芽孢杆菌ly152在制备微生物肥料上的应用
【专利摘要】本发明为芽孢杆菌LY152在制备微生物肥料上的应用，首先发现芽孢杆菌菌株能利用肥料中营养成分分泌3?吲哚乙酸。所述的芽孢杆菌LY152其拉丁文名Bacillus sp.，2014年8月25日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC NO 9541。制备的微生物肥料包括芽孢杆菌LY152菌剂、营养成分、助剂和填料。微生物肥料营养丰富，利于微生物生长定殖和作物吸收。微生物能快速繁殖并分泌3?吲哚乙酸，刺激作物生长使其能充分吸收利用该肥料中的养分，增产效果显著，可改善土壤微生态，增强作物抗病能力。
【专利说明】
芽孢杆菌LY152在制备微生物肥料上的应用
[0001 ] 技术领域:
本发明涉及微生物肥料制备领域，具体涉及利用产吲哚乙酸的菌株制备微生物肥料的方法及应用。
[0002]【背景技术】:
中国以占世界7%的耕地养育了占世界22%的人口，化肥的使用功不可没。化肥是重要的农业生产资料。化肥在促进粮食和农业生产发展中起了不可替代的作用，但目前也存在化肥过量施用、盲目施用等问题，带来了成本的增加和环境的污染。相关部门实施的“化肥使用量零增长行动”使得传统农业向生态农业转化越来越快，生态农业的出现催生了微生物肥料的开发与应用。微生物肥料无毒无害、不污染环境，可通过微生物的生命代谢活动，增加土壤中的氮素或有效磷、钾的含量，或可调节作物激素物质水平，或抑制植物病原菌的活动，从而提高土壤肥力，改善作物营养条件和生长环境，提高作物产量。通过微生物肥料的使用可以减少化学肥料的使用量，从而有效缓解土壤生态环境的恶化。
[0003]因此，寻求使用高效微生物肥料，提高化肥利用率，降低化肥与农药的使用量，改善生态环境、实现农业的可持续发展，是当今我国农业迫切的任务。尽管目前市场上有一些微生物肥料，如:固氮菌肥、磷细菌肥、钾细菌肥等。这些肥料存在着用量大、成本高等问题，而且还存在一些产品应用效果不稳定的问题。
[0004]吲哚乙酸(indole-3-acetic acid)是天然植物生长素的主要活性成分，参与植物发育的诸多过程。微生物可通过分泌吲哚乙酸促进植物生长。IAA可增加植物根的大小及分布，有利于根从土壤中吸收更多的营养物质。产生植物激素是微生物与宿主植物相互作用的主要机制之一，菌株容易在植株定殖，发挥作用。因此，利用具有分泌3-吲哚乙酸功能的菌株，添加其他组分，设计制备流程及工艺，生产出新型的微生物肥料具有重要意义。
[0005]利用具有吲哚乙酸合成功能的菌株制备的微生物肥料，施用以后，微生物利用底物合成吲哚乙酸，一方面，可减少调节剂化学合成过程的环境污染；另一方面，微生物更易于在作物定殖，能够活化改良土壤提高肥料利用率，并且微生物肥料中含有丰富的营养物质，易被植物吸收，在吲哚乙酸促进细胞分裂的同时保证养分吸收，实现“调节剂-养分”的协同作用，对作物抗逆增产起积极作用。
[0006]
【发明内容】
:
本发明的目的是提供芽孢杆菌LY152在制备微生物肥料的应用。
[0007]本发明是这样实现的:
芽孢杆菌LY152在制备微生物肥料上的应用，所述的芽孢杆菌LY152其拉丁文名Bacillus sp.，2014年8月25日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC NO 9541。
[0008]菌株LY152具有产3-吲哚乙酸功能，该功能不能从芽孢杆菌LY152本身显而易见或预见。将菌株LY152接种于有50ml液体R2A培养基的三角瓶中，并置于28°(:摇床培养，转速为150rpm/min，培养48h后，取其菌悬液50 yL滴置于白色陶瓷板上，同时加50 yL比色液(Salkowski比色液:50mL35%HC104 +ImL0.5moI/LFeCl3)于该菌悬液中。将白色陶瓷板置室温下避光放置30 min后观察其颜色变化。颜色变粉红者为阳性，表示能够分泌IAA，颜色越深表示分泌的强度越大，不变色为阴性，表示不能分泌IAA。菌株LY152菌悬液颜色为深粉红色，表明具有显著的IAA分泌性能。本发明的R2A培养基配方如下:0.5g酵母浸粉，0.5g胰蛋白胨，0.5g酪蛋白氨基酸，0.5g葡萄糖，0.5g可溶性淀粉，0.3g丙酮酸钠，0.3gK2HP04，
0.05gMgS04.7H20，0.5 g L-色氨酸，蒸馏水定容至 1000 mL，pH为7.2±0.2。
[0009]所述的微生物肥料的制备方法与应用，制备的微生物肥料包括芽孢杆菌LY152菌剂、营养成分、助剂和填料。其中，营养成分为酵母浸粉、葡萄糖和L-色氨酸;助剂为木质素磺酸钠和十二烷基苯磺酸钠中的任意一种或两种的组合;填料为高岭土、碳酸钙、硅藻土、膨润土、白炭黑中的任意一种或两种的组合。各组分由以下重量百分比计:芽孢杆菌LY152菌剂(有效活菌数>100亿cfu/g)l-2%，酵母浸粉5%-10%、葡萄糖2-5%、1^-色氨酸0.1-0.2%，助剂 1%-10%，填料 72.8%-90.2% ο
[0010]所述的微生物肥料在农作物生根促长上的应用。
[0011]所述的微生物肥料在农作物生根促长上的应用，其特征在于所述农作物为水稻、小麦、玉米、油菜、蔬菜、水果，在农作物种植过程中施用该微生物肥料，可有效促进作物发芽、生根及生长，减少化肥使用量，增加作物产量。
[0012]本发明首先发现芽孢杆菌菌株能利用肥料中营养成分分泌3-吲哚乙酸，可增加微生物肥料促生效果。所制备的微生物肥料营养丰富，利于微生物生长定殖和作物吸收。将其稀释后喷雾或灌根，微生物能快速繁殖并分泌3-吲哚乙酸，刺激作物生长;并且，作物在生长的同时能充分吸收利用该肥料中的养分，实现“调节剂和养分的有机结合”，提高农产品品质。所述微生物肥料增产效果显著，可改善土壤微生态，增强作物抗病能力。
[0013]【具体实施方式】:
实施例1:
芽孢杆菌LY152在制备微生物肥料上的应用，具体操作如下:
1、材料及设备
菌株:芽孢杆菌LY152，芽孢杆菌LY152其拉丁文名邓.，2014年8月25日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC NO 9541。该芽孢杆菌的发明专利申请已经于2015年2月25日被中国专利局公布。
[0014]设备:混匀机、低温气流式粉碎机、气流式粉碎机
2、操作方法及步骤
所述微生物肥料主要成分包括菌剂、营养成分、助剂和填料。
[0015](I)各组分的准备:
菌剂:将芽孢杆菌LY152制成有效活菌数大于100亿cfu/g的菌粉；
营养成分:酵母浸粉、葡萄糖和L-色氨酸；
助剂:木质素磺酸钠和十二烷基苯磺酸钠中的任意一种或两种的组合；
填料:高岭土、碳酸I丐、娃藻土、膨润土、白炭黑中的任意一种或两种的组合。
[0016](2)粉碎:将营养成分、助剂、填料分别加入到气流式粉碎机中，按325目细度粉碎，粉碎完成后备用。将菌剂加入到低温气流粉碎机中，控制粉碎温度在10°c以下，按325目细度粉碎，粉碎完成后备用。
[0017]( 3)混匀:各组分按以下重量百分比加入混匀机中，混合均匀，得到均匀分散的微生物肥料。各组分重量百分比为:菌剂1_2%，酵母浸粉5%-10%、葡萄糖2-5%、L-色氨酸0.Ι-Ο.2%，助齐 ljl%-10%，填料 72.8%-90.2%。
[0018]实施例2:
利用芽孢杆菌LY152在制备的微生物肥料在促进作物生长上的应用，具体操作如下:
1、材料:
微生物肥料制备:同实施例1;
作物:移栽5d后，长势基本一致的辣椒苗。
[0019]2、操作方法及步骤
(I)施肥方式为喷雾;施用量为0.25g/m2，清水稀释300倍后均匀喷施到辣椒苗上；以施清水为对照处理(CK)。
[0020](2)以上2个处理按每小区面积20m2布置安排，三次重复。
[0021](3)30d以后测定株高、根长，结果表明，施用微生物肥料以后，株高比对照组增加8-10%，根长比对照组增加7-9%。施用微生物肥料处理能显著促进辣椒生长。
[0022]实施例3:
利用芽孢杆菌LY152在制备的微生物肥料其配方在促进作物生长上增效作用，具体操作如下:
1、材料:
微生物肥料制备:同实施例1;
作物:移栽5d后，长势基本一致的黄瓜苗。
[0023]2、操作方法及步骤
(I)施肥方式为喷雾;施用量为0.25g/m2，清水稀释300倍后均匀喷施到黄瓜苗上。
[0024](2)试验共设置四个处理，A处理为实施例1所制备的微生物肥料处理，B处理为所述的不添加LY152菌剂的微生物肥料处理(其余组分不变)，C处理为不添加营养成分的微生物肥料处理(其余组分不变)，D处理为清水对照。以上四个处理按每小区面积20m2布置安排，三次重复。
[0025](3)30d以后测定株高，结果表明:A处理中，株高比对照组增加8-11%，效果显著;B处理中，株高比对照组增加2-3%，效果不显著;C处理中，株高比对照组增加1-2%，效果不显著。说明该微生物肥料配方中菌株与营养成分搭配具有增效作用，能显著促进作物生长。
[0026]上述实施例是对本发明的上述内容作进一步的说明，但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于上述实施例。凡基于上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
【主权项】
1.芽孢杆菌LY152在制备微生物肥料上的应用，所述的芽孢杆菌LY152，其拉丁文名Bacillus sp.，2014年8月25日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC NO 9541。2.根据权利要求1所述的芽孢杆菌LY152在制备微生物肥料上的应用，其特征在于:制备的微生物肥料包括芽孢杆菌LY152菌剂、营养成分、助剂和填料，芽孢杆菌LY152具有产3-吲哚乙酸功能；营养成分为酵母浸粉、葡萄糖和L-色氨酸;助剂为木质素磺酸钠和十二烷基苯磺酸钠中的任意一种或两种的组合;填料为高岭土、碳酸I丐、娃藻土、膨润土、白炭黑中的任意一种或两种的组合，各组分由以下重量百分比计:芽孢杆菌LY152(有效活菌数>100亿cfu/g)l-2%，酵母浸粉5%-10%、葡萄糖 2-5%、L-色氨酸0.1-0.2%，助剂 1%_10%，填料72.8%-90.2%。3.根据权利要求2所述的微生物肥料在农作物生根促长上的应用。4.根据权利要求3所述的微生物肥料在农作物生根促长上的应用，其特征在于所述农作物为水稻、小麦、玉米、油菜、蔬菜、水果，在农作物种植过程中施用该微生物肥料，可有效促进作物发芽、生根及生长，减少化肥使用量，增加作物产量。
【文档编号】A01G7/06GK106007950SQ201610339599
【公开日】2016年10月12日
【申请日】2016年5月23日
【发明人】王强锋, 侯勇, 朱彭玲, 夏中梅, 王海涛, 王赟, 曾芸, 曾显斌
【申请人】四川省兰月科技有限公司