专利名称：治疗心脑血管疾病的药物组合物及制备方法
技术领域：
本发明涉及一种治疗心脑血管疾病的药物组合物，特别是一种由天然药物的有效 成分组成的药物组合物，及其制备方法。
背景技术：
心脑血管疾病是一种常见和多发性病，尤以中老年人群的发病率高，严重危害中 老年人的身体健康和生活质量。传统的单味中药及其复方药物对心脑血管疾病有较好的 预防和治疗作用，如丹参具有祛瘀止痛，活血通经，清心除烦之功效，常被用于心脑血管疾 病的预防和治疗，其水溶性有效成分为包括丹酚酸A、丹酚酸B、丹酚酸C等多种丹参酚酸成 分(杜冠华等基础医学与临床，2000 ； (5) 10)，其中丹酚酸B含量最高(丹参中含量约为 4%)0丹参酚酸及其主要成分对心脑血管的保护作用主要表现为(1)对脑缺血再灌注引 起的脑损伤有保护作用，可以减少脑组织中MDA含量，对脑缺血再灌注引起的记忆功能障 碍有明显的改善作用。( 对心肌缺血再灌注引起的心肌细胞损伤和心律失常有显著的保 护作用，对实验性在体血栓形成有剂量依赖性抑制作用，对多种因素引起的血小板聚集均 有显著的抑制作用。丹参脂溶性有效成分为包括丹参酮I、丹参酮IIA、丹参酮IIB、隐丹参 酮等多种丹参酮成分，其中以丹参酮IIA含量最高。药理实验和临床观察的研究证明丹参 酮对心脑血管疾病有确切的疗效，主要作用有(1)抑制血管平滑肌细胞增殖，( 抑制血 管内膜增生，( 改善冠状动脉，(4)减轻心肌缺血再灌注损伤，( 防止心肌肥厚，(6)防 治心率失常，(7)减轻脑缺血缺氧损伤，(8)防治脑缺血再灌注损伤等(谭为华等贵阳中 医学院学报，2007 ;29 (3) 52-54) 川芎具有活血行气，祛风止痛之功效，主要有效成分为川芎挥发油、酚酸类等成 分。文献报道川芎挥发油具有改善微循环，增加脑血流量的作用，可使微血管解痉，增加毛 细血管开放数目，加快血流速度，使聚集的红细胞解聚等。川芎挥发油主要成分包括藁本 内酯、丁基苯酞、丁烯基苯酞等，其中藁本内酯含量最高，川芎药材和川芎油中藁本内酯的 含量分别约为1.5%、20-50%。酚酸类成分也是川芎中重要的活性成分，具有抗血栓、降血 脂，防治冠心病等药理活性，其中阿魏酸具有抗动脉粥样硬化，抗血小板聚集，抗氧化，抗菌 消炎等活性(张玲等现代中药研究与实践，2009，23 ) :41)，川芎酚酸主要代表性成分为 阿魏酸、阿魏酰奎尼酸、绿原酸、咖啡酸等。葛根具有解肌退热，生津，透疹，升阳止泻之功效，葛根有效成分包括葛根素、大豆 苷、大豆苷元、3’ -羟基葛根素、3’ -甲氧基葛根素等黄酮类成分，对高血钾和去甲肾上腺 素引起的血管痉挛有明显的松弛作用，能显著对抗反复性脑缺血脑组织含水量、Ca2+及丙二 醛的含量升高，抑制Ca2+-AIPase及超氧化物歧化酶活性的降低，显著延长小鼠断头后的呼 吸持续时间，对脑缺血有保护作用。葛根素具有降血脂、保护心肌、改善微循环、抗氧化等作 用。《中华人民共和国药典》2010年版一部收载的愈风宁心片，即为单味葛根原料经加工制 成的药品，具有解痉止痛，增强脑及冠脉血流量的作用；此外，葛根素注射液是治疗心脑血 管疾病的常用药物。《中华人民共和国药典》2010年版一部收载的葛根分为野葛和粉葛二种，其中野葛中葛根素(大于2. 4%)和总黄含量很高，粉葛中葛根素(大于0.3%)和总 黄含量较低，故一般提取葛根素和黄酮类成分首选野葛投料。以上述丹参、川芎、葛根为原料制备的“通脉制剂”(通脉冲剂和通脉口服液)，收 载于卫生部药品标准中药成方制剂第四册和第二十册，临床中已广泛使用，主要药效作用 有(1)抗血栓，(2)扩张冠状动脉、抗心肌缺血，(3)解痉、改善微循环，(4)抗脑缺血、缺氧 等。通脉制剂的处方为丹参500g、川芎500g、葛根500g，以上三味药材，加水煎煮二次，第 一次1. 5小时，第二次1小时，趁热滤过，合并滤液，按常规方法制成冲剂或口服液。公开号CN1839931A中国专利报道了一种治疗心脑血管疾病的药物组合物，由丹 参总酚酸、川芎挥发油和葛根总黄酮组成，其提取原料分别为丹参、川芎和葛根，其中，丹参 和葛根分别采用水提、大孔吸附树指法分离得到丹参酚酸提取物和葛根黄酮提取物，川芎 采用超临界二氧化碳萃取得到川芎挥发油提取物。试验显示，上述药物的组成仍分别存在一些不足之处，不仅影响了药物有益疗效 的充分发挥，也导致了药用原料的浪费。
发明内容
针对上述情况，本发明首先提供一种以上述组合方式为基础，能有利于药物疗效 充分发挥的治疗心脑血管疾病的药物组合物，并在此基础上进一步提供该药物组合物的制 备方法。本发明治疗心脑血管疾病的药物组合物，以丹酚酸B、丹参酮IIA、阿魏酸、藁本内 酯、葛根素为有效成分，与药物中可以接受的辅助添加成分共同组成。所说有效成分的重 量组成为丹酚酸B 2 10份，丹参酮IIA 0. 1 0.5份，阿魏酸0. 1 0.5份，藁本内酯 0.4 2份，葛根素2 10份。上述的药物组合物中，所说有效成分的优选重量组成是丹酚酸B 6份，丹参酮 IIA 0. 4份，阿魏酸0. 2份，藁本内酯1份，葛根素5份。在药物组合物的组成中，所说的有效成分丹酚酸B、丹参酮IIA、阿魏酸、藁本内 酯、葛根素，可以为购自于市售相应商品的单一纯品形式的成分，也可以按目前已有文献报 道的方法提取或制备得到。例如，目前对阿魏酸的全化学合成方式已有报道和/或使用；由 适当的天然药用原料提取丹酚酸B、丹参酮IIA、阿魏酸、藁本内酯、葛根素等成分的方法目 前也已有报道和/使用，且后者的提取方式通常可以更为简便和常用。例如，所说有效成分 丹酚酸B允许采用含有所说量的来自药用原料丹参的丹参酚酸提取物替换；有效成分丹参 酮IIA允许采用含有所说量的来自药用原料丹参的丹参酮提取物替换；有效成分阿魏酸允 许采用含有所说量的来自药用原料川芎的川芎酚酸提取物替换；有效成分藁本内酯允许采 用含有所说量的来自药用原料川芎的川芎挥发油提取物替换；有效成分葛根素允许采用含 有所说量的来自药用原料葛根的葛根黄酮提取物替换。这里所说的替换，在实际应用中，可 以根据实际情况，只针对其中的一种或几种有效成分的替换，也可以是针对全部有效成分 的替换。进一步，在采用由天然药用原料提取物进行替换时，对所用的提取物除可以采用 目前已知的相应方法进行纯化后得到的单一纯净形式的所说有效成分外，还允许采用在含 有所说有效成分的同时，还含有主要存在于其提取物中的同类成分和/或对本发明组合物药效作用无不利影响的其它成分或杂质。如，在丹参酚酸提取物中，除丹酚酸B外，还允许 含有如丹酚酸A、丹参酸C等其它成分；在丹参酮提取物中除丹参酮IIA外，还允许含有如 丹参酮I、丹参酮IIB、隐丹参酮等其它成分；在川芎酚酸提取物中，除阿魏酸外，还允许含 有如阿魏酰奎尼酸、咖啡酸、生物碱等其它成分；在川芎挥发油提取物中，除藁本内酯外，还 允许含有如川芎内酯、丁苯酞等苯酞类成分和脂肪油类成分等其它成分；葛根黄酮提取物 中除葛根素外，还允许含有如大豆甙、3'-羟基葛根素、3'-甲氧基葛根素等其它成分。试 验显示，在本发明的上述药物组合物中，采用以含有所说比例量的丹酚酸B、丹参酮IIA、阿 魏酸、藁本内酯、葛根素有效成分，或同时还存在有所说其它成分的相应丹参酚酸提取物、 丹参酮提取物、川芎酚酸提取物、川芎挥发油提取物、葛根黄酮提取物进行替换，一般不会 对所说药物有效成分的药效作用有明显的干扰或不利影响，可以具有同样的效果。本发明上述的药物组合物，优选的是以所说的有效成分，与口服药物中可以接受 的常规辅助添加成分制备而成的相应口服药物制剂。例如，与在口服制剂中可以被接受的 崩解剂、赋形剂、润滑剂、粘合剂、填充剂等常用的辅助添加成份混合后，按相应的常规工艺 方法处理，制成的片剂、丸剂、颗粒剂、胶囊剂或适当形式的缓释剂、控释剂等固体制剂形式 的口服药物；或是与常用的增溶剂、乳化剂、润湿剂、起泡或消泡剂等表面活性剂、稀释剂、 防腐剂、稳定剂、矫味剂、增稠剂等混合，按相应的常规工艺方法处理，制成为水剂、糖浆等 液体制剂形式的口服药物。其中，填充剂可以包括如常用的淀粉、糊精、糖粉、预胶化淀粉、乳糖、葡萄糖、微晶 纤维素、碳酸钙、硫酸钙、碳酸氢钙等；黏合剂可以包括如常用的羟丙甲纤维素、聚维酮、淀粉浆、糊精浆、糖浆、胶浆、海 藻酸钠、聚乙二醇、桃胶、阿拉伯胶等；崩解剂可以包括如常用的交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮、羧甲基淀粉钠、羟丙 基淀粉、低取代羟丙基纤维素柠檬酸、酒石酸、酸酐、碳酸氢钠、碳酸钠等；润滑值剂可以包括如常用的硬脂酸镁(钠)、滑石粉、微粉硅胶、液体石蜡、聚乙二
醇等；软胶囊剂中的基质可以包括如常用的植物油(如色拉油、蓖麻油、氢化大豆油 等)、聚乙二醇(如PEG 300、PEG 400、PEG 6000等)；以及常用的亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、 焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠、抗坏血酸、半胱氨酸、叔丁基对羟基茴香醚、二丁甲苯酚、维生素E 等抗氧化剂；口服缓控释制剂中的阻滞剂可包括如常用的蜂蜡、巴西棕榈蜡、氢化植物油、硬脂 醇、单硬脂酸甘油酯、醋酸纤维素酞酸酯、L-或S-丙烯酸树脂、羟丙甲纤维素酞酸酯、醋酸 羟丙甲纤维素琥珀酸酯、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、羟丙甲纤维素、聚维酮、卡波普、海 藻酸钠、脱乙酰壳聚糖、乙基纤维素、聚甲基丙烯酸酯、无毒聚氯乙烯、聚乙烯、乙烯-醋酸 乙烯共聚物、硅橡胶；以及如明胶、聚维酮、羧甲基纤维素钠、聚乙烯醇、右旋糖酐等常用的 增稠剂；以及必要时所用的环糊精包合物，表面活性剂等常用的稳定剂，和/或如柠檬酸、 富马酸、谷氨酸、L-天冬氨酸、乳酸、乳糖酸、半乳糖酸、葡萄糖醛酸、抗坏血酸、盐酸、醋酸等 常用的生理可用的PH值调节剂等。这些常规使用的辅助添加成分，可以根据不同制剂和/ 或需要选择使用。
如上述，在制备本发明所述的药物组合物时，所说的有效成分可以采用含有所说 比例量的丹酚酸B、丹参酮IIA、阿魏酸、藁本内酯、葛根素的相应提取物替换。所说的这些 提取物可以采用下述方式提取得到。例如所说有效成分中的丹参酮提取物采用下述方式之一制备得到方法1 以超临界二氧化碳循环逆流方式对粉碎后的丹参进行萃取后分离，得到 有效成分丹参酮提取物；方法2 用体积含量> 80%的乙醇溶液对粉碎后的丹参进行提取后，提取液除去 乙醇，沉淀，过滤，得到有效成分丹参酮提取物；方法3 用体积含量> 80%的乙醇溶液对粉碎后的丹参进行提取，提取液除去乙 醇，浓缩，干燥，得到有效成分丹参酮提取物。所说有效成分中的丹参酚酸提取物采用下述方式之一制备得到方法1 由药用原料丹参提取丹参酮提取物后，剩余物经水或体积含量< 80%的 乙醇-水混合溶剂提取，回收溶媒，浓缩，干燥，得到有效成分丹参酚酸提取物；方法2 由药用原料丹参提取丹参酮提取物后，剩余物经水或体积含量< 80%的 乙醇-水混合溶剂提取，水提液或除去乙醇后的提取液，经大孔树脂柱吸附和水洗涤除杂 后，用乙醇体积含量为40 80%的醇-水混合液洗脱，收集洗脱液并除去乙醇，浓缩，干燥， 得到有效成分丹参酚酸提取物。所说有效成分中的川芎挥发油提取物采用下述方式之一制备得到方法1 以超临界二氧化碳循环逆流方式对粉碎后的川芎进行萃取后，分离，得到 有效成分川芎挥发油提取物；方法2 取川芎，粉碎，用低沸点的有机溶剂提取，分离除去提取有机溶剂后，得到 有效成分川芎挥发油提取物，所说的提取溶剂为石油醚、汽油、6号溶剂油、正己烷和环己烷 中的至少一种；方法3:取川芎，用体积含量>80%的乙醇溶液进行提取，提取液除去乙醇，浓缩， 干燥，得到有效成分川芎挥发油提取物。所说有效成分中的川芎酚酸提取物采用下述方式之一制备得到方法1 由药用原料川芎提取川芎挥发油提取物后，剩余物以水或体积含量 < 80%的乙醇-水混合溶剂提取，回收溶媒，浓缩，干燥，得到有效成分川芎酚酸提取物；方法2 由药用原料川芎提取川芎挥发油提取物后，剩余物以水或体积含量 <80%的乙醇-水混合溶剂提取，水提液或除去乙醇后的提取液，经大孔树脂柱吸附和水 洗涤除杂后，用乙醇体积含量为30 70%的醇-水混合液洗脱，收集洗脱液并除去乙醇，浓 缩，干燥，得到有效成分)11芎酚酸提取物。所说有效成分中的葛根黄酮提取物采用下述方式之一制备得到方法1 葛根粉碎，水煎煮后过滤，滤液经大孔树脂柱吸附和水洗涤除杂后，用乙 醇体积含量为60 80%的醇-水混合液洗脱，收集洗脱液并除去乙醇，浓缩，干燥，得到有 效成分的葛根黄酮提取物；方法2 葛根粉碎，用水或体积含量< 80 %的乙醇-水混合溶剂提取，回收溶媒，浓 缩，干燥，得到有效成分的葛根黄酮提取物。上述提取制备过程中所说的上述所说的大孔树脂柱中所用的大孔树脂，一般可以选择目前使用最为广泛的HPD-100或DlOl型号的树脂。中药复方药物的独特疗效优势，体现在其复方中多成分、多靶点的协同整合作用。 本发明上述的药物组合物是用丹参、川芎、葛根各自的主要有效成分丹酚酸B、丹参酮IIA、 阿魏酸、藁本内酯、葛根素为有效成分，完全克服了目前虽采用同类或相似的药用原料、但 由于损失或完全丢失了其中的一种或几种有效成分的同类药物的缺陷，使药用原料中的各 种有效成分能充分发挥其各自及其协同的有益效果，显著提高了疗效，也大大提高了药用 原料的利用率，减少了药用原料的浪费。以下通过实施例的具体实施方式
再对本发明的上述内容作进一步的详细说明。但 不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。在不脱离本发明上述技术思想 情况下，根据本领域普通技术知识和惯用手段做出的各种替换或变更，均应包括在本发明 的范围内。
具体实施例方式实施例1分别称取市购单一纯品成分形式的商品丹酚酸B 60g、阿魏酸2g、葛根素50g，丹 参酮IIA 4g、藁本内酯IOg和药用辅料适量作为原料。丹酚酸B、阿魏酸和葛根素加入药用 PEG400溶解后，再加入丹参酮IIA、藁本内酯和药用辅料，混勻，备用。按体积比3 1. 2 3 取药用明胶、甘油和水，制成囊材后，将上述备用药液和囊材在软胶囊压制机上压制成软胶 囊，每粒重0. 5g，即为本发明的胶囊剂药物。实施例2分别将同样的丹酚酸B 20g、丹参酮II A lg、阿魏酸5g、葛根素20g，微粉化，加入 到PEG-6000熔融液中，再加入藁本内酯20g，搅拌混勻，在滴丸机中制成1000粒滴丸，即为 本发明的滴丸剂药物。实施例3分别称取同样的丹酚酸B 100g、阿魏酸lg、葛根素100g、丹参酮IIA 5g和藁本内 酯4g，加药用辅料适量，按常规方法压片，制成1000片，包薄膜衣，即为本发明的片剂药物。实施例4取药用原料丹参的粗粉100kg，采用超临界流体CO2循环逆流萃取、分离，萃取压力 35MPa，萃取温度50°C，夹带剂为95%乙醇，萃取时间4小时，分离器解析压力lOMpa，解析 温度30°C，得到含有效成分的丹参酮提取物。提取后的丹参药渣再分别加水8倍、6倍和6 倍，于70°C动态搅拌温浸提取3次，过滤，滤液通过装有150立升HPD-100大孔树脂(河北 沧州宝恩化工有限公司生产)吸附柱，用300立升水洗涤除杂，再用450立升50% ν/ν乙 醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压回收乙醇，浓缩至稠膏，于65°C减压干燥，得到丹参酚酸提取 物。取药用原料川芎的粗粉100kg，超临界流体CO2循环逆流萃取和分离，萃取压力 40MPa，萃取温度60°C，萃取剂(X)2用量1000公斤/时，萃取时间5小时，分离器解析压力 lOMpa，解析温度50°C，得到川芎挥发油提取物。其川芎药渣再分别加水12、10倍，回流提取 2次，过滤，滤液通过装有120立升HPD-100大孔树脂吸附柱，用200立升水洗涤除杂，再用 350立升50% ν/ν乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压回收乙醇，浓缩，减压干燥，得到川芎酚酸提取物。取药用原料葛根(野葛)的粗粉100kg，分别加水10、8、6倍，煎煮3次，过滤，滤液 调节PH值至4 5，通过装有200立升D141大孔树脂(中蓝晨光化工研究院生产)吸附 柱，用300立升水洗涤除杂，再用500立升70% ν/ν乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压回收乙 醇，浓缩至稠膏，干燥，得到葛根黄酮提取物。分别称取含丹酚酸B 50g的上述丹参酚酸提取物、含阿魏酸3g的川芎酚酸提取 物、含葛根素60g的葛根黄酮提取物、含丹参酮II A 3g的丹参酮提取物，和含藁本内酯4g 的川芎挥发油提取物，加药用辅料适量，按常规方法压片，制成3000片，包薄膜衣，即为本 发明的片剂药物。实施例5取药用原料丹参的粗粉100kg，用体积含量95%的乙醇回流提取2次，提取液回收 乙醇，浓缩，干燥，得到含有效成分丹参酮的提取物。经上述乙醇提取后的丹参药渣再用体 积含量60%的乙醇回流提取，减压回收溶媒，浓缩，干燥，得到含有效成分丹参酚酸的提取 物。取药用原料川芎的粗粉100kg，用体积含量95%的乙醇回流提取3次，提取液回收 乙醇，浓缩，干燥，得到含有效成分川芎挥发油的提取物。经该乙醇提取后的川芎药渣再用 体积含量70%的乙醇回流提取，减压回收溶媒，浓缩，干燥，得到含有效成分川芎酚酸的提 取物。取药用原料葛根的粗粉100kg，用体积含量70%的乙醇回流提取3次，回收溶媒， 浓缩，干燥，得到含有效成分葛根黄酮的提取物。分别称取上述丹参酚酸提取物100g(以丹酚酸B计)、川芎酚酸提取物5g(以阿魏 酸计)、葛根黄酮提取物20g(以葛根素计)、丹参酮提取物5g(以丹参酮IIA计)和川芎挥 发油提取物10g(以藁本内酯计)，加药用辅料适量，按常规方法制成胶囊5000粒，即为本发 明的胶囊剂药物。实施例6将药用原料丹参粗粉100kg，用体积含量90%的乙醇回流提取3次，提取液除去乙 醇，静置沉淀、过滤，得到含有效成分丹参酮的提取物，过滤母液备用。上述经乙醇提取后的 丹参药渣再用体积含量50%的乙醇回流提取2次，提取液除去乙醇，与备用的丹参酮过滤 母液合并，经DlOl大孔树脂柱吸附和水洗涤除杂后，用体积含量为70%的乙醇洗脱，收集 洗脱液并除去乙醇，浓缩，干燥，得到含有效成分丹参酚酸的提取物。将药用原料川芎粗粉100kg，用石油醚或6号溶剂油回流提取3次，分离除去溶媒 得到含有效成分川芎挥发油的提取物；上述经石油醚或6号溶剂油提取后的川芎药渣再以 水回流提取3次，水提液经DlOl大孔树脂柱吸附和水洗涤除杂后，用体积含量为60%的乙 醇洗脱，收集洗脱液并除去乙醇，浓缩，干燥，得到含有效成分川芎酚酸的提取物。 将药用原料葛根粗粉IOOkg用水煎煮提取2次，过滤，水提液经HPD-100大孔树脂 柱吸附和水洗涤除杂后，用体积含量为70%的乙醇洗脱，收集洗脱液并除去乙醇，浓缩，干 燥，得到含有效成分葛根黄酮的提取物。 分别称取上述丹参酚酸提取物20g(以丹酚酸B计)、川芎酚酸提取物lg(以阿魏 酸计)、葛根黄酮提取物IOOg (以葛根素计)、丹参酮提取物Ig (以丹参酮IIA计)，微粉化，加入到PEG-6000熔融液中，再加入川芎挥发油提取物20g (以藁本内酯计)，搅拌混勻，在滴 丸机中制成5000粒滴丸，即为本发明的滴丸剂型药物。以丹酚酸B、丹参酮IIA、阿魏酸、藁本内酯、葛根素为主要有效药用成分制成的本 发明药物组合物作为试验药物进行的下述实验，可以表明本发明药物组合物所具有的有益 效果。实验1对内皮细胞和神经元缺氧再给氧的保护作用1、实验方法参见鄂征主编的《组织培养和分子生物细胞学技术》，北京北京出 版社，1994年12月，438页。(I)MTT法测定内皮细胞存活率致密单层细胞经药物作用后，用冰冷的PBS溶液洗涤2次，加入0. 5mg/ml MTT溶 液100 μ 1，37°C掺入4小时，吸去残留液体，加入酸化异丙醇显色溶液100 μ 1，30分钟内在 波长595nm处用酶标仪测吸光度A值。观察试验药物对培养细胞生存的影响。(2) MTT法测定神经元存活率细胞培养10天后，向每孔加入0. 5%的MTT 10 μ 1继续培养4小时，吸弃培养液， 加入二甲亚砜(DMSO) 200 μ 1/孔，待颗粒溶解后置于酶标仪上，在波长570nm处检测各孔的 吸光度A值。观察试验药物对培养神经元生存的影响。(3)培养细胞缺氧/再给细氧模型正常培养基用95%队和5% CO2混合气体平衡30分钟后，获得缺氧培养基。细胞 用缺氧培养基悬浮后置培养板，放入缺氧仓内(持续通入95% N2和5% CO2混合气体为此 缺氧环境)，37°C孵育2小时(缺氧时间)后，立即更换正常的培养基，再孵育4小时(再给 氧)。以未经处理细胞作为对照。(4)药物给予方法试验药物用培养基配制成lOug/ml的浓度，缺氧期间药物用缺氧培养基配制，再 给氧期间药物用普通培养基配制。2、实验结果(1)对内皮细胞缺氧2小时再给氧4小时损伤的保护作用新生牛脑微血管内皮细胞经缺氧2小时再给氧4小时后，产生明显的死亡现象， MTT检测表明，缺氧再给氧(H/R)组细胞吸光度明显减小，经试验药物保护的细胞均呈现出 非常明显的保护作用，与对照组比较P < 0. 01，如表1所示。此外，由表1还可以清楚地看 出本发明药物组合物以重量配比6 0.4 0.2 1 5比例配伍对内皮细胞缺氧再给 氧(H/R)的保护作用最佳。(2)对培养神经元缺氧2小时再给氧4小时损伤的保护作用新生大鼠脑神经元经缺氧2小时再给氧4小时后，产生明显的死亡现象，MTT检测 表明，缺氧再给氧(H/R)组细胞吸光度明显减小，经试验药物保护的细胞均呈现出非常明 显的保护作用，与对照组比较P < 0. 01，如表2所示。此外，由表2还可以清楚地看出本 发明药物组合物以6 0.4 0.2 1 5比例配伍对神经元缺氧再给氧(H/R)的保护作 用最佳。表1本发明药物组合物对内皮细胞缺氧再给氧(H/R)的保护作用
权利要求
1.治疗心脑血管疾病的药物组合物，其特征是以丹酚酸B、丹参酮IIA、阿魏酸、藁本 内酯、葛根素为有效成分，与药物中可以接受的辅助添加成分共同组成，所说有效成分的重 量组成为丹酚酸B 2 10份，丹参酮IIA 0. 1 0.5份，阿魏酸0. 1 0.5份，藁本内酯 0.4 2份，葛根素2 10份。
2.如权利要求1所述的药物组合物，其特征是所说的有效成分的重量组成为丹酚酸B 6份，丹参酮IIA 0. 4份，阿魏酸0. 2份，藁本内酯1份，葛根素5份。
3.如权利要求1或2所述的药物组合物，其特征是所说有效成分丹酚酸B允许采用含 有所说量的来自药用原料丹参的丹参酚酸提取物；和/或，有效成分丹参酮IIA允许采用含有所说量的来自药用原料丹参的丹参酮提取物；和/或，有效成分阿魏酸允许采用含有所说量的来自药用原料川芎的川芎酚酸提取物；和/或，有效成分藁本内酯允许采用含有所说量的来自药用原料川芎的川芎挥发油提取物；和/或，有效成分葛根素允许采用含有所说量的来自药用原料葛根的葛根黄酮提取物。
4.如权利要求1或2所述的药物组合物，其特征是为口服制剂。
5.制备权利要求1至4之一所述治疗心脑血管疾病的药物组合物的方法，其特征是分 别由药用原料丹参、川芎和葛根得到所说的有效成分后，按所说比例与药物中可以接受的 辅助添加成分制备而成。
6.如权利要求5所述的制备方法，其特征是所说有效成分中的丹参酮提取物采用下述 方式之一制备得到方法1 以超临界二氧化碳循环逆流方式对粉碎后的丹参进行萃取后分离，得到有效 成分丹参酮提取物；方法2 用体积含量> 80%的乙醇溶液对粉碎后的丹参进行提取后，提取液除去乙醇， 沉淀，过滤，得到有效成分丹参酮提取物；方法3 用体积含量> 80%的乙醇溶液对粉碎后的丹参进行提取，提取液除去乙醇，浓 缩，干燥，得到有效成分丹参酮提取物。
7.如权利要求5或6所述的制备方法，其特征是所说有效成分中的丹参酚酸提取物采 用下述方式之一制备得到方法1 由药用原料丹参提取丹参酮提取物后，剩余物经水或体积含量< 80%的乙 醇-水混合溶剂提取，回收溶媒，浓缩，干燥，得到有效成分丹参酚酸提取物；方法2:由药用原料丹参提取丹参酮提取物后，剩余物经水或体积含量< 80%的乙 醇-水混合溶剂提取，水提液或除去乙醇后的提取液，经大孔树脂柱吸附和水洗涤除杂后， 用乙醇体积含量为40 80%的醇-水混合液洗脱，收集洗脱液并除去乙醇，浓缩，干燥，得 到有效成分丹参酚酸提取物。
8.如权利要求5所述的制备方法，其特征是所说有效成分中的川芎挥发油提取物采用 下述方式之一制备得到方法1 以超临界二氧化碳循环逆流方式对粉碎后的川芎进行萃取后，分离，得到有效 成分川芎挥发油提取物；方法2 取川芎，粉碎，用低沸点的有机溶剂提取，分离除去提取有机溶剂后，得到有效 成分川芎挥发油提取物，所说的提取溶剂为石油醚、汽油、6号溶剂油、正己烷和环己烷中的 至少一种；方法3 取川芎，用体积含量> 80%的乙醇溶液进行提取，提取液除去乙醇，浓缩，干 燥，得到有效成分川芎挥发油提取物。
9.如权利要求5或8所述的制备方法，其特征是所说有效成分中的川芎酚酸提取物采 用下述方式之一制备得到方法1 由药用原料川芎提取川芎挥发油提取物后，剩余物以水或体积含量< 80%的 乙醇-水混合溶剂提取，回收溶媒，浓缩，干燥，得到有效成分川芎酚酸提取物；方法2 由药用原料川芎提取川芎挥发油提取物后，剩余物以水或体积含量< 80%的 乙醇-水混合溶剂提取，水提液或除去乙醇后的提取液，经大孔树脂柱吸附和水洗涤除杂 后，用乙醇体积含量为30 70%的醇-水混合液洗脱，收集洗脱液并除去乙醇，浓缩，干燥， 得到有效成分)11芎酚酸提取物。
10.如权利要求5所述的制备方法，其特征是所说有效成分中的葛根黄酮提取物采用 下述方式之一制备得到方法1 葛根粉碎，水煎煮后过滤，滤液经大孔树脂柱吸附和水洗涤除杂后，用乙醇体 积含量为60 80%的醇-水混合液洗脱，收集洗脱液并除去乙醇，浓缩，干燥，得到有效成 分的葛根黄酮提取物；方法2 葛根粉碎，用水或体积含量< 80%的乙醇-水混合溶剂提取，回收溶媒，浓缩， 干燥，得到有效成分的葛根黄酮提取物。
全文摘要
治疗心脑血管疾病的药物组合物及制备方法。该药物组合物以丹酚酸B、丹参酮IIA、阿魏酸、藁本内酯、葛根素为有效成分，与药物中可以接受的辅助添加成分共同组成，有效成分的重量组成为丹酚酸B 2～10份，丹参酮IIA 0.1～0.5份，阿魏酸0.1～0.5份，藁本内酯0.4～2份，葛根素2～10份。试验显示，该药物组合物可明显缩小脑缺血再灌注损伤引起的脑组织出血坏死灶、减轻神经细胞和神经纤维的损伤。
文档编号A61P9/00GK102068440SQ20111000903
公开日2011年5月25日 申请日期2011年1月17日 优先权日2011年1月17日
发明者刘云华, 刘倩伶, 刘玉红, 易进海, 陈燕, 黄志芳 申请人:四川省中医药科学院