专利名称：一种治疗溃疡性结肠炎的凝结芽孢杆菌活菌制剂的制造方法和应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及治疗溃疡性结肠炎的凝结芽孢杆菌活菌制剂的制造方法和应用。
背景技术：
溃疡性结肠炎(UC)是一种原因未明的直肠和结肠慢性炎症性疾病，本病可发生于任何年龄，20～50岁为多见，男女发病率无明显差别。本病在欧美较常见，其发病率与患者约为79～140/10万人；日本较低，约为3.7-54/10万人，我国尚未做过该项流行学调查，估计不低于日本。但近年来，炎症性肠病有明显上升的趋势。该病轻型缓解率为70-80％；重型为50％；重型暴发型死亡率高达25％。尤其令人担心的是，长期慢性结肠炎会诱发癌变，其发生率为3～5％，发病20年以上者，癌变发生率达20％以上。UC的病因虽尚不明，许多研究提示本病可能与免疫、感染、遗传、肠道菌群失调、食物过敏和精神因素等有关，大多数人认为肠粘膜中杯状细胞病理性减少与黏蛋白耗竭性减少是发病条件之一，而诸如菌群失调、食物过敏、精神因素是重要的诱发因素。
UC是一种反复发作的肠道慢性疾病，主要症状是腹痛、腹泻、里急后重与排黏液血便。年轻时即发病，需忍受长期的社会和心理负担，治疗是终身性的。国外前瞻性研究包括496例UC病人，在诊断后追踪16个月，显示一年复发率累积为50％，而且1％的复发病人表现有慢性复发病程。目前肾上腺糖皮质类固醇激素仍为活动期UC的标准治疗药物，但治疗后仍有较高的复发率和死亡率。UC的内科治疗，目前尚无特效制剂，如上述肾上腺皮质激素，5-氨基水杨酸、柳氮磺胺吡啶、灭滴灵、利福平等可缓解症状，但上述药物均有一定副作用，病人难于耐受和坚持治疗，外科治疗是切除整个结肠，多有后遗症。而微生态制剂因其能调节肠道菌群和调节免疫，对UC有较好效果，近年来，国内在用微生态制剂治疗UC的临床研究中有所进展，在科研方面有用培菲康治疗UC，发现治疗后拟杆菌和双歧杆菌数量明显上升(崔海宏等.2003)；用普乐拜尔(双歧杆菌四联菌)治疗了324例结肠炎患者，总有效率为91.4％(于元龙2003)；口服丽珠肠乐胶囊治疗溃疡性结肠炎30例，总有效率为90％(杨春辉等2004)。国外Ventur(1999)，等分组给无法耐受5-氨基水杨酸(5-ASA)的UC患者应用乳酸杆菌、双歧杆菌、链球菌一年，结果20例患者中有15例缓解，且无任何副作用。此外，国内尚有凝结芽孢杆菌TQ33一种新的功能性食品添加剂(赵虎山等报道1997)，给5例患有便秘和2例慢性结肠炎(肠易激综合征)患者饮用有明显的调理作用。但认真分析该资料所述2例慢性结肠炎的症状应为肠易激综合征，而非溃疡性结肠炎，理由是①2病例无典型UC症状描述；②无结肠炎镜检确诊；③非国家卫生部或药管局批准在国家临床基地进行的规范临床试验。所以不能科学证明对结肠炎有疗效。北京天施康医药科技发展有限公司在解放军总医院等5家医院用凝结芽孢杆菌活菌片治疗急慢性腹泻103例，总有效率分别为98％和90％，且未见不良反应，表明该药安全有效。肠道菌群培养治疗后肠道有益菌乳酸菌和双歧杆菌活菌数明显增加，表明有调整肠道菌群失调作用。凝结芽孢杆菌活菌制剂既然对一般的感染性或非感染性急慢性腹泻有很好的疗效，那么对溃疡性结肠炎是否也有较理想的疗效呢？我们通过动物实验研究完全得到了证实，本实验结果证明凝结芽孢杆菌对大鼠实验性溃疡性结肠炎有很好的治疗效果，即治疗后，大鼠的结肠溃疡病灶面积缩小，结肠湿重减轻，髓过氧化物酶活性下降，炎症明显减轻，为此我们特别注重该药对UC疗效的研究，为解除UC病人的痛苦、保障人们健康，开发出凝结芽孢杆菌活菌制品治疗UC的另一个新用途，将具有显著的社会经济效益。
专利方面据查国内专利只有CN1371620“畜禽用微生态调节剂”中含有凝结芽孢杆菌等4个菌种，用于防治畜禽的肠道疾病，而凝结芽孢杆菌用于人的肠道病的防治的专利则为0。在国外有US6723326芽孢杆菌孢子(BC)和胞外产物(上清液和滤液)，局部用于哺乳类动物皮肤和粘膜抑制细菌、真菌和病毒的生长；EP1022023由凝结芽孢杆菌和赖氨酪组合成合适的食物整合剂用于治疗肠道功能紊乱和菌群失调；WO0954982凝结芽孢杆菌和胞外产物口服治疗肠道感染和婴儿猝死综合征；WO0134168乳酸菌孢子和外胞产物用于抑制病原菌感染；WO0061201利用凝结芽孢杆菌和胞外产物在使用卫生用品时抑制表皮组织上细菌的生长。综上所述，近年来，国内外的有关专利，均未见关于凝结芽孢杆菌治疗溃疡性结肠炎的实验研究和临床研究的专利。为此，我们特别申请这一项专利。
发明概述本发明的目的是提供一种凝结芽孢杆菌活菌用于制备治疗溃疡性结肠炎的药物的用途。
本发明的另一个目的是提供一种用于治疗溃疡性结肠炎的凝结芽孢杆菌活菌制剂。
本发明又一个目的是提供凝结芽孢杆菌活菌菌粉的制备方法。
本发明人使用目前已公知的凝结芽孢杆菌和新筛选出的凝结芽孢杆菌菌株进行了治疗溃疡性结肠炎的实验研究，发现包含凝结芽孢杆菌活菌粉的凝结芽孢杆菌制剂对于治疗溃疡性结肠炎均具有良好的效果，其中，所述新筛选出的凝结芽孢杆菌菌株得到较突出的优异效果。本发明是在以上发现基础上完成的。
本发明所述一种治疗炎症性肠病的凝结芽孢杆菌活菌制剂的制造方法和应用指的是凝结芽孢杆菌经发酵培养、离心的菌泥经干燥后得到活菌菌粉，再制成合适的剂型，供动物实验和临床应用。溃疡性结肠炎，其病变特征是病变多位于直肠和乙状结肠，也可累及整个结肠。结肠镜检可见受累肠粘膜出血、水肿、糜烂或浅表溃疡，上覆粘液及炎症渗出物，常有出血，有炎性细胞浸润，上皮细胞减少，隐窝萎陷扭曲，有脓肿形成。慢性期溃疡可愈合形成瘢痕或形成假息肉。实验研究是指用右旋葡聚糖硫酸钠(DSS)给SD大鼠灌胃加直肠注入法给药，以诱发实验性溃疡性结肠炎模型，然后再用凝结芽孢杆菌活菌片给造型大鼠进行实验性治疗和评价其治疗效果。应用是指用凝结芽孢杆菌活菌片对溃疡性结肠炎的病人进行临床治疗，以观察该活菌制剂对UC病人的疗效和安全性。
本文中所用述语“剂型”是指将该药物制成一定的剂型(固体或液体剂型)，以制剂的形式应用于治疗或预防。而制剂的有效性、安全性、合理性和精密性等则反映了药品的质量，决定了用药的效果。
本文中使用的所有的百分比或比例均按重量或重量/容量或容量/重量计，除非另有说明，而且，本文中所有的测量均是在25℃进行，除非另有说明。
发明内容
本发明人针对当今全球医药界对溃疡性结肠炎的治疗都感到棘手的情况下，依据微生态有益菌对人体的肠道病(如腹泻等)有很好的治疗效果，故将凝结芽孢杆菌活菌菌粉加入适宜的辅料制成片剂等剂型，用于动物实验和临床研究，以下是对本发明的详细描述。
本发明提供了凝结芽孢杆菌活菌用于制备治疗溃疡性结肠炎的药物的用途。其中所述凝结芽孢杆菌活菌可是活菌制剂。这里所述的凝结芽孢杆菌可是任何凝结芽孢杆菌菌株，所述菌株包括但非仅限于Bacilluscoagulans TBC169和Bacillus coagulans，Hammer，1915。其中使用本发明人新筛选出的凝结芽孢杆菌菌株得到较突出的优异效果，该新菌株为凝结芽孢杆菌Bacillus coagulans，TBC169已在北京中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号No.1207。
本发明还提供了一种用于治疗溃疡性结肠炎的凝结芽孢杆菌活菌制剂，其特征在于所述制剂包括凝结芽孢杆菌活菌菌粉及药用载体，其中所述凝结芽孢杆菌为凝结芽孢杆菌Bacillus coagulans，TBC169 CGMCC保藏号No.1207。其中所述药用载体可是公知的任何药用载体，尤其是微晶纤维素、甘露醇、聚乙烯吡咯烷酮和淀粉中的任一种或多种的混合物。
其中所述凝结芽孢杆菌活菌菌粉可由发酵产物通过各种已知方法来制备，优选由凝结芽孢杆菌液态发酵产物通过干燥制备，所述干燥可使用本领域普通技术人员公知的任何干燥方法，只要其能保持凝结芽孢杆菌活性，优选所述干燥通过冷冻干燥、喷雾干燥或烘干干燥或其结合来实现。
在所述制剂中，优选制剂总重量计该制剂中凝结芽孢杆菌活菌数不少于1.0×106cfu/g。
在本发明的一种优选实施方案中，以所述制剂总重量计，所述制剂包括的组分和含量为凝结芽孢杆菌活菌菌粉0.05％至80％微晶纤维素 0％至90％甘露醇 0％至90％聚乙烯吡咯烷酮 0％至90％葡萄糖 0％至90％脱脂奶粉0％至90％淀粉0％至90％其中微晶纤维素、甘露醇、聚乙烯吡咯烷酮、葡萄糖、脱脂奶粉、和淀粉的含量不能同时为0％。
在本发明的另一种实施方案中，其中以所述制剂总重量计，所述制剂包括的组分和含量为凝结芽孢杆菌活菌菌粉0.5％至70％微晶纤维素 20％至90％甘露醇 5％至90％聚乙烯吡咯烷酮 5％至90％在本发明的再另一种实施方案中，其中以所述制剂总重量计，所述制剂包括的组分和含量为凝结芽孢杆菌活菌菌粉 0.05％至80％微晶纤维素 10％至70％葡萄糖 10％至90％在本发明的再另一种实施方案中，其中以所述制剂总重量计，所述制剂包括的组分和含量为凝结芽孢杆菌活菌菌粉 0.05％至70％葡萄糖 10％至90％脱脂奶粉 10％至90％淀粉 10％至90％优选所述制剂的剂型为片剂、胶囊剂、散剂或颗粒剂。
本发明还提供了一种用于治疗溃疡性结肠炎的凝结芽孢杆菌活菌制剂的制备方法，其特征在于所述方法包括如下步骤1)接种培养在液体培养基中接种凝结芽孢杆菌菌种，进行培养或多级扩增培养；2)将上述步骤1)中液态培养物离心，收集湿菌泥，并将所述菌泥干燥、粉碎，得到干燥菌粉；3)将上述步骤2)所得干燥菌粉与药用载体混合，制成最终剂型。
其中所述多级扩增培养优选为三级扩增培养。
在各级培养中培养温度为30℃至55℃，各级培养时间为6小时至72小时。
其中所述扩增培养中的第一级培养所使用的菌种优选按如下方法制备将固体凝结芽孢杆菌菌种按重量比1∶1至1∶10的比例溶于生理盐水中，在50-80℃水浴活化5-15分钟。
本发明人新筛选出的凝结芽孢杆菌菌株特征凝结芽孢杆菌TBC169为兼性厌氧菌，在酪胨培养基(琼脂)上长出灰白色或乳白色边缘不整齐菌落，革兰氏染色阳性，菌体为杆形，大部分菌体中央或偏一端有卵园形芽孢、不膨胀。发酵葡萄糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖，不水解淀粉，触酶、吲哚、V-P反应阳性、硝酸盐还原阴性，牛奶凝固。适宜PH4.0-7.5，生长适宜温度为30℃-55℃，芽孢能耐受巴斯德灭菌，稳定性极好，能室温保存。
以下以实施例来对本发明进行说明，但所述实施例不应理解为是对本发明范围的限定。
实施例1凝结芽孢杆菌菌粉制备取凝结芽孢杆菌菌种管一支，溶于已灭菌装有10ml生理盐水和适量玻璃珠的100ml三角瓶中，活化10分钟，用1ml无菌吸管吸取1ml菌悬液接种装有50ml扩增培养基的250ml三角瓶中，置摇摆床内37℃恒温振荡(190rpm)培养24小时，转接装有450ml扩增培养基2500ml档板三角瓶中，37℃恒温振荡培养24小时，镜检无杂菌后再转接于装有4.5L扩增培养基的种子罐中，好氧培养(充气量3∶1)24小时，镜检无杂菌后转接有45L发酵培养基的发酵罐中，37℃好氧培养(充气量3∶1)24小时，镜检芽孢率达80％以上，停止培养。用连续离心机，12000rpm离心。收集湿菌泥，称重，按1∶1(w/v)添加适量脱脂奶粉后，干燥，粉碎，常温保存备用。
实施例2凝结芽孢杆菌活菌片、胶囊制造依据凝结芽孢杆菌菌粉的活菌数，按如下比例添加微晶纤维素、甘露醇和聚乙烯吡咯酮，使活菌数不低1.0×106cfu/g，压片。制造技术可参见在此参考的“片剂和胶囊剂”《实用药物制剂技术》第1版，人民卫生出版社，第1-30页(1999)。
凝结芽孢杆菌活菌片的配方成份 ％(重量)凝结芽孢杆菌活菌菌粉 1.00份微晶纤维素55.00份甘露醇25.00份聚乙烯吡咯酮 19.00份将上述组份中1-4组份充分搅拌均匀，然后利用常规压片技术按单位剂量压成片剂。
凝结芽孢杆菌活菌胶囊的配方成份 ％(重量)凝结芽孢杆菌活菌菌粉 15.00份份微晶纤维素25.00份葡萄糖60.00份将上述组份中1～3组中充分拌匀，然后利用常规灌装胶囊技术按单位剂量制成胶囊。
实施例3凝结芽孢杆菌活菌散剂制造依据凝结芽孢杆菌菌粉的活菌数，按如下比例添加脱脂奶粉，葡萄糖、淀粉，使活菌数不低于1.0×106cfu/g装袋。制造技术可参见在此参考的“散剂”《实用药物制剂技术》第1版，人民卫生出版社，第1～30页(1999)。
凝结芽孢杆菌活菌散剂的配方成份 ％(重量)凝结芽孢杆菌活菌菌粉 20.00份份脱脂奶粉 30.00份葡萄糖 30.00份淀粉 20.00份将上述组份中1～4组份中充分拌匀，然后利用常规散剂灌装技术按单位剂量压袋制成散剂。
关于凝结芽孢杆菌颗粒剂的制造，在此就不再赘述。
大鼠实验性溃疡性结肠炎模型的制作和治疗60只大鼠，试验前在无菌情况下，从大鼠肛门采大便作正常肠道菌群培养，然后其中10只大鼠作为正常对照，50只大鼠参照吴小平等报道的大鼠UC造型方法，加以改进，即用3％右旋葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液给空腹大鼠灌胃(ig)(1ml/100g)，每天1次，共7天，最后一次，从肛门加注DSS 1ml/只至直肠内，7天后采大便用作菌群分析。然后处死其中10只，剖腹取结肠，测定结肠湿重(g/100g体重)，甲醛固定。用爱尔新蓝溶液染色，肉眼观测溃疡和糜烂部分的点数，用卡尺测量其中一个最大的蓝染点的蓝染面积(cm2)，证实UC形成后，将大鼠分为4组，每组10只，分别用凝结芽孢杆菌活菌片(BC)107cfu、106cfu/ml、柳氮磺胺吡啶(SASP)0.02g/ml和生理氯化钠溶液(NS)，ig，一天2次，共21天，21天后取大便作肠道菌群分析。之后称体重，处死全部大鼠，按上法处理结肠标本，测相应指标，并采取肠组织块制成5％匀浆，采用髓过氧化物酶测试盒，用紫外分光析仪测定髓过氧化物酶(MPO)活性(U/g·湿片)。
肠道菌群培养分析，分别在造型前、造型后和治疗结束后，在无菌操作下，分别采取从大鼠肛门挤出的新鲜大便，称重后10倍稀释，取10-2、10-3、10-4，各稀释匀浆液0.1ml，接种到含有适宜培养基的平板上，涂匀，需氧菌在37℃培养48小时，厌氧菌在37℃培养72小时，镜检计数活菌数。治疗结果用DSS灌胃加直肠注入法给药后可形成典型的实验性溃疡性结肠炎，经用BC、SASP和NS进行21天治疗后的结果显示，各组中大鼠的体重增加，以BC107cfu/ml增重明显(p＜0.05)；各治疗组中大鼠的结肠湿重、肠溃疡和/或糜烂点数、面积、MPO活性与造型组或造型+生理氯化钠溶液组比较均有统计学显著性(P＜0.05或＜0.01)即表明BC片对大鼠实验性UC有显著治疗作用，为临床用药提供了科学依据；肠道菌群培养分析，UC造型前和治疗后均无显著性差异(P＞0.05)，BC在肠道中定植。
用凝结芽孢杆菌活菌片治疗溃疡性结肠炎的临床研究本研究方法如下。
●病例选择 按郑芝田主编《胃肠病学》中溃疡性结肠炎的诊断标准，排除肠道恶性病变。有明显出血、穿孔、痢疾、梗阻者不纳为试验对象，选择符合诊断标准患者400余例作为受试对象，让患者签署知情同意书。
●治疗方法 受试对象采用随机对照方法进行分组治疗，其中试药组患者300例，口服凝结芽孢杆菌活菌片6片/次，一天3次；对照组患者100例，口服金双歧片，6片/次，一天3次，疗程21-30天。拟在4个国家药品临床试验机构进行临床试验。
●疗效评定项目，根据患者治疗前后的腹泻、腹痛、里急后重、排黏液血便等症状改善情况及肠镜检查治疗前后溃疡病灶缩小情况进行疗效评定。
●疗效评定标准发 临床治愈溃疡面完全消失，但局部仍有轻度发红，无明显水肿，自觉症状全部消失或基本消失；显效溃疡面基本消失，仍有炎症、主要症状消失；有效溃疡病灶缩小50％以上，主要症状明显减轻；无效溃疡病灶缩小不及50％，自觉症状无改善。
●安全性评定 根据患者用药后有无主诉的不良反应及有关检查，如血象、肝肾功能检查等有无异常评定。
对大鼠实验性溃疡性结肠炎的治疗作用评价治疗方法，见前述，此处略去。
治疗结果，治疗后UC大鼠的结肠湿重明显减轻，溃疡点数和面积显著减少或缩小，MPO活性显著下降，炎症明显改善或消失，治疗效果非常显著，见表1表1 大鼠实验性结肠炎DSS造型和治疗(x±SD)
与造型组比较，*p＜0.05，**p＜0.01，与造型生理盐水组比较，△p＜0.05，△△p＜0.01。
2个凝结芽孢杆菌菌株治疗大鼠UC的效果比较治疗方法(1)大鼠UC造模型和检测项目及方法同前。(2)给药方法，分凝结芽孢杆菌TBC169和凝结芽孢杆菌(日本株，从日本三共株式地社生产的“有孢子性乳酸菌制剂”中分离培养的菌株)和生理盐水3组，每组UC造型大鼠10只，分别用107cfu/ml活菌液和生理盐水灌胃，一天2次，共21天。
治疗结果，治疗后2组UC大鼠的结肠湿重均有减轻，溃疡点数和面积都有减少或缩小，MPO活性皆有下降，与生理盐水组比较有显著性差异(P＜0.05或P＜0.01)，见表2。
组间比较，TBC169菌株组的各个参数与日本菌株组的参数比较虽无显著性差异，但也都偏小，治疗效果更好些。
结论，本结果表明TBC169菌株比日本菌株具有较突出的优异治疗效果，见表2。
表2 凝结芽孢杆菌2个菌株治疗大鼠UC的效果比较(x±SD)
与生理盐水组比较，**P＜0.0权利要求
1.凝结芽孢杆菌活菌用于制备治疗溃疡性结肠炎的药物的用途。
2.如权利要求1所述的用途，其中所述凝结芽孢杆菌活菌为活菌制剂。
3.如权利要求1或2的用途，其中所述凝结芽孢杆菌包括凝结芽孢杆菌Bacillus coagulans，TBC 169株，CGMCC保藏号No.1207。
4.一种用于治疗溃疡性结肠炎的凝结芽孢杆菌活菌制剂，其特征在于所述制剂包括凝结芽孢杆菌活菌菌粉及药用载体。
5.如权利要求4的制剂，其中所述药用载体是微晶纤维素、甘露醇、葡萄糖、脱脂奶粉、聚乙烯吡咯烷酮和淀粉中的任一种或多种的混合物。
6.如权利要求4所述的制剂，其中所述凝结芽孢杆菌活菌菌粉是由凝结芽孢杆菌液态发酵产物离心，得湿菌泥经干燥制备的，所述干燥通过冷冻干燥、喷雾干燥或烘干干燥或其结合来实现。
7.如权利要求6的制剂，其中以制剂总重量计该制剂中凝结芽孢杆菌活菌数不少于1.0×106cfu/g。
8.如权利要求4至7任一项的制剂，其中以所述制剂总重量计，所述制剂包括的组分和含量为凝结芽孢杆菌活菌菌粉 0.05％至80％微晶纤维素0％至90％甘露醇0％至90％聚乙烯吡咯烷酮0％至90％葡萄糖0％至90％脱脂奶粉 0％至90％淀粉 0％至90％其中微晶纤维素、甘露醇、聚乙烯吡咯烷酮、葡萄糖、脱脂奶粉、和淀粉的含量不能同时为0％。
9.如权利要求8的制剂，其中以所述制剂总重量计，所述制剂包括的组分和含量为凝结芽孢杆菌活菌菌粉 0.5％至70％微晶纤维素 20％至90％甘露醇 5％至90％聚乙烯吡咯烷酮 5％至90％
10.如权利要求8的制剂，其中以所述制剂总重量计，所述制剂包括的组分和含量为凝结芽孢杆菌活菌菌粉 0.05％至80％微晶纤维素10％至70％葡萄糖10％至90％
11.如权利要求8任一项的制剂，其中以所述制剂总重量计，所述制剂包括的组分和含量为凝结芽孢杆菌活菌菌粉 0.05％至70％葡萄糖 10％至90％脱脂奶粉 10％至90％淀粉 10％至90％
12.如权利要求8所述的制剂，其中所述制剂的剂型为片剂、胶囊剂、散剂或颗粒剂。
13.如权利要求4的制剂的制备方法，其特征在于所述方法包括如下步骤1)接种培养在液体培养基中接种凝结芽孢杆菌菌种，进行多级扩增培养；2)将上述步骤1)中液态培养物离心，收集湿菌泥，并将所述菌泥干燥、粉碎，得到干燥菌粉；3)将上述步骤2)所得干燥菌粉与药用载体混合，制成最终剂型。
14.权利要求13的方法，其中所述多级扩增培养为三级扩增培养。
15.如权利要求14的方法，在各级培养中培养温度为30℃至55℃，各级培养时间为6至72小时。
16.如权利要求15的方法，其中所述扩增培养中的第一级培养所使用的菌种按如下方法制备将固体凝结芽孢杆菌菌种按重量比1∶10或1∶100的比例溶于生理盐水中，在50-80℃水浴活化5-15分钟。
全文摘要
本发明公开了一种新筛选出的治疗溃疡性结肠炎的凝结芽孢杆菌活菌制剂的制造方法和应用，它包括该凝结芽孢杆菌活菌制剂治疗大鼠实验性溃疡性结肠炎的疗效，在临床上，则采用凝结芽孢杆菌活菌制剂对溃疡性结肠炎病人进行治疗和评价其有效性和安全性。本发明还包括凝结芽孢杆菌活菌制剂的配方和制造方法、制剂中活菌数含量、药用载体和制剂的剂型等内容。本发明的特点是该活菌制剂对溃疡性结肠炎的治疗有效安全，制剂稳定性好，可室温保存。病人可长期服用，无不良反应。为溃疡性结肠炎患者的治疗提供了一种新手段，为凝结芽孢杆菌活菌制剂开辟一个治疗溃疡性结肠炎的新用途。
文档编号A61K9/48GK1788737SQ200410098660
公开日2006年6月21日 申请日期2004年12月15日 优先权日2004年12月15日
发明者崔云龙 申请人:北京天施康医药科技发展有限公司, 青岛东海药业有限公司