专利名称：米托蒽醌或盐酸米托蒽醌脂质体注射剂及其制备工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及米托蒽醌或盐酸米托蒽醌的制剂，具体说是涉及一种米托蒽醌或盐酸米托蒽醌脂质体注射剂，本发明还涉及该药物的制备工艺。
背景技术：
米托蒽醌或盐酸米托蒽醌为蒽环类抗肿瘤抗生素，其作用机制主要是米托蒽醌分子进入细胞核与DNA结合，从而抑制核酸的合成和有丝分裂而导致细胞死亡。米托蒽醌或盐酸米托蒽醌主要用于恶性淋巴瘤、乳腺癌和急性白血病，对肺癌、黑色素瘤、软组织肉瘤、多发性骨髓瘤、肝癌、大肠癌、肾癌、前列腺癌、子宫内膜癌、睾丸肿瘤、卵巢癌和头颈部癌也有一定疗效。
相对于盐酸阿霉素而言，米托蒽醌或盐酸米托蒽醌的长期和短期毒性较低，但是当累积剂量加大时会产生骨髓抑制，引起白细胞和血小板减少。临床上出现的毒副作用还有恶心、呕吐、食欲减退、腹泻等消化道反应，另外也有乏力、脱发、皮疹、口腔炎等毒副作用发现。上述毒副作用使米托蒽醌或盐酸米托蒽醌的临床应用受到了很大的限制。
脂质体(Liposome)最初是由英国学者Bangham和Standish将磷脂分散在水中进行电镜观察时发现的。磷脂分散在水中自然形成多层囊泡，每层均为脂质的双分子层；囊泡中央和各层之间被水相隔开，双分子层厚度约为4纳米。后来，将这种具有类似生物膜结构的双分子层小囊称为脂质体。脂质体可分为多室脂质体和单室脂质体。单室脂质体又分为小单室脂质体和大单室脂质体。Bangham和Standish最初发现的就是多室脂质体，它们较易制备，尺寸一般为佳0.5-5微米。小单室脂质体为球形，尺寸一般为佳20-50纳米；大单室脂质体的尺寸为微米数量级。1971年英国莱门等人开始将脂质体用于药物载体，主要作用机理是将药物粉末或溶液包裹在脂质体双层脂质膜所封闭的水相中或嵌入脂质体双层脂质膜中，这种微粒具有类细胞结构，进入人体内主要被网状内皮系统吞噬而激活机体的自身免疫功能，并改变被包封药物的体内分布，使药物主要在肝、脾、肺和骨髓等组织器官中积蓄，从而提高药物的治疗指数，减少药物的治疗剂量和降低药物的毒性。目前用作药物载体的脂质体多为大单室脂质体，粒径一般位于100-1000纳米之间。70年代中后期，人们开始研究将脂质体用作蒽环类抗癌药物的有效载体，80年代末已有临床实验开始进行，到90年代中期欧美已有脂质体药物上市。当此类药物被包裹在特定的脂质体再通过静脉注射进入人体后，临床实验结果表明其毒副作用明显减少，药物半衰期显著延长，但其药效却并不减弱反而得到加强。
目前世界上研制成功并上市的脂质体产品有美国Alza Pharmaceuticals医药公司研制的Doxil和Caelyx，主要用于治疗复发性卵巢癌和AIDS相关的Kaposi’s肉瘤；美国伊兰医药公司(Elan Pharmaceuticals，Inc.)主要用于治疗乳腺癌的MyocetTM；美国Gilead生产的AmBisome和DaunoXome，其药学活性成分分别为两性霉素B和柔红霉素。Doxil，Caelyx和MyocetTM的药学活性成分都为阿霉素或盐酸阿霉素，其中Doxil和Caelyx是运用“隐形”(stealth)技术将盐酸阿霉素包裹在脂质体微粒中，同时在每个脂质体微粒表面再包裹上聚乙二醇(PEG)以进一步延长其在体内循环半衰期，它们的半衰期可达55小时。另外美国的APHOIS公司已经成功的将紫杉醇(paclitaxel)和喜树碱(camptothecin)等难溶性药物制成了脂质体制剂并用于乳腺癌的治疗。但到目前为止，世界上还没有米托蒽醌的脂质体产品在市场上销售。本发明涉及的米托蒽醌或盐酸米托蒽醌的制剂不仅添补了我国自行研制和生产米托蒽醌脂质体制剂的空白，而且将使我国在这个产品的研发和生产技术上处于国际领先地位。
发明内容
本发明的目的是提供一种稳定性好、包裹率高、成本低、毒副作用少的米托蒽醌或盐酸米托蒽醌脂质体注射剂。
本发明另一个目的是提供该注射剂的制备工艺。
本发明的技术方案是根据脂质体的特性，选用特定的磷脂来制备包裹米托蒽醌或米托蒽醌的脂质双层膜，配方中还加入胆固醇和自由基捕捉剂维生素E来增加脂质体米托蒽醌的稳定性，采用pH梯度法促进药物包裹，药物包裹率高达95％以上，并通过特殊的加工工艺来控制该制剂注射入人体后米托蒽醌从脂质体中释放到人体内的速度，降低了盐酸米托蒽醌的毒副作用而使其药效增加。脂质体主要由天然和/或合成磷脂组成，这些磷脂可分为三大类，即中性磷脂，带正电磷脂和带负电磷脂，本发明脂质体制备主要选用中性的卵磷脂。另外，配方中还加入胆固醇，它使脂质体双分子层膜固化，从而减少自由基的生成，降低了氧化水平，使脂质体稳定性显著增强。胆固醇和中性磷脂的摩尔比例为0.1∶1-1∶1。同时为了进一步降低形成脂质体的磷脂和脂质体所包裹药物的化学降解，配方中还加入了维生素E。维生素E是一种有效的抗氧化剂，被认为是通过与磷脂过氧化自由基反应并猝灭单一态的氧分子和对磷脂的双分子层进行排序(如限制类脂层分子的流动性)等分子机制而发挥其抗氧化作用。维生素E和磷脂的摩尔比例为0.001∶1-0.1∶1。已有的研究结果表明，卵磷脂、饱和大豆磷脂和磷脂酰甘油酯等的水解都受pH值的影响，而且水解产物可以使脂质体悬浮液的pH值下降，加速脂质体的进一步水解。这些磷脂成分均在pH 6.5时最稳定，水解速度常数最小。因此，本发明在把米托蒽醌或盐酸米托蒽醌有效地包裹在空白脂质体中后，又将米托蒽醌或盐酸米托蒽醌脂质体置于加入缓冲剂的脂质体分散液中，进一步增强了米托蒽醌或盐酸米托蒽醌脂质体的稳定性。
米托蒽醌或盐酸米托蒽醌可采用“离子梯度法”来包裹到空白脂质体中，它通过脂质体双分子脂质层内外离子浓度的差异来使药物更容易被包裹到脂质体中，这些离子包括Na+，K+，Li+，NH4+，H+等，使用H+时的方法被称作“pH梯度法”。本发明将采用“离子梯度法”中效果较好的“pH梯度法”来包裹米托蒽醌或盐酸米托蒽醌。该方法通过调节脂质体内外环境的pH差异来使脂质体外的米托蒽醌或盐酸米托蒽醌较易进入脂质体内，而脂质体内的米托蒽醌或盐酸米托蒽醌不易释放到脂质体外，从而使药物包裹率很高，一般可达95％以上。具体措施通过将米托蒽醌或盐酸米托蒽醌在被包裹到脂质体时用碱粉沫或碱水溶液来调节脂质体脂质双层膜外液相环境中的pH值来增加药物包裹率，药物处于脂质体双层脂质膜所包裹的酸性水溶液中，酸性水溶液由0.01M-0.5M的有机酸制备。脂质体的粒度及均匀度可通过高压均粒机制备，也可通过挤压设备把空白脂质体悬浮液在压力下挤过相应孔径的微孔膜来达到。在包裹药物后通过渗析过滤法然后将米托蒽醌或盐酸米托蒽醌脂质体置于与人体生理环境类似的脂质体分散液中。
空白脂质体的制备可采用薄膜分散法(TFV)，也可用逆相蒸发法(REV)、乙醇注入法来制备。制备过程中确切温度随脂质体组份不同而不同。成品米托蒽醌或盐酸米托蒽醌脂质体的分散液中为增加其在储存期间的稳定性加入了缓冲剂。
本发明的目的可以通过以下措施来为实现一种米托蒽醌或盐酸米托蒽醌的脂质体注射剂，每1000ml制剂的原料配方为米托蒽醌或盐酸米托蒽醌 500mg-2.5g磷脂500mg-25g
胆固醇 25mg-14.3g抗氧化剂 0.28mg-1.6g有机酸 30mg-30g碱 25mg-42g糖 28g-150g缓冲剂 1g-100g注射用水 定容至1000ml同时满足米托蒽醌或盐酸米托蒽醌和磷脂的摩尔比例为0.05∶1-0.5∶1，胆固醇和中性磷脂的摩尔比例为0.1∶1-1∶1。
所述的米托蒽醌或盐酸米托蒽醌的脂质体注射剂，其中磷脂可以是蛋黄卵磷脂(EPC)、氢化蛋黄卵磷脂(HEPC)、双硬脂酸卵磷脂(DSPC)、大豆卵磷脂(soy PC)、氢化大豆卵磷脂(HSPC)、双软脂酸卵磷脂(DPPC)或双肉豆寇酸卵磷脂(DMPC)。
所述的米托蒽醌或盐酸米托蒽醌的脂质体注射剂，其中抗氧化剂可以是维生素E，维生素E和磷脂的摩尔比例为0.001∶1-0.1∶1。
所述的米托蒽醌或盐酸米托蒽醌的脂质体注射剂，其中有机酸可以是柠檬酸、琥珀酸、乙酸、草酸、葡萄酸、乳糖酸、葡萄糖醛酸或半乳糖醛酸。
所述的米托蒽醌或盐酸米托蒽醌的脂质体注射剂，其中碱可以是碳酸钙、碳酸钠、碳酸氢钠、磷酸钾、磷酸氢钾、磷酸钠、磷酸氢钠、氢氧化钠。
所述的米托蒽醌或盐酸米托蒽醌的脂质体注射剂，其中糖为乳糖、麦芽糖、蔗糖、葡萄糖、海藻糖或棉白糖。
所述的米托蒽醌或盐酸米托蒽醌的脂质体注射剂，其中缓冲剂可以是甘氨酸、组氨酸或缓血酸胺。
所述的米托蒽醌或盐酸米托蒽醌的脂质体注射剂，其剂型可以是注射液、冻干粉。
所述的米托蒽醌或盐酸米托蒽醌的脂质体注射剂的制备方法，包含下列步骤1)制备脂质薄膜根据配方选用磷脂、胆固醇和维生素E溶于氯仿或氯仿-甲醇混合溶剂中混合均匀；用旋转蒸发仪将溶液中溶剂减压除去，形成脂质薄膜；2)制备含米托蒽醌或盐酸米托蒽醌的脂质体悬浮液a.配制0.01M-0.5M的米托蒽醌有机酸溶液，用米托蒽醌酸溶液来水化脂质薄膜，水化温度一般在40℃-70℃之间，得米托蒽醌脂质体悬浮液；
b.配制0.1M-2.0M的碱水溶液或准备碱粉末，用碱水溶液或碱粉末调节米托蒽醌脂质体悬浮液至弱碱性并在40℃-70℃下保温一段时间；3)均化脂质体包裹完全后用高压均粒机制备脂质体至所需粒径和均匀度，也可通过挤压设备把空白脂质体悬浮液在压力下挤过相应孔径的微孔膜来达到，脂质体的粒径控制在50-300nm，脂质体粒径和均匀度可用多角度纳米粒子分析器来检测；4)制备米托蒽醌或盐酸米托蒽醌脂质体按重量百分比配制浓度为3％-15％的糖水溶液并加入缓冲剂，调节至pH5-pH7，得脂质体的分散液，缓冲剂的含量为0.2％-10％；然后采用脂质体的分散液洗涤含米托蒽醌或盐酸米托蒽醌的脂质体，利用渗析过滤法使米托蒽醌或盐酸米托蒽醌脂质体外溶液置换为pH5-pH7的脂质体的分散液，使米托蒽醌或盐酸米托蒽醌脂质体分散在与人体生理环境类似的糖水溶液中，得米托蒽醌或盐酸米托蒽醌脂质体；5)定容、除菌、分装、保存用注射用水定容；将所得米托蒽醌或盐酸米托蒽醌脂质体悬浮液用微孔膜过滤除菌，分装即得成品，成品可在2℃-8℃下保存或冻干保存至使用。
本发明的优点本发明的脂质体脂质体的粒径位于50nm-300nm之间，药物包裹率可达95％以上，非包裹米托蒽醌或盐酸米托蒽醌含量少，一般小于5％。同时，配方加入胆固醇和抗氧化剂维生素E，使得米托蒽醌或盐酸米托蒽醌脂质体的稳定性大大提高。另外，由于脂质体盐酸盐酸的生产过程中关键的均粒步骤可由高效的高压均粒机来完成，而且该制剂也可通过冻干制成冻干剂型来保存，这不仅使米托蒽醌或盐酸米托蒽醌脂质体的稳定性进一步提高，并且使该制剂的工业化生产成为可能。本发明冻干粉在2℃-8℃下的一年稳定性实验结果表明其平均粒径变化率小于10％，药物包裹率的变化率小于5％，显示了本发明米托蒽醌或盐酸米托蒽醌脂质体制剂优异的稳定性。
米托蒽醌或盐酸米托蒽醌脂质体制剂的制备采用了国产原料，大大降低了其生产成本，使我国癌症患者能承受这种药效高且毒副作用低的抗癌新药。
本发明的药效学实验结果1)毒副作用实验米托蒽醌脂质体(L-MITOX)制剂按实例4制备，浓度为1.0mg/ml，传统盐酸米托蒽醌(F-MITOX)制剂由盐酸米托蒽醌溶于无菌生理盐水配制，浓度为1.0mg/ml。L-MITOX和F-MITOX分别由小鼠尾静脉注射入小鼠体内。毒性实验表明小鼠对F-MITOX的最大耐药剂量(MTD)为10mg/Kg，而对L-MITOX的最大耐药剂量(MTD)显著增加到30mg/Kg。在10mg/Kg剂量组中，注射L-MITOX的小鼠体重在两周内的减少量小于3％，注射F-MITOX的小鼠体重在注射后体重持续减少，在第12天体重减少达30％。
实验结果表明米托蒽醌脂质体的毒副作用明显低于传统盐酸米托蒽醌。
2)米托蒽醌脂质体对白血病L1210细胞的药效实验白血病L1210细胞由小鼠尾静脉注入小鼠体内。24小时后由小鼠尾静脉注入按实例1制备的浓度为1.0mg/ml的脂质体米托蒽醌(L-MITOX)。对照组的小鼠在同样条件下注射溶于无菌生理盐水的浓度为1.0mg/ml的传统盐酸米托蒽醌(F-MITOX)。实验中使用三种不同剂量的L-MITOX和F-MITOX5mg/Kg，10mg/Kg和20mg/Kg，实验期为60天。
在注射L-MITOX的小鼠中，10mg/Kg和20mg/Kg剂量组的小鼠死亡率为零，平均存活期超过60天。5mg/Kg剂量组的小鼠死亡率为100％，平均存活期约15天。
在注射F-MITOX的小鼠中，5mg/Kg，10mg/Kg和20mg/Kg剂量组的小鼠死亡率均为100％。5mg/Kg剂量组的小鼠平均存活期约12天；10mg/Kg剂量组的小鼠平均存活期约15天；20mg/Kg剂量组的小鼠平均存活期约10天。
上述药效实验结果表明脂质体米托蒽醌对L1210白血病不仅有明显的治疗效果，而且毒副作用明显减轻，疗效大大优于传统米托蒽醌。而且本发明的脂质体米托蒽醌制剂可明显增加药物在病体的摄入量并增强其抗肿瘤的治疗功能。
具体实施例方式
以下通过实施例对本发明作进一步阐明，实施例不是对本发明的限制。
实施例1制剂处方(1000ml容量)米托蒽醌 500mg双肉豆寇酸卵磷脂(DMPC)6g胆固醇1.3g维生素E 7.8mg柠檬酸1150mg无水碳酸钠800mg蔗糖 90g
组氨 5g注射用水 定容至所需容量制剂工艺如下根据配方选用磷脂、胆固醇和维生素E溶于氯仿中混合均匀；用旋转蒸发仪将溶液中氯仿减压除去，形成脂质薄膜；配制50mM的柠檬酸溶液并加入配方量的米托蒽醌，用所得米托蒽醌的柠檬酸溶液来水化脂质薄膜，水化温度一般在60℃-65℃之间，水化时间为15-30分钟；用0.5M的无水碳酸钠水溶液调节所得米托蒽醌脂质体悬浮液的pH至7.2±0.2，然后在60℃-65℃之间保温10-30分钟；包裹完全后用高压均粒机制备脂质体至平均粒径为100nm，脂质体粒径和均匀度用多角度纳米粒子分析器来检测；配制9％的蔗糖水溶液并加入0.5％的组氨酸，得脂质体分散液；采用脂质体分散液洗涤含米托蒽醌的脂质体，利用渗析过滤法使米托蒽醌脂质体外溶液置换为pH为7.0±0.2的脂质体分散液，用注射用水定容并调节至米托蒽醌的浓度为1.0mg/ml溶液，将米托蒽醌脂质体悬浮液用0.22微米孔径的微孔膜过滤除菌，分装即得成品，成品可在2℃-8℃下保存或冻干保存至使用。
实施例2制剂处方(1000ml容量)米托蒽醌 1000mg双肉豆寇酸卵磷脂(DMPC) 12g胆固醇 2.5g维生素E15mg柠檬酸 2300mg无水碳酸钠 1600mg蔗糖 90g组氨酸 5g注射用水 定容至所需容量制剂工艺如下根据配方选用磷脂、胆固醇和维生素E溶于氯仿中混合均匀；用旋转蒸发仪将溶液中氯仿减压除去，形成脂质薄膜；配制50mM的柠檬酸溶液并加入配方量的米托蒽醌，用所得米托蒽醌的柠檬酸溶液来水化脂质薄膜，水化温度一般在60℃-65℃之间，水化时间为15-30分钟；用0.5M的无水碳酸钠水溶液调节所得米托蒽醌脂质体悬浮液的pH至7.2±0.2，然后在60℃-65℃之间保温10-30分钟；包裹完全后用高压均粒机制备脂质体至平均粒径为80nm，脂质体粒径和均匀度用多角度纳米粒子分析器来检测；配制9％的蔗糖水溶液并加入0.5％的组氨酸，得脂质体分散液；采用脂质体分散液洗涤含米托蒽醌的脂质体，利用渗析过滤法使米托蒽醌脂质体外溶液置换为pH为7.0±0.2的脂质体分散液，用注射用水定容并调节至米托蒽醌的浓度为1.0mg/ml溶液，将米托蒽醌脂质体悬浮液用0.22微米孔径的微孔膜过滤除菌，分装即得成品，成品可在2℃-8℃下保存或冻干保存至使用。
实施例3制剂处方(1000ml容量)米托蒽醌1000mg氢化大豆卵磷脂(HSPC)13.9g胆固醇 2.5g维生素E 15mg柠檬酸 2300mg无水碳酸钠 1600mg蔗糖90g组氨酸 5g注射用水定容至所需容量制剂工艺如下根据配方选用磷脂、胆固醇和维生素E溶于氯仿中混合均匀；用旋转蒸发仪将溶液中氯仿减压除去，形成脂质薄膜；配制50mM的柠檬酸溶液并加入配方量的米托蒽醌，用所得米托蒽醌的柠檬酸溶液来水化脂质薄膜，水化温度一般在60℃-65℃之间，水化时间为30-60分钟；用0.5M的无水碳酸钠水溶液调节所得米托蒽醌脂质体悬浮液的pH至7.2±0.2，然后在60℃-65℃之间保温10-30分钟；包裹完全后用高压均粒机制备脂质体至平均粒径为100nm，脂质体粒径和均匀度用多角度纳米粒子分析器来检测；配制9％的蔗糖水溶液并加入0.5％的组氨酸，得脂质体分散液；采用脂质体分散液洗涤含米托蒽醌的脂质体，利用渗析过滤法使米托蒽醌脂质体外溶液置换为pH为7.0±0.2的脂质体分散液，用注射用水定容并调节至米托蒽醌的浓度为1.0mg/ml溶液，将米托蒽醌脂质体悬浮液用0.22微米孔径的微孔膜过滤除菌，分装即得成品，成品可在2℃-8℃下保存或冻干保存至使用。
实施例4制剂处方(1000ml容量)米托蒽醌 1000mg双软脂酸卵磷脂(DPPC) 13g胆固醇 2.5g维生素E 15mg柠檬酸 2300mg氢氧化钠 1200mg蔗糖 90g组氨酸 5g注射用水 定容至所需容量制剂工艺如下根据配方选用磷脂、胆固醇和维生素E溶于氯仿中混合均匀；用旋转蒸发仪将溶液中氯仿减压除去，形成脂质薄膜；配制50mM的柠檬酸溶液并加入配方量的米托蒽醌，用所得米托蒽醌的柠檬酸溶液来水化脂质薄膜，水化温度一般在60℃-65℃之间，水化时间为30-60分钟；用1.0M的氢氧化钠水溶液调节所得米托蒽醌脂质体悬浮液的pH至7.2±0.2，然后在60℃-65℃之间保温10-30分钟；包裹完全后用高压均粒机制备脂质体至平均粒径为100nm，脂质体粒径和均匀度用多角度纳米粒子分析器来检测；配制9％的蔗糖水溶液并加入0.5％的组氨酸，得脂质体分散液；采用脂质体分散液洗涤含米托蒽醌的脂质体，利用渗析过滤法使米托蒽醌脂质体外溶液置换为pH为7.0±0.2的脂质体分散液，用注射用水定容并调节至米托蒽醌的浓度为1.0mg/ml溶液，将米托蒽醌脂质体悬浮液用0.22微米孔径的微孔膜过滤除菌，分装即得成品，成品可在2℃-8℃下保存或冻干保存至使用。
实施例5制剂处方(1000ml容量)米托蒽醌 1000mg双硬脂酸卵磷脂(DSPC) 14g
胆固醇 2.5g维生素E 15mg柠檬酸 2300mg无水碳酸钠 1600mg蔗糖90g组氨酸 5g注射用水定容至所需容量制剂工艺如下根据配方选用磷脂、胆固醇和维生素E溶于氯仿中混合均匀；用旋转蒸发仪将溶液中氯仿减压除去，形成脂质薄膜；配制50mM的柠檬酸溶液并加入配方量的米托蒽醌，用所得米托蒽醌的柠檬酸溶液来水化脂质薄膜，水化温度一般在60℃-65℃之间，水化时间为30-60分钟；用0.5M的无水碳酸钠水溶液调节所得米托蒽醌脂质体悬浮液的pH至7.2±0.2，然后在60℃-65℃之间保温10-30分钟；包裹完全后用高压均粒机制备脂质体至平均粒径为88nm，脂质体粒径和均匀度用多角度纳米粒子分析器来检测；配制9％的蔗糖水溶液并加入0.5％的组氨酸，得脂质体分散液；采用脂质体分散液洗涤含米托蒽醌的脂质体，利用渗析过滤法使米托蒽醌脂质体外溶液置换为pH为7.0±0.2的脂质体分散液，用注射用水定容并调节至米托蒽醌的浓度为1.0mg/ml溶液，将米托蒽醌脂质体悬浮液用0.22微米孔径的微孔膜过滤除菌，分装即得成品，成品可在2℃-8℃下保存或冻干保存至使用。
实施例6制剂处方(1000ml容量)米托蒽醌 2500mg双硬脂酸卵磷脂(DSPC) 35g胆固醇 6.3g维生素E38mg柠檬酸 5800mg无水碳酸钠 4000mg蔗糖 90g组氨酸 5g
注射用水 定容至所需容量制剂工艺如下根据配方选用磷脂、胆固醇和维生素E溶于氯仿中混合均匀；用旋转蒸发仪将溶液中氯仿减压除去，形成脂质薄膜；配制50mM的柠檬酸溶液并加入配方量的米托蒽醌，用所得米托蒽醌的柠檬酸溶液来水化脂质薄膜，水化温度一般在60℃-65℃之间，水化时间为30-60分钟；用0.5M的无水碳酸钠水溶液调节所得米托蒽醌脂质体悬浮液的pH至7.2±0.2，然后在60℃-65℃之间保温10-30分钟；包裹完全后用高压均粒机制备脂质体至平均粒径为110nm，脂质体粒径和均匀度用多角度纳米粒子分析器来检测；配制9％的蔗糖水溶液并加入0.5％的组氨酸，得脂质体分散液；采用脂质体分散液洗涤含米托蒽醌的脂质体，利用渗析过滤法使米托蒽醌脂质体外溶液置换为pH为7.0±0.2的脂质体分散液，用注射用水定容并调节至米托蒽醌的浓度为1.0mg/ml溶液，将米托蒽醌脂质体悬浮液用0.22微米孔径的微孔膜过滤除菌，分装即得成品，成品可在2℃-8℃下保存或冻干保存至使用。
权利要求
1.一种米托蒽醌或盐酸米托蒽醌的脂质体注射剂，其特征在于每1000ml制剂的原料配方为米托蒽醌或盐酸米托蒽醌 500mg-2.5g磷脂500mg-25g胆固醇 25mg-14.3g抗氧化剂0.28mg-1.6g有机酸 30mg-30g碱 25mg-42g糖 28g-150g缓冲剂 1g-100g注射用水定容至1000ml同时满足米托蒽醌或盐酸米托蒽醌和磷脂的摩尔比例为0.05∶1-0.5∶1，胆固醇和磷脂的摩尔比例为0.1∶1-1∶1。
2.权利要求1中脂质体中的磷脂选自蛋黄卵磷脂、氢化蛋黄卵磷脂、双硬脂酸卵磷脂、大豆卵磷脂、氢化大豆卵磷脂、双软脂酸卵磷脂或双肉豆寇酸卵磷脂。
3.根据权利要求1所述的米托蒽醌或盐酸米托蒽醌的脂质体注射剂，其特征在于抗氧化剂可以是维生素E，维生素E和磷脂的摩尔比例为0.001∶1-0.1∶1。
4.根据权利要求1所述的米托蒽醌或盐酸米托蒽醌的脂质体注射剂，其特征在于有机酸可以是柠檬酸、琥珀酸、乙酸、草酸、葡萄酸、乳糖酸、葡萄糖醛酸或半乳糖醛酸。
5.根据权利要求1所述的米托蒽醌或盐酸米托蒽醌的脂质体注射剂，其特征在于碱可以是碳酸钙、碳酸钠、碳酸氢钠、磷酸钾、磷酸氢钾、磷酸钠、磷酸氢钠或氢氧化钠。
6.根据权利要求1所述的米托蒽醌或盐酸米托蒽醌的脂质体注射剂，其特征在于糖可以是乳糖、麦芽糖、蔗糖、葡萄糖、海藻糖或棉白糖。
7.根据权利要求1所述的米托蒽醌或盐酸米托蒽醌的脂质体注射剂，其特征在于缓冲剂可以是甘氨酸、组氨酸或缓血酸胺。
8.根据权利要求1所述的米托蒽醌或盐酸米托蒽醌的脂质体注射剂，其特征在于其剂型可以是注射液、冻干粉。
9.权利要求1所述的米托蒽醌或盐酸米托蒽醌的脂质体注射剂的制备方法，其特征在于包含下列步骤1)制备脂质薄膜根据配方选用磷脂、胆固醇和维生素E溶于氯仿或氯仿-甲醇混合溶剂中混合均匀；用旋转蒸发仪将溶液中溶剂减压除去，形成脂质薄膜；2)制备含米托蒽醌或盐酸米托蒽醌的脂质体悬浮液a.配制0.01M-0.5M的米托蒽醌有机酸溶液，用米托蒽醌酸溶液来水化脂质薄膜，水化温度一般在40℃-70℃之间，得米托蒽醌脂质体悬浮液；b.配制0.1M-2.0M的碱水溶液或准备碱粉末，用碱水溶液或碱粉末调节米托蒽醌脂质体悬浮液至弱碱性并在40℃-70℃下保温一段时间；3)均化脂质体包裹完全后用高压均粒机制备脂质体至所需粒径和均匀度，也可通过挤压设备把空白脂质体悬浮液在压力下挤过相应孔径的微孔膜来达到，脂质体的粒径控制在50-300nm，脂质体粒径和均匀度可用多角度纳米粒子分析器来检测；4)制备米托蒽醌或盐酸米托蒽醌脂质体按重量百分比配制浓度为3％-15％的糖水溶液并加入缓冲剂，调节至pH5-pH7，得脂质体的分散液，缓冲剂的含量为0.2％-10％；然后采用脂质体的分散液洗涤含米托蒽醌或盐酸米托蒽醌的脂质体，利用渗析过滤法使米托蒽醌或盐酸米托蒽醌脂质体外溶液置换为pH5-pH7的脂质体的分散液，使米托蒽醌或盐酸米托蒽醌脂质体分散在与人体生理环境类似的糖水溶液中，得米托蒽醌或盐酸米托蒽醌脂质体；5)定容、除菌、分装、保存用注射用水定容；将所得米托蒽醌或盐酸米托蒽醌脂质体悬浮液用微孔膜过滤除菌，分装即得成品，成品可在2℃-8℃下保存或冻干保存至使用。
全文摘要
本发明公开了一种米托蒽醌或盐酸米托蒽醌脂质体注射剂及其制备工艺。该注射剂由米托蒽醌或盐酸米托蒽醌、磷脂、胆固醇、抗氧化剂、有机酸、碱、糖、缓冲剂、注射用水组成，该制备工艺包括制备脂质薄膜、包裹药物、均化脂质体、纯化和固化脂质体、定容、除菌、分装、保存等步骤。该注射剂稳定性好、包裹率高、成本低、毒副作用少，该制备工艺简单易行。
文档编号A61K31/136GK1602844SQ20041004161
公开日2005年4月6日 申请日期2004年8月5日 优先权日2004年8月5日
发明者贺明, 贺欣, 周金鸿 申请人:常州太平洋药物研究所有限公司