专利名称：一种功能菌株及其菌剂和应用的制作方法
技术领域：
本发明属于环保领域，具体地说涉及一株可对恶臭气体物质进行吸附和降解的枯草芽孢杆菌属菌株，以及利用该功能菌株生产的微生物菌剂及其应用。
背景技术：
恶臭是各种气味(异味)的总称，是当今世界大气污染、水质污染、土壤污染、噪音污染等七种典型公害之一，直接作用于人的嗅觉给人造成直接危害。自然界的200多万中化合物中凭人的感觉可认识到4000多种化合物有恶臭，除特定的产业恶臭以外，其中硫化氢、胺类、吲哚类、低级脂肪酸、烃类、醛类等化合物对人体的危害较大。恶臭污染物质指一切刺激嗅觉器官引起人们不愉快及损害生活环境的气味物质。恶臭污染往往不是单一组分而是多种组分的复合臭，恶臭之间有相抵相加等多重作用。恶 臭的来源有天然形成的动植物在环境系统中自然腐败分解、或在加工过程中产生的臭气物质如胺、二氧化硫、醇、醛、低级脂肪酸、酮、醚等，也有动植物体内的有机物在某些微生物的作用下降解成低分子恶臭气体向大气释放，这是生活中臭气的主要来源。恶臭污染不仅会使人们精神不愉快，烦躁不安，而且还会造成人们食欲不振、呕吐、头晕、头疼、视觉模糊。高浓度的恶臭还可使接触者发生肺水肿、甚至窒息死亡。长期反复受恶臭物质刺激，还会引起嗅觉疲劳，导致嗅觉失灵。目前所采用的除臭方式主要有1、感官性除臭利用芳香有机化合物、遮蔽剂、动植物精油等以遮蔽覆盖的方式除臭，如空气清新剂，其通过散发香气来盖住异味，并没有分解、清除空气中的有害气体，只是靠混淆人的嗅觉来“淡化”异味，而且其含有的成分对人体可能带来的伤害；2、物理性除臭利用吸收、吸附作用使空气中的异味气体与水或与其它化学物质发生反应，生成无味分子，或利用多孔介质对恶臭分子进行吸附，以达到除臭的效果，如采用水洗、有机溶剂溶解等吸收作用，或采用活性碳、沸石、活性白土等吸附作用，只适用于低浓度恶臭气体的处理，且除臭效果一般，投资高；3、生物性除臭是采用生物法通过专门培养在生物滤池内生物填料上的微生物膜对废臭气分子进行氧化，使其分解成无臭的简单无机物而达到脱臭的目的，是目前最为经济有效的除臭方法，可同时处理含有多种污染物的废气，环保卫生，无二次污染，但其要求被去除的臭味物质由较好的水溶性并可被微生物氧化。枯草芽孢杆菌(Baillus subtilis)是芽孢杆菌属的一种，需氧菌,可利用蛋白质、多种糖及淀粉分解色氨酸形成吲哚，广泛分布在土壤及腐败的有机物中，易在枯草浸汁中繁殖，在遗传学研究中应用广泛。
发明内容
本发明的目的是提供一种对恶臭物质进行吸附、降解并分解成无臭的简单无机物的枯草芽孢杆菌(Baillus subtilis)属菌株W58。本发明所提供的菌株是从生活垃圾样品中筛选得到的。取垃圾样品lg，用灭菌生理盐水稀释成浓度为KT1悬液，连续作10倍比稀释，吸取不同稀释度悬液500 μ L，分别涂布在营养肉汤琼脂培养基上，37°C培养(需氧或厌氧)3d，挑取不同性状菌落染色镜检后，再进一步进行纯化培养；取纯化菌株分别接种于营养肉汤琼脂培养基，37°C下180r/min培养12小时，取培养菌液按10%接种量加入到含300g生活垃圾的三角瓶中，加塞封口，室温静置15d，打开瓶塞，感官判定并确定菌株对垃圾的除臭等级；选择除臭等级高的菌种液体培养后进行复筛，复筛中不同时间检测备选菌种处理后的氨气和硫化氢含量，挑取去除率最高的一株，该菌株已于2011年08月15日保藏于“中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心”，地址北京市朝阳区北辰西路I号院3号，保藏登记号为CGMCC No. 5140，命名为W58，分类命名为枯草芽孢杆菌(Baillus subtilis)。本发明还提供上述枯草芽孢杆菌(Baillus subtilis)属菌株W58在生物除臭中的应用。通过对枯草芽孢杆菌(Baillus subtilis)属菌株W58进行除臭试验,发现该菌株对多种恶臭环境起到显著的除臭和抑菌效果，具有较高的NH3平均去除率、H2S平均去除率和臭气浓度平均去除率。本发明所提供的枯草芽孢杆菌(Baillus subtilis)属菌株W58，光学显微镜40倍 下观察，菌体为杆状，大小为O. 7 O. 8X2 3微米，营养肉汤琼脂培养基培养8h后产生芽孢，芽孢中生，椭圆形，孢囊不膨大，抗酸染色阴性，无伴孢晶体，能运动，鞭毛周生。在营养肉汤琼脂平板上，培养初期菌落淡乳白色，脓状，圆形，边缘整齐，菌落隆起呈馒头状，表面湿润；培养后期菌落淡黄色，边缘不整齐，表面干燥有褶皱，在液体培养基中静止培养，表面形成白色菌膜。本发明所提供的枯草芽孢杆菌(Baillus subtilis)属菌株W58的各项生理生化特征如表I所示。表I枯草芽孢杆菌菌株W58的生理生化特征
检测项目生理生化检测项目生理生化
革兰氏染色+葡萄糖产酸+
淀粉水解+木糖产酸+
芽孢染色+阿拉伯糖产酸+
伴孢晶体甘露醇产酸+
运动性+I %葡萄糖产黑色素 :
接触酶+I %酪氨素产黑色素 :
厌氧生长-梓檬酸盐+
V. P.试验+产生吲哚:
酪素+酪氨素:
权利要求
1.一种枯草芽孢杆菌属菌株，已于2011年08月15日保藏于“中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心”，保藏登记号为CGMCC No. 5140，命名为W58，分类命名为枯草芽抱杆菌(Baillussubtilis)。
2.如权利要求I所述的枯草芽孢杆菌属菌株W58在生物除臭中的应用。
3.一种利用权利要求I所述的枯草芽孢杆 菌属菌株W58生产的微生物菌剂,其活性成分为枯草芽孢杆菌属菌株W58。
4.根据权利要求3所述的微生物菌剂，其特征在于所述微生物菌剂的枯草芽孢杆菌属菌株W58的活菌数大于2 X 109cfu/g。
5.根据权利要求3所述的微生物菌剂，其特征在于所述微生物菌剂为液态制剂。
6.根据权利要求3所述的微生物菌剂，其特征在于所述微生物菌剂在垃圾、生活污水、畜禽舍空气的除臭和净化的应用。
7.一种利用权利要求I所述的枯草芽孢杆菌属菌株W58生产微生物菌剂的方法，其特征在于，具体包括如下步骤 (1)菌种活化将_20°C保存的枯草芽孢杆菌属菌株W58接种LB平板培养基上，并在28 32°C下培养20 24小时，得活化的功能菌株； (2)种子液的制备挑取单菌落向LB液体培养基接入活化的功能菌株，在28 34°C下震荡培养20 24小时，得种子液； (3)发酵培养将步骤(2)所得种子液按照体积百分比为I 10%比例接入发酵培养基中，再在28 34°C、摇床转速150 200rpm的条件下培养24 30小时，即得功能菌株W58的液体制剂； 其中所述的发酵培养基的组成成分为=K2HPO4O. 4 0.8%、KH2PO4O. I O. 3 %、NaClO. I O. 4%,MgSO4 ·7Η200· 02 O. 04%,CaCl2 ·2Η200· 015 O. 025%, (NH4)2SO4O. I O.3%、蔗糖20Z0 4%、大豆粉I 3%，余量为水。
8.根据权利要求7所述的生产微生物菌剂的方法，其特征在于，所述的发酵培养基的制备方法，是按照重量百分比称取 K2HP04、KH2P04、NaCl、MgS04 .7H20、CaCl2 ·2Η20、(NH4)2SO4'蔗糖、大豆粉，然后将它们混合，再加水至所需体积即可。
全文摘要
本发明属于环保领域，具体地说涉及一株枯草芽孢杆菌属菌株，已于2011年08月15日保藏于“中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心”，保藏登记号为CGMCC No.5140，命名为W58，分类命名为枯草芽孢杆菌(Baillus subtilis)，该菌株对多种恶臭环境起到明显的除臭和抑菌效果，利用枯草芽孢杆菌属菌株W58生产的微生物菌剂，具有较高的NH3平均去除率、H2S平均去除率和臭气浓度平均去除率，可在垃圾、生活污水、畜禽舍空气等的除臭和净化上应用。
文档编号A61L101/52GK102851231SQ20121014253
公开日2013年1月2日 申请日期2012年5月10日 优先权日2012年5月10日
发明者王志伟 申请人:海南芳绿源科技开发有限公司