专利名称：：N-取代苯基-2-(1-芳基-1h-咪唑-2-巯基)乙酰胺类衍生物及其制备方法与应用的制作方法
技术领域：
：本发明涉及f取代苯基-2-a-芳基-1H-咪唑-2-巯基)乙酰胺类衍生物、制备方法与作为HIV-1非核苷类抑制剂的应用，属于抗HIV药物
技术领域：
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背景技术：
：人免疫缺陷病毒1型(HIV-1)是艾滋病(AIDS)的主要病原体。自1981年发现以来，艾滋病已成为危害人类生命健康的重大传染性疾病。虽然HAART的实施是抗艾滋病治疗的一项重大突破，但是由于耐药性的出现及长期服药的毒性问题极大地限制了该疗法的应用，新型抗艾滋病药物的研发刻不容缓。逆转录酶在病毒整个生命周期中起着关键作用，靶向于HIV-1RT非底物结合位点的非核苷类抑制剂(NNRTIs)具有高效、低毒的优点，成为HAART疗法的重要组成部分。但是由于NNRTIs结合位点的氨基酸易发生突变，导致耐药毒株的蔓延，使该类药物迅速丧失临床效价。因此研发新型、高效抗耐药的NNRTIs是目前抗艾滋病药物研究的重要方向之一。参见《抗艾滋病药物研究》，刘新泳主编，人民卫生出版社，北京，2006，12。含有多N原子的五元杂环化合物(如三唑、四唑及咪唑等)具有广泛的抗HIV活性，它们在HIV非核苷类逆转录酶抑制剂、整合酶抑制剂、侵入抑制剂及调节蛋白Rev等抑制剂的研究中发挥重要作用。它们广泛应用于新型抗HIV先导化合物的发现及结构优化，一是作为构成药效团的基本结构母核，以适合药物特殊作用靶点的空间要求，二是作为活性取代基或环系的组成部分而产生相应的生物活性。药物之所以依赖于杂环是因为杂环较脂肪或芳香化合物在体内更不易代谢分解，且与其具有更好的生物相容性。三唑及四唑巯乙酰胺类化合物是最近通过高通量筛选得到的一类新型、广谱高效的非核苷类HIV-1逆转录酶抑制剂，其先导化合物分别为A和B，结构及活性如下图所示。对该类结构骨架的抑制剂构效关系分析发现三唑或四唑杂环为维持分子的活性构象所必需，"S-CH2~CO-NH"链使分子具有一定的柔韧性，灵活调节在结合位点的构象；与五元杂环直接相连的苯环及与酰胺键相连的苯环上的取代基的种类及位置对活性有较大影响，参考.王等，新型HIV-1非核苷类逆转录酶抑制剂巯基三唑衍生物的合计及活性评价，生物有机及药物化学快报，2006，16(16):4174-7.②.莫瑞哥里拉等，四唑巯乙酰胺衍生物具有抗野生型HIV逆转录酶及K103N突变株活性的非核苷类抑制剂，生物有机及药物化学快报，2006,16(10):2748陽52.(①.WangZ,WuB,KuhenKL,BursulayaB,NguyenTN,NguyenDG,HeY.SynthesisandbiologicalevaluationsofsulfanyltriazolesasnovelHIV-1non-nucleosidereversetranscriptaseinhibitors.AfeJC7gw丄e//.2006,16(16):4174-7.②.MuragliaE，KinzelOD,LauferR,MillerMD,MoyerG,MunshiV,OrvietoF,PalumbiMC,PescatoreG，RowleyM,WilliamsPD,SummaV.Tetrazolethioacetanilides:potentnon-nucleosideinhibitorsofWTHIVreversetranscriptaseanditsK103Nmutant万/oo尸gAfeJC7;ew2006,16(10):2748-52.)。200810157250.0说明书第2/5页EC50=2.053|jMWTRTPol(IC50)=5nM虽然三唑及四唑巯乙酰胺类化合物对野生型及耐药毒株均具有较高的活性，但是它们仍具有体内代谢不稳定等缺点。因此，以该类骨架化合物为模板，利用构效关系的有效信息，进行广泛的结构修饰，对发现广谱高效、生物利用度好具有自主知识产权的新型抗HIV药物具有重大意义。
发明内容本发明提供了f取代苯基-2-(l-芳基-lH-咪唑-2-巯基)乙酰胺类衍生物及其制备方法，本发明还提供了A^取代苯基-2-(1-芳基-lH-咪唑-2-巯基)乙酰胺类衍生物的活性筛选结果及其应用。本发明的技术方案如下1.}取代苯基-2-(l-芳基-lH-咪唑-2-巯基)乙酰胺类衍生物本发明以三唑及四唑巯乙酰胺类化合物为先导化合物，根据生物电子等排体药物设计原理，用咪唑杂环代替先导化合物中的三唑环或四唑环，同时在与咪唑相连芳基为对氯苯基、1-萘基的情况下，在与酰胺相连的苯环上引入不同的取代基以考查其对HIV的抑制活性，由此设计合成了一系列新型/^取代苯基-2-(1-芳基-1H-咪唑-2-巯基)乙酰胺类衍生物，结构通式如下其中Ar为对氯苯基或1-萘基，X为F、Cl、Br、,2或0{3，Y为H或CH3。l取代苯基-2-(1-芳基-1H-咪唑-2-巯基)乙酰胺类衍生物的合成路线如下s.、r、一u丫SH入r3g,3hAr-NCS1人rNH0-lg,lh2g,2h5gl陽5g65hl-5h6g系列Ar=4-chlorophenylh系歹ll:Ar=1-naphthaleny1上述反应式中Ar为对氯苯基或1-萘基，X为F、Cl、Br、N02或ch3，Y为H或CHa。试剂(i)氨基乙醛縮二甲醇，EtOH;(ii)5NHCl/回流；(iii)2-氯乙酰-炉取代苯胺(4),Na2C03或NaOH,EtOH,rt.3.中间体1-芳基-1H-咪唑-2-巯基(3)的制备方法将芳基异硫氰酸酯溶于EtOH中，室温搅拌下滴加氨基乙醛縮二甲醇，滴毕搅拌30min，反应放热，有大量白色固体析出，反应液冷却，抽滤，冷EtOH洗，得1-芳基-3-(2，2-二甲氧乙基)硫脲(2)粗品，将该粗品与5NHC1加热回流，冷却，用NaOH溶液将反应液调为碱性，4抽滤，滤液用浓盐酸酸化，析出大量白色固体，水洗，干燥得到1-芳基-1&咪唑-2-巯基(3)。4.f取代苯基-2-(l-芳基-1H-咪唑_2-巯基)乙酰胺类衍生物(5)的制备方法向l-芳基-lH-咪唑-2-巯基(3)的EtOH混悬液中加入NaOH,室温搅拌，待混悬液澄清后，加入等当量的2-氯乙酰-f取代苯胺(4)，继续室温搅拌，TLC检测反应完全，减压蒸千溶剂，得到固体或油状物，向其中加入二氯甲烷，水洗，有机层干燥，浓縮，EtOH重结晶得到目标化合物(5)。上述的各种2-氯乙酰-f取代苯胺是2-氯乙酰-萨邻氯苯胺、2-氯乙酰-f邻硝基苯胺、2-氯乙酰-f邻氟苯胺、2-氯乙酰-f邻溴苯胺、2-氯乙酰-,邻溴对甲基苯胺或2-氯乙酰-^邻甲基苯胺。5.目标化合物的抗HIV-1活性和毒性实验对上述合成的12个化合物中的6个化合物进行了抗HIV-1(IIIB)活性筛选，它们的抗HIV-1活性和毒性数据列于表1中，并以奈韦拉平(NVP)、地拉韦定(DLV)、依法韦伦(EFV)、AZT为对照。由表1可以看出，被测试的6个化合物中有4个显示出了明显的抗HIV-1(IIIb)活性，命中率很高。其中化合物5a2的EC5。值达到微摩尔水平；化合物5bl的ECs。值与上市药物奈韦拉平(EC;。=0.208)，优于先导化合物A(ECS。=2.053)。1取代苯基-2-(l-芳基-lH-咪唑-2-巯基)乙酰胺类衍生物是一系列结构新颖的非核苷类HIV-l抑制剂，在目前较少的筛选样本中，该类骨架的化合物显示出了较高的命中率，其中化合物5a2的活性及选择性较好，这充分证明该类化合物具有进一步的研发价值，可作为抗HIV的先导化合物加以利用。本发明的i取代苯基-2-(1-芳基-lH-咪唑-2-巯基)乙酰胺类衍生物可作为HIV-1非核苷类抑制剂应用。具体地说，作为HIV-1抑制剂用于制备抗艾滋病药物。一种抗HIV-1药物组合物，包括本发明的f取代苯基-2-(1-芳基-lH-咪唑-2-巯基)乙酰胺类衍生物。表1化合物5a-b的结构及抗HIV-1(IIIB)的活性和毒性(MT-4细胞)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>"EC5。保护50。/。感染HIV-l的MT-4细胞免于细胞病变的化合物浓度；ACC5。使50W未感染HIV-1的细胞发生病变的化合物浓度；e选择性系数:CC5o/EC5o的比值；dNA:无活性。具体实施例方式下面结合实施例对本发明做进一步说明，所有化合物的编号与表1相同。实施例1.中间体l-(4-氯代苯基)-lH-咪唑-2-巯基(3a)的制备将8.5g(0.05mol)异硫氰酸对氯苯酯(la)溶于100mlEtOH中，室温搅拌下滴加氨基乙醛缩二甲醇5.3g(0.05mo1)，滴毕搅拌30min，反应放热，有大量白色固体析出，反应液冷却，抽滤，冷EtOH洗，得1-(4-氯苯)-3-(2,2-二甲氧乙基)硫脲(2a)粗品，不必纯化，直接进行下一步反应。将该粗品与50ral5NHC1加热回流3h，冷却，用4NNaOH溶液将反应液调为碱性，抽滤，滤液用浓盐酸酸化，析出大量白色固体，水洗，干燥得到1-(4-氯苯)-1H-咪唑-2-巯基(3a)，白色粉末，产率24.2%，mp:202.5-204.3°C。实施例2.斧(2-氯苯基)-2-(1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-2-巯基)乙酰胺(5al)的制备向0.42g(0.002mol)1_(4-氯苯)-1H-咪唑-2-巯基(3a)的EtOH(30ml)混悬液中加入0.08g(0.002mo1)NaOH，室温搅拌，待混悬液澄清后，加入等当量的2-氯乙酰-f邻氯苯胺(4.1)0.40g，继续室温搅拌，TLC检测反应完全，减压蒸干溶剂，得到灰白色固体，向其中加入30ml二氯甲垸，3X30ml水洗，有机层干燥，浓縮，Et0H重结晶得到目标化合物(5al)0.37g，白色针状晶体，产率48.9%，mp:233.1-235.(TC。产物光谱分析数据'H-画R(CDC13，ppm)S:10.54(s，1H，NH)，8.33(d，1H,>7.8Hz)，7.46(d，2H，/=8.4Hz,PhH)，7.35(dd，1H，/产1.2Hz，/尸8.4Hz，PhH),7.32(d，2H,/=8,4Hz，PhH)，7.25(dt,1H),7.20(s，1H)，7.11(d，1H'/=L2HzPhH),7.03(dt,1H)，3.98(s，2H'S—CH2);13C-画R(CDC13，ppm)S:167.87(C=0),142.61(N=C-N),135.40，134.96，134.81，129.90，129.58,127.28，126.35'124.72，123.74，122.52，122.38，36.76(S—CH2);IR(KBr，cm—1)3211(u冊)，1705(u)，1597(s),1541(s)，1489(s)，1442(s)(uc,，uc=c),1512(5J.EI-MS:历/么379.3(M+l).C17H13C12N30S(377.02).实施例3.f(2-硝基苯基)-2-(1-(4-氯苯基)-lH-咪唑-2-巯基)乙酰胺(5a2)的制备如实施例2所述的方法，所不同的是向将实施例l制备的中间体试剂3a0.42g(0.002mo1)的Et0H(30ml)混悬液中加入0.10g(0.001mo1)Na2C03,室温搅拌，待混悬液澄清后，加入等当量的2-氯乙酰-,邻硝基苯胺(4.2)0.43g，继续室温搅拌，TLC检测反应完全，减压蒸干溶剂，得到黄色固体，向其中加入30ml二氯甲垸，3X30ml水洗，有机层干燥，浓縮，Et0H重结晶得到目标化合物(5a2)0.30g，浅黄色针状晶体，产率38.7%，卿:240.1-241.8°C。产物光谱分析数据IR(KBr，crrf1)3156O冊)，1708"，—)，1660(s)，1584(s)，l棚(s)'1440(s)("C=N,uc=c),1553(SNH)，1503,1347(SN02).EI-MS:历/"90.7(M+l)，392.1(M+2).C17H13C1N403S(388.04).实施例4.中间体1-(l-萘基)-lH-咪唑-2-巯基(3b)的制备如实施例l所述的方法，所不同的是将9.26g(0.05mol)异硫氰酸对氯苯酯(lb)溶于100mlEt0H中，室温搅拌下滴加氨基乙醛縮二甲醇5.3g(0.05mo1)，滴毕搅拌片刻，反应放热，有大量白色固体析出，反应液冷却，抽滤，冷EtOH洗，得1-(1-萘基)-3-(2，2-二甲氧乙基)硫脲(2b)粗品，不必纯化，直接进行下一步反应。将该粗品与50ml5NHC1加热回流3h，冷却，用4NNaOH溶液将反应液调为碱性，抽滤，滤液用浓盐酸酸化，析出大量白色固体，水洗，干燥得到1-(1-萘基)-lf咪唑_2-巯基(3b)，白色粉末，产率27.8%,mp:186.5-服7°C。实施例5.,(2-氯苯基)-2-(1-(l-萘基)-lH-咪唑-2-巯基)乙酰胺(5bl)的制备如实施例2所述的方法，所不同的是向0.45g(0.002mol)1-(1-萘基)_1^咪唑-2_巯基(3b)的Et0H(30ral)混悬液中加入0.08g(0.002mol)NaOH，室温搅拌，待混悬液澄清后，加入等当量的2-氯乙酰-/^邻氯苯胺(4.1)0.40g，继续室温搅拌，TLC检测反应完全，减压蒸干溶剂，得到灰色固体，向其中加入30ml二氯甲垸，3X30ml水洗，有机层干燥，浓縮，EtOH重结晶得到目标化合物(5bl)0.43g，白色针状晶体，产率54.8%，mp:253.1-254.2'C。产物光谱分析数据'H-腿(CDCUppm)S:10.59(s，1H，NH)，8.31(d,1H,/=7.8Hz),8.02(d，1H,J=8.4Hz),7.98(d,1H，/=7.8Hz)，7.60-7.05(m，9H)，3.98(dd，2H，S—CH2);13C-NMR(CDCUppm)S:167.88(00)，144.28(N二C-N),135.40，134.25,132.48,130.30，129.60,129.29,129.06，128.42'127.86,127.37，127.11，125.33，125.18，124.78,124.13,124.04，122.63，122.65，36.69(S—CH2);IR(KBr，cm-1)3197(uNH)，1683(u—，H—)，1592(s)，1538(s)，1469(s),1439(s)("C=N,uc—J.EI-MS:/n/z394.8(M+l).C21H16C1N30S(393.07).实施例6.如实施例5所述的方法，所不同的是向将实施例4制备的中间体试剂3b0.45g(0.002mo1)的EtOH(30ml)混悬液中加入0.lOg(O.OOlmol)Na2C03，室温搅拌，待混悬液澄清后，加入等当量的2-氯乙酰-/\^邻硝基苯胺(4.2)0.43§，继续室温搅拌，TLC检测反应完全，减压蒸干溶剂，得到黄色固体，向其中加入30ml二氯甲烷，3X30ml水洗，有机层干燥，浓縮，EtOH重结晶得到目标化合物(5a2)0.30g，浅黄色针状晶体，产率58.3%，mp:248.2-249.8'C。产物光谱分析数据IR(KBr，cm—1)3156(uNH),1708("一，—)，1660(s),1584(s)，1488(s),1440(s)(uc——N,uc=c),1553(SNK),1503,1347(5XGZ).C21H16N403S(404.44).EI-MS:m/z405.5(M+l),406.3(M+2).C21H'6N403S(404.09).权利要求1.N-取代苯基-2-(1-芳基-1H-咪唑-2-巯基)乙酰胺类衍生物，其结构通式如下其中Ar为对氯苯基或1-萘基，X为F、Cl、Br、NO2或CH3，Y为H或CH3。2.权利要求1所述的f取代苯基-2-(卜芳基-1H-咪唑-2-巯基)乙酰胺类衍生物的制备方法，步骤如下将芳基异硫氰酸酯溶于EtOH中，室温搅拌下滴加氨基乙醛縮二甲醇，滴毕搅拌30min,反应放热，有大量白色固体析出，反应液冷却，抽滤，冷EtOH洗，得1-芳基-3-(2，2-二甲氧乙基)硫脲(2)粗品，将该粗品与5NHC1加热回流，冷却，用NaOH溶液将反应液调为碱性，抽滤，滤液用浓盐酸酸化，析出大量白色固体，水洗，干燥得到1-芳基-lf咪唑-2-巯基(3);向1-芳基-1H-咪唑-2-巯基(3)的EtOH混悬液中加入NaOH，室温搅拌，待混悬液澄清后，加入等当量的2-氯乙酰-A^取代苯胺(4)，继续室温搅拌，TLC检测反应完全，减压蒸干溶剂，得到固体或油状物，向其中加入二氯甲垸，水洗，有机层干燥，浓縮，EtOH重结晶得到目标化合物/^取代苯基-2-(1-芳基-1H-咪唑-2-巯基)乙酰胺类衍生物(5);上述的各种2-氯乙酰-f取代苯胺是2-氯乙酰-f邻氯苯胺、2-氯乙酰-f邻硝基苯胺、2-氯乙酰-/^邻氟苯胺、2-氯乙酰-,邻溴苯胺、2-氯乙酰-A^邻溴对甲基苯胺或2-氯乙酰-f邻甲基苯胺。3.权利要求1所述的f取代苯基-2-(1-芳基-1H-咪唑-2-巯基)乙酰胺类衍生物作为HIV-1抑制剂的应用。4.如权利要求1所述的f取代苯基-2-(l-芳基-1H-咪唑-2-巯基)乙酰胺类衍生物制备抗HIV的药物的应用。5.—种抗HIV药物组合物，包括权利要求l的,取代苯基-2-(1-芳基-lH-咪唑-2-巯基)乙酰胺类衍生物。全文摘要本发明提供了N-取代苯基-2-(1-芳基-1H-咪唑-2-巯基)乙酰胺类衍生物，结构通式如右式，其中Ar为对氯苯基或1-萘基，X为F、Cl、Br、NO<sub>2</sub>或CH<sub>3</sub>，Y为H或CH<sub>3</sub>。本发明的衍生物是新颖的结构骨架，具有较高的抑制HIV活性，可作为先导化合物用于抗HIV药物的制备。文档编号A61K31/4164GK101362722SQ200810157250公开日2009年2月11日申请日期2008年9月27日优先权日2008年9月27日发明者刘新泳,鹏展申请人:山东大学