专利名称：：一种单环单萜类化合物在制备治疗糖尿病药物中的应用的制作方法
技术领域：
：本发明涉及化合物d-柠檬烯，包括它的制备方法，以及它在治疗糖尿病包括1型和2型糖尿病中的应用。本发明涉及化合物d-柠檬烯的医学用途，尤其涉及在制药领域的新用途，具体是在制备治疗糖尿病药物中的应用。
背景技术：
：现有技术和知识已经公开了化合物柠檬烯(Cydohexene,l-methyl-4-(l-methylethenyl)-，(+)-(R)),艮卩1-甲基-4-(l-甲基乙烯基)环己烯。该化合物的分子式为C10H16，分子量为136.32，液体，不溶于水，易溶于乙醇。柠檬烯有d-柠檬烯，l-柠檬烯，dl-柠檬烯或双戊烯三种光学异构体。d-柠檬烯的化学名称为(4R)-(+)-4-异丙烯基-1-甲基环己烯。它存在于橙皮油、柠檬油、香柠檬油、莳萝油和桔油等中。沸点178'C，6rC(1.60kPa)。相对密度为0.8411。1-柠檬烯在柑桔精油中存在较少，但可以从其他芳香化合物转化而来。它存在于俄罗斯松节油、白千层油等中。沸点177.6-177.8°C(100.7kPa)，64.4。C(2.0kPa)。相对密度为0.8422。dl-柠檬烯存在于西伯利亚松针油、柠檬草油、香草油等中，沸点178°C，64.4。C(2.0kPa)，相对密度为0.8402。三者都是具有柠檬香的油状液体。在常压下蒸馏不起变化，但在空气中容易氧化生成含氧化合物和聚合物等复杂混合物，闪点48"C。药物作用的分子生物学研究显示，药物在体内的吸收、转运、分布、代谢、排泄以及与受体、酶和离子通道等靶点的结合均体现出立体选择性，因此，手性药物的不同对映体间往往显示不同的药理学和毒理学特性以及不同的药代动力学性质。在许多情况下，化合物的一对对映体在生物体内的药理活性、代谢过程、代谢速率及毒性等存在显著的差异。但是，消旋体具有某种特性时，至少有一个异构体带有该种特性也是化学常识。因此，可以认为dl-柠檬烯也具有部分d-柠檬烯的药理作用。该化合物拧檬烯由分馏的方法，分别从列出在下述植物或草药的挥发油中提取出来芸香科植物柠檬a'/r"s//wo"(L.)Burm.f.及其栽培变种的新鲜成熟果实、果皮(Pericarp)和叶，或者芸香科植物桔CV^sBlanco及其栽培变种的新鲜成熟果皮或干燥成熟果皮(中药陈皮pericarpiumCitriReticulatae)，或干燥幼果或未成熟果实的果皮(中药青皮pericarpiumCitriReticulataeViride)，或甜橙C.^ra""wm的新鲜成熟果实、果皮和种子(seed)，或者酸橙C7/msawra油'w/w的新鲜成熟果皮，或者酸橙C!Yn^awra油'訓及其栽培变种或甜橙C.awra油'聰(中药枳实FructusAurantiilmmaturus)的干燥幼果的果皮，或者马蜂橙C./2>^rix的新鲜成熟果实和果皮，或者油橙C.&wfl附/"的新鲜成熟果实和果皮，或者芸香科植物佛手C/r"sme^cflL.松rSawo^c^toSwingle的新鲜成熟果皮或干燥果皮，或者伞形禾斗植物羌活iVo寧e，.鹏/"c/s膽TingexH.T.chang或宽叶羌活AT./o^m//Boiss的根茎及根，或者姜科植物姜Zz'"g/6wo#c/"fl/e(Willd)Rose.的新鲜根茎，或者紫苏叶尸en7/"如fe^^w(L.)Britt.的根，或者木兰科植物玉兰MDesr.[M/ze/to/eto(Buch.)Dandy;Mcow5p/cwaSalisb;M.yulanDesr.]或武当玉兰Afs;re"ger/Pamp.(中药辛夷FlosMagnoliae)的干燥花蕾，或者荆芥Sc/^o"e戸tote"w/o""Briq的干燥地上部分，或者伞形科植物北柴胡5w/7/ewn/mC/w'"emeDC.或狭叶柴胡5.scorzowe/7》/z'M附Willd々/cafw附L.var.>scwzowm》//m/wLedeb.)(中药柴胡RadixBupleuri)，或曰本三岛柴胡及々/ca似m丄.@.化0^0"6"》//"附wiUdvar*Nakai)的干燥根，或者唇形禾斗植物薄荷Me"//w/w//oc_y/>:Briq.(Morrvera/sL.ww*Aa/7/oca/3a:Briq.)和家薄荷Briq.&rp—rasoms(Malinvand)C.Y.WuetH.W.Li(Marve腦'sLpzj^mscmsMalinvaud.)的全草，或者三白草禾斗植物蕺菜/fow^vmVaThunb.(中药鱼腥草HerbaHouttuyniae)的全草，或者菊科植物野菊C/o^aw决ewwm/"cfcwwL.的头状花序，或者胡椒禾斗植物风藤P^erfeK/sMrafb/zo&^Ohwi及石楠藤Piperwallichii(Miq)Hand-Mass(中药海风藤CaulisPiperKadsurae)的干燥藤茎，或者唇形科植物活血丹Glechomalongituba(Nakai)Kupr.(中药连钱草HerbaGlechomae)的干燥地上部分，或者芸香科植物青椒Zi2wf/oxy/M附sc/wVw》/z'MmSieb.EtZucc.或花椒ZafAojqv/mw26wwgeawM/wMaxim或野花椒Zw'附"/fl似Hance的干燥成熟果皮，或者伞形科植物茴香Foem'cw/wwVM/gawMill.(中药小茴香FructusFoeniculi)的干燥成熟果实，或者芸香科植物酸橙C/frwm/ra"^wL.(中药枳壳FructusAurantii)及其栽培变种的未成熟果实，或者伞形科植物页蒿Ozn/wcwr/L.(中药藏茴香Fructuscaricarvi)的果实，或者藜科藜属植物土荆芥C7^wqpo&MWam6ras/o/tfesL.的全草，或者菊科植物艾爿rte附/w》wgy/Levl.etVant.的干燥叶，或者禾本科植物芸香草qvw60pogow(Nees)A.Camus的全草，或者松科植物白皮松尸/w附6wwgeawaZucc.(中药白松塔StrobilusPiniBungeanae)的球果(cones),或者杜鹃花科植物黄花杜驟朋odoflfe打d謂fl"f/zo/ogo"oz血Maxim.，或者菊科飞蓬属植物短葶飞蓬五Wgeraw6rev^ca/—Vant.)Hand.-Mazz(中药灯盏细辛HerbaErigeronisBreviscapi)的干燥全草，或者菊科植物黄花蒿Afew/w'aa"m/aL.(中药青蒿HerbaArtemisiaeAnnuae)的全草，或芸香科芸香属植物芸香RutagraveolensL.(中药臭草HerbaRutae)的全草，或樟科植物山鸡椒丄/teeacw&6a(Lour.)Pers.(中药荜澄茄FructusLitseae)的干燥成熟果实，或者木兰科植物八角茴香IlliciumverumHook.f.的干燥成熟果实，或者菊科植物天名精CarpeskimabranoidesL.(中药鹤虱FructusCarpesii)的干燥成熟果实，或者唇形科植物广藿香尸ogostewowcaW/"(Blanco)Benth.或藿香々astac/en/go郞(Fisch.etMey.)O.Ktze的全草，或者莎草科植物莎草Q^pen/sraft/w^MSL.的根茎，或者橄f览禾斗植物没药树Co附附z》/ora附Fr/wEngl.树干皮部渗出的油胶树脂，或者姜科植物阳春砂Jmomwmw7/owmLour.，縮^!爿vz7/osw附Lour.VarjcaW/n'o/^fesT.L.WuetSenjen，海南^>A/owg///gw/,eT丄.Wu(中药砂仁FructusAmomi)的干燥成熟果实，或者唇形科植物紫苏叶Perilkfrutescens(L.)Britt.的干燥叶子，或者败酱科植物缬草Ki/en》"flo^c"a//sL.或宽叶缬草L.var.latifoliaMiq的根和根茎，或者豆科植物紫苜蓿Afe&cago<SW^vaL.或南苜蓿AfeJ/cago/z/^/cfaGuertn的全草，或者芸香科植物山油柑Jcra/^c/w'a/^/w"c"/ato(L)Miq或鲍尔氏山油柑J.6awer/的叶子，或者唇形科植物石荠苎M.scabra(Thunb.)C.Y.WuetH.W.Li的全草，或者唇形禾斗植物柠檬罗勒Oc/mw附6o7/cw/wvar.citriodorum的叶。此外，在植物精油除萜及樟脑油蒸馏加工或者制造合成樟脑时，柠檬烯作为副产品大量生成。柠檬烯主要用作磁漆、假漆和各种含油树脂、树脂蜡、金属催干剂的溶剂，用于制造合成树脂和合成橡胶。用于食品、洗涤剂等日用香精，尚可配制食用人造柑桔油，如桔味香精的配方。美国专利US4，083，994公开了d-柠檬烯可以用作利胆药的活性组分。此夕卜，美国专利4,083,994所公开的毒性实验显示，d-柠檬烯的毒性非常低。d-柠檬烯的高度生物学的安全适合于口服给药。大鼠口服d-柠檬烯(d-limoneiie)的半数致死量LD50为6.0ml/kg。现有技术和知识公开了d-柠檬烯的部分药代动力学数据。d-柠檬烯口服后经胃肠迅速吸收，可分布到体内各个部位，48小时内75%95%的给药量经尿排泄。柠檬烯主要从尿中排泄，约60%在24小时内经尿排泄，5%经粪便排泄，2%经呼出的C02排泄。主要代谢物是双氢紫苏酸和紫苏酸，由约35%的血桨中的柠檬烯转化而得。服用柠檬烯后，在血浆中测得紫苏酸甲脂和双氢紫苏酸甲脂，但仅有5%是从初始的柠檬烯转化而来。柠檬烯-1，2-二醇是另一代谢物，由约18%柠檬烯的初始量转化而得。糖尿病是一种复杂的疾病，其特征为高血糖症。这个疾病可以分成两个主要的子集胰岛素依赖型(IDDM)，也被称为1型糖尿病，和非胰岛素依赖型(NIDDM)，也被称为2型糖尿病。(世界卫生组织糖尿病研究组，WHO技术系列报告844，1994)。1型糖尿病在机体的免疫系统摧毁了胰岛P细胞时形成，这细胞是在机体中唯一的制造调节血糖的激素胰岛素的细胞。1型糖尿病可能占全部已诊断的糖尿病的5-10%2型糖尿病可能占全部己诊断的糖尿病的90-95%。它通常开始时有胰岛素抵抗，一种以细胞不能完全地利用胰岛素的紊乱。当需要胰岛素增加分泌时，胰腺逐渐丧失它生产胰岛素的能力(美国国家卫生部疾病预防中心，国家糖尿病情况说明书，2003)。1型和2型糖尿病都能够导致并发症微血管、大血管和神经病变。糖尿病能够影响机体的许多部分，并能够导致系列并发症例如象失明、肾脏损伤、和截肢。2003年，中国疾病预防和控制中心估计中国大约有4000万糖尿病人。2005年欧盟估计欧洲有大约2250万人患有2型糖尿病。2005年，美国国家疾病预防中心估计美国有2080万人有糖尿病，占人口的7.0%。糖尿病的总费用在2002年是1320亿美元(包括直接费和间接费)，直接的医疗费用是920亿美元，间接费用是400亿美元(包括伤残，丧失工作能力和过早死亡)。2005年，世界卫生组织估计，全球糖尿病患者为1.8亿。目前，治疗的2型糖尿病的药物主要有下面几类1.双胍类药物。疗效低，副作用较大，久用常产生乳酸酸中毒。2.磺尿类药物。副作用较大，久用常产生低血糖症。并且，可使胰小岛发生疲劳，甚至衰竭，内源性的胰岛素分泌功能进一步减少，发生药物继发性失效。3.葡萄糖苷酶抑制剂类药物。仅仅延迟葡萄糖在小肠的吸收，降低餐后血糖水平。它不能刺激胰岛素的分泌，也不能改变空腹胰岛素和C肽水平。4.单独使用胰岛素治疗2型糖尿病或者使用上述1-3类药物配合胰岛素，内源性的胰岛素分泌功能终将完全丧失，最后产生胰岛素的依赖性(世界卫生组织糖尿病研究组。WHO技术系列报告844，1994)。上述所有的药物都不能稳定地降低血糖水平。同时，病人将需要逐年加大这些药物的治疗剂量。英国糖尿病前瞻性研究指出，所有药物都不能制止空腹血浆葡萄糖水平持续性上升，表明胰岛细胞功能进行性衰竭。(英国糖尿病前瞻性研究组，英国糖尿病前瞻性研究，1977-1992)目前的药物却难以稳定地控制疾病的进程，糖尿病因此在世界上被称为尚无一例治疗痊愈的疾病，糖尿病人将终身用药。现在，制药公司和科学家正在寻找老药的新的替代品，以使口服药能够更为有效并且副作用更小，同时，也在寻找全新的、作用机制完全不同的药物。
发明内容发明的摘要本发明的目的在于提供d-柠檬烯的新用途。即在制药中的新应用。本发明涉及d-柠檬烯作为制备治疗糖尿病的药物方面的应用。具体涉及d-柠檬烯作为制备降低血糖药的应用。与治疗糖尿病的常规合成化学药物双胍类药物、磺尿类药物或葡萄糖苷酶抑制剂类药物不同，这种新的治疗糖尿病的药物是从天然植物中提取出来的油状液态化合物。d-柠檬烯存在于不同的挥发油中，特别是在柠檬、桔、酸橙、柚子和香拧檬的油中。d-柠檬烯可以从柠檬、桔、酸橙、柚子和香柠檬的果皮的蒸汽提取物获得。高纯度的d-柠檬烯的油产品的技术等级的蒸馏物，例如从大约95-96%。也可采用市售品。d-形态的柠檬烯可以在商业上获得自吉水南方药物油厂(江西吉^C，中国)，或佛罗里达化学公司(LakeAlfred，美国佛罗里达)。挥发油和d-柠檬烯的提取方法蒸馏的方法因温度高，容易产生聚合变质，因此，大多采用冷榨法。采用芸香科植物柠檬a'自//mo"(L.)Burm.f.的新鲜成熟果皮，或者采用芸香科植物桔a'/rusBlanco及其栽培变种的新鲜成熟果皮，或采用甜橙C."wrawft'M附的新鲜成熟果实、果皮和种子(seed)，或者采用酸橙C/一m/ra"rtww的新鲜成熟果皮，或者马蜂橙C力"r/^的新鲜成熟果实和果皮，或者采用油橙C.^gam/"的新鲜成熟果实和果皮，或者采用芸香科植物佛手CrtmsL.Fw&rco由cO;foSwingle的新鲜成熟果皮，撕碎后直接冷榨，再经过离心或者过滤，得到挥发油。或采用芸香科植物桔aYrwswft'cw/atoBlanco及其栽培变种的干燥成熟果皮陈皮pericarpiumCitriReticulatae或干燥幼果或未成熟果实的果皮青皮pericarpiumCitriReticulataeViride，或者采用酸橙Cz7r附flwna"rt'ww及其栽培变种或甜橙C.m/raw"ww(中药枳实FructusAurantiiImmaturus)的干燥幼果的果皮，使用干果皮，应以每份果皮加8份水泡软，一般泡3-4h。或者，直接采用果实取油。选用清洁的柑桔类，橙类和柠檬类果实送入不同的磨油机内取油。主要有FMC工艺和布朗工艺(BOE)，在一些地区和国家还有特殊的磨油机。精油除萜工艺，在沸点178i:，6rC(1.60kPa)分馏时，可以分离得到d-拧檬烯。或者，以常规方法分离精制后，可以用在本发明中。这种冷榨的方法获得的冷榨油和精油，可以获得纯度在卯％以上的d-拧檬烯。进一步在稀的NaOH或者碳基加成剂(如盐酸胲)中蒸馏以除去醛，则纯度可达到99.5%。美国专利US4，083,994已经公开了d-柠檬烯的药物毒性动物实验，d-柠檬烯的毒性非常低。显示d-柠檬烯作为口服药物的高度安全性。本发明首先在临床观察中发现中药羌活、陈皮等有明显的降低2型糖尿病人餐后血糖的作用。进一步的研究观察到柠檬油和陈皮油有更加强大的降低血糖作用。最终发现其中的药理活性成份是化合物柠檬烯的主要光学异构体d-拧檬烯。在本发明的动物实验中，本品对药物诱导糖尿病大鼠表现出明显的降血糖作用。经口服给予实验动物d-柠檬烯(0.8-2.4ml/kg)后0.5-2小时内，动物血浆葡萄糖水平大幅度降低，药物作用在用药2小时后逐渐消失。本发明能降低药物(链脲佐菌素，streptozotocin)诱导所致的重度1型或者2型糖尿病模型大鼠的空腹血糖。将0.8-2.4ml/kg的d-柠檬烯灌胃给予糖尿病大鼠，0.5-2小时后，实验大鼠的血糖明显下降。同时，d-柠檬烯并不降低健康大鼠的正常的血糖。d-柠檬烯能够降低2型糖尿病大鼠的升高的血糖，但是，它也能够降低1型糖尿病大鼠出乎意料之外的。一个可能的解释是，药物是通过一种与其他药物完全不同的机制来影响胰岛细胞的分泌的。在临床实验中，数量有限的2型糖尿病病人在每日3餐后服用d-拧檬烯0.9ml，结果表明，该药能明显而稳定地降低用药者餐后的血糖水平。未见任何明显的副作用发生。用药后使滞后的血糖峰值时间发生的移动，暗示糖尿病将可能被药物治愈。d-柠檬烯在动物和临床实验中所显示的另外一些特性，也是非常特别的。达到有效剂量后，增加剂量并不能使血糖降低更多，同时，也不会产生高血糖后的低血糖反应。相反，随着治疗时间的长度的增加，病人的原有的低血糖反应减缓或者消失。动物实验和临床实验结果显示，本发明涉及已知化合物d-柠檬烯的新的医学用途，可以开发出一种新型的抗糖尿病药物。另外，这是一种来自天然植物中的非合成化学药物，存在于人类数百万年以来形成的食物链上，毒性非常低。本发明可以含有一种或者多种药学上可接受的载体，即药学领域常规的药物载体，如水、淀粉、纤维素、明胶、琼脂、p-糊精、豆磷脂或卵磷脂等，本发明的化合物d-柠檬烯可通过口服和注射的方式给药。口服给药时，优选的形式是片剂、包衣片剂、颗粒剂、软胶囊、栓剂和注射液。本发明的化合物d-拧檬烯的常用剂量可以根据用药途径、患者病情的严重程度，糖尿病的类型等变化，日剂量可以是1.5-4.5ml，优选每日剂量2.4-3.0ml。每日进餐三次，分三次服用。或者服药的次数与进餐次数相同。在第一口食物入口后的l-10分钟内服用。部分患者用药后有轻度口干现象；少数患者可出现头昏、乏力、心悸、便秘、口唇疱疹等，在减量或停药后反应可消失。健康人服用d-柠檬烯，并不降低餐后或者空腹血糖水平。具体实施方式下面将描述本发明的几个实施例，但本发明的内容完全不局限于此。发明的详细说明实施例1从上述新鲜果皮或者干燥果皮中提取挥发油，并从中提取d-柠檬烯采用芸香科植物拧檬CzYr^//mo"(L.)Burm.f.的新鲜成熟果皮，撕碎后直接送进压榨机内冷搾，或者采用芸香科植物桔a'/n/sr幼'cM/atoBlanco及其栽培变种的干燥成熟果皮陈皮pericarpiumCitriReticulatae,以每份果皮加8份水泡软，一般泡3-4h。1.浸泡将果皮浸泡在1.53.0%的石灰水中，保持PH值1(K14，浸泡6-10h，果皮与石灰水比例为1:4~6之间。硬化果皮，使之适合压榨。除石灰之外，浸泡还可使用硫酸氢钠、碳酸钠、硫酸钠等。2.清洗将果皮放入清水中洗去石灰和杂质。3.压榨通过压榨机将果皮中的精油压出。4.过滤或分离从冷榨机或者压榨机出来的油水混合物，带有较多的果皮渣，具有不定的黏稠度，需要进行过滤和多次沉淀，以减轻离心分离机的压力。滤渣可经蒸馏器回收精油。5.离心分离油水的分离采用高速油水分离机，进行油水分离。分离完毕后，应让分离机空转2-3min，大量冲入清水，将残存的油冲出。为了促使精油从油乳液中分离，可以加入大约2%的氢氧化钠和少量硫酸钠于榨油用的水中。6.精制和脱蜡轻微混浊的粗精油，用无水硫酸钠脱水，然后静置澄清透明后滤去残渣，再离心分离。混浊的粗精油，先经静置沉淀，再用无水硫酸钠过滤。沉淀残渣，再离心分离。将粗精油置于低温下静置，蜡质析出后，再用离心分离法除去。8匸条件下，6d左右即可析出。在-25'C下，2d可析出。采用柠檬果皮可以获得纯度达到90%以上的d-柠檬烯，采用桔皮可以获得纯度达80-90%的d-柠檬烯。7.提纯冷榨获得的d-柠檬烯，可以用蒸馏的方法，从蒸馏器中在沸点178°C，6rC(1.60kPa)分馏得到纯度达到大约99%的d-柠檬烯。进一步在稀的NaOH或者碳基加成剂(如盐酸胲)中蒸馏以除去醛，则纯度可达到99.5%。但是，纯化以后的d-柠檬烯，如果不加以保护，则会很快与空气中的氧反应，转化为纯度为95-96。/。的粗d-柠檬烯。实施例2将挥发油d-柠檬烯制成可服用的药片或者注射用针剂-将挥发油以喷雾方式与一定量的P—糊精混和，加入一定量的水，保持在一定的温度下，搅拌lh，冷藏放置24h，滤过、抽干，加少量乙醚洗涤2次，在5(TC以下干燥为粉末，再加入足量的水，回收挥发油，计算回收率。挥发油与p-糊精的投料比为1:9(ml:g)，搅拌速度100r/min，包合温度为4(TC，P—糊精与加入水的比例为1:7，其挥发油回收率为88.0%。或者将25g豆磷脂加入蒸馏水中，在乳化机内搅拌3次，每次3分钟，然后加入500ml的d-柠檬烯，以同样方式在乳化机内搅拌3次，再加入5000ml蒸馏水，使油水充分混合。再与P—糊精混合，制片。或者，将油水混合液过滤，灌封，10(TC灭菌30分钟，使其成为针剂。实施例32型糖尿病模型大鼠实验2型糖尿病大鼠实验模型的建立。采用速发型类似NIDDM的模型。一次足量给予动物Wistar大鼠链尿佐菌素(STZ)，造成B细胞大量损伤，胰岛素的合成和分泌减少，引起糖代谢紊乱，导致糖尿病。将STZ用0.1mol/L无菌枸掾酸钠缓冲液新鲜配制成2%的溶液，调节PH值至4.5，滤菌器过滤除菌。大鼠禁食18小时按50-65mg/kg尾静脉一次注射溶液，24小时血糖大于等于16.7mmol/L，即可作为成功模型。该速发型模型通常单剂量达到50mg/kg体重不出现自然缓解现象，第6-27天，胰岛有一定程度再生，功能部分恢复，但未达到正常，仍然处于高血糖状态，适合于NIDDM的相关研究。链尿佐菌素注射后10小时内给予大鼠喂饲10%葡萄糖，以防止低血糖。在相关的实验中，STZ溶解入0.1M柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液(114.2)以组成60-65mg/kg重量溶液，溶液立即注射入尾静脉。IO天后，在确定检验血糖水平充分高后，实验材料被给予。治疗7天，使用正规方法从动物获得血，一个血糖监测系统强生公司的SureStep血糖机被利用于测量血糖水平。在相关的饲养方法中，使用7周大的雄性Wistar大鼠(重量210，+-.10g)每组12个。老鼠在房间温度摄氏22度下饲养，湿度50%和光照-黑暗各12小时(7:00大约19:00)。自由迸食和饮水。每天在禁食4小时后，以灌胃的方式加入d-柠檬烯以0和2.4ml/kg身体重量进入老鼠体内。灌胃后2小时，从大鼠尾静脉抽血，检验其血糖水平。实验结果如表1显示，P〈0.01，有非常显著的差异，疗效非常显著。说明药物d-柠檬烯能够明显降低2型糖尿病模型大鼠的空腹血糖。表1:2型糖尿病模型大鼠治疗前后比较(S土S)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>实施例4:1型糖尿病大鼠实验1型糖尿病大鼠实验模型的建立。最近几年，更多的人们己经明确表达观察到了STZ-诱导的实验糖尿病模型，虽然，原则上它是l型模型，可能用于如同一个2型模型。无论如何，因为STZ-诱导的实验糖尿病模型大鼠在发病后的第1-6天，类似依赖于胰岛素的1型糖尿病，因此，在这期间，STZ-诱导的糖尿病大鼠是l型糖尿病模型大鼠。STZ-诱导的糖尿病大鼠，在注射STZ后的第3-6天中，每天在禁食4小时后，以灌胃的方式加入d-柠檬烯2.4ml/kg身体重量进入老鼠体内。灌胃后2小时，从大鼠尾静脉抽血，检验其血糖水平。结果下表显示以d-柠檬烯治疗1型糖尿病模型大鼠，治疗效果显著。表2IDDM组和d-柠檬烯治疗组血糖水平的比较(S土S)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>实施例5l型链尿佐菌素糖尿病大鼠链脲佐菌素(streptozotocin)链脲佐菌素能够选择性损伤胰岛P细胞，引起实验性糖尿病。给大鼠注射链脲佐菌素后，血糖水平的改变也可分为三个时相①早期高血糖相，持续约12小时，乃此药抑制胰岛释放所致；②低血糖相，持续约610小时，可能是由于胰岛P细胞破坏，大量胰岛素释放，是血糖显著降低；③24小时后出现稳定的高血糖相即糖尿病阶段，此时大部分胰岛P细胞已呈现不同程度的损伤和破坏。与四氧嘧啶糖尿病不同，链脲佐菌素引起的糖尿病高血糖反应及酮症均较缓和。根据弗氏完全佐剂(CFA)和弗氏不完全佐剂可以激发机体免疫功能的特点，将小剂量STZ和CFA，IFA联合使用，可激活大鼠体内的淋巴细胞诱导胰岛B细胞发生轻度改变，在此基础上被激活的具有细胞毒性作用的淋巴细胞可将轻度变性的细胞当作靶细胞进行攻击，从而导致自身免疫过程的发生，使胰岛B细胞损害进一步加重，引起糖尿病。采用每周1次连续3周腹腔内注射CFA和IFA(弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂)0.5ml和STZ(25mg/kg)方法，建立了迟发型Wistar大鼠糖尿病模型。迟发型Wistar大鼠糖尿病模型建立的可能的机理为注射CFA后激活大鼠体内淋巴细胞，注射小剂量STZ后诱导胰岛e细胞发生轻度改变，在此基础上，来自脾细胞的被激活的具有细胞毒作用的T淋巴细胞将上述轻度变性的胰岛P细胞当作靶细胞进行攻击，从而导致自身免疫过程的发生，使胰岛P细胞损害加重。经过3周注射CFA，IFA和STZ，上述自身免疫作用不断被强化，使胰岛e细胞损伤由量变到质变，最终诱发大鼠糖尿病的发生。大鼠正常进食和饮水，第一天腹注射0.5mlCFA，第2天按25mg/kg体重注射STZ。第2周的第一天腹腔注射0.5mlIFA，第2天按25mg/kg体重注射STZ。第3周的第1天腹腔注射0.5mlIFA，第2天按25mg/kg体重注射STZ。连续三周。这种迟发型STZ动物模型有免疫学的改变，更接近人类IDDM的发生发展和变化。每天在禁食4小时后，以灌胃的方式加入d-柠檬烯0.8ml/kg身体重量进入老鼠体内。灌胃后2小时，从大鼠尾静脉抽血，检验其血糖水平。结果下表显示以d-柠檬烯治疗1型糖尿病模型大鼠，治疗效果非常显著。表3:1型糖尿病模型大鼠治疗前后比较(^士S)<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>实施例6一男性患者，56岁，2型糖尿病史10年，空腹血糖在正常范围内，餐后血糖在15.6mmol/L(281mg/dl)范围内。餐后4-6小时后，无进食，常发生低血糖反应。通过7天的治疗，每天三餐，在第一口饭后5-10分钟内，口服给予d-柠檬烯0.9ml，早餐后血糖最高峰值11.8mmol/L(212mg/dl)，发生在餐后1.25小时。继续治疗12周，进餐即口服给予d-柠檬烯0.9ml，餐后血糖水平均在正常范围内。早餐后血糖最高峰值10.4mmol/L(212mg/dl)，峰值时间前移到餐后0.75小时。有时，在晚餐后，不服任何药物，餐后血糖在正常范围内。午餐后，不服药，餐后血糖或者在正常范围内，或者血糖水平稍高于正常水平。但早餐目前仍然不能停药。餐后6-8小时后，无进食，无低血糖反应。病人在此期间保持适度的中等饮食。实施例7一妇女，58岁，2型糖尿病史15年，空腹血糖在8.6-13mmol/L(155-234mg/dl)之间，餐后血糖最高为23mmol/L(414mg/dl)。通过7天的治疗，每天三餐，在第一口饭后5-10分钟内，口服给予d-柠檬烯0.9ml，早餐后血糖最高峰值18.7mmol/L(337mg/dl)在1.25h。治疗前后对比，血糖平均降低6.99mmol/L(126mg/dl)病人在此期间保持适度的中等饮食。实施例8健康志愿者的实验一男性，24岁，健康无任何疾病。空腹血糖在4.4-5.3mmol/L(79-96mg/dl)波动，餐后血糖在6-7mmol/L(108-126mg/dl)之间。通过7天的治疗，每天三餐，在第一口饭后5-10分钟内，口服给予d-柠檬烯0.9ml，早餐后血糖最高峰值6.3-8.4mmol/L(115-150mg/dl)在餐后0.5小时。治疗前后对比，血糖基本无变化。受试者在此期间保持适度的中等饮食。实施例9健康志愿者的实验一妇女，46岁，健康无任何疾病。空腹血糖在5.0-5.4mmol/L(79-96mg/dl)波动，餐后血糖在8-12.2mmol/L(144-202mg/dl)之间。糖耐量实验异常。通过7天的治疗，每天三餐，在第一口饭后5-10分钟内，口服给予d-柠檬烯0.9ml，早餐后血糖最高峰值10.3-11.7mmol/L(185-211mg/dl)在在餐后0.5小时。治疗前后对比，血糖基本无变化。受试者在此期间保持适度的中等饮食。工业应用性单萜类化合物柠檬烯的原料主要来自芸香科植物柠檬OYn^//mow(L.)Burm.f.及其栽培变种的新鲜成熟果实和果皮(Pericarp)，或者芸香科植物桔Cz7msr劝'c"/atoBlanco及其栽培变种的新鲜成熟果皮或干燥成熟果皮(中药陈皮pericarpiumCitriReticulatae)，或干燥幼果或未成熟果实的果皮(中药青皮pericarpiumCitriReticulataeViride)，或甜橙C."wra"ft'M附的新鲜成熟果实、果皮和种子(seed)，或者酸橙C/Zms^ra"ft、w的新鲜成熟果皮，或者酸橙Cz7r^awra"riw附及其栽培变种或甜橙C.a"raw^//w(中药枳实FructusAurantiiImmaturus)的干燥幼果的果皮，或者马蜂橙C./i"/rix的新鲜成熟果实和果皮，或者油橙C.&《"w'"的新鲜成熟果实和果皮，或者芸香科植物佛手C/伊船w^'c"L.FarS"rco&c^fcSwingle的新鲜成熟果皮或干燥果皮。原料来源丰富而广泛，产量非常高。其次，也可从其他的多达约80种植物药的挥发油中提取。产地包括欧洲、亚洲、非洲、澳洲、北美和南美洲。其中产量最高的是南美洲的巴西和美国的佛罗里达州，其次是澳大利亚和南非。原料产地遍及全世界，价格低廉。其次，柠檬烯的加工方法简单，最简单的加工方法是通过压榨的方式获得d-柠檬烯含量高达80-90%以上的桔油和柠檬油。d-柠檬烯可以方便地通过高剪切乳化机进行油水混合，制成注射针剂；或加入e-糊精中制成片剂。或者以喷雾方式加入e-糊精中制成片剂，也可以直接制成油剂软胶囊。因此，适合于工业化生产。权利要求1.化合物d-柠檬烯(d-limonene)在制备治疗糖尿病药物中的用途。2.根据权利要求1,化合物d-柠檬烯在制备治疗1型糖尿病药物中的用途。3.根据权利要求1,化合物d-柠檬烯在制备治疗2型糖尿病药物中的用途。全文摘要本发明涉及一种单环单萜类化合物d-柠檬烯在制备治疗糖尿病的药物中的用途。特别涉及该化合物在制备治疗1型糖尿病或2型糖尿病的药物中的用途。与其他化学合成的抗糖尿病药物不同，该化合物是一种天然化合物，其毒理学方面的高度安全性适合于口服。文档编号A61K31/01GK101375840SQ20071001259公开日2009年3月4日申请日期2007年8月27日优先权日2007年8月27日发明者刚舒申请人:刚舒