专利名称：燕子掌美容和清除自由基功能的制作方法
燕子掌是景天科锁龙属的种名，其拉丁文学名为Crassula argentea详见日本国特许公报平-5-19554；中国专利号ZL95117499.1)燕子掌提取物(Crassula argentea extract，缩写为CAE)。本发明发现用新工艺提取的CAE具有美容和抗活性氧的功能。现阐述如下。
所谓活性氧不是指一般人类所需的氧气，而是对人体、动物体具有特殊作用的氧自由基(·O2)、羟自由基(·OH)、臭氧(O3)，基中臭氧在宇宙中形成臭氧层可起到保护人类免受过量紫外线的辐照，就·O2、·OH、O3等活性氧而言，导致人体、动物体蛋白质、核酸(基因)、脂肪细胞等的衰老、致病的罪魁祸首。
日常用于生物呼吸的氧分子用O2表示，体积占大气的五分之一，O2可在生物体内进行氧化反应，在生成水的过程中是一个0与2H结合被还原成水，氧夺得一个电子(·O2)叫氧自由基，夺得2个电子生成过氧化氢(H2O2)，夺得3个电子叫羟自由基(·OH)，夺得4个电子的最终生成惰性水(H2O)，从一个电子到三个电子还原状态的O2是称之为活性氧的代谢产物，极富反应性，给予生物体的蛋白，核酸(基因)、脂肪等进行氧化造成细胞损伤，通常认为原子核外围有2个电子是处于稳态，将其称为电子对，相反未成对的孤电子称为未成对电子，含有未成对电子的原子和分子反应性极强，把它称为游离基或自由基。众所周知，生物呼吸离不开氧气。
众所周知，生物呼吸离不开氧气，将活性氧转变成无害的酶或低分子化合物来增强免疫系统，同时活性氧会破坏免疫系统，乃至冲过免疫系统造成对细胞的损伤，产生免疫系统异常，例如干癣、硬皮症、红斑狼疮等自身免疫疾病。上述疾病不仅仅是生物呼吸和代谢过程，而且是由于吸烟、紫外线和放射线的辐照产生的。因为活性氧造成的机体损伤而引起的典型疾病，例如心机梗塞、心律不齐、胃溃疡、动脉硬化、再生性障碍贫血、癌、感染症、脑血栓、溃疡性肠炎、肝炎、糖尿病、肾炎、放射性灼伤、日光皮炎、过敏性皮炎、关节炎、胶原病、干癣、硬皮病、红斑狼疮等其它自己免疫疾病。白内障、幼儿视网膜症、老年黄斑变性、化疗或放疗的副作用、吸烟和手术感染引起的疾病等等。
由活性氧和自由基引起的创伤，作为生物防御体系，已知将活性氧转变无害的酶和非酶的活性氧和自由基的低分子化合物，将这种物质称之为活性氧或自由基消除剂(俗称生物抗氧剂)。作为酶的生物抗氧剂有超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶、过氧化物酶、谷胱甘肽过氧化物酶、谷胱甘肽-S-转移酶等，作为非酶的低分子生物抗氧剂有维生素C、维生素E、半胱氨酸、谷胱甘肽、胆红素、茶多酚、叶黄素、玉米黄素、类胡萝卜素、β-胡萝卜素等等。本发明主要用非酶的燕子掌提取物作为高效生物抗氧剂或称高效活性氧消除剂。进而制成医药品、保健食品、饮品、外用的化妆品等等。现将燕子掌提取新工艺及其提取的高效生物抗氧剂的相关试验综述如下1.燕子掌的提取新工艺老的提取工艺往往是醇沉淀，水提取，这样往往会丢掉有效组分，现将新的提取方法综述如下1.1 实施例1燕子掌乙醇提取工艺在索氏提取器中可加入新鲜燕子掌50g，加入100ml 85％的乙醇，在80-90℃水浴中回流2h，索氏提取器滤纸包中残渣A留作实施例3用。将醇提液减至浓缩成粘稠状，在50℃真空干燥器中烘干，得1.25g原粉，简称CAE原粉(主要含景天酸)，收率2.5％。(见附
图1)1.2 实施例2燕子掌70％乙醇提取工艺取新鲜燕子掌叶100kg洗净，捣碎加入70％乙醇50升，再捣碎浸泡过夜。过滤，在残渣中加入25升70％乙醇，浸泡过夜，过滤，合并滤液，残渣B留作实施例4用。减压浓缩，回收乙醇，50℃真空干燥，除去水分，得2.0kg粉碎过80目筛，收率2％。(见附图2)2.CAE的美容与消除自由基功能试验2.1 CAE2(水性)美容功能本发明美容原理是CAE(水性)激活胶原蛋白中的羟脯氨酸生成，胶原蛋白中的主要成分是羟脯氨酸，因此皮肤中富含羟脯氨酸即富含胶原蛋白，而胶原蛋白乃皮肤细嫩润滑的基础。
CAE2水性溶液可促进皮肤中的胶原蛋白增加，可以用测定胶原蛋白中的羟脯氨酸来衡量皮肤的衰老程度。
哺乳动物与人类一样从少年成长为青年时皮肤中胶原蛋白逐渐增加，过了青春期后，胶原蛋白中的羟脯氨酸逐渐下降，羟脯氨酸约占胶原蛋白的12％-14％，其他组织中几乎不含羟脯氨酸，胶原蛋白最大的特征是稳定且使羟脯氨酸含量升高，因此，从皮肤中测定羟脯氨酸含量是皮肤衰老的重要标志之一。
2.2 实施例3在索氏提取中加入残渣A，用100ml无离子水回流提取至无色，约4h，减压浓缩至干粉，粉碎，过80目筛，简称CAE2(主要含皂甙、多糖)见附图3。
2.2.1 实验动物昆明种小鼠，体重28-30g，雌雄各半2.2.2 仪器752UV可见紫外光谱2.2.3 试剂羟脯氨酸、氯胺一T、高氯酸、柠檬酸缓冲液。
2.2.4 操作脱毛后，每天在脱毛处涂抹CAE水溶液，浓度为5％。
2.2.5 实验结果将实验结果用每1mg干燥皮肤中所含羟脯氨酸的浓度来表示，如表2.2.1所示。表2.2.1是全部10只小鼠的测定的全部平均值。
表2.2.1 各组干燥皮肤中羟脯氨酸的含量
**P＜0.01与阳性对照组比较注(1)空白对照组是正常组(2)阴性对照组只含实验组的饲料，不含CAE(3)阳性对照组按现在中国评审标准2.3 CAE1与CAE2消除自由基功能试验2.3.1 体外(试管中)消除自由基试验。
实施例4在浓度为30mg/mlDPPH(1，1-二苯基-2-苦基肼自由基)0.5mM浓度的乙醇溶液2.25ml，100mM tris缓冲液(PH＝7.4)2.25ml，试管中然后分别加入CAE1与CAE2乙醇溶液10-300μl，在暗处反应30分钟，在517mM吸光度均达到极大吸收消失时，求出CAE1与CAE2的添加量，其添加量均为2200μg。作为阳性对照组，在维生素C、胱氨酸水溶液，维生素E乙醇溶液测定消除的活性，分别是80μg、120μg、200μg。
2.3.2 在动物体内消除自由基试验实施例5对四氯化碳损坏肝的预防作用。CAE1与CAE2原粉经口服被吸收状态时，为了证明发现了CAE1与CAE2在生物体内的抗氧化作用，探讨CAE1与CAE2对四氯化碳损坏的预防效果。
用5周龄的ICR小白鼠50只，雌雄各半驯养1周后，在粉末饲料中加入CAE1与CAE2原粉制成混合饲料，自由摄取，经3日后，用花生油将1μl四氯化碳稀释至0.2ml灌胃(1μl/ml)24小时后采血，测定血浆的GOT、GPT，将CAE1与CAE2原粉试验组与阳性对照组比较P值，其P值＜0.05以下者为显著效果，试验结果如表2.3.3所示。
表2.3.3 CAE1与CAE2对CCl4损坏肝的预防效果 *P＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001与阳性对照组比较。
3.CAE原粉的分离与检验实施例6将100g鲜燕子掌烤干，失水96％，得干重燕子掌4g，将干燕子掌用滤纸包好置于索氏提取器中，加入100ml 80％乙醇回流2h减压浓缩回收乙醇，烘干得CAE，(主要含景天酸)0.84g(见附图2)。将滤纸包置于索氏提取器中加入(30-60°)石油醚回流4h，减压回流石油醚得脂肪0.16g(4％)，然后将滤纸包中残渣仍留在索氏提取器中加入100ml无离子水回流至索氏提取器中 水溶液无色为止，水溶液用正丁醇萃取，减压回收正丁醇得总皂甙0.176g(4.4％)；将水层测定燕子掌多糖0.924g(23.1％)。(见附图4)。
3.1 干燕子掌粉试验成分表 4.结论4.1 CAE1与CAE2中富含景天酸、皂甙、多糖中可能提供充足的H°给予体，俘获造成细胞衰老与病变的OH(羟自由基)、O(氧自由基)，使逐渐恢复青春活力并延缓衰老；4.2 CAE2水溶液促进胶原蛋白中羟脯氨酸快速增长，达到美容效果；CAE1与CAE2醇溶液作为高效消除自由基的制剂，远远超过维生素E、胱氨酸、维生素C的抗氧化能力，内服用量10mg-100mg/人/日，外用时通常用量为0.01％-10％。
4.3 CAE1与CAE2具有超强的消除自由基、保肝与解毒功能。
5.举实施例说明保健食品、化妆品的调制以重量百分表示总量以100计。
实施例7化妆品乳液的配制(1)聚环氧乙烷(10)+烷氧基磷酸钠(4.5)；(2)聚环氧乙烷(3)+烷基醚(2.0)；(3)十六烷醇(2.0)；(4)亲油型硬脂酸甘油酯(2.0)；(5)三十碳烷(5.0)；(6)流动石腊油(10)；(7)1，2-丁二醇(5.0)；(8)乙醇(5.0)；(9)对羟苯甲酸甲酯(0.2)；(10)对羟苯甲酸丙酯(0.1)；(11)CAE1(0.1)；(12)体积不够用纯净水补足到100。
配制方法将成分(1)-(7)和(10)、(11)在80℃加热混合，加热到相同温度时加入；(13)进行乳化，冷却至40℃，在(11)中加入(8)边搅边溶解，冷至室温配成乳液。
实施例8化妆水配制(1)聚环氧乙烷(60)；(2)篦麻油(0.8)；(3)甘油(3)；
(4)一缩二丙二醇(CH3CHOHCH2)2O(2.0)；(5)乙醇(5.0)；(6)对羟苯甲酸甲酯(0.2)；(7)CAE2(0.1)；(8)氮酮(1.0)；(9)用纯净水加至100。
配制方法将(1)-(8)混合溶解成化妆水。
实施例9片剂的配制(1)CAE1与CAE2(12.5)；(2)淀粉(12.5)；(3)羟甲基纤维素(75)。
配制方法按(1)、(2)、(3)比例混合均匀、制粒后压片成每粒240mg最后从包膜成最终产品。
权利要求
1.本发明发现燕子掌提取物(CAE)，作为有效组分，在人与动物体内促进羟脯氨酸快速生长发挥消除活性氧的用途；
2.在权利要求1中所述，可制造含有CAE促进皮下胶原蛋白的增长与活性氧消除剂的医药品、保健食品、化妆品、饮料等产品；
3.在权利要求1所述，可制造含有CAE作为美容和活性氧消除剂的饮品、保健食品、医药品、食品等产品，内服剂量10mg-1000mg/人/日，外用剂量为0.01-10％。
全文摘要
本发明发现燕子掌提取物(CAE)具有美容与消除人类和动物体内活性氧(自由基)特殊用途，为防止人与动物受自由基的困扰和伤害，CAE提供一种优异的促进羟脯氨酸生长与自由基消除剂，同时为制造医药品、保健食品、饮品甚至外用化妆品提供了一个广阔的用途，内服时10mg－1000mg/人/日，外用时通常为0.01％－10％。
文档编号A61K31/715GK1611225SQ20031010165
公开日2005年5月4日 申请日期2003年10月28日 优先权日2003年10月28日
发明者丁鑑 申请人:丁鑑