专利名称：3,4,5,-三取代氨基噻吩类化合物及其制备和用途的制作方法
技术领域：
本发明属有机化合物的合成，涉及一类3，4，5，-三取代氨基噻吩类化合物的制备方法，及其在制备抗肿瘤药物中的应用。随着全球人口的不断增加和人口老龄化趋势的不断加深，同时也因为包括吸烟在内的各种不健康生活方式的广泛存在，肿瘤已经成为了发达国家威胁人类健康的头号杀手和发展中国家威胁人类健康的第二号杀手(Jemal, et al.，CA-Cancer J. Clin. 2011，61， 69-90)。传统的化学治疗药物如烷化剂、抗代谢物等普遍存在毒副作用大、易产生耐药性等缺点，而针对信号通路中的关键蛋白或激酶而设计的抗肿瘤药物正在肿瘤治疗领域取得令人鼓舞的效果。p53作为一个重要的肿瘤抑制因子在阻止癌症发展的过程中起到了关键作用。p53 主要通过细胞周期阻滞和促使细胞凋亡两个方面来发挥其功能。近20多年来，许多实验证明阻断p53-MDM2(p53的一个主要的负调节子)的相互作用可以有效的重新活化肿瘤细胞中的P53，从而达到杀死肿瘤细胞的效果。过去十年，许多结构种类的小分子化合物被发现具有抑制P53-MDM2相互作用的活性并且具有不同程度的抗癌活性，并已有两个化合物进入了临床研究，这更加验证了该治疗策略的有效性(Wang，et al.，Medicinal Research Reviews. D0I10. 1002/med. 20236)。本课题组设计并合成了一系列全新的p53_MDM2相互作用的小分子抑制剂，以3，4，5_三取代氨基噻吩类化合物作为其结构特点，并对该类化合物进行了蛋白水平以及细胞水平的抗肿瘤活性研究。结果表明该类化合物具有明显的阻断 P53-MDM2相互作用的活性以及细胞增值抑制活性，是有前景的P53-MDM2相互作用抑制剂， 为癌症治疗药物的研究提供了新的思路。
发明内容
本发明的目的是提供一类结构新颖的3，4，5，-三取代氨基噻吩类化合物及其盐， 具有如下结构通式A :
权利要求
1. 一种3，4，5，-三取代氨基噻吩类化合物及其盐，具有如下结构通式
2. —种3，4，5，-三取代氨基噻吩类化合物的制备方法，通过以下步骤实现(1)化合物I与取代苯在惰性溶剂中经路易斯酸催化得中间体酰化产物II，以乙醚、 二氧六环、二氯甲烷或氯仿为溶剂，所用的路易斯酸选用氯化铁、氯化锌、氯化铝、氯化锡或三氟化硼乙醚，反应温度为_15°C _25°C，反应时间为8-12小时，所得产物II经重结晶得纯品；(2)化合物II在酸性或者碱性条件下与氰基乙酸甲酯缩合得到化合物III，反应在中等极性溶剂中进行，所述的碱为二乙胺、三乙胺或二异丙基乙胺，选用的酸为四氯化钛、氯化锡或三氟化硼乙醚，反应温度为0°C -50°C，反应时间为12-24小时，所得产物为Z式和E 式的混合物，所述中等极性溶剂选用四氢呋喃；(3)化合物III在碱性条件下与硫粉环合得化合物IV，反应在极性非质子性溶剂中进行，极性非质子性溶剂选用丙酮或四氢呋喃，选用的碱有二乙胺、三乙胺或二异丙基乙胺， 反应温度为0°C -50°C，所得产物经重结晶得纯品；(4)化合物IV在碱性条件下水解得化合物V，反应在极性溶剂中进行，极性溶剂选用甲醇、乙醇或二氧六环，选用的碱有氢氧化钾、氢氧化钠或氢氧化锂，反应温度40 0C -80 0C，所得粗产物经重结晶得纯品；(5)化合物V在缩合试剂作用下与胺类化合物反应得目标产物VI，选用的缩合试剂为二环己基碳二亚胺/ 4- 二甲氨基吡啶、N-(3- 二甲氨基丙基)-N’ -乙基碳二亚胺盐酸盐)/ 1-羟基苯并三氮唑或6-氯苯并三氮唑-1，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸酯，反应温度 200C -60°C，反应时间12-24小时，粗产品经过柱层析得到纯品；反应式其中的R1U3的定义与权利要求1同。
3.根据权利要求2所述的一种3，4，5，-三取代氨基噻吩类化合物的制备方法，其特征在于，胺类化合物选用苯胺、苄胺、环丙胺、环己胺，4-羟基-环己胺、吡咯烷、吗啉、哌啶、 4-甲基哌啶、哌嗪、4-甲基哌嗪、2-哌啶酮，4-哌啶酮或2，4- 二哌啶酮中的一种。
4.一种3，4，5，-三取代氨基噻吩类化合物的制备方法，通过以下步骤实现(1)化合物I与取代苯在惰性溶剂中经路易斯酸催化得化合物II，以乙醚、二氧六环、 二氯甲烷或氯仿为溶剂，所用的路易斯酸选用氯化铁、氯化锌、氯化铝、氯化锡或三氟化硼乙醚，反应温度为_15°C _25°C，反应时间为8-12小时，所得化合物II经重结晶得纯品；(2)氰基乙酸甲酯与胺类化合物无溶剂条件下反应得到化合物VII，反应时间为6-12 小时，在室温下进行；(3)化合物II在酸性或者碱性条件下与化合物VII缩合得到化合物VIII，反应在四氧呋喃中进行，选用的碱为二乙胺、三乙胺或二异丙基乙胺，选用的酸为四氯化钛，氯化锡或三氟化硼乙醚，反应温度0°C -50°C，反应时间12-24小时，所得产物为Z式和E式的混合物；(4)化合物VIII在碱性条件下与硫粉环合得目标化合物VI，反应在极性非质子性溶剂中进行，极性非质子性溶剂选用丙酮或四氢呋喃，选用的碱为二乙胺、三乙胺或二异丙基乙胺，反应温度0°C -50°C，粗产品经柱层析得纯品；反应式
5.根据权利要求4所述的一种3，4，5，-三取代氨基噻吩类化合物的制备方法，其特征在于，胺类化合物选用苄胺、环己胺、环丙胺、吗啉、哌啶或吡咯烷中的一种。
6.根据权利要求1所述的3，4，5-三取代氨基噻吩类化合物及其盐在制备肿瘤药物中的应用，其特征在于，是在制备治疗与P53-MDM2信号通路有关的疾病的药物中的用途。
全文摘要
本发明提供一类3,4,5,-三取代氨基噻吩类化合物，以取代苯为原料，经傅克酰基化反应、Knoevenagel缩合、环合反应、水解反应和缩合反应得3,4,5,-三取代氨基噻吩衍生物。本发明提供的化合物及其盐，经药理实验证实对阻断p53-MDM2相互作用具有明显功效，并对肿瘤细胞有显著的体外增殖抑制活性，IC50达到μM级。本发明设计合理，所用原料来源广泛，制备方法简便，反应条件温和，各步收率高，适于实用，可在制备抗肿瘤药物中应用；本发明结构通式为。
文档编号A61K31/4535GK102503930SQ20111033512
公开日2012年6月20日 申请日期2011年10月28日 优先权日2011年10月28日
发明者何俏军, 刘滔, 杨波, 王味思, 盛荣, 胡永洲, 胡纯琦 申请人:浙江大学