专利名称：一种纳米尺寸(雷帕霉素/壳聚糖)的制造方法
技术领域：
本发明涉及一种纳米尺寸(雷帕霉素/壳聚糖)包载缓释体的制造方法，属创新药物领域。
背景技术：
壳聚糖是天然甲壳质的衍生物，纳米化产物更具优异的生物医学特性，还具抗器官移植排异功能，且资源十分丰富。雷帕霉素是防止器官移植排异的最优秀药物，美国(FDA)1999年首个批准，2000年再批准纳米雷帕霉素结晶。该药的疗效、毒副作用等，均大大优于此领城中最佳的环孢素。壳聚糖纳米化技术2000年已申报发明专利(已进入实审)。
发明内容
本发明的纳米尺寸(雷帕霉素/壳聚糖)包载体缓释体的合成特征，是利用离子移变技术、溶胶—凝胶技术、微乳液技术和超声空化技术，并通过以下步骤，同步完成壳聚糖纳米化、雷帕霉素纳米化和纳米壳聚糖对纳米雷帕霉素的包载缓释体的制造。
1.将壳聚糖粉(片)、有机酸、去离子水等，置于配有迥流冷凝器的反应釜中，1000-2000转/min搅拌、40-60℃条件下，予溶1-2小时(或静置过夜)。待壳聚糖基本溶解后，将釜温逐步升至60-65℃，补加非离子表面活性剂。随即，在1-1.5小时内将釜温升主85-95℃。同条件保特0.5-1.5小时。趁热过滤。滤出物为浅棕色半透明粘稠液。PH值5.5，为A料。残渣为未反应的壳聚糖，回收处理后再用。
2.将适量去离子水放入配有迥流冷凝器的反应釜中，在1000-2000转/min搅拌下加入A料，40-60℃、40-100W超声空化条件下，再补加适量的活化助剂-A处理1-2小时，溶解为0.1-40％的溶液。为B料。
3.将离子交联剂用去离子水，在常温下溶解成0.01-2.0％的溶液，为C料。
4.将B料装入配有迥流冷凝器的反应釜中，并按B料/C料(重量比)1/0.1-1/0.001的比例(均按物料实际含量计算)。在10-1000转/min搅拌和20-60℃条件下，在0.5-1.5小时内，将C料逐步加入反应釜中。加料毕，再保持同条件30-60min。获浅肉色透明液。PH值5.8---6.0，为D料。
5.将适量无水乙醇加于配有迥流冷凝器的反应釜中，在室温和1000-2000转/min搅拌条件下，逐步加入雷帕霉素原粉。予溶30-60min。全溶后为E料。
6.在配有迥冷凝器的反应釜中，予先加入D料。在40-60℃、1000-2000转/min搅拌、40-100W超声空化条件下，20-60min内将E料逐步加入。加料毕，同条件反应30-60min。获纳米尺寸(雷帕霉素/壳聚糖)缓释包载体。产物为浅肉色半透明胶体溶液。为F料。经5万倍透射电镜检测，产物为独立分布的类球形粒子。粒径主区20-60nm间，95％以上粒子直径小于100mm。
F料也可经处理和喷雾干燥综合技术制成浅肉色粉体。
实施例(一)实例11.自制壳聚糖粉(片)的酸溶解取100公斤自制壳聚糖粉、15公斤乳酸复合物、和800公斤去离子水，一并置于配迥流冷凝器的反应釜中。在1500转/min搅拌40℃，予溶2小时。待壳聚糖已大部溶解后，逐步将釜温升至60℃。补加12公斤OS-15。同条件再升温至95℃，并保持0.5小时。趁热过滤，获浅肉色粘调液。为A料，PH值5-5.5。残渣回收处理后再用。
2.取A料80公斤，用1800去离子水、15公斤活化助剂-A，在1500转/min搅拌、40-60℃、100W超声空化条件下，处理1.5小时，制成B料。
3.取5.5公斤硫酸钠，用2000公斤去离子水溶解，为C料。
4.取500公斤B料，在500转/min搅拌下，30min内，将1.5公斤C料逐步加入。加料毕，同条件保持60min。获浅棕透明液，为D料。PH值5.5。
5.取无水乙醇300公斤，置于配迥流冷凝器的反应釜中，在室温和1200转/min搅拌下，将0.7公斤雷帕霉素粉(含量95％)加入釜中。予溶1小时，待物料全溶后为E料。
6.在配有迥流冷凝器的反应釜中，予先加入500公斤D料。55℃、2000转/min搅拌、100W超声空化条件下，20min内将300公斤E料逐步加入D料中。加料毕，再保持同条件60min。纳米化包载即告完成。获浅棕色半透明液，为F料。即纳米尺寸(雷帕霉素/壳聚糖)包载缓释体。经5万倍透射电镜检测，产物为独立分布的类球粒子。主区粒径分布20-60nm间，95％以上粒子直径小于100nm。
F料也可经处理和喷雾干燥综合技术制成粉体。
(二)实例21.市售壳聚糖片的酸溶解取市售壳聚糖片150公斤、乙酸20公斤、去离子水1000公斤。一并置于配迥流冷凝器的反应釜中。在50℃、1000转/min条件下，予溶2.5小时或静置过夜。待壳聚糖己大部溶解后，逐步升温至60℃。补加JFC 5公斤。同条件再升温至90℃，保温1小时。趁热过滤。获浅棕色粘稠液。为A料，PH值5.0。残渣回收处理后再用2.取A料150公斤，用2000公斤去离子水、3公斤活化助剂-A，在2000转/min搅拌、40-50℃、80W超声空化条件下，处理2小时。制成B料。
3.取0.5公斤三聚磷酸钠，用2500公斤去离子水溶解，为C料。
4.在配迥流冷凝器的反应釜中加400公斤B料，400转/min搅拌下、40℃、50min内，逐步将4.5公斤C料加入。加料毕，同条件保持60min。获浅肉色半透明液，为D料。PH值5.5。
5.取300公斤无水乙醇，置于配迥流冷凝器的反应釜中，在室温和1200转/min搅拌下，将4公斤雷帕霉素粉(含量95％)加入乙醇中。侍物料全溶后，为E料。
6.在配迥流冷凝器的反应釜中，予先加入500公斤D料。60℃、1500转/min搅拌、40W超声空化条件下，40min内将500公斤E料逐步加入D料中。加料毕，再同条件保持60min。获浅棕色半透明液，即纳米尺寸(雷帕霉素/壳聚糖)包载缓释体。为F料。经5万倍透射电镜检测，产物为独立分布的类球粒子。主区粒径分布20---60nm间，95％以上粒子直径小于100nm。
F料也可经处理和喷雾干燥综合技术制成粉体。
权利要求
1.一种纳米尺寸(雷帕霉素/壳聚糖)包载体的制造方法。其特征在于所述的原料组份、含量(重量百分)、材料特征和制造方法。分述如下原料及配比自制或商品壳聚糖粉(片) 10-500份商品雷帕霉素粉 0.2-100份有机酸 1-200份非离子表面活性剂 1-100份离子交联剂 0.1-100份活化助剂-A 1-100份无水乙醇 50-500份去离子水 100-5000份
2.根据权利要求1所述的有机酸为各类氨基酸、乳酸、乙酸、柠檬酸、甲酸等。
3.根据权利要求1所述的非离子表面活性剂为平平加OS-15、JFC或其他脂肪类聚氧乙烯基醚。
4.根据权利要求1所述的雷帕霉素为市售商品或自制的发酵产物(白色结晶)。
5.根据权利要求1所述的离子交联剂为硫酸钠、三聚磷酸钠、柠檬酸钠等。
6.根据权利要求1所述的活化助剂-A为自制的纳米化专用助剂。
7.根据权利要求1所述的壳聚糖为自制专用品或合符要求的市售品。
8.根据权利要求1所述的一种纳米尺寸(雷帕霉素/壳聚糖)包载体的制造方法，其特征在于壳聚糖纳米化、雷帕霉素纳米化和纳米壳聚糖对纳米雷帕霉素的包载等三个过程，同条件、同步进行并完成。其合成步骤按下述过程进行第一步，将壳聚糖粉(片)10-500份、去离子水100-2000份、有机酸1-200份，置于配有迥流冷凝器的反应釜中，在1000-2000转/min搅拌、40-60℃，予溶2小时或静置过夜。待壳聚糖已大部溶解后，逐步将釜温升呈60-65℃。补加非离子表面活性剂1-100份。同条件再升温至85-95℃并保持0.5-1.5小时。趁热过滤，获浅肉色粘稠液。为A料，PH值5-5.5。第二步，将A料50-300份用100-2000份去离子水、1-100份活化助剂-A，在40-60℃、40-100W超声空化条件下处理1-2小时，制成B料。第三步，取0.1-100份离子交联剂用100-5000份去离子水溶解，为C料，备用。第四步，将10-500份B料，在10-1000转/min搅拌、20-60℃、30-90min内，将0.1---10份C料逐步加入。并保持同条件20-60min。获透明溶液，为D料，PH值5-6。第五步，将无水乙醇50-500份置于配有迥流冷凝器的反应釜中，在室温和1000-2000转/min搅拌条件下，将0.2-100份雷帕霉素原粉(含量95％)加入釜中。予溶30-60min，待全溶后为E料。第六步，在配有迥流冷凝器的反应釜中，予先加入100-300份D料。在40-60℃、1000---2000转/min搅拌和40-100W超声空化条件下，于20-60min内将10-150份E料加入。加料毕，同条件保持30-60min。纳米化包载过程即告完成。获浅棕色半透明液。为F料。F料经5万倍透射电镜检测，产物为独立分布的类球粒子。主区粒径分布20-60nm间，95％以上粒子直径小于100nm。F料也可经处理和喷雾干燥综合技术制成浅肉色粉体。
全文摘要
本发明提供一种制造纳米尺寸(雷帕霉素/壳聚糖)包载缓释体的制造方法。雷帕霉素是近年开发用于防止器官移植排异领城的最优秀药物。该药因毒性小、疗效高，性能远优于目前常用的环抱素。研究表明，壳聚糖也具抗器官移植排异功能。本发明的特征是应用离子移变技术、溶胶―凝胶技术、微乳液技术和超声空化技术等，在壳聚糖纳米化的条件下，完成壳聚糖纳米化、雷帕霉素纳米化和纳米壳聚糖对纳米雷帕霉素的包载。该包载体中纳米雷帕霉素粒子，呈环形排列分布在纳米壳聚糖中。经5万倍透射电镜检测，主区粒径分布20－60nm间。95％以上粒子直径小于100mm。该包载体具有雷帕霉素和壳聚糖的结构特征，且具优异抑菌性、缓释性、生物降解性、生物亲和性及稳定性。
文档编号A61P37/06GK1736488SQ20041002176
公开日2006年2月22日 申请日期2004年2月4日 优先权日2004年2月4日
发明者龚正烈, 吴访其 申请人:广汉恒宇新材料有限公司, 四川抗菌素工业研究所