1-芳基脲基环烷基-1-甲酰胺类化合物及其药物组合物和应用

1-芳基脲基环烷基-1-甲酰胺类化合物及其药物组合物和应用
【专利摘要】本发明公开了通式I所示的1?芳基脲基环烷基?1?甲酰胺类化合物及其药学上可接受的盐、氮氧化物、溶剂化物以及包括其各种比例混合物在内的立体异构体，T、L1、Y、X、X1、X2、X3、G、D、B环、RB、m具有在说明书中给出的含义。本发明还涉及此类化合物的制备方法，并且还涉及该类化合物其药学上可接受的盐、氮氧化物、溶剂化物、各种比例混合物在内的立体异构体的用途，特别是在制备用于防护、处理、治疗或减轻癌症病症的药物中的用途。
【专利说明】
1 -芳基脲基环烷基-1 -甲酰胺类化合物及其药物组合物和 应用
技术领域
[0001] 本发明涉及新的1-芳基脲基环烷基-1-甲酰胺类化合物及其药学上可接受的盐、 氮氧化物、溶剂化物、各种比例混合物在内的立体异构体以及含有所述化合物的药物组合 物。本发明还涉及此类化合物的制备方法，并且还涉及该类化合物其药学上可接受的盐、氮 氧化物、溶剂化物、各种比例混合物在内的立体异构体的用途，特别是在制备用于防护、处 理、治疗或减轻癌症病症的药物中的用途。
【背景技术】
[0002] 从2001年至今，已经有二十余个蛋白酪氨酸激酶抑制剂在临床上用于各类肿瘤的 治疗，例如，索拉非尼（Sorafenib)，由Bayer公司和Onyx Pharmaceuticals公司研发，它能 抑制VEGFR-2、VEGFR-3、H)GFR(血小板衍生生长因子受体，血管成长因子受体的一种，激活 PDGFR可促进肿瘤生长）、c-Kit (干细胞生长因子，在急性髓性白血病中表达较高）和Raf激 酶。它是唯一个能抑制Raf激酶的VEGFR类抑制剂类药物。索拉非尼可用于治疗晚期肾细胞 癌(RCC)和肝细胞癌(HCC)。脲基作为药物设计中经常使用的优势结构，既可以做氧键受体， 也可以做氧键供体，还可以提高药物的水溶性。（参考文献:姜杰，欧阳贵平.脲类受体酪氨 酸激酶抑制剂的研究进展[J].精细化工中间体，2014，44(5): 14-19。）
[0003]
[0004] 卡博替尼，以环丙基-1,1-双甲酰胺作为连接子，其对VEGFR2、c-Met、RET、KIT、 卩1^1/2/3、1'比-2及。-]\^七的1〇5()分别为0.03、1.3、4、4.6、12/11.3/6、14.3和7腦〇1.1/ 1，对 R0N和TOGFR的活性稍弱，IC5Q分别为124和234nmol · L-^此外，在细胞活性测试中，卡博替 尼也可有效抑制VEGFR2和c-Met的磷酸化，并对KIT、FLT3和AXL都有抑制作用，IC 5Q分别为 1·9、7·8、5·0、7·5和42nmol · L-1，其在体内肿瘤模型中也能有效抑c-Met和VEGFR2的磷酸 化。卡博替尼对c-Met和VEGFR信号转导通路调控异常的癌症具有非常好的疗效，能有效抑 制肿瘤血管形成和肿瘤转移。该药2012年11月29日被美国FDA批准用于治疗转移性甲状腺 髓样癌。（参考文献:胡亚宁，胡诗合，袁浩亮，庄津，陈亚东，陆涛.小分子c-Met激酶抑制剂 的研究进展[J]·药学进展，2015,39(3): 170-178。）
[0005]


【发明内容】

[0006] 本发明的一方面涉及一种如通式I所示的化合物及其药学上可接受的盐、氮氧化 物、溶剂化物以及包括其各种比例混合物在内的立体异构体，
[0007]
[0008] B环为具有0-3个N、0-2个0和/或0-2个S原子的3-7元饱和碳环或杂环，
[0009] RB选自氢、卤素、硝基、氰基、NhAJRhSRhNHRhNUikCORhSOsNHRhSO^Uih、 30顺1? 1、3(^(1?1)2、0)01?1、0)順1? 1、0^(1?1)2、-[(：(1?1)2] {；-厶心-[(：(1?1)2]{；-他七、-[(：(1? 1)2]{；-环烷 基、-OCORi、OCONHRi、0⑶N (Ri) 2、NRi ⑶A、NA⑶Ri、NRiCONHA、NACONHRi、NRi ⑶N (A) 2、NA⑶N (Ri) 2、NR1SO2A 或者 NASO2R1，
[0010] Ri为H、A、CHe C-CH2-、A-C E C-CH2-、CH2 = C-CH2-、A-CH=C-CH2-、A-C (R2) = C-CH2-、 〇)0办、〇)順1?2、〇^(1?2)2、-[(：(1? 2)2]{；-厶&-[(：(1?2)2] {；-他1-[(：(1?2)2]{；-环烷基，
[0011] R2 为H、A，
[0012] A为H、A2，
[0013] A2为具有1-10个碳原子的支链或者非支链烷基，其中，0-4个CH2基团被0原子或S原 子和/或-CH=CH-基团替换，和/或0-7个Η原子被卤素、羟基、氨基或下列基团替换，
[0014]
[0015] 其中，Μ为具有1-6个碳原子的支链或者非支链烷基，
[0016] X々〇、S、NRi，
[0017] X2为〇、S、NRi，
[0018] X3为〇、S、NRi、CHRi、C(Ri)2，
[0019] G^-[C(Ri)2]j-,
[0020] 0为厶、-[以1?1)2!^_环烷基，_[0(1?1)2!^ _厶1'、-[0(1?1)2!^_1161:，
[0021] X 为-
[0022] -[C(R2)2]nCOO[C(R 2)2]n，
[0023] Y为Ar-二基、杂芳-二基、亚环烷基，
[0024] Li 为0、S、NH、NRi 或者Li 不存在，
[0025] T为具有1-4个N、和/或0-4个0、和/或0-4个S原子的单环、双环或三环、饱和或不饱 和的、芳族或非芳族杂环，其可未取代或被以下基团单取代、二取代：=〇、=3、=冊1、=1'|-CN、= N-N02、= N-ORi、= N-C0R!、= N-C00R!、= N-0C00R!，各取代基之间相互独立;且其可未 取代或被以下基团单取代、二取代、三取代或四取代：卤素、硝基、氰基、N^AjR^SRhNHRl·、 N(Ri)2、CORi、S〇2NHRi、S〇2N(Ri)2、SONHRi、SON(Ri)2、COORi、CONHRi、CON(Ri)2、-[C(Ri)2] g_Ar、-[C (Ri) 2 ] g-He t、- [ C (Ri) 2 ] g_ 环烷基、-0 ⑶ Ri、OCONHRi、0C0N( Ri) 2、NRiCOA、NACORi、NRiCONHA、 嫩03順1?1、冊1〇^以)2、嫩0^(1?1)2、冊15〇24或者嫩5〇21?1，各取代基之间相互独立，
[0026] m为0、1 或2，
[0027] n为〇、1 或2，
[0028] j 为〇，1 或2，
[0029] g为〇，1 或2，
[0030] 卤素为氟、氯、溴、碘。
[0031] 而当1^不存在时，结构片段T与结构片段Y直接相连，所得到化合物结构如下所示：
[0032]
[0033] 更具体地，术语"环烷基"是指非芳族的、饱和的或部分不饱和的环烃基团，所述环 烷基可以任意地被一个或多个本申请所述的取代基取代，其具有3-20个碳原子成为单环的 环，或者7-12个碳原子成为二环的环。单环环烷基的实例包括但是不局限于环丙基、环丁 基、环戊基、1-环戊-1-烯基、1-环戊-2-烯基、1-环戊-3-烯基、环己基、1-环己-1-烯基、环庚 基、环辛基。示例性的成桥二环环烷基包括但是不局限于二环[2.2.1]庚烷、二环[2.2.2]辛 烷、二环[3.2.2]壬烷。"亚环烷基"其通过从所述的环烃结构的单个碳原子或者两个碳原子 上除去两个氢原子得到。
[0034] 术语"Ar"表示芳基，即6-20个碳原子的单价芳族烃基，其通过从母体芳族环系统 的单个碳原子上除去一个氢原子得到。芳基包括二环基团，该二环将基团中包括稠合至饱 和的或部分不饱和的芳族环，或者芳族碳环或杂环的环。通常芳基基团包括但是不局限于 以下的基团：苯、取代的苯、萘、蒽、联苯基、1，2_二氢萘、1，2,3,4_四氢萘基等等。更具体地， [0035] Ar为苯基、萘基或联苯基，它们各自未取代或被以下基团单取代、二取代、三取代 或四取代：卤素、硝基、氰基、NhAJRhSRhNHRhNUihJORhSOsNHRhSOmUOhSONHRi、 SON (Ri) 2、⑶ORi、⑶ NHRi、CON (Ri) 2、-OCORi、OCONHRi、(Χ0Ν (Ri) 2、NRi ⑶A、NACORi、NRiCONHA、 嫩(：0顺1?1、冊1〇^以)2、嫩0^(1?1)2、冊15〇2六或者嫩5〇21?1，各取代基之间相互独立。1广二基" 即6-20个碳原子的单价芳族烃基，其通过从所述的母体芳族环系统的两个碳原子上分别除 去两个氢原子得到。
[0036] 术语"Het"为具有1-4个N、0和/或S原子的单环或双环或三环、饱和或不饱和的、芳 族或非芳族杂环，其可被未取代或被以下基团单取代、二取代、三取代或四取代：卤素、硝 基、氰基、N3、A、ORi、SRi、NHRi、N (Ri) 2、⑶Ri、SO2NHR1、S02N (Ri) 2、SONHRi、SON (Ri) 2、COORi、 CONHRi、CON (Ri) 2、-OCORi、OCONHRi、0C0N (Ri) 2、NRiCOA、NACORi、NRiCONHA、NACONHRi、NRi ⑶ N (A)2 JACONUi )2 ARiSOM或者NAS02R!，各取代基之间相互独立，更具体地，术语"Het"表示 "杂环基"或者"杂芳基"。
[0037] "杂环基"是指3-20个环原子的饱和的或部分不饱和（即在环中具有一个或多个双 或三键)碳环基团，其中至少一个环原子是选自以下的杂原子:氮、氧、磷、硫，可以任意地被 一个或多个本申请所述的取代基取代。还包括这样的基团，即其中杂环基团与饱和的、部分 饱和的环稠合，或者与芳族碳环或杂环的环稠合。"杂环基"的实例包括但是不局限于吡咯 烷基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、吗啉代、硫吗啉代、哌嗪基、环氧丙烷基、咪唑烷基、3-氮杂 二环[3.1.0]己烷基、3-氮杂二环[4.1.0]庚烷基、氮杂二环[2.2.2]己烷基、N-吡啶基脲、嘧 啶酮基和1，1-二氧代-硫吗啉基。
[0038] "杂芳基"是指5-、6-、7-、8、9或10-元环的一价芳香基团，并且包括5-20个原子的 稠合系统，含有一个或多个选自氮、氧、磷和硫的杂原子，可以任意地被一个或多个本申请 所述的取代基取代。"杂芳基"的实例包括但是不局限于吡啶基、咪唑基、咪唑并吡啶基、嘧 啶基、吡唑基、三唑基、吡嗪基、四唑基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、喹啉基、吲哚基等等。"杂 芳-二基"是指其通过从所述的杂芳结构的两个碳原子上除去两个氢原子得到。本发明的一 方面涉及一种如通式I所示的化合物及其药学上可接受的盐、氮氧化物、溶剂化物以及包括 其各种比例混合物在内的立体异构体，其中，其特征在于，通式I中的T-Li-片段包含片段1 和片段2，
[0039]
[0040]其中，Zla为N，CR5，R5 为氢、羟基、卤素、硝基、氰基、R!、OR!、COR!、COORi、0C00R!; ZlbS 1〇?6，1?6为氢、卤素、硝基、氰基、~、厶、01?1、31? 1、冊1?1、叫1?1)2、卬1?1、30 2冊1?1、302叫1?1)2、 30顺1? 1、3(^(1?1)2、0)01?1、0)順1? 1、0^(1?1)2、-[(：(1?1)2] {；-厶心-[(：(1?1)2]{；-他七、-[(：(1? 1)2]{；-环烷 基、-OCORi、OCONHRi、0⑶N (Ri) 2、NRi ⑶A、ΝΑ⑶Ri、NRiCONHA、NACONHRi、NRi ⑶N (A) 2、ΝΑ⑶N (Ri) 2、NR! S02A或者NAS02R!，R3、R4相互独立，各自选自氢、卤素、硝基、氰基、N3、A、OR!、SR!、 NHRi、N(Ri)2、CORi、S〇2NHRi、S〇2N(Ri)2、SONHRi、SON(Ri)2、COORi、CONHRi、CON(Ri)2、_[C(Ri)2 ] g-Ar、- [ C ( Ri ) 2 ] g-He t、- [ C ( Ri ) 2 ] g_环烷基、-OCORi、OCONHRi、0⑶N ( Ri ) 2、NRi ⑶A、ΝΑ ⑶ Ri、 顺1〇)见^、嫩(：0順1?1、冊1〇^(厶)2、嫩0^(1?1)2、顺15〇2厶或者嫩5〇21?1，或者1?3、1?4、1?5、1?6两两之间 形成饱和或不饱和的、芳族或非芳族碳环或杂环，其可被未取代或进一步被以下基团单取 代、二取代或三取代：卤素、硝基、氰基、NhAWRhSRhNHRhNUiLCORhSOWHRhSO^UO〗、 30顺1? 1、3(^(1?1)2、0)01?1、0)順1? 1、0^(1?1)2、-[(：(1?1)2] {；-厶心-[(：(1?1)2]{；-他七、-[(：(1? 1)2]{；-环烷 基、-OCORi、OCONHRi、0⑶N (Ri) 2、NRi ⑶A、NA⑶Ri、NRiCONHA、NACONHRi、NRi ⑶N (A) 2、NA⑶N (Ri) 2、NRiSOM或者NAS02R!，各取代基之间相互独立，
[0041] E环为含有1-3个N、0-2个0和/或0-2个S原子的5-7元饱和或不饱和杂环，被以下基 团单取代、二取代：=〇、= S、= NRi、= N-CN、= N-N〇2、= N-ORi、= N-CORi、= N-⑶ ORi、= N-OCOORi，各取代基之间相互独立;且可以被R7取代，R?选自氢、卤素、硝基、氰基、 SRi、NHRi、N (Ri) 2、CORi、SO2NHR1、S02N (Ri) 2、SONHRi、SON (Ri) 2、COORi、CONHRi、CON (Ri) 2、- [ C (RihL-An-ECXRDdg-Het'-ECXROdg-环烷基、-OCOR^O ⑶NHRhO⑶NUDlNRKOA、 NACORi、NRiCONHA、NACONHRi、NRiCON (A) 2、NACON (Ri) 2、NRi S02A或者 NASO2R1，
[0042] L2 为 MKNRhO'SJsSArECXRiWg-An-ECXRiWg-Het。
[0043] 本发明的一方面涉及一种如通式I所示的化合物及其药学上可接受的盐、氮氧化 物、溶剂化物以及包括其各种比例混合物在内的立体异构体，其中，片段1包含下面的结构，
[0044]
[0045] L3 为 NH、0、S，
[0046] R9、R1Q 相互独立，各自选自氢、AXOORhCONHRhCONUih'-ECUihL-An-tC (RihL-HeKCUddg-环烷基;或R 9、R1Q两两之间形成杂环，其可被未取代或进一步被以 下基团单取代、二取代或三取代:A、OR!、SR!、NHR!、N (R!) 2、COR!、S02NHR!、S02N (R!) 2、S0NHR!、 3(^(1?1)2、0)01? 1{0冊1?1、0^(1?1)2、-[(：(1? 1)2]{；-厶^-[(：(1?1)2] {；-!^七、-[(：(1?1)2]{；-环烷基、-0 ⑶Ri、(XONHRi、(Χ0Ν (Ri) 2、NRiCOA、ΝΑ⑶Ri、NRi ⑶ NHA、ΝΑ⑶ NHRi、NRi ⑶N (A) 2、ΝΑ⑶N (Ri) 2、 NR602A或者NAS02R!，各取代基之间相互独立；
[0047] Z2a为N，CRl3a，Rl3a为氢、硝基、氰基，
[0048] Z2b 为N，CR13b，Ri3b 为氢、剛?14(1?1)2、-[(：(1?1) 2]{^广-[(：(1?1)2]{；-!^、-[(：(1? 1)2]{；-环 烷基、NRiCOA、NACORi、NRiCONHA、NACONHRi、NRiCON (A) 2、NAC0N( Ri) 2、NR1SO2A 或者 NASO2R1，
[0049] Rn、R12相互独立，各自选自氢、卤素、硝基、氰基、NhAJRhSRhNHRhNUikCORi、 S〇2NHRi、S〇2N(Ri)2、SONHRi、SON(Ri)2、ra〇Ri、CONHRi、CON(Ri)2、-[C(Ri)2] g_Ar、-[C(Ri)2]g-He t、- [ C (Ri) 2 ] g_ 环烷基、-OCORi、OCONHRi、0C0N (Ri) 2、NRiCOA、NACORi、NRiCONHA、NACONHRi、 NRiCON (A) 2、NACON (Ri) 2、NRi SO2A或者 NASO2R1，
[0050] 或Rn、R12之间形成饱和或不饱和的、芳族或非芳族碳环或杂环，其可被未取代或 进一步被以下基团单取代、二取代或三取代：卤素、硝基、氰基、N^AjRhSR^NHRhNU^、 CORi、S〇2NHRi、S〇2N(Ri)2、SONHRi、SON(Ri)2、COORi、CONHRi、CON(Ri)2、-[C(Ri)2] g_Ar、-[C (Ri) 2 ] g-He t、- [ C (Ri) 2 ] g_ 环烷基、-OCORi、OCONHRi、0C0N (Ri) 2、NRiCOA、NACORi、NRiCONHA、 嫩03順1?1、冊1〇^以)2、嫩0^(1?1)2、冊15〇24或者嫩5〇21?1，各取代基之间相互独立。
[0051] 本发明的一方面涉及一种如通式I所示的化合物及其药学上可接受的盐、氮氧化 物、溶剂化物以及包括其各种比例混合物在内的立体异构体，其中，片段2包含下面的结构，
[0052]
[0053]本发明的一方面涉及一种如通式I所示的化合物及其药学上可接受的盐、氮氧化 物、溶剂化物以及包括其各种比例混合物在内的立体异构体，其中，Y片段为Ar-二基，其未 取代或被以下基团单取代或二取代：卤素、硝基、氰基、N^AJRhSRhNHRhNUihXORl·、 SO2NHR1、SO2N (Ri) 2、SONHRi、SON (Ri) 2、COORi、CONHRi、CON (Ri) 2、-OCORi、OCONHRi、0C0N (Ri) 2、 顺1〇^、嫩(：01?1、冊1〇^撤、嫩(：0順1?1、顺1〇^(厶）2、嫩0^(1?1)2、冊15〇2厶或者嫩5〇21?1，各取代基 之间相互独立。
[0054] 本发明的一方面涉及一种如通式I所示的化合物及其药学上可接受的盐、氮氧化 物、溶剂化物以及包括其各种比例混合物在内的立体异构体，其中，D为苯基、吡啶基、噻吩 基、呋喃基、咪唑基，其未取代或被以下基团单取代、二取代或三取代：卤素、硝基、氰基、N 3、 A、0Ri、SRi、NHRi、N(Ri)2、C0Ri、S02NHRi、S02N(Ri)2、S0NHRi、S0N(Ri)2、C00Ri、C0NHRi、TON (1?1)2、-[(：(1? 1)2]{；-厶^-[(：(1?1)2] {；-!^七、-[(：(1?1)2]{；-环烷基、-0〇)1? 1、0〇)冊1?1、(^(^(1?1)2、 顺1〇^、嫩(：01?1、冊1〇^撤、嫩(：0順1?1、顺1〇^(厶）2、嫩0^(1?1)2、冊15〇2厶或者嫩5〇21?1，各取代基 之间相互独立。
[0055] 本发明的一方面涉及一种如通式I所示的化合物及其药学上可接受的盐、氮氧化 物、溶剂化物以及包括其各种比例混合物在内的立体异构体，其中，X为-NHC0-，乂:为順，X 2为 0、順，乂3为順。
[0056] 短语"可接受的盐"，是指本发明化合物的药学上可接受有机或无机盐。示例性的 盐包括但是不局限于硫酸盐、枸橼酸盐、乙酸盐、草酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、硝酸盐、 酸式硫酸盐、异烟酸盐、乳酸盐、水杨酸盐、酸式枸橼酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、延胡索酸 盐、葡萄糖酸盐、甲酸盐、甲磺酸盐和巴莫酸盐。"可接受的盐"可涉及包括另一分子例如马 来酸盐或其他平衡离子。平衡离子在母体化合物中稳定电荷。"可接受的盐"可以有多于一 个的荷电原子，多个荷电原子可具有多个平衡离子。
[0057] 如果本发明化合物是碱，需要的"可接受的盐"可通过适宜的方法制备，例如，用以 下的无机酸处理该游离碱:盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸;或者用如下的有机酸：乙酸、马 来酸、琥珀酸、扁桃酸、富马酸、丙二酸、丙酮酸、水杨酸、吡喃糖苷基酸如葡萄糖醛酸或半乳 糖醛酸、α-羟基酸如枸橼酸或酒石酸、氨基酸如谷氨酸、芳香族酸如苯甲酸或肉桂酸、磺酸 如甲磺酸或对甲苯磺酸。
[0058] 如果本发明化合物是酸，需要的"可接受的盐"可通过适宜的方法制备，例如，用如 下的无机碱或者有机碱处理该游离酸:胺、碱金属氢氧化物或碱土金属氢氧化物等。适宜的 盐的示例性的示例包括但是不限于由氨基酸得到的有机盐，伯、仲、叔胺盐，以及环状胺例 如哌啶、吗啉和哌嗪的盐，以及由钠、钙、钾、镁、锰、铁、铜、锌、铝和锂得到的无机盐。
[0059] 溶剂合物是指一个或多个溶剂分子与本发明化合物的结合物或络合物。形成溶剂 合物的溶剂的示例包括但是不局限于水、异丙醇、乙醇、甲醇、二甲亚砜、乙酸乙酯、乙酸和 乙醇胺。
[0060] 本发明的化合物可以含有不对称中心或手性中心，并且因此存在不同的立体异构 体形式。本发明化合物的所有立体异构体形式，包括但不局限于，非对映体、对映体和位阻 异构体，以及它们的混合物例如外消旋混合物，将形成本发明的一部分。在本文中，当任何 特定手性原子的立体化学未确定时，所有立体异构体均被考虑。此外，本发明涉及所有的几 何和位置异构体。本发明化合物可以以不同的互变异构体形式存在，并且所有这些形式均 包括在本发明范围内。本发明化合物可以以非溶剂化形式存在，也可以与药学上可接受的 溶剂如水、乙醇等以溶剂化形式存在，所以本发明将包括溶剂化和非溶剂化的形式。
[0061] 本发明的一方面涉及一种如通式I所示的化合物及其药学上可接受的盐、氮氧化 物、溶剂化物以及包括其各种比例混合物在内的立体异构体，包含但是不局限于下列结构：
[0062]
[0063]
[0064]
[0065]
[0066] 本发明还公开了制备通式1所述的化合物及其药学上可接受的盐、氮氧化物、水合 物、溶剂化物以及包括其各种比例混合物在内的立体异构体的方法，以X为-NHC0-为例介 绍，可以按照以下的路线以及步骤进行：
[0067]
[0068] 所述步骤包括：
[0069] (1)第一步:异氰酸酯类化合物与1-氨基环烷基甲酸酯及其类似物生成脲-酯类化 合物；
[0070] (2)第二步:脲-酯类化合物水解后生成脲-酸类化合物(片段A);
[0071] (3)第三步:脲-酸类化合物(片段A)与胺类化合物(片段B)在缩合剂的作用下生成 目标化合物。
[0072] 我们的合成策略是，首先是得到片段A以及片段B，然后进行两个片段的拼接。片段 A的合成，主要是指脲的合成方法。方法主要有以下几种策略：
[0073] 1)胺与异氰酸酯直接反应，
[0074] 2)两种胺类化合物在三光气的作用下生成，
[0075] 3)两种胺类化合物在⑶1(羰基二咪唑）的作用下生成，
[0076] 4)两种胺类化合物在氯甲酸酯的作用下生成，氯甲酸酯包括氯甲酸苯酯、氯甲酸 对硝基苯酯、氯甲酸-2-异丙烯酯、氯甲酸-2-三氟乙基酯或者氯甲酸-2-三氯乙基酯。
[0077] 具体的，我们以如下的反应方程式举例说明此类化合物反应路线：
[0078]
[0079] 异氰酸酯类化合物与1-氨基环烷基甲酸甲酯及其类似物生成脲-甲酯类化合物； 然后甲酯水解之后生成酸类生成酸类化合物。水解的条件包括LiOH、NaOH、LiI/吡啶等等。
[0080] 更加具体地，按照我们设计的合成方法，我们制备了片段A-1~片段A-5这5个化合 物作为片段A类脲-酸类化合物的代表。
[0081]
[0082]片段B，包含片段1相关结构以及包含片段2相关结构，其制备方法目前已经有很多 文献报道，可以按照文献的制备方法进行制备。
[0083]其中，包含片段1相关结构的合成，现举例如下：
[0084] 例（1) 1
[0086] '巧人 I 干」八：1 丄 tmtt丄?丄 mi 1U丄 SLUUltJS UIlMycobacterium tuberculosis N-acetylglucosamine-1-phosphate uridy1transferase.Org.Biomol.Chem.2013,11,8113-8126.)
[0087] 例（2)
[0088]
[0089] (参考文献:J ·库明.化合物[P].中国专利:CN1321151A.)[0090] 例（3)
[0091] 123 2 (参考文献：Kubo，K. ;Shimizu，T. ;0hyama，S. ;Murooka，H. ;et al .Novel Potent Orally Active Selective VEGFR-2Tyrosine Kinase Inhibitors:Synthesis, Structure-Activity Relationships,and Antitumor Activities of N-Phenyl-N7-{4-(4-quinolyloxy)phenyl}ureas.J.Med.Chem.2005,48,1359-1366.) 3 例⑷
[0095]
[0096] (参考文献：Garofalo，A. ;Goossens，L. ;Baldeyrou，B. ;et al.Design， Synthesis，and DNA-Binding of N-Alkyl(anilino)quinazoline Derivatives.J.Med.Chem.2010,53,8089-8103.)
[0097] 例（5)
[0098]
[0099] (参考文献：Yao，J. ;Chen，J. ;He，Z·; et al ·Design，synthesis and biological activities of thiourea containing sorafenib analogs as anti tumor agents.Bioorg.Med.Chem.2012,20,2923-2929.)
[0100] 例（6) 123
r 2 JCIWV ： , j . ; ne , λ . ； unen, j . ； e l ai · ues丄gn，syn Lnesis ana Dioiog丄cal activities of sorafenib derivatives as antitumor agents.Bioorg.Med.Chem.Lett.2012,22,6549-6553.) 3 例（7)
[0104；
[0105] (参考文献：宫平，赵燕芳，刘亚婧，翟鑫.喹唑类及噌啉类化合物及其应用[P].中 国专利：CN102643268B.)
[0106] 例（8)
[0107]
12 (参考文献：Kung，P ·; Funk，L ·; Meng，J ·; e t a 1 · Structure ac t i v i ty relationships of quinoline-containing c-Met inhibitors.Eur.J.Med.Chem.2008, 43,1321-1329.) 2 关于包含片段1相关结构的合成方法，除了上述文献报道了相关合成，在如下的文 献中也有详细的描述：1)US20130137708A ;2)US20090306103A;3)US20150376133A;4) Garofalo,A.；Goossens,L.；Six,P.；et al. Impact of aryloxy-linked quinazolines:A novel series of selective VEGFR-2receptor tyrosine kinase inhibitors .Bioorg.Med.Chem.Lett .2011,21,2106-2122;5)黄伟，丛欣，叶军，赵兴娥，王 佳.一种稠杂环衍生物及其应用[P].中国专利:CN103183674A;6)Lii，S. ;Zheng，W. ;Ji，L.; et al.Synthesis,characterization , screening and docking analysis of 4_ ani 1 inoquinazol ine derivatives as tyrosine kinase inhibitors.Eur.J.Med.Chem.2013,61,84-94；7)Rowbottom,M.ff.；Faraoni,R.；Chao,Q., et al. Identification of1-(3-(6,7-Dimethoxyquinazolin-4-yloxy)pheny1)-3-(5-(1, 1,1-trifluor〇-2-methylpropan-2-y1)isoxazol-3-yl)urea Hydrochloride(CEP-32496)，a Highly Potent and Orally Efficacious Inhibitor of V-RAF Murine Sarcoma Viral Oncogene Homologue B1(BRAF)V600E.J.Med.Chem.2012,55,1082-1105； 8)Garofalo, A.；Farce,A.；Ravez,S.；et al. Synthesis and Structure-Activity Relationships of(Aryloxy)quinazoline Ureas as Novel，Potent，and Selective Vascular Endothelial Growth Factor Receptor-2Inhibitors.J.Med.Chem.2012,55, 1189-1204；9)Shreder,K.R.；ffong,M.S.；Nomanbhoy,T.；et al.Synthesis of AX7593,a Quinazoline-Derived Photoaffinity Probe for EGFR.Org.Lett.2004,6(21),3715-3718；10)Zhai,x.；Li,w.；et al.Design and Synthesis of2-Iminothiazolidin-4-〇ne Moiety Containing Compounds as Potent Antiproliferative Agents.Arch.Pharm.Chem.Life.Sci.2012,345,360-367〇
[0110] 其中，包含片段2相关结构的合成，现举例如下：
[0111] 例（1)
[0112]
[0113]
al.Chlorothiophenecarboxamides as PI surrogates of inhibitors of blood coagulation factor Xa.Bioorg.Med.Chem.Lett.2004,14,5817-5822.)
[0114] 关于包含片段2相关结构的合成方法，，除了上述文献报道了相关合成，在如下的 文献中也有详细的描述：1))(；1叫，<1.;￥&叫，1^.;1^，!1.;6七31.1(161^1：[ >;!_。&七;!_0110亡 anthranilamide derivatives as potential factor Xa inhibitors: Drug design, synthesis and biological evaluation .Eur.J.Med.Chem.2015,95,388-399；2) CN1771237A。
[0115] 关于结构通式I所示的化合物的合成，可以用片段A中的任一结构与片段B中的任 一结构在缩合剂的存在下缩合而成。更加具体地，本专利所保护的化合物包括但是并不局 限于A1~A5所代表的任一结构与B1~B10所代表的任一结构随机搭配缩合生成的任何化合 物。缩合过程中，所用到的缩合试剂选自但是不局限于磷酸盐类试剂（PyCl 〇P、PyBr〇P、 PyB0P、PyA0P)，脲类试剂(HBTU、HATU、TBTU)，苯并三氮唑类缩合试剂（B0MI、BDMP)，碳二酰 亚胺类试剂(〇?：40(：、01〇，咪唑类试剂(0)1)，有机磷类试剂(0??八、0??-(：1、80?-(：1)，酸性 卤化物试剂(氯化试剂选自新戊酰氯、亚硫酰氯、草酰氯、氰尿酰氯、BTC)，氯代甲酸酯;所用 到的碱选自但是不局限于三乙胺，DΙΕΑ，NMM，DMAP，三甲基吡啶，碳酸氢钠。
[0116] 本发明的另一方面提供了一种药物组合物，包含一种或多种所述的式I的化合物 或其药学上可接受的盐、溶剂化物或其异构体，以及药学上可接受的载体、稀释剂、赋形剂、 辅剂、媒介物或它们的组合。这些组合物亦可在食品或保健品中有所应用。
[0117] 所述的药物组合物可以包含一种或多种所述的式I的化合物，也可以更进一步地 包含附加治疗剂，这些附加治疗剂选自：抗肿瘤药、抗增殖剂、抗病毒剂、抗炎剂、免疫调节 剂、神经因子、心血管疾病治疗剂、血管障碍治疗剂、免疫缺陷性障碍治疗剂。但是不局限于 上述已经列出的化合物。
[0118] 本发明的另一方面提供了用所述的式I化合物来制备用于防护、处理、治疗或减轻 患者疾病、病症或病状的药物的用途，其包含给需要的哺乳动物施用有效量的本发明的化 合物或其立体异构体、几何异构体、互变异构体、溶剂合物和"可接受的盐"。所述的疾病、病 症或病状的实例包括但是不局限于癌症、瘤转移、病毒性病症、细菌感染病症、血管生成性 病症、自体免疫疾病、炎症性病症、与器官移植相关联的病状、心血管类疾病、神经变性疾 病。更加具体地，用所述的式I化合物来制备用于防护、处理、治疗或减轻患者癌症、瘤转移、 病毒性病症、细菌感染病症的用途。更加更加具体的用途，是用所述的式I化合物来制备用 于防护、处理、治疗或减轻癌症、瘤转移。
[0119] 根据本发明方法，用所述的式I化合物来制备用于防护、处理、治疗或减轻癌症、瘤 转移，包括但是不局限于乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、前列腺癌、睾丸癌、生殖泌尿道癌、食道 癌、喉癌、成胶质细胞癌、成神经细胞癌、胃癌、皮肤癌、角化棘皮癌、肺癌、表皮样癌、大细胞 癌、非小细胞癌、小细胞癌、肺腺癌、骨癌、结肠癌、腺癌、胰腺癌、腺癌、甲状腺癌、滤泡性癌、 未分化癌、乳头状癌、精原细胞癌、黑素瘤、肉瘤、膀胱癌、肝癌和胆管癌、肾癌、骨髓样障碍、 淋巴样障碍、毛细胞癌、口腔和咽癌、唇癌、舌癌、嘴癌、小肠癌、结肠直肠癌、大肠癌、直肠 癌、脑和中枢神经系统癌、何杰金氏病或白血病。
[0120] 本发明的另一方面提供了用包含所述的式I化合物的药物组合物来制备用于防 护、处理、治疗或减轻患者疾病、病症或病状的药物的用途。这些药物组合物包含一种或多 种所述的式I的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或其异构体，以及药学上可接受的 载体、稀释剂、赋形剂、辅剂、媒介物或它们的组合。癌症、瘤转移、病毒性病症、细菌感染病 症、血管生成性病症、自体免疫疾病、炎症性病症、与器官移植相关联的病状、心血管类疾 病、神经变性疾病。更加具体地，是用包含所述的式I化合物的药物组合物来制备用于防护、 处理、治疗或减轻患者癌症、瘤转移的用途。
[0121] 根据本发明方法，用所述的式I化合物的药物组合物来制备用于防护、处理、治疗 或减轻癌症、瘤转移，包括但是不局限于胃癌、乳腺癌、甲状腺癌、肾癌、肝癌、卵巢癌、宫颈 癌、肺癌、前列腺癌、睾丸癌、生殖泌尿道癌、食道癌、喉癌、皮肤癌、角化棘皮癌、表皮样癌、 大细胞癌、非小细胞癌、小细胞癌、肺腺癌、骨癌、结肠癌、胰腺癌、腺癌、乳头状癌、黑素瘤、 肉瘤、膀胱癌、胆管癌、口腔和咽癌、唇癌、舌癌、嘴癌、小肠癌、结肠癌、大肠癌、直肠癌、脑和 中枢神经系统癌、何杰金氏病或白血病。
[0122] 根据本发明方法，所述的心血管疾病包括但是不局限于血栓形成、再狭窄、心肥 大、心肌梗塞动脉粥样硬化、心肌梗塞、心绞痛和充血性心力衰竭。
[0123] 根据本发明方法，所述的的神经变性疾病包括但是不局限于阿尔茨海默氏病、帕 金森病、肌萎缩侧索硬化、亨廷顿病和脑缺血，以及由创伤性损伤、谷氨酸神经毒性和缺氧 引起的神经变性疾病。
[0124] 根据本发明方法，所述的炎症疾病包括但是不局限于前列腺炎、乳腺炎、肾炎、类 风湿性关节炎、牛皮癣、接触性皮炎和迟发型超敏反应。
[0125] 本发明化合物可以通过适宜所治疗病况的任何途径施用。适宜的途径包括但是不 局限于口腔、胃肠外(包括皮下、肌内、静脉内、动脉内、皮内）、阴道、腹膜内、肺内和鼻内。应 当理解，优选的途径可以因例如病人的病况变化。当所述化合物经口施用时，可以将其与药 学上可接受的载体或赋形剂配制成丸剂、胶囊剂、片剂等。当所述化合物配制成胃肠外时， 其可以与药学上可接受的胃肠外载体配制。
[0126] 本发明可以以任意方便的给药形式施用化合物，例如，片剂、粉末、胶囊、溶液、分 散系、悬浮液、糖衆、喷雾剂、栓剂、凝胶、乳剂、贴剂等。这样的组合物可以含有药物制剂的 常规组分，例如稀释剂、载体、pH调节剂、甜味剂、填充剂和其他活性剂。如果需要胃肠外给 药，组合物是无菌的，且是适合注射或者输注的溶液或悬浮液形式。
[0127] 典型的制剂是通过将本发明化合物和载体、稀释剂或赋形剂混合来制备。适宜的 载体载体、稀释剂或赋形剂混包括但是不局限于如下的材料:碳水化合物、蜡类、水可溶或 可膨胀聚合物、亲水性或疏水性材料、明教、油类、溶剂、水等。所用的具体载体、稀释剂或赋 形剂将取决于本发明化合物被应用的方式和目的。溶剂根据安全性来选择，一般选择水性 溶剂以及可溶解或分散于水中的其他非毒性溶剂。适宜的水性溶剂包括但是不局限于水、 乙醇、聚乙二醇等及其混合物。所述的制剂还可以包括一种或者多种缓冲剂、增溶剂、表面 活化剂、润湿剂、润滑剂、乳化剂、混悬剂、防腐剂、抗氧剂、遮光剂、助流剂、着色剂、增甜剂、 芳香剂、调味剂和其他已知的添加剂。制备缓控释制剂包括但是不局限于聚酯、水凝胶、聚 乳酸化合物、L-谷氨酸的共聚物、非降解乙烯醋酸乙烯酯、可降解的乳酸-羟基乙酸共聚物。
[0128] 本发明的化合物可以单独使用，或者与其他治疗剂联合使用。联合治疗可以提供 协同作用，即当活性成分一起使用时达到的效果，大于分别使用所述化合物所产生效果的 加和。所述联合治疗可以以同时或连续的方案施用。当连续施用时，所述组合可以以两种或 多种用法来施用。化合物可以再单一的药物组合中一起施用，或分开施用，且当分开施用 时，可以同时地或以任意次序先后地进行。
[0129] 本发明的化合物或其异构体、溶剂合物、可接受的盐，被来制备用于防护、处理、治 疗或减轻患者疾病、病症或病状的药物的用途时，可以与附加治疗剂联合使用。其中，抗肿 瘤药包括在靶向治疗和常规化疗中使用的化合物。预见到用于联合治疗的许多合适的化疗 剂用于本发明的方法中。本发明预见到，但是不局限于，施用多种抗癌剂，例如:诱导细胞凋 亡的试剂，多核苷酸;多肽;药物;生物模拟物;生物碱;烷化剂;抗肿瘤抗生素;抗代谢物;激 素;铂化合物;与抗癌药物缀合的单克隆抗体，毒素，或者放射性核素;生物效应调节剂(如 干扰素和白介素）；过继免疫治疗剂;造血生长因子;诱导肿瘤细胞分化的试剂(如全反式维 甲酸）；基因治疗剂;反义治疗剂和核苷酸;肿瘤疫苗;血管生成剂等。
[0130] 在化疗剂的定义中也包括但是不局限于：（1)对肿瘤起作用的激素进行调节或抑 制的抗激素剂，如抗雌激素和选择性的雌激素受体调节剂，包括他莫昔芬、雷洛昔芬、屈洛 昔芬；（2)抑制酶芳香酶抑制剂(所述芳香酶调节肾上腺的雌激素产生），例如氨鲁米特、福 美坦；（3)抗雄激素例如氟他胺、尼鲁米特、亮丙瑞林和戈舍瑞林；（4)蛋白激酶抑制剂；（5) 脂质激酶抑制剂；（6)抗血管生成剂如贝伐单抗；以及上述任一种的药学上可接受的盐、酸 和衍生物。
[0131] 化疗剂实例包括但是不局限于伊马替尼、埃罗替尼、尼洛替尼、舒尼替尼、达沙替 尼、拉帕替尼、索拉菲尼、硼替佐米、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、亚叶酸、雷帕霉素、烷化剂如塞 替派和环磷酰胺;烷基磺酸酯如白消安和英丙舒凡;氮芥丙烷类如卡波醌;喜树碱，伊立替 康，托泊替康，苔藓抑素，紫杉醇，长春碱，长春新碱，替莫唑胺;氮芥如苯丁酸氮芥;抗生素 如烯二炔，抗生素如卡其霉素，达内霉素，阿克拉霉素，放线菌素，安曲霉素，博来霉素，阿霉 素，卡柔比星，柔红霉素，抗代谢物如叶酸类似物(如二甲叶酸），嘌呤类似物(如氟达拉滨）； 雄激素如卡普睾酮，抗肾上腺素如米托坦;叶酸补充物如亚叶酸。
[0132] 所述的附加剂还包括具有抗肿瘤潜力的人源化单克隆抗体，这些人源化单克隆抗 体包括但是不局限于阿伦单抗、安泊珠单抗、安塞珠单抗、西利珠单抗、达珠单抗。
[0133] 上述的附加治疗剂，可单独与本发明化合物联合使用，也可以多种附加治疗剂组 合后，再与本发明的化合物联合使用。
[0134] 总结来说，上述的附加治疗剂，包括但是不局限于伊马替尼、埃罗替尼、尼洛替尼、 舒尼替尼、达沙替尼、拉帕替尼、索拉菲尼、硼替佐米、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、亚叶酸、雷帕 霉素、塞替派、环磷酰胺、白消安、英丙舒凡、卡波醌、喜树碱、伊立替康、托泊替康、紫杉醇、 长春碱、长春新碱、替莫唑胺、苯丁酸氮芥、卡其霉素、达内霉素、阿克拉霉素、放线菌素、安 曲霉素、博来霉素、阿霉素、卡柔比星、柔红霉素、二甲叶酸、氟达拉滨、卡普睾酮、他莫昔芬、 雷洛昔芬、屈洛昔芬、氨鲁米特、福美坦、氟他胺、尼鲁米特、亮丙瑞林、戈舍瑞林、贝伐单抗、 阿伦单抗、安泊珠单抗、安塞珠单抗、西利珠单抗、达珠单抗，或它们的组合。
[0135] 对于预防和/或治疗用途，根据本发明的生理活性化合物的剂量可在宽的范围内 变化，并且可根据个体需要进行调节。通常情况下，每日lmg~4000mg的剂量是合适的，优选 的剂量为每日l〇mg~3000mg。在适合的情况下，该剂量也可在上述数值之上或者之下。该每 日剂量可以单个剂量或者多个剂量给药。典型的单个剂量包含约l〇mg、20mg、30mg、50mg、 1 OOmg、250mg、300mg、500mg、1 g或 2g 的所述活性成分。
【附图说明】
[0136] 图1为【具体实施方式】第二部分的实施例3所述ZJB-3作用于2株细胞的存活率曲线 图；
[0137] 图2为【具体实施方式】第二部分的实施例10所述ZJB-11作用于2株细胞的存活率曲 线图；
[0138] 图3为【具体实施方式】第二部分的实施例13所述ZJC-2作用于2株细胞的存活率曲线 图。
【具体实施方式】
[0139] 在以下实施例中，仅以阐明本发明方法的方式给出本发明的部分实施例。然而，这 些实施例不以任何方式限制本发明的范围，在本发明的构思前提下对本发明制备方法的简 单改进都属于本发明要求保护的范围。也就是，结合所列举的实施方案来描述本发明时，应 当理解为其无意将本发明限制为那些实施方案。相反，本发明意欲包括所有的变化、改良和 等价形式。本领域技术人员会认识到与本申请所述的那些类似或等同的许多方法和物质， 它们可以用于实现本发明。
[0140] 在下文描述的实施例中，除非另外说明，所有温度均以摄氏度给出。除非另外说 明，试剂从商业供应商购置或者定制，例如希恩思、阿拉丁、TCI、Sigma等等。
[0141] 第一部分:片段A的制备
[0142] (实施例1)片段A-1的制备
[0143]
[0144] 1-氨基-1-环己基甲酸甲酯4g溶解于60mlDCM中，冰浴条件下，缓慢滴入等当量异 氰酸酯在60mlDCM的溶液，室温搅拌过夜，减压除去溶剂，加入2M盐酸150ml (使其pH低于1)， 有固体出现，过滤，水洗，烘干，得到产物3.5g。
[0145] 将上述产物加入50mlTHF以及10ml水溶解，加入5当量的LiOH，搅拌过夜，减压除去 THF，加入水稀释，过滤除去不溶物，滤液用1M盐酸调节pH〈l，有固体从溶剂中析出，过滤，滤 饼用水洗涤，干燥箱中于65°C烘干过夜，所得产物2.5g，可以不做进一步的纯化，直接投入 下步反应。
[0146] 1HNMR(500MHz,DMS0-d6)5：12.18(s,lH),8.99(s,lH),8.06(s,lH),7.52-7.43(m, 4H),6.58(s,lH)a.95-1.37(m,10H)ppm；
[0147] 13CNMR(125MHz，DMS0-d6)S :176.9,154.9,140.7,132.7,127.4(m),124.8,122.9， 122·6，122·2，116·7，116·6，58·3，33·0，25·8，21·8ppm;
[0148] LC-MS，计算（Ci5Hi6ClF3N2〇3，M)为364.0802,发现[M+H] +:365.0885,365.0864， 365·0880，365·0863;[2M+H] +: 729·1662，729·1484，729·1664。
[0149] (实施例2)片段A-2的制备
[0150]
[0151] 1-氨基-1-环己基甲酸甲酯4g溶解于lOOmlTHF溶液，缓慢滴入等当量异氰酸酯在 50mlDCM中的溶液，室温搅拌过夜。减压除去溶剂，加入4M盐酸150ml (使其pH低于1 )，有固体 出现，过滤，水洗，烘干，得到粗品3g。
[0152] 将上述的粗品溶解于80mlTHF/40mlMe0H/20mlH20,加入LiOH 2g，搅拌过夜。减压 除去溶剂，加入水至200ml，过滤除去不溶物，向澄清滤液中加入浓盐酸，调节pH小于1，有白 色固体出现，过滤，滤饼水洗，烘干，得到目标产物2. lg，可以不做进一步的纯化，直接投入 下一步反应。
[0153] 4 MMR(500MHz，DMS0-d6)S: 12.10(s，lH)，8.46(s，lH)，7.34((1, J = 7.5Hz，2H)， 7.04(dd，J = 8.0Hz，J = 8.0Hz，2H)，6.33(s，lH)，1.94-1.19(m，10H)ppm;
[0154] 13C匪R(125MHz，DMS0-d6)S: 177.1,158.6,156.7,137.5,119.7,116.1,115.9， 58.1，33.1，25.8，21.9ppm;
[0155] LC-MS，计算（Ci4Hi7FN2〇3，M)为 280.1223,发现[M+H] + :281 · 1583,281 · 1542， 281·1491，281·1412;[2M+H] + : 561 · 2592，561·2561，561·2534,561·2527-:279.1146， 279.1150，279.1147，279.1161;[2M-H] -:559.2454,559.2412,559.2377,559.2379。
[0156] (实施例3)片段A-3的制备
[0157]
[0158] 1-氨基-1-环丙基甲酸甲酯4g溶解于150mlTHF，缓慢加入等当量异氰酸酯在DCM中 的溶液，室温搅拌过夜。减压除去反应溶剂，加入1M HC1，调节pH小于1，有固体析出，抽滤， 可以得到粗品4.6g，烘干。
[0159] 将上述粗品悬浮于75mlMe0H/15mlH20中，加入LiOH 3g，室温搅拌过夜。减压旋除 溶剂，加入l〇〇ml水和DCM萃取，弃去有机层。水层中加入2M HC1，调节pH小于1，有白色固体 析出，抽滤。滤饼烘干得到产物2.5g，可以不做进一步的纯化，直接投入下步反应。
[0160] 1HNMR(500MHz,DMS0-d6)5：12.33(s,lH),8.49(s,lH),7.38(d,J=7.0Hz,2H),7.04 (dd ,J = 8.5Hz,J = 8.5Hz, 2H), 6.71 (s,lH), 1.33-1.01 (m,4H)ppm；
[0161] 13CNMR(125MHz，DMS〇-d6)S :175.6,158.8,156.9,156.3,137.4,120.2(m),116.0， 115.8,33.9,17.7ppm；
[0162] LC-MS，计算（CiiHiiFN2〇3，M)为238.0754,发现[M+H] +:239.0826,239.0841， 239.0821;[2M+H] + :477 · 1566,477·1571，477·1565。
[0163] (实施例4)片段A-4的制备
[0164]
[0165] 1-氨基-1-环丙基甲酸甲酯2.5g溶解于100ml DCM，缓慢加入等当量异氰酸酯的 DCM溶液，室温搅拌过夜。减压除去溶剂DCM，加入1M盐酸100ml，再加入乙酸乙酯，分出乙酸 乙酯层，减压除去溶剂，真空干燥。
[0166] 将上述干燥的产物溶解于50mlTHF/10mlH20,加入LiOH 4g，搅拌6h。减压除去溶 剂，加入水至1 〇〇ml，过滤除去不溶物。向澄清滤液中加入浓盐酸10ml，调节pH小于1，加入乙 酸乙酯，充分搅拌，分出乙酸乙酯层，水层用乙酸乙酯再次萃取，合并有机相，饱和氯化钠洗 涤，无水硫酸钠干燥，减压除去溶剂，得到白色固体，真空干燥，得到3.5g产物，可以不做进 一步的纯化，直接投入下步反应。
[0167] 4 MMR(300MHz，DMS0-d6)S:8.71(s，lH)，7.75(d，J = 6.5Hz，2H) ,7.29-7 ·23(ι?， 2H)，6.85(s，lH)，1.33(s，2H)，1.02(s，2H)ppm;
[0168] 13C 匪R(125MHz，DMS0-d6)S:175.1,156.1,153.8,151.9,138.4,119.9,119.7， 118.8,117.6,117.5,33.9,17.7ppm;
[0169] LC-MS，计算（CiiHiqC1FN2〇3，M)为272.0364,发现[M+H] +:273.0466,273.0462， 273·0445，273·0438;[2M+H] +:545·0804，545·0800，545·0803，545·0793;- : 271·0291， 271.0296，271.0295，271.0293;[2M-H] -: 543.0647，543.0668，543.0659，543.0649。
[0170] (实施例5)片段A-5的制备
[0171]
[0172] 1-氨基-1-环丙基甲酸甲酯2.5g溶解于100ml DCM，缓慢加入等当量异氰酸酯的 DCM溶液，室温搅拌过夜。减压除去溶剂DCM，加入1M盐酸100ml，再加入乙酸乙酯，分出乙酸 乙酯层，减压除去溶剂，真空干燥。
[0173] 将上述干燥的产物溶解于50mlTHF/10mlH20,加入LiOH 5g，搅拌6h。减压除去溶 剂，加入水至1 〇〇ml，过滤除去不溶物。向澄清滤液中加入浓盐酸10ml，调节pH小于1，加入乙 酸乙酯，充分搅拌，分出乙酸乙酯层，水层用乙酸乙酯再次萃取，合并有机相，饱和氯化钠洗 涤，无水硫酸钠干燥，减压除去溶剂，得到黄色泡沫状固体，真空干燥，得到3.8g产物，可以 不做进一步的纯化，直接投入下步反应。
[0174] ΧΗ NMR(300MHz,DMS0-d6)5：12.40(br,lH),9.00(s,lH),8.09(s,lH),7.55(s,2H), 6.97(s,lH),1.33(s,2H),1.04(s,2H)ppm；
[0175] 13C NMR(125MHz,DMS0-de)5:175.3,156.0,140.7,132.7,127.3(m),124.8,123.4, 122.5,117.2,33.9,17.7ppm;
[0176] LC-MS，计算（Ci2Hi〇ClF3N2〇3，M)为322.0322,发现[M+H] +:323.0446,323.0432， 323·0404,323.0414;[2M+H] + :645·0730，645.0753，645·0719，645·0748;[M-H] -:321.0253， 321.0281，321.0252，321.0263;[2M-H] -:643.0661,643.0655,643.0586,643.0588。
[0177] 第二部分:ZJB以及ZJC系列化合物的制备
[0178] (实施例1)ZJB-1的制备
[0179]
[0180] 底物 1(酸）660mg，底物2(胺）450mg，HATU 850mg，DIEA0.4ml，DMF 40ml，室温下搅 拌24h。加入2倍量的饱和碳酸氢钠溶液，有固体析出，过滤，所得到的滤饼，硅胶柱层析，洗 脱剂 CHCl3/MeOH= 10:1，得到产物470mg。
[0181 ] LC-MS，计算（C3iH3〇ClF3N6〇4，M)为642 · 1969，发现[M+H] +: 643 · 2306，643 · 2292， 643.2275,643.2261；[2M+H] + ： 1285.4019,1285.3958,1285.3984,1285.4051〇 [0182](实施例2)ZJB_2的制备
[0183
[0184]底物 1(酸）780mg，底物2(胺）490mg，HATU 940mg，DIEA0.43ml，DMF 40ml，室温下搅 拌24h。加入2倍量的水，有固体析出，抽滤，滤饼用水洗涤，烘干后，用硅胶柱层析提纯，洗脱 剂(CHCl3/MeOH= 10:1)，得到产物430mg。
[0185] ^MflUSOOMHz.DMSO-dsMj.SKsJH)，9.28(s，lH)，8.41(s，lH)，8.04(d，J = 8.9Hz，2H)，7.85(s，lH),7.55-7.46(m，3H),7.32-7.23(m，2H)，7.15(s，lH)，6.38(s，lH)， 3.93(s,3H),3.91(s,3H),2.08-1.43(m,10H)ppm；
[0186] 13C匪R(125MHz，DMS〇-d6)S:174·3，157·3，155·1，154·5，153·6，149·7，147·5, 140.6,140.3,132.9,129.1,127.7(m),123.0,122.4,118.6,116.6,116.4,115.4,109.7， 107·8，102·8，59·7，57·0，56·7，32·5，25·8，21·8ppm;
[0187] LC-MS，计算（C31H3QCIF3N6O4，M)为642 · 1969，发现[M+H] +: 643 · 2387，643 · 2359， 643.2285,643.2206；[2M+H] + ： 1285.4045,1285.4023,1285.4052,1285.4011〇
[0188] (实施例3)ZJB_3的制备
[0189]
[0190] 底物 1(酸）720mg，底物2(胺）600mg，HATU l.lg，DIEA0.52ml，DMF 40ml，室温下搅 拌24h。加入2倍量的饱和碳酸氢钠水溶液，有固体析出，抽滤后得到滤饼。硅胶柱层析提纯， 洗脱剂(CHCl 3/Me0H=30:1~20:1)，得到产物800mg。
[0191] ^MMRUOOMHz，DMS〇-d6)S: 9.74(s，lH) ,8.61 (s，lH)，8.51(s，lH)，7.69((1, J = 8.9Hz，2H)，7.53(s，lH)，7.45-7.41(m，2H)，7.35(s，lH)，7.22(d，J=8.9Hz，2H)，7.06(dd，J = 8.9Hz ,J = 8.9Hz,2H) ,6.82(s , 1H), 3.96(s, 3H), 3.95(s , 3H), 1.43(s, 2H), 1.01 (s , 2H) ppm；
[0192] 13C匪R(125MHz,DMS0-d6)δ: 172.0,165.8,158.8,156.9,156.6,156.2,153.1, 150.9,149.7,148.7,137.4,137.2,122.9,122.4,120.3,120.2,116.1,115.9,110.6， 107.6，101.6,57.0,56.9,36.0,18.2ppm;
[0193] LC-MS，计算（C27H24FN5〇5，M)为517. 1761，发现[M+H] +:518.1870,518.2166， 518.1960,518.1828〇
[0194] (实施例4)ZJB_4的制备
[0195]
123 底物 1(酸）550mg，底物2(胺）450mg，HATU 860mg，DIEA0.4ml，DMF 30ml，室温下搅 拌24h。加入2倍量的饱和碳酸氢钠水溶液，有固体析出，抽滤后得到滤饼。硅胶柱层析提纯， 洗脱剂(CHCl 3/Me0H=30:1~20:1)，得到产物700mg。 2 1HNMR(300MHz,DMS0-d6)5：9.78(s,lH),8.60(s,lH),8.53(s,lH),7.65(s,lH), 7.58(d,J=7.9Hz,lH),7.52(s,lH),7.42-7.36(m,4H),7.07-6.98(m,3H),6.78(s,lH), 3.96(s,3H),3.95(s,3H),1.40(s,2H),0.99(s,2H)ppm； 3 13C匪R(125MHz,DMS0-d6)δ :172.3,165.6,158.8,156.9,156.6,156.1,153.2, 153.1.151.0. 149.7.141.0.137.4.130.3.120.2.117.9.117.8.116.1.115.9.114.6， 110.6.107.6.101.5.57.0. 56.9.36.1.18.4ppm；
[0199] LC-MS，计算（C27H24FN5〇5，M)为517. 1761，发现[Μ+Η] +:518.2178,518.2370， 518.2143,518.1875;[2M+H] +:1035.3590,1035.3661，1035.3635,1035.3602; 516.1667,516.1674,516.1682,516.1689;[M+Cl] -:552.1447,552.1454,552.1455， 552.1440;[M+HC00] -:562.1717,562.1721,562.1730,562.1743。
[0200] (实施例5)ZJB-5的制备
[0201]
[0202] 底物1(酸）690mg，底物2(胺）700mg，HATU 1.4g，DIEA0.6ml，DMF 50ml，继续室温下 搅拌过夜。加入2倍量的饱和碳酸氢钠溶液，有固体析出，加入乙酸乙酯萃取3次，合并有机 相，饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，减压除去有机溶剂，硅胶柱层析，洗脱剂(DCM/MeOH =40:1~20:1)，得到产物90〇11^。
[0203] 1HNMR(500MHz,DMS0-d6)5：9.81(s,lH),8.61(s,lH),8.60(d ,J = 5.5Hz,lH),7.80 (d,J = 9.0Hz,2H) ,7.60(s,lH) ,7.44-7.41(m,3H) ,7.26(d,J = 9.0Hz,2H) ,7.06(dd,J = 9.0Hz ,J = 9.0Hz,2H) ,6.81(s,lH),6.62(d,J = 6.0Hz,lH),3.97s,3H),3.96(s,3H),1.44-1.42(m,2H),1.02-1.01(m,2H)ppm；
[0204] 13C匪R(125MHz，DMS0-d6)δ :172.1,158.8,156.9,156.2,155.1,151.0,149.4, 147.0. 137.9.137.5.122.9.122.0.120.3.116.1.115.9.107.5.103.9.100·6,57·0,56·9， 36·1，18·2ppm;
[0205] 1^〇]\^，计算（〇281125卩~〇5，]\〇为516.1809，发现[]\1+!1] +:517.2198,517.2299， 517.2342,517.2318;[2M+H] +:1033.3718,1033.3683,1033.3690,1033.3691; 515.1739,515.1735,515.1729,515.1728;[M+Cl] -:551·1511，551·1504,551·1501， 551.1493；[M+HC00]-： 561.1788,561.1785,561.1787,561.1774；
[0206] (实施例6)ZJB_6的制备
[0207] 1234 底物1(酸）570mg，底物2(胺）500mg，HATU
960mg，DIEA0.42ml，DMF 50ml，室温下搅 拌过夜。加入2倍量的饱和碳酸氢钠溶液，有固体析出，过滤，滤饼烘干，硅胶柱层析，洗脱剂 (CHCl 3/Me0H=30:1~15:1)，得到产物760mg。 2 ^Μ?^δΟΟΜΗζ，DMS〇-d6)S: 9.57(s，lH) ,8.81 (s，lH)，8.50(s，lH)，7.67((1, J = 3 8.5Hz,2H),7.53(s,lH),7.38-7.36(m,2H),7.36(s,lH),7.19(d,J=9.0Hz,2H),7.04(dd,J 4 = 8.5Hz J = 8.5Hz,2H),6.27(s,lH),3.96(s,3H),3.95(s,3H),2.05-1.21(m,10H)ppm；
[0210] 13C匪R(125MHz，DMS0-d6)δ: 174.4,165.9,158.7,156.8,156.3,154.9,153.1， 150.9.149.6.148.4.137.8.137.5.122.9.121.9.119.8.119.7.116.2.116.0. 110.6, 107.6，101.5，59.5，56.9，56.8，32.6，25.8，21.9ppm;
[0211] 1^〇]\^，计算（〇3()113(^^〇5，]\〇为559.2231，发现[]\1+!1] +:560.2465,560.2581， 560.2542,560.2479;[M-H] -:558.2162，558.2153，558.2162，558.2160;[M+Cl] -:594.1925， 594.1921，594.1926，594.1925;[M+HC00] -: 604.2208，604.2205，604.2204，604.2209。
[0212](实施例7)ZJB-7的制备
[0213]
[0214] 底物 1(酸）810mg，底物2(胺）700mg，HATU 1.4g，DIEA0.6ml，DMF 50ml，室温下搅拌 过夜。加入2倍量的饱和碳酸氢钠溶液，有固体析出，过滤，滤饼烘干，硅胶柱层析，洗脱剂 (CHCl 3/Me0H=30:1~15:1)，得到产物560mg。
[0215] 1HNMR(300MHz,DMS0-d6)5：9.63(s,lH),8.82(s,lH),8.42(d ,J = 5.2Hz,lH),7.74 (d ,J = 7.5Hz,2H),7.49(s,lH),7.37(s,3H) ,7.19(d ,J = 7.7Hz,2H),7.05(dd ,J = 7.6Hz ,J = 7.6Hz,2H),6.41(d J = 5.2Hz,lH),6.27(s,lH),3.91(s,6H),2.06-1.21(m,10H)ppm；
[0216] 13C匪R(125MHz，DMS0-d6)δ :174.7,160.9,156.8,154.9,153.4,152.2,150.2, 149.8.147.3.137.9.137.5.122.5.122.0. 119.8.116.2.116.0.108.7.103.8.100.0.59.5， 56·6，32·6，25·8，21·8ppm;
[0217] LC-MS，计算（C3iH3iFN4〇5，M)为558.2278,发现[M+H] +:559.2690,559.2754， 559·2753,559·2738;[Μ-Η] -:557.2200，557·2201，557·2203，557·2198;[M+Cl] -:593.1970， 593.1965，593.1969，593.1964;[M+HC00] -: 603.2254，603.2246，603.2253，603.2245。
[0218](实施例8)ZJB-9的制备
[0219]
12 底物 1(酸）530mg，底物2(胺）430mg，HATU 840mg，DIEA0.6ml，DMF 40ml，室温下搅 拌过夜。加入乙酸乙酯以及饱和碳酸氢钠溶液，分出乙酸乙酯层，饱和氯化钠洗涤，无水硫 酸钠干燥，减压除去有机溶剂。硅胶柱层析，洗脱剂CHCl 3/Me0H = 40:1~20:1，得到产物 320mg〇 2 LC-MS，计算（C24H22FN5〇4，M)为 463.1656,发现[M+H] +:464.1806,464.2192， 464·2221，464·1873;[2Μ+Η] +:927·3401，927·3441，927·3485,927·3413;[Μ-Η] -:462.1581， 462.1568，462.1580，462.1584;[M+Cl]-:498.1359,498.1343,498.1353，498.1355;[M+ HC00] -:508.1635,508.1623,508.1635,508.1640。
[0222] (实施例9)ZJB_10的制备
[0223]
[0224] 底物 1(酸）710mg，底物2(胺）430mg，HATU 840mg，DIEA0.6ml，DMF 40ml，搅拌过夜。 加入乙酸乙酯以及饱和碳酸氢钠溶液，分出乙酸乙酯层，饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干 燥，减压除去有机溶剂。硅胶柱层析，洗脱剂CHCl 3/MeOH=40:1~20:1，得到产物200mg。
[0225] (实施例10)ZJB_11的制备
[0226]
[0227] 底物 1(酸）620mg，底物2(胺）430mg，HATU 840mg，DIEA 0.6ml，DMF 40ml，搅拌过 夜。加入乙酸乙酯以及饱和碳酸氢钠溶液，分出乙酸乙酯层，饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠 干燥，硅胶柱层析，洗脱剂CHCl 3/MeOH=40:1~10:1，得到产物300mg。
[0228] 1HNMR(300MHz,DMS0-d6)5：9.63(s,lH),8.81(s,lH),8.77(d ,J = 4.1Hz,lH),8.46 (d,J = 4.9Hz,lH) ,7.72(d,J = 7.8Hz,2H) ,7.39-7.01(m,8H) ,6.27(s,lH) ,2.76(d,J = 3.9Hz,3H),2.07-1.21(m,10H)ppm；
[0229] 13C匪R(125MHz，DMS0-d6)δ :174.7,166.7,164.6,158.7,156.8,154.9,153.3, 151.2,149.1,138.1,137.5,122.7,121.9,119.8,116.2,116.0,114.8,109.7,59.5,32.6, 26·8，25·8，21·8ppm;
[0230] LC-MS，计算（C27H28FN5〇4，M)为505.2125,发现[M+H] +:506.2383,506.2479， 506·2424,506·2205;[2M+H]+:1011.4341，1011.4397，1011.4364，1011.4305 504.2046,504.2059,504.2051，504.2055;[M+Cl] -:540.1819,540.1829,540.1824， 540.1827;[M+HC00] -:550.2096,550.2112,550.2099,550.2110。
[0231] (实施例11)ZJB-12的制备
[0232]
[0233] 底物 1(酸）530mg，底物2(胺）420mg，HATU
840mg，DIEA 0.6ml，DMF 40ml，搅拌过 夜。加入乙酸乙酯以及饱和碳酸氢钠溶液，分出乙酸乙酯层，饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠 干燥，减压除去有机溶剂。硅胶柱层析，洗脱剂CHCl 3/Me0H=40:1~20:1，得到产物150mg。
[0234] LC-MS，计算（C24H22FN5〇4，M)为 463.1656,发现[M+H] +:464.1832,464.2260， F 464·2263,464·1928;[2Μ+Η] +:927·3392,927·3381，927·3455,927·3464;[Μ-Η] -:462.1578， 462·1579，462·1581，462·1577;[M+Cl] -:498.1350,498.1349,498.1353，498·1350;[Μ+ HCOO] -:508.1629,508.1633,508.1635,508.1630。[0235] (实施例12)ZJC_1的制备
[0236]
[0237] 底物1(酸）760mg，底物2(胺）430mg，HATU 1.3g，DIEA 0.6ml，DMF 50ml，搅拌24h， 加入2倍量的饱和碳酸氢钠水溶液，有固体析出，室温放置一段时间，抽滤，硅胶柱层析提 纯，洗脱剂(CHCl 3/MeOH=30:1 ~20:1)，得到产物800mg。
[0238] 咕 Mffi(500MHz，DMS〇-d6)S :9.53(s，lH)，8.79(s，lH)，7.60((1, J = 8.5Hz，2H)， 7.59-7.24(m,2H) ,7.25(d,J = 9.0Hz,2H) ,7.03(dd,Ji = 9.0Hz,J2 = 9.0Hz,2H) ,6.24(s, lH),4.15(s,2H),3.93(t ,J = 6.0Hz,2H),3.65(t ,J = 6.0Hz,2H),2.03-1.21(m,10H)ppm；
[0239] 13C NMR(125MHz，DMS0-d6)S:174.7,166.7,158.7,156.8,154.8,138.6,137.5, 137.3,126.4,120.9,119.8,116.2,115.9,68.6,64.3,59.4,49.9,32.6,25.8,21.8ppm；
[0240] LC-MS，计算（C24H27FN4〇4，M)为454.2016,发现[M+H] +:455.2134,455.2132， 455·2120，455·2094;[2M+H]+:909·4203，909.4187，909·4135，909·4106;[M-H]-:453.1931， 453.1943，453.1947，453.1935;[M+Cl]-:489.1705,489.1713,489.1715，489.1709;[M+ HC00]-：499.1987,499.1995,499.1996,499.1990 〇
[0241] (实施例13)ZJC-2的制备 123456 I ￡. .一
、厂、 2 底物1(酸）450mg，底物2(胺）300mg，HATU 590mg，DIEA 0.3ml，DMF 50ml，搅拌24h。 加入2倍量的饱和碳酸氢钠水溶液和乙酸乙酯，分出乙酸乙酯层，水层用乙酸乙酯萃取，合 并有机相，饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，硅胶柱层析，洗脱剂（CHCl 3/MeOH= 20 :1~ 15:1 ~10:1)，得到产物 500mg。 3 1HNMR(500MHz,DMS0-d6)5：9.67(s,lH),8.59(s,lH),7.61(d,J=9.0Hz,2H),7.43-7.40(m,2H),7.29(d ,J = 8.5Hz,2H),7.05(dd ,Ji = 9.0Hz ,J2 = 9.0Hz,2H),6.79(s,1H),4.16 (s,2H),3.93(t ,J = 6.0Hz,2H), 3.67(t,J = 6.0Hz,2H), 1.42-0.98(m,4H)ppm； 4 13C匪R(125MHz，DMS0-d6)δ :172.0,166.7,156.9,156.1,154.8,137.8,137.4, 126.3,121.4,120.3,116.1,115.9,68.6,64.3,49.9,36.0,18.2ppm. 5 LC-MS，计算（C2iH2iFN4〇4，M)为412.1547,发现[M+H] +:413.1673,413.1670， 413·1647，413·1615;[2M+H] + :825 · 3209，825·3207，825·3176，825·3159;[M-H] -:411.1455， 411.1474,411.1466,411.1463；[M+Cl：447.1230,447.1245,447.1235,447.1229；[M+ HC00] -:457·1509,457.1530，457.1520,457.1517。 6 (实施例14)ZJC_3的制备
[0248]
[0249] 底物 1(酸）850mg，底物2(胺）400mg，HATU 1.2g，DIEA 0.7ml，DMF 50ml，搅拌24h。 加入2倍量的饱和碳酸氢钠水溶液和乙酸乙酯，分出乙酸乙酯层，水层用乙酸乙酯萃取，合 并有机相，饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，硅胶柱层析，洗脱剂（CHCl 3/MeOH= 30 :1~ 15:1~25:1)，得到产物660mg。
[0250] LC-MS，计算（C2iH2〇ClFN4〇4，M)为 446.1157,发现[Μ+Η] + :447· 1246,447· 1252， 447·1242，447·1241;[2Μ+Η]+:893·2399，893·2398,893·2393，893·2396;[M-H]-:445.1087， 445.1079，445.1080，445.1075;[M+C1] -:481.0848,481.0851，481.0852，481.0844;[M+ HC00] -:491.1138,491.1131,491.1134,491.1129。
[0251] (实施例15)ZJC-4的制备
[0252]
[0253] 底物 1(酸）lg，底物2(胺）400mg，HATU 1.2g，DIEA 0.7ml，DMF 50ml，搅拌24h。加入 2倍量的饱和碳酸氢钠水溶液和乙酸乙酯，分出乙酸乙酯层，水层用乙酸乙酯萃取，合并有 机相，饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，硅胶柱层析，洗脱剂(CHCl 3/Me0H=30:l)，得到产 物350mg。
[0254] LC-MS，计算（C22H2〇C1F3N4〇4，M)为 496.1125,发现[Μ+Η] + :497· 1213,497· 1207， 497·1200，497·1205;[2Μ+Η]+:993·2347，993·2333，993·2319，993·2342;[M-H]-:495.1041， 495·1078，495·1047，495·1044;[M+Cl]-:531.0815,531.0846,531.0818,531.0815;[M+ HC00] -:541·1098,541.1131，541·1099,541·1104。
[0255] 其他化合物的合成可以参照上述的制备方法，进行制备。
[0256] 第三部分:本发明产物的抗肿瘤活性研究
[0257] 体外抗肿瘤细胞活性:我们以化合物ZJB-3、ZJB-11以及ZJC-2为例，考察HepG2、 MGC803细胞经不同浓度梯度的药物处理48h后，通过MTT法检测药物对细胞生长的影响。按 照如下步骤进行：
[0258] (1)药物配制:药物取样20mg，加入2mL DMS0溶解得到母液浓度为10mg/mL，加药时 用培养基稀释药物至最大浓度为l〇〇yg/mL，随后5倍浓度梯度稀释至20yg/mL、4yg/mL、0.8y g/mL、0·16yg/mL〇
[0259] (2)细胞准备：培养HepG2和MGC803细胞至80~90 %满瓶，以5 X 104个/mL的细胞密 度接种6孔细胞培养板（2mL/we 11)，37 °C、5 % C02细胞培养箱培养4h换液，待细胞汇合度 80 %时开始铺板。
[0260] (3 )MTT实验:取对数生长期生长状态良好的MGC803、HepG2细胞，弃掉上层培养液， 用roS洗涤1次，弃去PBS，加入lml胰蛋白酶-EDTA静置消化1-3分钟，于显微镜下观察消化完 全后弃去胰酶，加入含10 %的胎牛血清的1640培养基终止消化，吹打收集细胞。1200rpm离 心5min后，计数，调节细胞密度为5 X 104个/mL，分别接种于96孔板上，每孔lOOyL，恒温箱中 于37°C，5%C02,饱和湿度过夜。24h后观察细胞是否贴壁良好，并小心使用移液器小心弃去 上清培养液，分别加入1 OyL新鲜完全培养基(含10 %胎牛血清的RPMI -1640培养基）的各药 物浓度的培养液各1 〇〇yL，每株细胞每浓度复孔4个，于37 °C，5 % C02的培养箱中继续培养。 48h后取出96孔板，每孔中避光加入5yg/mL的MTT溶液10uL，继续孵育4h，弃去培养液和药 液，加入二甲基亚砜100uL，于微量振荡器上水平缓慢震荡1分钟，待充分结晶沉淀后，酶联 检测仪检测波长为570nm处吸光度(0D)，记录数据，实验重复3次，按公式计算抑制率。存活 率=加药组0D/对照组0D。
[0261] MTT结果数据如表1、表2、表3所示，细胞的存活率曲线图如图1、图2、图3所示，ZJB-11 针对HepG2的 IC5Q = 22 · 52yg/mL;针对MGC803的 IC5Q = 26 · 19μg/ml; ZJC-2针对HepG2的 IC50 =6 · 66yg/mL;针对 MGC803 的 IC5Q = 37 · 75μg/ml。
[0262]表1ZJB-3作用于2株细胞的MTT结果数据
[0263]
[0264]
[0265]
[0266]
[0267]
[0268]
[0269] 第四部分:药物组合物的制备
[0270] 本发明中通式I的化合物可以单独使用，但通常是和药用载体混合物给与，所述药 用载体的选择要根据所需给药途径和标准药物实践，下面分别用该类化合物的各种药物剂 型来说明其在制药领域中的新应用。在此，我们列举了片剂、胶囊剂、注射剂、气雾剂、栓剂、 滴丸剂、膜剂的制备方法，尽管可以通过下面特定的实施方案描述了本发明，但是修改和更 新变化对于精通此领域的技术人员而言是显而易见的，但是它们都包含在本发明范围之 类。
[0271] (1)片剂
[0272] 用含有权利要求1中化合物（以实施例ZJB-11化合物为例）10g，按照药剂学一般压 片法加辅料20g混匀，压制成100片，每片重300mg，含有活性成分100mg。更具体地，可以按照 如下的处方付诸实践。 片剂 m_g/片 活性化合物 100.0 乳糖 77.5 「 " 聚维酮 15.0 交联羧甲基纤维素钠 12.0 微晶纤维素 92.5 硬脂酸镁 3.0 300. 0
[0274] (2)胶囊
[0275] 用含有权利要求1中化合物（以实施例ZJC-2化合物为例）10g，按照药剂学胶囊剂 的要求将辅料20g混匀后，装入空心胶囊，每个胶囊重300mg，含有活性成分100mg。更具体 地，可以按照如下的处方付诸实践。 胶囊 mg/胶囊 活性化合物 100.0 胶体二氧化硅 1.5
[0276] 乳糖 155.5 预胶凝化的淀粉 40,0 硬脂酸镁 3.0 300.0
[0277] (3)注射剂 1
[0278] 用含有权利要求1中化合物（以实施例ZJB-11化合物为例)20g，按照药剂学常规方 法，进行活性炭吸附，经0.65um微孔滤膜过滤后，填入氮气灌封制成水针制剂，每支装2ml， 共灌装1000瓶。更具体地，可以按照如下的处方付诸实践。 注射剂1' mg/ml 活性化合物 10.0 (补足后的最终浓度）
[0279] 氯化钠 4,0 O.lmol/L盐酸 适量 注射用水 适量》补足到2ml
[0280] (4)注射剂2
[0281]用含有权利要求1中化合物（以实施例ZJC-2化合物为例）20g，按照药剂学常规方 法，溶解于适量注射用水中，0.1m〇l/L盐酸调节pH到适当，进行活性炭吸附，用无菌抽滤漏 斗铺二层灭菌滤纸过滤，用经灭菌的G6垂熔玻璃漏斗精滤，滤液检查合格后，分装于2ml安 瓿，在无菌条件下低温冷冻干燥约26小时，并且在无菌条件下熔封，每支安瓿中含有20mg活 性成分。更具体地，可以按照如下的处方付诸实践。 注射剂2 mg/ml 活性化合物 1〇,〇 (补足后的最终浓度) 0.1mol/L盐酸 适量： 注射用水 适量，补足到2ml
[0283] (5)气雾剂
[0284] 用含有权利要求1中化合物（以实施例ZJB-3化合物为例）10g，按照药剂学常规方 法，加入适量潜溶剂溶解，如乙醇、聚乙二醇、丙二醇、甘油、油酸等，分装于耐压容器中，安 装阀门后压入抛射剂，如氟氯烷烃、碳氢化合物类，即得。更具体地，可以按照如下的处方付 诸实践。 气雾剂 _mg/罐
[0285] 活性化合物 3(10 油酸 适量 三氯一氟甲烷 5000.0
[0286] 二氯二氟甲烷 10000.0 二氯四氟乙烷 5000.0
[0287] (6)栓剂
[0288]用含有权利要求1中化合物（以实施例ZJB-4化合物为例）20g，与100g大豆卵磷脂 和1400g可可脂的混合物熔化，倒入模具中，然后冷却。每支栓剂含活性成分20mg。
[0289] (7)滴丸剂
[0290]用含有权利要求1中化合物（以实施例ZJB-5化合物为例）20g，与明胶等基质180g 加热恪化混匀后，趁热过滤置1C液瓶中。用管口内、外径分别为90mm、98mm的滴管滴制，滴速 80滴/min，滴入含43煤油的液体石蜡中冷凝成丸（外层为冰水浴冷却液），以液体石蜡洗丸 至无煤油味，用毛边纸吸去粘附的液体石蜡即得，共制得滴丸1000丸，每丸含有活性成分 20mg〇
[0291] (8)膜剂
[0292]用含有权利要求1中化合物（以实施例ZJB-7化合物为例)20g，将聚乙烯醇、药用甘 油、水等搅拌膨胀后加热过滤，80目筛网过滤，再将实施例12化合物加入到滤液中搅拌溶 解，涂膜机制膜1000片，每片含活性成分20mg。
【主权项】
1. 一种如通式I所示的化合物及其药学上可接受的盐、氮氧化物、溶剂化物以及包括其 各种比例混合物在内的立体异构体，其特征在于， B环为具有0-3个N、0-2个O和/或0-2个S原子的3-7元饱和碳环或杂环， Rb选自氢、卤素、硝基、氰基、NhA^RhSRhNHRhN(R1)L⑶RhSO2NHRhSO 2N(R1)L 30顺1?1、3(^(1?1)2、0)01?1、0)順1? 1、0^(1?1)2、-[(：(1?1)2] {；-厶心-[(：(1?1)2]{；-他七、-[(：(1? 1)2]{；-环烷 基、-OCORi、OCONHRi、0⑶N (Ri) 2、NRi ⑶A、NA⑶Ri、NRiCONHA、NACONHRi、NRi ⑶N (A) 2、NA⑶N (Ri) 2、NRi SO2A 或者 NASO2Ri， Ri 为H、A、CH = C-CH2-、A-C = C-CH2-、CH2 = C-CH2-、A-CH = C-CH2-、A-C (R2 )= C-CH2-、 (?(^、(!^!^、(!^(^^、-[?(!^!^-△^-[?(!^!^-^{、-[?(!^:^-环烷基， R2 为H、A， A为H、A2， A2为具有1-10个碳原子的支链或者非支链烷基，其中，0-4个CH2基团被0原子或S原子 和/或-CH=CH-基团替换，和/或0-7个H原子被卤素、羟基、氨基或下列基团替换，其中，M为具有1-6个碳原子的支链或者非支链烷基， Ar为苯基、萘基或联苯基，它们各自未取代或被以下基团单取代、二取代、三取代或四 取代：卤素、硝基、氰基、N3、A、OR1、SR1、NHR1、N (R1) 2、⑶R1、SO2NHR1、SO2N (R1) 2、SONHR1、SON (Ri) 2、COORi、CONHRi、CON (Ri) 2、-OCORi、OCONHRi、OCON (Ri) 2、NRiCOA、NACORi、NRiCONHA、 嫩03順1?1、冊1〇^以)2、嫩0^(1?1)2、冊15〇24或者嫩5〇21?1，各取代基之间相互独立， Het为具有1-4个N、0和/或S原子的单环或双环或三环、饱和或不饱和的、芳族或非芳族 杂环，其可被未取代或被以下基团单取代、二取代、三取代或四取代：卤素、硝基、氰基、N3、 A、0Ri、SRi、NHRi、N(Ri)2、C0Ri、SO2NHRi、S02N(Ri)2、SONHRi、SON(Ri) 2、C00Ri、C0NHRi JON (Ri) 2、-OCORi、OCONHRi、OCON (Ri) 2、NRiCOA、NACORi、NRiCONHA、NACONHRi、NRiCON (A) 2、NACON (R1) 2、NR1SO2A或者NASO2R1，各取代基之间相互独立， Xi 为(KSJR1， X2Slsjr1, X3 为(KSJRhCHRhC(R1)2, G 为-[C(Ri)2]：r， D为A、_[C(Ri)2] g-环烷基，- [C(Ri)2] g-Ar、_[C(Ri)2] g-He t， X 为-[(XRddnNRiCOECXRddn'-ECXRddnCONRdCXRddn'-ECXRddnCOECXRddn'-tC (R2)2]nCOO[C(R2)2]n， Y为Ar-二基、杂芳-二基、亚环烷基， 或者 L1F存在， T为具有1-4个N、和/或0-4个0、和/或0-4个S原子的单环、双环或三环、饱和或不饱和 的、芳族或非芳族杂环，其可未取代或被以下基团单取代、二取代：=〇、= S、=NRi、=N-CN、 =N-NO2、= N-OR1、= N-COR1、= N-COOR1、= N-OCOOR1，各取代基之间相互独立;且其可未取代 或被以下基团单取代、二取代、三取代或四取代：卤素、硝基、氰基、N^AJR 1 JR^NHRhN (Ri) 2、CORi、SO2NHRi、SO2N (Ri) 2、SONHRi、SON (Ri) 2、COORi、CONHRi、CON (Ri) 2、- [ C (Ri) 2 ] g-Ar、-[C (Ri) 2 ] g-He t、- [ C (Ri) 2 ] g_ 环烷基、-0 ⑶ Ri、OCONHRi、0C0N( Ri) 2、NRiCOA、NACORi、NRiCONHA、 嫩03順1?1、冊1〇^以)2、嫩0^(1?1)2、冊15〇24或者嫩5〇21?1，各取代基之间相互独立， m为0、1或2， η为0、1或2， j为0，1或2， g为〇，1或2， 卤素为氟、氯、溴、碘。2.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，通式I中的T-L1-片段包含片段1和片段2，其中，Zla为N，CR5，R5为氢、羟基、卤素、硝基、氰基、R 1、OR1、⑶ R1、COOR1、OCOOR1; ZlbSN， CR6, R6 为氢、卤素、硝基、氰基、N3 JjRhSR1 ^HRhN(R1)2XOR1 AO2NHR1 AO2N(R1)2AONHRh SON(R1) 2 JOOR1、⑶ NHR1 XONUd^^CXRDdg-Ar'-[(XROdg-Het'-ECXROdg-环烷基、-0 ⑶Ri、(XONHRi、(Χ0Ν (Ri) 2、NRiCOA、NA⑶Ri、NRi ⑶ NHA、NA⑶ NHRi、NRi ⑶N (A) 2、NA⑶N (Ri) 2、 NR1SO2A或者NASO2RhRhR4相互独立，各自选自氢、卤素、硝基、氰基、N 3 JJRhSRhNHRhN (Ri) 2、CORi、SO2NHRi、SO2N (Ri) 2、SONHRi、SON (Ri) 2、COORi、CONHRi、CON (Ri) 2、- [ C (Ri) 2 ] g-Ar、-[C (Ri) 2 ] g-He t、- [ C (Ri) 2 ] g_ 环烷基、-0 ⑶ Ri、OCONHRi、0C0N( Ri) 2、NRiCOA、NACORi、NRiCONHA、 嫩03順1?1、冊1(：(^(厶）2、嫩0^(1?1)2、冊15〇2厶或者嫩5〇21?1， 或者办、1?4、1?5、1?6两两之间形成饱和或不饱和的、芳族或非芳族碳环或杂环，其可被未取 代或进一步被以下基团单取代、二取代或三取代：卤素、硝基、氰基、N3 JJR^SRhNHRhN (Ri) 2、CORi、SO2NHRi、SO2N (Ri) 2、SONHRi、SON (Ri) 2、COORi、CONHRi、CON (Ri) 2、- [ C (Ri) 2 ] g-Ar、-[C (Ri) 2 ] g-He t、- [ C (Ri) 2 ] g_ 环烷基、-0 ⑶ Ri、OCONHRi、0C0N( Ri) 2、NRiCOA、NACORi、NRiCONHA、 嫩03順1?1、冊1〇^以)2、嫩0^(1?1)2、冊15〇24或者嫩5〇21?1，各取代基之间相互独立， E环为含有1-3个N、0-2个0和/或0-2个S原子的5-7元饱和或不饱和杂环，被以下基团单 取代、二取代：=〇、= S、= NRi、= N-CN、= N-NO2、= N-ORi、= N-CORi、= N-COORi、= N-OCOORi， 各取代基之间相互独立;且可以被办取代，R7选自氢、卤素、硝基、氰基、N3 JJR1JR1 (Ri) 2、CORi、SO2NHRi、SO2N (Ri) 2、SONHRi、SON (Ri) 2、COORi、CONHRi、CON (Ri) 2、- [ C (Ri) 2 ] g-Ar、-[C (Ri) 2 ] g-He t、- [ C (Ri) 2 ] g_ 环烷基、-0 ⑶ Ri、OCONHRi、0C0N( Ri) 2、NRiCOA、NACORi、NRiCONHA、 嫩03順1?1、冊1(：(^(厶）2、嫩0^(1?1)2、冊15〇2厶或者嫩5〇21?1， L2 为 NH、NR8、0、S，R8 为 ArECXROdg-An-ECXROdg-Het。3. 根据权利要求2所述的化合物，其特征在于，片段1包含下面的结构，L3 为NH、0、S， R9、Riq 相互独立，各自选自氢、Axoor1XONHR1、⑶ NUik-ECXRi Wg-Ah-ECXROdg-HeKCXROdg-环烷基;或R9、R1Q两两之间形成杂环，其可被未取代或进一步被以下基团单 取代、二取代或三取代:A、OR1、SR1、NHR1、N (R1) 2、COR1、SO2NHR1、SO2N (R1) 2、SONHR1、SON (R1) 2、 COOR1XONHR1'CONUOh-ECXRihL-Ah-ECXRDdg-Het'-ECXROdg-环烷基、-OCOR 1、 OCONHRi、0C0N (Ri) 2、NRiCOA、NACORi、NRiCONHA、NACONHRi、NRiCON (A) 2、NACON (Ri) 2、NRiSO2A 或 者NASO2R1，各取代基之间相互独立； Z2e^N，CRl3a，Rl3a为氢、硝基、氰基， Z2b 为N，CR13b，Ri3b 为氢、顺1?14(1?1)2、-[(：(1?1) 2]{；-厶匕-[(：(1?1)2]{；-!^1-[(：(1? 1)2]{；-环烷 基、NRiCOA、NACORi、NRiCONHA、NACONHRi、NRiCON (A) 2、NAC0N( Ri) 2、NRi SO2A 或者 NASO2Ri， Rii、Ri2相互独立，各自选自氢、卤素、硝基、氰基、NhA^RhSRhNHRhN(R1)2XORh S〇2NHRi、S〇2N(Ri)2、SONHRi、SON(Ri)2、ra〇Ri、CONHRi、CON(Ri)2、-[C(Ri)2] g_Ar、-[C(Ri)2]g-He t、- [ C (Ri) 2 ] g_ 环烷基、-OCORi、OCONHRi、0C0N (Ri) 2、NRiCOA、NACORi、NRiCONHA、NACONHRi、 NRiCON (A) 2、NACON (Ri) 2、NRi SO2A或者 NASO2Ri， 或Rn、Ri2之间形成饱和或不饱和的、芳族或非芳族碳环或杂环，其可被未取代或进一步 被以下基团单取代、二取代或三取代：卤素、硝基、氰基、N3 JjR1JR1 JHR1J(R1)2XOR^ S〇2NHRi、S〇2N(Ri)2、SONHRi、SON(Ri)2、ra〇Ri、CONHRi、CON(Ri)2、-[C(Ri)2] g_Ar、-[C(Ri)2]g-He t、- [ C (Ri) 2 ] g_ 环烷基、-OCORi、OCONHRi、0C0N (Ri) 2、NRiCOA、NACORi、NRiCONHA、NACONHRi、 NR1CON (A) 2、NACON (R1) 2、NR1SO2A或者 NASO2R1，各取代基之间相互独立。4. 根据权利要求2所述的化合物，其特征在于，片段2包含下面的结构，5. 根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，Y片段为Ar-二基.，其未取代或被以下基 团单取代或二取代：卤素、硝基、氰基、N 3 JJRhSR1 JHRhN(R1)2 JORhSO2NHRhSO2N(R1):^ SONHRi、SON (Ri) 2、⑶ORi、⑶ NHRi、CON (Ri) 2、-0⑶ Ri、0⑶ NHRi、0⑶ N (Ri) 2、NRi ⑶A、NA⑶ Ri、 NRiCONHA、NACONHRi、NRiCON (A) 2、NACON (Ri) 2、NRi SO2A或者NASO2Ri，各取代基之间相互独立。6. 根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，D为苯基、啦啶基、噻吩基、咲喃基、或咪 唑基，其未取代或被以下基团单取代、二取代或三取代：卤素、硝基、氰基、NhAjR^SRh NHRi、N(Ri)2、CORi、S〇2NHRi、S〇2N(Ri)2、SONHRi、SON(Ri)2、COORi、CONHRi、CON(Ri)2、_[C(Ri)2 ] g-Ar、- [ C ( Ri ) 2 ] g-He t、- [ C ( Ri ) 2 ] g_环烷基、-OCORi、OCONHRi、0⑶N ( Ri ) 2、NRi ⑶A、NA ⑶ Ri、 NRiCONHA、NACONHRi、NRiCON (A) 2、NACON (Ri) 2、NRi SO2A或者NASO2Ri，各取代基之间相互独立。7. 根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，X为-NHCO-，XANH，X2为0、NH，X3为NH。8.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，包含下列结构：9. 根据权利要求1所述的化合物，及其药学上可接受的盐、氮氧化物、水合物、溶剂化物 以及包括其各种比例混合物在内的立体异构体，其特征在于，按如下步骤进行制备的， 所述步骤包括：(1) 第一步:异氰酸酯类化合物与1-氨基环烷基甲酸酯类化合物生成脲-酯类化合物； (2) 第二步:脲-酯类化合物水解后生成脲-酸类化合物(片段A); (3) 第三步:脲-酸类化合物(片段A)与胺类化合物(片段B)在缩合剂的作用下生成目标 化合物。10. -种药物组合物，包含一种或多种权利要求1-8所述的化合物或其药学上可接受的 盐、溶剂化物或其异构体，以及药学上可接受的载体、稀释剂、赋形剂、辅剂、媒介物或它们 的组合。11. 根据权利要求10所述的药物组合物，其特征在于，药物组合物可以更进一步地包含 附加治疗剂，这些附加治疗剂选自：抗肿瘤药、抗增殖剂、抗病毒剂、抗炎剂、免疫调节剂、神 经因子、心血管疾病治疗剂、血管障碍治疗剂和免疫缺陷性障碍治疗剂。12. 根据权利要求11所述的药物组合物，其特征在于，其中所述的附加治疗剂是伊马替 尼、埃罗替尼、尼洛替尼、舒尼替尼、达沙替尼、拉帕替尼、索拉菲尼、硼替佐米、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、亚叶酸、雷帕霉素、塞替派、环磷酰胺、白消安、英丙舒凡、卡波醌、喜树碱、伊立替 康、托泊替康、紫杉醇、长春碱、长春新碱、替莫唑胺、苯丁酸氮芥、卡其霉素、达内霉素、阿克 拉霉素、放线菌素、安曲霉素、博来霉素、阿霉素、卡柔比星、柔红霉素、二甲叶酸、氟达拉滨、 卡普睾酮、他莫昔芬、雷洛昔芬、屈洛昔芬、氨鲁米特、福美坦、氟他胺、尼鲁米特、亮丙瑞林、 戈舍瑞林、贝伐单抗、阿伦单抗、安泊珠单抗、安塞珠单抗、西利珠单抗、达珠单抗，或它们的 组合。13. -种使用权利要求1所述的化合物来制备用于防护、处理、治疗或减轻患者疾病、病 症或病状的药物的用途，所述的疾病、病症或病状是癌症、瘤转移、病毒性病症、细菌感染病 症、血管生成性病症、自体免疫疾病、炎症性病症、与器官移植相关联的病状、心血管类疾病 或神经变性疾病。14. 一种使用权利要求10所述的药物组合物来制备用于防护、处理、治疗或减轻患者疾 病、病症或病状的药物的用途，所述的疾病、病症或病状是癌症、瘤转移、病毒性病症、血管 生成性病症、自体免疫疾病、炎症性病症、与器官移植相关联的病状、心血管类疾病或神经 变性疾病。15. 根据权利要求13所述的化合物在制备药物中的应用，其特征在于，所述的疾病、病 症或病状选自癌症、瘤转移、病毒性病症、细菌感染病症。16. 根据权利要求15所述的化合物在制备药物中的应用，其特征在于，所述的疾病、病 症或病状选自癌症、瘤转移。17. 根据权利要求16所述的化合物在制备药物中的应用，其特征在于，所述的癌症、瘤 转移选自胃癌、乳腺癌、甲状腺癌、肾癌、肝癌、卵巢癌、宫颈癌、肺癌、前列腺癌、睾丸癌、生 殖泌尿道癌、食道癌、喉癌、皮肤癌、角化棘皮癌、表皮样癌、大细胞癌、非小细胞癌、小细胞 癌、肺腺癌、骨癌、结肠癌、胰腺癌、腺癌、乳头状癌、黑素瘤、肉瘤、膀胱癌、胆管癌、口腔和咽 癌、唇癌、舌癌、嘴癌、小肠癌、结肠癌、大肠癌、直肠癌、脑和中枢神经系统癌、何杰金氏病或 白血病。18. 根据权利要求14所述的药物组合物在制备药物中的应用，其特征在于，所述的疾 病、病症或病状选自癌症、瘤转移。19. 根据权利要求18所述的药物组合物在制备药物中的应用，其特征在于，所述的癌 症、瘤转移选自胃癌、乳腺癌、甲状腺癌、肾癌、肝癌、卵巢癌、宫颈癌、肺癌、前列腺癌、睾丸 癌、生殖泌尿道癌、食道癌、喉癌、皮肤癌、角化棘皮癌、表皮样癌、大细胞癌、非小细胞癌、小 细胞癌、肺腺癌、骨癌、结肠癌、胰腺癌、腺癌、乳头状癌、黑素瘤、肉瘤、膀胱癌、胆管癌、口腔 和咽癌、唇癌、舌癌、嘴癌、小肠癌、结肠癌、大肠癌、直肠癌、脑和中枢神经系统癌、何杰金氏 病或白血病。
【文档编号】A61P25/14GK106008371SQ201610475847
【公开日】2016年10月12日
【申请日】2016年6月24日
【发明人】谢阳, 谢其光, 夏鸿林
【申请人】谢阳