一种嗪草酮农药残留降解菌及其生产的菌剂和应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于生物高技术领域，提供一种嗪草酮农药残留降解菌及其生产的菌剂和 应用。
【背景技术】
[0002] 化学农药的使用大大地促进了现代农业的发展，为农业生产挽回了大量因植物 病、虫、草害等原因造成的损失，并极大地提高了农业生产的劳动效率和机械化程度，在农 业生产的现代化进程中起了不可估量的作用。但同时农药是一些有毒有害化学物质，它们 进入生态环境后，不仅杀死了对人类有害的生物，同时也对生态系统造成了严重的危害。农 药的大量使用引起农产品中农药残留超标，严重影响了人们的身体健康及农产品的安全生 产。随着人们生活水平的提高和环境保护意识的增强，全社会对农药残留带来的直接危害 和潜在影响也越来越关注，人们迫切需要无农药残留污染的清洁绿色农产品。但从目前我 国的农业生产形式和人口状况来看，以停止农药使用降低农业产量为代价的生产模式是行 不通的，农药作为控制植物病、虫、草害的有效手段还将继续在农业生产中发挥巨大的作 用。如何能解决农业生产中的这个两难问题就成为研究热点。实验室和实际应用研究都表 明利用微生物来降解土壤中的农药残留，从而降低粮食、蔬菜、茶叶等农产品中的农药残 留，提尚农广品的品质和经济价值是可彳丁的。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的在于提供一种嗪草酮降解菌(Rhodococcussp. )QCT10。
[0004]本发明的另一目的在于上述的嗪草酮降解菌QCT10在降解嗪草酮和/或生产嗪草 酮农药残留降解菌剂中的应用。
[0005]本发明的目的还在于针对生产实践中的实际问题和需求，开发研制出一种新型的 嗪草酮农药残留降解菌剂。
[0006]本发明的进一步目的在于上述的菌剂在降解嗪草酮中的应用。
[0007]本发明的目的可通过如下技术方案实现：
[0008] 本发明提供一种嗪草酮降解菌QCT10,为革兰氏阳性菌，经鉴定为红球菌 (Rhodococcus sp.)，2015年6月29日保藏于中国典型培养物保藏中心，菌种保藏号为： CCTCCN0:M2015392。菌株QCT10在LB固体平板上为粉红色、菌落边缘光滑，中间略微凸起。 菌株QCT10无鞭毛，大小为1.1 -1.2μπιX1.6-1.7μπι的短杆菌（图1)，接触酶阳性，可以抗多粘 菌素Β。本发明所述的嗪草酮降解菌QCT10在降解嗪草酮中的应用。
[0009]本发明所述的嗪草酮降解菌QCT10在生产嗪草酮农药残留降解菌剂中的应用。
[0010] 嗪草酮农药残留降解菌剂，优选通过以下方法制备得到：
[0011] 1)将上述的嗪草酮降解菌QCT10接种于肉汤培养基（牛肉膏10克，蛋白胨5克， NaCl5克，水1000毫升，pH7.0-7.2)摇瓶中，振荡培养至对数期；
[0012] 2)将上述培养好的菌种按种子罐培养基的10 % (v/v)的接种量接种入500升种子 罐，培养过程中无菌空气的通气量为1:ο. 8-1.2，搅拌速度为180-240转/分，培养温度为30-32°C，培养至对数生长期，种子罐所用的培养基配方为：葡萄糖1.0wt%，NH4N03l.Owt%，K2HPO40.2wt%，MgS〇4 0.05wt%，NaCl0.01wt%，CaC03 0.3wt%，酵母膏0.02wt%，pH值 7.2-7.5；
[0013]3)将上述种子液按生产罐培养基的10% (v/v)接种量接入生产罐培养，生产罐所 用培养基与种子罐培养基相同，培养过程中无菌空气的通气量为1:0.8-1.2,搅拌速度为 180-240转/分，培养温度为30-32°C，全流程培养时间为36-48小时，发酵结束后菌体数量达 到10亿个/ml以上，发酵完成后培养液出罐直接用塑料包装桶或包装瓶分装成液体剂型或 采用泥炭吸附用包装袋分装成固体剂型。
[0014] 有益效果
[0015]使用该发明生产的农药残留降解菌剂具有生产使用成本低，使用方便，去除效果 好的优点，适合在全国粮油蔬菜生产出口基地或有绿色食品商标标志的地区大面积推广使 用。本发明对于保护生态环境，保护人民的身体健康，提高农产品的附加值具有重要的意 义。降解菌QCT10能将土壤中嗪草酮农药残留降解50%以上，使用该降解菌剂可以在农作物 的正常生长过程中正常使用化学农药进行草害防治而保证农产品中农药残留含量符合绿 色食品要求。
[0016]本发明成功地解决了农业生产中嗪草酮农药残留超标问题，既充分发挥了化学农 药在草害防治中的高效快速的作用，又可以生产出无毒无公害的绿色农产品。
【附图说明】
[0017]图1降解菌株QCT10的透射电镜照
[0018]生物材料保藏信息
[0019]一种嗪草酮降解菌QCT10,分类命名为Rhodococcussp.QCTIO,保藏于中国典型培 养物保藏中心，保藏日期为2015年6月29日，保藏地址为中国武汉?武汉大学，菌种保藏号 为：CCTCCΝ0:Μ2015392。
【具体实施方式】
[0020] 实施例1:菌株的分离、鉴定
[0021 ]采集长期受嗪草酮污染的土壤，取15g土壤样品置于100mL添加50mg/L嗪草酮的无 机盐液体培养基(NH4N03 1.0克，K2HP〇4 1.5克，KH2P〇4 0.5克，MgS〇4 0.2克，NaCll.O克，水 1000毫升，pH7.0-7.2)中，30°C、150r/min培养7天，以7.5%的接种量转接到相同的添加 50mg/L嗪草酮的无机盐液体培养基，连续转接4次。通过液相色谱法测定降解效果。取0.5mL 有效果的富集液，梯度稀释，每个梯度的稀释富集液取l〇〇yL涂在含有50mg/L嗪草酮农药的 无机盐固体培养基平板上，30°C培养5d。挑取平板上长出的单菌落接种于液体LB培养基(蛋 白胨1克，酵母膏0.5克，NaClO. 5克，琼脂粉20克，水1000毫升，pH7.0-7.2)试管中，30°C、 160r/min培养1天，取lmLLB培养液，接种至加有50mg·I/1嗪草酮的无机盐液体培养基中， 30°C、150r/min培养5d，液相色谱检测降解效果。对嗪草酮有降解效果的菌株即为降解菌 株。通过验证得到1株降解菌株，命名为QCT10,经鉴定为红球菌(Rhodococcussp.)。菌株 QCT10在LB固体平板上为粉红色、菌落边缘光滑，中间略微凸起。菌株QCT10无鞭毛，大小为 1 ·Η·2μπιχ1.6-1 ·7μπι的短杆菌，接触酶阳性，可以抗多粘菌素B。