醇(50ml)中，以硼氢化钠(117mg)处理。反应在室温搅拌1小时，然后，加入水(50ml)结束反应。将反应液浓缩至约50ml，然后以乙酸乙酯(3×60ml)萃取。合并有机层，以水(2×40ml)洗涤，经干燥(MgSO4)及真空浓缩后得到目标化合物(478mg)，为白色固体。
1HNMR 300MHz(CDCl3)7.79(1H，d)，7.07(1H，d)，4.80(2H，d)，3.18(1H，t)，2.65(3H，s).
b)6-[[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]甲基]-2-(甲硫基)-3-吡啶腈以咪唑(196mg)处理步骤a)产物(473mg)的二氯甲烷(80ml)溶液。溶液冷却至0℃，加入t-BDMSCl(434mg)。室温搅拌反应18小时，然后加入水(50ml)结束反应。以乙酸乙酯(3×60ml)萃取，合并有机层，以水(2×40ml)洗涤，干燥(MgSO4)后，真空浓缩得到目标化合物(731mg)，为白色固体。
1HNMR 300MHz(CD3)7.79(1H，d)，7.27(1H，d)，4.80(2H，s)，2.59(3H，s)，0.98(9H，s)，0.13(6H，s).
c)6-[[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]甲基]-2-(甲磺酰基)-3-吡啶腈将步骤b)产品(725mg)溶于丙酮(80ml)、水(40ml)及饱和的碳酸氢钠水溶液(20ml)中。以过硫酸氢钾(4.1g)处理悬液，室温搅拌反应24小时。真空浓缩反应混合物至约70ml，以乙酸乙酯(3×60ml)萃取。合并有机层并以水(3×40ml)洗涤，干燥(MgSO4)，真空浓缩后得到目标化合物(715mg)，为白色固体。
1HNMR 300MHz(CDCl3)8.24(1H，d)，7.91(1H，d)，4.92(2H，s)，3.35(3H，s)，0.97(9H，s)，0.16(6H，s).
d)1，1-二甲基乙基(4S)-4-[(2R)-2-[[3-氰基-6-[[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]甲基]-2-吡啶基]硫代]-2-苯乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯目标化合物的制备根据实施例10步骤m)的方法，使用步骤c)的产物(222mg)及实施例10步骤g)的产物(300mg)。产物以层析方法纯化(硅胶，己烷/乙酸乙酯作为流动相)得到目标化合物(180mg)，为无色油状物。
1HNMR 300MHz(CDCl3)7.75(1H，d)，7.39(2H，d)，7.33-7.18(4H，m)，5.20-5.00(1H，m)，4.89-4.67(2H，m)，4.17-4.04(1H，m)，3.85(1H，s)，3.72-3.42(1H，m)，2.66-2.33(1H，m)，2.17(1H，dd)，1.57-1.39(15H，m)，0.96(9H，d)，0.14(6H，d).
e)2-[[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-(羟基甲基)-3-吡啶腈(E)-丁烯二酸盐灰白色固体的目标化合物(100mg)的制备根据实施例10步骤n)的方法，使用步骤d)的产物(175mg)进行。M.p.147-149℃.
1HNMR 300MHz(d6-DMSO)8.17(1H，d)，7.50(2H，d)，7.39-7.23(4H，m)，6.46(2H，s)，5.33(1H，t)，4.69(2H，dd)，3.51-3.34(2H，m)，2.83(1H，t)，2.35-2.14(2H，m).
MS APCI+vem/z330([M+H]+).
实施例222-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-3-吡啶腈(E)-丁烯二酸盐a)1，1-二甲基乙基(4S)-4-[(2R)-2-[[(3-氰基-2-吡啶基)硫代]-2-苯乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯将实施例10步骤g)的产物(318mg)溶于7M氨的甲醇(40ml)溶液中，加入2-氯-3-氰基吡啶(100mg)。室温搅拌反应24小时。真空除去溶剂，剩余物以层析方法纯化(硅胶，乙酸乙酯/己烷作为流动相)得到目标化合物(200mg)，为无色油状物。
MS APCI+vem/z440([M+H]+).
b)2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-3-吡啶腈(E)-丁烯二酸盐目标化合物的制备根据实施例10步骤n)的方法，使用步骤a)的产物进行，为灰白色固体(125mg)。M.p.67-69℃.
1HNMR 300MHz d6-(DMSO)8.74(1H，d)，8.21(1H，dd)，7.50(2H，d)，7.32(4H，m)，6.46(2H，s)，5.37(1H，t)，3.53-3.33(2H，m)，2.90-2.80(1H，m)，2.36-2.17(2H，m).
MS APCI+vem/z300([M+H]+).
实施例23(β1S，δ1R)-β-氨基-δ-[(2，5-二氯-4-吡啶基)硫代苯丁醇]盐酸盐a)2，5-二氯-4-(甲硫基)-吡啶在0℃氮气氛围下，将正丁基锂(8.9ml，2.5M的己烷溶液)滴加入DMF(3.13ml)的四氢呋喃(20ml)溶液中，搅拌15分钟。在-78℃下，将反应混合物滴加入2，5-二氯吡啶(3g)的四氢呋喃(20ml)溶液中。2小时后，加入二甲基而硫化物(2.4ml)，反应温度升至0℃。加入水，以乙酸乙酯萃取混合物。合并有机层，干燥(Na2SO4)及浓缩后得到目标化合物(3g)，为黄色固体。
1HNMR 400MHz(CDCl3)8.18(1H，s)，7.02(1H，s)，2.50(3H，s).
b)2，5-二氯-4-(甲磺酰基)-吡啶目标化合物的制备根据实施例5步骤b)的方法，使用实施例23步骤a)的产物进行，为白色固体。
1HNMR 300MHz(CDCl3)8.39(1H，s)，7.91(1H，s)，2.90(3H，s).
c)(β1S，δ1R)-β-氨基-δ-[(2，5-二氯-4-吡啶基)硫代苯丁醇]-盐酸盐目标化合物的制备根据实施例10步骤m及n)的方法，使用实施例23步骤b)及实施例10步骤g)的产物进行。最终的纯化先以反相HPLC进行，再以HCl处理。
MS(API+ve)m/z343[M(+H)]+.
1H 400MHz(DMSO-d6)8.37(1H，s)，8.08(3H，bs)，7.58(3H，m)，7.41(2H，t)，7.33(1H，tt)，3.54-3.50(2H，m)，3.41(1H，dd)，2.96(1H，bs)，2.33-2.14(2H，m).
实施例242-[[(2R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-5-氟-6-甲氧基-3-吡啶腈-(E)-丁烯二酸盐a)2-氯-5-氟-6-甲氧基-3-吡啶腈将2，6-二氯-5-氟-3-吡啶腈(2.33g)及甲醇钠(1.9ml，25wt.％的甲醇溶液)的DMF溶液在50℃加热16小时。再加入甲醇钠(0.57ml)，继续加热48小时。加入水，混合物以乙醚萃取。合并有机层并以水洗涤，干燥(Na2SO4)，浓缩得到白色固体的目标化合物(2.08g)。
1HNMR 300MHz(CDCl3)7.58(1H，d)，4.11(3H，s).
b)2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-5-氟-6-甲氧基-3-吡啶腈-(E)-丁烯二酸盐目标化合物的制备根据实施例10步骤m及n)的方法，使用实施例24步骤a)及实施例10步骤g)的产物进行。
MS(APCI+ve)m/z348[M(+H)]+.
1H 400MHz(DMSO-d6)8.20(1H，d)，7.49(2H，d)，7.36(2H，t)，7.28(1H，m)，5.28(1H，dd)，4.13(3H，s)，3.31(2H，m)，2.67(1H，m)，2.21(1H，m)，2.08(1H，m).
实施例254-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-(二甲基氨基)-3-吡啶腈(E)-2-丁烯二酸盐a)5-(4，5-二氢-4，4-二甲基-2-噁唑基)-N，N-二甲基-2-吡啶胺将实施例10步骤h)的产物(2.1g)、2.0M二甲基胺/四氢呋喃(80ml)及甲苯(80ml)的混合物在密封管内120℃加热16小时。然后，混合物浓缩至干，剩余物以层析方法纯化(硅胶，乙酸乙酯作为流动相)得到目标化合物(1.55g)，为浅橙色固体。
1HNMR 400MHz(CDCl3)8.64(1H，s)，7.97(1H，d)，6.48(1H，d)，4.05(2H，s)，3.14(6H，s)，1.36(6H，s).
b)5-(4，5-二氢-4，4-二甲基-2-噁唑基)-N，N-二甲基-4-(甲硫基)-2-吡啶胺目标化合物的制备根据实施例10步骤j)的方法，使用步骤a)的产物进行，以层析方法进行纯化(硅胶，异己烷/乙酸乙酯作为流动相)。
MS APCI+vem/z266([M(+H)]+).
c)6-(二甲基氨基)-4-(甲硫基)-3-吡啶腈目标化合物的制备根据实施例10步骤k)的方法，使用步骤b)的产物进行。
MS APCI+vem/z194([M(+H)]+).
d)6-(二甲基氨基)-4-(甲磺酰基)-3-吡啶腈目标化合物的制备根据实施例16步骤d)的方法，使用步骤c)的产物进行。
MS APCI+vem/z226([M(+H)]+).
e)1，1-二甲基乙基(4S)-4-[(2R)-2-[[5-氰基-2-(二甲基氨基)-4-吡啶基]硫代]-2-苯乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯目标化合物的制备根据实施例10步骤m)的方法，使用步骤d)的产物进行。
MS APCI+vem/z483([M(+H)]+).
f)4-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-(二甲基氨基)-3吡啶腈(E)-2-丁烯二酸盐目标化合物的制备根据实施例10步骤n)的方法，使用步骤e)的产物进行。M.p.175-177℃.
1HNMR 400MHz(d6-DMSO)8.29(1H，s)，7.55(2H，d)，7.38(2H，t)，7.29(1H，t)，6.47(4H，d)，5.11(1H，m)，3.38(2H，m)，3.05(6H，s)，2.75(1H，m)，2.17(1H，m)，2.04(1H，m).
实施例264-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-(甲基氨基)-3吡啶腈二盐酸盐a)5-(4，5-二氢-4，4-二甲基-2-噁唑基)-N-甲基-2-吡啶胺将实施例10步骤h)的产物(2.1g)、2.0M甲基胺/四氢呋喃(30ml)及甲苯(30ml)的混合物在密封管内120℃加热16小时。然后将混合物浓缩至干，剩余物以层析方法纯化(硅胶，乙酸乙酯作为流动相)得到目标化合物(700mg)，为浅褐色固体。
1HNMR 400MHz(CDCl3)8.60(1H，s)，7.97(1H，d)，6.36(1H，d)，4.85(1H，br s)，4.06(2H，s)，2.96(3H，d)，1.36(6H，s).
b)1，1-二甲基乙基[5-(4，5-二氢-4，4-二甲基-2-噁唑基)-2-吡啶基]甲基氨基甲酸酯将重碳酸二叔丁基酯(Di-tert-butyl dicarbonate)(1.47g)加入到步骤a)的产物(700mg)的二氯甲烷(10ml)溶液中。然后，加入4-(二甲基氨基)吡啶(42mg)，混合物室温搅拌16小时。反应混合物倾入水中，分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩至干后得到目标化合物(900mg)的无色油状物。
MS APCI+vem/z306([M(+H)]+).
c)1，1-二甲基乙基[5-(4，5-二氢-4，4-二甲基-2-噁唑基)-4-(甲硫基)-2-吡啶基]甲基-氨基甲酸酯目标化合物的制备根据实施例10步骤j)的方法，使用步骤b)的产物进行。
MS APCI+vem/z25 2([M(+H)]+).
d)1，1-二甲基乙基[5-氰基-4-(甲硫基)-2-吡啶基]甲基氨基甲酸酯目标化合物的制备根据实施例10步骤k)的方法，使用步骤c)的产物进行。
MS APCI+vem/z180([M(+H)]+).
e)1，1-二甲基乙基-[5-氰基-4-(甲磺酰基)-2-吡啶基]甲基氨基甲酸酯目标化合物的制备根据实施例16步骤d)的方法，使用步骤d)的产物进行。
MS APCI+vem/z212([M(+H)]+).
f)1，1-二甲基乙基(4S)4-[[[5氰基[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]甲基氨基]-4-吡啶基]硫代]-2-苯乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯目标化合物的制备根据实施例10步骤m)的方法，使用步骤e)的产物进行。
MS APCI+vem/z569([M(+H)]+).
g)4-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-(甲基氨基)-3-吡啶腈二盐酸盐将4M HCl的二噁烷(20ml)溶液加入到步骤f)产物(490mg)的甲醇(20ml)溶液中。混合物室温搅拌8小时，真空除去溶剂。剩余物以乙醚研磨，过滤收集目标化合物(340mg)，为白色固体。M.p.206-208℃.
MS APCI+vem/z329([M(+H)]+).
1HNMR 400MHz(d6-DMSO)8.21(1H，s)，8.18(2H，brs)，7.53(2H，m)，7.36(2H，m)，7.28(1H，m)，6.66(1H，s)，5.04(1H，t)，3.45(2H，m)，2.99(1H，brs)，2.83(3H，s)，2.31(2H，t).
实施例27(β1S，δ1R)-β-氨基-δ-[(5-溴-2-甲氧基-4-吡啶基)硫代]-苯丁醇(E)-2-丁烯二酸盐a)5-溴-2-甲氧基-4-(甲硫基)-吡啶在0℃氮气氛围下，将正丁基锂(32.5ml，2.5M的己烷溶液)滴加入N，N-二异丙基胺(11.7ml)的四氢呋喃(45ml)溶液中，搅拌15分钟。反应混合物冷却至-78℃，滴加入5-溴-2-甲氧基吡啶(14.3g)的四氢呋喃(10ml)溶液。2小时后，加入二甲基二硫化物(13.8ml)，然后加入四氢呋喃(20ml)。反应温度升至-40℃。将反应液倾入氯化铵水溶液中，以乙醚萃取混合物。合并有机层，干燥(Na2SO4)并浓缩。冷异己烷研磨得到浅褐色固体的目标化合物(11g)。
1HNMR 300MHz(CDCl3)8.08(1H，s)，6.45(1H，s)，3.91(3H，s)，2.44(3H，s).
b)5-溴-2-甲氧基-4-(甲磺酰基)吡啶目标化合物的制备根据实施例16步骤d)的方法，使用步骤a)的产物进行。
MS APCI+vem/z267/269([M(+H)]+).
c)1，1-二甲基乙基(4S)-4-[(2R)-2-[(5-溴-2-甲氧基-4-吡啶基)硫代]-2-苯乙基]2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯目标化合物的制备根据实施例10步骤m)的方法，使用步骤b)的产物进行。
MS APCI+vem/z523/525([M(+H)]+).
d)(β1S，δ1R)-β-氨基-δ-[(5-溴-2-甲氧基-4-吡啶基)硫代]-苯丁醇(E)-2-丁烯二酸盐目标化合物的制备根据实施例10步骤n)的方法，其使用步骤c)的产物。M.p.178-180C.
MS APCI+vem/z383/385([M(+H)]+).
1HNMR 400MHz(d6-DMSO)8.17(1H，s)，7.56(2H，d)，7.38(2H，t)，7.29(1H，t)，6.86(1H，s)，6.47(2H，s)，4.98(1H，m)，3.79(3H，s)，3.30-3.41(2H，m)，2.72(1H，m)，2.17(1H，m)，2.04(1H，m).
实施例28(β1S，δ1R)-β-氨基-δ-[(5-氯-2-甲氧基-4-吡啶基)硫代]-苯丁醇(E)-2-丁烯二酸盐a)5-氯-2-甲氧基-4-(甲硫基)-吡啶以甲醇钠(8.2ml，25wt％的甲醇溶液)处理实施例23步骤a)产物(1.4g)的甲醇(20ml)溶液，加热回流48小时。减压除去溶剂，剩余物在水(50ml)及二氯甲烷(50ml)中分配。干燥(MgSO4)有机相，浓缩至干。层析纯化(硅胶，二氯甲烷作为流动相)得到目标化合物(345mg)，为白色固体。
MS APCI+vem/z189([M(+H)]+).
b)5-氯-2-甲氧基-4-(甲磺酰基)吡啶目标化合物的制备根据实施例5步骤b)的方法，使用步骤a)的产物进行。
MS APCI+vem/z222/224([M(+H)]+).
c)1，1-二甲基乙基(4S)-4-[(2R)-2-[(5-氯-2-甲氧基-4-吡啶基)硫代]-2-苯乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯目标化合物的制备根据实施例10步骤m)的方法，其使用步骤b)的产物进行。
MS APCI+vem/z479/481([M(+H)]+).
d)(β1S，δ1R)-β-氨基-δ-[(5-氯-2-甲氧基-4-吡啶基)硫代]-苯丁醇(E)-2-丁烯二酸盐目标化合物的制备根据实施例10步骤n)的方法，使用步骤c)的产物进行。M.p.191-193℃。
MS APCI+vem/z339-341([M(+H)]+).
1HNMR 400MHz(d6-DMSO)8.08(1H，s)，7.56(2H，d)，7.38(2H，t)，7.29(1H，t)，6.88(1H，s)，6.48(2H，s)，4.99(1H，m)，3.80(3H，s)，3.30-3.41(2H，m)，2.73(1H，m)，2.18(1H，m)，2.05(1H，m).
实施例294-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-乙氧基-3-吡啶腈，(E)-丁烯二酸盐a)5-(4，5-二氢-4，4-二甲基-2-噁唑基)-2-乙氧基-吡啶以乙醇(1.2ml)及氢化钠(0.8g，含60％，分散在矿物油中)处理实施例10步骤h)产物(2.1g)的DMF(50ml)溶液，60℃加热20小时。加入水(200ml)，所得混合物以乙酸乙酯(2×150ml)萃取。合并有机相，干燥(MgSO4)，浓缩得到目标化合物(3.0g)，为黄色油状物。
MS APCI+vem/z221[M+H]+.
1HNMR 400MHz(d6-DMSO)8.66(1H，s)，8.09(1H，d)，6.71(1H，d)，4.40(2H，q)，4.09(2H，s)，1.26-1.41(9H，m).
b)6-乙氧基-4-(甲硫基)-3-吡啶腈目标化合物的制备根据实施例10步骤j)-k)的方法，使用步骤a)的产物进行。
MS APCI+vem/z195[M+H]+.
1HNMR 400MHz(d6-DMSO)8.28(1H，s)，6.49(1H，s)，4.42(2H，q)，2.52(3H，s)，1.38(3H，t).
c)6-乙氧基-4-(甲磺酰基)-3-吡啶腈目标化合物的制备根据实施例14步骤d)的方法，使用步骤b)的产物进行。
1HNMR 400MHz(d6-DMSO)8.67(1H，s)，7.44(1H，s)，4.52(2H，q)，3.27(3H，s)，1.42(3H，t).
d)4-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-乙氧基-3-吡啶腈(E)-丁烯二酸盐目标化合物的制备根据实施例10步骤m)-n)的方法，使用步骤c)的产物进行。M.p.169.5-171.5℃.
MS APCI+vem/z344[M+H]+.
1HNMR 400MHz(d6-DMSO)8.52(1H，s)，7.55(2H，d)，7.39(2H，t)，7.30(1H，t)，6.98(1H，s)，6.47(2H，s)，5.13(1H，m)，4.34(2H，q)3.40(2H，m)，2.70(1H，m)，2.21(1H，m)，2.02(1H，m)，1.30(3H，t).
实施例303-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-5-(三氟甲基)-2-吡啶腈乙二酸盐a)1，1-二甲基乙基，(4S)-4-[(2R)-2-[[2-氰基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]硫代]-2-苯乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯目标化合物的制备根据实施例1步骤c)的方法，使用实施例1步骤b)及3-氯-2-氰基-5-三氟甲基吡啶的产物进行。
MS APCI+vem/z408[M+H-Boc]+.
b)3-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-5-(三氟甲基)-2-吡啶腈乙二酸盐目标化合物的制备根据实施例1步骤d)的方法，使用步骤a)的产物得到白色固体的目标化合物(133mg)的。M.p.147-149C.
MS APCI+vem/z368[M+H]+.
1HNMR 400MHz(d6-DMSO)8.98(1H，s)，8.33(1H，s)，7.34(5H，m)，5.04(1H，t)，3.58(1H，dd)，3.48(1H，m)，3.05(1H，m)，2.33(1H，m)，2.18(1H，m).
实施例313-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-1，6-二氢-5-甲基-6-氧代-2-吡啶腈a)3-溴-5-甲基-2-吡啶腈以氰化钠(1.48g)处理3-溴-2-氟-5-甲基吡啶(J.Het.Chem.1967，641，642)的干燥DMSO(100ml)溶液，80℃加热24小时。混合物倾入盐水中，以乙酸乙酯萃取，干燥(MgSO4)有机层。浓缩溶剂，剩余物以层析方法纯化(硅胶，乙醚)得到淡黄色固体的目标产物(3.0g)。
1HNMR 400MHz(CD3)8.47(1H，s)，7.84(1H，s)，2.44(3H，s).
b)3-溴-5-甲基-2-吡啶腈-N-氧化物以30％过氧化氢(20ml)处理步骤a)的产物(2.0g)的冰乙酸(100ml)溶液，并80℃加热22小时。浓缩混合物，剩余物以己烷研磨，收集所得固体得到淡黄色固体的目标产物(2.0g)。
MS APCI+vem/z214[M+H]+.
1HNMR 400MHz(CDCl3)8.07(1H，s)，7.35(1H，s)，2.37(3H，s).
c)1，1-二甲基乙基(4S)-4-[(2R)-2-[(2-氰基-5-甲基-3-吡啶基)硫代]-2-苯乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯N-氧化物目标化合物的制备根据实施例1步骤c)的方法，其使用实施例1步骤b)的硫代苯甲酸酯及步骤b)的吡啶-N-氧化物(0.43g)得到胶状物(1.25g)，可直接用于步骤d)。
MS APCI +vem/z470[M+H]+.
d)1，1-二甲基乙基(4S)-4-[(2R)-2-[[6-(乙酰氧基)-2-氰基-5-甲基-3-吡啶基]硫代]-2苯乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯将步骤d)产物的乙酸酐(20ml)溶液加热回流4小时。浓缩混合物，剩余物溶于乙酸乙酯并以水洗，然后以NaHCO3水溶液洗涤，干燥(MgSO4)。浓缩溶剂，剩余物以层析方法纯化(硅胶，20％乙酸乙酯/己烷)得到粘稠油状的目标产物(0.45g)。
MS APCI+vem/z456[M+2H-tBu].
e)3-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-1，6-二氢-5-甲基-6-氧代-2-吡啶腈目标化合物的制备根据实施例1步骤d)的方法，其使用步骤d)的产物得到白色固体的目标化合物(131mg)，为游离碱形式。
MS APCI+vem/z330[M+H]+.
1HNMR 400MHz(d6-DMSO)7.27(1H，s)，7.26(5H，m)，4.53(1H，m)，3.23(4H，m)，2.50(1H，m)，2.12(1H，m)，1.82(1H，m)，1.97(3H，s).
实施例323-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-5-氯-2-吡啶腈乙二酸盐目标化合物的制备根据实施例10步骤m及n)的方法，其使用3，5-二氯-2-吡啶腈及实施例10步骤g)的产物。以HCl处理后，目标化合物经反相HPLC纯化(以除去不需要的位置异构体)，然后以乙二酸处理得到白色固体。
MS(APCI+ve)m/z334[M(+H)]+.
1H 400MHz(DMSO-d6)8.66(1H，d)，8.22(1H，d)，8.03(约2H，vbs)，7.41-7.27(5H，m)，4.97(1H，t)，3.55(1H，dd)，3.44(1H，dd)，3.02(1H，m)，2.32(1H，m)，2.16(1H，dt).
实施例336-氨基-4-[[(1R，3S)]-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-3-吡啶腈(E)-丁烯二酸盐a)1，6-二氢-4-(甲磺酰基)-6-氧代-3-吡啶腈将实施例10步骤1)的6-甲氧基-4-(甲磺酰基)-3-吡啶腈(5.1g)溶于乙氰(200ml)中，加入碘化钠(7.28g)及三甲基氯硅烷(5.28g)。加热回流反应48小时，然后冷却，真空浓缩溶剂。剩余物在水(120ml)及乙酸乙酯(120ml)中分配。振摇后，滤过收集固体，60℃真空干燥得到灰白色固体的目标化合物(3.6g)。
1HNMR 400MHz(d6-DMSO)13.15(1H，bs)，8.58(1H，s)，6.89(1H，s)，3.39(3H，s).
b)5-氰基-4-(甲磺酰基)-2-吡啶基三氟甲磺酸酯在-20℃下，将三氟甲磺酸酐(triflic anhydride)(0.1ml)加入到步骤a)的产物(57mg)及三乙胺(0.1ml)的乙氰(2ml)溶液中，在-20～20℃搅拌反应2小时。加入水，以二氯甲烷萃取混合物。有机层经干燥(MgSO4)浓缩后，以层析方法纯化(硅胶，二氯甲烷作为流动相)得到目标化合物(66mg)。
1H 300MHz(CDCl3)8.94(1H，s)，7.91(1H，s)，3.37(3H，s).
c)6-氨基-4-(甲磺酰基)-3-吡啶腈将0.5M氨的二噁烷(2ml)溶液加入到步骤b)产物(164mg)的四氢呋喃(2ml)溶液中，搅拌反应16小时。真空除去溶剂，剩余物以层析方法纯化(硅胶，异己烷/乙酸乙酯作为流动相)得到白色固体的目标化合物(33mg)。
1HNMR(d6-DMSO)8.57(1H，s)，7.78(2H，s)，7.05(1H，s)，3.35(3H，s).
d)1，1-二甲基乙基(4S)-4-[(2R)-2-[(2-氨基-5-氰基-4-吡啶基)硫代]-2-苯乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯将实施例10步骤g)产物(105mg)的7M氨的甲醇(5ml)溶液搅拌8小时。浓缩甲醇，剩余物溶于干燥乙氰(3ml)中。加入步骤c)产物(45mg)及碳酸铯(151mg)，混合物20℃搅拌反应1小时。加入氯化铵溶液，以乙酸乙酯萃取混合物。有机萃取物经干燥(MgSO4)浓缩后，以层析方法纯化(硅胶，异己烷/丙酮作为流动相)得到目标化合物(55mg)，为白色固体。
MS(APCI+ve)m/z455[M(+H)]+.
1H 300MHz(CDCl3)8.16(1H，s)，7.38-7.30(5H，m)，6.83(1H，s)，5.22(2H，s)，4.45(1H，d)，3.97(1H，t)，3.55(1H，t)，2.93(1H，d)，2.59(1H，d)，2.29(1H，q)，1.61-1.42(15H，m).
e)6-氨基-4-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-3-吡啶腈(E)-丁烯二酸盐由步骤d)的产物制备目标化合物，其根据实施例10步骤n)的方法。
MS(APCI+ve)m/z315[M(+H)]+.
1HNMR 400MHz(DMSO)8.16(1H，s)，7.51(2H，d)，7.38(2H，t)，7.31(1H，t)，7.14(2H，s)，6.62(1H，s)，6.50(2H，s)，4.95(1H，s)，3.41-3.33(2H，m)，2.78-2.70(1H，m)，2.29-2.19(1H，m)，2.16-2.07(1H，m).
实施例343-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-5-甲基-2-吡啶腈a)1，1-二甲基乙基(4S)-4-[(2R)-2-[(2-氰基-5-甲基-3-吡啶基)硫代]-2-苯乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯目标化合物的制备根据实施例1步骤c)的方法，使用实施例1步骤b)的硫代苯甲酸酯及实施例31步骤a)的溴吡啶(0.17g)制备得到玻璃状产物(0.19g)。
MS APCI+vem/z398[M+2H-tBu]+.
b)3-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-5-甲基-2-吡啶腈目标化合物的制备根据实施例1步骤d)的方法，其使用步骤a)的产物得到白色固体的目标化合物(139mg)，为游离碱形式。
MS APCI+vem/z314[M+H]+.
1HNMR 400MHz(d6-DMSO)8.41(1H，s)，8.18(2H，bs)，8.04(1H，s)，7.43(2H，d)，7.31(3H，m)，5.32(1H，bt)，5.13(1H，m)，3.46(2H，m)，2.93(1H，m)，2.35(3H，s)，2.28(1H，m)，2.16(1H，m).
实施例354-[[(1R，3S)-3-氨基-1-(2-氟苯基)-4-羟丁基]硫代]-6-甲氧基-3-吡啶腈乙二酸盐a)1，1-二甲基乙基4-[(2S)-2-(2-氟苯基)-2-羟乙基]-2，2-二甲基-(4S)-3-噁唑烷羧酸酯，及1，1-二甲基乙基4-[(2R)-2-(2-氟苯基)-2-羟乙基]-2，2-二甲基-(4S)-3-噁唑烷羧酸酯在氮气氛围下，以1，2-二溴甲烷(2.44g)处理搅拌下镁(243mg)的四氢呋喃(30ml)悬液后，缓缓加热。放热开始后，反应物开始回流。待金属溶解后，将混合物在氮气氛围下室温放置。在-65～-70℃氮气氛围下，以正丁基锂(2.5M的己烷溶液，2.26ml，5.67mmol)处理3-溴氟苯(1.17g)的四氢呋喃(10ml)溶液，在-70℃搅拌30分钟。在-65～-70℃以上述溴化镁溶液处理溶液，在-70℃搅拌5分钟，再在0℃搅拌反应20分钟。在0℃氮气氛围下，以上述格林雅试剂处理搅拌下的2，2-二甲基-4-[(4S)-2-氧代乙基]-3-噁唑烷羧酸1，1-二甲基乙酯(1.21g)的四氢呋喃(20ml)溶液，0℃搅拌30分钟后，室温搅拌过夜。加入饱和的氯化铵水溶液结束溶液，以乙醚萃取。萃取物经洗涤干燥(MgSO4)后，浓缩，剩余物以层析方法纯化(硅胶，乙醚/异己烷作为流动相)得到目标化合物1，1-二甲基乙基4-[(2S)-2-(2-氟苯基)-2-羟乙基]-2，2-二甲基-(4S)-3-噁唑烷羧酸酯(600mg)，为白色固体。
1HNMR 300MHz(d4-MeOH)7.38(1H，s)，7.28(4H，s)，7.12(5H，d)，4.80-4.75(9H，m)，4.00-3.79(18H，m)，2.12-1.96(11H，m)，1.54-1.41(96H，m).
进一步的洗脱得到第二种目标化合物1，1-二甲基乙基4-[(2R)-2-(2氟苯基)-2-羟乙基]-2，2-二甲基-(4S)-3-噁唑烷羧酸酯(429mg)，为白色固体。
1HNMR 300MHz(d4-MeOH)7.40-7.37(1H，m)，7.28(1H，s)，7.12(1H，d)，4.83-4.79(1H，m)，4.06(1H，s)，3.90-3.84(1H，m)，3.75-3.72(1H，m)，2.20(1H，s)，1.96-1.86(1H，m)，1.54-1.47(15H，m).
b)4-巯基-6-甲氧基-3-吡啶腈将实施例10步骤I的产物(1.0g)及硫氢化钠(790mg)的乙醇(50ml)混合物搅拌2小时，并浓缩。剩余物溶于水，以稀盐酸处理至pH6，以乙酸乙酯萃取。萃取物经干燥(MgSO4)浓缩得到目标化合物(741mg)，为褐色粉末。
1HNMR 300MHz(CDCl3)8.36(1H，s)，6.72(1H，s)，3.97(3H，s).
c)4-[[3(3S)-氨基-1(1R)-(2-氟苯基)-4-羟基丁基]硫代]-6-甲氧基-3-吡啶腈乙二酸盐在-5～0℃氮气氛围下，以DIAD(238mg)处理搅拌下的三苯基膦(309mg)及四氢呋喃(10ml)的溶液，-5℃搅拌20分钟后，冷却至-20℃放置。将步骤b)产物(196mg)及步骤a)产物(589mg)混合物进行搅拌，以上述DIAD/三苯基膦溶液处理，搅拌过夜后浓缩。剩余物以层析方法纯化(硅胶，乙醚/异己烷)，溶于甲醇(10ml)中，以2M HCl的二噁烷(10ml)溶液处理，搅拌2小时后浓缩。剩余物以制备性HPLC在19×50mm Xterra C8 5微米柱上纯化，使用10-60％乙氰的2％水0.880氨水溶液洗脱6分钟，流速20ml/分钟。以DAD作UV检测。游离碱溶于乙醚/乙醇混合物，以乙二酸的乙醇溶液处理并浓缩。剩余物以乙醚研磨，经干燥得到目标化合物(31mg)，为乳酪状粉末。M.p.179-185℃.
MS APCI+vem/z348[M+H]+.
1HNMR 300MHz(d4-MeOH)8.58(1H，s)，7.62(1H，t)，7.43-7.37(1H，m)，7.31-7.23(2H，m)，6.98(1H，s)，5.22(1H，t)，3.91(3H，s)，3.56-3.40(4H，m)，3.05-3.02(1H，m)，2.40-2.17(2H，m).
实施例362-[[(1R，3S)-3-氨基-1-(4-氟苯基)-4-羟丁基]氧基]-6-三氟甲基-3-吡啶腈乙二酸盐a)1，1-二甲基乙基4-[(2S)-2-(4-氟苯基)-2-羟乙基]-2，2-二甲基-(4S)-3-噁唑烷羧酸酯，及1，1-二甲基乙基4-[(2R)-2-(4-氟苯基)-2羟基乙基]-2，2-二甲基-(4S)-3-噁唑烷羧酸酯在0℃氮气氛围下，以4-氟苯基溴化镁(2M的乙醚溶液，8.32ml)处理搅拌下的1，1-二甲基乙基2，2-二甲基-4-[(4S)-2-氧代乙基)-3噁唑烷羧酸酯(3.0g)的四氢呋喃溶液(20ml)，并于0℃反应1小时。加入饱和的氯化铵溶液结束反应，以乙醚萃取。萃取物经洗涤干燥(MgSO4)后，浓缩，剩余物以层析方法纯化(硅胶，乙醚/异己烷作为流动相)得到目标化合物1，1-二甲基乙基4-[(2S)-2-(4-氟苯基)-2-羟乙基]-2，2-二甲基(4S)-3-噁唑烷羧酸酯(1.62g)，为白色固体。
1HNMR 300MHz(d4-MeOH)7.40-7.35(2H，m)，7.10-7.04(2H，m)，4.72-4.61(1H，m)，4.02-3.74(3H，m)，2.05-1.87(2H，m)，1.55-1.41(15H，m).
进一步洗脱得到目标化合物1，1-二甲基乙基4-[(2R)-2-(2-氟苯基)-2-羟乙基]-2，2-二甲基-(4S)-3-噁唑烷羧酸酯(1.21g)，为白色固体。
1HNMR 300MHz(d4-MeOH)7.39(2H，m)，7.07(2H，m)，4.73-4.69(1H，m)，4.08(1H，m)，3.92-3.80(2H，m)，2.15(1H，m)，1.83(1H，m)，1.53-1.41(15H，m).
b)2-[[(1R，3S)-3-氨基-1-(4-氟苯基)-4-羟丁基]氧基]-6-三氟甲基-3-吡啶腈乙二酸盐以氢化钠(60％，分散在油中，30mg)处理搅拌下的a)部分(2R，4S)异构体(214mg)的及2-氯-6三氟甲基-3-吡啶腈(130mg)的NMP溶液(3ml)，搅拌过夜后浓缩。剩余物溶于乙醚，洗涤，干燥(MgSO4)后浓缩。剩余物以层析方法纯化(硅胶，乙醚/异己烷作为流动相)得到油状物，将其溶于甲醇(5ml)中，以4MHCl的二噁烷溶液处理，搅拌2小时后浓缩。剩余物以制备性反相HPLC在19×50mm Xterra C8 5微米柱上进行处理，使用10-80％乙氰的2％0.880氨水溶液洗脱5分钟，流速20ml/分钟。采用DAD进行UV检测。将游离碱溶于乙醚/乙醇混合物中，以乙二酸的乙醇溶液处理及浓缩。剩余物以乙醚研磨，经干燥得到奶酪粉末状的目标化合物(85mg)，M.p.109-114℃。
MS APCI+ve′/z3 70[M+H]+.
1HNMR 300MHz(d4-MeOH)8.34(1H，d)，7.56-7.50(3H，m)，7.13-7.09(2H，m)，6.35-6.31(1H，m)，3.85-3.81(1H，m)，3.75-3.71(1H，m)，3.53-3.47(1H，m)，2.53-2.45(1H，m)，2.34-2.27(1H，m).
实施例372-(2S)-氨基-4-(4R)-(3-氟苯基)-4-[(4-甲氧基-2-硝基苯基)硫代]丁-1-醇a)1，1-二甲基乙基4-[(2S)-2-(3-氟苯基)-2-羟乙基]-2，2-二甲基-3-(4S)-噁唑烷羧酸酯目标化合物以溴化3-氟苯基镁[由3-氟溴苯(2.91g)、镁(485mg)及四氢呋喃(20m])制得]及1，1-二甲基乙基2，2-二甲基-4-[(4S)-2-氧代乙基)-3-噁唑烷羧酸酯(3.0g)按照实施例36步骤a)所述的方法制备得到水白色的油状物(2.06g)。
1HNMR 300MHz(d4-MeOH)7.39-7.30(1H，m)，7.1 8-7.09(2H，m)，7.02-6.94(1H，m)，4.75-4.63(1H，m)，4.02-4.00(2H，m)，3.76-3.72(1H，m)，2.02-1.85(2H，m)，1.55-1.42(15H，m).
b)1，1-二甲基乙基-(苯甲酰基硫代)-2(2R)-3-氟苯基)乙基]-2，2-二甲基3(4S)-噁唑烷羧酸酯(ozolidinecarboxylate)在0℃氮气氛围下，滴加入DIAD(6.75g)处理搅拌下的三苯基膦(8.76g)的四氢呋喃(100ml)溶液，搅拌30分钟，以硫代苯甲酸(4.61g)及a)部分的醇(5.67g)混合物处理，搅拌过夜后浓缩。剩余物滤过硅胶垫，以二氯甲烷/甲醇洗脱，浓缩滤液。剩余物以乙醚/异己烷溶解，滗出上层液，浓缩。剩余物以层析方法纯化(硅胶，二氯甲烷/异己烷)得到黄色油状的目标化合物(4.8g)，该油状物可直接用于下一步。
c)1，1-二甲基乙基4-[(2R)-2-(3-氟苯基)-2-巯基乙基]-2，2-二甲基-(4S)-3-噁唑烷羧酸酯将步骤c)的产物(4.8g)及7M氨甲醇混合物搅拌6小时，浓缩得到胶状目标化合物，将其溶于NMP(86ml)直接用于下一步。
MS APCI+ve′/z356[M+H]+.
d)2-(2S)-氨基-4-(3-氟苯基)-4-(4R)-[(4-甲氧基-2-硝基苯基)硫代]丁-1-醇以步骤d)得到的硫醇溶液(2ml)处理碳酸铯(717mg)及4-氯-3-硝基茴香醚(0.2mmol)的混合物，搅拌过夜。混合物以水稀释后，以二氯甲烷萃取。洗涤并干燥(MgSO4)萃取物，然后浓缩，剩余物以层析方法纯化(硅胶，乙醚/异己烷)得到油状物，该油状物溶于甲醇(2ml)，以4M HCl的二噁烷(5ml)溶液处理，搅拌30分钟后浓缩。剩余物以制备性反相HPLC 19×50mm Xterra C8 5微米柱处理，以10-60％乙氰的2％0.880氨水溶液洗脱6分钟；流速20ml/分钟。用DAD作UV检测，得到黄色油状的目标化合物(5mg)。
MS APCI+vem/z367[M+H]+.
1HNMR 300MHz(d4-MeOH)7.44-7.38(2H，m)，7.31-7.24(1H，m)，7.16-7.05(3H，m)，6.98-6.91(1H，m)，4.65-4.60(1H，m)，3.83(3H，s)，3.50-3.35(2H，m)，2.77-2.69(1H，m)，2.16-2.06(1H，m)，1.96-1.87(1H，m).
实施例382(2S)-氨基-4(4R)-(3-氟苯基)-4-[(4-氯-2-硝基苯基)硫代]丁-1-醇根据实施例37步骤d)的方法，目标化合物由1-溴-4-氯-2-硝基苯及实施例3步骤c)的硫醇(2ml)制备得到，为黄色油状物(14mg)。
MS APCI+vem/z371[M+H]+.
1HNMR 300MHz(d4-MeOH)8.04-8.03(1H，m)，7.63(1H，d)，7.54(1H，dd)，7.36-7.19(3H，m)，7.01-6.94(1H，m)，4.83-4.79(1H，m)，3.46-3.34(2H，m)，2.67-2.59(1H，m)，2.17-2.06(1H，m)，1.97-1.87(1H，m).
实施例392(2S)-氨基-4(4R)-(3-氟苯基)-4-[(5-氨基-4-氯-2-硝基苯基)硫代]丁-1-醇根据实施例37步骤d)的方法，目标化合物由1-溴-4-氯-2-硝基苯及实施例3步骤c)的硫醇(2ml)制备得到，为黄色油状物(14mg)。
MS APCI+vem/z386[M+H]+.
1HNMR 300MHz(d4-MeOH)8.13(1H，s)，7.37-7.26(3H，m)，7.03-6.96(1H，m)，6.83(1H，s)，4.71-4.66(1H，m)，3.47-3.34(2H，m)，2.69-2.61(1H，m)，2.14-1.90(2H，m).
实施例402(2S)-氨基-4(4R)-(3-氟苯基)-4-[(4-羟基甲基)-2-硝基苯基)硫代]丁-1-醇根据实施例37步骤d)的方法，目标化合物由1-溴-4-氯-2-硝基苯及实施例3步骤c)产物(2ml)制备得到，为黄色油状物(12mg)。
MS APCI+vem/z367[M+H]+.
1HNMR 300MHz(d4-MeOH)7.97(1H，d)，7.61(1H，d)，7.49(1H，dd)，7.31-7.19(3H，m)，6.98-6.91(1H，m)，4.86-4.78(1H，m)，4.61(2H，s)，3.46-3.33(2H，m)，2.68-2.60(1H，m)，2.13-2.04(1H，m)，1.97-1.87(1H，m).
实施例412(2S)-氨基-4(4R)-(3-氟苯基)-4-[(4-氟-2-硝基苯基)硫代]丁-1-醇目标化合物由1-溴-4-氯-2-硝基苯及实施例3步骤c)的硫醇(2ml)，根据实施例37步骤d)的方法进行制备。
MS APCI+vem/z355[M+H]+.
1HNMR 300MHz(d4-MeOH)7.79-7.74(1H，m)，7.68-7.61(1H，m)，7.39-7.26(2H，m)，7.24-7.14(2H，m)，7.01-6.93(1H，m)，4.79-4.72(1H，m)，3.47-3.35(2H，m)，2.69-2.60(1H，m)，2.16-2.05(1H，m)，1.96-1.86(1H，m).
实施例422(2S)-氨基-4(4R)-(3-氟苯基)-4-[(3，5-二氯-2-吡啶基)硫代]丁-1-醇根据实施例37步骤d)的方法，目标化合物由2，3，5-三氯吡啶及实施例3，步骤c)的硫醇(2ml)制备得到，为水-白色油状物(25mg)。
MS APCI+vem/z361[M+H]+.
1HNMR 300MHz(d4-MeOH)8.43(1H，d)，7.82(1H，d)，7.37-7.23(3H，m)，7.02-6.95(1H，m)，5.28-5.21(1H，m)，3.48-3.34(2H，m)，2.71-2.63(1H，m)，2.26-2.16(1H，m)，2.08-1.99(1H，m).
实施例434-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-3-氯苯甲腈乙二酸盐a)1，1-二甲基乙基(4S)-4-[(2R)-2-[(2-氯-4-氰基苯基)硫代]-2-苯乙基]-2，2二甲基-3-噁唑烷羧酸酯目标化合物(320mg)的制备根据实施例3步骤a)的方法，使用实施例1步骤b)的产物及3-氯-4-氟苯甲腈进行。
MS APCIvem/z3473/5(M+H+).
1HNMR 400MHz(d6-DMSO(90℃))7.87(1H，d)，7.45-7.62(4H，m)，7.23-7.34(3H，m)，4.70(1H，m)，4.04(1H，m)，3.78(1H，m)，3.65(1H，m)，2.15(1H，m)，2.06(1H，m)，1.46(9H，s)，1.43(3H，s)，1.39(3H，s).
b)4-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-3-氯苯甲腈乙二酸盐根据实施例4步骤b)的方法，使用步骤a)的产物制备目标化合物(175mg)，为白色固体(M.p.142-144℃)。
MS APCI+vem/z333/5(M+H+).
1HNMR 400MHz(d6-DMSO)8.02(1H，s)，7.75(1H，d)，7.61(1H，d)，7.52(2H，m)，7.25-7.4(3H，m)，5.00(1H，m)，3.50(1H，m)，3.39(1H，m)，2.96(1H，t)，2.10-2.30(2H，m).
实施例44
4-氯-2-[[(1R，3S)-3-(乙基氨基)-4-羟基-1-(2-噻唑基)丁基]氧基]-5-氟苯甲腈乙二酸盐将乙醛(35μl)加入至实施例8步骤c)产物(140mg)的乙醇(4ml)溶液中，搅拌反应16小时。冷却至0℃后，加入硼氢化钠(77mg)，搅拌反应30分钟。加入水(0.5ml)，以乙酸乙酯稀释混合物并过滤。溶液经干燥(MgSO4)，浓缩。以反相HPLC纯化，中和相关流分并加入乙二酸(1当量)得到目标化合物。以乙酸乙酯/乙醚重结晶得到白色固体。M.p.55-80℃.
MS(APCI+ve)m/z370[M(+H)]+.
1H 400MHz(CD3OD)7.87(1H，d)，7.70(2H，m)，7.40(1H，d)，6.05(1H，dd)，3.92(1H，dd)，3.80(1H，dd)，3.51(1H，m)，3.16(2H，m)，2.54(2H，m)，1.33(3H，t).
实施例452-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-(5-噻唑基)丁基]氧基]-5-氟-苯甲腈(2E)-2-丁烯二酸盐a)1，1-二甲基乙基(4S)-4-[(2R)-2-(2-氯-5-噻唑基)-2-羟乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯及1，1-二甲基乙基(4S-4-[(2S)-2-(2-氯-5-噻唑基)-2-羟乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯在-78℃氮气氛围下，将丁基锂(1.6M的己烷溶液，4.26ml)滴加入二异丙基胺(1.59ml)的四氢呋喃(20ml)溶液中。在-78℃搅拌反应15分钟后，滴加入2-氯噻唑(900mg)的四氢呋喃(10ml)溶液，反应混合物在冷却条件下继续搅拌15分钟。然后用5分钟加入1，1-二甲基乙基(4S)-2，2-二甲基-4-(2-氧代乙基)-3-噁唑烷羧酸酯(1.82g)的四氢呋喃(10ml)溶液。滴加完毕后，撤掉冷却浴，混合物继续搅拌30分钟。将反应混合物倾入水中，以乙醚萃取产物。合并萃取物，干燥(MgSO4)，经滤过后真空浓缩。层析纯化(硅胶，50％异己烷/乙醚作为流动相)得到无色油状的(4S，2S)目标化合物(500mg)。
1HNMR 400MHz(CDCl3)7.34(1H，s)，5.47(1H，d)，4.80(1H，d)，4.32(1H，m)，4.03(1H，m)，3.73(1H，d)，2.09(1H，m)，1.89(1H，m)，1.53(15H，m).
进一步洗脱得到无色油状(4S，2R)目标化合物(380mg)。
1HNMR 400MHz(CDCl3)7.37(1H，s)，5.01(1H，m)，4.73(1H，br s)，4.18(1H，brs)，4.05(1H，m)，3.73(1H，br d)，2.18(2H，br d)，1.48(15H，m).
b)1，1，-二甲基乙基(4S)-4-[(2R)-2-羟基-2-(5-噻唑基)乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯将10％钯-碳加入到步骤a)的产物(380mg)及乙酸钠(129mg)的乙醇(15ml)溶液中。混合物在5个大气压的氢气氛围下搅拌反应16小时。过滤反应物，浓缩。然后将所得剩余物溶于二氯甲烷中，二次过滤后浓缩得到无色油状的目标化合物(235mg)。
1HNMR 400MHz(CDCl3)8.73(1H，brs)，7.76(1H，s)，5.12(1H，m)，4.22(1H，m)，4.04(1H，m)，3.82(1H，m)，2.22(2H，m)，1.48(15H，s).
c)1，1，-二甲基乙基(4S)-4-[(2R)-2-(2-氰基-4-氟苯氧基)-2-(5-噻唑基)乙基]-2，2二甲基-3-噁唑烷羧酸酯将碳酸铯(466mg)加入至步骤b)的产物(235mg)及2，5-二氟苯甲腈(100mg)的DMF(15ml)溶液中。然后，室温搅拌反应混合物3天。然后，升温至55-60℃反应5天。冷却至室温后，混合物以水稀释并以乙酸乙酯萃取。有机相经干燥(MgSO4)，过滤及真空浓缩后，所得剩余物以层析方法纯化(硅胶，异己烷/乙酸乙酯作为流动相)制得无色油状的目标化合物(150mg)。
MS APCI+vem/z448([M(+H)]+).
d)2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-(5-噻唑基)丁基]氧基]-f-氟-苯甲腈(2E)-2-丁烯二酸盐目标化合物的制备根据实施例10步骤n)的方法，使用步骤c)的产物进行。M.p.163-165℃.
MS APCI+vem/z308([M(+H)]+).
1HNMR 400MHz(d6-DMSO)9.11(1H，s)，8.04(1H，s)，7.73(1H，m)，7.52(1H，m，)7.41(1H，m)，6.47(2H，s)，6.24(1H，t)，3.55(1H，m)，3.46(1H，m)，3.00(1H，t)，2.30(1H，m)，2.17(1H，m).
实施例462-[[(1R，3S)-3-氨基-4-甲氧基-1-苯丁基]硫代]-6-甲基-3-吡啶腈乙二酸盐a)6-甲基-2-[[(1R)-1-苯基-3-丁烯基]硫代]-3-吡啶腈在0℃下，将2-巯基-6-甲基-3-吡啶腈(6.08g)、α-(2-丙烯基)-(α1S)-苯甲醇(6g)及三苯基膦(13.8g)的干燥四氢呋喃(150ml)混合物进行搅拌。用20分钟滴加入偶氮二甲酸二异丙酯(10.4ml)。然后将混合物升至室温继续搅拌17小时。真空浓缩反应混合物至干，剩余物以层析方法纯化(硅胶，异己烷/乙酸乙酯95∶5)得到淡黄色油状的目标化合物(9.58g)。
MS APCI+vem/z281([M+H]+).
b)2-[[(1R，3R)-3，4-二羟基-1-苯丁基]硫代]-6-甲基-3-吡啶腈将AD-mix β(47.89g)加入至剧烈搅拌下的2-甲基-2-丙醇及水(各160ml)的混合物中。混合物冷却至0℃，将步骤a)的产物(9.58g)的2-甲基-2-丙醇(20ml)溶液滴加至混合溶液中。0℃反应20分钟后，混合物以乙酸乙酯(3×100ml)萃取，合并萃取物，干燥(Na2SO4)后浓缩蒸干。混合物以层析方法纯化(硅胶，二氯甲烷/7M氨的甲醇溶液99∶1-98∶2)得到目标化合物(5.39g)。
MS APCI+vem/z315([M+H]+).
c)2-[[(1R，3R)-4-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]-3-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-甲基-3-吡啶腈在0℃下，将氯-(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷(1.54g)加入至步骤b)的产物(3.2g)及咪唑(700mg)的干燥四氢呋喃(75ml)的搅拌混合物中。在0℃下搅拌混合物1小时，然后20℃搅拌1小时。再加入氯-(1，1-二甲基乙基)二甲基硅烷(750mg)及咪唑(350mg)，再持续搅拌反应3小时。浓缩混合物至干，所得剩余物溶于乙醚(100ml)中，溶液通过硅胶垫。所得乙醚溶液浓缩至干得到目标化合物(3g)。
MS APCI+vem/z429([M+H]+).
d)2-[[1R，3R)-4-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]-3-[(甲磺酰基)氧基]-1-苯丁基]硫代]-6-甲基-3-吡啶腈在0℃下，以二异丙基乙基胺(2.1ml)及甲磺酰氯(0.91ml)处理步骤c)产物(5g)的干燥四氢呋喃(50ml)溶液，混合物搅拌1小时。再加入2当量的二异丙基乙基胺及甲磺酰氯，继续反应3小时至反应结束。然后减压除去溶剂，剩余物溶于二氯甲烷及乙醚(200ml 1∶1)混合溶液中，然后过硅胶垫。收集滤液，再与冲洗硅胶的乙醚液合并。浓缩得到目标化合物，立即使用。
MS APCI+vem/z507([M+H]+).
e)2-[[(1R，3S)-3-叠氮基-4-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]-1-苯丁基]硫代]-6-甲基-3-吡啶腈将步骤d)的产物溶于干燥DMF(50ml)中，溶液以叠氮钠(1.52g)处理。混合物于90℃加热4小时，然后冷却，以水(100ml)稀释。产物以乙醚(2×100ml)萃取，合并萃取物，干燥(MgSO4)后浓缩得油状物。粗品以层析方法纯化(硅胶乙醚/异己烷1∶4)得到目标化合物(4.9g)。
1HNMR 400MHz(CDCl3)7.59(1H，d)，7.43-7.2(5H，m)，6.86(1H，d)，5.29(1H，dd)，3.65-3.54(2H，m)，3.04(1H，m)，2.56(3H，s)2.25-2.07(2H，m)，0.83(9h，s)，0.00(6H，s).
f)2-[[1R，3S)-3-叠氮基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-甲基-3-吡啶腈将步骤e)的产物溶于含氟化四丁基铵(11ml，1M的四氢呋喃溶液)的干燥四氢呋喃(50ml)中，室温搅拌20小时。混合物浓缩至干，所得剩余物溶于乙醚及二氯甲烷混合溶液，然后滤过硅胶垫。浓缩滤液得到目标化合物(2.6g)。
MS APCI+vem/z454([M+H]+).
g)2-[[(1R，3S)-3-叠氮基-4-[(甲磺酰基)氧基]-1-苯丁基]硫代]-6-甲基-3-吡啶腈以甲磺酰氯(0.12ml)处理步骤f)的产物(0.5g)及二异丙基乙基胺(0.26ml)的干燥四氢呋喃(20ml)冰冷溶液。加入完毕，混合物升至室温搅拌1小时。再加入二异丙基乙基胺(0.26ml)及甲磺酰氯(0.12ml)，继续搅拌2小时。以水(100ml)稀释混合物，以乙酸乙酯(2×50ml)萃取。合并萃取物，干燥(MgSO4)浓缩得油状物。粗品以层析方法纯化(硅胶，乙醚/异己烷1∶1)。分离得到油状的目标化合物(630mg)。
MS APCI+vem/z418([M+H]+.
h)2-[(3-叠氮基-4-甲氧基-1-苯丁基)硫代]-6-甲基-3-吡啶腈以甲醇钠(1ml，25wt/v的甲醇溶液)处理步骤g)磺酸酯(0.9g)的甲醇(50ml)溶液，混合物回流20小时。然后将混合物浓缩至小体积，以10％柠檬酸水溶液(20ml)处理。产物以乙醚(100ml)萃取，萃取液经干燥(MgSO4)后浓缩。粗品以层析方法纯化(硅胶，乙醚/异己烷1∶4)得到琥珀色油状的目标化合物(200mg)。
MS APCI+vem/z354([M+H]+).
i)2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-甲氧基-1-苯丁基]硫代]-6-甲基-3-吡啶腈将叠氮化合物46g(198mg)及三苯基膦的含水四氢呋喃(10ml+0.2ml水)溶液进行搅拌，升温回流3小时。然后浓缩混合物，剩余物以层析方法纯化(硅胶，二氯甲烷/7M氨的甲醇液95∶5)得到游离碱(180mg)。加入等当量乙二酸的乙氰溶液，制备得到奶酪状乙二酸盐(180mg)，为有色固体。
MS APCI+vem/z328([M+H]+).
1H 400MHz(d6-DMSO)8.08(1H，d)，7.51-7.196H，m)，5.31(1H，t)，3.47-3.35(2H，m)，3.21-3.17(4H，m)，2.6(3H，s)，2.33(2H，t).
实施例472-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-4-甲基-1-苯基戊基]氧基]-4-氯-5-氟苯甲腈乙二酸盐a)1，1-二甲基乙基[(4S)4-(2R)-2-羟基-2-苯乙基]-2，2，5，5-四甲基-3-噁唑烷羧酸酯在0℃氮气氛围下，以溴化苯基镁(1M的四氢呋喃溶液，22ml)处理1，1-二甲基乙基(4S)-2，2，5，5-四甲基-4-(2-氧代乙基)-3噁唑烷羧酸酯(4.6g)的干燥四氢呋喃(50ml)溶液。加入完毕后，反应升温至20℃，搅拌0.5小时。将柠檬酸水溶液(150ml，10％w/v)加入到反应混合物以结束反应，产物以乙酸乙酯(2×75ml)萃取。合并萃取物，干燥(MgSO4)后浓缩得到胶状物。非对映异构体混合物以层析分离(硅胶，异己烷/乙醚)。目标化合物为无色固体(1.3g)。
1H 400MHz(d6-DMSO)7.35-7.20(5H，m)，5.19(1H，d)，4.63-4.59(1H，m)，3.93(1H，m)，1.9-1.7(2H，m)，1.50(3H，s)，1.44(9H，s)，1.29(3H，s)，1.26(3H，s)，1.24(3H，s).
b)1，1-二甲基乙基(4S)4-[(2R)-2-(5-氯-2-氰基-4-氟苯氧基)-2-苯乙基]-2，2，5，5-四甲基-3-噁唑烷羧酸酯目标化合物根据实施例8步骤b)所述的方法，使用步骤a)的产物进行制备。
MS APCI+vem/z403([M+H-boc]+).
c)2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-4-甲基-1-苯基戊基]氧基]-4-氯-5-氟苯甲腈乙二酸盐根据实施例8步骤c)的方法，由步骤b)的化合物制备目标化合物。M.p 80℃.
1H 400MHz(d6-DMSO)7.62(1H，d)，7.49-7.34(5H，m)，7.17(1H，d)，5.67(1H，dd)，3.24(1H，dd)，2.38-2.25(2H，m)，1.26(3H，s)，1.21(3H，s).
MS APCI+vem/z363([M+H]+).
实施例48
2-[[(1S，3S)-3-氨基-4-羟基-1-丙基丁基]氧基]-4-氯-5-氟苯甲腈乙二酸盐a)1，1-二甲基乙基(4S)4-[(2S)-2-羟基戊基]-2，2-二甲基-3噁唑烷羧酸酯目标化合物的制备根据实施例47步骤a)的方法，但是使用氯化丙基镁及1，1-二甲基乙基(4S)-2，2-二甲基-4-(2-氧代乙基)-3-噁唑烷羧酸酯。
MS APCI+vem/z188([M+H-boc]+).
b)1，1-二甲基乙基(4S)4-[(2S)-2-(5-氯-2-氰基-4-氟苯氧基)戊基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯目标化合物的制备根据实施例8步骤b)的方法，使用步骤a)产物的干燥四氢呋喃溶液。
MS APCI+vem/z341([M+H-boc]+).
c)2-[[(1S，3S)-3-氨基-4-羟基-1-丙基丁基]氧基]-4-氯-5-氟苯甲腈乙二酸盐目标化合物的制备根据实施例8步骤c)所述的方法。M.p.171-2℃MS APCI+vem/z301([M+H]+).
1H 300MHz(d6-DMSO)8.02(1H，d)，7.66(1H，d)，4.79(1H，m)，3.67-3.61(1H，m)，3.48-3.42(1H，m)，3.2(1H，m)，1.92(2H，t)，1.66-1.56(2H，m)，1.5-1.2(2H，m)，0.89(3H，t).
实施例492-[[(1S)-1-[(2S)-2-氨基-3-羟丙基]戊基]硫代]-6-甲基-3-吡啶腈乙二酸盐a)1，1-二甲基乙基(4S)-4-[(2R)-2-羟己基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯目标化合物的制备根据实施例47步骤a)所述的类似方法，但使用氯化丁基镁及1，1-二甲基乙基(4S)-2，2-二甲基-4-(2-氧代乙基)-3-噁唑烷羧酸酯。
1H 300MHz(d6-DMSO)4.53(1H，d)，4.28-4.22(1H，m)，4.00(1H，dd)，3.66(1H，d)，3.55-3.42(1H，m)，1.8-1.71(1H，m)，1.5-1.3(21H，m)，0.90(3H，t).
b)1，1-二甲基乙基(4S)-4-[(2S)-2-(苯甲酰基硫代)己基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯目标化合物的制备根据实施例1步骤b)的方法，但使用实施例49步骤a)的产物。
MS APCI+vem/z322([M+H-boc]+).
c)1，1-二甲基乙基(4S)4-[(2S)-2-[(3-氰基-6-甲基-2-吡啶基)硫代]己基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯目标化合物的制备根据实施例17步骤b)的方法，但使用实施例49步骤b)的产物。
MS APCI+vem/z434([M+H]+).
d)2-[[(1S)-1-[(2S)-2-氨基-3-羟丙基]戊基]硫代]-6-甲基-3-吡啶腈乙二酸盐目标化合物的制备根据实施例8步骤c)的方法，使用步骤c)的产物。
MS APCI+vem/z294([M+H]+).
1H 400MHz(d6-DMSO)8.09(1H，d)，7.2(1H，d)，4.22(1H，br s)，3.5-3.8(2H，m)，3.2(1H，brs)，2.52(3H，s)，1.5-2.2(4H，m)，0.93(4H，d)，0.88(3H，t).
实施例502-[[(1S，3S)-3-氨基-4-羟基-1-(2-甲基丙基)丁基]硫代]-6-甲基-3-吡啶腈乙二酸盐a)1，1-二甲基乙基(4S)-4-[(2R)-2-羟基-4-甲基戊基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯目标化合物的制备根据实施例47步骤a)的方法，使用氯化异丁基镁及1，1-二甲基乙基(4S)-2，2-二甲基-4-(2-氧代乙基)-3噁唑烷羧酸酯。
MS APCI+vem/z202([M+H-boc]+).
b)1，1-二甲基乙基(4S)-4-[(2S)-2-(苯甲酰基硫代)-4-甲基戊基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯目标化合物的制备根据实施例1步骤b)的方法，但使用步骤a)的产物。
MS APCI+vem/z322([M+H-boc]+).
c)1，1-二甲基乙基(4S)-4-[(2S)-2-[(3-氰基-6-甲基-2-吡啶基)硫代]-4-甲基戊基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯目标化合物的制备根据实施例17步骤b)的方法，使用步骤b)的产物。
MS APCI+vem/z434([M+H]+).
d)2-[[(1S，3S)-3-氨基-4-羟基-1-(2-甲基丙基)丁基]硫代]-6-甲基-3-吡啶腈乙二酸盐目标化合物的制备根据实施例8步骤c)的方法，使用步骤c)的产物。
MS APCI+vem/z322([M+H]+).
1H 400MHz(DMSO-d6)8.1(1H，d)，7.2(1H，d)，4.2-4.1(1H，m)，3.7-3.5(2H，m)，3.2(1H，m)，2.52(3H，s)，2.1-2(1H，m)，1.73-1.7(2H，m)，1.45-1.24(4H，m)，0.86(3H，t).
实施例512-[[(3S)-3-氨基-4-羟基-1-(5-异噁唑)丁基]硫代]-6-甲基-3-吡啶腈(E)-丁烯二酸盐a)(4S)-4-[2-(5-异噁唑基)-2-氧代乙基-2-噁唑烷酮目标化合物的制备根据实施例2步骤a)的方法，使用5-异噁唑甲酰氯。
1HNMR(d6-DMSO)δ8.84(1H，d)，7.72(1H，d)，4.49(1H，t)，4.37(1H，t)，4.24(1H，五重峰)，4.06(1H，dd)，3.92-3.74(2H，t).
b)(4S)-4-[2-羟基-2-(5-异噁唑基)乙基]-2-噁唑烷酮目标化合物的制备根据实施例2步骤b)的方法，使用步骤a)的产物进行。
1HNMR(d6-DMSO)8.49(1H，t)，7.83&7.65(1H，s)，6.37(1H，dd)，5.90(1H，dd)，4.87(1H，dd)，4.43-4.31(1H，m)，4.10-3.72(2H，m)，1.99-1.85(2H，m).
c)(4S)-4-[2-(苯甲酰基硫代)-2-(5-异噁唑基)乙基]-2-噁唑烷酮目标化合物的制备根据实施例2步骤c)的方法，使用步骤b)的产物进行。
MS APCI+vem/z318[M+H]+.
d)2-[[1-(5-异噁唑基)-2-[(4S)-2-氧代噁唑烷基]乙基]硫代]-6-甲基-3-吡啶腈目标化合物的制备根据实施例2步骤d)的方法，使用步骤c)的产物进行。
MS APCI+vem/z330[M+H]+e)1，1-二甲基乙基(4(S)-4-[2-[(3-氰基-6-甲基-2-吡啶基)硫代]-2-(5-异噁唑)乙基-2-氧代-3-噁唑烷羧酸酯目标化合物的制备根据实施例2步骤e)的方法，使用步骤d)的产物进行。
1HNMR(CDCl3)8.22(1H，ddd)，7.75(1H，dd)，7.03(1H，dd)，6.44&6.29(1H，2xdd)，5.59 & 5.48-5.40(1H，t & m)，4.56-4.22(3H，m)，2.65-2.54(5H，m)，1.62-1.48(9H，m).
f)1，1-二甲基乙基[(1S)-3-[(3-氰基-6-甲基-2-吡啶基)硫代]-1-(羟基甲基)-3(5-异噁唑)丙基]氨基甲酸酯目标化合物的制备根据实施例2步骤f)的方法，使用步骤e)的产物进行。
MS APCI+vem/z405[M+H]+.
g)2-[[(3S)-3-氨基-4-羟基-1-(5-异噁唑基)丁基硫代]-6-甲基-3吡啶腈，(E)-丁烯二酸盐将步骤f)产物(48mg)的4M HCl的二噁烷(2ml)溶液搅拌2小时。加入2M碳酸钾溶液，混合物以乙酸乙酯萃取。有机层经干燥(Na2SO4)，浓缩，以层析方法纯化(硅胶，二氯甲烷/7M氨的甲醇溶液作为流动相)，然后加入1当量富马酸使其转变为(E)-丁烯二酸盐，得到白色固体的目标化合物(17mg)。M.p.150-2℃.
MS APCI+vem/z305[M+H]+.
1HNMR(d6-DMSO)8.51(1H，d)，8.13(1H，d)，7.24(1H，dd)，6.54(1H，dd)，6.43(2H，s)，5.69&5.62(1H，2xt)，3.57-3.32(3H，m)，2.97-2.75(1H，m)，2.60(3H，s)，2.43-2.01(2H，m).
实施例522-[[(3S)-3-氨基-4-羟基-1-(5-异噁唑基)丁基]氧基]-6-(三氟甲基)-3-吡啶腈，(E)-丁烯二酸盐a)2-[1-(5-异噁唑基)-2-[(4S)-2-氧代-4-噁唑烷基]乙氧基]-6-(三氟甲基)-3吡啶腈将碳酸铯(1.35g)加入至实施例51步骤b)的产物(330mg)及3-氯-5-(三氟甲基)-2-吡啶腈(556mg)的DMF溶液(2ml)中，混合物在20℃搅拌1小时。加入氯化铵溶液，混合物以乙酸乙酯萃取。有机层经干燥(MgSO4)，浓缩后以层析方法纯化(硅胶，异己烷/乙酸乙酯作为流动相)得到目标化合物(258mg)。
1HNMR(CDCl3)8.25(1H，d)，8.15(1H，t)，7.47(1H，t)，6.53(1H，t)，6.42(1H，d)，5.78&，5.64(1H，2xs)，4.66-4.53(1H，m)，4.29-4.07(2H，m)，2.68-2.37(2H，m).
b)1，1-二甲基乙基(4S)-4-[2-[[3-氰基-6-(三氟甲基)-2-吡啶基]氧基]-2-(5-异噁唑基)乙基]-2-氧代-3-噁唑烷羧酸酯目标化合物的制备根据实施例2步骤e)的方法，使用步骤a)的产物进行。
1HNMR(CDCl3)8.24(1H，d)，8.14(1H，d)，7.46(1H，d)，6.58(1H，dd)，6.45(1H，d)，4.57-4.39(3H，m)，2.88-2.76(1H，m)，2.68-2.57(1H，m)，1.57-1.51(9H，m).
c)1，1-二甲基乙基[(1S)-3-[[3-氰基-6-(三氟甲基)-2-吡啶基]氧基]-1-(羟甲基)-3-(5-异噁唑基)丙基]-1-氨基甲酸酯目标化合物的制备根据实施例2步骤f)的方法，使用步骤b)的产物进行。
MS APCI+vem/z443[M+H]+.
d)2-[[(3S)-3-氨基-4-羟基-1-(5-异噁唑基)丁基]氧基]-6-(三氟甲基)-3-吡啶腈，(E)-丁烯二酸盐目标化合物的制备根据实施例51步骤g)的方法，使用步骤c)的产物进行。M.p.150-2℃。
MS APCI+vem/z343[M+H]+.
1HNMR(DMSO)8.63(1H，d)，8.57(1H，d)，7.74(1H，d)，6.60(1H，d)，6.55(1H，t)，6.47(2H，s)，3.64-3.49(2H，m)，3.17-3.09(1H，m)，2.38(2H，t).
实施例532-[[3-(3S)-氨基-4-羟基-1-(1R)-(2-噻吩基)丁基]氧基]-4-氯-5-氟苯甲腈乙二酸盐a)1，1-二甲基乙基4-[(2R)-2-羟基-2-(2-噻吩基)乙基]-2，2-二甲基-(4S)-3-噁唑烷羧酸酯根据实施例36，a)部分的方法，目标化合物由2-溴噻吩(2.71g)，镁(485mg)及1，1-二甲基乙基2，2-二甲基-4-[(4S)-2-氧代乙基]-3-噁唑烷羧酸酯(3g)的四氢呋喃(20ml)溶液制备得到油状物(1.51g)。
1HNMR 300MHz(d4-MeOH)7.31(1H，dd)，7.03-6.95(2H，m)，5.00-4.95(1H，m)，4.15-4.04(1H，m)，3.92-3.86(1H，m)，3.81-3.69(1H，m)，2.35-2.18(1H，m)，2.01-1.90(1H，m)，1.56-1.44(15H，m).
b)2-[[3-(3S)-氨基-4-羟基-1-(1R)-(2-噻吩基)丁基]氧基]-4-氯-5-氟苯甲腈乙二酸盐根据实施例36步骤b)的方法，目标化合物由步骤a)的产物(236mg)及4-氯2，5-二氟苯甲腈制备得到，为奶酪粉末状物质(38mg)。
MS APCI+vem/z341[M+H]+.
1HNMR 300MHz(d4-MeOH)7.63(1H，d)，7.47(1H，d)，7.38(1H，d)，7.24(1H，d)，7.04-7.01(1H，m)，6.00(1H，dd)，3.87(1H，dd)，3.75-3.69(1H，m)，3.63-3.55(1H，m)，2.58-2.48(1H，m)，2.40-2.31(1H，m).
实施例542-[[3-(3S)-氨基-4-羟基-1(1R)-(3-噻吩基)丁基]氧基]-4-氯-5-氟苯甲腈乙二酸盐a)1，1-二甲基乙基4-[(2R)-2-羟基-2-(3-噻吩基)乙基]-2，2-二甲基-(4S)-3噁唑烷羧酸酯根据实施例35步骤a)的方法，目标化合物由3-溴噻吩(1.09g)，1，1-二甲基乙基2，2-二甲基-4-[(4S)-2-氧代乙基]-3-噁唑烷羧酸酯(3g)的四氢呋喃(20ml)溶液及二溴化镁制备得到，为黄色油状物(158mg)。
1HNMR 300MHz(d4-MeOH)7.40-7.37(1H，m)，7.28(1H，s)，7.12(1H，d)，4.84-4.79(1H，m)，4.13-3.97(1H，m)，3.91-3.83(1H，m)，3.77-3.69(1H，m)，2.31-2.11(1H，m)，1.97-1.84(1H，m)，1.56-1.47(15H，m).
b)2-[3(3S)-氨基-4-羟基-1(1R)-(3-噻吩基)丁基]氧基]-4-氯-5-氟苯甲腈乙二酸盐根据实施例36步骤b)的方法，目标化合物由步骤a)的醇(158mg)及4-氯-2，5-二氟苯甲腈制备得到，为奶酪粉末状的物质(30mg)。M.p.111-115℃.
MS APCI+vem/z341[M+H]+.
1HNMR 300MHz(d4-MeOH)7.62(1H，d)，7.51-7.48(2H，m)，7.25(1H，d)，7.18-7.16(1H，m)，5.78-5.75(1H，m)，3.86(1H，dd)，3.72-3.67(1H，m)，3.58-3.53(1H，m)，2.47-2.40(1H，m)，2.29-2.23(1H，m).
实施例552-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-(3-吡啶基)丁基]硫代]-4-(三氟甲基)苯甲腈二盐酸盐a)1，1-二甲基乙基(4S)-4-[(2S)-2-羟基-2-(3-吡啶基)乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯及1，1-二甲基乙基(4R)-4-[(2S)-2-羟基-2-(3-吡啶基)乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯目标化合物的制备根据实施例1步骤a)的方法，使用溴化3-吡啶基镁进行。
柱初始的洗脱得到油状的(2S，4S)目标化合物(3.40g)。
MS APCI+vem/z323[(M+H]+).
1HNMR 400MHz(CDCl3)8.58(1H，m)，8.49(1H，d)，7.75(1H，d)，7.26(1H，m)，5.19(1H，m)，4.68(1H，m)，4.35(1H，m)，4.03(1H，m)，3.67(1H，d)，2.03(1H，m)，1.80(1H，m)，1.62(3H，s)，1.53(12H，m).
柱进一步洗脱得到淡黄色油状的(2R，4S)目标化合物(2.30g)。
MS APCI+vem/z323([M+H]+).
1HNMR 400MHz(CDCl3)8.59(1H，m)，8.51(1H，d)，7.73(1H，d)，7.26(1H，m)，4.83(1H，m)，3.80-4.20(4H，m)，2.07(2H，m)，1.65(3H，s)，1.50(12H，m).
b)1，1-二甲基乙基(4S)-4-[(2R)-2-(苯甲酰基硫代)-2-(3-吡啶基)乙基]-2，2-二甲基-3噁唑烷羧酸酯目标化合物(2.80g)的制备根据实施例2步骤c)的方法，使用步骤a)的(2S，4S)产物进行。
MS APCI+vem/z443(M+H+).
1HNMR 400MHz(CDCl3)8.68(1H，d)，8.51(1H，m)，7.91(2H，m)，7.72(1H，m)，7.55(1H，m)，7.42(2H，m)，7.26(1H，m)，4.78(1H，m)，3.90-4.15(3H，m)，2.58-2.38(1H，m)，2.13(1H，m)，1.60-1.40(15H，m).
c)1，1-二甲基乙基(4S)-4-[(2R)-2-[[2-氰基-5-(三氟甲基)苯基]硫代]-2-(3-吡啶基)乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯目标化合物(180mg)的制备根据实施例3步骤a)的方法，使用步骤b)的产物及2-氟-4-(三氟甲基)苯甲腈进行。
MS APCI+vem/z508(M+H+).
d)2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-(3-吡啶基)丁基]硫代]-4-(三氟甲基)苯甲腈二盐酸盐将步骤c)的产物(175mg)、甲醇(5ml)及4M氯化氢的二噁烷(5ml)溶液搅拌4小时。浓缩反应混合物，剩余物以乙醇/乙醚重结晶得到目标化合物(120mg)，为白色固体。M.p.238-40℃.
MS APCI+vem/z368[M+H]+.
1HNMR 400MHz(d6-DMSO)8.90(1H，s)，8.70(1H，d)，8.40(1H，m)，8.30(2H，m)，8.05(2H，m)，7.78(2H，m)，5.47(1H，m)，3.50-3.60(2H，m)，3.03(1H，m)，2.40(2H，m)，2.30(1H，m).
实施例562-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-(5-嘧啶基)丁基]硫代]-4-氯苯甲腈盐酸盐
a)1，1-二甲基乙基4-[(2S)-2-羟基-2-(3-吡啶基)乙基]-2，2-二甲基-(4S)-3-噁唑烷羧酸酯及1，1-二甲基乙基4-[(2R)-2-羟基-2-(3-吡啶基)乙基]-2，2-二甲基-(4S)-3-噁唑烷羧酸酯在-78℃氮气氛围下，将丁基锂(2.5M己烷溶液，7.90ml)滴加入1，1-二甲基乙基(4S)-2，2-二甲基-4-(2-氧代乙基)-3噁唑烷羧酸酯(4.55g)及5-溴嘧啶(3.00g)的干燥四氢呋喃(50ml)搅拌溶液中。混合物在-78℃搅拌1.5小时，然后加入饱和的氯化铵溶液结束反应，产物以乙酸乙酯萃取。有机相经干燥(MgSO4)后浓缩得油状物。非对映异构体粗品以层析方法纯化(硅胶，甲醇/二氯甲烷作为流动相)。
柱初始的洗脱得到黄色固体的(2S，4S)目标化合物(1.08g)。
MS APCI+vem/z324([M+H]+).
1HNMR 400MHz(CDCl3)9.13(1H，s)，8.76(2H，s)，5.41(1H，m)，4.67(1H，m)，4.38(1H，m)，4.06(1H，dd)，3.68(1H，d)，2.04(1H，m)，1.79(1H，m)，1.62(3H，s)，1.55(3H，s)，1.53(9H，s).
柱进一步洗脱得到淡黄色油状的(2R，4S)目标化合物(540mg)。
MS APCI+vem/z324([M+H]+).
1HNMR 400MHz(CDCl3)9.13(1H，s)，8.77(2H，s)，4.87(1H，m)，4.67(1H，m)，4.22(1H，m)，3.85(1H，m)，2.15(2H，m)，1.48-1.60(15H，m).
b)1，1-二甲基乙基(4S)-4-[(2R)-2-(苯甲酰基硫代)-2-(5-嘧啶基)乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯目标化合物的制备根据实施例2步骤c)的方法，使用步骤a)的(2S，4S)产物进行。
MS APCI+vem/z444(M+H+).
1HNMR 400MHz(CDCl3)9.11(1H，s)，8.81(2H，m)，7.90(2H，d)，7.58(1H，m)，7.44(2H，m)，4.76(1H，m)，3.96(2H，m)，2.40-2.65(1H，m)，2.16(1H，m)，1.45-1.80(16H，m).
c)1，1-二甲基乙基(4S)-4-[(2R)-2-[(5-氯-2-氰基苯基)硫代]-2-(5-嘧啶基)乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯目标化合物(200mg)的制备根据实施例3步骤a)的方法，使用步骤b)的产物及4-氯-2-氟苯甲腈进行。
MS APCI+vem/z475/7(M+H+).
d)2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-(5-嘧啶基)丁基]硫代]-4-氯苯甲腈盐酸盐根据实施例7步骤c)的方法，使用步骤c)的产物制备目标化合物(90mg)，为固体(m.p.120-30℃).
MS APCI+vem/z335/7[M+H]+.
1HNMR 400MHz(d6-DMSO)9.08(1H，s)，8.85(2H，s)，8.23(3H，bs)，7.90(1H，d)，7.84(1H，d)，7.56(1H，dd)，5.24(1H，m)，3.50-3.75(2H，m)，3.01(1H，m)，2.43(1H，m)，2.28(1H，m).
实施例572-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-(3-吡啶基)丁基]硫代]-4-氯-5-氟苯甲腈二盐酸盐a)O-(5-氯-2-氰基-4-氟苯基)二甲基硫代氨基甲酸酯(carbamothioate)将苯酚(2.00g)、碳酸钾(1.85g)及N，N-二甲基硫代氨基甲酸酯(N，N-dimethylthiocarbamate)的丙酮(30ml)溶液加热回流24小时。混合物倾入水中，以乙酸乙酯萃取。合并有机层，盐水洗涤，干燥(MgSO4)后浓缩。剩余物以层析方法纯化(硅胶，异己烷/乙醚作为流动相)得到固体的目标化合物(2.36g)。
MS APCI+vem/z259/261[M+H]+.
1HNMR 400MHz(CDCl3)7.43(1H，d)，7.36(1H，d)，3.46(3H，s)，3.40(3H，s).
b)S-(5-氯-2-氰基-4-氟苯基)二甲基硫代氨基甲酸酯在氮气氛围下，将步骤a)的产物(2.35g)在二甲基苯胺(25ml)中升温回流4小时。然后将混合物倾入2M HCl溶液中，以乙酸乙酯萃取3次。合并有机层，盐水洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩得到白色固体的目标化合物(2.3g)。
1HNMR 400MHz(CDCl3)7.73(1H，d)，7.52(1H，d)，3.13(3H，s)，3.06(3H，s).
c)4-氯-5-氟-2-巯基苯甲腈将步骤b)的产物(2.00g)溶于甲醇(100ml)及氢氧化钠(1.55g)溶液中，加入水(50ml)。在氮气氛围下，混合物加热回流1.5小时。混合物冷却后浓缩，剩余物以水稀释，然后以乙醚洗涤两次。水层以2M HCl溶液酸化，以乙酸乙酯萃取两次。合并有机层，盐水洗涤，干燥(MgSO4)后浓缩得到目标化合物(1.45g)。
1HNMR 400MHz(CDCl3)7.50(1H，d)，7.40(1H，d)，4.08(1H，s).
d)1，1-二甲基乙基(4S)-4-[(2R)-2-[(5-氯-2-氰基-4-氟苯基)硫代]-2-(3-吡啶基)乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯将步骤c)的产物(100mg)溶于四氢呋喃(10ml)中，加入实施例55步骤a)的(2S，4S)产物(170mg)，然后加入三苯基膦(140mg)及偶氮二羧酸二乙酯(0.10ml)。在20℃下，搅拌混合物24小时，然后浓缩。剩余物以层析方法纯化(硅胶，乙醚作为流动相)得到油状的目标化合物(85mg)。
MS APCI+vem/z492/494[M+H]+e)2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-(3-吡啶基)丁基]硫代]-4-氯-5-氟苯甲腈二盐酸盐目标化合物(60mg)为灰白色固体，根据实施例55步骤d)的方法、使用步骤d)的产物进行制备。M.p.252-5℃.
MS APCI+vem/z352/4[M+H]+.
1HNMR 400MHz(d6-DMSO)8.78(1H，s)，8.67(1H，d)，8.20(1H，d)，8.08(2H，m)，7.72(1H，dd)，5.21(1H，t)，3.61-3.37(2H，m)，3.03(1H，m)，2.40(1H，m)，2.25(1H，m).
实施例582-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-(3-吡啶基)丁基]硫代]-4-溴苯甲腈二盐酸盐a)1，1-二甲基乙基(4S)-4-[(2R)-2-[(5-溴-2-氰基苯基)硫代]-2-(3-吡啶基)乙基-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯目标化合物(170mg)的制备根据实施例3步骤a)的方法，使用实施例55步骤b)的产物及4-溴-2-氟苯甲腈进行。
MS APCI+vem/z520/2(M+H+).
1HNMR 400MHz(CDCl3)8.50-8.30(1H，m)，7.75-7.57(5H，m)，7.26(1H，m)，4.50-3.60(4H，m)，2.60-2.30(1H，m)，2.18(1H，m)，1.60-1.40(15H，m).
b)2-[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-(3吡啶基)丁基]硫代]-4-溴苯甲腈二盐酸盐目标化合物(118mg)为白色固体，根据实施例55步骤d)的方法、使用产物步骤a)的产物进行制备。M.p.278-280℃.
MS APCI+ve/z380[M+H]+.
1HNMR 400MHz(d6-DMSO)8.94(1H，s)，8.73(1H，d)，8.42(1H，d)，8.32(3H，bs)，8.03(1H，s)，7.84(1H，dd)，7.74(1H，d)，7.68(1H，dd)，5.41(1H，m)，3.60-3.48(2H，m)，3.02(1H，m)，2.43(1H，m)，2.27(1H，m).
实施例592-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-(2-噻唑基)丁基]氧基]-5-氟-6-甲基-3-吡啶腈盐酸盐a)双(1，1-二甲基乙基)2-(6-氯-5-氰基-3-氟-2-吡啶基)丙二酸酯在氮气氛围下，将氢化钠(200mg)加入到双(1，1-二甲基乙基)马来酸酯丙二酸酯(1.08g)的干燥DMF(20ml)溶液中。混合物20℃反应30分钟，然后，加入2，6-二氯-3-氰基-5-氟吡啶。混合物搅拌30分钟，然后倾入冰乙酸(100ml)中，以乙醚萃取。乙醚层干燥(MgSO4)，浓缩。剩余物以层析方法纯化(硅胶，二氯甲烷/异己烷作为流动相)得到目标化合物固体(1.38g)。
MS APCI+vem/z369/371(M+H+).
1HNMR 400MHz(CDCl3)7.72(1H，d)，4.83(1H，d)，1.50(18H，s).
b)2-氯-5-氟-6-甲基-3-吡啶腈将三氟乙酸(2ml)及二苯基醚(10g)加入步骤a)的产物(1.3g)中。混合物加热回流10分钟。混合物溶于异己烷，经硅胶滤过。硅胶先以10％二氯甲烷/异己烷洗涤，再以二氯甲烷洗涤。浓缩二氯甲烷层得到固体，其以冷异己烷研磨得到目标化合物(510mg)。
MS APCI+vem/z169/71(M+H+).
1HNMR 400MHz(CDCl3)7.64(1H，d)，2.59(3H，s).
c)1，1-二甲基乙基(4S)-4-[(2R)-2-[(3-氯-5-氟-6-甲基-2-吡啶基)氧基]-2-(2-噻唑基)乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯目标化合物(180mg)的制备根据实施例8步骤b)的方法，使用步骤b)的产物及实施例8步骤a)的(2R，4S)产物进行。
MS APCI+vem/z463/5(M+H+).
d)2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-(2-噻唑基)丁基]氧基]-5-氟-6-甲基-3-吡啶腈盐酸盐目标化合物(100mg)为白色固体，其制备根据实施例55步骤d)的方法、使用步骤c)的产物进行。M.p.148-50℃.
MS APCI+vem/z323(M+H+).
1HNMR 400MHz(d6-DMSO)8.38(1H，d)，8.12(4H，bs)，7.85(1H，d)，7.78(1H，d)，6.60(1H，m)，3.70(1H，m)，3.59(1H，m)，3.35(1H，m)，2.52-2.43(5H，m).
实施例604-[[(1R，3S)-3-氨基-1-(3-氟-2-噻吩基)-4-羟丁基]硫代]-6-甲氧基-3-吡啶腈(E)-丁烯二酸盐a)3-氟-2-噻吩甲酸根据文献(OPPI BRIEFS，1997，29，221-223)制备得到目标化合物(1.5g，40％)，为黄色固体。M.p.171-172℃(文献值172-173℃).
1HNMR 300MHz(CDCl3)δ7.52(1H，dd)及6.89(1H，d).
b)3-氟噻吩根据文献(Synth.Comm，1994，24，95-101)制备得到目标化合物(540mg，62％)，为透明液体。
1HNMR 300MHz(CDCl3)7.20-7.16(1H，m)，6.85-6.83(1H，m)及6.71-6.69(1H，m).
c)(4S)-1，1-二甲基乙基4-[(2S)-3-(3-氟-2-噻吩基)-2-羟乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯化合物的制备根据实施例1步骤a)的方法，使用(4S)-1，1二甲基乙基-2，2-二甲基-4-(2-氧代乙基)-3-噁唑烷羧酸酯及3-氟-2噻吩基锂，而不用苯基锂。层析纯化(硅胶，10％乙酸乙酯/异己烷作为流动相)得到目标化合物(500mg，28％)，为淡黄色胶状物。
MS(APCI+ve)m/z246[M(+H)]+.
1HNMR 300MHz(CDCl3)7.07(1H，dd)，6.73(1H，d)，5.23(1H，d)，5.03-4.93(1H，m)，4.38-4.28(1H，m)，4.04-3.99(1H，m)，3.70-3.66(1H，m)，2.20-2.10(1H，m)，1.96-1.86(1H，m)及1.55-1.52(15H，m).
d)(4S)-1，1-二甲基乙基4-[(2R)-2-(乙酰基硫代)-2-(3-氟-2-噻吩基)-2-乙基]-2，2二甲基-3-噁唑烷羧酸酯目标化合物的制备根据实施例10步骤g)的方法，使用硫代乙酸及步骤c)的产物，而不用硫代苯甲酸及(4S)-1，1二甲基乙基4-[(2S)2-羟基-2-苯乙基)-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯。层析纯化(硅胶，5％乙酸乙酯/异己烷作为流动相)得到无色油状的目标化合物(300mg)。
MS(APCI+ve)m/z304[M(+H)(-Boc)]+.
1HNMR 300MHz(CDCl3)7.07-7.05(1H，m)，6.74-6.70(1H，m)，4.94-4.80(1H，m)，4.05-3.80(3H，m)，2.36-2.30(4H，m)，2.18-2.08(1H，m)及1.57-1.47(15H，m).
e)(4S)-1，1-二甲基乙基4-[(2S)-2-[(5-氰基-2-甲氧基-4-吡啶基)硫代]-2-(3-氟-2噻吩基)乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯目标化合物的制备根据实施例10步骤m)的方法，使用6-甲氧基-4-(甲磺酰基)-3-吡啶腈及(4S)-1，1-二甲基乙基4-[(2S)-2-(乙酰基硫代)-2-(3-氟-2-噻吩基)乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯，替代(4S)-1，1-二甲基乙基4-[(2S)-2-(苯甲酰基硫代)-2-苯乙基]-2，2-二甲基-3噁唑烷羧酸酯。层析纯化(硅胶，10％乙酸乙酯/异己烷)得到目标化合物(100mg)，为透明胶状物。
MS(APCI+ve)m/z394[M(+H)(-Boc)]+.
1HNMR 300MHz(CDCl3)8.32-8.30(1H，m)，7.14-7.10(1H，m)，6.74-6.70(2H，m)5.06-4.64(1H，m)，4.18-4.08(1H，m)，4.00-3.85(4H，m)，3.78-3.48(1H，m)，2.56-2.15(2H，m)及1.58-1.46(15H，m).
f)4-[[(1R，3S)-3-氨基-1-(3-氟-2-噻吩基)-4-羟丁基]硫代]-6-甲氧基-3-吡啶腈(E)-丁烯二酸盐根据实施例10步骤n)的方法，制备得到目标化合物(56mg)，为白色固体。M.p.177-178℃.
MS(APCI+ve)m/z354[M(+H)]+.
1HNMR 300MHz(d6-DMSO)8.59(1H，s)，7.55-7.52(1H，m)，7.02-6.94(2H，m)，6.47(2H，s)，5.45-5.39(1H，m)，3.92(3H，s)，3.55-3.35(1H，m)，3.00-2.90(1H，m)，2.70-2.60(1H，m)，2.20-2.10(1H，m)及2.05-1.95(1H，m).
实施例612-[[(1R，3S)-3-氨基-1-(4-氯-5-噻唑基)-4-羟丁基]氧基]-4-氯-5-氟苯甲腈(E)-丁烯二酸盐a)2，4-二氯噻唑根据文献(Bull.Chim.Soc.Fr.，1962，1735)的方法，制备得到目标化合物(7.16g)，为白色固体。M.p.41-42℃(文献值42-43℃).
1HNMR 300MHz(CDCl3)7.01(1H，s).
b)(4S)-1，1-二甲基乙基4-[(2R)-2-(2，4-二氯-5-噻唑基)-2-羟乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯目标化合物的制备根据实施例1步骤a)的方法，使用(4S)-1，1-二甲基乙基酯-2，2-二甲基-4-(2-氧代乙基)-3-噁唑烷羧酸及2，4-二氯-5-噻唑基锂，而不用苯基锂。层析纯化(硅胶，20％乙酸乙酯异己烷溶液作为流动相)得到目标化合物(744mg)，为淡黄色胶状物。
MS(APCI+ve)m/z297/299/301[M(+H)(-Boc)]+.
1HNMR 300MHz(CDCl3)5.08-4.98(1H，m)，4.16-4.04(2H，m)，3.84-3.71(1H，m)，2.322.22(2H，m)及1.61-1.45(15H，m).
c)(4S-1，1-二甲基乙基4-[(2R)-2-(4-氯-5-噻唑基)-2-羟基乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯将步骤b)的产物(740mg)的MeOH(15ml)溶液加入到钯-活性炭(75mg)及三水乙酸钠(380mg)的MeOH(10ml)搅拌悬液中。混合物置于氢气氛围(5bar)下反应72小时。混合物滤过后浓缩至干。剩余物溶于二氯甲烷(25ml)中，干燥(Na2SO4)，滤过后真空浓缩。层析纯化(硅胶，20％乙酸乙酯/异己烷作为流动相)得到目标化合物(653mg)，为无色胶状物。
MS(APCI+ve)m/z363/365[M(+H)]+.
1HNMR 300MHz(CDCl3)8.63(1H，s)，5.20-5.10(1H，m)，4.18-4.04(2H，m)，3.91-3.84(1H，m)，2.27-2.20(2H，m)及1.62-1.44(15H，m).
d)(4S)-1，1-二甲基乙基4-[(2R)-2-(5-氯-2-氰基-4-氟苯氧基)-2-(4-氯-5-噻唑基)乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯根据实施例8步骤b)的方法，使用4-氯-2，5-二氟苯甲腈及步骤b)的产物(650mg)制备目标化合物。层析纯化(硅胶，20％乙酸乙酯/异己烷)得到目标化合物(190mg)，为淡绿色泡沫。
MS(APCI+ve)m/z416/418/420[M(+H)(-Boc)]+.
1HNMR 300MHz(CDCl3)9.10(1H，s)，7.87(1H，d)，7.39(1H，d)，5.98(1H，dd)，4.19-4.13(1H，m)，3.99-3.97(2H，m)，2.58-2.48(1H，m)，2.20-2.13(1H，m)及1.42-1.40(15H，m).
e)2-[[(1R，3S)-3-氨基-1-(4-氯-5-噻唑基)-4-羟丁基]硫代]-4-氯-5-氟苯甲腈(E)-丁烯二酸盐根据实施例10步骤n)的方法，制备目标化合物(136mg)，为淡黄色固体。M.p.177-178℃.
MS(APCI+ve)m/z376/378/380[M(+H)]+.
1HNMR 300MHz(d6-DMSO)9.19(1H，s)，8.03(1H，d)，7.65(1H，d)，6.48(2H，s)，6.17(1H，t)，3.60-3.48(2H，m)，3.10-3.06(1H，m)及2.37-2.18(2H，m).
实施例622-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-5-硝基苯甲腈盐酸盐目标化合物的制备根据实施例10步骤m)及实施例26步骤g)的方法，使用2-氯-4-硝基-苯甲腈及实施例10步骤g)的产物进行。
MS(APCI+ve)m/z344[M(+H)]+.
1H 400MHz(DMSO-d6)8.68(1H，s)，8.38(1H，dd)，8.19(3H，bs)，7.95(1H，d)，7.58(2H，d)，7.39(2H，m)，7.31(1H，t)，5.35(2H，m)，3.2-3.52(2H，m)，2.96(1H，bs)，2.33(1H，m)，2.22(1H，m).
实施例632-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-5-氯-3-吡啶腈(E)-丁烯二酸盐a)2，5-二氯-3-吡啶腈在-78℃氮气氛围下，将3-溴-2，5-二氯-吡啶(1.08g)的乙醚(4ml)溶液滴加入正丁基锂(1.9ml，2.5M的己烷溶液)的乙醚溶液(4ml)中，搅拌1.5小时。加入固体1-氰基咪唑(0.53g)，搅拌反应2小时。加热至室温后，加入水，混合物以乙醚萃取。合并有机层，盐水洗涤，干燥(Na2SO4)后浓缩得到黑色固体(0.64g)。层析纯化(硅胶，异己烷/乙醚作为流动相)得到目标化合物(0.13g)，为白色固体。
1HNMR 300MHz(CDCl3)8.56(1H，d)，7.98(1H，d).
b)2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-5-氯-3-吡啶腈(E)-丁烯二酸盐目标化合物的制备根据实施例10步骤m及n)的方法，使用步骤a)及实施例10步骤g)的产物进行。
MS(APCI+ve)m/z334[M(+H)]+.
1H 400MHz(DMSO-d6)8.80(1H，d)，8.50(1H，d)，7.50(2H，d)，7.36(2H，t)，7.29(1H，tt)，6.47(2H，s)，5.32(1H，dd)，3.44(1H，dd)，3.35(1H，dd)，2.79(1H，m)，2.29(1H，m)，2.17(1H，m).
实施例64β-氨基-δ-[(4-氨基-2-硝基苯基)硫代]-(β1S，δ1R)-苯丁醇a)1，1-二甲基乙基(4S)4-[(2R)-2-[(4-氨基-2-硝基苯基)硫代]-2-苯乙基]-2，2二甲基-3-噁唑烷羧酸酯目标化合物的制备根据实施例10步骤m)的方法，使用实施例10步骤g)的产物及4-氯-3-硝基苯胺。
MS APCI+vem/z374([M+H-boc]+).
b)β-氨基-δ-[(4-氨基-2-硝基苯基)硫代]-(β1S，δ1R)-苯丁醇目标化合物的制备根据实施例10步骤n)的方法，使用步骤a)的产物进行。
MS APCI+vem/z334([M+H]+).
1H 400MHz(DMSO-d6/D2O)7.35-7.18(6H，m)，6.98(1H，d)，6.72(1H，dd)，4.54(1H，t)，3.62-3.36(2H，m)，2.96(1H，t)，2.18-2.05(2H，m).
实施例652-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-5-溴-苯甲腈乙二酸盐a)1，1-二甲基乙基(4S)-4-[[(2R)-2-(4-溴-2-氰基苯基)硫代]-2-苯乙基]-2，2-二甲基-3-噁唑烷羧酸酯在室温氮气氛围下，将实施例1步骤b)产物(441mg)的7M氨甲醇(10ml)溶液搅拌6小时。然后真空浓缩混合物，剩余物溶于DMF(10ml)中，并以5-溴-2-氟苯甲腈(200mg)处理，接着在氮气氛围下接着以碳酸铯(650mg)处理。室温搅拌混合物20小时，然后以乙酸乙酯及水分配。分离水相，以乙酸乙酯萃取，合并有机相，盐水洗涤，干燥(MgSO4)。浓缩溶剂，剩余物以层析方法纯化(硅胶，10％乙酸乙酯/异己烷)得到目标化合物(332mg，64％)，为无色油状泡沫。
MS APCI+vem/z418[M-BOC+2H]+.
b)1，1-二甲基乙基[(1S，3R)-3-[(4-溴-2-氰基苯基)硫代]-1-(羟基甲基)-3-苯丙基]氨基甲酸酯在氮气氛围下，将一水对甲苯磺酸(1mg)加入至步骤a)产物的甲醇(5ml)搅拌溶液中，混合物于20℃搅拌48小时。混合物以乙酸乙酯稀释，先后以1M硫酸氢钾溶液、饱和的碳酸氢钠溶液、盐水洗涤，然后干燥(MgSO4)，浓缩。所得剩余物以层析方法纯化(硅胶，30％乙酸乙酯/异己烷)得到目标化合物(175mg，57％)，为无色油状泡沫。
MS APCI+vem/z378[M-BOC+2H]+.
c)2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-5-溴-苯甲腈乙二酸盐将步骤b)的产物根据实施例4步骤b)的方法进行脱保护得到目标化合物(113mg，65％)，为白色固体。
MS APCI+vem/z378[M+H]+.
1HNMR 300MHz(D6-DMSO)8.11(1H，d)，7.83(1H，dd)，7.50(1H，d)，7.40-7.25(5H，m)，4.83(1H，dd)，3.52(1H，dd)，3.41(1H，dd)，3.03-2.95(1H，m)，2.31-2.21(1H，m)，2.15-2.05(1H，m).
本发明化合物的药理活性根据以下筛选进行测试。
筛选1基于Forstermann等，Eur.J.Pharm.，1992，225161-165.的方法，筛选式(I)的化合物，或其可药用盐、对映异构体或消旋体的氧化氮合酶的抑制活性。氧化氮合酶将3H-L-精氨酸转化为3H-L-瓜氨酸，可经阳离子交换层析分离，并用液体闪烁计数进行定量。
经诱导后，酶可经培养的鼠巨噬细胞系J774A-1(获自皇家癌症研究基金会实验室)制备。J774A-1细胞培养使用Dulbeccos Modified EaglesMedium(DMEM)，外加10％胎牛血清、4mM L-谷氨酰胺及抗生素(100单位/ml青霉素G、100mg/ml链霉素及0.25mg/ml两性霉素B)。通常用225cm3规格的培养瓶培养细胞，培养瓶内加入35ml培养基，置于37℃、5％CO2的潮湿环境中。
在干扰素-γ(IFNγ)及脂多糖(LPS)刺激下，细胞产生氧化氮合酶。除去融合培养瓶里的培养基，代之以25ml(每瓶)新鲜培养基，其包含1mg/ml LPS及10单位/ml IFNg。培养17-20小时后，弄碎瓶表面的细胞层转入培养基，收集细胞。离心(1000g进行10分钟)收集细胞，向细胞团加入溶液裂解细胞小球，该溶液包含50mM tris-HCl(pH7.5 20℃)、10％(v/v)甘油、0.1％(v/v)Triton-X-100、0.1mM二硫苏糖醇及混合的蛋白酶抑制剂，该抑制剂包括亮抑酶肽(2mg/ml)、大豆胰蛋白酶抑制剂(10mg/ml)、抑蛋白肽酶(5mg/ml)及苯甲磺酰氟(50mg/ml)。
进行分析时，将25μl的底物混合液(50mM Tris-HCl(pH7.5，20℃)、400μMNADPH、20μM黄素腺嘌呤二核苷酸、20μM黄素单核苷酸、4μM四氢生物喋呤、12μM L-精氨酸及0.025mCi L-[3H]-精氨酸)加入到96孔滤板(0.45μM孔径)的孔中，每孔包含25μl测试化合物的50mM Tris-HCl溶液。加入50μl细胞裂解液(制备如上)起始反应，室温孵育1小时后，加入50μl(3mM硝基精氨酸和21mM EDTA)的水溶液终止反应。
使用DowexAG-SOW，从标记的L-精氨酸分离出标记的L-瓜氨酸。当所有成份滤入96孔板后，加入150μl 25％的Dowex50W(Na+型)浆状物。取75μl滤液样品，加入含固体闪烁体的96孔板中。样品干燥后，以闪烁计数量化L-瓜氨酸。
在典型试验中，实验基础活性为300dpm/75μl，该值在试剂对照中可增至1900dpm。化合物的活性以IC50(测试中使50％酶抑制的药物浓度)表示；并且用氨基胍，其IC50(50％抑制剂浓度)为10μM，作为校验该方法的标准。测试一定浓度范围内的化合物活性，从抑制情况计算得到IC50值。在100μM化合物抑制酶活性应至少达25％方可归为活性化合物，且至少再测试一次。
在上述筛选中，测试了实施例1-10的化合物，其IC50值小于10μM显示其预期具有有用的治疗活性。
筛选2重组人氧化氮合酶(iNOS，eNOS及nNOS)在E.coli表达，并在Hepes(pH7.4)缓冲液中裂解，该缓冲液包含辅因子(FAD，FMN，H4B)、蛋白酶抑制剂、溶菌酶以及表面活性剂，CHAPS。经适当稀释，这些制备用来评估对不同同工型的抑制效果。NOS抑制方法采用了Forstermann等9的改进方法，通过测量自L-[3H]精氨酸形成的L-[3H]瓜氨酸。酶的测定皆在3μM[3H]精氨酸，1mM NADPH及其它必需支持NOS活性的辅因子(FAD，FMN，H4B，calmodulin，Ca2+)存在下进行。由于已有报道指出，多种NOS抑制剂表现出缓慢的结合动力学，或以时间依赖方式使酶失活，因而，在加入精氨酸启动反应之前，在NADPH存在下预先酶及抑制剂孵育60分钟。在结束测定之前，再继续孵育60分钟，然后自未反应的底物以层析方法分离[3H]瓜氨酸，该层析采用96孔形式在Dowex-SOW树脂上进行。
在上述的筛选中，测试了实施例1-65所述的化合物，其抑制酶iNOS的IC50值小于10μM，显示其预期具有有用的治疗活性。
筛选3化合物对人的诱导型氧化氮合酶也表现了活性，由下述测定证实。
人结肠直肠癌细胞系DLD-1(European Collection of Animal Cell Culture-细胞系编号90102540)，在37℃，5％CO2环境下在补加10％(v/v)胎牛血清及2mM L-谷氨酸的RPMI1640中培养。
通过加入包含人重组γ-IFN(1000单位/ml)、TNF-α(200U/ml)、IL-6(200U/ml)及IL-1-β(250U/ml)，诱导细胞氧化氮合酶。37℃孵化18小时后，除去培养基，细胞以热磷酸盐缓冲盐溶液洗涤。在37℃/5％CO2下，细胞在分别包含及不包含测试化合物的情况喜爱，于包含100μM L-精氨酸及100μM异博定-HCl的RPMI1640中继续孵育5小时。
亚硝酸盐的测试，通过将等体积的培养基与Griess试剂(10mg/ml磺胺，1mg N-(1-萘基)乙二胺的1ml 2.5％(v/v)磷酸)相混合。相对于未经处理细胞产生的亚硝酸盐水平，计算测试化合物存在时的抑制效果。IC50值可自百分抑制率对化合物浓度的半对数图中估算。
在该筛选测试中，实施例1-65中化合物的IC50小于100μM，表明预计它们具有有用的治疗活性。
权利要求
1.具有式(I)结构的化合物，或其可药用盐、对映异构体或消旋体， 其中X表示H、C1-4烷基、C1-4烷氧基、卤素、CN、C≡CH、NH2、NHCH3、N(CH3)2、NO2、CH2OH、CHO、COCH3或NHCHO；所述烷基或烷氧基任选进一步被一个或多个氟原子取代；Y表示C1-4烷基、C1-4烷氧基、卤素、CN、C≡CH、NO2、CH2OH、CHO、COCH3或NHCHO；该烷基或烷氧基任选进一步被一个或多个氟原子取代；T、U及W独立地表示CR7或N；及每个R7基团独立地表示H、F或CH3； 当T表示CR7时，基团R7可另指OH、Cl、Br、CN、CH2OH、NO2、NHR13、OR14或OSO2CH3；V表示O或S(O)n；n表示整数0、1或2；R1表示H或Me。R2表示C1-4烷基、C2-4链烯基、C2-4链炔基、C3-6环烷基或包含一个选自O，S及N的原子的4-8员饱和杂环；所述基团中的任何一个任选被C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷硫基、C3-6环烷基、卤素或苯基进一步取代；该苯基任选被一个或多个取代基取代，该取代基独立地选自卤素、C1-4烷基、C1-4烷氧基、CF3、OCF3、CN或NO2；或R2表示苯基，包含1-3个独立地选自O、S及N杂原子的五或六员芳香杂环；该苯基或芳香杂环任选被一个或多个取代基取代，这些取代基独立地选自卤素、C1-4烷基、C1-4烷氧基、OH、CN、NO2，或NR9R10；该烷基或烷氧基任选进一步被一个或多个氟原子取代；R3表示H、C1-4烷基或C3-6环烷基；该烷基任选被C1-4烷氧基、卤素、羟基、NR11R12、苯基、包含1-3个独立地选自O、S及N的杂原子的五或六员芳香或饱和杂环取代；该苯基或芳香杂环任选被卤素，C1-4烷基，C1-4烷氧基、CF3、OCF3、CN或NO2进一步取代。R4、R5、R6、R9、R10、R11、R12、R13及R14独立地表示H或C1-4烷基。
2.权利要求1所述的式(I)化合物，其中V表示O。
3.权利要求1所述的式(I)化合物，其中V表示S(O)n，并且n表示0。
4.权利要求1-3中任何一项所述的式(I)化合物，其中X、Y独立地表示Br、Cl、CH3、CH2F、CHF2、CF3、OCH3或CN。
5.权利要求4所述的化合物，其中Y表示CN。
6.权利要求1所述的式(I)化合物，其为2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-甲基-3-吡啶腈；2-[[(3S)-3-氨基-4-羟基-1-(3-异噁唑基)丁基]硫代]-6-甲基-3-吡啶腈；4-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-甲基-3-吡啶腈；3-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-5-(三氟甲基)-2-吡啶腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-(二氟甲基)-3-吡啶腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-(二氟甲基)-3-吡啶腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-(3-吡啶基)丁基]氧基]-4-氯-5-氟苯甲腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-(2-噻唑基)丁基]氧基]-4-氯-5-氟苯甲腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-(5-异噻唑基)丁基]氧基]-4-氯-5氟苯甲腈；4-[[(1R，3R)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-甲氧基-3-吡啶腈；4-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-甲氧基-3-吡啶腈；4-[[(1S，3R)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-甲氧基-3-吡啶腈；4-[[(1S，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-甲氧基-3-吡啶腈；4-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-(二氟甲氧基)-3-吡啶腈；2-[[(1R，3R)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-甲基-3-吡啶腈；4-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-(2H3)甲氧基-3-吡啶腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-乙基-3-吡啶腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-(1-甲基乙基)-3-吡啶腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-甲基-3-吡啶甲醇；6-乙酰基-2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-3-吡啶腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-(羟基甲基)-3-吡啶腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-3-吡啶腈；(β1S，δ1R)-β-氨基-δ-[(2，5-二氯-4-吡啶基)硫代苯丁醇]；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-5-氟-6-甲氧基-3-吡啶腈；4-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-(二甲基氨基)-3-吡啶腈；4-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-(甲基氨基)-3-吡啶腈；(β1S，δ1R)-β-氨基-δ-[(5-溴-2-甲氧基-4-吡啶基)硫代]-苯丁醇；(β1S，δ1R)-β-氨基-δ-[(5-氯-2-甲氧基-4-吡啶基)硫代]-苯丁醇；4-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-6-乙氧基-3-吡啶腈；3-[[(1R，3 S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-5-(三氟甲基)-2-吡啶腈；3-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-1，6-二氢-5-甲基-6-氧代-2-吡啶腈；3-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-5-氯-2-吡啶腈；6-氨基-4-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-3-吡啶腈；3-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-5-甲基-2-吡啶腈；4-[[(1R，3S)-3-氨基-1-(2-氟苯基)-4-羟丁基]硫代]-6-甲氧基-3-吡啶腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-1-(4-氟苯基)-4-羟丁基]氧基]-6-三氟甲基-3-吡啶腈；2(2S)-氨基-4(4R)-(3-氟苯基)-4-[(4-甲氧基-2-硝基苯基)硫代]丁-1-醇；2(2S)-氨基-4(4R)-(3-氟苯基)-4-[(4-氯-2-硝基苯基)硫代]丁-1-醇；2(2S)-氨基-4(4R)-(3-氟苯基)-4-[(5-氨基-4-氯-2-硝基苯基)硫代]丁-1-醇；2(2S)-氨基-4(4R)-(3-氟苯基)-4-[(4-羟基甲基)-2-硝基苯基)硫代]丁-1-醇；2(2S)-氨基-4(4R)-(3-氟苯基)-4-[(4-氟-2-硝基苯基)硫代]丁-1-醇；2(2S)-氨基-4(4R)-(3-氟苯基)-4-[(3，5-二氯-2-吡啶基)硫代]丁-1-醇；4-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-3-氯苯甲腈；4-氯-2-[[(1R，3S)-3-(乙基氨基)-4-羟基-1-(2-噻唑基)丁基]氧基]-5-氟苯甲腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-(5-噻唑基)丁基]氧基]-5-氟-苯甲腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-甲氧基-1-苯丁基]硫代]-6-甲基-3-吡啶腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-4-甲基-1-苯基戊基]氧基]-4-氯-5-氟苯甲腈；2-[[(1S，3S)-3-氨基-4-羟基-1-丙基丁基]氧基]-4-氯-5-氟苯甲腈；2-[[(1S)-1-[(2S)-2-氨基-3-羟基丙基]戊基]硫代]-6-甲基-3-吡啶腈；2-[[(1S，3S)-3-氨基-4-羟基-1-(2-甲基丙基)丁基]硫代]-6-甲基-3-吡啶腈；2-[[(3S)-3-氨基-4-羟基-1-(5-异噁唑基)丁基]硫代]-6-甲基-3-吡啶腈；2-[[(3S)-3-氨基-4-羟基-1-(5-异噁唑基)丁基]氧基]-6-(三氟甲基)-3-吡啶腈；2-[[3-(3S)-氨基-4-羟基-1-(1R)-(2-噻吩基)丁基]氧基]-4-氯-5-氟苯甲腈；2-[[3-(3S)-氨基-4-羟基-1(1R)-(3-噻吩基)丁基]氧基]-4-氯-5-氟苯甲腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-(3-吡啶基)丁基]硫代]-4-(三氟甲基)苯甲腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-(5-嘧啶基)丁基]硫代]-4-氯苯甲腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-(3-吡啶基)丁基]硫代]-4-氯-5-氟苯甲腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-(3-吡啶基)丁基]硫代]-4-溴苯甲腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-(2-噻唑基)丁基]氧基]-5-氟-6-甲基-3-吡啶腈；4-[[(1R，3S)-3-氨基-1-(3-氟-2-噻吩基)-4-羟丁基]硫代]-6-甲氧基-3-吡啶腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-1-(4-氯-5-噻唑基)-4-羟丁基]氧基]-4-氯-5-氟苯甲腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-5-硝基苯甲腈；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-5-氯-3-吡啶腈；β-氨基-δ-[(4-氨基-2-硝基苯基)硫代]-(β1S，δ1R)-苯丁醇；2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羟基-1-苯丁基]硫代]-5-溴-苯甲腈；及其可药用盐、对映异构体或消旋体。
7.权利要求1-6中任何一项所述的式(I)化合物，或其可药用盐、对映异构体或消旋体作为药物的用途。
8.一种药物组合物，包括权利要求1-6中任何一项所述的式(I)化合物，或其可药用盐、对映异构体或消旋体以及可药用佐剂、稀释剂或载体。
9.权利要求1-6中任何一项所述的式(I)化合物或其可药用盐、对映异构体或消旋体在用于制备治疗或预防人疾病或病症药物中的用途，所述疾病或病症中抑制氧化氮合酶活性可以得到有益的效果。
10.权利要求9所述的用途，其中主要是诱导型氧化氮合酶被抑制。
11.权利要求1-6中任何一项所述的式(I)化合物或其可药用盐、对映异构体或消旋体在用于制备治疗或预防炎性疾病药物中的用途。
12.权利要求11所述的用途，其中所述疾病为炎性肠病。
13.权利要求11所述的用途，其中所述疾病类风湿性关节炎。
14.权利要求11所述的用途，其中所述疾病为骨性关节炎。
15.权利要求1-6中任何一项所述的式(I)化合物或其可药用盐、对映异构体或消旋体在用于制备治疗或预防疼痛药物中的用途。
16.权利要求1-6中任何一项所述的式(I)化合物或其可药用盐、对映异构体或消旋体组合COX-2抑制剂，在用于制备治疗或预防炎性疾病药物中的用途。
17.一种治疗或降低人疾病或病症发作风险的方法，该疾病或病症中抑制氧化氮合酶活性可以得到有益的效果，该方法包括对该疾病或病症的患者或潜在患者施用治疗有效量的权利要求1-6中任何一项所述的式(I)化合物或其可药用盐、对映异构体或消旋体。
18.权利要求17所述的治疗方法，其中被抑制的主要是诱导型氧化氮合酶。
19.一种治疗或降低炎性疾病发作风险的方法，其中该方法包括对该疾病或病症的患者或潜在患者施用治疗有效量的权利要求1-6中任何一项所述的式(I)化合物或其可药用盐、对映异构体或消旋体。
20.权利要求19所述的治疗方法，其中所述疾病为炎性肠病。
21.权利要求19所述的治疗方法，其中所述疾病为类风湿性关节炎。
22.权利要求19所述的治疗方法，其中其中所述疾病为骨性关节炎。
23.一种治疗或降低疼痛发作风险的方法，其中该方法包括对患者施用治疗有效量的权利要求1-4中任何一项所述的式(I)化合物或其可药用盐、对映异构体或消旋体。
24.一种治疗或降低炎性疾病发作风险的方法，其中该方法包括对患者施用权利要求1-6中任何一项所述的式(I)化合物或其可药用盐、对映异构体或消旋体与COX-2抑制剂的组合。
25.一种制备权利要求1-6中任何一项所定义的式(I)化合物或其可药用盐、对映异构体或消旋体的方法，其中该方法包括(a)将式(II)化合物与具有式(III)结构的化合物反应 其中T、U、X、Y及W如权利要求1中所定义，L1表示离去基团， 其中R1、R2、R3、R4、R5、R6及V如权利要求1中所定义；或(b)将式(IV)化合物与式(V)化合物反应 其中T、U、W、X、Y及V如权利要求1中所定义； 其中R1、R2、R3、R4、R5及R6如权利要求1中所定义，L2为离去基团；并且当期望或必要时，将式(I)产物或其另一种盐转变为其可药用盐；或将一种式(I)化合物转变为另一种式(I)化合物；并且当期望时，可将式(I)的产物转变为其光学异构体。
全文摘要
本发明提供了式(I)新化合物，其中R
文档编号A61P17/04GK1630637SQ02809618
公开日2005年6月22日 申请日期2002年5月6日 优先权日2001年5月8日
发明者蒂娜·伯金肖, 斯蒂芬·康诺利, 蒂莫西·卢克, 安托尼奥·梅特, 伊恩·米利奇普 申请人:阿斯利康(瑞典)有限公司