专利名称：一种含有溶菌酶和氟苯尼考的混悬剂组合物及其制备方法
技术领域：
本发明属于药物技术领域，特别是一种含有溶菌酶及氟苯尼考的混悬剂组合物及 其制备方法。
背景技术：
溶菌酶是具有溶解细菌细胞壁的一类酶的总称，其抗菌作用是通过破坏细胞壁中 的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之间的0_1，4糖苷键，使细胞壁不溶性黏多糖分解 成可溶性糖肽，导致细胞壁破裂内容物逸出而使细菌溶解。溶菌酶还可以与各种诱发炎症 的酸性物质结合，使其失活。溶菌酶在临床上用于各种细菌和病毒引起的感染、炎症的治疗 和预防，以及防治慢性呼吸道、慢性支气管炎，也可以用于包括非特异性的防御感染免疫反 应。溶菌酶抗病毒作用是通过与带负电荷的病毒蛋白直接结合，与DNA、RNA、脱辅基蛋白形 成复盐，使病毒失活。研究发现，溶菌酶不仅对革兰氏阳性菌具有较强的杀灭作用，而且具 有良好的抗病毒活性。溶菌酶作为一种天然的蛋白质，具有很好的安全性和抗耐药性，尤其 是目前由于抗生素滥用愈演愈烈的耐药性问题，使得溶菌酶在临床应用上有很大的优势。 但是，溶菌酶作为一种蛋白类药物，同样存在受到胃酸容易降解失活的问题，使得口服用药 收效甚微，因此急需开发新的口服制剂。氟苯尼考具有抗菌谱广、抗菌活性强、吸收良好等优点，且相对比较安全。目前市 场销售的氟苯尼考制剂主要为粉剂、预混剂、溶液剂和注射剂。溶液剂和注射剂在治疗严重 细菌性感染方面有其独特之处，但由于氟苯尼考难溶于水，在制备时要加入大量的有机溶 剂使其溶解，因此在制剂上的费用较高，生产复杂、对在线生产员工的身体有其危害性等问 题，且对用药动物有不良应激反应和刺激性。而粉剂和预混剂虽然预防用药时给药不方便、 不易溶水，通过混饲给药治疗效果较差等问题。因此开发氟苯尼考的混悬剂组合物具有实 际意义，该组合物的抗菌范围广、应用范围广，生产工艺简单，成本低，用药安全等特点。
发明内容
本发明的目的是提供一种含有溶菌酶和氟苯尼考的混悬剂。一种含有溶菌酶和氟苯尼考的混悬剂的混悬剂，其特征在于主要成分由氟苯尼 考和溶菌酶组成。一种含有溶菌酶和氟苯尼考的混悬剂的组合物，其特征在于主要成分由以下配比 组成溶菌酶1-15 ；氟苯尼考1-30份。其中优选于溶菌酶7. 5份、氟苯尼考15份本发明的另一目的是提供一种含有溶菌酶和氟苯尼考的混悬剂的制备方法，包括 如下步骤溶菌酶1-15 ；氟苯尼考1-30份；吐温-80 2-10份；枸橼酸钠1_8份；尼泊金甲 酯0. 1-1. 0份；丙二醇5-20份；注射用水90-100份，并且溶菌酶与氟苯尼考的质量比为 1:5-5: 10。
1.称取溶菌酶1-15和氟苯尼考1-30份放入适量注射用水中，加入吐温-80 2-10 份，充分搅拌均勻。2.加入枸橼酸钠1-8份，充分搅拌均勻。3.加入尼泊金甲酯0. 1-1.0份，充分搅拌均勻。4.加入丙二醇5-20份，充分搅拌均勻。5.最后，用注射用水定容至100份，充分搅拌至均勻，在30-100Mpa压力下进行两 次均质化即得。搅拌时，搅拌子转速为1000-2000rpm，时间为30-80分钟，温度为室温，即能形成 外观均一的含有溶菌酶和氟苯尼考的混悬剂产品。一种含有溶菌酶和氟苯尼考的混悬剂的制备方法，其中优选于溶菌酶7. 5份，氟苯尼考1-30份；吐温_80，8份；枸橼酸钠，1. 6份；尼泊金甲酯， 0. 3份；丙二醇15份；最后用注射用水定容到100份1.称取溶菌酶7. 5份和氟苯尼考15份放入适量注射用水中，加入吐温-80 8份， 充分搅拌均勻。2.加入枸橼酸钠1. 6份，充分搅拌均勻。3.加入尼泊金甲酯0. 3份，充分搅拌均勻。4.加入丙二醇15份，充分搅拌均勻。5.最后，用注射用水定容至100份，充分搅拌至均勻，在30-100Mpa压力下进行两 次均质化即得。搅拌时，搅拌子转速为1500rpm，时间为50分钟，温度为室温，即能形成外观均一 的含有溶菌酶和氟苯尼考的混悬剂产品。下面以临床试验说明本发明药物的治疗效果应用本药物组合治疗鸡慢性呼吸道病，鸡慢性呼吸道病又称鸡败血支原体(霉形 体)感染，是由支原体引起的一种呼吸道疾病，其特征是病程长，病理变化发展慢，临床上 主要表现为呼吸呜音、咳嗽、鼻漏及气囊炎等。该病是养鸡业中常见的多发病。
具体实施例方式下面通过实施例来对本发明做进一步说明，但所描述内容不作为限定本发明保护 范围的依据。实施例一一种含有溶菌酶和氟苯尼考的混悬剂组合物及制备方法(1)称取溶菌酶5份，氟苯尼考10份放入适量注射用水中，加入吐温-80 6份，充 分搅拌均勻；(2)加入枸橼酸钠1份，充分搅拌均勻；(3)加入尼泊金甲酯0. 3份，充分搅拌均勻；(4)加入丙二醇10份，充分搅拌均勻；(5)最后用注射用水定容至100份，充分搅拌至均勻，在30-100Mpa压力下进行两 次均质化即得。转速为1500rpm，时间为45分钟，温度为室温。
4
实施例二 一种含有溶菌酶和氟苯尼考的混悬剂组合物及制备方法(1)称取溶菌酶7. 5份，氟苯尼考15份放入适量注射用水中，加入吐温-80 8份， 充分搅拌均勻；(2)加入枸橼酸钠1. 6份，充分搅拌均勻；(3).加入尼泊金甲酯0. 3份，充分搅拌均勻；(4)加入丙二醇15份，充分搅拌均勻；(5)最后用注射用水定容至100份，充分搅拌至均勻，在30-100Mpa压力下进行两 次均质化即得。转速为1500rpm，时间为60分钟，温度为室温。实施例三一种含有溶菌酶和氟苯尼考的混悬剂组合物及制备方法(1)称取溶菌酶10份，氟苯尼考20份放入适量注射用水中，加入吐温-80 9份，充 分搅拌均勻；(2)加入枸橼酸钠2份，充分搅拌均勻；(3)加入尼泊金甲酯0. 3份，充分搅拌均勻；(4)加入丙二醇18份，充分搅拌均勻；(5)最后用注射用水定容至100份，充分搅拌至均勻，在30-100Mpa压力下进行两 次均质化即得。转速为1500rpm，时间为45分钟，温度为室温。临床实验人工诱发肉鸡慢性呼吸道病例，进行溶菌酶混悬剂组合物对慢性呼吸道病的临床 试验，试验期间分别统计死亡率、治愈率、有效率和增重。试验具体情况如下1.材料和方法1. 1试验材料1. 1. 1试验药物一种含有溶菌酶和氟苯尼考的混悬剂组合物(实施例二 )，推荐剂 量为每1L水中加本品0.66g，自由饮用，每日一次，连用3日；对照药物A 溶菌酶，生产单 位大连三仪动物药品有限公司，使用剂量为混饮或馄饲，推荐剂量为每1L水中加本品lg， 每日一次，连用三日；对照药物B 氟苯尼考溶液，生产单位山东中牧兽药有限公司，推荐剂 量为每1L水中加本品lg，自由饮用，每日两次，连用3日。1. 1. 2试验菌株鸡败血支原体MG BG44T株购自中国兽药监察所。1. 1. 3试验动物10日龄肉鸡300只，从天津市静海县某养鸡场，按常规程序进行饲 养管理，试验前饲喂不含抗菌药物的全价饲料，自由饮水，将其随机分成六组，第一组为复 方溶菌酶混悬剂组合物实验组；第二组为药物A对照组；第三组为药物B对照组；第四组为 感染对照组；第五组为健康对照(不感染)组；第六组为安全剂量组。1. 2试验方法1. 2. 1人工诱发鸡败血支原体病鸡败血支原体MG BG44T株冻干管经4次传代，生 长浊度达109CCU/ml即成接种支原体液。除健康对照组和安全剂量组外，每只鸡左、右胸气 囊各接种支原体液1ml，另用0. 5ml支原体液滴鼻。
1. 2. 2给药及性状记录接种前后分别观察每只鸡的临床症状，如精神状态、食欲、 呼吸等变化情况，记录体重。试验鸡接种支原体后，按天记录各组鸡的临床症状、精神状况， 记录发病数、剖检死亡鸡，试验鸡接种支原体7d后，对各组鸡进行混饮给药治疗，连续给药 3d。每次用药后观察临床症状。记录死亡数并对死亡鸡进行尸体剖检，观察气囊病变，以确 定死因。所有实验鸡继续观察至接种后第14d。1.2. 3疗效评价标准死亡率试验期间凡出现鸡败血支原体病典型症状并死亡，尸体剖检气囊有典型 病变特征的则判断为死亡。根据死亡数计算死亡率。治愈率凡在试验期间，鸡用药后精神状态、食欲、呼吸恢复正常，不再出现咳嗽、 啰音、张口呼吸，流鼻液等临床症状者，均属治愈。根据治愈鸡数占整个试验组的比例计算 治愈率。有效率用药后，试验鸡的精神、食欲、呼吸有明显好转，体重较用药前增加者，判 断为有效。据此计算有效率。增重根据给药前及试验结束时的鸡体重，计算每只鸡的增重量，然后算出每组试 验鸡的平均增重量。1. 2. 4数据的分析处理用生物统计进行数据的显著性检验，其中死亡率、治愈率及 有效率均用卡方检验，各组之间的差异和增重采用t检验。2 结果各组鸡的死亡率、治愈率、有效率、平均增重量见表。表临床验证试验疗效结果 2. 1死亡率各用药组相比较，复方溶菌酶混悬剂组合物实验组死亡率较低。药物A 和药物B对照组及感染对照组死亡率相对较高。统计学分析表明，复方溶菌酶混悬剂组合 物实验组的死亡率显著低于对照组的死亡率。2. 2治愈率与有效率复方溶菌酶混悬剂组合物实验组的治愈率较高，均超过 90%。2. 3增重量以复方溶菌酶混悬剂组合物实验组最高。统计学分析，用药组增重与感染对照组比较差异极显著(P < 0. 01)。2. 4安全性试验健康鸡自由饮用11. 25g/3L水浓度的复方溶菌酶混悬剂组合物， 连用3天。用药期间，鸡精神活泼，采食正常、羽毛丰满，剖检后内脏器官及组织未见异常。3 结论3. 1复方溶菌酶混悬剂组合物用于治疗鸡败血支原体病感染具有良好的治疗效 果，且治愈率、有效率显著优于对照组；死亡率显著低于对照组。3. 2经对健康鸡的安全性试验(推荐剂量3倍饮水用3天)表明，使用期间未见临 床异常表现，对健康鸡无明显影响，说明本制剂是安全的。本发明的有益效果1、该发明采用了混悬剂型，由于混悬剂的粒子超微细，比通常的制剂给药方便，成 本低，对动物机体和体内细胞具有良好的渗透性，吸收率高，低剂量就能发挥良好的药效， 并能减少环境污染。并提高了药物的生物利用度及延长了有效血药浓度在体内的维持时 间。2、该发明可以提高药物的生物利用度，最大程度的发挥药物组方的抗菌作用，并 且提供确实、长久的保护。可以用于预防和治疗各种畜禽败血支原体病感染。3.在生产的过程中需要的设备简单，降低了生产成本，节省了大量的人力物力，也 不产生环境污染，适于在畜牧业中推广应用。4.对用于治疗畜禽败血支原体病感染等疾病具有良好的治疗效果。
权利要求
一种含有溶菌酶和氟苯尼考的混悬剂的制剂，其特征在于主要成分由氟苯尼考和溶菌酶组成。
2.根据权利要求1所述的一种含有溶菌酶和氟苯尼考的混悬剂的组合物，其特征在于 主要成分由以下配比组成溶菌酶1-15份、氟苯尼考1-30份。其中优选于溶菌酶7. 5份、氟苯尼考15份。
3.根据权利要求1或2所述的一种含有溶菌酶和氟苯尼考的混悬剂的制备方法，包括 如下步骤溶菌酶1-15份、氟苯尼考1-30份；吐温-802-10份；枸橼酸钠1-8份；尼泊金甲酯 0. 1-1. 0份；丙二醇5-20份；注射用水90-100份。(1)称取溶菌酶1-15份、氟苯尼考1-30份放入适量注射用水中，加入吐温-802-10 份，充分搅拌均勻。(2)加入枸橼酸钠1-8份，充分搅拌均勻。(3)加入尼泊金甲酯0.1-1.0份，充分搅拌均勻。(4)加入丙二醇5-20份，充分搅拌均勻。(5)最后，加注射用水90-100份，充分搅拌均勻，在30-100Mpa压力下进行均质化即得。 搅拌时，搅拌子转速为1000-2000rpm，时间为30-80分钟，温度为室温，即能形成外观均一的含有溶菌酶和氟苯尼考的混悬剂产品。
4.根据权利要求1或2或3所述的一种含有溶菌酶和氟苯尼考的混悬剂的制备方法， 包括如下步骤溶菌酶7. 5份，氟苯尼考15份；吐温-80，8份；枸橼酸钠，1. 6份；尼泊金甲酯，0. 3份； 丙二醇15份；最后用注射用水定容到100份(1)称取溶菌酶7.5份和氟苯尼考15份放入适量注射用水中，加入吐温-80 8份，充分 搅拌均勻。(2)加入枸橼酸钠1.6份，充分搅拌均勻。(3)加入尼泊金甲酯0.3份，充分搅拌均勻。(4)加入丙二醇15份，充分搅拌均勻。(5)最后，用注射用水定容至100份，充分搅拌至均勻，在30-100Mpa压力下进行两次均 质化即得。搅拌时，搅拌子转速为1500rpm，时间为50分钟，温度为室温，即能形成外观均一的含 有溶菌酶和氟苯尼考的混悬剂产品。
5.根据权利要求1所述的一种含有溶菌酶和氟苯尼考的混悬剂组合物，其特征在于该 组合物可以用于治疗畜禽败血支原体病感染等疾病。
全文摘要
本发明涉及一种含有溶菌酶和氟苯尼考的混悬剂组合物，是由溶菌酶和氟苯尼考与吐温-80、枸橼酸钠、尼泊金甲酯、丙二醇、注射用水配制成的微乳溶液。此组合物选用溶菌酶和氟苯尼考的配伍，不仅拓宽了抗菌谱，而且高效、低毒、低残留且不易产生耐药性；制成混悬剂不仅可以解决氟苯尼考微溶于水的问题，提高了其生物利用度，也保护了溶菌酶在胃肠液中的活性，同时也对二者起到了缓释作用，使药物在体内维持长时间的有效血药浓度，集速效、高效、长效优点于一身，可以用于治疗畜禽败血支原体病感染。
文档编号A61P11/00GK101874774SQ200910068698
公开日2010年11月3日 申请日期2009年4月29日 优先权日2009年4月29日
发明者马丽伟 申请人:天津瑞普生物技术股份有限公司