专利名称：阿奇霉素脂质体组合药物及其制备的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种大工业化生产阿奇霉素脂质体组合药物制备方法，其特征是，以分子分散法，以统一的配方、工艺、设备，既可大工业化生产阿奇霉素脂质体组合药物注射剂，又可大工业化生产阿奇霉素脂质体组合药物口服制剂。
背景技术：
我国制药技术，原料药制备技术和国际先进水平差距仅5年以内，有的已达到或超过国际先进水平，制剂技术要落后国际先进水平10-20年。现大量的是生产二代普通制剂，而三代缓释、控释剂，尤其是四代脂质体等靶向制剂目前仅处于实验室研究阶段。原因有1、现有生产、科研制备脂质体组合药物技术注射剂与口服制剂配方、工艺、设备不符合大工业化生产要求；2、现有技术制备脂质体组合药物的方法有高压勻质法、超声波法、有机溶剂干燥法、喷雾干燥法、流化床包衣法、单相溶液冷冻干燥法。高压勻质法及超声波法粒径可控，但是高能破碎，对原料药有破坏；后四种方法对粒径不可控，且粒径分布不集中，有机溶剂残留，有泄漏、沉淀、凝聚、磷脂腐败等质量问题；3、现有脂质体制备方法使脂质体组合药物载体的包封率不能达100%，各批次波动、变化大；泄漏率大，失去脂质体组合药物意义；4、生产过程折腾多，耗能费时，设备投资大，处方、工艺不稳靠、不成熟，导致制剂质量不可控、不稳定、重现性差；5、灭菌、除热原方法不当，全程无菌、无热原操作难以保障，对脂质体组合药物缺乏高度无菌观念，致使脂质体组合药物在细菌侵蚀下腐败，包封率递降，泄漏率递增，有效期极短，几乎失去药用价值；6、注射剂不溶解性粒子数及粒径超标；7、原料药、磷脂及辅料、溶剂选材大多没有国家药品质量标准，有专利也批不了新药证书及生产批文，注册难度很大，时间很长；8、脱离中国实情，从开发到得到脂质体新药生产批文，花费近10年时间，耗资 2000万元以上，再好的药品发明专利，绝大多企业不敢投资开发。可见，在国家进行医疗改革及国家基本药物制度时期，从已经进入国家基本药物二代制剂中选销量大产品提升到第四代的脂质体制剂，进行制剂技术创新，消除其副作用及不良反应，这样药品销量大，投资回收时间短。达到安全、有效、优质、经济这一基本原则。
发明内容
本发明目的是克服上述现有技术的缺陷。本发明的主题是用分子分散法，以统一配方、工艺、设备既可大工业化生产脂质体组合药物注射剂，又可大工业化生产脂质体组合药物口服制剂。本发明是通过以下技术方案实现的本发明工业化生产脂质体组合药物的规范的各组份原料摩尔数比如下1、原料药0.03-0.102、磷脂原料0.45-1.203、抗氧剂0.01-0.074、磷脂膜分子态稀释剂0.90-1.505、脂质体载药体分散剂及赋形剂0. 90-3. 006、表面活性剂0. 01-0. 077、乙醇彡85%浓度(体积比，乙醇水彡85%，干燥时挥发至尽)适量8、注射用磷酸盐缓冲液0. 01-0. 03M浓度pH值5. 0-8. 0(干燥时挥发至尽)适量9、注射用水(干燥时挥发至尽)注射用磷酸盐三分之二体积所述原料药为脂溶性强或水溶性强特性，配方剂量是现有二代对应口服或注射剂制剂最小规格制剂量的三分之一到五分之一。优选阿奇霉素，或是罗沙替丁乙酸酯，所述磷脂原料的平均分子量都定义以800D计算，磷脂原料是氢化大豆卵磷脂与蛋黄卵磷脂摩尔数比2. 5 1组合物。所述磷脂的抗氧剂是还原型谷胱甘肽与维生素C摩尔数比1 1组合物。所述磷脂膜分子态稀释剂，又是抗氧剂，又是络合剂，是二巯丙醇。所述脂质体载药体分散剂，又为赋型剂，为木糖醇与谷氨酸钠摩尔数比5 1组合物与谷氨酸钠摩尔数比51组合物。 所述表面活性剂是去氢胆酸钠。脂质体组合药物的各组份原料都应有国家标准，并且都是药用注射剂级的国家标准。既符合国家GMP规范，又符合国家《药品注册管理办法》的规定，以利产业化开发。本发明还提供所述组质体组合药物的规范制备方法1、在溶解罐中，将木糖醇与谷氨酸钠摩尔数比5 1组合物配料量在注射用磷酸盐缓冲液中溶解成木糖醇与谷氨酸钠摩尔数比5 1组合物的15%的重量百分比溶液，将此溶液在121°C蒸汽灭菌20分钟，当溶液温度为20-25°C时，用截留分子量1000D的超滤膜的超滤柱超滤，除溶液中的热原及热原分子片段，取超滤得到的溶液；再在室温下，将溶液用5% -8%的分析纯氢氧化钠溶液调pH值8. 5，将溶液经0. 05 μ m以下孔径的膜滤过，除去不溶性粒子、高价金属离子、金属离子的沉淀物。将超滤得到的溶液按体积等分为A、B、C 三份溶液，再将A、B、C溶液分别用8%的分析纯的盐酸溶液调pH值为5. 0-8. 0。若是水溶性强的原料药用适量注射用水溶解完全，用截留分子量1000D的膜超滤，除热原，所得超滤溶液合并到B溶液中搅拌均勻，再经0. 05 μ m孔径以下膜滤过，除去原料药溶液中菌、不溶性粒子。原料药液要求检验热原及不溶性粒子合格才能允许加入B溶液中。若是脂溶性的原料药溶解则按下面第3步处理。2、将A溶液在制备药用注射剂级的喷雾干燥机中，按喷雾干燥常法工艺操作A溶液由设备顶部的喷雾喷咀中与洁净度100级压缩空气(由压缩机来，室温)混合喷出，与设备底部进入的温度150°c -190°c 100级洁净空气(由引风机引来，高温)气液逆流混合，喷雾干燥成120-150目左右多孔粒子干粉。干燥完毕，干燥物料存放在此设备底部存料室备用。3、分别加入脂溶性的原料药、磷脂、磷脂分散剂到乙醇中搅拌溶解完全，制成比重在1. 0至1. 2的溶液，经过截留分子量1000D的膜超滤，再经0. 05 μ m以下孔径膜滤过，除去热原凝聚粒子、细菌、不溶性粒子。若是水溶性原料药，则在第1步制备步骤中溶解。4、将第2步制备的A溶液的组合物干燥颗粒，放到沸腾包衣机中，按沸腾包衣及沸腾干燥常法工艺操作先将第3步制备的磷脂乙醇溶液等体积分三份；在设备底部由引风机引入的空气改为引入经常法处理的无水、无菌、无油、无0. 01 μ m以上粒径的粒子的室温高纯氮气流(用处理空气方法净化纯氮气，经冷冻干燥器冷凝气流中水和油，经除水除油过滤器过滤除水除油，经除尘过滤器过滤除尘，经除菌过滤器过滤除菌净化)，在加热器中加热到40°C -65°C温度，由引风机引入到沸腾包衣机中，高纯氮气流的负压控制使物料沸腾高度为400mm-500mm高为佳；对第2步制得的木糖醇与谷氨酸钠摩尔数比5 1组合物干燥物粒子进行沸腾流化状态下包衣先将第一份的(三分之一体积的)磷脂乙醇溶液，由泵输送到设备中部的包衣喷咀中与经压缩的洁净级别为100级纯氮气混合，呈喷雾状喷到机中沸腾高度为400mm-450mm物料(木糖醇与谷氨酸钠摩尔数比5 1组合物)流的最密集处，在沸腾物料粒子表面包衣，沸腾下的物料同时高度均勻地混和及分散，并极快地使溶剂挥发，形成多孔固体包衣薄层，第一个三分之一磷脂的乙醇溶液料液包衣完成，沸腾干燥 15分钟，再将第一步制备的B溶液也等分三份，将第一份B溶液的体积的三分之一溶液在无水、无菌、无油、无0. OOlym以上粒径的粒子的100级纯氮气流中，按上述操作包衣，包衣后，沸腾干燥20分钟，这样进行了第一次包衣-干燥操作。重复上述包衣-干燥操作，分别进行第二、第三次两种溶液的第二份、第三份的三分之一体积的溶液按上述操作进行磷脂液与B溶液的交替包衣-干燥操作；最外层包衣层是木糖醇与谷氨酸钠摩尔数比5 1组合物微孔干燥物层，或是溶于水的原料药、木糖醇与谷氨酸钠摩尔数比5 1组合物的组合物的微孔干燥物层；第三次包衣后，得到的包衣干燥物料中残留水份< 1.0%，残留的二巯丙醇<0.2%。注意，若是水溶性的原料药，则是原料药及木糖醇与谷氨酸钠摩尔数比5 1 组合物在B溶液中对A溶液的干燥颗粒三次包衣，其乙醇溶液中不含原料药。5、在配料罐中加入与第1步用的注射用磷酸盐溶液三分之二体积等同的注射用水，在罐内充氮气与罐外压持平，100转/分钟搅拌速度下，加热至60士5°C ；调搅拌转速为 500-700转/分钟，在罐内充氮气下，在30分钟至60分钟内把第4步制得的包衣干燥物加入到配料罐中溶解分散完全；加完包衣干燥物后，在罐内充氮气环境下，保持温度60士5°C， 并在100转/分钟搅拌下保持60-120分钟；再在100转/分钟搅拌下，把罐内药液冷却到 30-400C ；再在100转/分钟搅拌下，分别加入抗氧剂还原型谷胱甘肽与维生素C摩尔数比 1 1组合物及去氢胆酸钠各三分之二配方量溶解完全，并调整药液PH值5. 0-8.0。6、在保药液持温度在30士5°C范围内，在0. 1_0. 2Mpa氮气压下，用0. IOym膜滤过第5步制得的药液，取滤过的药液，得到粒径小于IOOnm的脂质体药液。按药剂学允许该药品的剂量分装脂质体药液到西林瓶中，并半加塞，在冷冻干燥机组的冷冻干燥箱中常法冷冻干燥。至药品固体残留水分为小于2%，二巯丙醇残留量为小于0.2%。真空压塞，轧盖， 检验合格后进库。制成脂质体组合药物的纳米粒径的冻干针剂。此冻干针剂或按常法配成无菌喷雾剂。7、在100级无菌级别下，将第6步滤过的滤膜上截留的大于IOOnm的脂质体药物颗粒洗到另一配料罐中，洗法是把滤膜上颗粒洗到三分之一体积C溶液中，测定药液中总磷脂原料的含量，并用三分之二的C溶液调整药液体积，达到控制药液中总磷脂含量在 40-80mg/ml ；充高纯氮气下，100转/分钟搅拌速度，30-60分钟内加热到50士5°C，保持这温度范围搅拌60-120分钟；再保持充高纯氮气下，100转/分钟转速，分别加入抗氧剂还原型谷胱甘肽与维生素C摩尔数比11组合物及去氢胆酸钠各三分之一配方量溶解完全； 在0. 1-0. 2Mpa氮气压下，用0. 22 μ m膜滤过药液除菌，把药液分装到316L不锈钢托盘中， 放到另一台冻干机组冷冻干燥箱中，常法冷冻干燥，至药物固体中水分含量小于2%，二巯丙醇残留量为小于0. 2%。得到脂质体组合药物固体，把脂质体组合药物固体在100级无菌级别下，粉碎至80-100目，按药剂学允许的剂量，常法制成制质体组合药物的无菌肠溶口服制剂，或无菌拴剂。8、所有生产环境、清洗、灭菌、设备、操作、原料、辅料、注射用水、容器具、工衣、人员都应严格按照国家GMP规范中注射剂无菌及热原标准要求执行，口服制剂也得按注射剂无菌及热原要求执行。本发明的脂质体组合药物，无菌冻干针剂在使用时，当西林瓶内用输液水化溶解时，磷脂分散剂把脂质体载药体迅速分散，并在木糖醇与谷氨酸钠摩尔数比5 1组合物液表面张力及表面活性剂作用下，形成粒径50nm-100nm范围单室纳米粒径的脂质体载药粒子均勻分散体系；口服制剂在肠内形成100-150nm粒径脂质体载药粒子，包封率都在 100%。脂质体载药体分散在输液中6小时内泄漏率5%以下，不沉淀、不凝聚、不分层，分散均勻。本发明的药物口服后在胃肠道液中分散组成单室及多室混合脂质体组合药物，提高药物的治疗指数。本发明的优势有1、以统一的配方、工艺、设备既可大工业化生产脂质体组合药物注射剂，又可大工业化生产脂质体组合药物口服制剂。2、用二代制剂的设备创新及二代制剂工艺的创新组合制备四代靶向制剂，使神秘的脂质体组合药物从实验室实施工业化稳定生产。开拓了脂质体组合药物的规范配方、规范制备方法，而且是注射剂、口服制剂、其它给药途径制剂有统一的核心配方及制备方法， 节省厂房、设备、人力、时间、能源，也可实现三废零排放。3、本发明重在理念创新带来创新技术突破以安全、有效、优质、经济这一基本原则，对发明药品从选料开始、到制备过程、到使用最终脂质体组合药物分散到输液中全程对药品的无菌、热原、粒径、粒径分布、包封率、泄漏率、腐败率、沉降速率、凝聚率、有效期等等都是高要求地、完善地符合这一基本原则，使本发明药品产业化开发上市风险小。4、本发明中的药品核心技术有磷脂原料摩尔数投入量突破现有技术用量，是现有技术用量的5倍，是原料药的10倍，并且原料药是选脂溶性或水溶性强于分散剂木糖醇与谷氨酸钠摩尔数比5 1组合物的药物，磷脂对药物的包封率大大地大于对木糖醇与谷氨酸钠摩尔数比5 1组合物的包封率，包封率达100% ；同时磷脂原料用量大，存在大量空白脂质体，在体内空白脂质体被巨噬细胞吞噬，使载药脂质体少被吞噬，疗效更高；表面活性剂溶于脂质体磷脂膜层中，对脂质体双分子层起“封堵”，加固作用，这因为脂质体表面活性剂是钠盐，当溶解生理盐水及葡萄糖等PH值小于6输液中，部分其钠盐变成不溶于水的酸分子，而进入磷脂双分子层中，代替胆固醇也起“封堵”、加固脂质体粒子作用，使泄漏率非常小，表面活性剂还有抗脂质体在输液中的沉淀、凝聚作用，还有加强脂质体分散成均勻的脂质体输液作用；由于加入磷脂膜分散剂二巯丙醇，在包衣干燥时，使磷脂膜呈分子态的微孔固态分子分散代替高压撞击破碎、超声波破碎磷脂膜粒子，比高压撞击破碎的磷脂原料粒子小千万倍，在水化时快速、高效、整齐地形成单室脂质体，粒径在IOOnm以下；在包衣时木糖醇与谷氨酸钠摩尔数比5 1组合物取代挥发的二巯丙醇位置，组成磷脂与木糖醇与谷氨酸钠摩尔数比5 1组合物分子态微孔固体分散体系，使木糖醇与谷氨酸钠摩尔数比5 1组合物成为脂质体的分散剂；本研究发现，木糖醇与谷氨酸钠摩尔数比5 1组合物也和甘露醇样具有保护脂质体载药体在冷冻干燥时不被小冰渣破坏的保护作用，但甘露醇缺陷是在静脉滴注时对血管有刺激作用；二巯丙醇在包衣时抗氧化作用，保护还原型谷胱甘肽与维生素C摩尔数比1 1组合物、磷脂、原料药不被氧化，使还原型谷胱甘肽与维生素C摩尔数比1 1组合物在体内起抗氧化及抗过氧化组用，并保护肝脏不受药物损害；磷脂材料本研究发现，氢化大豆卵磷脂与蛋黄卵磷脂摩尔数比2. 5 1组合物这两种磷脂组合物制成的脂质体稳定、泄漏率低，这两种磷脂对人体无抗原及对肝脏无损害；本发明的脂质体冻干针剂是制成了脂质体均勻分散体系再冷冻干燥，在重新水化时，保持脂质体物理及化学性质不变。5、本发明药物在输液中的粒径、粒径分布不变，包封率100%、泄漏率< 5%、腐败率为0%、沉降率为0%、凝聚率为0%。消除了脂质体组合药物需冰箱储运，含量及包封率递降，泄漏率递升，有效期短的四大世界性难题。令人满意地成为优良的可实用的四代制剂。6、本发明制备的脂质体组合药物，磷脂膜中磷脂是以分子状态成固态溶液分散于磷脂膜吸释剂及表面活性剂中，且比超声波法、高压均勻质破碎磷脂粒子要小千万倍，保证脂质体粒径在200nm以下；在包衣-干燥时溶剂及二巯丙醇的挥发使磷脂膜层形成无数微小孔层；又由于磷脂膜层和木糖醇与谷氨酸钠摩尔数比5 1组合物层是磷脂膜分散剂层， 在水化时迅速、高度分散磷脂。这三种优势，比现有技术形成脂质体粒子粒径更稳定、更重现性好地形成纳米粒径范围，且粒径呈正态分布。7、本发明组合药物由于选的磷脂是天然磷脂，是人体及微生物细胞膜组成物质， 对病菌、病毒细胞、肿瘤细胞及血管壁破坏处有更好靶向释药功能，治疗指数高，所以原料药用量仅是二代药物的三分之一至五分之一，加上磷脂的包封，原料药的不良反应几乎没有了。原料药的用量减少，加大磷脂用量，确保包封率达100%，并有“封堵”加固脂质体作用的表面活性剂，所以泄漏率为零。8、本发明组合药物的脂质体分散剂又是磷脂膜包衣的支撑剂。又与表面活性剂共同控制前脂质体水化时脂质体粒子大小的物质，它们是由在水溶液中形成一定范围的表面张力作用所致。木糖醇与谷氨酸钠摩尔数比5 1组合物可对糖尿病、肝病患者供给能量， 又可治药物对肝的损害，是理想的磷脂膜分散剂及赋型剂。
9、本发明的组合药物的磷脂膜稀释剂，由既溶于乙醇又溶于水，在喷雾干燥时挥发，形成磷脂膜成分子态固体分散体系的微孔磷脂膜层，在水化时磷脂膜中磷脂是以分子态破碎程度并和表面分散剂把磷脂分散到水中，形成均勻的纳米粒脂质体载药体，二巯丙醇又是优良的脂质体的抗氧剂，在包衣时保护磷脂及药物，在脂质体水化后，又是络合剂， 把输液中高价铁离子络合，保护药物及磷脂不被氧化。10、本发明的组合药物的表面活性剂作用第一是在磷脂水化时把磷脂分散到水中，第二在进入PH值3. 0-6. 0的输液中，它又由钠盐酸化为分子结构有机酸，又进入脂质体双分脂层中，起到脂质体“封堵”加固作用，第三在脂质体表面起表面活性剂作用。11、本发明能使脂质体组合药物有效期一年，采用四个有效措施一是加了抗氧剂，保护磷脂膜及原料药不氧化；二是在磷脂分散剂包衣层在磷脂膜包衣层外面，包护磷脂膜层；三是口服制剂也是按注射剂选材、灭菌及无菌操作，消除细菌对磷脂的腐败分解，这是所有现有脂质体口服制剂乃至注射剂技术重大失误的地方；四是在脂质体分散于输液中，有0. 2%二巯丙醇络合输液中金属离子，使输液中带来的金属离子不会破坏磷脂及脂质体载药体，在维生素C-还原型谷胱甘肽与维生素C摩尔数比1 1组合物-二巯丙醇组合抗氧剂、在脂质体表面活性剂、分散剂共同作用下不泄漏、不沉淀、不分层、不凝聚、不氧化、 不腐败，从而使脂质体载药体真正过了有实际使用价值难关。避免了脂质体载药体分散在输液中，由于脂质体本身缺陷及输液作用下，使脂质体组合药物产生质变，这也是本发明弥补现有技术重大失误之处。12、本发明的脂质体组合药物在制备过程中，磷脂液及磷脂分散剂液都经过 0. 05 μ m孔径以下的膜滤过(通常注射剂制备都是经0. 22 μ m膜滤过)，使不溶解性粒子粒径降至允许值的四分之一，使脂质体水化后粒径50nm至IOOnm粒子全为脂质体粒子。可精确测定脂质体载药体的粒径及粒径分布。这也是本发明弥补现有技术重大失误的地方。
具体实施例方式实施例1原料药是脂溶性强的脂质体组合药物规范的各原料组份摩尔数比如下1.阿奇霉素0.032、磷脂原料是氢化大豆卵磷脂与蛋黄卵磷脂摩尔数2. 5 1的组合物0. 453、抗氧剂是还原型谷胱甘肽与维生素C摩尔数比1 1组合物 0.014、磷脂膜分子态稀释剂是二巯丙醇0.905、脂质体载药体分散剂及赋形剂是木糖醇与谷氨酸钠摩尔数比5 1组合物0.906、表面活性剂是去氢胆酸钠0. 017、乙醇90% (v/v)(干燥时挥发至尽)适量8、注射用磷酸盐缓冲液0. OlM ρΗ值5. 0-8. 0适量9、注射用水(干燥时挥发至尽)注射用磷酸盐缓冲液三分之二体积本发明提供所述脂质体组合药物的规范制备步照及方法如下(1)在溶解罐中，将木糖醇与谷氨酸钠摩尔数比5 1组合物配料量在注射用磷酸盐缓冲液中溶解成木糖醇与谷氨酸钠摩尔数比5 1组合物的15%的重量百分比溶液，将此溶液在121°C蒸汽灭菌20分钟，当溶液温度为20-25°C时，用截留分子量1000D的超滤膜的超滤柱超滤，除溶液中的热原及热原分子片段，取超滤得到的溶液；再在室温下，将溶液用5% -8%的分析纯氢氧化钠溶液调pH值8. 5，将溶液经0. 05 μ m以下孔径的膜滤过，除去不溶性粒子、高价金属离子、金属离子的沉淀物。将超滤得到的溶液按体积等分为A、B、C 三份溶液，再将A、B、C溶液分别用8 %的分析纯的盐酸溶液调pH值为5. 0-8. 0 ；(2)将A溶液在制备药用注射剂级的喷雾干燥机中，按喷雾干燥常法工艺及操作 A溶液由设备顶部的喷雾喷咀中与洁净度100级压缩空气(由压缩机来，室温)混合喷出， 与设备底部进入的温度150°C -190°C 100级洁净空气(由引风机引来，高温)气液逆流混合，喷雾干燥成120-150目左右多孔粒子干粉。干燥完毕，干燥物料存放在此设备底部存料室备用；(3)分别加入脂溶性的原料药阿奇霉素、磷脂、磷脂分散剂到乙醇中搅拌溶解完全，制成比重在1. 0至1. 2的溶液，经过截留分子量1000D的膜超滤，再经0. 05 μ m以下孔径膜滤过，除去热原凝聚粒子、细菌、不溶性粒子；(4)将第(2)步制备的A溶液的组合物干燥颗粒，放到沸腾包衣机中，按沸腾包衣及沸腾干燥常法工艺操作先将第C3)步制备的磷脂乙醇溶液等体积分三份；在设备底部由引风机引入的空气改为引入经过常法处理的无水、无菌、无油、无0. 01 μ m以上粒径的粒子的室温高纯氮气流(用处理空气方法净化纯氮气，经冷冻干燥器冷凝气流中水和油， 经除水除油过滤器过滤除水除油，经除尘过滤器过滤除尘，经除菌过滤器过滤除菌净化)， 在加热器中加热到40°C _65°C温度，由引风机引入到沸腾包衣机中，高纯氮气流的负压控制使物料沸腾高度为400mm-500mm高为佳；对第(2)步制得的木糖醇与谷氨酸钠摩尔数比5 1组合物干燥物粒子进行沸腾流化状态下包衣先将第一份的(三分之一体积的) 磷脂乙醇溶液，由泵输送到设备中部的包衣喷咀中与经压缩的洁净级别为100级纯氮气混合，呈喷雾状喷到机中沸腾高度为400mm-450mm物料(木糖醇与谷氨酸钠摩尔数比5 1 组合物)流的最密集处，在沸腾物料粒子表面包衣，沸腾下的物料同时高度均勻地混和及分散，并极快地使溶剂挥发，形成多孔固体包衣薄层，第一个三分之一磷脂的乙醇溶液料液包衣完成，沸腾干燥15分钟，再将第一步制备的B溶液也等分三份，将第一份B溶液的体积的三分之一溶液在无水、无菌、无油、无0. 001 μ m以上粒径的粒子的100级纯氮气流中，按上述操作包衣，包衣后，沸腾干燥20分钟，这样进行了第一次包衣-干燥操作。重复上述包衣-干燥操作，分别进行第二、第三次两种溶液的第二份、第三份的三分之一体积的溶液按上述操作进行磷脂液与B溶液的交替包衣-干燥操作；最外层包衣层是木糖醇与谷氨酸钠摩尔数比5 1组合物微孔干燥物层。第三次包衣后，得到的包衣干燥物料中残留水份彡1.0%，残留的二巯丙醇彡0.2% ；(5)在配料罐中加入与第(1)步用的注射用磷酸盐溶液三分之二体积等同的注射用水，在罐内充氮气与罐外压持平，100转/分钟搅拌速度下，加热至60士5°C ；调搅拌转速为500-700转/分钟，在罐内充氮气下，在30分钟至60分钟内把第(4)步制得的包衣干燥物加入到配料罐中溶解分散完全；加完包衣干燥物后，在罐内充氮气环境下，保持温度 60 士 5°C，并在100转/分钟搅拌下保持60-120分钟；再在100转/分钟搅拌下，把罐内药液冷却到30-40°C ；再在100转/分钟搅拌下，分别加入抗氧剂还原型谷胱甘肽与维生素C摩尔数比1 1组合物及去氢胆酸钠各三分之二配方量溶解完全，并调整药液PH值5. 0-8.0;(6)在保药液持温度在30士5°C范围内，在0. 1_0. 2Mpa氮气压下，用0. IOym膜滤过第( 步制得的药液，取滤过的药液，得到粒径小于IOOnm的脂质体药液。按药剂学允许该药品的剂量分装脂质体药液到西林瓶中，并半加塞，在冷冻干燥机组的冷冻干燥箱中常法冷冻干燥。至药品固体残留水分为小于2%，二巯丙醇残留量为小于0.2%。真空压塞， 轧盖，检合格后进库。制成阿奇霉素脂质体组合药物的纳米粒径的冻干针剂。或此冻干针剂配成无菌喷雾剂；(7)在100级无菌级别下，将第6步滤过的滤膜上截留的大于IOOnm的脂质体药物颗粒洗到另一配料罐中，洗法是把滤膜上颗粒洗到三分之一体积C溶液中，测定药液中总磷脂原料的含量，并用三分之二的C溶液调整药液体积，达到控制药液中总磷脂含量在 40-80mg/ml ；充高纯氮气下，100转/分钟搅拌速度，30-60分钟内加热到50士5°C，保持这温度范围搅拌60-120分钟；再保持充高纯氮气下，100转/分钟转速，分别加入抗氧剂还原型谷胱甘肽与维生素C摩尔数比11组合物及去氢胆酸钠各三分之一配方量溶解完全； 在0. 1-0. 2Mpa氮气压下，用0. 22 μ m膜滤过药液除菌；把药液分装到316L的不锈钢托盘中，放到另一台冻干机组的冷冻干燥箱中，常法冷冻干燥，至药物固体中水分含量小于2%， 二巯丙醇残留量为小于0. 2%。得到脂质体组合药物固体，把脂质体组合药物固体在100级无菌级别下，粉碎至80-100目，按药剂学允许的剂量，常法制成阿奇霉素脂质体组合药物的无菌肠溶口服制剂，或无菌拴剂；(8)所有生产环境、清洗、灭菌、设备、操作、原料、辅料、注射用水、容器具、工衣、人员都应严格按照国家GMP规范中注射剂无菌及热原标准要求执行，口服制剂也得按注射剂无菌及热原要求执行。实施例2原料药是脂溶性强的脂质体组合药物规范的各原料组份摩尔数比如下1、阿奇霉素0. 102.磷脂原料是氢化大豆卵磷脂与蛋黄卵磷脂摩尔数比2. 5 1组合物1.203、抗氧剂是还原型谷胱甘肽与维生素C摩尔数比11组合物 0.074、磷脂膜分子态稀释剂是二巯丙醇1. 505、脂质体载药体分散剂及赋形剂是木糖醇与谷氨酸钠摩尔数比5 1组合物3.006、表面活性剂是去氢胆酸钠0. 077、乙醇90% (v/v)(干燥时挥发至尽)适量8、注射用磷酸盐缓冲0. 03Μ ρΗ值5. 0-8. 0适量9、注射用水(干燥时挥发至尽)注射用磷酸盐缓冲液三分之二体积制备步骤及方法按前面所述的脂溶性强的原料药的脂质体组合药物制备步骤及方法执行。实施例3原料药是脂溶性强的脂质体组合药物规范的各原料组份摩尔数比如下1、阿奇霉素0.03
2、磷脂原料是氢化大豆卵磷脂与蛋黄卵磷脂摩尔数比2. 5 1组合物1.203、抗氧剂是还原型谷胱甘肽与维生素C摩尔数比1 1组合物0.014、磷脂膜分子态稀释剂是二巯丙醇1. 505、脂质体载药体分散剂及赋形剂是木糖醇与谷氨酸钠摩尔数比5 1组合物0.906、表面活性剂是去氢胆酸钠0.0377、乙醇95% (ν/ν)(干燥时挥发至尽)适量8、注射用磷酸盐缓冲液0. 02Μ ρΗ值5. 0-8. 0适量9、注射用水(干燥时挥发至尽)注射用磷酸盐缓冲液三分之二体积制备步骤及方法按前面所述的脂溶性强的原料药的脂质体组合药物制备步骤及方法执行。实施例4原料药是脂溶性强的脂质体组合药物规范的各原料组份摩尔数比如下
0108]1、阿奇霉素0. 10
0109]2、磷脂原料是氢化大豆卵磷脂与蛋黄卵磷脂
0110]摩尔数比2. 5 1组合物0.45
0111]3、抗氧剂是还原型谷胱甘肽与维生素C摩尔数比1 1组合物 0.07
0112]4、磷脂膜分子态稀释剂是二巯丙醇0.90
0113]5、脂质体载药体分散剂及赋形剂
0114]是木糖醇与谷氨酸钠摩尔数比5 1组合物3.00
0115]6、表面活性剂是去氢胆酸钠0.01
0116]7、乙醇85% (ν/ν)(干燥时挥发至尽)适量
0117]8、注射用磷酸盐缓冲液0. 03Μ ρΗ值5. 0-8. 0适量9、注射用水(干燥时挥发至尽)注射用磷酸盐缓冲液三分之二体积制备步骤及方法按前面所述的脂溶性强的原料药的脂质体组合药物制备步骤及方法执行。实施例5原料药是脂溶性强的脂质体组合药物规范的各原料组份摩尔数比如下
0122]1、阿奇霉素0.07
0123]2、磷脂原料是氢化大豆卵磷脂与蛋黄卵磷脂
0124]摩尔数比2. 5 1组合物0.80
0125]3、抗氧剂是还原型谷胱甘肽与维生素C摩尔数比1 1组合物 0.06
0126]4、磷脂膜分子态稀释剂是二巯丙醇1.30
0127]5、脂质体载药体分散剂及赋形剂
0128]是木糖醇与谷氨酸钠摩尔数比5 1组合物2.00
0129]6、表面活性剂是去氢胆酸钠0.04
0130]7、乙醇90% (ν/ν)(干燥时挥发至尽)适量
0131]8、注射用磷酸盐缓冲液0. 02Μ ρΗ值5. 0-8. 0适量
9、注射用水(干燥时挥发至尽)注射用磷酸盐缓冲液三分之二体积制备步骤及方法按前面所述脂溶性强的原料药的脂质体组合药物制备步骤及方法执行。实施例6原料药是脂溶性强的脂质体组合药物规范的各原料组份摩尔数比如下
0136]1、原料药是罗沙替丁乙酸酯0.03
0137]2、磷脂原料是氢化大豆卵磷脂与蛋黄卵磷脂
0138]摩尔数比2. 5 1组合物0.45
0139]3、抗氧剂是还原型谷胱甘肽与维生素C摩尔数比1 1组合物0.01
0140]4、磷脂膜分子态稀释剂是二巯丙醇0.90
0141]5、脂质体载药体分散剂及赋形剂
0142]是木糖醇与谷氨酸钠摩尔数比5 1组合物0.90
0143]6、表面活性剂是去氢胆酸钠0.01
0144]7、乙醇90% (ν/ν)(干燥时挥发至尽)适量
0145]8、注射用磷酸盐缓冲液0. OlM ρΗ值5. 0-8. 0适量9、注射用水(干燥时挥发至尽)注射用磷酸盐缓冲液三分之二体积制备步骤及方法按前面所述脂溶性强的原料药的脂质体组合药物制备步骤及方法执行。实施例7原料药是脂溶性强的脂质体组合药物规范的各原料组份摩尔数比如下
0150]1、原料药是罗沙替丁乙酸酯0. 10
0151]2、磷脂原料是氢化大豆卵磷脂与蛋黄卵磷脂
0152]摩尔数比2. 5 1组合物1.20
0153]3、抗氧剂是还原型谷胱甘肽与维生素C摩尔数比1 1组合物0.07
0154]4、磷脂膜分子态稀释剂是二巯丙醇1.50
0155]5、脂质体载药体分散剂及赋形剂
0156]是木糖醇与谷氨酸钠摩尔数比5 1组合物3.00
0157]6、表面活性剂是去氢胆酸钠0.07
0158]7、乙醇95% (ν/ν)(干燥时挥发至尽)适量
0159]8、注射用磷酸盐缓冲液0. 03Μ ρΗ值5. 0-8. 0适量9、注射用水(干燥时挥发至尽)注射用磷酸盐缓冲液三分之二体积制备步骤及方法按前面所述脂溶性强的原料药的脂质体组合药物制备步骤及方法执行。实施例8原料药是脂溶性强的脂质体组合药物规范的各原料组份摩尔数比如下1、原料药是罗沙替丁乙酸酯0.102、磷脂原料是氢化大豆卵磷脂与蛋黄卵磷脂摩尔数比2. 5 1组合物0.453、抗氧剂是还原型谷胱甘肽与维生素C摩尔数比1 1组合物0.070168]4、磷脂膜分子态稀释剂是二巯丙醇 0.90
0169]5、脂质体载药体分散剂及赋形剂
0170]是木糖醇与谷氨酸钠摩尔数比5 1组合物 3.006、表面活性剂是去氢胆酸钠 0.017、乙醇100% (ν/ν)(干燥时挥发至尽) 适量8、注射用磷酸盐缓冲液0. 03Μ ρΗ值5. 0-8. 0适量9、注射用水(干燥时挥发至尽)注射用磷酸盐缓冲液三分之二体积制备步骤及方法按前面所述脂溶性强的原料药的脂质体组合药物制备步骤及方法执行。实施例9原料药是脂溶性强的脂质体组合药物规范的各原料组份摩尔数比如下1、原料药是罗沙替丁乙酸酯0.062、磷脂原料是氢化大豆卵磷脂与蛋黄卵磷脂摩尔数比2. 5 1组合物0.703、抗氧剂是还原型谷胱甘肽与维生素C摩尔数比1 1组合物0.044、磷脂膜分子态稀释剂是二巯丙醇1.205、脂质体载药体分散剂及赋形剂是木糖醇与谷氨酸钠摩尔数比5 1组合物1.606、表面活性剂是去氢胆酸钠0.037、乙醇90% (ν/ν)(干燥时挥发至尽)适量8、注射用磷酸盐缓冲液0. 02Μ ρΗ值5. 0-8. 0适量9、注射用水(干燥时挥发至尽)注射用磷酸盐缓冲液三分之二体积制备步骤及方法按前面所述脂溶性强的原料药的脂质体组合药物制备步骤及方法执行。实施例10原料药是脂溶性强的脂质体组合药物规范的各原料组份摩尔数比如下1、原料药是罗沙替丁乙酸酯0.032、磷脂原料是氢化大豆卵磷脂与蛋黄卵磷脂摩尔数比2. 5 1组合物1.203、抗氧剂是还原型谷胱甘肽与维生素C摩尔数比1 1组合物0.014、磷脂膜分子态稀释剂是二巯丙醇1.505、脂质体载药体分散剂及赋形剂是木糖醇与谷氨酸钠摩尔数比5 1组合物0.906、表面活性剂是去氢胆酸钠0.077、乙醇85% (ν/ν)(干燥时挥发至尽)适量8、注射用磷酸盐缓冲液0. OlM ρΗ值5. 0-8. 0适量9、注射用水(干燥时挥发至尽)注射用磷酸盐缓冲液三分之二体积制备步骤及方法按前面所述脂溶性强的原料药的脂质体组合药物制备步骤及方法执行。
技术经济及质量指标对比
本发明方法勻质冷冻干燥法流化床包衣法
1、可制剂型口服、注射剂注射剂、口服口服脂质体
脂质体载药体脂质体载药体载药体
2、IOOkg/ 批 1
质体设备投资1600万元2600万元1200万元
3、工时25小时/批48小时,/批26小时/批
4、无菌率100%90%有限菌落
5、热原^ 60EU/ml彡 100EU/ml(300EU/IOOmg
6、包封率100%80% -90%80%-90%
7、泄漏率^ 5%^ 20%(20%
8、粒径nm^ 100彡200^ 2000
9、产生杂质3% -5%10% -20%5% --10%
结论本发明技术制备脂质体载药体与现有勻质冷冻干燥法、流化床包衣法技术
制脂质体载药体相比，本发明技术经济及主要质量指标都优越于勻质冷冻干燥法，质量指标都优于流化床包衣法。药效学验证试验抗胃溃疡药物药效学验证试验实验动物选健康大鼠，性别不限，体重200_250g，每组8只。使用药物及剂量见试验结果表。实验前，大鼠禁食M小时，自由饮水，在乙醚麻醉下打开腹腔，将内径5mm、长 30mm的玻璃管垂直放置于胃体部浆膜面上，向管腔内加入冰乙酸0. 2ml, 1. 5分钟后用棉签蘸出冰乙酸，缝合手术切口。术后正常饮食，第二天随机设立空白对照组1组及阳性对照组 1组，空白对照组用生理盐水给药，0. 5ml/次，腹腔注射给药，阳性对照组以法莫替丁用生理盐水溶解，取0.5ml/次，注射给药。本发明的脂质体组合药物给药组，注射给药。脂质体组合药物注射给药，用生理盐水溶解脂质体组合药物，取0. 5ml/次。给药15天，每天给2 次，12小时一次。分为注射给药和口服給药。每实施例制出样品分别连接给药3天。给药 15天后，解剖取出胃，并用甲醛固定，测量溃疡面积mm2，计算各组平均溃疡面积。试验结果
表
权利要求
1. 一种阿奇霉素脂质体组合药物，其特征是，本发明阿奇霉素脂质体组合药物的各组分原料摩尔数比如下(1)阿奇霉素0. 03-0. 10(2)磷脂原料0. 45-1. 20(3)抗氧剂0. 01-0. 07(4)磷脂膜分子态稀释剂0. 90-1. 50(5)脂质体载药体分散剂及赋形剂0. 90-3. 00(6)表面活性剂0. 01-0. 07(7)乙醇彡85%浓度(体积比，乙醇水彡85%，干燥时挥发至尽)适量(8)注射用磷酸盐缓冲液.0. 01-0. 03浓度PH值5. 0-8. 0 (干燥时挥发至尽)适量(9)注射用水(干燥时挥发至尽)注射用磷酸盐三分之二体积所述原料药优选阿齐霉素；所述磷脂原料的平均分子量都定义以800D计算，磷脂原料是氢化大豆卵磷脂与蛋黄卵磷脂摩尔数比2. 5 1组合物；所述磷脂的抗氧剂是还原型谷胱甘肽与维生素C摩尔数比11组合物；所述磷脂膜分子态稀释剂，又是抗氧剂，又是络合剂，是二巯丙醇；所述脂质体载药体分散剂，又为赋型剂，为木糖醇与谷氨酸钠摩尔数比5 1组合物；所述表面活性剂是去氢胆酸钠；脂质体组合药物的各组份原料都应有国家标准，并且都是药用注射剂级的国家标准， 既符合国家GMP规范，又符合国家《药品注册管理办法》的规定，以利产业化开发；所述的分子分散法的大工业化生产脂质体组合药物的方法，其特征是，本发明提供所述脂质体组合药物的规范制备步照及方法如下(1)在溶解罐中，将木糖醇与谷氨酸钠摩尔数比5 1组合物配料量，在注射用磷酸盐缓冲液中溶解成木糖醇与谷氨酸钠摩尔数比5 1组合物的15%的重量百分比溶液，将此溶液在121°C蒸汽灭菌20分钟，当溶液温度为20-25°C时，用截留分子量1000D的超滤膜的超滤柱超滤，除溶液中的热原及热原分子片段，取超滤得到的溶液；再在室温下，将溶液用 5%-8%的分析纯氢氧化钠溶液调pH值8. 5，将溶液经0. 05 μ m以下孔径的膜滤过，除去不溶性粒子、高价金属离子、金属离子的沉淀物。将超滤得到的溶液按体积等分为A、B、C三份溶液，再将A、B、C溶液分别用8%的分析纯的盐酸溶液调pH值为5. 0-8. 0 ；(2)将A溶液在制备药用注射剂级的喷雾干燥机中，按喷雾干燥常法工艺及操作A溶液由设备顶部的喷雾喷咀中与洁净度100级压缩空气(由压缩机来，室温)混合喷出，与设备底部进入的温度150°C-190°C 100级洁净空气(由引风机引来，高温)气液逆流混合，喷雾干燥成120-150目左右多孔粒子干粉，干燥完毕，干燥物料存放在此设备底部存料室备用；(3)分别加入脂溶性的原料药阿奇霉素、磷脂、磷脂分散剂到乙醇中搅拌溶解完全，制成比重在1. 0至1. 2的溶液，经过截留分子量1000D的膜超滤，再经0. .05 μ m以下孔径膜滤过，除去热原凝聚粒子、细菌、不溶性粒子；(4)将第( 步制备的A溶液的组合物干燥颗粒，放到沸腾包衣机中，按沸腾包衣及沸腾干燥常法工艺操作先将第C3)步制备的磷脂乙醇溶液等体积分三份；在设备底部由引风机引入的空气改为引入经过常法处理的无水、无菌、无油、无0. 01 μ m以上粒径的粒子的室温高纯氮气流(用处理空气方法净化纯氮气，经冷冻干燥器冷凝气流中水和油，经除水除油过滤器过滤除水除油，经除尘过滤器过滤除尘，经除菌过滤器过滤除菌净化)，在加热器中加热到40°C-65°C温度，由引风机引入到沸腾包衣机中，高纯氮气流的负压控制使物料沸腾高度为400mm-500mm高为佳；对第( 步制得的木糖醇与谷氨酸钠摩尔数比5 1组合物干燥物粒子进行沸腾流化状态下包衣先将第一份的(三分之一体积的)磷脂乙醇溶液，由泵输送到设备中部的包衣喷咀中与经压缩的洁净级别为100级纯氮气混合，呈喷雾状喷到机中沸腾高度为400mm-450mm物料(木糖醇与谷氨酸钠摩尔数比5 1组合物)流的最密集处，在沸腾物料粒子表面包衣，沸腾下的物料同时高度均勻地混和及分散，并极快地使溶剂挥发，形成多孔固体包衣薄层，第一个三分之一磷脂的乙醇溶液料液包衣完成，沸腾干燥15分钟，再将第一步制备的B溶液也等分三份，将第一份B溶液的体积的三分之一溶液在无水、无菌、无油、无0. 001 μ m以上粒径的粒子的100级纯氮气流中，按上述操作包衣，包衣后，沸腾干燥20分钟，这样进行了第一次包衣-干燥操作；重复上述包衣-干燥操作，分别进行第二、第三次两种溶液的第二份、第三份的三分之一体积的溶液按上述操作， 进行磷脂液与B溶液的交替包衣-干燥操作；最外层包衣层是木糖醇与谷氨酸钠摩尔数比 5 1组合物微孔干燥物层；第三次包衣后，得到的包衣干燥物料中残留水份<1.0%，残留的二巯丙醇彡0.2% ；(5)在配料罐中加入与第(1)步用的注射用磷酸盐溶液三分之二体积等同的注射用水，在罐内充氮气与罐外压持平，100转/分钟搅拌速度下，加热至60士5°C ；调搅拌转速为500-700转/分钟，在罐内充氮气下，在30分钟至60分钟内把第(4)步制得的包衣干燥物加入到配料罐中溶解分散完全；加完包衣干燥物后，在罐内充氮气环境下，保持温度 60 士 5°C，并在100转/分钟搅拌下保持60-120分钟；再在100转/分钟搅拌下，把罐内药液冷却到30-40°C ；再在100转/分钟搅拌下，分别加入抗氧剂还原型谷胱甘肽与维生素C摩尔数比1 1组合物及去氢胆酸钠各三分之二配方量溶解完全，并调整药液PH值5. 0-8.0;(6)在保药液持温度在30士5°C范围内，在0.1-0. 2Mpa氮气压下，用0. 10 μ m膜滤过第 (5)步制得的药液，取滤过的药液，得到粒径小于IOOnm的脂质体药液，按药剂学允许该药品的剂量分装脂质体药液到西林瓶中，并半加塞，在冷冻干燥机组的冷冻干燥箱中常法冷冻干燥，至药品固体残留水分为小于2%，二巯丙醇残留量为小于0.2%，真空压塞，轧盖， 检验合格后进库；制成阿奇霉素脂质体组合药物的纳米粒径的冻干针剂；或此冻干针剂配成无菌喷雾剂；(7)在100级无菌级别下，将第(6)步滤过的滤膜上截留的大于IOOnm的脂质体药物颗粒洗到另一配料罐中，洗法是把滤膜上颗粒洗到三分之一体积C溶液中，测定药液中总磷脂原料的含量，并用三分之二的C溶液调整药液体积，达到控制药液中总磷脂含量在 40-80mg/ml ；充高纯氮气下，100转/分钟搅拌速度，30-60分钟内加热到50士5°C，保持这温度范围搅拌60-120分钟；再保持充高纯氮气下，100转/分钟转速，分别加入抗氧剂还原型谷胱甘肽与维生素C摩尔数比11组合物及去氢胆酸钠各三分之一配方量溶解完全； 在0. 1-0. 2Mpa氮气压下，用0. 22 μ m膜滤过药液除菌；把药液分装到316L的不锈钢托盘中，放到另一台冻干机组的冷冻干燥箱中，常法冷冻干燥，至药物固体中水分含量小于2 %， 二巯丙醇残留量为小于0. 2% ；得到脂质体组合药物固体，把脂质体组合药物固体在100级无菌级别下，粉碎至80-100目，按药剂学允许的剂量，常法制成阿奇霉素脂质体组合药物的无菌肠溶口服制剂，或无菌拴剂；(8)所有生产环境、清洗、灭菌、设备、操作、原料、辅料、注射用水、容器具、工衣、人员都应严格按照国家GMP规范中注射剂无菌及热原标准要求执行，口服制剂也得按注射剂无菌及热原要求执行。
2.根据权利要求1所述制备脂质体组合药物，其特征是，按药剂学允许的剂量，制成权利要求1所述的原料药阿奇霉素的脂质体组合药物的无菌冻干针剂，或无菌喷雾剂，或无菌肠溶口服制剂，或无菌栓剂。
3.根据权利要求1和2、3所述的制备的阿奇霉素脂质体组合药物，其特征是，用于抗菌。
全文摘要
本发明的特征，其主题是用分子分散法，以统一的配方、工艺、设备既可大工业化生产脂质组合药物注射剂，又可大工业化生产脂质体组合药物口服制剂；本发明提供了制备阿奇霉素脂质体组合药物的各组分原料摩尔数比配方；本发明提供了制备的阿奇霉素脂质体组合药物冻干针剂及口服制剂工艺；本发明的阿奇霉素脂质体组合药物用于抗菌。
文档编号A61K9/19GK102283808SQ20111009038
公开日2011年12月21日 申请日期2011年4月12日 优先权日2010年8月9日
发明者蔡海德 申请人:蔡海德