含吡啶基二硫化物部分的聚合连接基的制作方法

专利名称：含吡啶基二硫化物部分的聚合连接基的制作方法
技术领域：
本发明涉及药物递送体系。特别是，本发明涉及包含吡啶基二硫化物部分的基于 活化的聚合物的药物递送连接基(linker)，该连接基改善含巯基的生物活性部分的缀合。
背景技术：
最近几年，已提出许多方法用于将治疗剂递送至体内并改善那些药物的生物利用 度。一种尝试是将该药物作为可溶性运送体系的一部分加入。该运送体系可包括永久的基 于缀合物(conjugate)的体系或前药。特别是，聚合物运送体系可改善药物的溶解性和稳 定性。例如，水溶性聚环氧烷与治疗部分如蛋白质和多肽的缀合是已知的。参见，例如，美 国专利4，179，337(‘337专利)，其内容在此引入作为参考。该'337专利公开了用PEG修 饰的生理活性多肽在体内循环较长的时间，且具有降低的免疫原性和抗原性。也已认识到其它改善。例如，基于聚合物的包含苄基消除体系、三烷基锁定体系 (trialkyl lock system)等的药物递送平台体系由EnzonPharmaceuticals公开作为可 释放地递送蛋白质、肽和小分子的手段。还参见Greenwald，等人，J. Med. Chem. Vol.42, No. 18，3657-3667 ；Greenwald,等人，J. Med. Chem. Vol. 47，No. 3，726-734 ；Greenwald,等 人，J. Med. Chem. Vol. 43，No. 3,475-487 上述每一个的内容在此引入作为参考。最近，提出将聚乙二醇(PEG)用于与广泛的生物活性化合物(包括寡核苷酸、靶向 蛋白质、肽等)缀合。对于缀合，聚合物的羟基末端-基团必须首先转化为反应性官能团。 该过程经常称为"活化"且产物称为"活化的聚环氧烷"。其它聚合物被类似活化。对于 该目的，一些官能团是现有技术中已知的。尽管有上述尝试和进步，但对于含巯基的部分仍在寻找PEG和聚合物缀合技术的进一步改善。本发明解决了该需求以及其它问题。

发明内容
为克服上述问题并改善药物递送技术，提供了新的支链聚合物和以其制备的缀合 物。在本发明一个方面，提供式(I)的化合物<formula>formula see original document page 17</formula>
其中R1是基本上非抗原性的水溶性聚合物；A是封端基团，或
<formula>formula see original document page 17</formula>
Y1和Y，i独立地为S、0或NR2 ；Y2 和 Y，2 独立地为 S、0、SO、SO2, NR20 ；Y3和Y’ 3独立地为H、离去基团、活化基团、官能团，或<formula>formula see original document page 17</formula>L1^3和L’ η为独立选择的双官能连接基；R2_n、R’ R2tl独立地选自氢、氨基、取代的氨基、叠氮基、羧基、氰基、卤素、羟 基、硝基、硅烷基醚、磺酰基、巯基、C1^6烷基巯基、芳基巯基、取代的芳基巯基、取代的Ch6烷 基硫基、CV6烷基、c2_6烯基、c2_6炔基、c3_19支链烷基、c3_8环烷基、CV6取代的烷基、c2_6取代 的烯基、c2_6取代的炔基、c3_8取代的环烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、CV6 杂烷基、取代的Cp6杂烷基、CV6烷氧基、芳基氧基、C1^6杂烷氧基、杂芳基氧基、c2_6烷酰基、 芳基羰基、C2_6烷氧基羰基、芳基氧基羰基、c2_6烷酰基氧基、芳基羰基氧基、c2_6取代的烷酰 基、取代的芳基羰基、C2_6取代的烷酰基氧基、取代的芳基氧基羰基、c2_6取代的烷酰基氧基 和取代的芳基羰基氧基；R12和R’ 12独立地选自氢、羟基、离去基团、官能团、药物、靶向剂、诊断剂、取代的 C1^6烷基硫基、Ch6烷基、C2_6烯基、C2_6炔基、C3_19支链烷基、C3_8环烷基、CV6取代的烷基、c2_6 取代的烯基、c2_6取代的炔基、c3_8取代的环烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、(V6杂烷基、取代的(V6杂烷基、Cp6烷氧基、芳基氧基、C1^6杂烷氧基、杂芳基氧基、c2_6烷酰基、芳基羰基、c2_6烷氧基羰基、芳基氧基羰基、c2_6烷酰基氧基、芳基羰基氧基、c2_6取代的烷 酰基、取代的芳基羰基、C2_6取代的烷酰基氧基、取代的芳基氧基羰基、c2_6取代的烷酰基氧 基、取代的芳基羰基氧基、马来酰亚氨基、乙烯基、取代的砜、氨基、羧基、巯基、酰胼和胼基 甲酸基(carbazate)；(a)、(a，)、(d)和(d，)独立地为0或正整数，优选0或1 ；(b)和(b’)独立地为0或正整数，优选0或1至10的整数，更优选0或1，且最优 选0;(c)和(c’)独立地为0或正整数，优选0或1至10的整数，更优选0或1，且最优 选1;(e)和(e，)独立地为0或1 ；(g)和(g，)独立地为0或1，优选1 ；条件是(a)和(g)不同时为0。在本发明某些优选方面，该聚合物药物递送体系包括半胱氨酸。在一些优选方面，R8_n或R’ 8_n的至少一个为吸电子基团如取代的酰氨基、酰基、 叠氮基、羧基、烷基氧基羰基、氰基和硝基，优选硝基，且更优选硝基作为R8或1 ’ 8。在另一优选方面，R12或R’ 12选自药物、靶向剂或诊断剂。在一些特别优选的方面，R1包括分子量为约5，000至约60，000的直链或支链的聚 (乙二醇)残基，Y1和Y，工为0，Y2和Y，2为NR20, (a)和(a，)为0或1，(b)和(b，)为0 或1，(c)和(C，)为1，且(e)和(e，)为0。在一个特别方面，R2_7，R，3_7，R9_n和R，9_n选 自氢、甲基和乙基，且每个更优选为氢。在本发明另一方面，提供制备本文所述的化合物的方法，使用本发明的化合物进 一步用于与生物活性化合物缀合的方法，和使用所得缀合物用于治疗的方法。本文所述的含吡啶基二硫化物部分的聚合物运送体系的一个优点为技术人员能 够选择性缀合含巯基的部分。即使掺入具有巯基的氨基酸作为聚合物活化体系的部分，本 发明的化合物也可提供用于肽合成的起始点。本文所述的聚合物体系的另一个优点允许连 接第二试剂。通过使用分支部分作为提供二硫键的连接基可引入多重取代。本发明的化合 物的多重取代将进一步使本领域技术人员能够连接第二药物以具有治疗协同效应，所述第 二药物靠近可通过二硫键选择性缀合的靶向基团。本文所述的聚合物递送体系允许将药物 靶向治疗位点。出于本发明的目的，术语“生物活性部分”和“生物活性部分的残基”应理解为是 指生物活性化合物的一部分，其在生物活性化合物经历取代反应(其中已连接了运送载体 部分)后保留。除非另有所述，出于本发明的目的术语“烷基”应理解为包括直链的，支链的，取代的，例如卤素_，烷氧基_，和硝 基-Cu烷基，C3_8环烷基或取代的环烷基，等；术语“取代”应理解为包括添加一个或多个不同原子或以一个或多个不同原子替 换官能团或化合物中包含的一个或多个原子；术语“取代的烷基”包括羧基烷基，氨基烷基，二烷基氨基，羟基烷基和巯基烷基；
术语“取代的环烷基”包括如4-氯环己基的部分；芳基包括如萘基的部分；取代的 芳基包括如3-溴苯基的部分；芳烷基包括如甲苯甲酰基(toluyl)的部分；杂烷基包括如 乙基噻吩的部分；术语“取代的杂烷基”包括如3-甲氧基_噻吩的部分；烷氧基包括如甲氧基的部 分；且苯氧基包括如3-硝基苯氧基的部分；术语“卤素”应理解为包括氟，氯，碘和溴；且术语"足量"和“有效量”出于本发明的目的应理解为获得治疗效果的量，该效果 是本领域技术人员所理解的。附图简述

图1图示实施例1-5所述的合成方法。图2图示实施例6-8所述的合成方法。图3图示实施例7-12所述的合成方法。图4图示实施例13-15所述的合成方法。发明详述A.概述在本发明一个方面，提供式(I)的化合物<formula>formula see original document page 19</formula>其中R1是基本上非抗原性的水溶性聚合物；A是封端基团，或
<formula>formula see original document page 19</formula>Y1和Y，独立地为S、0或NR2 ；Y2 和 Y，2 独立地为 S、0、SO、SO2, NR20 ；Y3和Y’ 3独立地为H、离去基团、活化基团、官能团，或
<formula>formula see original document page 20</formula>L1^3和L’卜3为独立选择的双官能连接基；R2_n、R’ R2tl独立地选自氢、氨基、取代的氨基、叠氮基、羧基、氰基、卤素、羟 基、硝基、硅烷基醚、磺酰基、巯基、C1^6烷基巯基、芳基巯基、取代的芳基巯基、取代的Ch6烷 基硫基、CV6烷基、c2_6烯基、c2_6炔基、c3_19支链烷基、c3_8环烷基、CV6取代的烷基、c2_6取代 的烯基、c2_6取代的炔基、c3_8取代的环烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、CV6 杂烷基、取代的Cp6杂烷基、CV6烷氧基、芳基氧基、C1^6杂烷氧基、杂芳基氧基、c2_6烷酰基、 芳基羰基、C2_6烷氧基羰基、芳基氧基羰基、c2_6烷酰基氧基、芳基羰基氧基、c2_6取代的烷酰 基、取代的芳基羰基、C2_6取代的烷酰基氧基、取代的芳基氧基羰基、c2_6取代的烷酰基氧基 和取代的芳基羰基氧基；R12和R’ 12独立地选自氢、羟基、离去基团、官能团、药物、靶向剂、诊断剂、取代的 C1^6烷基硫基、Ch6烷基、C2_6烯基、C2_6炔基、C3_19支链烷基、C3_8环烷基、CV6取代的烷基、c2_6 取代的烯基、c2_6取代的炔基、c3_8取代的环烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、 (V6杂烷基、取代的CV6杂烷基、Cp6烷氧基、芳基氧基、C1^6杂烷氧基、杂芳基氧基、c2_6烷酰 基、芳基羰基、c2_6烷氧基羰基、芳基氧基羰基、c2_6烷酰基氧基、芳基羰基氧基、c2_6取代的烷 酰基、取代的芳基羰基、C2_6取代的烷酰基氧基、取代的芳基氧基羰基、c2_6取代的烷酰基氧 基、取代的芳基羰基氧基、马来酰亚氨基、乙烯基、取代的砜、氨基、羧基、巯基、酰胼和胼基 甲酸基；(a)、(a，)、(d)和(d，)独立地为0或正整数，优选0或1 ；(b)和(b’)独立地为0或正整数，优选0或1至10的整数，更优选0或1，且最优 选0 ；(c)和(c’)独立地为0或正整数，优选0或1至10的整数，更优选0或1，且最优 选1;(e)和(e，)独立地为0或1 ；(g)和(g，)独立地为0或1，优选1 ；条件是(a)和(g)不同时为0。在本发明那些方面，预期用于取代的取代基(其中相应于R2_n、R’ 2_n和R2tl的 部分表明为可取代的)可包括，例如，酰基、氨基、酰氨基、脒、芳烷基、芳基、叠氮基、烷 基巯基、芳基巯基、羰基、羧酸酯(carboxylate)、氰基、酯、醚、甲酰基、卤素、杂芳基、杂 环烷基、羟基、亚氨基、硝基、硫代羰基、硫酯、硫代乙酸酯(thioacetate)、硫代甲酸酯 (thioformate)、烷氧基、磷酰基、膦酸酯(phosphonate)、亚膦酸酯(phosphinate)、硅烷 基、巯基、硫酸酯(sulfate)、磺酸酯(sulfonate)、氨磺酰基、磺酰胺和磺酰基。在本发明一个方面，该离去基团选自0H、卤素、活化酯、环酰亚胺硫酮、N-羟基琥 珀酰亚氨基、对硝基苯氧基、N-羟基邻苯二甲酰亚氨基、N-羟基苯并三唑基、咪唑、甲苯磺 酰基、甲磺酰基、三氟乙基磺酰基(tresyl)、硝基苯磺酰基(nosyl)、C1^6烷基氧基、C1^6烷酰基氧基、芳基羰基氧基、邻硝基苯氧基、对硝基苯氧基、五氟苯氧基、1，3，5-三氯苯氧基和 1,3,5-三氟苯氧基。在本发明另一方面，该生物部分包括含-NH2的部分，含-OH的部分和含-SH的部 分。在另一方面，A可选自H、NH2、OlCO2ICh6烷氧基和CV6烷基。在一些其它优选实 施方案中，A可为甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、H和OH。A更优选为甲基或甲氧基。在本发明某些优选方面，该聚合物药物递送体系包括半胱氨酸或其它含巯基的氨基酸。
在一些优选方面，R8_n或R’ 8_n的至少一个为吸电子基团如取代的酰氨基、酰基、 叠氮基、羧基、烷基氧基羰基、氰基和硝基，优选硝基，且更优选硝基作为R8或1 ’ 8。在另一优选方面，R12或R’ 12选自药物、靶向剂、或诊断剂。在一些特别优选的方面，R1包括分子量为约5，000至约60，000的直链或支链的聚 (乙二醇)残基，Y1和Y，工为0，Y2和Y，2为NR20, (a)和(a，)为0或1，(b)和(b，)为0 或1，(c)和(C，)为1，且(e)和(e，)为0。在一个特别方面，R2_7、R，3_7、！V11和R，9_n选 自氢、甲基和乙基，且每个更优选为氢。在一个优选实施方案中，本文所述的化合物具有下式
Y1Yi
I /r'A厂 /吟 “
(Li)a-Y2-C-^ /R6\ Y'3-s一"HcH-(U3)e^-(L3)e-Kc-W--S-Y3
—Wc.&」g.L r3W」g。在一些优选的实施方案中，本文所述的化合物具有下式(II)
Yi
{ ^aI I
ic-j-C-(L2)d一R12
A1——Ri-(Li)a-Y2-C^
R3 UT S_Y3
V R7/c(II)其中A1是封端基团，或<formula>formula see original document page 22</formula>Μ贵- ；所有其它变量与以上定义相同。在一个优选实施方案中，本文所述的化合物具有下式
<formula>formula see original document page 22</formula>
其中A3是封端基团，或
<formula>formula see original document page 22</formula>
(h)和(h’)独立地为0或正整数，优选0至10，且更优选0至4;和所有其它变量 与以上定义相同。在更优选的实施方案中，本文所述的化合物可为，例如，
<formula>formula see original document page 22</formula>其中，A2是封端基团，或＝<formula>formula see original document page 23</formula>所有其它变量如上定义。在一些优选的实施方案中，R2_n、R’ 2_n和R2tl独立地为氢或CH3。在一些特别优选 的实施方案中，R2-n、R’ H1和R2tl均为氢。在其它特别的实施方案中，Yh2和Y’ H包括O和 NR20,且R2_n、R’ 2_n和R2tl包括氢、CV6烷基、环烷基、芳基和芳烷基。B.基本上非抗原性的水溶性聚合物本文所述的化合物中使用的聚合物优选为水溶性聚合物且基本上为非抗原性的 如聚环氧烷(PAO’ s)。在本发明一个方面，本文所述的化合物包括直链、末端支链的或多臂的聚环氧烷。 在本发明一些优选的实施方案中，该聚环氧烷包括聚乙二醇和聚丙二醇。聚环氧烷具有的平均分子量为约2，000至约100，000道尔顿，优选约5，000至约 60，000道尔顿。该聚环氧烷更优选可为约5，000至约25，000或约20，000至约45，000道 尔顿。在一些特别优选的实施方案中，本文所述的化合物包括平均分子量为约12，000至约 20，000道尔顿或约30，000至约45，000道尔顿的聚环氧烷。在一个特别的实施方案中，聚 合部分具有的分子量为约12，000或40，000道尔顿。该聚环氧烷包括聚乙二醇和聚丙二醇。更优选地，该聚环氧烷包括聚乙二醇 (PEG)。PEG 通常由结构-0- (CH2CH2O) n-表示其中(η)表示聚合物的聚合度，且取决于聚合物的分子量。或者本发明的聚乙二 醇(PEG)残基部分可选自-Y71-(CH2CH2O) n-CH2CH2Y71-,-Y71-(CH2CH2O) n-CH2C ( = Y72) -Y71-,-Y7「C ( = Y72) - (CH2) a71-Y73- (CH2CH2O) [CH2CH2-Y73- (CH2) a7「C ( = Y72) -Y71-,和-Y71-(CR71R72) a72-Y73- (CH2) b71-0_ (CH2CH2O) n_ (CH2) b71_Y73- (CR71R72) a72_Y71_，其中Y71 和 Y73 独立地为 0、S、SO、SO2, NR73 或键；Y72 为 0、S 或 NR74 ；R71_74独立地为可用于&的相同的部分；(a71)、(a72)和(b71)独立地为0或正整数，优选0_6，且更优选1 ；且(η)为约10至约2300的整数。支链的或U-PEG衍生物描述于美国专利号5，643，575，5，919，455，6，113，906和 6，566，506，其每一个的内容在此引入作为参考。该聚合物的非限制性实例相应于具有以下 结构的聚合物体系(i)-(vii)<formula>formula see original document page 24</formula><formula>formula see original document page 25</formula>
其中Y61_62 独立地为 0、S 或 NR61 ；Y63 为 0、NR62、S、S0 或 SO2(w62)、(w63)和(w64)独立地为0或正整数；(w61)为 0 或 1;mPEG 为甲氧基 PEG其中PEG如上定义且聚合物部分的总分子量为约2，000至约100，000道尔顿；且R61和R62独立地选自氢、CV6烷基、C2_6烯基、C2_6炔基、C3_19支链烷基、C3_8环烷基、 CV6取代的烷基、c2_6取代的烯基、c2_6取代的炔基、c3_8取代的环烷基、芳基、取代的芳基、杂 芳基、取代的杂芳基、C1^6杂烷基、取代的CV6杂烷基、C1^6烷氧基、芳基氧基、C1^6杂烷氧基、 杂芳基氧基、c2_6烷酰基、芳基羰基、c2_6烷氧基羰基、芳基氧基羰基、c2_6烷酰基氧基、芳基羰 基氧基、c2_6取代的烷酰基、取代的芳基羰基、c2_6取代的烷酰基氧基、取代的芳基氧基羰基、 c2_6取代的烷酰基氧基、和取代的芳基羰基氧基。在另一方面，该聚合物包括多臂PEG-OH或“星形-PEG”产物如描述于NOF Corp. Drug Delivery System目录，Ver. 8，2006年四月中的那些，其内容在此引入作为参考。该聚合物可删猶于美国专利号5’ 122, 614或5, 808, 096专利中的活碰术转化为适当活 化的形式。具体地，该PEG可为式··
<formula>formula see original document page 26</formula>
二 :为约4至约455 _数；且残基的至多3个末端部分被甲基或其它低级烧基
=9]在-些优选的实施方案中，肺4个PEG臂可转化为合适的活化基团，以促进与芳 族基团的连接。该转化之前的化合物包括
<formula>formula see original document page 26</formula><formula>formula see original document page 27</formula>H0-CH2CH2-(0CH2CH2)u.-0>v^\0^v^0—(CH2CH2OV-CH2CH2-OH HO-CH2CH2-(OCH2CH2)u^u^(CH2CH2O)ul-CH2CH2-OH
ο在此包括的聚合物质优选在室温是水溶性的。该聚合物的非限制性实例包括聚 环氧烷均聚物如聚乙二醇(PEG)或聚丙二醇，聚氧乙烯化多元醇(polyoxyethylenated polyols)，其共聚物和其嵌段共聚物，条件是保持嵌段共聚物的水溶性。在另一实施方案中，作为基于PAO的聚合物的替代物，可使用一种或多种有效 地非抗原性物质，如葡聚糖、聚乙烯醇、基于碳水化合物的聚合物、羟丙基甲基丙烯酰胺 (HPMA)、聚环氧烷、和/或其共聚物。还参见共同授让的美国专利6，153，655，其内容在此 引入作为参考。本领域技术人员应理解采用与对在此所述的PAO' s如PEG相同的活化类 型。本领域技术人员将进一步认识到上述实例仅是解释性的，所有具有本文所述性质的聚 合物质都在考虑范围内。出于本发明的目的，“基本上或有效地非抗原性的”是指本领域理 解的所有物质，其为无毒的且在哺乳动物中不引发可观察到的免疫源应答。在一些方面，可使用具有末端氨基团的聚合物以制备本文所述的化合物。以高 纯度制备含末端胺的聚合物的方法描述于美国专利申请11/508，507和11/537，172，其每 一个的内容在此引入作为参考。例如，具有叠氮基(a zides)的聚合物与基于膦的还原剂 如三苯基膦或碱金属硼氢化物还原剂如NaBH4反应。或者，包括离去基团的聚合物与保护 的胺盐如甲基-叔丁基亚氨基二碳酸酯的钾盐(KNMeBoc)或二-叔丁基亚氨基二碳酸酯 (di-tert-butylimidodicarbonate)的钾盐(KNBoc2)反应，然后脱保护该脱保护的氨基。由 这些方法形成的含末端胺的聚合物的纯度大于约95%且优选大于99%。在其它方面，具有末端羧基的聚合物可在本文所述的聚合物递送体系中使用。以 高纯度制备具有末端羧酸的聚合物的方法公开于美国专利申请11/328，662，其内容在此引 入作为参考。该方法包括首先制备聚环氧烷的叔烷基酯，然后转化为其羧酸衍生物。制备 PAO羧酸的方法的第一步骤包括形成中间体如聚环氧烷羧酸的叔丁基酯。该中间体通过 PAO与卤代乙酸叔丁基酯在碱如叔丁醇钾的存在下反应而形成。一旦叔丁基酯中间体形成， 该聚环氧烷的羧酸衍生物就容易以超过92 %，优选超过97 %，更优选超过99 %且最优选超 过99. 5%的纯度而提供。C.双官能连接基双官能连接基包括氨基酸、氨基酸衍生物和肽。该氨基酸可为天然存在的和非天 然存在的氨基酸。天然存在的氨基酸的衍生物和类似物，以及各种本领域已知的非天然存 在的氨基酸(D或L)，疏水或非疏水的，也包括在本发明的范围内。非天然存在的氨基酸的 合适的非限制性实例包括2-氨基己二酸，3-氨基己二酸，β-丙氨酸，β-氨基丙酸，2-氨 基丁酸，4-氨基丁酸，哌啶酸，6-氨基己酸，2-氨基庚酸，2-氨基异丁酸，3-氨基异丁酸， 2-氨基庚二酸，2,4-氨基丁酸，锁链素，2，2- 二氨基庚二酸，2，3- 二氨基丙酸，N-乙基甘氨 酸，N-乙基天冬酰胺，3-羟基脯氨酸，4-羟基脯氨酸，异锁链素，别异亮氨酸，N-甲基甘氨 酸，肌氨酸，N-甲基-异亮氨酸，6-Ν-甲基-赖氨酸，N-甲基缬氨酸，正缬氨酸，正亮氨酸和 鸟氨酸。一些优选的氨基酸残基选自甘氨酸、丙氨酸、蛋氨酸或肌氨酸，且更优选地，甘氨 酸。
或者Lh和L，独立地选自- [C ( = 0) ] γ (CR22R23) t [C ( = 0) ] v’ _，
- [C( = 0) ] V (CR22R23) t"0 [C ( = 0) ] v’ _，- [c ( = 0) ] v (CR22R23) t"NR26 [C ( = 0) ] v’ -，- [C ( = 0) ] v0 (CR22R23) t [C ( 二 0) ] v’ -，- [C ( = 0) ] v0 (CR22R23) t0 [C ( = 0) ] v’ -，_ [C ( = 0) ] v0 (CR22R23) tNR26 [C ( = 0) ] v’ -，_ [C ( = 0) ] vNR21 (CR22R23) t [C ( = 0) ] v’ _，_ [C ( = 0) ] vNR21 (CR22R23) t0 [C ( = 0) ] v’ _，_ [C ( = 0) ] VNR21 (CR22R23) tNR26 [C ( = 0) ] v’ -，- [C ( = 0) ] v (CR22R23) t0- (CR28R29) t’ [C ( = 0) ] v’ _，- [C ( = 0) ] v (CR22R23) tNR26- (CR28R29) t，[C ( = 0) ] v，_，_ [C ( = 0) ] v (CR22R23) tS- (CR28R29) t’ [C ( = 0) ] v’ _，- [C ( = 0) ] v0 (CR22R23) t0_ (CR28R29) t’ [C ( = 0) ] v’ _，- [C ( = 0) ] v0 (CR22R23) tNR26_ (CR28R29) t’ [C ( 二 0) ] v’ -，- [C ( = 0) ] v0 (CR22R23) tS_ (CR28R29) t’ [C ( = 0) ] v’ _，_ [C ( = 0) ] vNR21 (CR22R23) t0- (CR28R29) t’ [C ( 二 0) ] v’ -，- [c ( = 0) ] vNR21 (CR22R23) tNR26" (CR28R29) t’ [C ( = 0) ] v’ -，- [c ( = 0) ] vNR21 (CR22R23) ts- (CR28R29) t’ [C ( 二 0) ] v’ _，- [C ( = 0) ] v (CR22R23CR28R29O) tNR26 [C ( = 0) ] v’ _，- [C ( = 0) ] v (CR22R23CR28R29O) t [C ( = 0) ] v’ -，_ [C ( = 0) ] v0 (CR22R23CR28R29O) tNR26 [C ( = 0) ] v’ _，_ [C ( = 0) ] v0 (CR22R23CR28R29O) t [C ( = 0) ] v’ 一，- [C ( = 0) ] vNR21 (CR22R23CR28R29O) tNR26 [C ( = 0) ] v’ -，_ [C ( = 0) ] vNR21 (CR22R23CR28R29O) t [C ( = 0) ] v’ _，- [c ( = 0) ] v (CR22R23CR28R29O) t (CR24R25) t’ [C ( = 0) ] v’ -，- [C ( = 0) ] v0 (CR22R23CR28R29O) t (CR24R25) t’ [C ( = 0) ] v’ -，_ [C ( = 0) ] vNR21 (CR22R23CR28R29O) t (CR24R25) t’ [C ( = 0) ] v’ -，- [c ( = 0) ] v(CR22R23CR28R29O) t (CR24R25) t’ 0[C ( = 0) ] v’ -，- [c ( = 0) ] v (CR22R23) t (CR24R25CR28R29O) t’ [C ( = 0) ] v’ -，- [C ( = 0) ] v (CR22R23) t (CR24R25CR28R29O) t’ NR26 [C ( = 0) ] v’ -，_ [C ( = 0) ] v0 (CR22R23CR28R29O) t (CR24R25) t’ 0 [C ( = 0) ] v’ -，- [c ( = 0) ] v0 (CR22R23) t (CR24R25CR28R29O) t’ [C ( = 0) ] v’ -，- [c ( = 0) ] v0 (CR22R23) t (CR24CR25CR28R29O) t’ NR26 [C ( = 0) ] v’ -，- [C ( = 0) ] vNR21 (CR22R23CR28R29O) t (CR24R25) t’ 0 [C ( = 0) ] v’ -，_ [C ( = 0) ] vNR21 (CR22R23) t (CR24R25CR28R29O) t’ [C ( = 0) ] v’ -，_ [C ( = 0) ] vNR21 (CR22R23) t (CR24R25CR28R29O) t’ NR26 [C ( = 0) ] v’ _，<formula>formula see original document page 30</formula>其中R21_29独立地选自氢、C1^6烷基、C3_12支链烷基、C3_8环烷基、CV6取代的烷基、C3_8取 代的环烷基、芳基、取代的芳基、芳烷基、(V6杂烷基、取代的(V6杂烷基、Cp6烷氧基、苯氧基 和Cp6杂烷氧基；(t)和(t’)独立地为0或正整数，优选0或约1至约12的整数，更优选约1至约 8的整数，且最优选1或2;和(ν)和(V，)独立地为0或1。在一些优选的实施方案中，Lh和L’ Η独立地选自<formula>formula see original document page 31</formula>
<formula>formula see original document page 31</formula>
-Val-Cit-,-Gly-Phe-Leu-Gly-,-Ala-Leu-Ala-Leu-,-Phe-Lys-,<formula>formula see original document page 32</formula>-Val-Cit-C ( = 0) -CH2OCH2-C ( = 0)-，-Val-Cit-C ( = 0) -CH2SCH2-C ( = 0)-，禾口-NHCH (CH3) -C ( = 0) -NH (CH2) 6_C (CH3) 2_C ( = 0)-其中，Yn_19 独立地为 0、S 或 NR48 ；R31_48、R5ch51和A51独立地选自氢、Cp6烷基、C3_12支链烷基、C3_8环烷基、C^6取代的 烷基、C3_8取代的环烷基、芳基、取代的芳基、芳烷基、CV6杂烷基、取代的CV6杂烷基、Cp6烷 氧基、苯氧基和Cp6杂烷氧基；Ar为芳基或杂芳基部分；Ln_15为独立选择的双官能间隔基；J和J’独立地选自主动运输至靶细胞的部分、疏水部分、双官能连接部分和其组 合；(cll)、(hll)、(kll)、(zll)、(mil)和(nil)为独立选择的正整数，优选 1 ；(all)、(ell)、(gll)、(jll)、(oil)和(qll)独立地为 0 或正整数，优选 1 ；和(bll)、(xll)、(χ，11)、(fll)、(ill)和(pll)独立地为 0 或 1。
或者Lh和L，独立地选自_ [C ( = 0) ] rNH (CH2) 2CH = N-NHC ( = 0) - (CH2) 2_，_ [C ( = 0) ] rNH (CH2) 2 (CH2CH2O) 2 (CH2) 2NH [C ( = 0) ] r’ -，_ [C ( = 0) ] rNH (CH2CH2) (CH2CH2O) 2NH [C ( = 0) ] r’ -，_ [C ( = 0) ] rNH (CH2CH2) SNH (CH2CH2) s’ [C ( = 0) ] r’ -，- [C ( = 0) ] rNH (CH2CH2) sS (CH2CH2) s’ [C ( = 0) ] r’ -，- [C ( = 0) ] rNH (CH2CH2) (CH2CH2O) [C ( = 0) ] r’ -，- [C ( = 0) ] rNH (CH2CH2) s0 (CH2CH2) s’ [C ( = 0) ] r’ -，- [C ( = 0) ] rNH (CH2CH2O) (CH2) NH [C ( = 0) ] r’ -，- [C ( = 0) ] rNH (CH2CH2O) 2 (CH2) [C ( = 0) ] r’ -，- [C ( = 0) ] rNH (CH2CH2O) s (CH2) s’ [C ( = 0) ] r’ -，- [C ( = 0) ] ,NHCH2CH2NH [C ( = 0) ] r’ -，_ [C ( = 0) ] rNH (CH2CH2) 20 [C ( = 0) ] r’ -，- [C ( = 0) ] rNH (CH2CH2O) [C ( = 0) ] r’ -，_ [C ( = 0) ] rNH (CH2CH2O) 2 [C ( = 0) ] r’ -，
-[C( = 0) JrNH(CH2) 3 [C ( = 0)]r’-，- [C ( = 0) ] r0 (CH2CH2O) 2 (CH2) [C ( = 0) ] r’ -，- [C ( = 0) ] r0 (CH2) 2NH (CH2) 2 [C ( = 0) ] r’ -，- [C ( = 0) ] r0 (CH2CH2O) 2NH [C ( = 0) ] r’ -，- [C ( = 0) ] r0 (CH2) 20 (CH2) 2 [C ( = 0) ] r’ -，
- [C ( = 0) ] r0 (CH2) 2S (CH2) 2 [C ( = 0) ] r’ -，- [C ( = 0) ] r0 (CH2CH2) NH [C ( = 0) ] r’ -，- [C ( = 0) ] r0 (CH2CH2) 0 [C ( = 0) ] r’ -，- [C ( = 0) ] r0 (CH2) 3NH [C ( = 0) ] r’ -，_ [C ( = 0) ] r0 (CH2) 30 [C ( = 0) ] r’ -，- [C ( = 0) ] r0 (CH2) 3 [C ( = 0) ] r’ _，_ [C ( = 0) ] ,CH2NHCH2 [C ( = 0) ] r’ -，- [C ( = 0) ] ,CH2OCH2 [C ( = 0) ] r’ -，- [C ( = 0) ] ,CH2SCH2 [C ( = 0) ] r’ -，- [C ( = 0) ] rS (CH2) 3 [C ( = 0) ] r’ _，-[C( = 0) ] ,(CH2)3 [C ( = 0)]r’_，
—[C(=0)]r0CH2-^^-CH2NH[C(=0)]r.-—[C(=0)]r0CH2-^j)-CH20[C(=0)]r,—
-[C(=0)]rNHCH2—CH2NH[C(=0)]r—和
-[C(=0)]rNHCH2-^^CH20[C(=0)]r.—其中，(r)和(r，)独立地为0或1.在另一实施方案中，Lm和L’ Η包括相应于如上所示的那些的结构，但进一步被乙烯基、砜的残基、氨基、羧基、巯基、酰胼、胼基甲酸基(carbazate)等取代。D. R12 禾口 R，12 基团1.离去基团和官能团在一些方面，合适的离去基团包括，但不限于卤素(Br、Cl)、活化碳酸酯 (avtivated carbonate)、羰基咪唑、环酰亚胺硫酮、异氰酸酯(isocyanate)、N-羟基琥 珀酰亚氨基、对硝基苯氧基、N-羟基邻苯二甲酰亚氨基、N-羟基苯并三唑基、咪唑、甲苯 磺酸酯(tosylate)、甲磺酸酯(mesylate)、三氟乙基磺酸酯(tresylate)、硝基苯磺酸酯 (nosylate)、C1-C6烷基氧基、C1-C6烷酰基氧基、芳基羰基氧基、邻硝基苯氧基、N-羟基苯并 三唑基、咪唑、五氟苯氧基、1，3，5-三氯苯氧基和1，3，5-三氟苯氧基或其它本领域技术人 员熟知的合适的离去基团。出于本发明的目的，离去基团是指能与在所需靶(即生物活性部分、诊断剂、靶向 部分、双官能间隔基、中间体等)上的亲核基团反应的基团。因此所述靶包含用于置换的基团，例如在蛋白质、肽、酶、天然或化学合成的治疗分子(如多柔比星)，和间隔基如单-保护 的二胺上的OH、NH2或SH基团。在一些优选的实施方案中，将聚合物运送体系连接至生物活性部分的官能团包括 可进一步缀合至生物活性基团的马来酰亚氨基、乙烯基、砜的残基、氨基、羧基、巯基、酰胼、 胼基甲酸基等。在本发明一些优选的实施方案中，R12和R’12可选自Η、0Η、甲氧基、叔丁氧基、N-羟 基琥珀酰亚氨基和马来酰亚氨基。2.生物活性部分很多种生物活性部分可连接至本文所述的活化的聚合物。所述生物活性部分包括 药学活性化合物、酶、蛋白质、寡核苷酸、抗体、单克隆抗体、单链抗体和肽。与本发明的化合 物缀合的生物活性化合物将包含SH官能部分。 此外，本发明的活化的聚合物可进一步包含 生物活性部分作为R12，其包括含胺、羟基或巯基的化合物。该合适的化合物的非限制性实 例包括有机化合物、酶、蛋白质、多肽、抗体、单克隆抗体、单链抗体或寡核苷酸等。有机化合 物包括，但不限于，如喜树碱和类似物如SN38的部分，伊立替康，和相关的拓扑异构酶I抑 制剂，紫杉烷和紫杉醇衍生物，包括AZT的核苷，包括柔红霉素、多柔比星的蒽环类抗生素 化合物；对氨基苯胺氮芥(p-aminoaniline mustard)，美法仑，Ara-C (阿糖胞苷)和相关抗 代谢物化合物，例如，吉西他滨等。或者，生物活性部分可包括心血管剂、抗肿瘤剂、抗感染 药、抗真菌药如制霉菌素和两性霉素B、抗焦虑剂、肠胃病药、中枢神经系统活化剂、止痛剂、 致育药(fertility agent)、避孕剂、抗炎剂、留体类药、抗高尿酸血症药(anti-urecemic agents)、血管扩张剂和血管收缩剂等。应理解其它未具体说明但具有合适的含胺、含羟基 或含巯基的基团的生物活性物质也可被考虑且在本发明的范围内。在本发明另一方面，该生物活性化合物适用于医药或诊断用途以治疗动物，例如， 哺乳动物，包括人，用于治疗需要该治疗的症状。适于在本文加入的生物活性部分的类型的仅有的限制为存在可用的至少一个化 学反应性官能部分，如胺、羟基或巯基，以与载体部分连接，且在以缀合至本文所述的聚合 物递送体系的形式时，生物活性没有明显的损失。或者适用于加入本发明的聚合物运送缀 合物化合物中的母体化合物在从连接的化合物水解释放后可具有活性，或在水解释放后没 有活性，但在经历进一步的化学过程/反应后变得有活性。例如，通过聚合物运送体系递送 至血流的抗癌药物可在进入癌症或肿瘤细胞后才具有活性，在该细胞中其被癌症或肿瘤细 胞化学物质活化，例如，通过该细胞独特的酶反应活化。本发明另一方面提供由连接至本文所述的聚合物递送体系的诊断标记物(tag) 的任选制备缀合化合物，其中选择该标记物用于诊断或成像目的。因此，合适的标记物通过 将任何合适的部分(例如，氨基酸残基)连接至任何本领域标准的放射同位素、射线不透性 标记、磁共振标记、或其它适合于磁共振成像的非放射性同位素标记、荧光型标记、显示可 见颜色和/或能在紫外线、红外线或电化学刺激下发荧光的标记而制备，以允许在手术操 作中成像肿瘤组织，等等。任选地，该诊断标记物掺入和/或连接至缀合的治疗部分，以用 于监测治疗性生物活性物质在动物或人患者中的分布。在本发明另一方面，本发明的加标记物的缀合物易于通过本领域已知的方法，利 用任何合适的标记(包括，例如，放射性同位素标记)制备。仅仅作为实例，这些包括131碘、125碘、"-锝和/或111铟以制备放射免疫-闪烁剂，以选择性体内吸收进入肿瘤细胞。例如，有 许多本领域已知的将肽连接至Tc-99m的方法，包括，仅仅作为实例，美国专利5，328，679 ； 5，888，474 ；5, 997，844 ；和5，997，845所示的那些，其在此引入作为参考。3.靴向基团在一些方面，本文所述的化合物可与靶向基团反应或可包含靶向基团。该靶向基团包括受体配体、抗体或抗体片段、单链抗体、靶向肽、靶向碳水化合物分子或凝集素。靶向 基团增强本文所述的化合物在靶组织和细胞群中的结合或摄取。例如，靶向基团的非限制 性实例括血管内皮细胞生长因子、FGF2、生长抑素和和生长抑素类似物、转铁蛋白、促黑素、 ApoE和ApoE肽、维勒布兰德氏因子(von Willebrand' s Factor)和维勒布兰德氏因子肽、 腺病毒纤维蛋白和腺病毒纤维蛋白肽、PDl和PDl肽、EGF和EGF肽、RGD肽、叶酸(folate) 等。在本发明另一方面靶向基团包括单克隆抗体、单链抗体、生物素、细胞粘附肽、细胞穿透 肽(CPPs)、荧光化合物、放射性标记化合物和适体(aptamers)。在本发明另一方面靶向剂 可包括选凝素(Selectin)、TAT、穿透素(Penetratin)、Ang9和叶酸。E.聚合物递送体系的合成通常，制备本发明的活化的聚合物的方法包括将具有适当的离去基团的聚合物与 在远端包含吡啶基二硫化物基的亲核物质反应。本发明的活化的聚合物递送体系可进一步 与包含SH基的生物活性化合物反应以得到聚合缀合物，其中生物活性部分通过-S-S-键结 合至聚合物。在本发明一个方面，制备本文所述的化合物的方法包括将式(III)的聚合化合物A4-R1-M1(III)与式(IV)的化合物<formula>formula see original document page 35</formula>在足以形成式(V)的化合物的条件下反应<formula>formula see original document page 36</formula>其中R1是基本上非抗原性的水溶性聚合物；A4为封端基团或M1;A5为封端基团或
<formula>formula see original document page 36</formula>M1为OH或离去基团；M2 为-OH、SH 或-NHR90 ；Yi*Y’工独立地为S、0或NR2 ；Y2 和 Y，2 独立地为 S、0、SO、SO2, NR20 ；Y3和Y’ 3独立地为H、离去基团、活化基团、官能团，或<formula>formula see original document page 36</formula>L1^3和L’ η为独立选择的双官能连接基；R2_n，R’ 2_n，R2tl和R9tl独立地选自氢、氨基、取代的氨基、叠氮基、羧基、氰基、卤素、 羟基、硝基、硅烷基醚、磺酰基、巯基、C1^6烷基巯基、芳基巯基、取代的芳基巯基、取代的C^6 烷基硫基、C1^6烷基、C2_6烯基、C2_6炔基、C3_19支链烷基、C3_8环烷基、CV6取代的烷基、c2_6取 代的烯基、C2_6取代的炔基、c3_8取代的环烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、 C1^6杂烷基、取代的CV6杂烷基、Ch6烷氧基、芳基氧基、C1^6杂烷氧基、杂芳基氧基、c2_6烷酰 基、芳基羰基、c2_6烷氧基羰基、芳基氧基羰基、c2_6烷酰基氧基、芳基羰基氧基、c2_6取代的烷 酰基、取代的芳基羰基、C2_6取代的烷酰基氧基、取代的芳基氧基羰基、c2_6取代的烷酰基氧 基和取代的芳基羰基氧基；
R12和R’ 12独立地选自氢、羟基、离去基团、官能团、药物、靶向剂、诊断剂、取代的 C1^6烷基硫基、Cp6烷基、C2_6烯基、C2_6炔基、C3_19支链烷基、C3_8环烷基、CV6取代的烷基、c2_6 取代的烯基、c2_6取代的炔基、c3_8取代的环烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、 (V6杂烷基、取代的CV6杂烷基、Cp6烷氧基、芳基氧基、C1^6杂烷氧基、杂芳基氧基、c2_6烷酰 基、芳基羰基、c2_6烷氧基羰基、芳基氧基羰基、c2_6烷酰基氧基、芳基羰基氧基、c2_6取代的烷 酰基、取代的芳基羰基、C2_6取代的烷酰基氧基、取代的芳基氧基羰基、c2_6取代的烷酰基氧 基、取代的芳基羰基氧基、马来酰亚氨基、乙烯基、取代的砜、氨基、羧基、巯基、酰胼和胼基 甲酸基；(a)，(a，)，(d)和(d，)独立地为0或正整数；(b)和(b’)独立地为0或正整数；(c)和(C’)独立地为0或正整数；(e)和(e，)独立地为0或1 ；和(g)和(g，)独立地为0或1 ；条件是(a)和(g)不同时为0。含吡啶基二硫化物的部分与聚合物部分的连接或含分支部分的聚合物体系与式 (IV)的化合物的缀合优选在偶合剂的存在下进行。合适的偶合剂的非限制性实例包括1， 3- 二异丙基碳二亚胺(DIPC)，任何合适的二烷基碳二亚胺，2-卤代-1-烷基-吡啶鐺卤 化物，(Mukaiyama试剂)，1_ (3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDC)、丙烷膦酸环酐 (PPACA)和二氯磷酸苯酯等，其可从例如商业来源如Sigma-Aldrich Co.获得或使用已知 技术合成。优选地，所述反应在惰性溶剂如二氯甲烷、氯仿、DMF或其 混合物中进行。该反应 可优选在碱的存在下进行，所述碱如二甲基氨基吡啶(DMAP)、二异丙基乙基胺、吡啶、三乙 胺等，以中和任何产生的酸。该反应可在约0°C至约22°C (室温)进行。一些由本文所述方法制备的具体实施方案包括
<formula>formula see original document page 38</formula><formula>formula see original document page 39</formula><formula>formula see original document page 40</formula>其中mPEG 具有式 CH3O (CH2CH2O) n_ ；PEG 具有式-O (CH2CH2O) n_，禾口(η)为约10至约2300的整数。所得式(V)的化合物可进一步与含SH的部分反应以得到聚合递送缀合物，其中生 物部分通过二硫键连接。本发明的活化的聚合物可易于与生物活性部分在中性或弱酸性条 件如PH 6. 5中缀合。该反应可在室温或_4°C至30°C在适于本发明的聚合化合物和生物活 性部分的溶剂中进行。该反应可在水性或有机溶剂如DCM、氯仿、DMF、DMS0等中进行。如果 底物为寡核苷酸或肽，优选该反应在水性缓冲溶液中进行。该生物活性部分选自药物活性 化合物、酶、蛋白质、寡核苷酸、抗体、单克隆抗体、单链抗体和肽。一些缀合方法描述于实施 例中。一些可通过使用本文所述的缀合方法将本发明的活化的聚合化合物与生物活性
部分反应制备的具体实施方案包括
<formula>formula see original document page 40</formula>
<formula>formula see original document page 41</formula><formula>formula see original document page 42</formula>
其中(ζ)为正整数，优选约1至约10 ；-YGRKKRRQRRR-为 TAT 肽；mPEG 具有式 CH3O (CH2CH2O) n_ ；PEG 具有式-O (CH2CH2O) n_，(η)为约10至约2300的整数；和Rltll选自靶向基团、诊断剂和生物活性部分。F.治疗方法本发明另一方面提供治疗哺乳动物各种医学病症的方法。该方法包括向需要该治 疗的哺乳动物给药有效量的本文所述的生物活性部分缀合的聚合物。该聚合缀合化合物尤 其用于治疗类似于用母体化合物治疗的那些疾病，例如在哺乳动物中的酶替代治疗、瘤形 成疾病、减少肿瘤负荷、防止肿瘤转移和防止肿瘤/赘生物生长复发。给药的聚合缀合物的量将取决于其中包含的母体分子的量。通常，治疗方法中使 用的聚合缀合物的量为在哺乳动物中有效获得所需治疗结果的量。自然地，不同聚合缀合化合物的剂量将根据母体化合物、聚合物的分子量、体内水解速率等而稍有改变。本领域技 术人员将基于临床经验和治疗适应症确定所选的聚合运送缀合物的最佳剂量。实际剂量对 于技术人员是明显的，不用过多的实验。本发明的化合物可包含在一种或多种合适的药物组合物中以给药于哺乳动物。该 药物组合物可为溶液、混悬液、片剂、胶囊等形式，根据本领域熟知的方法制备。还考虑到该 组合物的给药可根据技术人员的需要通过口服和/或肠胃外途径。可使用组合物的溶液和 /或混悬液，例如，作为载体溶媒以通过任何本领域已知的方法注射或渗滤组合物，例如，通 过静脉内、肌内、腹膜内、皮下注射等。这种给药也可通过输注入体间隙或体腔，以及通过吸 入和/或鼻内途径。然而，在本发明优选的方面，该聚合缀合物肠胃外给药于需要的哺乳动 物。实施例提供以下实施例以进一步理解本发明，但不是以任何方式限制本发明的范围。实 施例中的黑体数字相应于附图中所示的那些。整个实施例中使用缩写，例如DCM( 二氯甲 烷)、DIEA (二异丙基乙基胺)、DMAP (4- 二甲基氨基吡啶)、DMF (N，N’ - 二甲基甲酰胺)、 DSC (二琥珀酰亚氨基碳酸酯)、EDC (1- (3- 二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺)、IPA (异丙 醇)、NHS (N-羟基琥珀酰亚胺)、PEG (聚乙二醇)、SCA-SH (单链抗体)、SN38 (7-乙基-10-羟 基喜树碱)>TBDPS (叔丁基-二丙基硅烷(tert-butyl-dipropylsiIyl)))和 TEA (三乙胺)。—般方法所有反应在干燥氮气或氩气的气氛中进行。使用商业试剂而没有进一步 纯化。所有PEG化合物在使用前真空干燥或通过从甲苯共沸蒸馏而干燥。除非另有所述， 使用 Varian Mercury 300NMR 光谱仪，以 300MHz 获得 1H NMR 谱，以 75. 46MHz 获得 13C NMR 谱，并使用氘代氯仿作为溶剂。化学位移(δ )以距四甲基硅烷(TMS)的低场百万分率(ppm) 记录。HPLC方法.反应混合物，和中间体和最终产物的纯度通过BeckmanCoulter System Gold HPLC 仪器监测。其使用 ZORBAX 300SB C8 反相柱(150X4. 6mm)或 Phenomenex Jupiter 300A C 18反相柱(150χ4· 6讓)，并具有比8 二极管阵列UV检测器， 使用梯度为10-90%的乙腈在0.05%三氟乙酸(TFA)中的溶液，流速为ImL/分钟。实施例1.制备化合物(2)将4Ν HCl在二噁烷(70mL)中的溶液添加至BocCys (Npys)-OH (化合物1，1. 5g， 13.32mmol)中。将该混悬液在室温搅拌3小时，然后将其倒入700mL乙醚中。使用粗 滤器通过重力过滤收集固体并用乙醚(50mL)洗涤三次。将洗涤的固体在真空室温干燥 过夜以得到产物=1H NMR(CD3OD) δ 8. 93 (1Η, dd, J=L 5,4. 7Ηζ)，8· 66 (1Η, dd, J = 1. 5， 8. 20Hz)，7. 59 (1H, dd, J = 4. 7,8. 2Hz)，4. 24 (1H, dd, J = 4. 1,9. 4Hz)，3. 58 (1H, dd, J = 4. 1，14. 9Hz) ,3. 36 (1H, dd, J = 9. 4，15. 2Hz). 13C NMR(CD3OD) δ 169. 40，156. 27，154. 64， 144. 13，135. 246，123. 10，52. 77，39. 27。实施例2.制备化合物(4)将mPEG-SC(化合物 3，Mw. 20kDa，7. 30g，0. 35mmol)和 DIEA (3mL，16. 8mmol)添加 至化合物2(1. 82g，5. 55mmol)在DMF和DCM(25mL_45mL)的混合物中的溶液中。将所得混 悬液在室温搅拌5小时 。将该反应混合物真空蒸发然后用DCM-Et2O在0°C沉淀。通过过滤收集固体并溶于SOmLDCM中。添加20mL 0. IN HCl后，将混合物搅拌5分钟。使用分液漏 斗分离有机层并用0. IN HCl (20mL)和盐水(20mL)洗涤。有机层用无水MgSO4干燥，过滤 并真空蒸发。残余物用DCM/Et20在0°C沉淀。过滤固体并在真空烘箱中在30°C干燥至少2 小时以得到产物。实施例3.制备化合物(5)在轻搅拌下将化合物4 (0. 084mmol)添加至SCA_SH(0. 00027mmol)在3mL磷酸钠 缓冲液(0. 1M，pH 7. 8)中的溶液中。将该溶液在30°C搅拌30分钟。使用GPC柱(Zorbax GF-450)监测PEG缀合。在反应结束时(原料酶已不存在)，该混合物用12mL配制缓冲液 (0. 05M磷酸钠，0. 85%氯化钠，ρΗ7· 3)稀释，并用Centriprep浓缩器(Amicon)渗滤以去 除未反应的PEG试剂。按需要在4°C持续渗滤直到通过混合等量的滤液和0. 1% PMA(0. IM HCl中的聚甲基丙烯酸)不再检测到游离PEG，以得到产物。实施例4.制备化合物(6)
向C6-硫代-LNA-存活蛋白(100mg，0. 018mmol)在60mL pH 8. 0磷酸盐缓冲液中 的溶液中添加化合物4(3. 6g，0. 18mmol)，且将溶液在室温搅拌1小时。反应进展通过离子 交换HPLC检测。将反应混合物通过0.2微米滤器过滤并装载在Potos阴离子交换柱上。产 物使用在PH 7. 0的缓冲液体系20mM Tris. HCl 2M NaCl梯度洗脱。实施例5.制备化合物(7)在氮气下将化合物4(8mg，0. 0014mmol,寡聚物等价物(oligo eq))与 HS-RGD2(lllmg,0. 0496mmol)在 3mL 缓冲液(5M 尿素，IOOmM KH2PO4)中混合。该反应进行 2 小时。粗产物在Source 15S树脂上纯化。柱用缓冲液A(5M尿素，IOOmM KH2PO4, 25% CH3CN, PH 6.5)平衡。产物用缓冲液B(2MKBr)洗脱。收集的产物在HiPr印脱盐柱上脱盐，冻干。实施例6.制备化合物(9a)将2CIK8 臂-PEG-SC (化合物 8a，7. 30g, 0. 35mmol)和 DIEA (3mL, 16. 8mmol)添加至化 合物2(1.82g，5. 55mmol)在DMF(25mL)和DCM(45mL)中的溶液中。所得混悬液在室温搅拌 5小时。将反应混合物真空蒸发然后用DCM-乙醚(4 l,v/v)在0°C沉淀。将固体过滤并 溶于80mL DCM中。添加20mL 0. IN HCl后，将混合物搅拌5分钟，然后转移至分液漏斗，且 分离有机层并再次用0. IN HCl (20mL)和盐水(20mL)洗涤。有机层用无水MgSO4干燥，过滤 并真空浓缩。残余物用DCM-Et2O在0°C沉淀。过滤固体并在真空烘箱中在30°C干燥以得 到产物:13C NMR δ 170. 90，156. 66，155. 68，153. 86，142. 41，133. 85，121. 24,72. 96-69. 30， 64. 08,53. 01,41. 82。实施例7.制备化合物(Ila)向LNA-存活蛋白(化合物10，1. 7μπιο1)在PBS缓冲液(5mL，pH 7.8)中的溶液中 添加化合物9a(Mw 20kDa, 17 μ mol)并在室温搅拌5小时。将反应混合物用水稀释至50mL 并装载在Poros HQ,强阴离子交换柱(IOmmX 1. 5mm,柱床体积 16mL)上，该柱预先用20mM Tris-HCl缓冲液，pH 7.4(缓冲液A)平衡。该柱用3_4倍柱体积的缓冲液A洗涤以去除 过量的PEG连接基。然后该产物以流速IOmL/分钟用梯度为0至100%的IM NaCl在20mM Tris-HCl缓冲液(pH 7. 4，缓冲液B)中的溶液洗脱10分钟，然后以100%缓冲液B洗脱10 分钟。洗脱的产物用HiPr印脱盐柱(50mL)脱盐并冻干得到产物。实施例8.制备化合物(13a)
在轻搅拌下将化合物lla(0. 084mmol)添加至RGD-K-NH2 (化合物12， 0. 00027mmol)在3mL磷酸钠缓冲液(0. ΙΜ,ρΗ 7. 8)中的溶液中。将该溶液在30°C搅拌30 分钟。使用GPC柱(Zorbax GF-450)监测PEG缀合。在反应结束时(原料酶已不存在)， 该混合物用12mL制剂缓冲液(0. 05M磷酸钠，0. 85%氯化钠，pH 7. 3)稀释并用Centripr印 浓缩器(Amicon)渗滤以去除未反应的PEG试剂。按需要在4°C持续渗滤直到通过混合等量 的滤液和0. 1% PMA(0. IM HCl中的聚甲基丙烯酸)不再检测到游离PEG，以得到产物。实施例9.制备化合物(14a)将20K8 臂-PEG-SC (化合物 8a, 7. 30g, 0. 35mmol)和化合物 2 (1. 82g, 5. 55mmol) 进行与实施例6所述的相同的反应条件以得到产物13C NMR δ 170. 90,156. 66,155. 68, 153. 86，142. 41，133. 85，121. 24,72. 96-69. 30,64. 08,53. 01,41. 82。实施例10.制备化合物(14b)将2CIK4 臂-PEG-SC (化合物 8b，6. Og, 0. 29mmol)和化合物 2 (765mg, 2. 33mmol)进行 与实施例6所述的相同的反应条件以得到产物=13C NMR δ 170. 76，156. 53，155. 57，153. 85， 142. 37，133. 79，121. 23,72. 44-69. 30,63. 99,52. 95,45. 36,41. 82。实施例11.制备化合物(15a)向C6-硫代-LNA-存活蛋白(化合物 10，120mg，0. 021mmol)在 60mL pH6. 5 磷酸盐 缓冲液中的溶液中添加化合物14a(2. 3mg,0. 107mmol)且将溶液在室温搅拌1小时。反应 进程通过阴离子交换HPLC检查。将反应混合物通过0. 2微米滤器过滤并装载在Poros阴 离子交换柱上。产物使用在PH 7. 0的缓冲液体系20mM Tris. HCl 2M NaCl梯度洗脱。脱 盐后的产量为从UV计算的SOmg寡聚物等价物。实施例12.制备化合物(17a)将化合物15a(80mg寡聚物等价物，0. 0142mmol)溶于20ml缓冲液(5M尿素，IOOmM KH2PO4)。将溶液在氮气下在0°C冷却，然后添加肽C-TAT(329mg，0. 198mmol)。观察到深黄 色。在氮气下在0°C持续搅拌反应1.5小时，然后通过阳离子交换色谱法使用Source 15S 树脂纯化。将柱(IOmmxlOmm)用3倍柱体积的缓冲液A (5M尿素，IOOmM KH2PO4, 25% CH3CN, PH 6. 5)平衡，然后将样品装载在柱上。将产物用缓冲液B(2M KBr)洗脱。将收集的产物冻 干并用50mM pH 7. 4PBS缓冲液在HiPr印脱盐柱上脱盐。然后将脱盐的溶液浓缩至约Img/ ml (寡聚物等价物)溶液。产物产量21. 75mg。实施例13.制备化合物(19a)向8臂2°k-SCPEG (化合物8a，1当量)在DMF中的溶液中添加化合物18 (16当量)。 然后，添加DIEA(32当量)且将所得混悬液在室温搅拌5小时。将反应混合物用DCM/Et20 在0°C沉淀。将固体过滤然后溶于水。粗固体使用C18反相色谱法纯化。收集产物峰并冻 干成固体。实施例14.制备化合物(20a)将化合物19a添加至2%胼在DMF中的溶液中，并将溶液在室温搅拌4小时。将反 应混合物装载在反相柱上并纯化。收集产物峰并冻干。实施例15.制备化合物(21a)将化合物20a (1当量)溶于20ml缓冲液(5M尿素 ，IOOmM KH2PO4)中。将该溶液 在0°c在氮气下冷却然后添加寡聚物-SH(8当量)。在氮气下在0°C持续搅拌该反应1. 5小时，然后通过阳离子交换色谱法使用Source 15S树脂纯化。将柱(IOmmxIOmm)用3倍柱体积的缓冲液A (5M尿素，IOOmMKH2PO4, 25% CH3CN，pH 6.5)平衡，然后将样品装载在柱上。将 产物用缓冲液B (2M KBr)洗脱。将收集的产物冻干并用50mM pH 7. 4PBS缓冲液在HiPr印 脱盐柱上脱盐。然后将脱盐的溶液浓缩至约lmg/ml(寡聚物等价物)溶液。
权利要求
式(I)的化合物其中R1是基本上非抗原性的水溶性聚合物；A是封端基团，或Y1和Y’1独立地为S、O或NR2；Y2和Y’2独立地为S、O、SO、SO2、NR20；Y3和Y’3独立地为H、离去基团、活化基团、官能团，或L1-3和L’1-3为独立选择的双官能连接基；R2-11、R’2-7和R20独立地选自氢、氨基、取代的氨基、叠氮基、羧基、氰基、卤素、羟基、硝基、硅烷基醚、磺酰基、巯基、C1-6烷基巯基、芳基巯基、取代的芳基巯基、取代的C1-6烷基硫基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-19支链烷基、C3-8环烷基、C1-6取代的烷基、C2-6取代的烯基、C2-6取代的炔基、C3-8取代的环烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、C1-6杂烷基、取代的C1-6杂烷基、C1-6烷氧基、芳基氧基、C1-6杂烷氧基、杂芳基氧基、C2-6烷酰基、芳基羰基、C2-6烷氧基羰基、芳基氧基羰基、C2-6烷酰基氧基、芳基羰基氧基、C2-6取代的烷酰基、取代的芳基羰基、C2-6取代的烷酰基氧基、取代的芳基氧基羰基、C2-6取代的烷酰基氧基和取代的芳基羰基氧基；R12和R’12独立地选自氢、羟基、离去基团、官能团、药物、靶向剂、诊断剂、取代的C1-6烷基硫基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-19支链烷基、C3-8环烷基、C1-6取代的烷基、C2-6取代的烯基、C2-6取代的炔基、C3-8取代的环烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、C1-6杂烷基、取代的C1-6杂烷基、C1-6烷氧基、芳基氧基、C1-6杂烷氧基、杂芳基氧基、C2-6烷酰基、芳基羰基、C2-6烷氧基羰基、芳基氧基羰基、C2-6烷酰基氧基、芳基羰基氧基、C2-6取代的烷酰基、取代的芳基羰基、C2-6取代的烷酰基氧基、取代的芳基氧基羰基、C2-6取代的烷酰基氧基、取代的芳基羰基氧基、马来酰亚氨基、乙烯基、取代的砜、氨基、羧基、巯基、酰肼和肼基甲酸基；(a)、(a’)、(d)和(d’)独立地为0或正整数；(b)和(b’)独立地为0或正整数；(c)和(c’)独立地为0或正整数；(e)和(e’)独立地为0或1；和(g)和(g’)独立地为0或1；条件是(a)和(g)不同时为0。FPA00001105858400011.tif,FPA00001105858400012.tif,FPA00001105858400013.tif
2.权利要求1所述的化合物，其中R8_n和R’8吣独立地选自氢、取代的酰氨基、酰基、 叠氮基、羧基、烷基氧基羰基、氰基和硝基。
3.权利要求1所述的化合物，其中R12和R，12独立地选自H.NH^OH.CO^.C^e烷氧基、 (V6烷基、马来酰亚氨基、乙烯基、砜的残基、巯基、酰胼和胼基甲酸基。
4.权利要求1所述的化合物，其中该离去基团选自0H、卤素、活化酯、环酰亚胺硫酮、 N-羟基琥珀酰亚氨基、对硝基苯氧基、N-羟基邻苯二甲酰亚氨基、N-羟基苯并三唑基、咪 唑、甲苯磺酰基、甲磺酰基、三氟乙基磺酰基、硝基苯磺酰基、(V6烷基氧基、Cm烷酰基氧基、 芳基羰基氧基、邻硝基苯氧基、对硝基苯氧基、五氟苯氧基、1，3，5-三氯苯氧基和1，3，5-三 氟苯氧基。
5.权利要求1所述的化合物，其中Li_3和L’独立地选自-[C(=0)v(CR22R23)t[C( = 0)]v’-，-[C(=0)v(CR22R23)t-0[C( = 0)]v’-，-[C(=0)v(CR22R23)t-NR26[C( = 0)]v’-，-[C(=0)v0(CR22R23)t[C( = 0)]v’-，-[C(=0)v0(CR22R23)t0[C( = 0)]v’-，-[C(=0)v0(CR22R23)tNR26[C( = 0)]v’-，-[C(=0)vNR21 (CR22R23)t[C( = 0)]v’-，-[C(=0)vNR21 (CR22R23)t0[C( = 0)]v’-，-[C(=0)vNR21 (CR22R23)tNR26[C( = 0)]v’_9-[C(=0)v(CR22R23)t0-(CR28R29)t’ [C( = 0)]v’-，-[C(=0)v(CR22R23)tNR26-(CR28R29)t’ [C(==0)]v’-，-[C(=0)v(CR22R23)tS-(CR28R29)t’ [C( = 0)]v’-，-[C(=0)v0(CR22R23)t0-(CR28R29)t’ [C(=0)]v’-，-[C(=0)v0(CR22R23)tNR26-(CR28R29)t’ [C(= 0)]v’--[C(=0)v0 (cr22r23) ts- (cr28r29) t. [c(=0)]v’-，-[C(=0)vNR21(CR22R23)t0-(CR28R29)t’ [C(= 0)]v’--[C(=0)vNR21(CR22R23)tNR26-(CR28R29)t’ [C( = 0)]-[C(=0)vnr21 (cr22r23) ts- (cr28r29) t’ [c (= 0)]v’-<formula>formula see original document page 4</formula>和其中R21_29独立地选自氢，(V6烷基、c3_12支链烷基、c3_8环烷基、(V6取代的烷基、c3_8取代的 环烷基、芳基、取代的芳基、芳烷基、Cm杂烷基、取代的(V6杂烷基、(V6烷氧基、苯氧基和(V6 杂烷氧基；(t)和(t’)独立地为o或正整数；和(v)和(V，)独立地为0或1。
6.权利要求1所述的化合物，其中Li_3和L’ 独立地选自[C=0)rNH(CH2)2CH = N-NHC ( = 0)-(CH2)2-，[C=0)rNH (CH2) 2 (CH2CH20) 2 (CH2) 2NH [C ( = 0)][C=0)rNH (CH2CH2) (CH2CH20) 2NH [C ( = 0) ] r’ -，[C=0)rNH(CH2CH2)sNH(CH2CH2)s’ [C( = 0)]r,-[C=0)rNH(CH2CH2)sS(CH2CH2)s’ [C( = 0)]r’-，[C=0)rNH(CH2CH2) (CH2CH20) [C( = 0)]r’-，[C=0)rNH (CH2CH2) s0 (CH2CH2) s’ [C ( = 0) ] r’ -，[C=0)rNH(CH2CH20) (CH2)NH[C( = 0)]r’-，[C=0)rNH (CH2CH20) 2 (CH2) [C ( = 0) ] r’ -，[C=0)rNH (CH2CH20) s (CH2) s’ [C ( = 0) ] r’ -，[C=0)rNHCH2CH2NH[C( = 0)]r’-，[C=0)rNH(CH2CH2)20[C( = 0)]r’-，[C=0)rNH(CH2CH20) [C( = 0)]r’-，[C=0)rNH(CH2CH20)2[C( = 0)]r’-，[C=0)rNH(CH2)3[C( = 0)]r’-，[C=0)ro (CH2CH2O) 2 (CH2) [C ( = 0) ] r’ -，[C=0)r0(CH2)2NH(CH2)2[C( = 0)]r’-，[C=0)ro (ch2ch2o) 2nh[c( = o)]r’-，[C=0)r0(CH2)20(CH2)2[C( = 0)]r’-，[C=0)r0(CH2)2S(CH2)2[C( = 0)]r’-，[C=0)ro (ch2ch2)nh[c( = o)]r’-，[C=0)ro (ch2ch2)o[c( = o)]r’-，[C=0)r0(CH2)3NH[C( 二 0)]r’-，[C=0)r0(CH2) 30[C( = 0)]r’-，[C=0)r0(CH2)3[C( = 0)]r’-，[C=0)rCH2NHCH2 [C ( = 0)]r’-，[C=0)rCH20CH2 [C ( = 0)]r’-，[C=0)rCH2SCH2 [C ( = 0)]r’-，[C=0)rS(CH2)3[C( = 0)]r’_，[C=0)r(CH2)3[C( = 0)]r_， <formula>formula see original document page 5</formula>和其中(r)和(r’ )独立地为0或I，条件是两者不同时为0。
7.权利要求I所述的化合物，其中L 3和L'1 3独立地选自氨基酸、氨基酸衍生物和肽。
8.权利要求I所述的化合物，其中Li-3和L'1 3独立地选自<formula>formula see original document page 6</formula><formula>formula see original document page 7</formula><formula>formula see original document page 7</formula>和 -NHCH(CH3)-C( = 0) -NH(CH2) 6-C (CH3) 2-C( = 0)-其中，Yn_19独立地为0、S或NR48 ；R31-48>R50-51和A51独立地选自氢、(V6烷基、C3_12支链烷基、C3_8环烷基、C^取代的烷基、 c3_8取代的环烷基、芳基、取代的芳基、芳烷基、(V6杂烷基、取代的Cm杂烷基、C^e烷氧基、 苯氧基和Cm杂烷氧基； Ar为芳基或杂芳基部分； Ln-15为独立选择的双官能间隔基；J和J’独立地选自主动运输至靶细胞的部分、疏水部分、双官能连接部分和其组合； (ell)、(hll)、(kll)、(zll)、(mil)和(nil)为独立选择的正整数； (all)、(ell)、(gll)、(jll)、(oil)和(qll)独立地为 0 或正整数；和 (bll)、(xll)、(x，11)、(fll)、(ill)和(pll)独立地为 0 或 1。
9.权利要求1所述的化合物，其中A选自H、NH2、OH、C02H、(V6烷氧基和C^烷基。
10.权利要求1所述的化合物，其具有下式
11.权利要求1所述的化合物，其具有下式(II)<formula>formula see original document page 8</formula>其中K是封端基团，或<formula>formula see original document page 8</formula>；和所有其它变量与权利要求1中的定义相同。
12.权利要求1所述的化合物其中k和L’工为赖氨酸。
13.权利要求1所述的化合物，其中礼包括直链的、末端支链的或多臂的聚环氧烷。
14.权利要求13所述的化合物，其中该聚环氧烷选自聚乙二醇和聚丙二醇。
15.权利要求13所述的化合物，其中该聚环氧烷选自 -Y7「(CH2CH20)n_CH2CH2-Y7「， -Y7「(CH2CH20)n_CH2C( = Y72)-Y7「，-Y7「C( = Y72)-(CH2)a71-Y73-(CH2CH20)n_CH2CH2-Y73-(敞^ = Y72)_Y71_，和 -Y71- (CR71R72) a72-Y73- (CH2) b71-0- (CH2CH20) n- (CH2) b71-Y73- (CR71R72) a72_Y71_， 其中y71 和 y73 独立地为 0、s、so、so2、nr73 或键； Y72 为 0、s 或 NR74 ；r71、R71、R73和R74独立地选自可用于R2的相同的部分； (a71)、(a72)和(b71)独立地为0或正整数；且 (n)为约10至约2300的整数。
16.权利要求13所述的化合物，其中该聚环氧烷为式-0-(CH2CH20)n-的聚乙二醇，其中 (n)为约10至约2300的整数。
17.权利要求1所述的化合物，其中礼具有的平均分子量为约200至约250，000道尔顿。
18.权利要求1所述的化合物，其中礼具有的平均分子量为约1，000至约200，000道尔顿。
19.权利要求1所述的化合物，其中礼具有的平均分子量为约2，000至约100，000道尔顿。
20.权利要求1所述的化合物，其中队具有的平均分子量为约2，000至约60，000道尔顿。
21.权利要求1所述的化合物，其中队具有的平均分子量为约5，000至约25，000道尔 顿或约20，000至约45，000道尔顿。
22.权利要求1所述的化合物，其选自<formula>formula see original document page 9</formula>，和<formula>formula see original document page 9</formula>其中mPEG为CH30-(CH2CH20)n-，其中(n)为约10至约2300的整数；和 Z和Z’独立地为封端基团或<formula>formula see original document page 10</formula>条件是至少一个z不为封端基团。
23.权利要求1所述的化合物其中R2_7和R’2_7独立地选自氢、甲基、乙基和异丙基。
24.权利要求1所述的化合物，其具有下式<formula>formula see original document page 10</formula>其中，A2是封端基团，或<formula>formula see original document page 10</formula>和所有其它变量与权利要求1中的定义相同。
25.权利要求1所述的化合物，其具有下式<formula>formula see original document page 10</formula>其中A3是封端基团，或其中，(h)和(h’ )独立地为0或正整数；和 所有其它变量与权利要求1中的定义相同。
26.权利要求1所述的化合物，其选自<formula>formula see original document page 11</formula><formula>formula see original document page 12</formula><formula>formula see original document page 13</formula>其中mPEG 具有式 CH30(CH2CH20)n-； PEG 具有式-0 (CH2CH20) n-，禾口 (n)为约10至约2300的整数。
27.制备包含吡啶基二硫化物部分的聚合化合物的方法，包括 将式(III)的聚合化合物 A^RrMidll) 与式(VI)的化合物<formula>formula see original document page 14</formula>在足以形成式(V)的化合物的条件下反应其中R是基本上非抗原性的水溶性聚合物； A4为封端基团或M1; A5为封端基团或<formula>formula see original document page 14</formula>Mi为OH或离去基团； M2 为-OH、SH 或-NHR9Q ；和r ！独立地为s、o或nr2 ； y2 和 r 2 独立地为 s、o、so、so2、nr20 ； Y3和Y’ 3独立地为H、离去基团、活化基团、官能团，或Li-3和L’ 为独立选择的双官能连接基；R2-11'R,2-11'R20和^独立地选自氢、氨基、取代的氨基、叠氮基、羧基、氰基、卤素、羟基、<formula>formula see original document page 14</formula>硝基、硅烷基醚、磺酰基、巯基、(V6烷基巯基、芳基巯基、取代的芳基巯基、取代的Cm烷基硫 基、(V6烷基、C2_6烯基、C2_6炔基、C3_19支链烷基、C3_8环烷基、Cm取代的烷基、C2_6取代的烯 基、C2_6取代的炔基、C3_8取代的环烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、C^e杂烷 基、取代的Cm杂烷基、(V6烷氧基、芳基氧基、C^e杂烷氧基、杂芳基氧基、C2_6烷酰基、芳基 羰基、C2_6烷氧基羰基、芳基氧基羰基、C2_6烷酰基氧基、芳基羰基氧基、C2_6取代的烷酰基、取 代的芳基羰基、C2_6取代的烷酰基氧基、取代的芳基氧基羰基、C2_6取代的烷酰基氧基和取代 的芳基羰基氧基；r12和R’12独立地选自氢、羟基、离去基团、官能团、药物、靶向剂、诊断剂、取代的(V6烷 基硫基、CV6烷基、c2_6烯基、c2_6炔基、c3_19支链烷基、c3_8环烷基、(V6取代的烷基、c2_6取代 的烯基、c2_6取代的炔基、c3_8取代的环烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、(V6 杂烷基、取代的Cm杂烷基、(V6烷氧基、芳基氧基、C^e杂烷氧基、杂芳基氧基、C2_6烷酰基、 芳基羰基、C2_6烷氧基羰基、芳基氧基羰基、c2_6烷酰基氧基、芳基羰基氧基、c2_6取代的烷酰 基、取代的芳基羰基、C2_6取代的烷酰基氧基、取代的芳基氧基羰基、c2_6取代的烷酰基氧基、 取代的芳基羰基氧基、马来酰亚氨基、乙烯基、取代的砜、氨基、羧基、巯基、酰胼和胼基甲酸 基；(a)、(a’)、(d)和(d，)独立地为0或正整数；(b)和(b’)独立地为0或正整数；(c)和(c’)独立地为0或正整数；(e)和(e，)独立地为0或1 ；和(g)和(g，)独立地为0或1 ；条件是(a)和(g)不同时为0。
28.权利要求27所述的方法，还包括将式(V)的化合物与含巯基的部分在足以形成聚 合缀合物的条件下反应。
29.权利要求28所述的方法，其中该含巯基的部分为生物活性部分，其选自药物活性 化合物、酶、蛋白质、寡核苷酸、抗体、单克隆抗体、单链抗体和肽。
30.通过权利要求28的方法制备的聚合缀合物。
31.治疗哺乳动物的方法，包括向有此需要的患者给药有效量的权利要求30的化合物。
全文摘要
本发明提供含吡啶基二硫化物部分的聚合连接基。还公开了制备该聚合连接基的方法和使用该连接基制备缀合物的方法。
文档编号A61K39/44GK101835482SQ200780101178
公开日2010年9月15日 申请日期2007年9月15日 优先权日2007年8月20日
发明者夏靖, 普拉桑纳·雷迪, 赵洪 申请人:安佐制药股份有限公司