专利名称：应用抗磷脂酰丝氨酸受体抗体在治疗癌症上的新用途的制作方法
技术领域：
本发明是有关应用抗磷脂酰丝氨酸受体抗体(anti-phosphatidylserine receptor antibody)来阻止憐月旨酷丝氛酸受体和憐 脂酰丝氨酸结合，使磷脂酰丝氨酸表面化的细胞在局部诱导特异免疫反应，极大的增强癌 症的治疗效果，为治疗癌症的新用途，涉及制药领域.
背景技术：
癌症是严重危害人类健康的常见病及多发病，在世界范围内致死性疾 病中，占第二位或第三位。近半个世纪以来，世界有许多国家和地区癌症的发病率和死亡率 均有增加之势.癌症的治疗方法主要有外科手术疗法、放射疗法和药物疗法，近年来生物 免疫疗法已进入临床应用，临床上常以四种方法的综合应用来治疗癌症.单克隆抗体或多克隆抗体是一类蛋白质分子，以其高特异性在医学基础研究，疾 病的临床诊断，治疗和预防有广泛的应用，其在生物免疫疗法治疗癌症的开发前景已获广 泛肯定·巨嗜细胞是机体免疫系统的一个重要组成部份，其表面的磷脂酰丝氨酸受体和在 细胞凋亡时外翻的磷脂酰丝氨酸结合是迅速清除凋亡的细胞的一个主要机制.细胞凋亡是机体在生理或病理条件下受到刺激后，导致细胞产生一系列形态和生 化方面的改变而引起的程序性细胞死亡.磷脂酰丝氨酸是一种磷脂，存在于细胞膜内，为膜的一种组成部分.正常细胞的细胞膜磷脂分布是不对称的，位于细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸 (phosphatidylserine)在细胞凋亡时转至细胞膜外表面，此改变被认为是特异性的，并且 可作为凋亡细胞表面改变的标记。磷脂酰丝氨酸表面化发生于凋亡早期，是一种导致机体 吞噬凋亡细胞的信号.
发明内容
本发明利用放射线在试验动物肿瘤模型上诱导细胞凋亡，利用抗磷脂 酰丝氨酸受体抗体疗法来阻止凋亡细胞被机体的免疫系统的迅速清除，使凋亡细胞在局部 诱导特异肿瘤免疫反应，起到肿瘤疫苗的作用，用以刺激机体产生对肿瘤的免疫反应，达到 治疗目的.所用抗磷脂酰丝氨酸受体抗体为兔抗人多克隆抗体，该抗体对人和鼠磷脂酰丝氨 酸受体有交叉反应.兔IgG和抗磷脂酰丝氨酸受体抗体购自Trend Pharma & Tech Ltd.试验动物肿瘤模型试验动物采用C3H/HEN小鼠，试验用肿瘤细胞为老鼠鳞状细 胞癌细胞株SCCVII.各组小鼠接种肿瘤后第8天测量各组小鼠肿瘤体积.各组无显著差异。试验动物分组组(1)为对照组，无任何治疗.组(2)为肿瘤局部放射治疗.组(3)为肿瘤局部放射治疗，加抗磷脂酰丝氨酸受体抗体.组(4)为肿瘤局部放射治疗，加兔IgG为治疗对照.当肿瘤的直径超12mm，和体积超过450立方毫米，给与人道毁灭.
在附图1中，X轴表示该图为植肿瘤后的第8天纪录的分组资料，Y轴表示各组存活老鼠只数.该图表明所有试验鼠均存活.在附图2中，X轴表示该图为植肿瘤后的第15天纪录的分组资料，Y轴表示各组存 活老鼠只数.该图表明组1所有试验鼠因肿瘤体积超过450立方毫米，均人道毁灭，其他 3组试验鼠均存活.在附图3中，X轴表示该图为种植肿瘤后的第50天纪录的分组资料，Y轴表示各 组存活老鼠只数.经过放射照射后约40天，三组中有些老鼠身上肿瘤开始复发，至第50天 时，凡老鼠的复发肿瘤的直径超过12mm，和体积超过450立方毫米，给与人道毁灭.在附图4中，X轴表示该图为植肿瘤后的第80天纪录的分组资料，Y轴表示各组存 活老鼠只数.图示只有组3有75%小鼠经治疗存活，其余组全部小鼠因肿瘤复发死亡.
具体实施例方式以下对本发明作详细说明，但不意味着限制本发明的内容.试验基本准备动物试验用C3H/HEN小鼠，22_30克重，50只，雌雄各半，试验前 一天用电动理发刀剃掉小鼠背部毛发，并使用市售退毛剂去掉残余毛根，然后每只老鼠背 部种植2百万个肿瘤细胞，约8天后，种植的肿瘤细胞长为实体肿瘤，选用其肿瘤直径约为 8-9mm(毫米)的老鼠32只，分为4组，雌雄各半，并测量每个肿瘤的体积，测量用游标卡尺， 因肿瘤体积近似于锥形，所以测量结果经公式体积=1/3 ^ 3. 14 ^ r ^ r ^ H计算，其中 r表示肿瘤底面半径，H表示肿瘤高度，并纪录并进行统计学处理，然后按试验计划，分组治 疗，肿瘤局部放疗是将老鼠放置于一个3毫米铅板所制小容器，只允许肿瘤暴露与外，接受 放射治疗.组(1)为对照组，无任何治疗，每2天测量肿瘤体积.组(2)给与肿瘤局部放射治疗25Gy，定期测量肿瘤体积.组(3)给与肿瘤局部放射治疗25Gy，立即给与腹腔注射抗磷脂酰丝氨酸受体抗 体，每天一次，连续3天.然后定期测量肿瘤体积.组(4)给与肿瘤局部放射治疗25Gy，立即给与腹腔注射兔IgG，每天一次，连续3 天.然后定期测量肿瘤体积.任何小鼠肿瘤的直径超过12毫米，和体积超过450立方毫米，给与人道毁灭.
权利要求
本发明是有关应用阻断磷脂酰丝氨酸受体和磷脂酰丝氨酸结合的方法在治疗癌症上的新用途，涉及制药领域，此新用途可用于国家一类新药的开发。
2.根据权利要求1所述的本发明所用抗体为可阻断磷脂酰丝氨酸受体和磷脂酰 丝氨酸结合的单克隆或多克隆抗磷脂酰丝氨酸受体的抗体(anti-phosphatidylserine receptor antibody)和功能上的类似物，如来自有此功能抗体的片段，有此功能抗体的重 组形式，有此功能抗体的人源化形式或有此功能的化学合成物。
3.根据权利要求1所述的本发明的抗体的应用可以和诱导肿瘤细胞凋亡的方法，包括 物理的，化学的和生物的方法联用，也可单独应用。
4.根据权利要求1所述的本发明的应用对象是人或动物。
5.根据权利要求1所述的本发明的抗体的应用剂量是每天0.5毫克/每公斤体重-20毫克/每公斤体重。
6.根据权利要求1所述的本发明在阻断磷脂酰丝氨酸受体和磷脂酰丝氨酸结合时，每 天注射1 2次。
7.根据权利要求1所述的本发明的应用途径是经静脉注射或经腹腔注射，或经静脉注 射和经腹腔注射结合。
8.根据权利要求1所述的本发明所用携带抗体的注射用液为0.9%生理盐水或其它临 床静脉注射稀释用液体。
9.根据权利要求1所述的本发明所用抗体为IgGjPIgM及所属亚型。
10.根据权利要求1所述的本发明的治疗范围为早期，中期，晚期的实体癌症和非实体 癌症。
全文摘要
本发明是有关应用抗磷脂酰丝氨酸受体抗体在治疗癌症上的新用途，该用途可用来阻止磷脂酰丝氨酸表面化的细胞被机体的免疫系统的迅速清除，使之在局部诱导特异肿瘤免疫反应，极大的增强癌症的治疗效果，为治疗癌症的新用途，涉及制药领域。
文档编号A61P35/00GK101810857SQ20091006080
公开日2010年8月25日 申请日期2009年2月20日 优先权日2009年2月20日
发明者孙京海 申请人:孙京海