专利名称：聚联乙炔类脂体抗癌药物控释制剂及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种稳定的控释制剂及其制备方法。
背景技术：
癌症是当前危害人类健康的“三大杀手”之一，它的主要治疗手段之一是药物治 疗。理想的药物治疗应该是只对宿主的特定靶细胞发挥作用，而不对宿主的正常细胞产生 效应，或者引起的毒副作用微不足道。但目前的抗癌药物大多存在对肿瘤组织的选择性较 差，疗效低、毒性大的缺点。为增加抗癌效果减少毒副作用，各国都竞相研发最新型的纳米 药物载体材料和技术，包括最初期的癌症诊断、准确地指出它在身体内的位置、向恶性细胞 准确投递抗癌药物，以便从根本上改变目前癌症诊断、治疗和预防的状况。近年来，随着生物技术的不断发展，脂质体制备工艺的逐步完善，脂质体作用机制 的进一步阐明，加之脂质体适合体内降解、无毒性和无免疫原性，特别是大量实验数据证明 脂质体作为药物载体可以提高药物治疗指数、降低药物毒性和减少药物副作用，并减少药 物剂量等优点，脂质体作为药物载体的研究愈来愈受到重视。尽管脂质体作为药物载体具备了许多优点和特点，而且相关研究报道也已经很 多，然而脂质体的应用并不象人们预期的那样广泛。传统脂质体所用膜材主要是磷脂及其 衍生物，由于磷脂容易水解和氧化，并且在表面活性剂作用下脂质体结构容易被破坏，导致 传统脂质体的稳定性较差，包封药物容易泄露。这样一来，对循环环境不稳定的脂质体会在 达到肿瘤位点之前过早泄露抗肿瘤剂，从而产生严重的毒副作用。此外，磷脂的结构特点使 它难以与其他靶向分子连接，制备具有主动靶向的磷脂脂质体在技术上存在一定的困难， 通常需要借助于繁琐复杂的有机合成手段，这给制备技术带来了一定难度。由于稳定性欠 佳以及和靶向分子连接困难等缺点，限制了脂质体的临床应用，因此上述问题是脂质体研 究过程中急需解决的问题。
发明内容
本发明的目的是为了解决现有脂质体本身不稳定、会产生聚集和氧化现象，对所 包裹的药物泄漏，并且难以控制药物释放速率等问题，提供一种聚联乙炔类脂体抗癌药物 控释制剂及其制备方法。聚联乙炔类脂体抗癌药物控释制剂按联乙炔单体、磷脂类物质和抗癌药物0 100 0 100 1 5的摩尔比制成。其中磷脂类物质为磷脂酰胆碱、磷脂酰肌醇、磷脂 酰丝氨酸、磷脂酰甘油、磷脂酸、二月桂酰磷脂酰胆碱、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷 脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰甘油、二棕榈酰磷脂酰甘油、二棕榈酰磷 脂酸、二油酰磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰乙醇胺、卵磷脂、大豆磷脂、天然脑磷脂、合成脑磷 脂、心磷脂中的一种或几种的混合物；联乙炔单体的分子结构式为R-C = C-C = C-R'式中，R为 CH3, CH3(CH2)4, CH3(CH2)9, C00H, COOH(CH2)4, COOH(CH2)9,PO4 (CH2) 2N (CH3) 3，PO4 (CH2) 2N (CH3) 3 (CH2) 4，或 PO4 (CH2) 2N (CH3) 3 (CH2) 9 ；R'为(CH2) 15CH3， (CH2)17CH3, (CH2)19CH3中的一种或几种基团的组合。制备聚联乙炔类脂体抗癌药物控释制剂按以下步骤实现一、将联乙炔单体、磷脂 类物质和抗癌药物按0 100 0 100 1 5的摩尔比混合后溶于有机溶剂中，得混 合溶液A ；二、将混合溶液A置于旋转蒸发仪上，在温度为20 70°C条件下旋转减压蒸发至 干燥，得脂膜；三、将脂膜置于PH为2 12的缓冲溶液中，在温度为20 70°C、超声功率 为40 400W的条件下超声震荡15 30min，至脂膜完全溶解，得混合溶液B ；四、将混合溶 液B在10 20W的紫外灯下光照10 60min，即得聚联乙炔类脂体抗癌药物缓释制剂。其 中步骤一中磷脂类物质为磷脂酰胆碱、磷脂酰肌醇、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰甘油、磷脂酸、二 月桂酰磷脂酰胆碱、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱、 二硬脂酰磷脂酰甘油、二棕榈酰磷脂酰甘油、二棕榈酰磷脂酸、二油酰磷脂酰胆碱、二油酰 磷脂酰乙醇胺、卵磷脂、大豆磷脂、天然脑磷脂、合成脑磷脂、心磷脂中的一种或几种的混合 物；步骤一中联乙炔单体的分子结构式为R-C = C-C = C-R'式中，R为 CH3, CH3(CH2)4, CH3(CH2)9, C00H, COOH(CH2)4, COOH(CH2)9, PO4 (CH2) 2N (CH3) 3，PO4 (CH2) 2N (CH3) 3 (CH2) 4，或 PO4 (CH2) 2N (CH3) 3 (CH2) 9 ；R'为(CH2) 15CH3， (CH2)17CH3, (CH2)19CH3中的一种或几种基团的组合。本发明得到的聚联乙炔类脂体抗癌药物控释制剂，因为联乙炔单体含有共轭三 键，能够在紫外光下聚合，生成聚联乙炔，从而提高了类脂体的稳定性。与传统脂质体相比， 不易聚集及发生水解和氧化现象，并且对表面活性剂的抵抗性增强。本发明得到的聚联乙炔类脂体抗癌药物控释制剂，通过调节紫外光照时间，或者 通过掺入磷脂类物质，改变类脂体的组成比，可以控制联乙炔的聚合度，进而控制药物的体 内外释放速率。本发明得到的聚联乙炔类脂体抗癌药物控释制剂，因为聚联乙炔具有温度和PH 敏感性，当两者变化时聚联乙炔共轭骨架发生扭曲，可以加速药物的释放，因此在用作刺 激-响应的药物控释载体方面具有应用前景。本发明制备方法工艺简单，反应条件温和，易操作，重现性好，无污染，为抗癌药物 缓释制剂的研制及应用研究提供物质基础与技术保障，具有良好的应用前景。
图1为利用动态光散射测量联乙炔类脂体粒径在表面活性剂存在下的变化结果。 (·)表示聚合联乙炔类脂体粒径随表面活性剂的加入变化图；(■)表示未聚合联乙炔类 脂体粒径随表面活性剂的加入变化图。图2为表面活性剂对联乙炔类脂体的形貌影响示意 图。a图表示原始的联乙炔类脂体透射电镜照片；b图表示未聚合的联乙炔类脂体加入表 面活性剂后的透射电镜照片；c图表示聚合的联乙炔类脂体加入表面活性剂后的透射电镜 照片。图3为不同体系中抗癌药物的体外释放曲线。(■)表示游离药物体外释放曲线； (·)表示磷脂类物质脂质体体外释放曲线；(▲)表示掺杂75%磷脂类物质的联乙炔类脂 体体外释放曲线；(▼)表示掺杂50%磷脂类物质的联乙炔类脂体体外释放曲线；( )表示 掺杂25 %磷脂类物质的联乙炔类脂体体外释放曲线。图4表示掺杂50 %磷脂类物质时，不同光照时间对体外释放的影响，(■)表示光照时间为20分钟；(▲)表示光照时间为30 分钟；(·)光照时间为40分钟。
具体实施例方式具体实施方式
一本实施方式是这样实现的a、将联乙炔单体、磷脂类物质和抗 癌药物按0 100 0 100 1 5的摩尔比混合后溶于有机溶剂中，得混合溶液A ;b、 将混合溶液A置于旋转蒸发仪上，在温度为20 70°C条件下旋转减压蒸发至干燥，得脂膜； c、将脂膜置于pH为2 12的缓冲溶液中，在温度为20 70°C、超声功率为40 400W的 条件下超声震荡15 30min，至脂膜完全溶解，得混合溶液B ;d、将混合溶液B在10 20W 的紫外灯下光照10 60min，即得聚联乙炔类脂体抗癌药物缓释制剂。本实施方式中，磷脂类物质为磷脂酰胆碱、磷脂酰肌醇、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰甘 油、磷脂酸、二月桂酰磷脂酰胆碱、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰 磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰甘油、二棕榈酰磷脂酰甘油、二棕榈酰磷脂酸、二油酰磷脂酰 胆碱、二油酰磷脂酰乙醇胺、卵磷脂、大豆磷脂、天然脑磷脂、合成脑磷脂、心磷脂中的一种 或几种的混合物。本实施方式中，联乙炔单体的分子结构式为R-C = C-C = C-R'式中，R为 CH3, CH3(CH2)4, CH3(CH2)9, C00H, COOH(CH2)4, COOH(CH2)9, PO4 (CH2) 2N (CH3) PO4 (CH2) 2N (CH3) 3 (CH2) 4 ^ PO4(CH2)2N(CH3)3(CH2)9 ；R'为(CH2)15CH3, (CH2)17CH3, (CH2)19CH3中的一种或几种基团的组合。本实施方式中，有机溶剂为乙醇、甲醇、乙醚、丙酮、异丙醇、氯仿中的一种或几种 的混合物。本实施方式中，缓冲溶液为20mM Hepes缓冲液、磷酸盐缓冲液、含0. 15MNaCl、pH =7. 5的Tris-HCl缓冲液或含甘露醇的水溶液。本实施方式得到的聚联乙炔类脂体稳定性能大大增加，从图1可以看出，未聚合 联乙炔类脂体在加入表面活性剂后开始粒径增大，随后急剧降低到IOnm左右，说明开始时 表面活性剂插入类脂体的磷脂类物质区域，导致类脂体粒径增大。但当表面活性剂继续增 加，未聚合类脂体就会发生破裂，形成胶束。相反，表面活性剂加入到聚合联乙炔类脂体中， 直到[Triton X_100]/[lipid]为48时，类脂体仍保持球型。说明聚合类脂体与未聚合类 脂体相比稳定性有了明显提高。这一点也可以从透射电镜得到证明，从图2可以看出，刚制 备出的联乙炔类脂体粒径在200 400nm(图加)，加入表面活性剂后，未聚合类脂体变成 IOnm左右的聚集体(图2b)，而聚合类脂体仍为球型，尺寸增大到600 lOOOnm。本实施方式得到的聚联乙炔类脂体具有很好的控释性能，从图3可以看出，游离 药物在8小时内基本释放完全，传统脂质体在M小时内也基本释放完全。而掺杂了联乙炔 的聚合类脂体释放明显减缓，掺杂25%联乙炔类脂体M小时内释放了大约72%，掺杂50% 联乙炔类脂体M小时内释放了大约44%，掺杂75%联乙炔类脂体M小时内释放了大约 20%。说明联乙炔比例越大，药物释放速率越慢。图4是光照时间对释放速率的影响，光照 20分钟后，药物在M小时内释放了大约90%，光照30分钟和40分钟，24小时内分别释放 了 44%和37. 6%。说明光照时间越长，联乙炔类脂体的聚合度越大，药物的释放速率就越6慢。因此我们可以通过控制类脂体的组成比和光照时间调控药物的释放速率。
具体实施方式
二 本实施方式与具体实施方式
一不同的是聚联乙炔类脂体的抗癌 药物控释制剂按0 100 1 5的摩尔比由联乙炔、和抗癌药物制成。
具体实施方式
三本实施方式与具体实施方式
一不同的是抗癌药物控释制剂按 0 100 1 5的摩尔比由磷脂类物质和抗癌药物制成。
权利要求
1.聚联乙炔类脂体抗癌药物控释制剂，其特征在于聚联乙炔类脂体的抗癌药物控释制 剂按0 100 0 100 1 5的摩尔比由联乙炔、磷脂类物质和抗癌药物制成。其中磷 脂类物质为磷脂酰胆碱、磷脂酰肌醇、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰甘油、磷脂酸、二月桂酰磷脂酰 胆碱、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂 酰甘油、二棕榈酰磷脂酰甘油、二棕榈酰磷脂酸、二油酰磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰乙醇胺、 卵磷脂、大豆磷脂、天然脑磷脂、合成脑磷脂、心磷脂中的一种或几种的混合物；联乙炔单体 的分子结构式为R-C = C-C = C-R'式中，R 为 CH3, CH3 (CH2)4, CH3 (CH2)9, C00H, COOH(CH2)4, COOH(CH2)9, PO4(CH2)2N(CH3)3, PO4 (CH2)2N (CH3) 3 (CH2)4,或 PO4 (CH2)2N (CH3) 3 (CH2) 9 ；R，为(CH2)15CH3, (CH2)17CH3, (CH2)19CH3 中 的一种或几种基团的组合。
2.根据权利要求1所述的聚联乙炔类脂体抗癌药物缓释制剂，其特征在于聚联乙炔类 脂体的抗癌药物缓释制剂按0 100 0 100 1 5的摩尔比由联乙炔单体、磷脂类 物质和抗癌药物制成。
3.根据权利要求1所述的聚联乙炔类脂体抗癌药物缓释制剂，其特征在于聚联乙炔类 脂体的抗癌药物缓释制剂按O 100 1 5的摩尔比由联乙炔单体和抗癌药物制成。
4.根据权利要求1所述的聚联乙炔类脂体抗癌药物缓释制剂，其特征在于聚联乙炔类 脂体的抗癌药物缓释制剂按0 100 1 5的摩尔比由磷脂类物质和抗癌药物制成。
5.根据权利要求1、2、3或4所述的聚联乙炔类脂体抗癌药物缓释制剂，其特征在于抗 癌药物为5-氟脲嘧啶、氟脱氧尿苷、尿嘧啶替加氟、替吉奥S-1、卡培他宾、脱氧胞苷、阿糖 胞苷、5-氮杂胞嘧啶、吉西他汀、5-氮杂胞嘧啶-阿拉伯糖苷、6-琉基嘌呤、硫鸟嘌呤、硫唑 嘌呤、别嘌呤醇、克拉屈滨、氟达拉宾、喷司他丁、2-氯腺营、顺钼、卡钼、奥沙利钼、依络钼、 钼-DACH、奥马钼、CI-973、JM-216、阿霉素、道诺霉素、表阿霉素、伊达比星、米托蒽醌、表鬼 臼毒素-依托泊苷、替尼泊苷、依立替康、托泊特坎、勒托替康、Silatecan.9-氨基喜树碱、 10，11-亚甲二氧喜树碱、9-硝基喜树碱、TAS 103、7-甲基-呱嗪-亚甲基)-10，11-亚 乙二氧基-20 (S)-喜树碱、7- (2-N-异丙基氨基)乙基-20 (S)-喜树碱、己烯雌酚、它莫西 芬、托瑞米芬、Tohnudex, Thyrnitaq、氟他胺、比卡鲁胺、非那雄胺、雌二醇、曲西立滨、多洛 昔芬、醋酸甲羟孕酮、甲地孕酮醋酸酯、氨鲁米特、睾内酯、长春新碱、长春碱、长春瑞滨、长 春酰胺、帕利它西、紫杉醇或多烯紫杉醇。
6.制备如权利要求1所述的聚联乙炔类脂体抗癌药物缓释制剂按以下步骤实现一、 将联乙炔单体、磷脂类物质和抗癌药物按0 100 0 100 1 5的摩尔比混合后溶 于有机溶剂中，得混合溶液A ；二、将混合溶液A置于旋转蒸发仪上，在温度为20 70°C条 件下旋转减压蒸发至干燥，得脂膜；三、将脂膜置于PH为2 12的缓冲溶液中，在温度为 20 70°C、超声功率为40 400W的条件下超声震荡15 30min，至脂膜完全溶解，得混合 溶液B ；四、将混合溶液B在10 20W的紫外灯下光照10 60min，即得聚联乙炔类脂体抗 癌药物缓释制剂。其中步骤一中磷脂类物质为磷脂酰胆碱、磷脂酰肌醇、磷脂酰丝氨酸、磷 脂酰甘油、磷脂酸、二月桂酰磷脂酰胆碱、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二 硬脂酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰甘油、二棕榈酰磷脂酰甘油、二棕榈酰磷脂酸、二油酰 磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰乙醇胺、卵磷脂、大豆磷脂、天然脑磷脂、合成脑磷脂、心磷脂中的一种或几种的混合物；步骤一中联乙炔单体的分子结构式为 R-C = C-C = C-R'式中，R 为 CH3, CH3 (CH2)4, CH3 (CH2)9, C00H, COOH(CH2)4, COOH(CH2)9, PO4(CH2)2N(CH3)3, PO4 (CH2)2N (CH3) 3 (CH2)4,或 PO4 (CH2)2N (CH3) 3 (CH2) 9 ；R，为(CH2)15CH3, (CH2)17CH3, (CH2)19CH3 中 的一种或几种基团的组合。
7.根据权利要求6所述的制备聚联乙炔类脂体抗癌药物缓释制剂的方法，其特征在于 步骤一中有机溶剂为乙醇、甲醇、乙醚、丙酮、异丙醇、氯仿中的一种或几种的混合物。
8.根据权利要求6所述的制备聚联乙炔类脂体抗癌药物缓释制剂的方法，其特征在 于步骤三中缓冲溶液为20mM Hepes缓冲液、磷酸盐缓冲液、含0. 15MNaCl、pH = 7. 5的 Tris-HCl缓冲液或含甘露醇的水溶液。
全文摘要
聚联乙炔类脂体的抗癌药物控释制剂及其制备方法，它涉及一种控释制剂及其制备方法。本发明解决了现有脂质体本身不稳定、会产生聚集和氧化现象，对所包裹的药物泄漏以及难以控制药物释放速率等问题。产品由联乙炔、磷脂类物质、抗癌药物制成。方法一、制混合溶液A；二、制脂膜；三、脂膜水化，超声，得混合溶液B；四、将混合溶液B在紫外光下进行光交联，即得。本发明得到的产品具有低毒性、高的稳定性以及可控释放药物的特性。本发明得到的产品对癌症药物的包封率及载药率比较高。本发明工艺简单，反应条件温和，重现性好，无污染。
文档编号A61K45/08GK102038632SQ200910073060
公开日2011年5月4日 申请日期2009年10月16日 优先权日2009年10月16日
发明者刘绍琴, 姜畅, 戴志飞, 李文元, 郭彩欣 申请人:哈尔滨工业大学