杂环化合物的制作方法

专利名称：杂环化合物的制作方法
杂环化合物
交叉引用
本申请要求2008年4月27日提交的美国临时申请系列号第61/046,496号 的优先权，该申请的内容参考结合入本文中。
背景技术：
趋化因子是在免疫和炎症反应期间调节白细胞粘附和经内皮迁移的细胞因 子家族(Mackay C.R.， Nat. Immunol., 2001 ， 2:95; Olson等，Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol.， 2002， 283:R7)。趋化因子也调节T细胞和B细胞的运输 和寻靶，并能促进淋巴生成系统和造血系统的发育(Ajuebor等，Biochem. Pharmacol., 2002， 63:1191)。已经在人体中鉴定到约50种趋化因子。根据保守 半胱氨酸残基在N末端的位置，可将它们分为4个亚家族，即CXC、 CX3C、 CC和C趋化因子(Onuffer等，Trends Pharmacol Sci.， 2002， 23:459)。趋化因子 通过结合和激活细胞表面的G蛋白偶联受体(GPCR)介导其生物学功能。
基质衍生因子-l(SDF-l)是CXC趋化因子成员。最初由骨髓基质细胞系克 隆，发现可用作B细胞祖细胞的生长因子(Nishikawa等，Eur. J. Immunol., 1988， 18:1767)。 SDF-1在造血干细胞和内皮祖细胞的寻靶和运动中起到核心作用 (Bleul等，J. Exp. Med.， 1996， 184:1101;和Gazzit等，Stem Cells, 2004， 22:65-73)。 SDF-1通过CXCR4受体介导其生理学功能。缺少SDF-1或CXCR4受体的小鼠 在骨髓生成、B细胞生成和小脑发育中出现致死性异常(Nagasawa等，Nature， 1996， 382:635; Ma等，Proc. Natl. Acad. Sci.， 1998， 95:9448; Zou等，Nature, 1998， 393:595; Lu等，Proc. Natl. Acad. Sci.， 2002， 99:7090)。 CXCR4受体广 泛表达于各种组织，特别是免疫和中枢神经系统，以被认为是T淋巴细胞上 HIV-1/2的主要共同受体。虽然最初对CXCR4拮抗作用的兴趣集中于它在AIDS 治疗中的潜在应用(Bleul等，Nature, 1996， 382:829)，但目前越来越明确，CXCR4 受体和SDF-1也参与其它病理状况，如类风湿性关节炎、哮喘和肿瘤转移 (Buckley等，J. Immunol., 2000， 165:3423)。近年来，有报道称CXCR4拮抗剂 和抗癌药能协同抑制癌症，如急性早幼粒细胞性白血病(Liesveld等，LeukemiaResearch 2007， 31:1553)。另夕卜，CXCR4/SDF-1途径在数种组织损伤模型的再 生中至关重要。具体说，己发现损伤部位的SDF-1水平升高，CXCR4阳性细胞
能主动参与组织再生过程。

发明内容
本发明是基于以下发现特定化合物能够(l)有效地抑制SDF-1和趋化因子 受体(例如CXCR3或CXCR4受体)之间的结合，(2)当与粒细胞集落刺激因子 (G-CSF)联用时，在干细胞和内皮祖细胞的活动中表现出协同效果。
在一个方面，本发明涉及具有以下结构式的化合物
Q 、U N N N
—V'N^(R3)m H
(R4)FX 。
在此式中，Q和U各自为CH或N，前提是Q和U中的至少一种是N; X， Y和Z各自独立地是d—5亚烷基或者缺失；m是0， 1， 2， 3， 4或5; n是0， 1 或2; p是1或2; R!是H， C广do垸基，C3-C2o环烷基，C广C2o杂环烷基，芳基，
杂芳基，卤素，CN， ORa， COORa， OC(O)Ra， C(O)Ra， C(0)NRaRb，或NRaRb; R2是C广C,o烷基，C3-C2o环垸基，C广C20杂环烷基，芳基，杂芳基，或Q-Qo
烷基，其任选被C广do烷基，C3-C2o环烷基，d陽C2o杂环烷基，或N(RcRd)取代；
R3独立地是C,-d。烷基，C3-C20环垸基，Q-C20杂环烷基，芳基，杂芳基，卤素， CN， ORe， COORe， OC(O)Re， C(0)Re， C(0)NReRf，或NReRf;或者R3是和与 之相连的环上的两个碳原子连接的Ci-5亚垸基，或者和与之相连的环上的一个
碳原子连接的C2—8亚垸基；R4是P(=0)(ORg)(OR') ， P(=0)(NHRg)(OR,)， P(=0)(NRg)(NRi)， S(=0)2ORg，或S(=0)2Rg;其中Ra， Rb， Rc， Rd， Re， Rf， Rg和Ri各自独立地是H， C广Cu)垸基，C3-C2Q环烷基，C广C2Q杂环烷基，芳基， 杂芳基，或-C(O)R， R为H、 d-d。垸基、C3-C2o环垸基、Q-C2Q杂环垸基、芳
基或杂芳基；或者Ra和Rb相连， 一起形成C2-8亚垸基，Re和Rd相连， 一起形 成C^亚垸基，Re和Rf相连， 一起形成C2-8亚烷基，或Rg和R,相连， 一起形 成Cw亚烷基。
上述化合物可具有以下特征中的一种或多种特征U是N; X是-CH2-， -CH2CH2^-CH2CH2CH2-，且p为l，或者X是/^"2—或一CH2-CH-CH2一且p为2; Y是-CH2或缺失；Z是-CHr; m是0， 1，或2; n是1或2; R,是NH2; R2 是Cm院基取代的N(RcRd)，例如-CH2CH2-N(RcRd)或-CH2CH2CH2-N(RcRd)，其 中Rc是H而Rd是C厂Cio垸基，C3-C2。环烷基，C广C2o杂环垸基，芳基，或杂芳
基，或者Re和Rd相连， 一起形成C4—6亚垸基；R3是CpC3垸基，C3-Q环烷基，
C,-Q杂环垸基，芳基，杂芳基，卤素，CN， ORe，或C(O)NReRf;或者Rs是和
与之相连的环上的两个碳原子连接的d-2亚烷基，或者和与之相连的环上的一
个碳原子连接的<:2-5亚垸基；R4是P(=0)(OH)2， P(=0)(OH)(OCH2CH3)，
o、
0。 rrNV
P(=0)(OCH2CH3)2， X， l|v^J\^o ， S(=0)2OH， S(=0)2CH3，或S(=0)2Ph。
在另一个方面，本发明涉及具有以上结构式的化合物，其中Q和U各自是 N或CH，前提是它们当中的至少一种是N; X， Y和Z各自独立地是d-s亚烷 基或者缺失，m是1， 2， 3， 4，或5; n是O， 1或2; R!是H， C,-Cu)烷基， C3-C20环垸基，C广C20杂环烷基，芳基，杂芳基，卤素，CN， ORa， COORa， OC(0)Ra， C(0)Ra， C(0)NRaRb，或NRaRb; R2是Q-Qo垸基，(:3-<:20环垸基， C,-C2o杂环烷基，芳基，杂芳基，或C,-Q。烷基，其任选地被d-d。垸基，C3-C20
环烷基，C广C2。杂环烷基，或N(ReRd)取代；R3是d-Cn)垸基，C3-C20环烷基， Q-C20杂环烷基，芳基，杂芳基，卤素，CN， ORe， COORe， OC(O)Re， C(0)Re，
C(0)NReRf，或NReRf;或R3是和与之相连的环上的两个碳原子连接的亚烷
基，或和与之相连的环上的一个碳原子连接的C2.8亚烷基；R4是H， d-Cu)垸
基，<:3-<:20环垸基，C广C2o杂环垸基，芳基，杂芳基，ORg， COORg， C(0)Rg， C(O)NRgRi， P(-O)(ORg)(ORi)， P(=0)(NHRg)(ORi)， P(=0)(NRg)(NRi), S(=0)2ORg， 或S(-0)2Rg;其中Ra， Rb， Rc， Rd， Re， Rf， Rg和R,各自独立地是H， C广do 垸基，C3-C2o环垸基，C广C2o杂环烷基，芳基，杂芳基，或-C(O)R， R为H、 C广Qo
烷基、C3-C20环垸基、C广C20杂环烷基、芳基或杂芳基;或Ra和Rb相连，共同形 成C2.s亚烷基，Rc和Rd相连，共同形成C2-8亚垸基，Re和Rf相连，共同形成
<:2—8亚垸基，或Rg和R,相连，共同形成C2-8亚垸基。
上述化合物可具有以下特征中的一种或多种特征U是N; X是-CH2-，
-CH2CH2-， -CH2CH2CH2-，或者缺失；Y是-012或者缺失；Z是-012-; m是l 或2; n是1或2; R！是NH2; R2是d-5垸基取代的N(RcRd)，例如-CH2CH2-N(RcRd) 或-CH2CH2CH2-N(RcRd)，其中Rc是H而Rd是C厂do烷基，〇3-(:20环烷基，d-C^o
杂环垸基，芳基，或杂芳基，或者Rc和Rd相连，共同形成C4-6亚烷基；R3是Q-CV烷基，C3-C8环垸基，d-Q杂环垸基，芳基，杂芳基，卤素，CN， ORe，
或C(O)NReRf;或R3是和与之相连的环上的两个碳原子连接的d.2亚烷基，或 和与之相连的环上的一个碳原子连接的C2—5亚烷基；R4是P(=0)(OH)2，
<formula>formula see original document page 10</formula>
在此式中，U是CH或N; L是d-C,Q烷基，CrC2o环烷基，CrC加杂环垸 基，芳基，或杂芳基；Y和Z各自独立地是C"5亚烷基或者缺失；m是0， 1， 2， 3， 4，或5; n是0， l或2; &是H， C广Cu)烷基，<:3-<:20环垸基，C广C2。杂环 烷基，芳基，杂芳基，卤素，CN， ORa， COORa， OC(O)Ra, C(0)Ra， C(0)NRaRb，
或NRaRb; R2是d-Qo垸基，C3-C20环烷基，C,-C20杂环烷基，芳基，杂芳基， 或C广do烷基，其任选地被C广do烷基，C3-C2o环垸基，C广C20杂环垸基，或
N(RcRd)取代；R3是C厂Cu)垸基，Q-C2o环垸基，C厂C2o杂环烷基，芳基，杂芳
基，卣素，CN， ORe， COORe， OC(O)Re， C(0)Re， C(O)NReRf，或NReRf;或
R3是和与之相连的环上的两个碳原子连接的C,—5亚烷基，或者和与之相连的环 上的一个碳原子连接的C2—8亚烷基；R4是H， C广Qo垸基，C3-C20环烷基，d-C加
杂环垸基，芳基，杂芳基，ORg， COORg， C(O)Rg，或C(0)NRgRi;其中Ra， Rb， Rc， Rd， Re， Rf， Rg和R,各自独立地是H， C厂C!o烷基，<:3-<:20环垸基， C广C2o杂环垸基，芳基，杂芳基，或-C(O)R， R为H、 C广Cu)烷基、C3-C2o环垸 基、d-C加杂环烷基、芳基或杂芳基;或Ra和Rb相连，共同形成C2-8亚烷基，
Rc和Rd相连，共同形成C2—8亚垸基，Re和Rf相连，共同形成C^亚垸基，或
Rg和R,相连，共同形成C2—8亚烷基。
上述化合物可具有以下特征中的一种或多种特征U是N; Y是-CH2或者 缺失；Z是-CH2-; m是l或2; n是1或2; L是环己基；&是NH2; R2是Cm 垸基取代的N(RcRd)，例如-CH2CH2-N(RcRd:^-CH2CH2CH2-N(RcRd)，其中Rc为
P(=0)(OH)(OCH2CH3) ， P(=0)(OCH2CH3)2 ， W ， U S(=0)2CH3，或S—0)2Ph。
在另一个方面，本发明涉及具有以下结构式的化合物:H而Rd为d-do垸基，CrC2Q环烷基，d-C2o杂环烷基，芳基，或杂芳基，或
Rc和Rd相连，共同形成C4—6亚烷基；R3是C,-Q烷基，C3-Cs环烷基，Q-C8杂 环垸基，芳基，杂芳基，卤素，CN， 0Re，或C(O)NReRf;或R3为和与之相连 的环上的两个碳原子连接的d.2亚烷基，或和与之相连的环上的一个碳原子连
接的C2-5亚烷基；R4是H或任选被以下基团取代的d-C3烷基ORg， C02Rg， NRgRj， P(=0)(ORg)(ORi)， P(=0)(NHRg)(ORi)， P(=0)(NRg)(NRi)， S—0)2。Rg或 S(=0)2Rg;其中Rg和Ri各自独立地是H， Q-Qo垸基，(23-(]20环垸基，d-C^ 杂环垸基，芳基，杂芳基，或-C(O)R， R为H、 C厂do烷基、C3-C2o环垸基、d-C20 杂环垸基、芳基或杂芳基;或Rg和Ri相连，共同形成Cw亚烷基。 在另一个方面，本发明涉及具有以下结构式的化合物
该结构式中，Q和U各自是N或CH，前提是它们当中的至少一种是N; Y和Z各自独立地是C,.5亚烷基或者缺失；m是0， 1， 2， 3， 4或5; n是0， 1
或2; !^是H， C广Qo垸基，C3-C2o环垸基，C广C20杂环烷基，芳基，杂芳基，
卤素，CN， ORa， COORa， OC(O)Ra， C(O)Ra， C(0)NRaRb，或NRaRb; R2是
C广do烷基，CVC20环垸基，C广C20杂环烷基，芳基，杂芳基，或C广do烷基，
其任选地被C广do垸基，Q-C2o环烷基，C广C2o杂环烷基，或N(RcRd)取代；R3 是Q-do烷基，CrC2o环垸基，C广C2o杂环烷基，芳基，杂芳基，卤素，CN，
ORe， COORe， OC(O)Re， C(O)Re， C(0)NReRf，或NReRf;或R3是和与之相连 的环上的两个碳原子连接的Cm亚垸基，或和与之相连的环上的一个碳原子连 接的C2—8亚垸基；其中Ra， Rb， Rc， Rd， Re和Rf各自独立地是H， d-do烷基，
CVC2o环烷基，C广C2o杂环烷基，芳基，杂芳基，或-C(O)R， R为H、 C广do垸
基、C3-C2。环烷基、C「C20杂环垸基、芳基或杂芳基;或Ra和Rb相连，共同形成 C2-8亚垸基，Rc和Rd相连，共同形成C2-8亚烷基，或Re和Rf相连，共同形成 C2-8亚烷基。
上述化合物可具有以下特征中的一种或多种特征U是N; Y是-CH2或者 缺失；Z是-CHr; m是0， l或2; n是1或2; R!是NH2; R2是C"烷基取代 的N(RcRd)，例如-CH2CH2-N(RcRd)或一CH2CH2CH2-N(RcRd)，其中R。是H而Rd是Q-do烷基，CVC2o环烷基，C厂C2o杂环垸基，芳基，或杂芳基，或I^和Rd 相连，共同形成C4—6亚垸基；R3是d-C3烷基，C3-Cs环烷基，d-Q杂环烷基， 芳基，杂芳基，卤素，CN， ORe，或C(O)NReRf;或R3是和与之相连的环上的 两个碳原子连接的Ci—2亚烷基，或和与之连接的环上的一个碳原子连接的C2.5
亚烷基；
在另一个方面，本发明涉及具有以下结构式的化合物
在结构式中，Q和U各自是N或CH，前提是它们当中的至少一种是N; W， X， Y和Z各自独立地是C,—5亚烷基或者缺失；m是0， 1， 2， 3， 4或5; n是0， l或2; Ri是H， d-C、o烷基，QrC2o环垸基，d-C2o杂环垸基，芳基，
杂芳基，卤素，CN， ORa， COORa， OC(O)Ra， C(0)Ra， C(0)NRaRb，或NRaRb;
R2是哌啶-l-基，(双环[2.2.1]庚烷基)氨基，(环己基甲基)氨基，(2，3-二氢-111-
茚-2-基嵐基，苯基氨基，或苄基氨基；R3是d-Cu)烷基，C3-C2。环垸基，C广C20 杂环烷基，芳基，杂芳基，卤素，CN， ORe， COORe， OC(O)Re， C(0)Re， C(0)NReRf， 或NReRf;或R3是和与之相连的环上的两个碳原子连接的CM亚垸基，或和与
之相连的环上的一个碳原子连接的C2-s亚垸基；R4是H， d-Cu)烷基，C3-C20 环垸基，C广C2o杂环烷基，芳基，杂芳基，ORg， COORg， C(O)Rg，或C(0)NRgRi; 其中Ra， Rb， Re， Rf， Rg和Ri各自独立地是H， C广do烷基，<:3-<:20环烷基， C广C2o杂环垸基，芳基，杂芳基，或-C(O)R， R为H、 C厂do垸基、C3-C2o环烷
基、q-C20杂环烷基、芳基或杂芳基;或Ra和Rb相连，共同形成C2-8亚垸基， Re和Rf相连，共同形成C2.8亚垸基，或Rg和Ri相连，共同形成C^亚烷基。 上述化合物可具有以下特征中的一种或多种特征U是N; X是-CHr， -CH2CH2-或-CH2CH2CH2-; Y是-CH2或者缺失；Z是-012-; W是-CH2CH2-; m 是1或2; n是l或2; Ri是NH2; R3是d-C3垸基，Q-C8环烷基，C广Q杂环
烷基，芳基，杂芳基，卤素，CN， ORe，或C(O)NReRf;或R3是和与之相连的 环上的两个碳原子连接的亚烷基，或和与之相连的环上的一个碳原子连接
的Cw亚烷基。
术语"烷基"表示饱和或不饱和的，直链或支链的烃部份，例如-CH3，-CH2-CH=CH2，或支链的-(:3117。术语"亚烷基"表示二价或多价的、饱和或不饱<formula>formula see original document page 13</formula>
和的、直链或支链的烃部份，例如-CH2-， I ， -CH2CH2-， /eH—eH2—， -CH2CH2CH2-， —ch2-ch-ch2—，或.CH-CH-。术语"环垸基"表示饱和或不饱和的、 非芳香族的、单环、双环、三环或四环的烃部份，例如环己基，环己烯-3-基， 或金刚烷基。术语"杂环烷基"表示饱和或不饱和的、非芳香族、单环、双环、 三环或四环的包含一个或多个环上杂原子(例如N、 O或S)的部份，例如4-四氢 吡喃基或4-吡喃基。术语"芳基"表示包含一个或多个芳环的烃部份。芳基部份 的例子包括苯基(Ph)，亚苯基，萘基，亚萘基，芘基，蒽基和菲基。术语"杂芳 基"表示包含一个或多个含有至少一个杂原子(例如N， O，或S)的芳环的部份。 杂芳基部份的例子包括呋喃基，亚呋喃基，芴基，吡咯基，噻吩基，嗯唑基， 咪唑基，噻唑基，吡啶基，嘧啶基，喹唑啉基，喹啉基，异喹啉基和吲哚基。
除非有相反的具体说明，本文提到的烷基，亚烷基，环垸基，杂环烷基，芳基 和杂芳基同时包括取代的和未取代的部份。环烷基，杂环垸基，芳基和杂芳基
可能的取代基包括但不限于C广d。垸基，C2-do烯基，C2-do炔基，C3-C20环烷 基，C3-C20环烯基，C厂C2o杂环烷基，C广C2o杂环烯基，C广do烷氧基，芳基，
芳氧基，杂芳基，杂芳氧基，氨基，C,-d。烷基氨基，C广C2o二烷基氨基，芳基 氨基，二芳基氨基，羟基，卤素，硫代，CVdo烷硫基，芳硫基，CrCu)烷基磺 酰基，芳基磺酰基，酰氨基，氨酰基，氨基硫代酰基，脒基，胍，脲基，氰基， 硝基，酰基，硫代酰基，酰氧基，羧基，以及羧酸酯。另一方面，烷基和亚烷
基上可能的取代基包括除了 C「d。烷基，CVCH)烯基和C2-do炔基以外的上述
所有取代基。环垸基，杂环垸基，芳基和杂芳基还可以互相稠合。
如果可能的话，上述化合物包括这些化合物本身，以及它们的盐、前药和 溶剂合物。例如盐可以由阴离子与具有以上结构式中的一种的化合物上带正电 荷的基团(例如氨基)形成。合适的阴离子包括氯离子、溴离子、碘离子、硫酸根、 硝酸根、磷酸根、柠檬酸根、甲磺酸根、三氟乙酸根、乙酸根、苹果酸根、甲 苯磺酸根、酒石酸根、富马酸根、谷氨酸根、葡糖醛酸根、乳酸根、戊二酸根 和马来酸根。类似地，还可以由阳离子和具有上述结构式中的一种的化合物上 带负电荷的基团(例如羧酸根)形成。合适的阳离子包括钠离子、钾离子、镁离子、 钙离子和铵离子，例如四甲基铵离子。所述化合物还可包括含有季氮原子的盐。 前药的例子包括酯以及能够在对对象给药之后提供活性化合物的其它药学上可 接受的衍生物。溶剂合物表示活性化合物与药学上可接受的溶剂之间形成的络合物。药学上可接受的溶剂包括水、乙醇、异丙醇、乙酸乙酯、乙酸和乙醇胺。
在另一个方面，本发明涉及一种治疗与CXCR4相关的医学病症的方法，所
述医学病症例如是炎性疾病或免疫疾病，发育疾病或变性疾病，组织损伤或癌 症。本方法包括给予需要治疗的对象以有效量的一种或多种上文所述式(I)的化 合物。
炎症分为局部炎症或全身性炎症，急性炎症或慢性炎症。例子包括视网膜 病(例如糖尿病性视网膜病和增殖性视网膜病)、炎性皮肤病(例如皮炎、湿疹、 特应性皮炎、过敏性接触性皮炎、荨麻疹、坏死性脉管炎、皮肤脉管炎、高敏 感性脉管炎、嗜曙红细胞性肌炎、多发性肌炎、皮肌炎和嗜曙红细胞性筋膜炎)、 炎性肠病(例如克罗恩病和溃疡性结肠炎)、超敏性肺病(例如超敏感性肺炎、嗜
酸细胞性肺炎、迟发型超敏反应、间质性肺病(ILD)、特发性肺纤维变性、以及 与类风湿性关节炎相关的ILD)、黄斑水肿、哮喘和过敏性鼻炎。
免疫疾病的特征是免疫系统反应过度或反应减退。例子包括但不限于自身 免疫疾病(例如类风湿性关节炎、银屑病关节炎、全身性红斑狼疮、重症肌无力、 I型糖尿病、肾小球肾炎、自身免疫性甲状腺炎(autoimmune throiditis)、强直性 脊柱炎、全身性硬化症、以及多发性硬化症)、极性和慢性炎症(例如全身性过敏 或超敏反应、药物过敏、昆虫叮咬过敏、移植物排斥、包括同种异体移植物排 斥、以及移植物抗宿主反应疾病)、舍格伦综合征、以及人免疫缺陷病毒感染。
发育异常是生长或分化相关疾病，可导致功能缺失或者获得功能。变性疾 病通常表示组织变为功能性较低或较差的形式。发育异常或变性疾病的例子包 括年龄相关的黄斑变性、角膜新生血管形成、虹膜新生血管形成、脊髓性肌萎 縮、进行性假肥大性肌营养不良、帕金森病和阿尔茨海默氏病。组织损伤可以 由以下原因造成氧化应激(例如中风或心肌梗死时的缺血-再灌注)、补体激活、 移植物排斥、化学因素(例如酒精造成的肝脏损伤或癌症治疗中的粘膜组织伤 害)、病毒感染(例如与丙型肝炎相关的肾小球损伤)、以及机械作用力(例如运动 损伤)。组织损伤的例子包括脑损伤、神经损伤、心脏损伤、肝脏损伤、骨骼肌 损伤、肾损伤、胰脏损伤、肺损伤、皮肤损伤、四肢损伤、无症状缺血、心肌 缺血和胃肠道损伤。
癌症是一类具有以下特征的疾病细胞群能够自主生长，即以细胞生长快
速增生、有时发生肿瘤转移为特征的不正常状态或病征。癌症的例子包括但不 限于癌症和恶性肿瘤，例如白血病、肉瘤、骨肉瘤、淋巴瘤、黑色素瘤、卵巢 癌、皮肤癌、睾丸癌、胃癌、胰腺癌、肾癌、乳腺癌、前列腺结肠直肠癌、头颈癌、脑癌、食管癌、膀胱癌、肾上腺皮质瘤、肺癌、支气管癌、子宫内膜癌、
鼻咽癌、颈部癌或肝癌、结肠癌、肾癌、甲状腺癌、造血系统癌症(haematopoietic cancer)和未知主要位点的癌。
需要上述治疗的对象还可并行给予有效量的上述杂环化合物中的一种，以 及有效量的一种或多种其它治疗剂。治疗剂包括G-CSF，甾体或非甾体抗炎药， 化学治疗药，血管生成抑制剂，COX2抑制剂，白细胞三烯受体抑制剂，前列腺 素调节剂，TNF调节剂以及免疫抑制剂(例如环孢素A)。例如，人们可以将本发 明的化合物与化疗药联用，用来治疗癌症(血液性癌症或实体瘤)。不希望被理论 所限制，在治疗血液性癌症(例如急性髓细胞样白血病和急性成淋巴细胞性白血 病)的时候，所述杂环化合物作为"化学敏化剂"使得癌细胞移动离开骨髓，然后 所述化学治疗药杀死这些癌细胞，从而提高治疗效果。另外，不受限于理论， 在实体瘤的治疗中，所述杂环化合物作为血管生成抑制剂，当与化疗药一起使 用时，可以提高治疗效果。再例如，人们可以使用本发明的化合物和另一种血 管生成抑制剂来治疗视网膜病，年龄相关的黄斑变性，黄斑水肿，角膜新生血 管形成或虹膜新生血管形成。G-CSF是一种会刺激骨髓产生更多白细胞的造血 生长因子。化疗药是能够抑制癌细胞生长的药物或细胞毒试剂。血管生成抑制 剂是通过抑制血管形成过程而发挥治疗作用的药物。血管生成抑制剂的例子包 括但不限于阿瓦斯汀(Avastin)，卢森提斯(Lucentis)，舒尼替尼(Sunitinib)和索拉 非尼(Sorafenib)。术语"并行给药"表示在治疗期间的相同时间或不同时间给予 两种或多种活性剂。并行给药的一个例子是给予患者两种或多种活性剂的固体 或液体混合物。
在另一个方面，本发明涉及一种提高骨髓衍生的细胞向血液迁移的方法。 该方法包括给予需要治疗的对象以有效量的一种或多种上面式(I)所示的化合 物。术语"骨髓衍生的细胞"表示源自骨髓的细胞。骨髓衍生细胞的例子包括但 不限于CD34+细胞和CD133+细胞。较佳地，骨髓衍生细胞是干细胞或内皮祖 细胞。在此方法中，还可给予有效量的G-CSF生长因子。
本发明还包括用于治疗上述医学病症的包含上述一种或多种化合物以及药 学上可接受的载体的组合物，以及该组合物在生产用于上述治疗的药剂中的应 用。
在本发明的另一方面，提供了本发明上述的化合物或其药学上可接受盐的 用途，它们被用于制备治疗与CXCR4相关的医学病症的药物。
较佳地，所述医学病症是炎性疾病或免疫疾病，发育疾病或变性疾病，或组织损伤；更佳地医学病症选自下组
(a) 糖尿病性视网膜病，增殖性视网膜病，年龄相关的黄斑变性，黄斑水肿， 角膜新血管形成或虹膜新血管形成；
(b) 脑损伤，神经损伤，心脏损伤，肝损伤，骨骼肌损伤，肾损伤，胰脏损 伤，肺损伤，皮肤损伤，肢体缺血，无症状缺血，心肌缺血或胃肠道损伤；
(C)I型糖尿病；
在本发明的另一方面，提供了本发明上述化合物或其药学上可接受盐的用 途，它们被用于制备治疗癌症的药物。
在本发明的另一方面，提供了一种药物组合物，它含有本发明上述的化合 物或其药学上可接受盐以及药学上可接受的载体。
在另一优选例中，所述药物组合物的剂型选自下组滴眼剂、软膏、可注 射流体、微粒或缓释剂型。
在另一优选例中，所述化合物选自化合物2-4， 14-19， 21-57， 62， 63， 74， 75， 78-98， 101， 110， 111， 141-144， 146或147;或化合物60-100， 112， 113或148-150。
本发明还提供了一种用来治疗与CXCR4相关的医学病症的方法，该方法包 括给予需要治疗的对象以有效量的本发明上述的化合物，其中，所述病症是炎 性疾病或免疫疾病，发育疾病或变性疾病，或组织损伤。
在另一优选例中，所述医学病症是糖尿病性视网膜病，增殖性视网膜病， 年龄相关的黄斑变性，黄斑水肿，角膜新血管形成或虹膜新血管形成。
在另一优选例中，所述组合物被配制成滴眼剂，软膏，可注射流体，微粒 或缓释剂型。
在另一优选例中，所述医学病症是脑损伤，神经损伤，心脏损伤，肝损伤， 骨骼肌损伤，肾损伤，胰脏损伤，肺损伤，皮肤损伤，肢体缺血，无症状缺血， 心肌缺血或胃肠道损伤。
在另一优选例中，所述医学病症是I型糖尿病。
在另一优选例中，所述方法还包括给予所述对象以有效量的G-CSF生长因子。
在本发明的另一方面，提供了一种治疗癌症的方法，该方法包括给予需要
治疗的对象以有效量的本发明上述化合物以及有效量的化疗药。
下面对本发明的一个或多个实施方式进行了详细描述。从说明书和权利要 求书可以显而易见地了解本发明的其它特征、目标和优点。
具体实施例方式
下面显示了本发明的示例性化合物，化合物1-150:
<formula>formula see original document page 17</formula><formula>formula see original document page 18</formula><formula>formula see original document page 19</formula><formula>formula see original document page 20</formula><formula>formula see original document page 21</formula><formula>formula see original document page 22</formula><formula>formula see original document page 23</formula><formula>formula see original document page 24</formula><formula>formula see original document page 25</formula>
上述化合物可以通过本领域众所周知的方法制备。Rg和R6是卤素
<formula>formula see original document page 26</formula>
去保护
历程I可以通过各种方式进行改性，以制备本发明的其它化合物。例如，
可以使用不同于化合物(2)的氨基化合物，或者可以用咪唑垸或二氮杂萆代替哌 嗪化合物(4)。再例如，化合物(7)可以如下面历程II所示进行改性以制得膦酸酯 化合物(9)或膦酸(10)。
历程n
这样合成得到的化合物可通过柱色谱、高效液相色谱或重结晶之类的方法 纯化。
下面的实施例1-150详细描述了本发明的化合物1-150的制备。 上述方法中使用的中间体可以是在市场上购得的，或者可通过本领域已知 的方法制备。另外，所述方法还可包括在本文具体描述的步骤之前或之后添加 或除去合适的保护基团，使得最终能够合成所述化合物。另外，可以以另外的
26
下面显不的历程I是用来合成某些示例性化合物的常规合成路径。包含两
个卤素基团(R3和R6为卤素)的化合物(1)与氨基化合物(2)反应，制得式(3)的化合
物，其与包含环上氮原子的哌嗪化合物(4)反应，制得式(5)的化合物。最后，如
果需要的话，对所得化合物进行去保护，得到式(6)的化合物，即为本发明的化
合物中的一种。 历程i
<formula>formula see original document page 26</formula>
Rd是C1-C10烷基
去保护 r^N人N^N 6Rd顺序或次序进行各种合成步骤以制得所需的化合物。可用来合成可用的化合物 的合成化学转化和保护基团方法(保护和去保护)是本领域已知的，包括例如以下
文献所述的那些R. Larock，《综合有机转化》(Comprehensive Organic Transformations), VCH出版社(1989); T.W. Greene和P.G.M. Wuts，《有机化 学中的保护基团》(Protective Groups in Organic Synthesis),第二版，约翰威力和 萨孙出版社(John Wiley and Sons)(1991); L. Fieser和M. Fieser，《有机合成中的 菲氏禾卩菲氏反应试齐ll》(Fieser and Fieser，s Reagents for Organic Synthesis),约翰 威力和萨孙出版社(1994);以及L.Paquette著的《有机合成反应试剂百科全书》 (Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis),约翰威力和萨孙出版社(1995)， 以及其随后的版本。
本文所述的化合物可包含非芳香性的双键以及一个或多个不对称中心。因 此，它们可以是外消旋体和外消旋混合物，单独的对映异构体，独立的非对映 异构体，非对映异构体混合物，互变异构体以及顺式或反式-异构形式。所有的 这些异构形式都包括在本发明范围内。
本发明还包括一种药物组合物，其包含有效量的至少一种上述化合物以及 药学上可接受的载体。另外，本发明包括给予具有上面发明内容部份描述的疾 病的患者以有效量的一种或多种本发明的化合物以治疗所述疾病的方法。本发 明还包括给予对象有效量的一种或多种所述化合物，以提高骨髓衍生细胞向血 液迁移的方法。
术语"治疗"表示给予具有上述医学病症、该医学病症的征兆、或者具有易 产生该症状倾向的对象一种或多种化合物，以期获得治疗效果，例如治愈、缓 解、改变、影响、改善或防止上述医学病症、该医学病症的征兆、或者易产生 该症状的倾向。术语"有效量"表示使得被治疗的对象获得治疗效果所需的活性 化合物的量。本领域技术人员应当认识到，有效剂量可根据所治疗的疾病种类、 给药途径、赋形剂使用、以及可能一同使用的其它治疗而改变。
为了实施本发明的方法，包含一种或多种本发明化合物的组合物可以胃肠 外给药、口服给药、鼻腔给药、直肠给药、局部给药或向颊给药。术语"胃肠 外"表示皮下注射、皮内注射、静脉注射、肌内注射、关节内注射、动脉注射、 滑膜内注射、胸骨内注射、鞘内注射、病损内注射或颅内注射，以及任何合适 的灌注技术。所述组合物可以为溶液、悬浮液、乳液、片剂、丸剂、胶囊、粉 末、微粒或纳米颗粒的形式。还可将组合物配制成能够实现活性组分的受控释 放或持续释放。
无菌注射用组合物可以是在无毒胃肠外可接受的稀释剂或溶剂中的溶液或 悬浮液，例如在1，3-丁二醇中的溶液。可接受的运载体和溶剂为甘露醇，水，林 格溶液和等渗氯化钠溶液。另外，通常可用非挥发性油作为溶剂或悬浮介质(例如合成的甘油单酯或甘油二酯)。脂肪酸，例如油酸及其甘油酯衍生物可用来制 备注射制剂，例如可使用药学上可接受的天然油类，例如橄榄油或蓖麻油，特 别是它们的聚氧乙烯化形式。这些油溶液或悬浮液还可包含长链醇稀释剂或分 散剂，羧甲基纤维素，或类似的分散剂。可使用通常用于生产药学上可接受的
固体、液体或者其它剂型的其它常用的表面活性剂，例如吐温(Tween)或司盘 (Span)，或其它类似的乳化剂或生物利用度促进剂来配制所述组合物。
用于口服给药的组合物可以是任何可接受的口服剂型，包括胶囊、片剂、 乳剂和水性混悬剂、分散剂和溶液剂。对于片剂，常用的载体包括乳糖和玉米 淀粉。通常还可加入润滑剂，例如硬脂酸镁。对于胶囊形式的口服给药，可用 的稀释剂包括乳糖和干燥的玉米淀粉。当水性混悬剂或乳剂口服给药的时候， 可以将活性组份悬浮或溶解在与乳化剂或悬浮剂合并的油相中。如果需要，可 以加入某些甜味剂、芳香剂或着色剂。
可以根据制药领域众所周知的技术制备鼻腔喷雾剂或吸入组合物。例如， 可使用本领域已知的苄醇或其它合适的防腐剂、提高生物利用度的吸收促进剂、 氟代烃、和/或其它增溶剂或分散剂来制备盐水溶液形式的所述组合物。
可以根据本领域众所周知的技术制备和使用滴眼剂或软膏组合物。
包含一种或多种活性化合物的组合物还可以直肠给药的栓剂形式给予。
药学组合物中的载体必须是"可接受"的，即能够与组合物的活性成分相 容(优选能够稳定活性成分)，且不会对被处理的对象造成不利影响。可以将一种 或多种增溶剂作为用于递送活性成分的药用辅料。其它载体的例子包括胶体氧 化硅、硬脂酸镁、纤维素、月桂基硫酸钠和D&C Yellow #10。
上述化合物可以通过体外试验(下面的实施例153和154)初步筛选，筛选它 们在治疗上述疾病方面的功效，然后通过动物试验和临床试验进行验证。其他 的方法对于本领域普通技术人员来说也是显而易见的。
已发现用作CXCR4拮抗剂的本发明化合物能与其配体SDF-1竞争结合该 受体，从而阻断CXCR4/SDF-1信号转导，该信号转导在干细胞和祖细胞的运动 /寻靶中至关重要。如果不受理论束缚，本发明化合物可通过以下机理用于治疗 和修复组织损伤。
通过阻断CXCR4/SDF-1信号转导，本发明化合物能促进干细胞和祖细胞由 骨髓(干细胞/祖细胞储库)运动到外周血中。更具体说，因为SDF-1在骨髓中高 表达，所以表达CXCR4的干细胞和祖细胞通过CXCR4-SDF-1相互作用被俘获 到骨髓中。通过阻断这种相互作用，本发明化合物将干细胞和祖细胞由骨髓释 放到外周血中。在血液中循环时，干细胞和祖细胞寻靶至发生损伤的组织和器 官并通过分化成因其损失造成损伤的细胞类型来修复损伤。
在视网膜病中，SDF-1在玻璃体内高表达。通过结合干细胞和祖细胞中表达的CXCR4， SDF-1能帮助这些细胞迁移到视网膜中，导致新血管形成，这在 视网膜病发生和发展中起到重要作用。本发明化合物通过阻断CXCR4/SDF-1信 号转导，也防止干细胞和祖细胞寻靶至视网膜，从而有效治疗视网膜病。可将 该化合物局部应用于视网膜病患者的眼部。与全身应用不同，局部应用不会使 干细胞/祖细胞运动到骨髓外，因此不会帮助这些细胞寻靶至视网膜内。
以下的具体实施例仅仅用于说明，而不会对说明书的其余部份构成任何限 制。相信本领域技术人员基于本文所述的内容，无需另外的阐述推敲便可最大 程度地利用本发明。本文所引用的所有出版物都全文参考结合入本文中。
实施例1:化合物1的制备
<formula>formula see original document page 29</formula>p 氯代甲酸乙酯 、ll -IO'C至室温
<formula>formula see original document page 29</formula>
化合物1
将水(IO.O升)和(Boc)20(3.33千克，15.3摩尔)加入反-4-氨基甲基-环己烷羧 酸(化合物l-1， 2.0千克，12.7摩尔)禾卩碳酸氢钠(2.67千克，31.8摩尔)的溶液中。 该反应混合物在常温下搅拌18小时。水层用浓盐酸(2.95升，pH-2)酸化，然后 过滤。收集所得的固体，用水(15升)洗涤三次，在加热箱(6(TC)中干燥，制得白 色固体反—4-(叔丁氧羰基氨基-甲基)-环己垸羧酸(化合物l-II， 3.17千克，97%)。 Rf = 0.58 (EtOAc)。 LC-MS m/e 280 (M+Na+)。力NMR (300 MHz， CDC13) 5 4.58 (brs， 1H)， 2.98 (t， J = 6.3Hz， 2H)， 2.25 (td， J=12， 3.3 Hz， 1H)， 2.04 (d， J =ll.lHz， 2H)， 1.83 (d， J=ll.lHz， 2H)， 1.44 (s， 9H)， 1.35~1.50(m， 3H)，0.89-1.03 (m， 2H)。 "C画R (75 MHz， CDC13) S 181.31 ， 156.08， 79.12， 46.41， 42.99， 37.57， 29.47， 28.29， 27.96。熔点134.8~135.0 。C。
化合物l-II(1.0千克，3.89摩尔)在THF(5升)中的悬浮液在-l(TC冷却，在 低于-1(TC的温度下加入三乙胺(1.076升，7.78摩尔)和氯代甲酸乙酯(0.441升， 4.47摩尔)。该反应混合物在常温下搅拌3小时。然后该反应混合物再次在-10 。C冷却，在低于-l(TC的温度下加入NH40H(3.6升，23.34摩尔)。反应混合物在 常温下搅拌18小时，然后过滤。收集固体，用水(IO升)洗涤三次，在加热箱(60。C) 中干燥，制得白色固体反-4-(叔丁氧基羰基-氨基-甲基)-环己烷羧酰胺(化合物 l-III， 0.8千克，80%)。 Rf=0.23(EtOAc)。 LC匿MS m/e 279， M+Na+。 ！H NMR (300 MHz， CD3OD) S 6.63 (brs， 1H)， 2.89 (t， J = 6.3 Hz， 2H)， 2.16 (td， J=12.2， 3.3 Hz， 1H)， 1.80~1.89(m， 4H)， 1.43 (s， 9H)， 1.37-1.51 (m， 3H)， 0.90~1.05 (m， 2H)。 13C NMR (75 MHz， CD3OD) S 182.26， 158.85， 79.97， 47.65， 46.02， 39.28， 31.11， 30.41， 28.93。熔点221.6-222.0 。C。
将化合物l-III(1.2千克，4.68摩尔)在CH2Cl2(8升)中的悬浮液在-l(TC冷却， 在低于-10。C的温度下加入三乙胺(1.3升，9.36摩尔)和三氟乙酸酐(0.717升，5.16 摩尔)。该反应混合物搅拌3小时。加入水(2.0升)之后，分离有机层，并用水(3.0 升)洗涤两次。然后使得有机层通过硅胶并浓縮。所得的油用二氯甲烷结晶。晶 体用己烷洗涤，制得白色晶体反-(4-氰基-环己基甲基)-氨基甲酸叔丁基酯(化合物 l-IV， 0.95千克，85%)。Rf=0.78(EtOAc)。LC-MS m/e261， M+Na+。丄H画R (300 MHz， CDCl3)S4.58(brs， 1H)， 2.96 (t， J = 6.3Hz， 2H)， 2.36 (td， J=12， 3.3 Hz， 1H)， 2.12 (dd， J=13.3， 3.3 Hz， 2H)， 1.83 (dd， J=13.8， 2.7 Hz， 2H)， 1.42 (s， 9H)， 1.47~1.63 (m， 3H)， 0.88~1.02 (m， 2H)。 13C NMR (75 MHz， CDC13) 5 155.96， 122.41， 79.09， 45.89， 36.92， 29.06， 28.80, 28.25， 28.00。熔点100.4~100.6°C。
将化合物1-IV (1.0千克，4.196摩尔)溶解在1，4-二噁烷(8.0升)和水(2.0 L) 的混合物中。向该反应混合物中加入一水合氢氧化锂(0.314千克，4.191)、阮内 镍(0.4千克，2.334摩尔)和10%的钯碳(0.46千克，0.216摩尔)在水中50%的悬 浮液。该反应混合物在氢气气氛中，在5(TC下搅拌20小时。过滤除去催化剂， 然后真空除去溶剂，加入水(1.0升)和CH2Cl2(0.3升)的混合物。相分离之后，有 机相用水(l.O升)洗涤，然后浓縮，得到浅黄色油状物反-(4-氨基甲基-环己基甲 基)-氨基甲酸叔丁基酯(化合物l-V， 0.97千克，95%)。 Rf = 0.20(MeOH/EtOAc = 9/1)。 LC-MSm/e243， M+H+。 'H薩R(300MHz， CDC13) 5 4.67 (brs， 1H)， 2.93 (t' J = 6.3Hz， 2H)， 2.48 (d， J = 6.3 Hz， 2H)， 1.73~1.78(m， 4H)， 1.40 (s， 9H)， 1.35 (brs， 3H)， 1.19-1.21 (m， 1H)， 0.77~0.97 (m， 4H)。 13C NMR (75 MHz， CDC13) 5 155.85， 78.33， 48.27， 46.38， 40.80， 38.19， 29.87， 29.76， 28.07。
化合物l-V (806克)和Et3N(1010克，3当量)在1-戊醇(2.7升)中的溶液在90。C下用化合物l-VI， (540克，1当量)处理15小时。TLC显示反应完全。
在25。C将乙酸乙酯(1.5升)加入反应混合物。该溶液搅拌1小时。过滤 Et3NHCl盐。然后在5(TC和真空条件下将滤液浓縮至1.5升(初始体积的1/6)。 然后向浓縮溶液加入二乙醚(2.5升)，在25"过滤后制得所需的产物l-VII (841 克，产率68%)。
中间体1-VII(841克)的溶液用在MeOH (8.1升)中的4 N HCl/二噁烷(2.7升) 处理，在25。C搅拌15小时。TLC显示反应完全。所述混合物在真空和5(TC的 条件下浓縮至1.5升(初始体积的1/7)。然后将二乙醚(5升)缓慢加入该溶液中， 形成1-VIII的HC1盐(774克)，过滤，真空(<10托)干燥。为了进行中和，在25 。C将K2C03(2.5千克，8当量)加入l-Vm的HC1盐在MeOH(17升)中的溶液中。 该混合物在相同温度下搅拌3小时(pH〉12)，过滤(估计滤液中l-VIII的量为504 克)。
在0-i(rc将醛i-ix(58i克，基于i-vn的摩尔量为i.o当量)加入i-vm的
滤液中。所述反应在0-10。C搅拌3小时。TLC显示反应完成。然后在低于10 'C的温度下加入NaBH4 (81克，基于l-VII的摩尔量为1.0当量)，该溶液在 10-15°C搅拌1小时。对所述溶液进行浓縮，制得残余物，然后该残余物用 CH2C12(15 L)处理。所述混合物用H20 (1.2升)稀释的NH4C1饱和水溶液(300毫 升)洗涤。浓縮CH2Cl2层，残余物用硅胶色谱(短柱，EtOAc作为流动相，用来 除去其它组分；MeOH/28% NH40H:97/3作为流动相用来收集1-X)纯化，制得 粗l-X(841克)。
然后在25。C将Et3N(167克，1当量)和Boc2O(360克，1当量)加入1-X (841 克)的CH2C12(8.4升)溶液中。该混合物在25。C搅拌15小时。通过TLC证明反 应完全之后，浓缩溶液，将EtOAc(5升)加入所得的残余物中。所述溶液在低压 和50。C的条件下浓縮至3升(初始体积的1/2)。然后将正己烷(3升)加入浓縮溶 液中。通过加晶种，在50'C形成固体产物，过滤和蒸发操作之后得到所需的粗 产物l-XI(600克，产率60%)。
在25°C向化合物1-XI(120.0克)和哌嗪(l-XIt 50.0克，3当量)在1-戊醇(360 毫升)中的溶液中加入Et3N(60.0克3.0当量)。所述混合物在12(TC搅拌8小时。 在25。C将乙酸乙酯(480毫升)加入反应混合物中。溶液搅拌l小时。对Et3NHCl 盐进行过滤，浓縮溶液，用硅胶纯化(EtOAc/MeOH-2:8)，以74%的产率制得
i-xm(96克)。
中间体I-XIII(IOO毫克)的溶液用在CH2C12 (1毫升)中的4 N HCl/二噁垸(2 毫升)处理，在25。C搅拌15小时。浓縮该混合物，制得化合物1的盐酸盐(51毫 克)。
CI-MS(M++ 1): 459.4实施例2:化合物2的制备
<formula>formula see original document page 32</formula>
化合物2
中间体1-XIII如实施例1所述制备。
在25。C向1-XIII(120克)的MeOH(2.4升)溶液加入二乙基乙烯基膦酸酯 (2-1， 45克，1.5当量)。该混合物在65。C下搅拌24小时。TLC和HPLC显示反 应完全。浓縮该溶液，通过硅胶(MeOH/CH2Cl2-8/92)纯化，HPLC分析产物的 纯度得到87克2-II(产率539fc，纯度>98%，每种单独的杂质含量<1%)。
将20呢的TFA/CH2Cl2(36毫升)溶液加入中间体2-11(1.8克)的CH2C12(5毫升) 溶液中。该反应混合物在室温下搅拌15小时，通过除去溶剂进行浓縮，制得化 合物2的三氟乙酸盐(1.3克)。
CI-MS(M++ 1): 623.1
实施例3:化合物3的制备
<formula>formula see original document page 32</formula>
中间体2-n如实施例2所述制备。
在10-15°C向2-11(300克)的CH2C12(1800毫升)溶液加入TMSBr(450克'8 当量)处理1小时。该混合物在25°C搅拌15小时。在真空和4(TC的条件下浓縮 溶液以除去TMSBr和溶剂。将CH2Cl2加入混合物中以溶解残余物。在真空条 件下(<1托)干燥3小时后，又一次真空除去TMSBr和溶剂，制得360克粗制固 体。然后，所述粗制固体用7.5升IPA/MeOH (9/1)洗涤，过滤，然后在25。C真 空(<1托)干燥3小时后制得化合物3(280克)。用EtOH结晶制得化合物3的氢 溴酸盐(190克)。CI-MS (M++ 1): 567.0。
将所述化合物3的氢溴酸盐(5.27克)溶解在20毫升水中，用浓氨水处理 (pH=9-10)，该混合物进行真空蒸发。用Dowex 50WX8(H+型，100-200目)的柱 (100毫升，4.5X8厘米)对水(30毫升)中的残余物进行处理，并洗脱(洗脱速率6 毫升/分钟)。用水(2000毫升)进行洗脱，然后使用0.2M的氨水进行洗脱。将紫 外吸收性氨洗脱液蒸干，制得化合物3的氨盐(2.41克)。CI-MS(M++ 1): 567.3。将化合物3的氨盐(1.5克)溶解在水(8毫升)中，用浓氨水(pH^l)碱化，用 Dowex 1X2(乙酸根型100-200目)的柱(75毫升，3X 14厘米)处理该混合物溶液， 并进行洗脱(洗脱速率，3毫升/分钟)。用水(900毫升)进行洗脱，然后用0.1 M 的乙酸进行洗脱。将紫外吸收性乙酸洗脱液蒸发，残余物与水(5X50毫升)共馏， 制得化合物3(1.44克)。CI-MS (M+ + 1): 567.4。
实施例4:化合物4的制备
中间体l-XIII在化合物1的制备过程中制得。
向二乙基乙烯基膦酸酯(4-1， 4克)的CH2C12(120毫升)溶液中加入草酰氯 (15.5克，5当量)，该混合物在30。C搅拌36小时。所述混合物在旋转蒸发仪上 真空浓縮，定量地制得相应的磷酰氯，将其加入环己胺(4-n， 5.3克，2.2当量)， CH2Cl2(40毫升)和Et3N(6.2克，2.5当量)的混合物中。该混合物在35。C搅拌36 小时，然后用水洗漆。干燥有机层(MgS04)，过滤，然后蒸发，制得棕色油状物 4-111(4.7克，产率85%)。
将化合物4-111(505毫克)加入中间体1-XIII(500毫克)的MeOH(4毫升)溶液 中。该溶液在45'C搅拌24小时。浓縮溶液，残余物用硅胶柱色谱纯化(EtOAc/ MeOH=4:l)，制得中间体4-IV(420毫克)，产率为63%。
将HCl的醚(5毫升)溶液加入中间体4-IV(420毫克)的CH2Cl2(1.0毫升)溶液。 所述反应混合物在室温下搅拌12小时，除去溶剂而浓縮。所得的残余物用醚洗 涤，制得化合物4的盐酸盐(214毫克)。
CI墨MS (M++ 1): 595.1
实施例5:化合物5的制备
化合物5依照与实施例l所述相同的方式制备，不同之处在于，使用高哌 嗪(homopiperazine)代替哌嗪。 CI-MS (M++1): 473.1 实施例6:化合物6的制备化合物依照与实施例l所述相同的方式制备，不同之处在于，使用(R)-(-)-2-
甲基哌嗪代替哌嗪。
CI掘(M++1): 473.4 实施例7:化合物7的制备
化合物7依照与实施例1所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 (S)-(+)-2-甲基哌嗪代替哌嗪。 CI-MS (M++1): 473.4 实施例8:化合物8的制备
化合物8依照与实施例1所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 (S)《-)-2-叔丁基-2-哌嗪羧酰胺(carboxamide)代替哌嗪。 CI-MS (M++1): 558.4 实施例9:化合物9的制备
化合物9依照与实施例1所述相同的方式制备，不同之处在于，使用2，6-二甲基哌嗪代替哌嗪。 CI-MS (M++1): 487.4 实施例10:化合物10的制备
化合物10依照与实施例1所述相同的方式制备，不同之处在于，使用2-苯基哌嗪代替哌嗪。
CI画MS (M++1): 535.4 实施例11:化合物11的制备
化合物11依照与实施例1所述相同的方式制备，不同之处在于，使用二氢 溴酸合(lS，4S)-2，5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷代替哌嗪。 CI-MS (M++1): 471.4 实施例12:化合物12的制备
化合物12依照与实施例1所述相同的方式制备，不同之处在于，使用二 盐酸合6,9-二氮杂-螺[4.5]癸烷代替哌嗪。 CI-MS (M++1): 513.4 实施例13:化合物13的制备
化合物13依照与实施例1所述相同的方式制备，不同之处在于，使用二 盐酸合1，4-二氮杂-螺[5.5]十一烷代替哌嗪。 CI-MS (M++1): 527.5 实施例14:化合物14的制备
化合物14依照与实施例3所述相同的方式制备，不同之处在于，45匸下， 在Et3N的DMF溶液的存在下，使用2-溴乙磺酸钠代替二乙基乙烯基膦酸酯。 使用盐酸使得氨基保护基去保护，制得化合物14的盐酸盐。CI掘(M++ 1): 567.3 实施例15:化合物15的制备
化合物15依照与实施例3所述相同的方式制备，不同之处在于，4CTC下， 使用溶于MeOH的甲基乙烯基砜代替二乙基乙烯基膦酸酯。用盐酸使氨基保护 基去保护，制得化合物15的盐酸盐。
CI-MS (M++1): 565.4
实施例16:化合物16的制备
化合物16依照与实施例3所述相同的方式制备，不同之处在于，使用苯基 乙烯基砜代替二乙基乙烯基膦酸酯。 CI-MS (M++1): 627.4 实施例17:化合物17的制备
化合物17依照与实施例2所述相同的方式制备，不同之处在于，在存在处 于CH3CN中的K2C03的条件下，使用二乙基-l-溴丙基膦酸酯代替二乙基乙烯
CI-MS (M++ 1): 637.5 实施例18:化合物18的制备
化合物18依照与实施例3所述相同的方式制备，不同之处在于，在存在处 于CH3CN中的K2C03的条件下，使用二乙基-l-溴丙基膦酸酯代替二乙基乙烯
CI-MS (M++ 1): 581.4 实施例19:化合物19的制备
化合物19依照与实施例3所述相同的方式制备，不同之处在于，在存在处 于CH3CN中的K2C03的条件下，使用二异丙基-l-溴甲基膦酸酯代替二乙基乙 烯基膦酸酯。
CI墨MS (M++ 1): 553.3 实施例20:化合物20的制备
<formula>formula see original document page 35</formula>
中间体i-xni按照实施例i所述制备。向1-XIII(5克)的CH3CN(150毫升)溶液加入溴代乙酸乙酯(20-1, 1.25克)和 K2C03 (3.1克)。该混合物在室温下搅拌2小时。过滤该溶液，浓縮，然后通过 硅胶纯化(用EtOAc和MeOH作为洗脱剂)制得20-11(5克)，产率为88%。
向20-11(4克)的CH2C12(60毫升)溶液加入20%的TFA/CH2C12(40毫升)，在 室温下搅拌过夜。对该溶液进行浓縮，在室温下，向丙酮(75毫升)中的残余物 加入HC1(在1,4-二噁垸中的浓度为4 N， 21.5毫升)反应0.5小时。除去溶剂， 残余物用醚进行处理，制得盐酸盐20(3克)。
CI-MS (M+ + 1): 545.5
实施例21:化合物21的制备
化合物21依照与实施例2所述相同的方式制备，不同之处在于，使用高哌 嗪代替哌嗪。
CI-MS (M++1): 637.4 实施例22:化合物22的制备
化合物22依照与实施例3所述相同的方式制备，不同之处在于，使用高哌 嗪代替哌嗪。
CI-MS (M++1): 581.2 实施例23:化合物23的制备
化合物23依照与实施例4所述相同的方式制备，不同之处在于，使用高哌 嗪代替哌嗪。
CI-MS (M++1): 609.4 实施例24:化合物24的制备
化合物24依照与实施例17所述相同的方式制备，不同之处在于，使用高 哌嗪代替哌嗪。
CI-MS (M++1): 651.4 实施例25:化合物25的制备
化合物25依照与实施例14所述相同的方式制备，不同之处在于，使用高 哌嗪代替哌嗪。
CI-MS (M++1): 581.4 实施例26:化合物26的制备
化合物26依照与实施例15所述相同的方式制备，不同之处在于，使用高 哌嗪代替哌嗪。
CI-MS (M++1): 579.3 实施例27:化合物27的制备
化合物27依照与实施例16所述相同的方式制备，不同之处在于，使用高
哌嗪代替哌嗪。CI-MS (M++1): 641.5 实施例28:化合物28的制备
化合物28依照与实施例2所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 (R)-(-)-2-甲基哌嗪代替哌嗪。 CI-MS (M++1): 636.8 实施例29:化合物29的制备
化合物29依照与实施例3所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 (R)-(-)-2-甲基哌嗪代替哌嗪。 CI-MS (M++1): 581.1 实施例30:化合物30的制备
化合物30依照与实施例17所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 (R)-(-)-2-甲基哌嗪代替哌嗪。 CI-MS (M++1): 651.5 实施例31:化合物31的制备
化合物31依照与实施例18所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 (R)-(-)-2-甲基哌嗪代替哌嗪。 CI-MS (M++1): 595.4 实施例32:化合物32的制备
化合物32依照与实施例2所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 (S)-(+)-2-甲基哌嗪代替哌嗪。 CI-MS (M++1): 637.1 实施例33:化合物33的制备
化合物33依照与实施例3所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 (S)-(+)-2-甲基哌嗪代替哌嗪。 CI-MS (M++1): 581.1 实施例34:化合物34的制备
化合物34依照与实施例17所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 (S)-(+)-2-甲基哌嗪代替哌嗪。 CI-MS (M++1): 651.5 实施例35:化合物35的制备
化合物35依照与实施例18所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 (S)-(+)-2-甲基哌嗉代替哌嗪。 CI-MS (M++1): 595.5 实施例36:化合物36的制备
化合物36依照与实施例3所述相同的方式制备，不同之处在于，使用(S)-(-)-2-叔丁基-2-哌嗪羧酰胺代替哌嗪。
CI-MS (M++1): 666.5 实施例37:化合物37的制备
化合物37依照与实施例17所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 (S)-(-)-2-叔丁基-2-哌嗪羧酰胺代替哌嗪。 CI-MS (M++1): 736.5 实施例38:化合物38的制备
化合物38依照与实施例18所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 (S)-(-)-2-叔丁基-2-哌嗪羧酰胺代替哌嗪。 CI-MS (M++1): 680.5 实施例39:化合物39的制备
化合物39依照与实施例17所述相同的方式制备，不同之处在于，使用2，6-二甲基哌嗪代替哌嗪。 CI-MS (M++1): 665.5 实施例40:化合物40的制备
化合物40依照与实施例18所述相同的方式制备，不同之处在于，使用2,6-二甲基哌嗪代替哌嗪。 CI-MS (M++1): 609.5 实施例41:化合物41的制备
化合物41依照与实施例2所述相同的方式制备，不同之处在于，使用2-苯基哌嗪代替哌嗪。
CI-MS (M++1): 699.5 实施例42:化合物42的制备
化合物42依照与实施例3所述相同的方式制备，不同之处在于，使用2-苯基哌嗪代替哌嗪。
CI-MS (M++1): 643.4 实施例43:化合物43的制备
化合物43依照与实施例17所述相同的方式制备，不同之处在于，使用2-苯基哌嗪代替哌嗪。
CI陽MS (M++1): 713.5 实施例44:化合物44的制备
化合物44依照与实施例18所述相同的方式制备，不同之处在于，使用2-苯基哌嗪代替哌嗪。
CI-MS (M++1): 657.4 实施例45:化合物45的制备化合物45依照与实施例2所述相同的方式制备，不同之处在于，使用二氢
溴酸合(1S，4S)-2，5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷代替哌嗪。 CI-MS (M++1): 635.5 实施例46:化合物46的制备
化合物46依照与实施例3所述相同的方式制备，不同之处在于，使用二氢 溴酸合(lS，4S)-2，5-二氮杂双环[2.2.1]庚垸代替哌嗪。 CI-MS (M++1): 579.4 实施例47:化合物47的制备
化合物47依照与实施例17所述相同的方式制备，不同之处在于，使用二 盐酸合6，9-二氮杂-螺[4.5]癸烷代替哌嗪。 CI-MS (M++1): 691.5 实施例48:化合物48的制备
化合物48依照与实施例18所述相同的方式制备，不同之处在于，使用二 盐酸合6，9-二氮杂-螺[4.5]癸烷代替哌嗪。 CI-MS (M++1): 635.5 实施例49:化合物49的制备
化合物49依照与实施例17所述相同的方式制备，不同之处在于，使用二 盐酸合1，4-二氮杂-螺[5.5]H^—烷代替哌嗪。 CI-MS CM++1): 705.5 实施例50:化合物50的制备
化合物50依照与实施例18所述相同的方式制备，不同之处在于，使用二 盐酸合1,4-二氮杂-螺[5.5]十一垸代替哌嗪。 CI-MS (M++1): 649.5 实施例51:化合物51的制备ISIH2
、N' 、N人N' HNj h 51-IX
,PO(OEt): 2-l
N
Boc
Boc
NH2
N
。 广N入N人N-'、 Eto—g tO "
、N Boc
Boc
TMSBr
HO-
9
NH2 N
'-1 H
OH
化合物51
中间体l-II如实施例1所述制备。
在25。C向中间体1-11(31.9克)在甲苯(150毫升)中的悬浮液加入叠氮磷酸 (phosphorazidic acid)二苯基酯(51-I， 32.4克)和Et3N(11.9克)处理1小时。反应 混合物在8(TC搅拌3小时，然后冷却至25。C。加入苄醇(51-11， 20克)之后，反 应混合物在8(TC再搅拌3小时，然后温度升高至12(TC处理过夜。然后对其进 行浓縮，再溶解在EtOAc和H20中。收集有机层。用EtOAc萃取水层。合并起 来的有机层用2.5 N的HC1， NaHC03饱和水溶液和盐水洗涤，用无水MgS04 干燥，过滤，然后浓縮。这样制得的残余物用硅胶柱色谱纯化(EtOAc/己烷":2)， 制得中间体51-111(35克)，产率为79%。
中间体51-111(35克)的溶液用溶于MeOH (350毫升)中的4 N HCl/二噁垸 (210毫升)处理，在室温下搅拌过夜。加入醚(700毫升)之后，对溶液进行过滤。 固体真空干燥。在室温下将K2C03加入该固体在CH3CN和异丙醇中的悬浮液内 处理10分钟。加水之后，反应混合物在室温下搅拌2小时，过滤，用无水MgS04 干燥，然后浓縮。所得的残余物用硅胶柱色谱纯化(使用CH2Cl2和MeOH作为
、NHC02CH2Ph
(Boc)20
51-V
'Cbz
51-VI
1國VI
Boc Boc
51-VIII
、,'GQ2H
已oc"
51-111 51-IV
BN
c y
o 、
BN
H洗脱剂)，制得中间体51-IV(19克)，产率为76%。
将中间体1-IX(21克)加入中间体51-IV(19克)的CH2C12(570毫升)溶液中。 该混合物在25'C搅拌2小时。然后在25"加入NaBH(OAc)3(23克)，处理过夜。 对溶液进行浓縮之后，将NaHC03饱和水溶液加到所得残余物上。然后该混合 物用CH2Cl2萃取。浓縮该溶液，残余物用硅胶柱色谱纯化(使用EtOAc和MeOH 作为洗脱剂)，制得中间体51-V(23.9克)，产率为66%。
在25。C下向中间体51-V(23.9克)和Boc20(11.4克)的CH2C12(200毫升)溶液 中加入Et3N(5.8毫升)处理过夜。然后对该溶液进行浓縮，所得的残余物通过硅 胶柱色谱纯化(使用EtOAc和己垸作为洗脱剂)，制得中间体51-VI (22克)，产率 为77%。将10%的Pd/C(2.2克)加入中间体51-VI(22克)在MeOH(44毫升)中的 悬浮液中。该混合物在氢气气氛和常温的条件下搅拌过夜，过滤，然后浓縮。 这样制得的残余物通过硅胶柱色谱纯化(使用EtOAc和MeOH作为洗脱剂)，制 得中间体51-VI1(16.5克)，产率为97%。
在120。C下，在1-戊醇(75毫升)中使中间体51-VII(16.5克)和Et3N(4.4毫 升)与2,4-二氯-6-氨基嘧啶(l-VI， 21克)反应过夜。然后除去溶剂，通过硅胶柱 色谱纯化残余物(使用EtOAc和己垸作为洗脱剂)，制得中间体51-VIII(16.2克)， 产率为77%。
在120。C下，向中间体51-VIII(16.2克)和哌嗪(l-Xn， 11.7克)的1-戊醇(32 毫升)溶液中加入Et3N(3.3毫升)处理过夜。溶液浓縮之后，残余物用水进行处理， 用CH2Cl2萃取。收集有机层并进行浓缩。这样制得的残余物用硅胶柱色谱纯化 (使用EtOAc/MeOH至28%NH4OH/MeOH作为洗脱剂)，制得中间体51-IX(13.2 克)，产率为75%。
如实施例3所述，用二乙基乙烯基膦酸酯(2-I)处理51-IX，制得化合物51 的氢溴酸盐。
CI画MS (M++ 1): 553.3 实施例52:化合物52的制备
化合物52依照与实施例4所述相同的方式制备，不同之处在于，使用中间 体51-IX代替中间体l-XIII。 CI-MS (M++ 1): 581.2 实施例53:化合物53的制备
化合物53依照与实施例51所述相同的方式制备，不同之处在于，在存在 处于CH3CN中的K2C03的条件下，使用二乙基-l-溴丙基膦酸酯代替二乙基乙 烯基膦酸酯。
CI-MS (M++ 1): 567.2
实施例54:化合物的制备54化合物54依照与实施例51所述相同的方式制备，不同之处在于，使用(R)—0-2-甲基哌嗪代替哌嗪。
CI陽MS (M++ 1): 566.7实施例55:化合物的制备55
化合物55依照与实施例53所述相同的方式制备，不同之处在于，使用(R)-(-)-2-甲基哌嗪代替哌嗪。CI-MS (M+ + 1): 580.7实施例56:化合物56的制备
化合物56依照与实施例51所述相同的方式制备，不同之处在于，在45'C，在存在处于CH3CN中的K2C03的条件下，使用2-溴乙磺酸钠代替二乙基乙烯基膦酸酯。
CI-MS (M++ 1): 553.2
实施例57:化合物57的制备
化合物57依照与实施例51所述相同的方式制备，不同之处在于，在4CTC，在MeOH中使用甲基乙烯基砜代替二乙基乙烯基膦酸酯。用盐酸使氨基保护基去保护，制得化合物57的盐酸盐。
CI-MS (M++ 1): 551.3
实施例58:化合物58的制备
<formula>formula see original document page 42</formula>化合物58
向2-氨基乙基苯胺(58-1， 2.92克)的MeOH(300毫升)溶液加入l-IX(4.56克)。该混合物在6(TC搅拌8小时。然后在0t:加入NaBH4(0.68克)处理0.5小时，除去溶剂而进行浓縮。向所得的残余物加入NH4C1的水溶液(10%， 10毫升)。该混合物用CH2Cl2萃取，干燥(MgS04)，过滤，然后蒸发。用硅胶色谱纯化(EtOAc/MeOH = 1/1)制得58-11(4.2克)，产率为63%。
在25。C下向58-11(4.2克)和Boc20(2.8克)的CH2C12(250毫升)溶液加入Et3N(1.4毫升)处理过夜。然后对该溶液进行浓縮，所得残余物用硅胶色谱纯化(EtOAc/己垸-1/5)，制得58-111(4克)，产率为75%。
在室温、存在10% Pd/C (800毫克)和5% Rh/C(400毫克)的条件下，MeOH(20毫升)中的化合物58-111(4.0克)在50 psi下氢化18小时。然后对该混合物进行过滤蒸发，残余物用硅胶色谱纯化(EtOAc/MeOH作为洗脱剂)，制得58-IV(2.8克)，产率为69%。
在12(TC下，1-戊醇(5毫升)中的化合物58-IV(900毫克)和Et3N(0.4毫升)与2，4-二氯-6-氨基嘧啶(l-VI， 365毫克)反应24小时。除去溶剂，残余物用硅胶色谱纯化(￡10八0/己垸=1/1)，制得58-V(842毫克)，产率为74%。
将(S)-(-)-2-叔丁基-2-哌嗪羧酰胺(58-VI， 274毫克)加入l-戊醇(l毫升)中的58-V(300毫克)中，该混合物在12CTC搅拌18小时。对该溶液进行浓縮，制得残余物，将残余物装载到Si02上，通过硅胶纯化(EtOAc/ MeOH = 7/3)，制得58-VII(242毫克)，产率为65%。
向58-VII(200毫克)的CH3CN(20毫升)溶液加入溴代乙酸乙酯(20-I， 44毫克)和K2CCb(182毫克)。该混合物在6CTC搅拌2小时。对溶液进行过滤，浓縮，硅胶纯化(用EtOAc和MeOH作为洗脱剂)，制得58-VIII(133毫克)，产率为60%。
向溶于THF (10毫升)的化合物58-VIII(500毫克)添加0.5 M的LiOH (10毫升)。该混合物在室温下搅拌15小时。然后，用2.5M的HCl酸化(PH-9)，过滤制得黄色固体58-IX。通过硅胶色谱纯化(用EtOAc/MeOH至21% NH3(水溶液)/MeOH作为洗脱剂)，制得中间体58-IX(324毫克)，产率为67%。
向58-IX(200毫克)的CH2C12(2毫升)溶液加入20%的TFA/CH2C12(4毫升)。该溶液在室温下搅拌2小时。除去溶剂，制得化合物58的三氟乙酸盐(260毫克)。
CI-MS (M++ 1): 65.8
实施例59:化合物59的制备
化合物59依照与实施例58所述相同的方式制备，不同之处在于，使用3-溴代丙酸乙酯代替溴代乙酸乙酯。CI-MS (M++1): 629.8实施例60:化合物60的制备CIN、CI义N人CI60-1
Boc'
O60-11
1-V
CI
N、
,O丫N J
广N义N人CI
NH4OH
O
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广N乂N人CIQ 60-，V
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NH2N、
60-VI
,NH2
1. K2C03， MeOH
1-IX
Boc
3. NaBH4
NH2N、
。 60-VH
Boc
HCI
，N、
乂M人
,0YN、
广N N
化合物60
H H
中间体1-V依照实施例1所述制备。
在0'C，将1-哌嗪羧酸苄基酯(60-11， 1.3克)溶解在丙酮(10毫升)中的溶液和NaHCO3(0.5克)的水(IO毫升)溶液同时加入三嗪60-1(1.1克)的丙酮(24毫升)和水(36毫升)的溶液中。该溶液在25。C搅拌2小时，制得固体。通过过滤制得化合物60-111，其不经纯化直接用于下一步。
在25°C ，向化合物60-111 (2.0克)的丙酮(20毫升)溶液加入氢氧化铵水溶液(10毫升)。15小时后，在减压条件下除去丙酮，使化合物60-IV沉淀，对其进行过滤，用丙酮(10毫升)洗涤，干燥制得1.9克60-IV，总产率91%。
在6(TC下，中间体l-V(1.45克)和Et3N(1.6毫升)的异丙醇(10毫升)溶液与化合物60-IV(1.9克)反应过夜。所述反应混合物在减压条件下蒸发。这样制得的残余物用硅胶柱色谱纯化(用EtOAc作为稀释剂)，制得中间体60-V(2.2克)，产率为70%。
中间体60-V(17克)的溶液用在MeOH (180毫升)中的4 N HCl/二嗯垸(160毫升)处理，在室温下搅拌过夜。加入醚之后，对溶液进行过滤。这样制得的固体进行真空干燥。在室温下向上述固体的MeOH溶液中加入K2C03。所得的混合物搅拌1小时，进行过滤。加入中间体l-IX(7.78克)。该混合物在25。C搅拌2小时。然后在25"C加入NaBH4(1.0克)。该混合物搅拌过夜，然后浓縮。加入NH4C1的饱和水溶液。该混合物用CH2Cl2萃取。收集有机层，用无水MgS04干燥，然后浓縮。残余物用硅胶柱色谱纯化(MeOH作为洗脱剂)，制得中间体60-VII(16克)，产率为74%。
将HC1的醚(3毫升)溶液加入中间体60-VII(200毫克)的CH2C12(1.0毫升)溶液中。该反应混合物在室温下搅拌12小时，然后除去溶剂而浓縮。所得的残余物用醚洗涤，制得化合物60的盐酸盐(128毫克)。
CI-MS (M++ 1): 594.2
实施例61:化合物61的制备
<formula>formula see original document page 45</formula>
中间体i-v如实施例i所述制备。
在-l(TC的温度下，化合物1-V(120克)禾卩Et3N(150克，3当量)的CH2C12(2.6升)溶液与氯代甲酸苄酯(61-I， 84克，1当量)反应15小时。TLC显示反应完全。
中间体61-11(167克)用在MeOH (1.2升)中的4N HCl/二嗯烷(280毫升)处理。该混合物在室温下搅拌过夜。加入醚之后，对溶液进行过滤。这样制得的固体在真空条件下干燥。在室温下向上述固体的MeOH溶液加入K2C03。搅拌1小时之后，对该溶液进行过滤，加入中间体l-IX (101.2克)。该混合物在25'C搅拌2小时。然后在25"加入NaBH4(12克)，该混合物搅拌过夜。然后对该溶液进行浓縮，加入NH4C1的饱和水溶液。该混合物用CH2Cl2萃取，用无水MgS04干燥，过滤，然后浓縮。这样制得的残余物通过硅胶柱色谱纯化(MeOH作为洗脱剂)，制得中间体61-IV(100克)，产率为32%。
在25°C，将Et3N(29.2毫升)加入中间体61-IV(80克)和Boc20(5克)的中间体61-VIII如实施例61所述制备。
将二乙基乙烯基膦酸酯(2-I， 213毫克)加入中间体61-VIII(570毫克)的MeOH(20毫升)溶液中。该溶液在25。C搅拌12小时。然后浓縮溶液，残余物通过硅胶柱色谱纯化(EA/MeOH-5/1)，制得中间体62-1(290毫克)，产率为42%。
将20%的TFA/CH2Cl2溶液(5毫升)加入中间体62-1(430毫克)的CH2C12(2 CH2Cl2(200毫升)溶液。该溶液搅拌过夜，然后浓縮。所得的残余物用硅胶柱色谱纯化(用EtOAc作为洗脱剂)，制得中间体61-V(80克)，产率为84%。
在甲醇中，H2(l大气压)下，用Pd/C(10呢，3.8克)催化氢化61-V(38克)，制得中间体61-VI (29克)。
在(TC下，将溶于THF (200毫升)的61-VI (26.1克)和溶于THF (200毫升)的N，N-二异丙基乙胺(7.8克)同时加入三嗪60-1 (10克)的THF(200毫升)溶液中。该溶液在25。C搅拌2小时，制得固体。进行过滤，制得化合物61-VI1，其不经纯化直接用于下一步骤。
在25。C下向化合物61-VII(30克)的THF(IOOO毫升)溶液加入氢氧化铵水溶液(50毫升)。15小时后，减压蒸发THF，使化合物61-VIII沉淀，对其进行过滤和干燥，制得23.9克61-VIII,总产率为70%。
在25。C向l-戊醇(3毫升)中的化合物61-VIII(2.0克)和哌嗪(l-Xn， 0.83克)加入Et3N(0.97克)。该混合物在12(TC搅拌8小时。TLC显示反应完全。在25r将乙酸乙酯(480毫升)加入该反应混合物。该溶液搅拌1小时。对Et3N HC1盐进行过滤，对溶液进行浓縮，硅胶纯化(EtOAc/MeOH-2:8)，制得61-IX(1.0克)，产率为46%。
将HC1的醚(5毫升)溶液加入中间体61-IX(420毫克)的CH2C12(1.0毫升)溶液。该反应混合物在室温下搅拌12小时，通过除去溶剂进行浓縮。所得的残余物用醚洗涤，制得化合物61(293毫克)的盐酸盐。
实施例62:化合物62的制备
<formula>formula see original document page 46</formula>毫升)溶液中。该反应混合物在室温下搅拌8小时，通过除去溶剂浓縮。所得的
残余物通过硅胶柱色谱纯化(EA/MeOH-l/1)，制得化合物62的三氟乙酸盐(175毫克)。
CI-MS (M++1): 642.4
实施例63:化合物63的制备
yH2 NH2
N、
f N N 3。c 30C扁r 。 N 口"K M
m, kj 6H 化合物63 lj
O
62-1
如实施例62所述制备中间体62-1。
化合物62-1 (610毫克)和三甲基甲硅烷基溴(l.21克)的CH2C12(30毫升)在25'C搅拌72小时。然后该溶液真空浓縮制得橙黄色泡沫体。用EtOH结晶，制得化合物63的氢溴酸盐(189毫克)。
CI-MS (M++1): 568.0
实施例64:化合物64的制备
化合物64依照与实施例61所述相同的方式制备，不同之处在于，使用高哌嗪代替哌嗪。
CI-MS (M++1): 474.4实施例65:化合物65的制备
化合物65依照与实施例61所述相同的方式制备，不同之处在于，使用(R)-(-)-2-甲基哌嗪代替哌嗪。CI陽MS (M++1): 474.4实施例66:化合物66的制备
化合物66依照与实施例61所述相同的方式制备，不同之处在于，使用(S)-(+)-2-甲基哌嗪代替哌嗪。CI-MS (M++1): 474.1实施例67:化合物67的制备
化合物67依照与实施例61所述相同的方式制备，不同之处在于，使用(S)-(-)-2-叔丁基-2-哌嗪羧酰胺代替哌嗪。CI-MS (M++1): 559.5实施例68:化合物68的制备
化合物68依照与实施例61所述相同的方式制备，不同之处在于，使用2,6-二甲基哌嗪代替哌嗪。CI-MS (M++1): 488.1实施例69:化合物69的制备
化合物69依照与实施例61所述相同的方式制备，不同之处在于，使用2-苯基哌嗪代替哌嗪。
CI-MS (M++1): 536.4实施例70:化合物70的制备
化合物70依照与实施例61所述相同的方式制备，不同之处在于，使用二氢溴酸合(lS，4S)-2，5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷代替哌嗪。CI-MS (M++1): 514.4实施例71:化合物71的制备
化合物71依照与实施例61所述相同的方式制备，不同之处在于，使用二盐酸合6,9-二氮杂-螺[4.5]癸烷代替哌嗪。CI-MS (M++1): 528.5实施例72:化合物72的制备
化合物72依照与实施例61所述相同的方式制备，不同之处在于，使用l-甲基哌嗪代替哌嗪。
CI-MS (M++1): 474.4实施例73:化合物73的制备
化合物73依照与实施例61所述相同的方式制备，不同之处在于，使用1-(2-吗啉代乙基)-哌嗪代替哌嗪。CI-MS (M++1): 573.5实施例74:化合物74的制备
化合物74依照与实施例62所述相同的方式制备，不同之处在于，在存在处于CH3CN中的K2C03的条件下，使用二乙基-l-溴丙基膦酸酯代替二乙基乙烯基膦酸酯。
CI-MS (M+ + 1): 638.2
实施例75:化合物75的制备
化合物75依照与实施例63所述相同的方式制备，不同之处在于，在存在处于CH3CN中的K2C03的条件下，使用二乙基-l-溴丙基膦酸酯代替二乙基乙烯基膦酸酯。
CI-MS (M++ 1): 582.0
实施例76:化合物76的制备
化合物76依照与实施例63所述相同的方式制备，不同之处在于，在存在处于CH2Cl2中的DIPEA的情况中，使用N-戊酰氯代替二乙基乙烯基膦酸酯。用盐酸使氨基保护基去保护，制得化合物76的盐酸盐。
CI-MS (M+ + 1): 544.4
实施例77:化合物77的制备
化合物77依照与实施例63所述相同的方式制备，不同之处在于，在存在处于CH3CN中的K2C03的条件下，使用4-溴代丁酸乙酯代替二乙基乙烯基膦酸酯。用LiOH使醚基水解，制得氨基酸化合物。用三氟乙酸除去氨基保护基团，制得化合物77的三氟乙酸盐。
CI-MS (M++ 1): 546.2
实施例78:化合物78的制备
化合物78依照与实施例63所述相同的方式制备，不同之处在于，在45'C，在存在处于DMF中的Et3N的的情况下，使用2-溴乙磺酸钠代替二乙基乙烯基膦酸酯。使用盐酸除去氨基保护基团，制得化合物79的盐酸盐。
CI-MS (M+ + 1): 568.3
实施例79:化合物79的制备
化合物79依照与实施例78所述相同的方式制备，不同之处在于，在40'C，用处于MeOH中的甲基乙烯基砜代替二乙基乙烯基膦酸酯。使用盐酸使氨基保护基去保护，制得化合物79的盐酸盐。
CI-MS (M++1): 566.2
实施例80:化合物80的制备
化合物80依照与实施例62所述相同的方式制备，不同之处在于，使用高哌嗪代替哌嗪。
CI-MS (M++1): 638.5实施例81:化合物81的制备
化合物81依照与实施例63所述相同的方式制备，不同之处在于，使用高哌嗪代替哌嗪。
CI-MS (M++1): 582.4实施例82:化合物82的制备
化合物82依照与实施例74所述相同的方式制备，不同之处在于，使用高哌嗪代替哌嗪。
CI-MS (M++1): 652.5实施例83:化合物83的制备
化合物83依照与实施例75所述相同的方式制备，不同之处在于，使用高哌嗪代替哌嗪。
CI-MS (M++1): 596.4实施例84:化合物84的制备
化合物84依照与实施例62所述相同的方式制备，不同之处在于，使用(R)-(-)-2-甲基哌嗪代替哌嗪。CI-MS (M++1): 638.3实施例85:化合物85的制备化合物85依照与实施例63所述相同的方式制备，不同之处在于，使用(R)-(-)-2-甲基哌嗪代替哌嗪。CI-MS (M++1): 582.2实施例86:化合物86的制备
化合物86依照与实施例74所述相同的方式制备，不同之处在于，使用(R)-(-)-2-甲基哌嗪代替哌嗪。CI-MS (M++1): 652.5实施例87:化合物87的制备
化合物87依照与实施例75所述相同的方式制备，不同之处在于，使用(R)-(-)-2-甲基哌嗪代替哌嗪。CI-MS (M++1): 596.2实施例88:化合物88的制备
化合物88依照与实施例63所述相同的方式制备，不同之处在于，使用(S)-(+)-2-甲基哌嗪代替哌嗪。CI-MS (M++1): 582.4实施例89:化合物89的制备
化合物89依照与实施例74所述相同的方式制备，不同之处在于，使用(S)-(+)-2-甲基哌嗪代替哌嗪。CI-MS (M++1): 652.5实施例90:化合物90的制备
化合物90依照与实施例75所述相同的方式制备，不同之处在于，使用(S)-(+)-2-甲基哌嗪代替哌嗪。CI-MS (M++1): 596.0实施例91:化合物91的制备
化合物91依照与实施例74所述相同的方式制备，不同之处在于，使用(S)-(-)-2-叔丁基-2-哌嗪羧酰胺代替哌嗪。CI-MS (M++1): 737.6实施例92:化合物92的制备
化合物92依照与实施例75所述相同的方式制备，不同之处在于，使用(S)-(-)-2-叔丁基-2-哌嗪羧酰胺代替哌嗪。CI-MS (M++1): 681.5实施例93:化合物93的制备
化合物93依照与实施例74所述相同的方式制备，不同之处在于，使用2,6-二甲基哌嗪代替哌嗪。CI-MS (M++1): 666.5实施例94:化合物94的制备
化合物94依照与实施例75所述相同的方式制备，不同之处在于，使用2，6-二甲基哌嗪代替哌嗪。CI-MS (M++1): 610.4实施例95:化合物95的制备
化合物95依照与实施例75所述相同的方式制备，不同之处在于，使用2-苯基哌嗪代替哌嗪。
CI-MS (M++1): 658.4实施例96:化合物96的制备
化合物96依照与实施例74所述相同的方式制备，不同之处在于，使用二盐酸合6，9-二氮杂-螺[4.5]癸垸代替哌嗪。CI-MS (M++1): 692.5实施例97:化合物97的制备
化合物97依照与实施例75所述相同的方式制备，不同之处在于，使用二盐酸合6，9-二氮杂-螺[4.5]癸垸代替哌嗪。CI-MS (M++1): 636.5实施例98:化合物98的制备
化合物98依照与实施例75所述相同的方式制备，不同之处在于，使用二盐酸合1，4-二氮杂-螺[5.5]十一垸代替哌嗪。CI-MS (M++1): 650.5实施例99:化合物99的制备
<formula>formula see original document page 51</formula>4-氰基苄基醛(99-I， 5克)和N-环己基-l，3-丙烷-二胺(99-n， 6克)的CH3OH(100毫升)溶液加热至60°C处理6小时。冷却至室温之后，将NaBH4 (2.5克)缓慢加入该溶液中。该混合物再搅拌30分钟，然后浓縮，用NH4C1(水溶液)猝灭，然后用CH2Cl2萃取。合并有机层，用无水MgSOt干燥，浓縮制得残余物。所述残余物用硅胶色谱纯化(EtOAc/Et3N-4/l)制得中间体99-111(7.2克)，产率为70%。
中间体99-111(7.2克)禾卩Boc20(17.3克)的CH2C12(280毫升)溶液在25T:搅拌15小时，然后浓縮。所得的残余物用硅胶色谱纯化(EtOAc/己烷1/1)，制得黄色油状物中间体99-IV(10.6克，产率85%)。
中间体99-IV(4.7克)和NiCl2(64毫克)的0130映100毫升)溶液在25匸搅拌。冷却至0。C之后，将NaBH4(1.83克)缓慢地加入，该混合物再搅拌15小时。对所述溶液进行浓縮，用NH4C1(水溶液)猝灭，用CH2Cl2萃取。合并的有机层用水洗涤，过滤，用无水MgS04干燥，浓縮制得残余物。所述残余物用硅胶色谱纯化(21% NH3(水溶液)/MeOH = 1/19)，制得中间体99-V(2.36克)，产率为50%。
在0°C ，将溶于THF (50毫升)的99-V (3.4克)和溶于THF (50毫升)的N，N-二异丙基乙基胺(0.92克)同时加入溶于THF (50毫升)中的三嗪60-1 (1.3克)中。该溶液在25°。搅拌2小时，制得固体。通过过滤制得化合物99-VI，其不经纯化直接用于下一步。
在25°C向化合物99-VI (4.3克)的THF(100毫升)溶液加入氢氧化铵水溶液(10毫升)。15小时之后，在减压条件下蒸发THF，使化合物99-VII沉淀，过滤，然后蒸发，制得3克99-VI1，总产率为70%。
在25。C向l-戊醇(3毫升)中的化合物99-VI1 (500毫克)和哌嗪(1-XI1， 211毫克)力卩入Et3N(248毫克)。该混合物在12(TC搅拌8小时。TLC显示反应完全。在25'C将乙酸乙酯(120毫升)加入反应混合物。溶液搅拌1小时。对Et3NHCl盐进行过滤，对溶液进行浓縮，通过硅胶纯化(EtOAc/MeOH= 2:8)，制得99-VIII(460毫克)，产率为85%。
将HC1的醚(5毫升)溶液加入中间体99-VIII(200毫克)的CH2C12(1.0毫升)溶液。所述反应混合物在室温下搅拌12小时，通过除去溶剂进行浓縮。所得的残余物用醚洗涤，制得化合物99的盐酸盐(110毫克)。
CI-MS (M++ 1): 454.1
实施例100:化合物100的制备
化合物100依照与实施例99所述相同的方式制备，不同之处在于，使用1-甲基哌嗪代替哌嗪。
CI-MS (M++1): 468.0实施例101:化合物101的制备
O 101-1
2. NH4OH
01. LAHNH2 2. (Boc)203.HCI
O 101-111
H,N、
NH2入N
、N.Boc CCIH 1-VI
101-IV
H Boc101-VI U
(Boc)2Q
H。 H
101-VII
NH2
。日 訓
Boc Boc
NH2。 H
OEt
化合物101
在0。C向THF(100毫升)中的顺-1，4-环己垸二羧酸(101-I， IO克)加入草酰氯(101-11， 15.5g)，然后加入DMF(数滴)。该混合物在室温下搅拌15小时。对该溶液进行浓縮，残余物溶解在THF(100毫升)中。将该混合物溶液加入氢氧化铵(80毫升)，搅拌1小时。对该溶液进行浓縮，过滤，制得粗产物101-111(7.7克)。
在0。C下，将THF (200毫升)中的化合物IOI-III (7.7克)缓慢地加入LiAlH4(8.6克)的THF(200毫升)溶液。该混合物溶液在65。C搅拌15小时。在室温下加入NaSO4.10H2O，搅拌1小时。对所得的混合物进行过滤，得到滤液，然后进行浓縮。将残余物溶解在CH2C12(100毫升)中。在室温下加入Et3N(27克)和(Boc)2O(10克)。该溶液搅拌15小时，然后浓縮，得到残余物。向所得的残余物加入醚。进行过滤操作，真空干燥，制得固体粗产物101-IV(8.8克)。
化合物101-IV (1.1克)和Et3N(1.7克)的l-戊醇(10毫升)溶液与2，4-二氯-6-氨基嘧啶(1-VI， 910毫克)在90°C下反应15小时。TLC显示反应完全。在25'C将乙酸乙酯(IO毫升)加入反应混合物中。该溶液搅拌1小时。除去Et3NHCl盐。滤液进行浓縮，通过硅胶纯化(610^(:/己垸(116幻=1:2)，制得所需产物lOl-V(l.l克，产率65%)。
在25。C，中间体lOl-V(l.l克)的溶液用在MeOH(10毫升)中的4NHCl/二口恶垸(10毫升)处理，搅拌15小时。TLC显示反应完全。对混合物进行浓縮，过滤，真空(<10托)干燥。为了进行中和，在25。C将K2C03(3.2克)加入HC1盐的MeOH(20毫升)溶液。该混合物在相同的温度下搅拌3小时(pH〉12)，然后过滤。在0-10。C的温度下将醛l-IX(759毫克)加入滤液。反应在0-10。C搅拌3小时。TLC显示反应完全。然后，在低于l(TC的温度下加入NaBH4(112毫克)，该溶液在10-15"C搅拌1小时。对该溶液进行浓縮，制得残余物，然后该残余物用CH2C12(10毫升)处理。混合物用饱和NH4C1水溶液洗涤。对012<:12层进行浓縮，残余物用硅胶色谱纯化(MeOH/28免NH4OH = 97/3)，制得中间体101-VI (1.0克，产率66%)。
在25。C将Et3N (600毫克)和Boc20(428毫克)加入lOl陽VI(l.O克)的CH2Cl2(10毫升)溶液。该混合物在25。C搅拌15小时。TLC显示反应完全。该溶液进行浓縮，用硅胶色谱纯化(EtOAc/己烷(Hex)-l:l)，制得中间体101-VII (720
毫克，产率60%)。
在25。C，向化合物101-VII(720毫克)和哌嗪(l-Xn， 1.22克)的1-戊醇(10毫升)溶液加入Et3N(1.43克)。该混合物在120。C搅拌24小时。TLC显示反应完全。在25T:加入乙酸乙酯(20毫升)。该溶液搅拌l小时。除去Et3NHCl盐，对该溶液进行浓縮，用硅胶纯化(EtOAc/MeOH-2:8)，制得101-VIII(537毫克)，产率为69%。
在25。C下向101-VIII(537毫克)的MeOH(11毫升)溶液加入二乙基乙烯基膦酸酯(2-1， 201毫克)。该混合物在65。C搅拌24小时。TLC和HPLC显示反应完全。对溶液进行浓縮，用硅胶纯化(MeOH/CH2Cl产l:9)，制得101-IX (380毫克)，产率为57%。
在10-15。C向101-IX(210毫克)的CH2C12(5毫升)溶液加入TMSBr(312毫克)，处理1小时。该混合物在25"C搅拌15小时。在真空、4(TC的条件下对该溶液进行浓縮以除去TMSBr和溶剂，然后加入CH2Cl2以溶解残余物。然后在真空条件下进一步除去TMSBr和溶剂并加入CH2Cl2，重复四次。对该溶液进行浓縮，制得化合物101的氢溴酸盐(190毫克)。
CI-MS(M++ 1): 566.9
实施例102:化合物102的制备Boc'
O
H
102-1
.0
61-H
Boc
N、.,、'
O
H
102-IVO.
Boc
N、、'、'
O
H
1. HN、 102-111
102-11
H2, Pd/C
Boc 102-V
、NH,
2. NaBH4
NH2
CI"N人CI 1-VI
NH2
CI" 、N人N' " H
Boc
102-VI
NH
102-VII
HO'
INH2
、N' 、N八N' H
Boc
102-vm
HCI
HO
NH2
人
广N, W I
化合物102
H
中间体6i-n如实施例61所述制备。
在0°C ，向CH2C12(10毫升)中的中间体61-11 (1.0克)禾口 DL-10-樟脑磺酸(150 毫克)加入丙烯醛(102-I， 446毫克)。该反应在25X:搅拌15小时。对该溶液进行 浓縮，用硅胶色谱纯化(EtOAc/己垸(Hex卢l:l)，制得中间体102-11 (180毫克)， 产率为16%。
将中间体102-11 (1.13克)和哌啶(102-m， 222毫克)溶解在MeOH(10毫升) 中。该混合物在0'C搅拌3小时。在0X:加入NaBH4(119毫克)，该溶液搅拌1 小时。对该溶液进行浓縮，加入CH2Cl2。该溶液用NH4C1饱和水溶液洗涤。对 CH2Cl2层进行浓縮，残余物用硅胶色谱纯化(EtOAc/己烷":l)，制得中间体 102-IV(737毫克)，产率为56%。
MeOH(10毫升)中的102-IV(737毫克)和Pd/C(10%，20毫克)在H2(l大气压) 中搅拌18小时。通过塞里塑料柱过滤，除去MeOH，制得中间体102-V (580毫 克)。
在120°C，化合物102-V (580毫克)和Et3N(480毫克)的I-戊醇(IO毫升)溶 液与2，4-二氯-6-氨基嘧啶(l-VI， 258毫克)反应15小时。对该溶液进行浓缩，用 硅胶色谱纯化(EtOAc/己烷(Hex卢l:2)，制得中间体102-VI(420毫克)，产率为 54%。
在N-(2-羟乙基)哌嗪(102-Vn， 1毫升)中的化合物102-VI (50毫克)在120'C搅拌15小时。在25'C向该混合物加入CH2C12(10毫升)。该溶液用水洗涤。 除去Cl2CH2之后，残余物用硅胶色谱纯化(Cl2CH2/MeOH-9:l)，制得中间体 102-VIII (15毫克)，产率为25%。
将HC1的1，4-二噁烷(4N， 2毫升)溶液加入中间体102-VIII(15毫克)的 CH2C12(5.0毫升)溶液。该反应混合物在室温下搅拌4小时，通过除去溶剂进行 浓縮。所得的残余物用醚进行洗涤，制得化合物102的盐酸盐(11毫克)。
CI-MS (M++1): 489.3
实施例103:化合物103的制备
化合物103依照与实施例102所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 l-(2-吗啉代乙基)-哌嗪代替N-(2-羟乙基)哌嗪。 CI-MS (M++1): 558.5 实施例104:化合物104的制备
化合物104依照与实施例102所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 1-(2-(2-羟基乙氧基)乙基)哌嗪代替N-(2-羟乙基)哌嗪。 CI-MS (M++1): 533.4
实施例105:化合物105的制备
<formula>formula see original document page 56</formula>
中间体102-11依照实施例102所述制备。
MeOH (10毫升)中的102-11 (1000毫克)和外-2-氨基降冰片垸(105-I， 257毫 克)在0。C搅拌3小时。然后在0°C，在1小时时间内加入NaBH4 (87.5毫克)。对该溶液进行浓縮，用NH4C1(水溶液)猝灭，用CH2Cl2萃取。合并有机层，用 无水MgS04干燥，浓縮制得残余物，该残余物用硅胶色谱纯化(MeOH/28免 NH4OH = 97/3)，制得中间体105-11 (1000毫克，产率82%)。
中间体105-11(1000毫克)，Et3N(210毫克)和Boc20(455毫克)的CH2C12 (10 毫升)溶液在25。C搅拌15小时。对该溶液进行浓縮，用硅胶色谱纯化(EtOAcA/ 己烷=1/1)，制得中间体105-111(907毫克，产率76%)。
在25°C、氢气(气球)条件下，中间体105-III (907毫克)和Pd/C (20亳克)的 MeOH(lO毫升)溶液搅拌18小时。通过塞里塑料柱过滤制得滤液，除去MeOH， 制得中间体105-IV(740毫克)。
将Et3N (454毫克)加入中间体105-IV(740毫克)和2，4-二氯-6-氨基嘧啶 (l-VI， 246毫克)的l-戊醇(10毫升)溶液。该反应混合物在12(TC搅拌15小时， 真空浓縮。所得的残余物用硅胶色谱纯化@10八0/己垸=1/2)，制得中间体 105-V(420毫克，产率45%)。
中间体105-V(50毫克)的N-(2-羟乙基)哌嗪(1毫升)溶液在12(TC搅拌15小 时。将该反应冷却至25。C，用Cl2CH2(10毫升)稀释。反应溶液用水洗涤，用无 水MgS04干燥，然后浓縮。残余物用硅胶色谱纯化(Cl2CH2/MeOH-9/1)，制得 中间体105-VI(10毫克，产率17%)。
将4 N HC1的1，4-二噁垸(2毫升)溶液加入中间体105-VI (10毫克)的 CH2Cl2(5毫升)溶液。该反应混合物在室温下搅拌4小时，通过除去溶剂进行浓 縮。所得的残余物用醚洗涤，制得化合物105的盐酸盐(8毫克)。
CI-MS (M++1): 515.4
实施例106:化合物106的制备
化合物106依照与实施例105所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 l-(2-吗啉代乙基)-哌嗪代替N-(2-羟乙基)哌嗪。 CI隱MS (M++1): 584.5 实施例107:化合物107的制备
化合物107依照与实施例105所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 1-(2-(2-羟基乙氧基)乙基)哌嗪代替N-(2-羟乙基)哌嗪。 CI-MS (M++1): 559.5 实施例108:化合物108的制备
化合物108依照与实施例105所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 哌嗪代替N-(2-羟乙基)哌嗪。 CI-MS (M++1): 471.4 实施例109:化合物109的制备
化合物109依照与实施例105所述相同的方式制备，不同之处在于，使用l-(2-乙氧基乙基)哌嗪代替N-(2-羟乙基)哌嗪。
CI陽MS (M++1): 543.1
实施例110:化合物110的制备
(HO)2。Pv^
110-1
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Boc N
1-XIII
TFA
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110-IV
o
化合物110
中间体l-XIII依照实施例1所述制备。
在0'C下向乙烯基膦酸(110-I， 550毫克)在无水CH2C12(17毫升)溶液缓慢加 入草酰氯(3.9克)和DMF(0.4毫升)。该混合物回流3小时，浓縮而定量地制得相 应的磷酰氯。在-70。C将该磷酰氯加入2，2-二甲基-l,3-丙二醇(110-11， 530毫克)， 无水CH2C12(17毫升)和Et3N(3.1克)的混合物中。该混合物缓慢地升温至室温， 搅拌15小时。然后用水洗涤。对有机层进行干燥(MgS04)，过滤，然后蒸发。 残余物通过硅胶柱色谱(EtOAc/MeOH-9:l)纯化，制得棕色油状物110-111(65毫 克，产率7%)。
将化合物110-III (65毫克)加入中间体l-XIII (202毫克)的MeOH(4毫升)溶 液。该溶液在65。C搅拌24小时。对溶液进行浓縮，残余物通过硅胶柱色谱纯化 (CH2Cl2/MeOH=9:l)，制得中间体110-IV(147毫克)，产率48%。
将20%的TFA/CH2Cl2溶液(3毫升)加入中间体110-IV(147毫克)的CH2C12 (2.0毫升)溶液。该反应混合物在室温下搅拌12小时，浓縮，制得化合物110的 三氟乙酸盐(267毫克)。
CI-MS (M++1): 635.4
实施例111:化合物111的制备
化合物111依照与实施例110所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 2-氨基苄基醇代替2，2-二甲基-1，3-丙二醇。 CI-MS (M++1): 654.4 实施例112:化合物112的制备<formula>formula see original document page 59</formula>
中间体l-v如实施例1所述制备。
在90°C ，化合物60-11 (27克)和Et3N(37克，3当量)的1-戊醇(80毫升)溶液 与2，4-二氯-6-氨基嘧啶(l-VI， 20克，1当量)反应15小时。TLC显示反应完全。 在25。C加入乙酸乙酯(55毫升)。该溶液搅拌l小时。除去Et3NHCl盐之后，在 50。C将滤液浓縮至23毫升(初始体积的1/6)。然后将二乙醚(70毫升)加入浓縮的 溶液中，在25。C过滤之后，制得所需的中间体112-1(25克，产率60%)。
在140。C下，中间体l-V(500毫克，1.2当量)和N，N，-二异丙基乙基胺 (DIPEA， 446毫克，2当量)以及KI(29毫克，0.1当量)的1-戊醇(1.8毫升)溶液 与化合物112-1(600毫克)反应24小时。该反应混合物在减压条件下浓縮。这样 制得的残余物通过硅胶柱色谱纯化(MeOH/CH2Cl2 = 5/95)，制得中间体 112-11(645毫克)，产率为67%。
中间体112-11 (645毫克)用在MeOH (6.5毫升)中的4N HCI/二嗯垸(1.7毫升) 处理。该混合物在室温下搅拌过夜。加入醚之后，对该溶液进行过滤。这样制 得的112-III的HC1盐真空干燥。在室温下，向112-III的HC1盐的MeOH (15 毫升)溶液加入K2C03(1.3克)，搅拌3小时(pH〉12)。对该混合物进行过滤。在 O-l(TC将醛l-IX(300毫克，基于112-11的摩尔量为1.0当量)加入112-111的滤液中。该反应在0-l(TC搅拌3小时。TLC显示反应完全。然后在低于l(TC的温度 下加入NaBH4(70毫克，基于112-11的摩尔量为1.5当量)。所述溶液在10-15°C 搅拌1小时，浓縮，提供残余物，该残余物用CH2Cl2(30毫升)处理。该混合物 用NH4C1饱和水溶液(15毫升)洗涤。CH2Cl2层用无水MgS04干燥，然后浓縮。 残余物用硅胶色谱纯化(短柱，用EtOAc作为流动相用于除去其它组分； MeOH/28%NH4OH=97/3作为流动相用来收集112-IV)，制得中间体112-IV(214 毫克)，产率为30%。
将HC1的醚(4毫升)溶液加入中间体112-IV (200毫克)的CH2C12(1.0毫升) 溶液。该反应混合物在室温下搅拌12小时，然后进行浓縮。所得的残余物用醚 洗涤，制得化合物112的盐酸盐(120毫克)。
CI-MS (M++ 1): 593.3
实施例113:化合物113的制备
NH
,Y、
o
》Xi
(Boc)20
112匿IV
Boc N。
O
广N'
Boc Boc
113-1
H2, Pd/C
113-11
已oc Boc
化合物113
中间体112-IV如实施例112所述制备。
在25°C，将Et3N (65^L)力卩入中间体112-IV(214毫克)和Boc20(81毫克)的 CH2C12(10毫升)溶液。该溶液搅拌过夜，然后浓縮。所得的残余物通过硅胶柱 色谱纯化(用EtOAc作为洗脱剂)，制得中间体113-1 (196毫克)，产率为80%。
MeOH中的113-1(150毫克)和Pd/C(10%， 20毫克)在氢气(气球)和25°C的 条件下搅拌18小时。该混合物通过塞里塑料柱。通过除去MeOH制得中间体 113-11(112毫克)，产率为90%。
将HC1的醚(2毫升)溶液加入中间体113-11 (100毫克)的CH2C12(1.0毫升) 溶液。该反应在室温下搅拌12小时，然后浓縮。所得的残余物用醚洗涤，制得 化合物113的盐酸盐(93毫克)。
CI-MS (M+ + 1): 459.4
实施例114:化合物114的制备<formula>formula see original document page 61</formula>
中间体1-VII如实施例1所述制备。
在25。C，将化合物环己基甲胺(114-I， 3.0克)和Boc20(7.7克)的CH2C12(30 毫升)溶液加入Et3N(5.0毫升)处理15小时。然后对该溶液进行浓縮，所得的树 脂通过硅胶柱色谱纯化(使用EtOAc和己垸作为洗脱剂)，制得中间体114-11 (6.5 克)，产率为49%。
在0°C向CH2C12 (30毫升)中的中间体114-1 (3.0克)和DL-10-樟脑磺酸(450 毫克)加入丙烯醛(102-I， 2.72克)。该反应在25。C搅拌15小时。对该溶液进行 浓縮，用硅胶色谱纯化(EtOAc/己烷(Hex)-4:l)，制得中间体114-111 (2.4克)，产 率为63%。
中间体l-VII (1.0克)的溶液用在MeOH (20毫升)中的4 N HCl/二嗯垸(5毫 升)处理，在25。C搅拌15小时。TLC显示反应完全。对该混合物进行浓縮，形 成1-VIII的盐酸盐，进行过滤，真空(<10托)干燥。为了进行中和，在25"C将 K2C03(1.5克)加入1-VIII的盐酸盐的MeOH(20毫升)溶液。该混合物在相同的 温度下搅拌3小时(pHW2)，然后过滤。
在0-10。C将醛114-111(728毫克)加入滤液。该混合物在0-10。C搅拌3小时。 TLC显示反应完全。然后在低于l(TC的温度加入NaBH4(103毫克)，该溶液在 10-15。C搅拌1小时。对该溶液进行浓縮，提供残余物，然后该残余物用CH2C12 (10毫升)处理。该混合物用NH4C1饱和水溶液洗涤。对CH2Cl2层进行浓縮，残 余物用硅胶色谱纯化(短柱，EtOAc作为流动相用来除去其它组分； MeOH/28%NH4OH=97/3作为流动相用来收集114-IV)，以制得粗114-IV(870毫 克)。在25。C将Et3N(820毫克)和Boc2O(470毫克)加入114-IV(870毫克)的 CH2C12(10毫升)溶液。该混合物在25'C搅拌15小时。TLC显示反应完全。对该 溶液进行浓縮，用硅胶色谱纯化(EtOAc/己垸(Hex)4:l)制得中间体114-V(940 克)，产率为91%。
在25。C向化合物114-V(200毫克)禾卩哌嗪(l-XIL 116毫克)的1-戊醇(2毫升) 溶液加入Et3N(194毫克)。该混合物在120"C搅拌8小时。TLC显示反应完全。 对该溶液进行浓縮，用硅胶色谱纯化(EtOAc/MeOH = 3:7)，制得中间体114-VI (120毫克)，产率为56%。
中间体114-VI (120毫克)的溶液用在CH2C12 (10毫升)中的4 N HCl/二嗯垸 (5毫升)处理，在25t:搅拌15小时。对该混合物进行浓縮，制得化合物114的 盐酸盐(60毫克)。
CI-MS (M+ + 1): 473.4
实施例115:化合物115的制备
化合物115依照与实施例114所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 N-(2-羟乙基)哌嗪代替哌嗪。 CI-MS (M++1): 517.4 实施例116:化合物116的制备
化合物116依照与实施例114所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 1-(2-乙氧基乙基)哌嗪代替哌嗪。 CI-MS (M++1): 545.4 实施例117:化合物117的制备
化合物117依照与实施例114所述相同的方式制备，不同之处在于，使用
1- (2-吗啉代乙基)-哌嗪代替哌嗪。
CI-MS (M++1): 586.5
实施例118:化合物118的制备
化合物118依照与实施例114所述相同的方式制备，不同之处在于，使用
2- 氨基茚满代替环己基-甲胺。
CI-MS (M++1): 493.4
实施例119:化合物119的制备
化合物119依照与实施例114所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 2-氨基茚满代替环己基-甲胺。 CI-MS (M++1): 537.4 实施例120:化合物120的制备
化合物120依照与实施例116所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 2-氨基茚满代替环己基-甲胺。CI-MS (M++1): 565.4
实施例121:化合物121的制备
化合物121依照与实施例117所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 2-氨基茚满代替环己基-甲胺。 CI-MS (M++1): 606.4 实施例122:化合物122的制备
化合物122依照与实施例115所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 苯胺代替环己基-甲胺。 CI-MS (M++1): 497.0 实施例123:化合物123的制备
化合物123依照与实施例114所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 苄基胺代替环己基-甲胺。 CI-MS (M++1): 467.1 实施例124:化合物124的制备
化合物124依照与实施例123所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 N-(2-羟乙基)哌嗪代替哌嗪。 CI-MS (M++1): 511.1 实施例125:化合物125的制备
化合物125依照与实施例123所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 l-(2-乙氧基乙基)哌嗪代替哌嗪。 CI-MS (M++1): 539.0 实施例126:化合物126的制备
化合物126依照与实施例123所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 l-(2-吗啉代乙基)-哌嗪代替哌嗪。 CI-MS (M++1): 580.1 实施例127:化合物127的制备
化合物127依照与实施例114所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 环戊胺代替环己基甲胺。 CI-MS (M++1): 445.1 实施例128:化合物128的制备
化合物128依照与实施例115所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 环戊胺代替环己基甲胺。 CI陽MS (M++1): 489.1 实施例129:化合物129的制备
化合物129依照与实施例116所述相同的方式制备，不同之处在于，使用环戊胺代替环己基甲胺。
CI-MS (M++1): 517.1
实施例130:化合物130的制备
化合物130依照与实施例117所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 环戊胺代替环己基甲胺。 CI-MS (M++1): 558.5 实施例131:化合物131的制备
化合物131依照与实施例128所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 l-(2-(2-羟基乙氧基)乙基)哌嗪代替N-(2-羟乙基)哌嗪。 CI-MS (M++1): 533.4 实施例132:化合物132的制备
化合物132依照与实施例102所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 吡咯垸代替哌啶。
CI-MS (M++1): 475.4
实施例133:化合物133的制备
化合物133依照与实施例114所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 异丙胺代替环己基甲胺。 CI-MS (M++1): 419.1 实施例134:化合物134的制备
化合物134依照与实施例115所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 异丙胺代替环己基甲胺。 CI-MS (M++1): 463.1 实施例135:化合物135的制备
化合物135依照与实施例116所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 异丙胺代替环己基甲胺。 CI-MS (M++1): 491.1 实施例136:化合物136的制备
化合物136依照与实施例117所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 异丙胺代替环己基甲胺。 CI-MS (M++1): 532.1 实施例137:化合物137的制备
化合物137依照与实施例115所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 噻吩-2-甲基胺代替环己基甲胺。 CI-MS (M++1): 517.4 实施例138:化合物138的制备化合物138依照与实施例116所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 噻吩-2-甲基胺代替环己基甲胺。
CI-MS (M++1): 545.4
实施例139:化合物的制备139
化合物139依照与实施例117所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 噻吩-2-甲基胺代替环己基甲胺。 CI-MS (M++1): 586.4 实施例140:化合物的制备140
化合物140依照与实施例137所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 l-(2-(2-羟基乙氧基)乙基)哌嗪代替N-(2-羟乙基)哌嗪。 CI-MS (M++1): 561.4 实施例141:化合物的制备141
NH2 一N
广NH
Boc
Boc
105-V
1-XII
广N' HN J
NH2 十N
L人
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々N
、N々 H
Boc Boc
TFA
141-11
— 广N,
6b
141-1
NH2
L人
化合物141
中间体105-V如实施例105所述制备。
在25。C向l-戊醇(30毫升)中的化合物105-V (1.7克)和哌嗪(1-XIL 1.4克， 6当量)加入Et3N(1.66克，6.0当量)。该混合物在120°C搅拌15小时。该溶液 进行浓縮，用硅胶纯化(EtOAc/MeOH-8:2)，制得141-1(1.5克)，产率为82%。
在25。C向141-1(1.5克)的MeOH(30毫升)溶液加入二乙基乙烯基膦酸酯 (2-1， 0.556克，1.5当量)。该混合物在65。C搅拌24小时。TLC和HPLC显示反 应完全。对该溶液进行浓縮，通过硅胶纯化(MeOH/CH2C1^8/92)，得到1.1克 141-11，产率为59%。
将TFA(0.2毫升)加入中间体141-11 (100毫克)的CH2C12(0.8毫升)溶液。该 反应混合物在室温搅拌15小时，通过除去溶剂进行浓縮，制得化合物141的三 氟乙酸盐(40毫克)。
CI-MS (M++ 1): 635.4
实施例142:化合物142的制备
o八
6Et
N、
Boc
Boc
TMSBr
141-11
O
EtO-， 6Et
NH2
化合物142中间体141-11如实施例141所述制备。
在10-15°C向142-11(1.0克)的CH2C12(5毫升)溶液加入TMSBr(1.46克，8当
量)处理1小时。该混合物在25°C搅拌15小时。在4(TC的真空条件下对该溶液 进行浓縮以除去TMSBr和溶剂。将CH2Cl2加入混合物中以溶解残余物。再在 真空下除去TMSBr和溶剂，制得粗制固体，该粗制固体用IPA/MeOH (9/1)洗涤， 过滤，然后在25'C的真空条件下(〈1托)干燥3小时，制得化合物142。在EtOH 中结晶制得化合物142的氢溴酸盐(530毫克)。
CI-MS (M+ + 1): 579.4
实施例143:化合物143的制备
化合物143依照与实施例141所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 环己基甲胺代替外-2-氨基降冰片垸。 CI-MS (M++1): 637.5 实施例144:化合物144的制备
化合物144依照与实施例142所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 环己基甲胺代替外-2-氨基降冰片垸。 CI-MS (M++1): 581.4 实施例145:化合物145-1的制备
将化合物1-1(2.11克，1.1当量)和K2C03(8.5克，5当量)溶解在CH3CN/ H20(l:2， 30毫升)中，加入碘化四丁基铵作为催化剂。在9(TC，该混合物与2，4-二氯-6-氨基嘧啶(l-VI， 2克，1当量)反应15小时。通过TLC证明反应完全。 在减压条件下对该混合物进行蒸发以除去有机溶剂，用浓盐酸对水层进行酸化 (pH=4~5)，然后进行过滤。收集所得的固体，用水(15毫升)洗涤三次，然后真 空干燥制得白色固体化合物145-1(2.8克)，产率为80%。
CI-MS (M++ 1): 285.1
实施例146:化合物145-V的制备
在冰水浴条件下，将化合物l-氨甲酰基-环丙烷羧酸(145-11， 5克，1当量)，
<formula>formula see original document page 66</formula>六氟磷酸0-(7-氮杂苯并三唑-l-基)-N，N，N'，N'-四-甲基脲镞(uronium)(HATU， 22.85克，1.6当量)和l-羟基苯并三唑(HOBt 8.12克，1.6当量)悬浮在CH2C12(150 毫升)中。在O-l(TC的温度下，在搅拌的同时将N-甲基吗啉(NMM， 16.5毫升， 4当量)和环己胺(145-m， 5.2毫升，1.2当量)加入该溶液中。加完之后，所述反 应混合物在室温下再搅拌15小时。通过TLC证明该反应完全。
将所述混合物倒入NH4C1饱和水溶液(100毫升)中。分离之后，有机层依次 用盐水和NaHC03饱和水溶液洗漆(每次用量100毫升)，用无水MgS04干燥， 过滤，然后浓缩。残余物用硅胶柱色谱纯化(EtOAc/己垸-4:l)，制得橙色油状物 化合物145-IV(6.3克)，产率为80%。
在氮气气氛下，将LiAffl4(4.8克，4当量)分成小份加入145-IV(6.3克)的无 水THF(150毫升)溶液中，同时温度保持在0-10。C。该混合物在室温下搅拌1小 时，然后再回流加热4小时。对该混合物进行冷却，在0'C用NH4C1饱和水溶 液(15毫升)猝灭。使其升温至室温，搅拌1小时。该混合物通过塞里塑料垫过 滤，滤液在减压条件下浓縮，制得黄色油状产物145-V(4.4克)，产率为80%。
CI-MS (M++ 1): 183.1
实施例147:化合物145的制备
<formula>formula see original document page 67</formula>化合物145
在冰水浴条件下将化合物145-1(3.95克，1当量)，HATU(8.44克，1.6当量) 禾口HOBt(3.0克，1.6当量)悬浮在CH2Cl2(55毫升)中。在0-l(TC下，在搅拌的同 时加入NMM(6.1毫升，4当量)和N-(l-(氨基甲基)环丙基)环己胺(145-V， 3.1克， 1.2当量)。加完之后，该反应混合物在室温下进一步搅拌15小时。通过TLC证 明反应完全。
将混合物倒入NH4C1饱和水溶液(50毫升)中。分层之后，有机层依次用盐水和NaHCO3饱和水溶液洗涤(每次用量50毫升)，用无水MgS04干燥，过滤， 然后浓縮。残余物通过硅胶柱色谱纯化(EtOAc/MeOJ^7:3)，制得黄色油状化合 物145-VI(1.5克)，产率为30%。
在氮气气氛下，将LiAlH4(267毫克，2当量)分成小份加入145-VI(1.5克) 的无水THF(20毫升)溶液中，同时将温度保持在0-10'C。该混合物在室温下搅 拌1小时，然后再回流加热4小时。对其进行冷却，在0"C用NH4C1饱和水溶 液(l毫升)猝灭。然后使其升温至室温，搅拌1小时。该混合物通过塞里塑料垫 过滤，然后在25。C将Et3N(1.0克，3当量)和(Boc)20(1.8克，2.5当量)加入滤液 中。在25。C搅拌15小时之后，对所述溶液进行浓縮，通过硅胶柱色谱纯化(EtOAc/ 己烷=4:1)，制得黄色油状化合物145-VII(940毫克)，产率为69%。
在25。C向1-戊醇(3毫升)中的化合物145-VII(940毫克)和哌嗪(l-XI1， 382 毫克，3当量)加入Et3N(450毫克，3当量)。该混合物在12(TC搅拌8小时，此 时通过TLC证明反应完全。在25'C将乙酸乙酯(5毫升)加入所述反应混合物。 所述溶液搅拌1小时，通过过滤除去Et3NHCl盐浓縮，用硅胶纯化(EtOAc/MeOH =7:3)，制得145-VIII(570毫克)，产率为56%。
中间体145-VIII (100毫克)的溶液用在CH2C12 (1毫升)中的4 N HCl/二噁烷 (2毫升)处理，在25。C下搅拌15小时。通过TLC证明反应完全。对该混合物进 行浓缩，制得化合物145的盐酸盐(55毫克)。
CI-MS (M+ + 1): 485.0
实施例148:化合物146的制备
<formula>formula see original document page 68</formula>
中间体145-VIII在化合物145的制备过程中制得。
在25°C向145-VIII (520毫克)的MeOH(8毫升)溶液加入二乙基乙烯基膦酸 酯(2-I， 187毫克，1.5当量)。该混合物在65。C搅拌24小时。通过TLC证明反 应完全。对该溶液进行浓缩，通过硅胶纯化(MeOH/CH2Cl2-8/92)，制得淡黄色 泡沫状化合物146-1(317毫克)，产率为50%。
将20%的TFA/CH2Cl2溶液(2毫升)加入中间体146-1 (100毫克)的CH2C12(1 毫升)溶液。该反应混合物在室温下搅拌15小时，然后通过除去溶剂进行浓縮， 制得化合物146的三氟乙酸盐(80毫克)。CI-MS (M++ 1): 649.3 实施例149:化合物147的制备
O r P N U^T^IBo" Boc -O 。
N U"^Y^1H ▽ H
OB 146-1 U OH 化合物147
中间体146-1在化合物146的制备过程中制得。
在10-15°C ，向146-1 (200毫克)的CH2C12(1毫升)溶液加入TMSBr(0.3毫升， 8当量)处理1小时。该混合物在25t:搅拌15小时，然后在真空和40。C的条件 下浓縮以除去TMSBr和溶剂。加入CH2Cl2以溶解残余物。再对该混合物进行 真空处理，以制得化合物147的氢溴酸盐(150毫克)。CI-MS (M++ 1): 593.3
实施例150:化合物148的制备
化合物148依照与实施例U2所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 l-(2-吗啉代乙基)-哌嗪代替化合物60-11。 CI-MS (M++1): 572.5 实施例151:化合物149的制备
化合物149依照与实施例112所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 N-(2-羟乙基)哌嗪代替化合物60-11。 CI-MS (M++1): 503.4 实施例152:化合物150的制备
化合物150依照与实施例112所述相同的方式制备，不同之处在于，使用 1-(2-(2-羟基乙氧基)乙基)哌嗪代替化合物60-11。 CI-MS (M++1): 547.4 实施例153: GTP-结合实验
用DELFIA GTP-结合试剂盒(芬兰土尔库的华莱克公司(Wallac Oy， Turku， Finland))检测化合物1-150结合CXCR4受体的功效。DELFIA GTP-结合实验是 时间分辩的荧光实验，其基于在G-蛋白亚基上的GDP-GTP交换，然后是G蛋 白偶联受体被激动剂激活。用GTP的无法水解的类似物Eu-GTP监测激动剂依 赖性G-蛋白激活。需要注意，SDF-1刺激CXCR4受体导致G-蛋白oc亚基上的 GDP被GTP取代。得到的GTP-Ga复合物代表G蛋白的激活形式。参见Peltonen 等，Eur. J. Pharmacol. (1998) 355:275。
将衍生自表达CXCR4的HEK293细胞的质膜悬浮于测定缓冲液(50 mM NaCl， 100mg/mL皂苷，3mMMgCl2， 3mMGDP， 5% BSA， 50mMHEPES， pH 7.4)中。将等份(4 pg蛋白质)加入AcroPlate(密歇根州安阿伯的玻尔生物科学 公司(Pall Life Sciences, Ann Arbor， MI))各孔中。加入受试化合物(用0.1% DMSO溶液配制的10mM溶液)和SDF-l (用测定缓冲液配制的4nM溶液)之后，缓慢 振荡的同时在室温下避光培育该测试板10分钟。将获自华莱克公司(Wallac Oy)Eu-GTP的Eu-GTP加入各孔。再次培育该平板60分钟，然后用测定试剂盒 提供的洗涤缓冲液洗涤两次，以终止该实验。根据Victor 2多标记(multi-label) 酶标仪测定的荧光信号来确定Eu-GTP的结合。
出乎意料的是，28个受试化合物的ICso(将SDF-1刺激的GTP-Goc结合抑制 50%所需的浓度)为20nM， 83个受试化合物的IC5。为nM级，37个受试化合物 的ICs。为100-1000 nM。
实施例154:放射性配体结合实验
用玻璃纤维过滤板(马萨诸塞州比尔里卡的密理博公司(Millipore， Billerica， MA))分别测定114种受试化合物与人SDF-1之间的结合竞争，如下所述
用90 |Lil 0.2%聚乙烯亚胺预包被该玻璃纤维过滤板30分钟，用100 蒸馏 水洗涤四次以减少非特异性结合。在U-形底测定板(纽约州康宁的康宁公司 (Corning, Corning, NY))中，将70 (il测定缓冲液(50 mM HEPES， pH7.4， 0.5% 牛血清白蛋白，90mMNaCl， 5mMMgCl2， 1 mM CaCl2)配制的人CXCR4-转染 的HEK293细胞(5-10 pg蛋白质/孔)的膜与20 (il受试化合物和10 |il [125I]-SDF-1 (终浓度150 pM)—起培育。室温下120分钟后，将反应混合物转移至玻璃纤维 平板孔中(80 jil/孔)以终止培育，并进行真空过滤(MultiScreen Vacuum Maniford， 密理伯公司(Millipore))。用80 |_11/孔的洗涤缓冲液(20 mM HEPES， pH 7.4和90 mMNaCl)洗涤该平板四次，然后空气干燥过夜。将35 pl Supermix混合物加入 平板各孔后，用Trilux MicroB eta(马萨诸塞州波士顿的帕金埃尔玛公司 (PerkinElmer， Boston, MA))对平板上残留的放射性进行计数。
50种受试化合物的IQo(将严I]-SDF-l与受体的结合抑制50%所需的浓度 浓度)小于20nM，43种受试化合物的IC5G为20-100 nM， 21种受试化合物的IC50 为100-1000 nM。
实施例155:干细胞运动
如下所述检测五种化合物增强干细胞运动的功效.-
将各化合物溶解于盐水。将各溶液以4ml/kg静脉内给予BALB/c小鼠。在 静脉内注射后1、 2、 3、 6、 18和24小时，通过心脏穿刺采集全血。接受盐水 的小鼠用作对照。汇集同组的血样(各组N=3)，用台盼蓝排除法计算白细胞总 数。用抗体表面染色和流式细胞术(佛罗里达州迈阿密的贝克曼柯尔克公司 (Beckman Coulter, Miami, FL))测定造血干细胞(CD34+)和内皮祖细胞(CD133+)。 用单向ANOVA进行统计学显著性分析。如果p值<0.05则认为有显著性差异。
结果表明，所有受试化合物均能以剂量依赖性方式增强CD34+造血干细胞 和CD133+内皮祖细胞向外周血中的运动。在单次注射后13小时内，化合物使进入循环的CD34+细胞增加一直到6.2-14.5倍，进入循环的CD133+细胞增加一 直到5.2-10.7倍。
实施例156:在干细胞和内皮祖细胞运动中的协同作用 以类似于实施例129所述的方式还测试了单用G-CSF和G-CSF与受试化合 物联用对干细胞和内皮祖细胞运动的功效。结果表明，联用在增强CD34+和 CD133+运动中具有协同作用。进入循环的CD34+增加一直到约18.5倍，进入循 环的CD133+增加一直到约64.2倍。
实施例157:氧气诱导的视网膜病(糖尿病视网膜病模型) 将新生大鼠从出生期至出生后14天交替置于含50%氧气的空气中和含10% 氧气的空气中， 一个周期为24小时，以诱导强烈的视网膜血管新生。这些大鼠 用作糖尿病视网膜病模型。
将受试化合物溶解于水。通过玻璃体内注射将浓度为0.1-10 的溶液给 予大鼠(2(il/眼)。未注射任何受试化合物或注射载体的氧气诱导的视网膜病大鼠 用作对照。然后将所有大鼠放置在正常空气中6天，之后处死。用ADP酶组织 化学和计算机辅助图像分析技术评价新血管形成。
结果表明，受试化合物能有效抑制视网膜新血管形成。 实施例158:脉络膜新血管形成(年龄相关的黄斑变性模型) 在4-6周龄雄性C57BL/6J小鼠用激光诱导布鲁赫膜破裂，以产生脉络膜新 血管形成(CNV)。用手持的盖玻片作为接触镜，将安装在狭缝灯上的氩气激光凝 固器(532 nm)在视网膜中间-外周的视神经头周围产生四处损伤(光点直径50 |im，持续时间0.07秒，260mW)。将受试化合物溶解于水。在激光处理后，立 即通过玻璃体内注射将浓度为1-100 (^M的溶液给予CNV小鼠(l或2pl/眼)。不 用受试化合物处理的CNV小鼠用作对照。激光处理后14天，处死所有小鼠， 用荧光染色的脉络膜-巩膜-RPE铺片(flat-mount)、通过计算机辅助图像分析评估 布鲁赫膜破裂位点处的CNV生长。
结果表明，与对照相比受试化合物能使新血管形成面积縮小34%-59%。 实施例159:肢体缺血模型
用肢体缺血模型测试三种化合物在缺血治疗中的功效。 如下所述在各BALB/c小鼠的左后肢诱导缺血结扎股动脉，在结扎处近 端和远端0.20-0.30 cm处切断股动阮也切断可以看到且位于结扎处远端的任何
其它大血管。
在术后第4天和第8天，将各化合物溶解于盐水，静脉内给予肢体缺血小 鼠，剂量范围是0.5mg/kg至最大耐受剂量。对侧右后肢和接受盐水的小鼠用作 对照。用两种半定量缺血指数观察该动物，每周三次。在术后第1、 7、 14、 21 和28天，用激光多普勒成像器(PeriScanPIMII)测定血流恢复程度，该成像器能检测血液流量(血液/(面积x时间))。此外，用数字握力计(Digital Grip Strength Meter)(0167-005L，哥伦布仪器公司(Columbus Instmments))测定肌力。评估术后 第18天处死后立即收集的腿部肌肉中的新血管形成。在毛细血管密度分析中， 进行CD31免疫组化染色。在显微镜下对IO个视野中的阳性染色的新形成的内 皮细胞计数，数据表示为阳性细胞数/高倍放大视野。用单向ANOVA进行统计 学显著性分析。如果p值<0.05则认为有显著性差异。
所有受试化合物都具有改善后肢功能、外观和肌力，恢复血流以及增加新 血管形成的功效。
其它实施方式
说明书中所揭示的所有特征可以以任意的组合方式结合。该说明书中所揭 示的各种特征可以通过提供相同、等价或类似目的的特征代替。因此，除非另 外说明，所揭示的各种特征仅仅是一系列等价或类似特征中的一个例子。
通过以上说明，本领域技术人员可以很容易地确定本发明的主要特征，同 时可以在不背离本发明的精神和范围的前提下，对本发明进行各种改变和改良， 以使其适用于各种应用和条件。因此，其他的实施方式也在所附权利要求书的 范围之内。
权利要求
1.一种具有以下结构式的化合物式中，Q和U各自是CH或N，前提是Q和U中的至少一种是N；X，Y和Z各自独立地是C1-5亚烷基或者缺失；m是0，1，2，3，4或5；n是0，1或2；p是1或2；R1是H，C1-C10烷基，C3-C20环烷基，C1-C20杂环烷基，芳基，杂芳基，卤素，CN，ORa，COORa，OC(O)Ra，C(O)Ra，C(O)NRaRb或NRaRb；R2是C1-C10烷基，C3-C20环烷基，C1-C20杂环烷基，芳基，杂芳基或C1-C10烷基，其任选地被C1-C10烷基，C3-C20环烷基，C1-C20杂环烷基或N(RcRd)取代；R3独立地是C1-C10烷基，C3-C20环烷基，C1-C20杂环烷基，芳基，杂芳基，卤素，CN，ORe，COORe，OC(O)Re，C(O)Re，C(O)NReRf或NReRf；或着R3是和与之相连的环上的两个碳原子连接的C1-5亚烷基，或者和与之相连的环上的一个碳原子连接的C2-8亚烷基；R4是P(＝O)(ORg)(ORi)，P(＝O)(NHRg)(ORi)，P(＝O)(NRg)(NRi)，S(＝O)2ORg或S(＝O)2Rg；其中Ra，Rb，Rc，Rd，Re，Rf，Rg和Ri各自独立地是H，C1-C10烷基，C3-C20环烷基，C1-C20杂环烷基，芳基，杂芳基或-C(O)R，R为H，C1-C10烷基，C3-C20环烷基，C1-C20杂环烷基，芳基或杂芳基；或者Ra和Rb相连，共同形成C2-8亚烷基，Rc和Rd相连，共同形成C2-8亚烷基，Re和Rf相连，共同形成C2-8亚烷基，或Rg和Ri相连，共同形成C1-5亚烷基。
2. 如权利要求1所述的化合物，其特征在于，Q是CH或N，而U是N。
3. 如权利要求1所述的化合物，其特征在于，X是-CH2-， -01^(:112-或 -CH2CH2CH2-，而p是1。
4. 如权利要求1所述的化合物，其特征在于，Y是-CH2或者缺失，而Z 是-012-。
5. 如权利要求1所述的化合物，其特征在于，R2是C^烷基取代的 N(RcRd)。
6. 如权利要求5所述的化合物，其特征在于，R2是-CH2CH2CH2-N(ReRd)， 其中Rc是H而Rd是Q-C川垸基，C3-C2o环烷基，C厂C2o杂环垸基，芳基或杂芳基，或者Re和Rd相连，共同形成C4-6亚烷基。
7. 如权利要求l所述的化合物，其特征在于，m是O， l或2; n是l或 2; R,是NHr, R3是d-C3烷基，(:3《8环烷基，d-Q杂环垸基，芳基，杂芳 基，卣素，CN， ORe或C(O)NRJRf;或R3是和与之相连的环上的两个碳原子连接的d—2亚烷基，或和与之相连的环上的一个碳原子连接的C2—5亚烷基。
8. 如权利要求1所述的化合物，其特征在于，R4是P(=0)(OH)2，P(=。)(OH)(OCH2CH3) ， P(=0)(OCH2CH3)2 ， ， ^^A^ ， S(=0)2OH，S(=0)2CH^S(=0)2Ph。
9. 如权利要求8所述的化合物，其特征在于，m是O， l或2; n是l; p 是l; X是-012012-或-(^2012012-; Y是-CH2或者缺失，而Z是-CHr; R, 是NHv R2是Cw烷基取代的N(RcRd); R3是CrQ垸基，(:3《8环院基，CrC8 杂环垸基，芳基，杂芳基，卤素，CN， ORe或C(O)NReRf;或者尺3是和与之 相连的环上的两个碳原子连接的Cw亚垸基，或和与之相连的环上的一个碳原 子连接的Cw亚垸基。
10. 如权利要求l所述的化合物，其特征在于，所述化合物选自化合物 2-4， 14-19， 21-57， 62， 63， 74， 75， 78-98， 101， 110， 111， 141-144， 146 或147。
11. 一种具有以下结构式的化合物<formula>formula see original document page 4</formula>式中U是CH或N，L是C广Cu)烷基，C3-C2o环垸基，C!-C2o杂环垸基，芳基或杂芳基； Y和Z各自独立地是Q.5亚垸基或者缺失； m是0， 1， 2， 3， 4或5; n是0， 1或2;A是H， d-do烷基，C3-C2。环垸基，CrC2o杂环垸基，芳基，杂芳基，卣素，CN， ORa， COORa， OC(O)Ra， C(O)Ra， C(O)NRaRb或NRaRb;R2是C广do垸基，Q-C2o环烷基，C广C2o杂环烷基，芳基，杂芳基或C广C10 垸基，其任选地被C广do垸基，C3-C2o环烷基，C厂C2o杂环烷基或N(RcRd)取 代；R3是C广do烷基，C3-C20环烷基，C广C20杂环垸基，芳基，杂芳基，卤 素，CN， ORe， COORe， OC(O)Re， C(0)Re， C(O)NReRf或NReRf;或R3是和 与之相连的环上的两个碳原子连接的CM亚烷基，或和与之相连的环上的一个 碳原子连接的C2—8亚烷基；R4是H， CrCu)烷基，C3-C2Q环垸基，d-C20杂环烷基，芳基，杂芳基，ORg， COORg， C(O)Rg或C(O)NRgRi;其中Ra， Rb， Rc， Rd， Re， Rf， Rg和Ri各自独立地是H， C「Cu)烷基， CrC2o环垸基，C!-C2o杂环垸基，芳基，杂芳基或-C(O)R， R为H， C广Cu)垸 基，CrC2o环垸基，d-C2o杂环烷基，芳基或杂芳基；或者Ra和Rb相连，共同形成C2.8亚烷基，Rc和Rd相连，共同形成C2-8亚垸基，Re和Rf相连，共同形成C^亚烷基，或Rg和Ri相连，共同形成<:2.8亚烷基。
12. 如权利要求11所述的化合物，其特征在于，U是N。
13. 如权利要求ll所述的化合物，其特征在于，Y是-CH2或者缺失，而 Z是-CH2画。
14. 如权利要求11所述的化合物，其特征在于，R2是Cw烷基取代的N(RcRd)。
15. 如权利要求14所述的化合物，其特征在于，R2是 -CH2CH2CH2-N(RcRd)，其中&是H而Rd是C广do垸基，〇3-<:20环烷基，CrC20杂环烷基，芳基或杂芳基，或者Rc和Rd相连，共同形成C4—6亚烷基。
16. 如权利要求15所述的化合物，其特征在于，m是1或2; n是1或2; L是环己基；R!是NH2; R3是d-C3烷基，(:3-(:8环垸基，CrQ杂环垸基，芳 基，杂芳基，卤素，CN， ORe或C(O)NReRf;或者R3是和与之相连的环上的 两个碳原子连接的Q.2亚垸基，或和与之相连的环上的一个碳原子连接的C2-5 亚烷基；R4是H或任选被ORg， C02Rg， NRgRi， P(=0)(ORg)(ORi)， P(=0)(NHRg)(ORi)， P(=0)(NRg)(NRi)， S—0)20Rg或S(-0)2Rg取代的C广C3烷基；其中Rg和Ri各自独立地是H， C广do垸基，C3-C20环垸基，C广C2Q杂环垸基，芳基，杂芳基或-C(O)R， R为H， d-do垸基，Q陽C2。环烷基，C!-C20 杂环垸基，芳基或杂芳基；或Rg和Ri相连，共同形成Q-5亚烷基。
17. 如权利要求11所述的化合物，其特征在于，所述化合物选自化合物 60-100， 112， 113或148-150。
18. —种权利要求1或11所述的化合物或其药学上可接受盐的用途，其特 征在于，用于制备治疗与CXCR4相关的医学病症的药物，较佳地，所述医学病症是炎性疾病或免疫疾病，发育疾病或变性疾病， 或组织损伤；更佳地医学病症选自下组(a) 糖尿病性视网膜病，增殖性视网膜病，年龄相关的黄斑变性，黄斑水 肿，角膜新血管形成或虹膜新血管形成；(b) 脑损伤，神经损伤，心脏损伤，肝损伤，骨骼肌损伤，肾损伤，胰脏 损伤，肺损伤，皮肤损伤，肢体缺血，无症状缺血，心肌缺血或胃肠道损伤；(c) I型糖尿病；
19. 一种权利要求1或11所述的化合物或其药学上可接受盐的用途，其 特征在于，用于制备治疗癌症的药物。
20. —种药物组合物，其特征在于，它含有权利要求1或11所述的化合 物或其药学上可接受盐以及药学上可接受的载体。
21. 如权利要求20所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物的剂型选自下组滴眼剂、软膏、可注射流体、微粒或缓释剂型。
22. 如权利要求20所述的药物组合物，其特征在于，所述化合物选自 化合物2-4， 14-19， 21-57， 62， 63， 74， 75， 78-98， 101， 110， 111， 141-144， 146或147;或化合物60-100， 112， 113或148-150。
全文摘要
本发明涉及具有说明书中所示的结构式的杂环化合物。本发明还涉及用所述杂环化合物之一来治疗以下疾病的方法炎性疾病或免疫疾病，发育疾病或变性疾病，以及组织损伤。
文档编号A61K31/551GK101565404SQ20081017969
公开日2009年10月28日 申请日期2008年12月1日 优先权日2008年4月21日
发明者严启峰, 笙 胡, 胡正洸, 金其新, 黄彰斌, 黄盈慧 申请人:太景生物科技股份有限公司