专利名称：一种瓜馥木总黄酮及总碱的制备方法
技术领域：
本发明涉及天然产物分离领域，特别是涉及一种从瓜馥木中制备瓜馥木总黄酮及总碱的方法。
背景技术：
瓜馥木(Fissistigma οldhamii (Hems 1.)Merr.)，又名铁牛钻石、钻三风、香藤，是番荔枝科瓜馥木属(Fissistigma Griff.)植物，为广西特色植物十八钻之一。主要产于浙江、福建、台湾、江西、湖南、广东、海南、广西及云南等省市。其根、茎、皮、花都可药用，性温、 味辛，具有祛风除温、镇痛消肿、活血化瘀等功效，用于跌打损伤，关节炎及坐骨神经痛的治疗。据文献报道，瓜馥木中含有生物碱、黄酮、有机酸、蒽醌等化学成分。瓜馥木属植物的生理活性作用主要体现在抗肿瘤、具有心血管活性、抗炎、镇痛及松弛平滑肌等方面。药理实验研究证明瓜馥木总生物碱具有抗炎、镇痛作用。Yi-Chen Chia等从多脉瓜馥木、瓜馥木中分离得到一系列马兜铃内酰胺及阿朴菲类化合物，经实验证明这些化合物具有抗活血小板聚集等活性作用；瓜馥木总黄酮作为瓜馥木中主要有效成分，可作为瓜馥木药材质量控制的定量检测指标，傅春燕等研究表明瓜馥木中总黄酮的含量 0. 563 0. 833%。现有技术对瓜馥木的研究主要集中在瓜馥木总生物碱方面，对同时提取总黄酮和总碱的研究涉及较少，造成对原材料的浪费。现有提取总生物碱的方法主要为醇提，浓缩后经酸碱除杂，最后用有机溶剂萃取得瓜馥木总碱。该方法有机溶剂用量大，且制得瓜馥木总碱纯度不高。如硕士论文“瓜馥木化学成分研究及抑菌活性初探”，该论文公开的方法是采用95%乙醇回流提取，提取液浓缩，用盐酸溶解，溶液再加氨水调至pH8 9，加入氯仿进行萃取，最后回收氯仿制得总生物碱，该方法有机溶剂用量大，原料利用率低。
发明内容
本发明的目的是提供一种瓜馥木总黄酮及瓜馥木总碱的制备方法。本发明的目的是通过下述方案实现的—种瓜馥木总黄酮及总碱的制备方法，其特征在于包含以下步骤1)提取将瓜馥木药材粉碎，加4 10倍量50 70%乙醇回流提取2 4次，每次0. 5 池，合并提取液，浓缩至无醇味得浓缩液；2)大孔树脂分离将上述浓缩液加入至大孔树脂柱中吸附，先用少量水洗，再用高浓度乙醇洗脱，分别收集下柱液、水洗液和醇洗液(I)；3)离子树脂纯化将上述下柱液和水洗液合并，加稀盐酸调节至pH2 4，加入至阳离子树脂柱中吸附，用PH9 11的氨水溶液洗脱，收集碱洗液(II)；4)浓缩干燥将上述醇洗液(I)、碱洗液(II)分别除去溶剂，干燥得瓜馥木总黄酮与总碱。所述步骤2)中的大孔树脂可选用AB-8、HPD-450或LSA-20中的一种，用量是药材量的 1/3 4/5 (w/w)。所述步骤2)中的高浓度乙醇为60 80%乙醇溶液，用量是3 6BV。所述步骤3)中的阳离子树脂选用强酸性阳离子树脂，型号可选用HD-8或732型离子树脂。所述步骤4)中的 干燥方法包括低温真空干燥、喷雾干燥或冷冻干燥。本发明的优点是本方法操作简单、提取完全、原料利用率高；大孔树脂与离子树脂处理量大；所用溶剂毒性小，基本都可回收重复使用，对环境污染相对小，适合工业规模化生产。
具体实施例方式以下通过实施例进一步说明本发明，但不作为对本发明的限制。实施例1 取瓜馥木药材1kg，粉碎，加入4L70%的乙醇回流提取2次，每次2h，将提取液合并，浓缩至无醇味，取350gAB-8型大孔树脂装柱，浓缩液上大孔树脂柱吸附，先用少量水洗，再用3BV80%乙醇洗脱，分别收集下柱液、水洗液和醇洗液(I)；将下柱液和水洗液合并，用稀盐酸调节至PH2，上HD-8型阳离子树脂柱层析，pH9的氨水溶液洗脱，收集碱洗液 (II)，将醇洗液(I)和碱洗液(II)分别除去溶剂，真空干燥即得瓜馥木总黄酮5. 4g和瓜馥木总碱4. 3g，含量均不低于60%。实施例2 取瓜馥木药材2kg，粉碎，加入20L50%的乙醇回流提取4次，每次0. 5h，将提取液合并，浓缩至无醇味，取1. 5kgHPD-450型大扎树脂装柱，浓缩液上大孔树脂柱吸附，先用少量水洗，再用6BV60%乙醇洗脱，分别收集下柱液、水洗液和醇洗液(I)；将下柱液和水洗液合并，用稀盐酸调节至PH4，上732型阳离子树脂柱层析，pHl 1的氨水溶液洗脱，收集碱洗液 (II)，将醇洗液(I)和碱洗液(II)分别除去溶剂，喷雾干燥即得瓜馥木总黄酮12. 3g和瓜馥木总碱7. 9g，含量均不低于60%。实施例3 取瓜馥木药材5kg，粉碎，加入30L60%的乙醇回流提取3次，每次lh，将提取液合并，浓缩至无醇味，取2. 5kgLSA-20型大孔树脂装柱，浓缩液上大孔树脂柱吸附，先用少量水洗，再用5BV65%乙醇洗脱，分别收集下柱液、水洗液和醇洗液(I)；将下柱液和水洗液合并，用稀盐酸调节至PH3，上HD-8型阳离子树脂柱层析，pHIO的氨水溶液洗脱，收集碱洗液 (II)，将醇洗液(I)和碱洗液(II)分别除去溶剂，冷冻干燥即得瓜馥木总黄酮20. 3g和瓜馥木总碱19. 8g，含量均不低于60%。实施例4 取瓜馥木药材10kg，粉碎，加入50L65%的乙醇回流提取2次，每次1. 5h，将提取液合并，浓缩至无醇味，取6kgAB-8型大孔树脂装柱，浓缩液上大孔树脂柱吸附，先用少量水洗，再用6BV75%乙醇洗脱，分别收集下柱液、水洗液和醇洗液(I)；将下柱液和水洗液合并，用稀盐酸调节至PH2. 5，上732型阳离子树脂柱层析，pHll的氨水溶液洗脱，收集碱洗液 (II)，将醇洗液(I)和碱洗液(II)分别除去溶剂，真空干燥即得瓜馥木总黄酮51. 3g和瓜馥木总碱43. 2g，含量均不低于60%。
实施例5 取瓜馥木药材10kg，粉碎，加入60L60%的乙醇回流提取3次，每次池，将提取液合并，浓缩至无醇味，取^gHPD-450型大孔树脂装柱，浓缩液上大孔树脂柱吸附，先用少量水洗，再用5BV80%乙醇洗脱，分别收集下柱液、水洗液和醇洗液(I)；将下柱液和水洗液合并，用稀盐酸调节至PH3，上HD-8型阳离子树脂柱层析，pHIO的氨水溶液洗脱，收集碱洗液 (II)，将醇洗液(I)和碱洗液(II)分别除去溶剂，喷雾干燥即得瓜馥木总黄酮49. 7g和瓜馥木总碱41. 8g，含量均不低于60%。
权利要求
1.一种瓜馥木总黄酮及总碱的制备方法，其特征在于包含以下步骤1)提取将瓜馥木药材粉碎，加4 10倍量50 70%乙醇回流提取2 4次，每次 0. 5 池，合并提取液，浓缩至无醇味，得浓缩液；2)大孔树脂分离将上述浓缩液加入至大孔树脂柱中吸附，先用少量水洗，再用高浓度乙醇洗脱，分别收集下柱液、水洗液和醇洗液(I)；3)离子树脂纯化将上述下柱液和水洗液合并，加稀盐酸调节至pH2 4，加入至阳离子树脂柱中吸附，用PH9 11的氨水溶液洗脱，收集碱洗液(II)；4)浓缩干燥将上述醇洗液(I)、碱洗液(II)分别除去溶剂，干燥得瓜馥木总黄酮与总碱。
2.如权利要求1所述的一种瓜馥木总黄酮及总碱的制备方法，其特征在于所述步骤2) 中的大孔树脂可选用AB-8、HPD-450或LSA-20中的一种，用量是药材量的1/3 4/5 (w/w)。
3.如权利要求1所述的一种瓜馥木总黄酮及总碱的制备方法，其特征在于所述步骤2) 中的高浓度乙醇为60 80%乙醇溶液，用量是3 6BV。
4.如权利要求1所述的一种瓜馥木总黄酮及总碱的制备方法，其特征在于所述步骤3) 中的阳离子树脂选用强酸性阳离子树脂，型号可选用HD-8或732型离子树脂。
5.如权利要求1所述的一种瓜馥木总黄酮及总碱的制备方法，其特征在于所述步骤4) 中的干燥方法包括低温真空干燥、喷雾干燥或冷冻干燥。
全文摘要
本发明提供一种瓜馥木总黄酮及总碱的制备方法，其特征在于包含以下步骤将瓜馥木药材粉碎，采用50～70％的乙醇回流提取2～4次→将提取液合并，浓缩至无醇味，上大孔树脂柱吸附→分别收集下柱液、醇洗液(I)→下柱液用稀盐酸调节至酸性，上阳离子树脂柱层析→收集碱洗液(II)，将醇洗液(I)和碱洗液(II)分别除去溶剂，即得瓜馥木总黄酮和瓜馥木总碱。采用本发明同时制得瓜馥木总黄酮和总碱提取物，原料利用率高，制备过程安全，成本低，周期短，制得瓜馥木总黄酮和总碱的含量均在60％以上，具有工业化意义。
文档编号A61K135/00GK102178710SQ20111011794
公开日2011年9月14日 申请日期2011年5月6日 优先权日2011年5月6日
发明者苏刘花 申请人:南京泽朗农业发展有限公司