专利名称：一种胡椒碱含量的测定方法及其用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种胡椒碱含量的测定方法及其用途，具体的，涉及利用高效液相色 谱法测定中药组合物，尤其是小儿止泻中药巴布剂中胡椒碱含量及其用途。
背景技术：
胡椒属常绿热带藤本植物，主要含有胡椒碱、胡椒脂碱及挥发油成分、石竹烯、胡 椒烯、胡椒醛等，特别是胡椒碱和胡椒油树脂，是从胡椒分离、提取、制备的最有效成分。其 中胡椒碱是胡椒中最有价值的一类化学成分，具有镇静安神、温中散寒、开胃下气、消痰、调 五脏、壮肾气等独特功效，用于腹痛泄泻，尤其对婴儿单纯性腹泻有明显疗效，此为胡椒广 泛用于止泻的本质原因。此外其还具有抗炎作用，保肝作用，可作为生物利用度增强剂使 用。2005版药典对胡椒碱的测定方法采用内标法，由于这种方法要求内标物与各组分 基线分离，因此这种测定方法并不适用于成分复杂的组合物，因此，对于中药组合物中的胡 椒碱需要采用新的含量测定方法以得到质量稳定的产品。
发明内容
因此，本发明的目的是，提供一种胡椒碱含量的测定方法。本发明的另一个目的是，提供上述测定方法的用途。本发明的目的是采用以下技术方案来实现的。一方面，本发明提供了一种胡椒碱 含量的测定方法，所述方法为反相高效液相色谱法，其色谱条件如下检测波长为343nm ； 流动相为甲醇-水=70 30、乙腈-醋酸铵缓冲液(pH = 6.0) =45 55或者甲醇-含 0.1%三乙胺的水=70 30 ；分析柱为用十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂的反相色谱 柱，其柱长为250mm，柱直径为4. 6mm,填充剂颗粒直径为5 u m优选地，所述色谱条件如下检测波长为343nm;流动相为甲醇-水=70 30 ；分 析柱为 Alltima C18 (250mmX 4. 6mm, 5 u m) > Kromasi 1 100-5C18 (250mmX 4. 6mm, 5 u m)或者 Agilent Eclipse XDB-C18 (250mmX 4. 6mm, 5 u m)；理论板数按胡椒碱峰计算不低于 1500。优选地，所述方法中供试品溶液是通过甲醇、乙醇或者50%甲醇水溶液提取制备 的。优选地，所述供试品溶液是通过回流提取或者超声提取进行制备的。优选地，所述方法中供试品溶液的制备方法为取供试品，超声提取或回流提取， 取出，放冷，以甲醇补足减失的重量，摇勻，滤过，取续滤液加甲醇稀释至刻度，摇勻，滤过， 即得。优选地，所述供试品溶液的制备方法为取供试品0.5g，精密加入甲醇25ml，密 塞，称定重量，用甲醇回流提取30 90分钟，取出，放冷，以甲醇补足减失的重量，摇勻，滤 过，精密量取续滤液2. 0ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇勻，滤过，即得。优选地，所述方法还包括制备对照品溶液的步骤。
优选地，所述对照品溶液的制备方法为精密称取胡椒碱对照品适量，加甲醇制成 每lml含25 y g对照品的溶液。优选地，所述方法包括以下步骤1)采用高效液相色谱法，反相色谱分析柱用 十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂，波长为343nm，流动相为甲醇-水=70 30，理论板数 按胡椒碱峰计算不低于1500 ；2)对照品溶液的制备精密称取胡椒碱对照品适量，加甲醇 制成每lml含25 y g的溶液；3)供试品溶液制备取供试品约0. 5g，精密称定于具塞锥形瓶 中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，回流提取，取出，放冷，以甲醇补足减失的重量，摇 勻，滤过，精密量取续滤液2. 0ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇勻，滤过，即得；4) 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10yl，注入液相色谱仪，测定。优选地，所述供试品为中药组合物，优选为中药巴布剂，其由2重量份胡椒、1重量 份吴茱萸、2重量份砂仁和1重量份陈皮经提取后与巴布剂基质混合制成；更优选地，所述 中药巴布剂每片载药量相当于原药材7g，含胡椒以胡椒碱计每片不少于35mg。另一方面，本发明提供了上述方法在测定中药组合物中胡椒碱含量中的用途；优 选地，所述中药组合物为中药巴布剂，其由2重量份胡椒、1重量份吴茱萸、2重量份砂仁和 1重量份陈皮经提取后与巴布剂基质混合制成。本发明还提供了一种中药组合物的制备方法，所述方法包括采用上述方法测定中 药组合物中胡椒碱含量中的步骤；优选地，所述中药组合物为中药巴布剂，其由2重量份胡 椒、1重量份吴茱萸、2重量份砂仁和1重量份陈皮经提取后与巴布剂基质混合制成。本发明还可以采用以下技术方案来实现。本发明提供了一种小儿止泻中药巴布 剂中胡椒碱的含量测定方法，具体的，包括以下步骤1)采用高效液相色谱法，色谱条件 采用反相色谱柱，波长为343nm，流动相为甲醇-水、乙腈-醋酸铵缓冲液(pH = 6. 0)或甲 醇-含0. 三乙胺的水；2)对照品溶液的制备精密称取胡椒碱对照品适量，加甲醇制成 对照品溶液；3)供试品溶液的制备取小儿止泻中药巴布剂，超声提取或回流提取，取出， 放冷，以甲醇补足减失的重量，摇勻，滤过，取续滤液加甲醇稀释至刻度，摇勻，滤过，即得； 4)精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，测定。步骤1)所述流动相为甲醇-水=70 30，或乙腈-醋酸铵缓冲液(pH = 6.0)= 45 55，或甲醇含0. 三乙胺的水=70 30。优选的，所述流动相为甲醇-水=70 30。所述步骤3)用甲醇、乙醇或50%甲醇水溶液回流提取。优选的，所述步骤3)用甲醇回流提取。步骤3)中的小儿止泻巴布剂由以下方法制得组分一的制备吴茱萸、砂仁和陈皮的水提醇沉提取物及胡椒的有机溶剂提取物 合并、浓缩，加入甘油、丙二醇、聚乙烯醇、羟苯乙酯、苯甲酸钠，加热溶解；组分二的制备另取甘油，加入聚丙烯酸钠、甘羟铝、氮酮、冰片，充分搅拌使分散 均勻；组分三的制备另取聚乙烯吡咯烷酮，加水配制成10%的溶液；将组分一与组分二混合，搅拌加入吴茱萸、砂仁和陈皮的挥发油，再加入组分三， 继续搅拌均勻，涂展于无纺布上，同时覆盖塑料薄膜，裁切，包装，即得。色谱条件选择
检测波长的选择对胡椒碱对照品溶液进行吸收波长扫描，结果胡椒碱在343nm 波长处有最大吸收，本发明选择343nm为检测波长。流动相的选择本发明选用流动相①甲醇-水(70 30)；②乙腈-醋酸铵缓冲液 (pH = 6. 0) (45 55)；③甲醇-水(含0. 三乙胺)(70 30)，对小儿止泻巴布剂中的 胡椒碱进行含量测定，结果均得到样品中胡椒碱峰基线分离的对称色谱峰。方法学考察以 流动相①甲醇-水(70 30)为流动相。本发 明选用 Alltima C18 (250mmX 4. 6mm, 5 u m) > Kromasil 100-5C18 (250mmX4. 6mm, 5 u m)、Agilent Eclipse XDB_C18 (250mmX4. 6mm, 5 u m)三个品牌 的色谱柱对小儿止泻巴布剂中的胡椒碱进行含量测定，均得到样品中胡椒碱峰基线分离的 对称色谱峰，分离度大于1. 5，理论塔板数按胡椒碱峰计算大于1500。优选的，以Alltima C18(250mmX4. 6mm, 5 u m)为分析柱。综上所述，本发明提供了一种胡椒碱含量的测定方法，该方法尤其适合用于成分 复杂的中药组合物中胡椒碱含量的测定。在本发明的一个优选实施方案中，采用该方法测 定了小儿止泻中药巴布剂中胡椒碱的含量，该巴布剂由胡椒、砂仁、吴茱萸、陈皮经提取制 成，所述测定方法采用反相色谱柱，波长为343nm，流动相为甲醇-水，精密称取胡椒碱对 照品适量，加甲醇制成对照品溶液，取小儿止泻中药巴布剂，超声提取或回流提取，取出，放 冷，以甲醇补足减失的重量，摇勻，滤过，取续滤液加甲醇稀释至刻度，摇勻，滤过，即得供试 品溶液，精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，测定。该方法简单、高效，能 很好的满足工业化生产的需要。
以下，结合附图来详细说明本发明的实施方案，其中图1本发明所提供的胡椒碱标准曲线图；图2本发明实施例4中测定的胡椒碱对照品溶液色谱图；图3本发明实施例4中测定的胡椒碱供试品溶液色谱图。
具体实施例方式以下参照具体的实施例来说明本发明。本领域技术人员能够理解，这些实施例仅 用于说明本发明，其不以任何方式限制本发明的范围。实施例1供试品小儿止泻巴布剂的制备本实施例为制备作为供试品的小儿止泻巴布剂，其由以下方法制得1)取陈皮100g、吴茱萸100g、砂仁200g加入10倍量水，提取挥发油4小时，过滤，
滤液备用；2)步骤1)所得药渣加8倍量水，煎煮2次，每次1小时，滤过，滤液与步骤1)所得 滤液合并，浓缩至60°C下相对密度为1. 10 1. 15，放冷，加入乙醇使含醇量为70%，充分搅 勻，静置12小时，滤过，得吴茱萸、砂仁、陈皮的水提醇沉提取物；3)另取胡椒200g，粉碎成粗粉，加4倍量70%乙醇，回流提取2次，每次1小时，滤 过，得胡椒的乙醇提取物；4)合并步骤2)所得水提醇沉提取物和步骤3)所得乙醇提取物，回收乙醇，浓缩至
560°C下相对密度为1. 20 1. 23的中药浸膏；5)组分一的制备取步骤4)中得到的中药浸膏，加入甘油110g、丙二醇60g、聚乙 烯醇10g、羟苯乙酯1. 5g、苯甲酸钠1. 5g，加热溶解；6)组分二的制备另取甘油220g，加入聚丙烯酸钠50g、甘羟铝12g、氮酮20g、冰 片2g，充分搅拌使分散均勻；7)组分三的制备另取聚乙烯吡咯烷酮，加水配制成10%的溶液；8)将步骤5)制备的组分一与步骤6)制备的组分二混合，搅拌加入步骤1)中制备 吴茱萸、砂仁和陈皮的挥发油，再加入步骤7)制备的组分三，继续搅拌均勻，涂展于无纺布 上，同时覆盖塑料薄膜，裁切，包装，即得。以上述方法制备得到小儿止泻中药巴布剂三批，批号分别为090301、090302、 090303。实施例2胡椒碱含量测定方法中色谱条件的选择本实施例为胡椒碱测定方法中色谱条件的选择，包括以下几方面1)检测波长的选择对胡椒碱对照品溶液进行吸收波长扫描，结果胡椒碱在343nm波长处有最大吸 收，故选择343nm为检测波长。2)流动相的选择选用流动相①甲醇-水(70 30)；②乙腈-醋酸铵缓冲液(pH = 6. 0) (45 55)； ③甲醇-水(含0.1%三乙胺)(70 30)，对小儿止泻巴布剂中的胡椒碱进行含量测定，结 果均得到样品中胡椒碱峰基线分离的对称色谱峰，但是流动相②成本较高，而流动相③对 色谱柱有损伤，所以选择流动相①。3)分析柱的选择选用 Alltima C18(250mmX4.6mm，5iim)、Kromasil 100-5C18 (250mmX 4. 6mm, 5 um) .Agilent Eclipse XDB_C18 (25(kimX 4. 6匪，5 y m)三个品牌的色谱柱对小儿止泻巴布 剂中的胡椒碱进行含量测定，均得到样品中胡椒碱峰基线分离的对称色谱峰，分离度大于 1. 5，理论塔板数按胡椒碱峰计算大于1500。选择以 Alltima C18(250mmX4. 6mm, 5 u m)为分析柱。4)对照品溶液制备方法精密称取胡椒碱对照品(购自中国药品生物制品检定所)适量，加甲醇制成每1ml 含25ug的溶液，摇勻，即得。5)供试品溶液的制备方法以实施例1制备的小儿止泻巴布剂为供试品，对提取溶媒、提取方法、提取时间等 因素做了考察，具体如下。a)提取溶媒选择取小儿止泻巴布剂(批号090301)，剪成小块，除去盖衬，取约0.5g，精密称定于 具塞锥形瓶中，分别精密加入甲醇(分析纯)、乙醇、50%甲醇水溶液(将分析纯甲醇与水按 1 1的体积分数混合)各25ml，密塞，称定重量，加热回流60分钟，取出，放冷，用各自提 取溶液补足减失的重量，摇勻，滤过，精密量取续滤液2. 0ml，置10ml量瓶中，分别用各自提 取溶液稀释至刻度，摇勻，滤过，即得。按上述色谱条件测定，测定结果见表1。
表1提取溶媒考察
由表1可见，以甲醇提取的胡椒碱的含量最高，并且流动相也含甲醇，故选择以甲 醇作为提取溶液。b)提取方法选择取小儿止泻巴布剂(批号090301)，剪成小块，除去盖衬，取约0.5g，精密称定于 具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，分别进行①超声提取60min，②回流提 取60min，取出，放冷，以甲醇补足减失的重量，摇勻，滤过，精密量取续滤液2. 0ml，置10ml 量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇勻，滤过，即得。按上述色谱条件测定，测定结果见表2。表2提取方法考察 由表2可见，由于巴布剂基质中含有交联剂等，超声提取后仍是比较粘的块状物， 由于提取不完全造成提取含量较低，而以回流提取胡椒碱的含量较高，故选择回流提取方 法。c)提取时间选择取小儿止泻巴布剂(批号090301)，剪成小块，除去盖衬，取约0.5g，精密称定于 具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，分别进行①回流提取30min，②回流提 取60min，③回流提取90min，取出，放冷，以甲醇补足减失的重量，摇勻，滤过，精密量取续 滤液2. 0ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇勻，滤过，即得。按上述色谱条件测定，测 定结果见表3。表3提取时间考察 由表3可见，提取30min时胡椒碱含量较低，而提取60min和90min样品中胡椒碱 的含量影响几乎无差别，可选择直接回流60min。综上所述，供试品溶液的制备方法为取小儿止泻巴布剂，剪成小块，除去盖衬，取约0. 5g，精密称定于具塞锥形瓶中，精 密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，回流提取60min，取出，放冷，以甲醇补足减失的重量，摇勻，滤过，精密量取续滤液2. 0ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇勻，滤过，即得。空白试验按实施例1的方法制得不含胡椒的空白试剂，再按供试品溶液制备方 法制备并测定，结果空白溶液在与胡椒碱对照品相同保留时间处未显色谱峰，故认为无干 扰。实施例3胡椒碱含量测定方法的方法学验证本实施例为对实施例2所建立的胡椒碱含量测定方法进行方法学验证，包括以下 几方面。1)标准曲线及线性范围考察分别精密吸取实施例2制备的对照品溶液(0. 021264mg/ml) 1、5、10、20 yl，对照 品溶液(0. 5316mg/ml) 1、5、10 yl，注入液相色谱仪，照高效液相色谱法(中国药典2005年 版一部附录VI D)测定峰面积。以峰面积(A)为纵坐标(Y)，胡椒碱对照品进样量(ug)为 横坐标(X)，绘制标准曲线，如图1所示。计算回归方程标准曲线Y = 6984. 0X+7. 5，相关 系数0.9999。测定结果见表4。表4胡椒碱对照品标准曲线测定结果 由表4可见，胡椒碱进样量在0. 021264 5. 316 u g范围内与色谱峰面积呈良好 线性关系。2)稳定性试验取批号为090301的样品，按上述方法制备供试品溶液，室温下保存，分别精密吸 取lOiil于0、2、4、8小时，注入液相色谱仪，测定，记录色谱图，考察其稳定性，结果见表5。表5稳定性考察试验结果 由表5所见，供试品溶液在配制后8小时内测定，结果稳定。3)精密度试验精密吸取同一供试品溶液(批号090301)，重复进样6次，每次10 u 1，测定胡椒 碱峰面积，结果见表6。表6精密度试验考察结果
8 由表6可见，供试品峰面积平均值为1437. 0，RSD为0. 6%，表明精密度良好。4)重复性试验取批号为090301的样品，剪成小块，除去盖衬，取0. 5g，精密称定于100ml锥形瓶
中，共6份，测定，结果见表7。表7重现性试验结果 由表7可见，含量平均值为8. 2374mg/g，RSD = 0. 8%，表明重现性良好。5)回收率试验采用加样回收法，取已知含量的样品(批号090301，胡椒碱含量为8. 2374mg/g)， 剪成小块，除去盖衬，取0. 25g，精密称定于100ml量瓶中，共6份，分别精密加入胡椒碱对 照品溶液(C = 0. 6316mg/ml)2.5、3.0、3. 5ml，再精密加入甲醇25ml，称定重量，回流提取 60分钟，取出，放冷，以甲醇补足减失的重量，摇勻，滤过，精密量取续滤液2ml，置10ml量瓶
中，加甲醇稀释至刻度，摇勻，滤过，即得。测定，按下式计算回收率
实测胡椒碱含量(mg )-样品中胡椒碱含量(mg )
回收率％=- x 10 0%
胡椒碱对照品加入量(mg)结果见表8。表8加样回收率考察试验结果
9 由表8可见，采用加样回收试验所得平均回收率为99. 1%，RSD为1.9%，表明回 收率较好。6)样品测定按照上述含量测定方法对090301、090302、090303三批中试产品胡椒碱的含量进 行了测定，每批平行测定2次，结果见表9。表9样品中胡椒碱含量测定结果 7)含量限度的确定根据三批样品对应的胡椒药材质量及中试生产所得小儿止泻巴布剂的质量控制 数据，计算成品中胡椒碱转移率见表10，计算公式如下
每片巴布剂中胡椒碱含量 成品中胡椒碱转移率%= - x 100%
折算每片巴布剂中胡椒碱理论含量其中每片巴布剂相当于原药材7g，含胡椒药材为2. 33g。表10胡椒药材及胡椒碱转移率 实施例4胡椒碱含量的测定仪器与试药仪器Agilent 1100高效液相色谱仪及配套工作站，Sartorius CP22OT电子天 平，Sartorius BS124S 电子天平。胡椒碱对照品购自中国药品生物制品检定，批号0775-200203，供含量测定用。试剂甲醇(色谱纯，美国Fisher化学试剂公司)；其它试剂均为分析纯，水为重 蒸馏水(自制)。供试品小儿止泻巴布剂按下述方法制备取陈皮100g、吴茱萸100g、砂仁200g加 入10倍量水，提取挥发油4小时，过滤，滤液备用，药渣加8倍量水，煎煮2次，每次1小时， 滤过，滤液与提取挥发油滤液合并，浓缩至相对密度为1. 10 1. 15(60°C )，放冷，加入乙 醇至乙醇体积分数为70%，充分搅勻，静置8小时，滤过；另取胡椒200g，粉碎成粗粉，加4 倍量70%乙醇，回流提取2次，每次1小时，滤过；合并滤液，回收乙醇，浓缩至相对密度为 1.20 1.23(60°C )。加入甘油110g、丙二醇60g、聚乙烯醇10g、羟苯乙酯1.5g、苯甲酸钠 1.5g，加热溶解，制得(I)；另取甘油220g，加入聚丙烯酸钠50g、甘羟铝12g、氮酮20g、冰 片2g，充分搅拌使分散均勻，制得(II)；另取聚乙烯吡咯烷酮20g，加水配制成10%的溶液 (III)；将(I)与(II)混合，搅拌加入挥发油，再加入(III)，继续搅拌均勻，涂展于无纺布 上，同时覆盖塑料薄膜，裁切，包装，即得。其中每片巴布剂载药量相当于原药材7g，含胡椒 碱药材为2. 33g。测定胡椒碱含量的色谱条件如下检测波长343nm。流动相甲醇-水(70 30)。分析柱Alltima C18 (250mmX 4. 6mm，5 u m)。对照品制备方法精密称取胡椒碱对照品适量，加甲醇制成每1ml含25y g的溶 液，摇勻，即得。供试品溶液的制备方法为取上述小儿止泻巴布剂，剪成小块，除去盖衬，取约 0. 5g，精密称定于具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，回流提取60min，取 出，放冷，以甲醇补足减失的重量，摇勻，滤过，精密量取续滤液2. 0ml，置10ml量瓶中，加甲 醇稀释至刻度，摇勻，滤过，即得。分别精密吸取上述对照品溶液和供试品溶液各10 iU注入液相色谱仪，测定，色 谱图分别如图2和图3所示。小儿止泻巴布剂每片含胡椒以胡椒碱计不得少于35. Omg。
权利要求
一种胡椒碱含量的测定方法，其特征在于，所述方法为反相高效液相色谱法，其色谱条件如下检测波长为343nm；流动相为甲醇-水＝70∶30、乙腈-醋酸铵缓冲液＝45∶55或者甲醇-含0.1％三乙胺的水＝70∶30；分析柱为用十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂的反相色谱柱，其柱长为250mm，柱直径为4.6mm，填充剂颗粒直径为5μm。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述色谱条件如下检测波长为343nm； 流动相为甲醇-水=70 30 ；分析柱为 Alltima C18 (250mm X 4. 6mm, 5 μ m), Kromasil 100-5C18 (250mmX 4. 6mm, 5 μ m)或者 Agilent Eclipse XDB-C18 (250mmX 4. 6mm, 5 μ m)；理 论板数按胡椒碱峰计算不低于1500。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述方法中供试品溶液是通过甲醇、 乙醇或者50%甲醇水溶液提取制备的；优选地，所述供试品溶液是通过回流提取或者超声 提取进行制备的。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述方法中供试品溶液的制备方法为 取供试品，超声提取或回流提取，取出，放冷，以甲醇补足减失的重量，摇勻，滤过，取续滤 液加甲醇稀释至刻度，摇勻，滤过，即得；优选地，所述供试品溶液的制备方法为取供试品 0. 5g，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，用甲醇回流提取30 90分钟，取出，放冷，以甲 醇补足减失的重量，摇勻，滤过，精密量取续滤液2. 0ml，置IOml量瓶中，加甲醇稀释至刻 度，摇勻，滤过，即得。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其特征在于，所述方法还包括制备对照品 溶液的步骤；优选地，所述对照品溶液的制备方法为精密称取胡椒碱对照品适量，加甲醇 制成每Iml含25 μ g对照品的溶液。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤1)采用高效液相色谱法，反相色谱分析柱用十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂，波长 为343nm，流动相为甲醇-水=70 30，理论板数按胡椒碱峰计算不低于1500 ；2)对照品溶液的制备精密称取胡椒碱对照品适量，加甲醇制成每Iml含25μ g的溶液；3)供试品溶液制备取供试品约0.5g，精密称定于具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml， 密塞，称定重量，回流提取，取出，放冷，以甲醇补足减失的重量，摇勻，滤过，精密量取续滤 液2. Oml，置IOml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇勻，滤过，即得；4)分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ1，注入液相色谱仪，测定。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其特征在于，所述供试品为中药组合物， 优选为中药巴布剂，其由2重量份胡椒、1重量份吴茱萸、2重量份砂仁和1重量份陈皮经提 取后与巴布剂基质混合制成；优选地，所述中药巴布剂每片载药量相当于原药材7g，含胡 椒以胡椒碱计每片不少于35mg。
8.权利要求1至7中任一项所述方法在测定中药组合物中胡椒碱含量中的用途；优选 地，所述中药组合物为中药巴布剂，其由2重量份胡椒、1重量份吴茱萸、2重量份砂仁和1 重量份陈皮经提取后与巴布剂基质混合制成。
9.一种中药组合物的制备方法，其特征在于，所述方法包括采用权利要求1至7中任一 项所述方法测定中药组合物中胡椒碱含量中的步骤；优选地，所述中药组合物为中药巴布 齐U，其由2重量份胡椒、1重量份吴茱萸、2重量份砂仁和1重量份陈皮经提取后与巴布剂基 质混合制成。
全文摘要
本发明提供一种胡椒碱含量的测定方法及其用途。本发明提供的胡椒碱含量的测定方法为反相高效液相色谱法，其色谱条件如下检测波长为343nm；流动相为甲醇-水＝70∶30、乙腈-醋酸铵缓冲液＝45∶55或者甲醇-含0.1％三乙胺的水＝70∶30；分析柱为用十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂的反相色谱柱，理论板数按胡椒碱峰计算不低于1500。本发明提供的测定方法简单、高效，能很好的满足工业化生产的需要。
文档编号A61P1/12GK101852790SQ201010186820
公开日2010年10月6日 申请日期2010年5月26日 优先权日2010年5月26日
发明者廖立东, 张康宁, 杨婷, 洛勇, 邓艳 申请人:成都晟铭医药科技有限公司