专利名称：一种含活性成分阿德福韦或其盐的经注射给药的制剂及其制备方法
技术领域：
本发明属于药物制剂领域，更具体地说是涉及一种含活性成分阿德福韦或其盐的经注射给药的制剂及其制备方法。
背景技术：
阿德福韦[英文名Adefovir，9-(2-phosphonylmethoxyethyl)adenine，简称PMEA]是一种新的核苷类抗病毒药物，化学名9-[2-磷酰甲氧基乙基]腺嘌呤。分子式为C8H12N5O4P，分子量为273.19，具有下述化学结构。
乙型肝炎是由乙型肝炎病毒(HBV)引起的，在我国约有1.2亿人是乙肝病毒携带者，现患乙肝2800万，有较大一部分人会演变成慢性肝炎、肝硬化或肝癌，严重危害着人类健康的疾病，因此开发抗乙肝病毒的药物具有极其重大的意义。阿德福韦是一类新的核苷类抗病毒药物，化合物专利为Czech Academy of Sciences的EP 0206459[1986.12.30]和JP 1986275289[1986.12.5]及其等同专利。阿德福韦可以作为DNA合成所需的核苷酸dATP的替代底物，通过竞争病毒多聚酶而进入合成中的DNA，由于阿德福韦并无3’羟基，其后的核苷酸不再能够连接，迫使病毒DNA链的合成终止。在体内外试验表明具有抗肝DNA病毒、逆转录病毒和疱疹病毒的广谱抗病毒活性。
由于阿德福韦的磷酸基带负电荷，口服后在肠内吸收不佳。Bristol-Myers SquibbCo.与Gilead Sciences Inc.研制了阿德福韦的前药—阿德福韦特戊酰二酯，口服后迅速被酯酶水解释放出游离的阿德福韦进入门静脉和全身循环，提高了阿德福韦的生物利用度。阿德福韦酯是专门为口服设计的前药，即使提高了生物利用度后，生物体也只能利用40％以下[Kenneth C.Cundy，Journal of Pharmaceutical Sciences86(12)1334-1338，1997；Antimicrobial Agents and Chemotherapy，Ort，2001.p.2740-2745]。在乙肝的治疗中，当病毒急性发作时，口服给药往往不能满足要求，临床上一般采用静脉给药来控制治疗。
发明内容
本发明的目的是在克服上述现有技术的缺点和不足，提供一种生物利用度高及满足临床急性治疗要求的含活性成分阿德福韦或其盐的经注射给药的制剂及其制备方法。
本发明是通过下列方式实现的一种含活性成分阿德福韦或其盐的经注射给药的制剂，其特征在于由活性成分阿德福韦或其盐和药用辅料组成。
阿德福韦的盐为药用上可接受的有机盐及无机盐。有机盐是氨基酸盐、葡甲胺盐、甲磺酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、乙酸盐、马来酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、胆酸盐、脱氧胆酸盐，优选氨基酸盐、葡甲胺盐、柠檬酸盐、富马酸盐；无机盐是钠、钾、镁、锌、铝等金属离子盐以及盐酸、硫酸、磷酸、硝酸等无机酸盐，优选钠盐、钾盐、盐酸盐、硫酸盐。药用辅料为甘露醇、低分子右旋糖苷、山梨醇、聚乙二醇、吐温、葡萄糖、乳糖、半乳糖、氯化钠、EDTA-2Na、硫代硫酸钠、焦亚硫酸钠、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、碳酸氢钠、碳酸钠的一种或几种的组合。本发明的经注射给药的制剂包括阿德福韦或其盐，所述的经注射给药的制剂包括a.冻干剂中药物成分与药用辅料的重量百分比为0.1-50％，优选1-20％，最优选3-10％；b.小针注射液中药物的浓度为20mg/ml-0.5mg/ml，优选5mg/ml；c.小输液中药物的浓度为1mg/ml-0.02mg/ml，优选0.2mg/ml。其中阿德福韦或其盐的小输液是指活性成分与氯化钠、葡萄糖或低分子右旋糖苷的一种或几种组成的复方注射液。
用于本发明的经注射给药的阿德福韦或其盐与药用辅料是按以下配比选择制成100％的组成(1)冻干剂阿德福韦或其盐0.1-50％药用辅料 50-99.9％(2)小针注射液阿德福韦或其盐 0.05-2.0％药用辅料 0.2-20％注射用水 80.0-99.8％(3)小输液阿德福韦或其盐 0.002-0.1％药用辅料 0.2-20％注射用水 80.0-99.8％不同的经注射给药制剂的制备方法包括下列步骤(1)冻干剂取阿德福韦或其盐和药用辅料，加入注射用水适量，调节PH值至4-9使其溶解，加水至刻度，加入0.1-0.5％活性炭，在20-50℃下搅拌10-60分钟，脱碳，采用微孔滤膜过滤除菌，滤液进行分装，采用冷冻干燥法，制得白色疏松块状物，封口即的。
(2)小针注射液取阿德福韦或其盐和药用辅料，加入注射用水适量，调节PH值至4-9使其溶解，加水至刻度，加入0.1-0.5％活性炭，在20-50℃下搅拌10-60分钟，脱碳，精滤、灌封、灭菌。
(3)小输液取阿德福韦或其盐和药用辅料，加入注射用水适量约20％，调节PH值至4-9使其溶解，加入0.1-0.5％活性炭，在20-50℃下搅拌10-60分钟，脱碳，加水至刻度，精滤、灌封、灭菌。
本发明对阿德福韦酯口服和阿德福韦注射剂在大鼠体内的生物利用度也进行了比较。
方法如下标准曲线于0.95ml空白大鼠血清中加入不同浓度的PMEA对照品溶液50μl，得到PEMA终浓度为0，20，50，100，200，500和1000ng/ml的标准血清样品，复管操作，加等体积的10％三氯乙酸同上法沉淀蛋白后，取上清液50μl进样测定HPLC紫外吸收，色谱条件同上。
Wister大鼠9只随机分为3组，每组3只，禁食16小时后，一组灌胃阿德福韦酯样品，折合阿德福韦30mg/kg，体积为1ml/100g体重，另2组静脉注射阿德福韦注射剂30mg/kg，体重，于给药后1、5、10、20、30、45分钟及1、1.5、2、4、6、8小时取血300μl，室温放置待血凝后，以10000rpm离心分离血清，加入等体积的10％三氯乙酸，充分振摇后，沉淀蛋白30分钟以上，以10000rpm离心2分钟，分离沉淀，取上清液50μl进样。计算不同时间下的血药浓度，AUC0-t，以梯形法计算。
表1不同样品的吸收程度(AUC)结果。
样品 给药方式AUC(h.ng/ml) 相对比例阿德福韦酯 口服 224282.4 1.00实施例7 静注 615686.5 2.75实施例11静注 644212.3 2.87结果表明，实施例7和11得到的阿德福韦注射剂样品的生物利用度与阿德福韦酯比较明显高于口服阿德福韦酯本身，参见附图1。其中AD-po阿德福韦酯口服的血药浓度时间曲线。AD-IV-1实施例7的阿德福韦冻干剂的血药浓度时间曲线。AD-IV-2实施例11阿德福韦注射液的血药浓度时间曲线。
图1大鼠体内血药浓度时间曲线图。
具体实施例方式
下面结合实施例对本发明做进一步的说明，实施例仅为解释性的说明，决不意味着它以任何方式限制本发明的范围。
实施例1取阿德福韦2.73g，加入乙醇50ml，再加谷氨酸1.47g，加热搅拌使完全溶解，过滤，回收溶剂，浓缩至约30ml，加入10ml水，放冷，在0℃下析晶，收集，干燥，得阿德福韦谷氨酸盐。
实施例2取阿德福韦2.73g，加入乙醇25ml和25ml水，再加精氨酸1.74g，加热搅拌使完全溶解，过滤，回收溶剂，浓缩至约30ml，放冷，在0℃下析晶，收集，干燥，得阿德福韦精氨酸盐。
实施例3
取阿德福韦2.73g，加入水30ml，再加浓盐酸3ml，加热搅拌使完全溶解，过滤，加入乙醇20ml，放冷，在0℃下析晶，收集，干燥，得阿德福韦盐酸盐。
实施例4取阿德福韦2.73g，加入乙醇25ml和25ml水，再加氢氧化钠0.8g，加热搅拌使完全溶解，过滤，加乙醇25ml，放冷，在0℃下析晶，收集，干燥，得阿德福韦钠盐。
实施例5取阿德福韦1g，置于容器中，加注射用水80ml，加氢氧化钠0.2g，搅拌使溶解，以1mol/L的枸橼酸调节PH至8.0-7.5，加入甘露醇18g、乳糖2g，搅拌使溶解，补加水至100ml，加入0.5g活性碳，在50℃下搅拌20分钟，脱碳，采用微孔滤膜过滤除菌，滤液按每支1ml进行分装，预冻2小时后，冷冻下减压干燥12小时，至样品温度到室温后，再干燥5小时，制得白色疏松块状物，封口即得阿德福韦冻干粉针。
实施例6取阿德福韦盐酸盐(相当于阿德福韦1g)，置于容器中，加注射用水180ml，搅拌使溶解，以1mol/L的盐酸或氢氧化钠调节PH至4.0-4.5，加入甘露醇10g、山梨醇5g，搅拌使溶解，补加水至200ml，加入0.5g活性碳，在30℃下搅拌30分钟，脱碳，采用微孔滤膜过滤除菌，滤液按每支2ml进行分装，预冻2小时后，冷冻下减压干燥18小时，至样品温度到室温后，再干燥5小时，制得白色疏松块状物，封口即得阿德福韦冻干粉针。
实施例7取阿德福韦精氨酸盐适量(相当于阿德福韦1g)，置于容器中，加注射用水180ml，搅拌使溶解，以1mol/L的盐酸或氢氧化钠调节PH至7.0-7.5，加入甘露醇5g、乳糖20g，搅拌使溶解，补加水至200ml，加入0.5g活性碳，在20℃下搅拌40分钟，脱碳，采用微孔滤膜过滤除菌，滤液按每支2ml进行分装，预冻2小时后，冷冻下减压干燥15小时，至样品温度到室温后，再干燥5小时，制得白色疏松块状物，封口即得阿德福韦冻干粉针。
实施例8取阿德福韦柠檬酸盐适量(相当于阿德福韦1g)，加入到已溶解10g磷酸氢二钠的注射用水440ml中，加入2g硫代硫酸钠搅拌溶解，加入碳酸氢钠调节PH为5.5-6.5，加入5g活性炭，室温搅拌吸附30分钟，除炭，补加水至500ml，精滤、以每支5ml灌封、灭菌，即得阿德福韦注射液。
实施例9取阿德福韦精氨酸盐适量(相当于阿德福韦1g)，加入到已溶解10g磷酸氢二钠的注射用水440ml中，加入1g EDTA-2Na搅拌溶解，加入碳酸氢钠调节PH为7.5-8.0，补加水至500ml，加入5g活性炭，室温搅拌吸附30分钟，除炭，精滤，以每支5ml灌封、灭菌，即得阿德福韦注射液。
实施例10取阿德福韦1g，加入注射用水180ml中，搅拌下加浓盐酸使溶解，加入4g L-半胱氨酸、3g硫代硫酸钠搅拌溶解，调节PH为4.0-5.0，补加注射用水至200ml，加入2g活性炭，搅拌吸附30分钟，除炭、精滤、以每支2ml灌封、灭菌，即得阿德福韦注射液。
实施例11取阿德福韦1g，加入注射用水180ml中，加0.5克NaOH搅拌使溶解，加入10g磷酸氢二钠，搅拌溶解，调节PH为7.0-8.0，补加注射用水至200ml，加入2g活性炭，搅拌吸附30分钟，除炭、精滤、以每支2ml灌封、灭菌，即得阿德福韦注射液。
实施例12取阿德福韦钠适量(相当于阿德福韦1g)，加入15g磷酸氢二钠和90g氯化钠，再加注射用水2000ml，搅拌使溶解，调节PH为7.5，加入10g活性炭，搅拌吸附30分钟，除炭，补加水至10000ml，精滤、灌封每瓶100ml，灭菌，即得阿德福韦氯化钠注射液。
实施例13取阿德福韦盐酸盐适量(相当于阿德福韦1g)，加入15g磷酸二氢钠和1000g葡萄糖，15g焦亚硫酸钠，再加注射用水2000ml，搅拌使溶解，调节PH为5.0，加入10g活性炭，搅拌吸附30分钟，除炭，补加水至10000ml，精滤、灌封每瓶100ml，灭菌，即得阿德福韦葡萄糖注射液。
实施例14取阿德福韦1g，加入精氨酸2克，注射用水2000ml，搅拌使溶解，再加入15g磷酸氢二钠和500g低分子右旋糖苷，15g EDTA-2Na，搅拌使溶解，调节PH为7.0，加入10g活性炭，搅拌吸附30分钟，除炭，补加水至5000ml，精滤、灌封每瓶50ml，灭菌，即得阿德福韦低分子右旋糖苷注射液。
权利要求
1.一种含活性成分阿德福韦或其盐的经注射给药的制剂，其特征在于由活性成分阿德福韦或其盐和药用辅料组成。
2.如权利要求1所述的经注射给药的制剂，其特征在于所述的阿德福韦盐为药用上可接受的有机盐及无机盐。
3.如权利要求2所述的经注射给药的制剂，其特征在于所述的阿德福韦的有机盐是氨基酸盐、葡甲胺盐、甲磺酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、乙酸盐、马来酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、胆酸盐、脱氧胆酸盐；无机盐是钠、钾、镁、锌、铝等金属离子盐以及盐酸、硫酸、磷酸、硝酸等无机酸盐。
4.如权利要求1所述的经注射给药的制剂，其特征在于所述的制剂是a.冻干剂中药物成分与药用辅料的重量百分比为0.1-50％；b.小针注射液中药物的浓度为20mg/ml-0.5mg/ml；c.小输液中药物的浓度为1mg/ml-0.02mg/ml。
5.如权利要求4所述的经注射给药的制剂，其特征在于所述的小输液是指活性成分与氯化钠、葡萄糖或低分子右旋糖苷的一种或几种组成的复方注射液。
6.根据权利要求1所述的经注射给药的制剂，其特征在于药用辅料是甘露醇、低分子右旋糖苷、山梨醇、聚乙二醇、吐温、葡萄糖、乳糖、半乳糖、氯化钠、EDTA-2Na、硫代硫酸钠、焦亚硫酸钠、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、碳酸氢钠、碳酸钠的一种或几种的组合。
7.一种含活性成分阿德福韦或其盐的经注射给药的制剂的制备方法，其特征在于该方法包括下列步骤I、组成(1)冻干剂阿德福韦或其盐0.1-50％药用辅料 50-99.9％(2)小针注射液阿德福韦或其盐2.0％-0.05％药用辅料 0.2-20％注射用水 80.0-99.8％(3)小输液阿德福韦或其盐0.1％-0.002％药用辅料 0.2-20％注射用水 80.0-99.8％II.不同的经注射给药制剂的制备方法包括下列步骤(1)冻干剂取阿德福韦或其盐和药用辅料，加入注射用水适量，调节PH值至4-9使其溶解，加水至刻度，加入0.1-0.5％活性炭，在20-50℃下搅拌10-60分钟，脱碳，采用微孔滤膜过滤除菌，滤液进行分装，采用冷冻干燥法，制得白色疏松块状物，封口即的。(2)小针注射液取阿德福韦或其盐和药用辅料，加入注射用水适量，调节PH值至4-9使其溶解，加水至刻度，加入0.1-0.5％活性炭，在20-50℃下搅拌10-60分钟，脱碳，精滤、灌封、灭菌。(3)小输液取阿德福韦或其盐和药用辅料，加入注射用水适量约20％，调节PH值至4-9使其溶解，加入0.1-0.5％活性炭，在20-50℃下搅拌10-60分钟，脱碳，加水至刻度，精滤、灌封、灭菌。
全文摘要
本发明涉及一种含活性成分阿德福韦或其盐的经注射给药的制剂及其制备方法。其特征在于由活性成分阿德福韦或其盐和药用辅料组成，其中活性成分阿德福韦或其盐的重量百分比为0.002－50％，余量为药用辅料或水。本发明同时还公开了冻干剂、小针注射液和小输液的制备方法。本发明制备的含活性成分阿德福韦或其盐的经注射给药的制剂稳定性好、生物利用度高，解决了阿德福韦酯口服给药在治疗病毒急性发作中的不足。
文档编号A61K9/08GK1623552SQ20031010720
公开日2005年6月8日 申请日期2003年12月5日 优先权日2003年12月5日
发明者徐为人, 任晓文, 马晋, 张士俊, 林巳茏, 连潇嫣, 李洪起, 王平保, 王玉丽, 黄莹, 刘跃鹏 申请人:天津药物研究院