专利名称：一种含十八种氨基酸的组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及ー种注射用ー种含十八种氨基酸组合物(S卩，复方氨基酸注射液18AA-V)及其制备方法，属于药物制剂领域。
背景技术：
复方氨基酸注射液(18AA-V)是由18种氨基酸加辅料配制而成的灭菌水溶液，临床作为氨基酸补充剂，对于不能ロ服或经肠道补给营养，以及营养不能满足需要的患者，可静脉输注本品以满足机体合成蛋白质的需要。由于氨基酸在水溶液中不稳定，极易被氧化而产生一系列复杂的对人体有害的物质。国内外复方氨基酸注射液生产主要是加入亚硫酸盐类(亚硫酸氢钠或焦亚硫酸钠等)抗氧剂，并进行全过程的冲氮气保护。亚硫酸盐类抗氧剂有较多不良反应，最常见的毒副反应是亚硫酸盐过敏(尤其哮喘病人)，症状是支气管痉挛、喘鸣、呼吸困难，恶性喉部水肿，低血压、休克甚至死亡。最近的研究表明，亚硫酸盐可对染色体及DNA造成损伤.亚硫酸氢钠和亚硫酸钠(I 3)生物试液可诱发中国仓鼠肺纤维细胞(CHL)染色体畸变(CA)频率显著增高，且呈明确的剂量-效应关系。在低浓度下主要诱发染色单体型畸变，在高浓度下既可引起染色单体型畸变，又可引起染色体型畸变，研究还发现，处理细胞时间愈长，引起细胞遗传损伤所需的最低浓度就越低，用其处理CHL细胞24h吋，在5mmol/L浓度下才能诱发CA显著增加；若处理48h，lmmol/L浓度即可诱发CA显著增カロ。另外，研究指出亚硫酸氢钠能够引起人血淋巴细胞姊妹染色単体互換(SCE)和微核(MN)率的増加，可使淋巴细胞有丝分裂周期延迟及细胞分裂指数下降，且这些作用有显著的剂量-效应关系。这些遗传学效应的机制尚不清楚，有待进ー步研究，但人们对亚硫酸盐(SO2)危害已有了新的认识。为此，世界各国纷纷限制其在药品和食品中的应用。国家药品标准WSl-(X-324)-2003Z中規定，每IOOOml复方氨基酸注射液18AA-V中含亚硫酸氢钠O. 5g，并制定了严格的限量检查标准。目前，我国大部分复方氨基酸注射液生产厂家均采用亚硫酸盐作为抗氧剂，少数没有添加亚硫酸盐的复方氨基酸注射液，其中的特点在于全程充氮或者添加有机酸类物质。因此探索不含亚硫酸盐类抗氧剂或者含有其他安全的辅料成分来替代本领域常规的含亚硫酸盐类抗氧剂及避免不利于エ业化生产的复方氨基酸注射液，值得研究。
发明内容
本发明的目的在于研制ー种不含亚硫酸盐类抗氧化剂的含18种氨基酸的药物组合物，即，不含亚硫酸盐类抗氧化剂的复方氨基酸注射液18AA-V。本发明的另一目的在于提供制备ー种不含亚硫酸盐抗氧化剂的18种氨基酸的药物组合物的制备方法。
在这种药物组合物内，亚硫酸盐类的含量为0，因此这种药物组合物能彻底消除亚硫酸盐类对人体的毒副作用。本发明中所述的含十八中氨基酸的组合物的通用名也可称为复方氨基酸注射液18AA-V。按照本发明的技术方案，该药物组合物是由18种氨基酸及辅料按以下重量份比例制成的不同浓度的复方氨基酸注射液18AA-V，以组合物总量IOOOml计，其包括以下重量份数的组分盐酸精氨酸2. 32 3. 47g、盐酸组氨酸L 97 2. 96g、亮氨酸3. 04 4. 55g、异亮氨酸I. 36 2. 04g、盐酸赖氨酸2. 67 4. 0g、苯丙氨酸2. 27 3. 4g、苏氨酸I. 58
3.89g、丙氨酸L 51 2. 26g、脯氨酸O. 80 L 2g、酪氨酸O. 09 O. 14g、丝氨酸O. 54
0.81g、盐酸半胱氨酸O. 6 O. 7g、门冬氨酸O. 92 I. 38g、谷氨酸I. 58 2. 37g、依地酸钙钠O. 01 O. lg、木糖醇45 55g ;所述组合物pH值为5. 0-6. 2。优选地，以该组合物总量IOOOml计，其由以下重量份数的组分组成盐酸精氨酸
2.32 3. 47g、盐酸组氨酸I. 97 2. 96g、亮氨酸3. 04 4. 55g、异亮氨酸I. 36 2. 04g、盐酸赖氨酸2. 67 4. 0g、苯丙氨酸2. 27 3. 4g、苏氨酸I. 58 2. 37g、纟颜氨酸I. 09
1.64g、甲硫氨酸O. 85 I. 28g、色氨酸O. 32 O. 47g、甘氨酸2. 60 3. 89g、丙氨酸I. 51
2.26g、脯氨酸O. 80 L 2g、酪氨酸O. 09 O. 14g、丝氨酸O. 54 O. 81g、盐酸半胱氨酸O. 6 O. 7g、门冬氨酸O. 92 I. 38g、谷氨酸I. 58 2. 37g、依地酸钙钠O. 01 O. lg、木糖醇45 55g ;该组合物pH值为5. 0-6. 2 ;该组合物中总氨基酸含量为至少3%，优选至少5%，更优选5% 15%。本发明与现有技术对比，其创新点在于I、亮氨酸(C6H1) 3. 98g、异亮氨酸(C6H13NO2)、缬氨酸(C5H11NO2)比普通的氨基酸注射液(复方氨基酸注射液18AA-V)中的该三种组分各増加了大约5% (以各组分在市售复方氨基酸注射液18AA-V中的百分含量做100%计)，充分提供人体所需支链氨基酸；2、不含亚硫酸盐类抗氧剂；3、所述组合物PH值为5. 5-6. 2，更适合人体的用药依顺性。本发明的上述合物，以总量IOOOml计，其优选包括/或由以下重量份的组分组成盐酸精氨酸2. 6 3. 2g、盐酸组氨酸2. 2 2. 7g、亮氨酸3. 6 4. 4g、异亮氨酸I. 6 2. 0g、盐酸赖氨酸3. O 3. 67g、苯丙氨酸2. 5 3. lg、苏氨酸I. 8 2. lg、缴氨酸I. 3 I. 6g、甲硫氨酸O. 9 I. 2g、色氨酸O. 35 O. 43g、甘氨酸2. 9 3. 56g、丙氨酸I. 7 2. 0g、脯氨酸O. 9 I. lg、酪氨酸O. 10 O. 12g、丝氨酸O. 61 O. 75g、盐酸半胱氨酸O. 6 O. 7g、门冬氨酸I. O I. 25g、谷氨酸I. 8 2. lg、依地酸钙钠O. 03 O. 07g、木糖醇45 55g。该组合物pH值为5. 0-6. 2 ;组合物中总氨基酸含量为至少5%，优选5 15%。以上组合物中以IOOOml计，更优选，该组合物中依地酸钙钠O. 05g、木糖醇(C5H12O5) 50. 0g。在本发明的优选实施例中，该组合物总量1000ml计，其由以下重量份数的组分组成盐酸精氨酸(C6H14N4O2 · HCl) 2. 89g、盐酸组氨酸(C6H9N3O2 · HCl · H2O) 2. 46g、亮氨酸(C6H1) 3. 98g、异亮氨酸(C6H13NO2) I. 78g、盐酸赖氨酸(C6H14N2O2 · HCl) 3. 33g、苯丙氨酸(C9H11NO2) 2. 83g、苏氨酸(C4H9NO3) I. 97g、缬氨酸(C5H11NO2) I. 43g、甲硫氨酸(C5H11NO2S) I. 06g、色氨酸(C11H12N2O2)O. 39g、甘氨酸(C2H5NO2) 3. 24g、丙氨酸(C3H7NO2) I. 88g、脯氨酸(C5H9NO2) I. 00g、酪氨酸(C9H11NO3)O. llg、丝氨酸(C3H7NO3)O. 67g、盐酸半胱氨酸(C3H7NO2S HCl H2O) 0. 65g、门冬氨酸(C4H7NO4) I. 15g、谷氨酸(C5H9NO4) I. 97g、依地酸钙钠0. 05g、木糖醇(C5H12O5) 50g。在本发明的另一优选实施例中，以该组合物总量IOOOml计，其由以下重量份数的组分组成盐酸精氨酸2. 89g、盐酸组氨酸2. 46g、亮氨酸3. 78g、异亮氨酸I. 69g、盐酸赖氨酸3. 33g、苯丙氨酸2. 83g、苏氨酸I. 97g、缴氨酸I. 36g、甲硫氨酸I. 06g、色氨酸0. 39g、甘氨酸3. 24g、丙氨酸1.88g、脯氨酸1.008、酪氨酸().Hg、丝氨酸0. 67g、盐酸半胱氨酸0. 65g、门冬氨酸I. 15g、谷氨酸I. 97g、、依地 酸I丐钠0. 05g、木糖醇50. Og0采用盐酸半胱氨酸无疑增加了难溶氨基酸的溶解性，溶解于注射液后其离解为半胱氨酸，其既是氨基酸组合物的组成部分，又具有了抗氧化的作用。金属螯合剂依地酸钙钠为常用的金属螯合剂，因其不影响血钙浓度而取代了过去常规使用的依地酸二钠。而盐酸半胱氨酸和依地酸钙钠两者的协同抗氧作用取代了国家药品标准WS1-XG-004-2011复方氨基酸注射液(18-V)中的亚硫酸氢钠，彻底杜绝了亚硫酸盐类抗氧剂所致的毒副作用。该处方相配的工艺简单，非常适合大规模的工业化生产，值得推广应用。按照本发明的技术方案，该药物组合物是由18种氨基酸及辅料按以下重量份数比例制成的复方氨基酸注射液18AA-V(总氨基酸含量3% ):以该组合物总量IOOOml计，其由以下重量份数的组分组成盐酸精氨酸2. 89g、盐酸组氨酸2. 46g、亮氨酸3. 85g、异亮氨酸I. 75g、盐酸赖氨酸3. 33g、苯丙氨酸2. 83g、苏氨酸I. 97g、缴氨酸I. 40g、甲硫氨酸I. 06g、色氨酸0. 39g、甘氨酸3. 24g、丙氨酸I. 88g、脯氨酸I. 00g、酪氨酸0. Hg、丝氨酸0. 67g、盐酸半胱氨酸0. 65g、门冬氨酸I. 15g、谷氨酸I. 97g、依地酸I丐钠0. 05g、木糖醇50. 0g，水适量至 1000ml。按照本发明的技术方案，该药物组合物的制备方法，即，所述的含十八种氨基酸的组合物的制备方法，其特征在于包括以下步骤在容器中加注射用水，充氮气并加热至沸腾，首先加入少量依地酸钙钠，例如不超过依地酸钙钠总量的1/3，再依次投入余量的依地酸钙钠、胱氨酸、酪氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、谷氨酸、门冬氨酸、醋酸赖氨酸、苏氨酸、甘氨酸、精氨酸、丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸，搅拌至全溶；降温至500C，投入盐酸半胱氨酸、组氨酸、色氨酸，搅拌至全溶，加药用炭，脱炭，充氮，加注射用水至全量，经0. 22um过滤，灌装至输液瓶，充氮，加塞，密封、121°C灭菌。上述制备方法优选全过程均冲氮气保护，且其注射用水、药液的溶解氧控制在0. 5mg/L以内；以及，优选地，该制备方法所灌装的输液瓶中药液上部的空间的残氧量控制在0. 5%以内。本发明所述的复方氨基酸注射液(18AA-V)的制备方法，包括以下步骤加注射用水适量于浓配缸中，充氮气并加热至沸腾并保持15分钟，停止加热，首先加入部分(大约不超过依地酸钙钠总加入量的1/3)依地酸钙钠，再依次投入余量依地酸钙钠、胱氨酸、酪氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、谷氨酸、门冬氨酸、醋酸赖氨酸、苏氨酸、甘氨酸、精氨酸、丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸，搅拌至全溶；降温至50°C，投入盐酸半胱氨酸、组氨酸、色氨酸，搅拌至全溶，加入0.05% (w/v)的药用炭并保持15分钟，脱炭循环，泵入稀配缸，充氮，加注射用水至全量，经0. 22um滤器过滤灌装至输液瓶中，输液瓶中药液上部的空间的残氧量控制在0. 5%以内，充氮，加丁基胶塞，加铝盖后轧盖密封、121°C灭菌8-12分钟、灯检、包装；所述的注射用水、药液的溶解氧控制在0. 5mg/L以内。按照本发明的技术方案，该药物组合物的制备方法，其特征在于投料时部分依地酸钙钠应首先加入，例如先投入不足1/3量的依地酸钙钠，在将余量的依地酸钙钠与其他配料一起投料，能更好地产生并达到抗氧化的目的，实验证明，该方法比一次性加入依地酸钙钠的工艺方法，其抗氧性提高了至少10%。按照本发明的技术方案，该药物组合物的制备方法，其特征在于生产全过程均应冲氮气保护，其注射用水、药液的溶解氧应控制在0. 5mg/L以内，而输液瓶上部的空间残氧量应控制在0. 5%以内。本发明技术方案的基本原理是加入盐酸半胱氨酸增加其溶解性，对配方中对氧敏感的色氨酸、酪氨酸、甲硫氨酸等起到保护作用，依地酸钙钠具有较好的金属离子螯合性能，抑制了溶液中微量金属离子的催化作用，与半胱氨酸起协同保护作用。生产过程中采用氮气保护，尽可能减少溶液中氧含量。目前国内外市售静脉给药制剂中均有使用金属螯合剂依地酸二钠。由于依地酸二钠可与钙离子结合成可溶的络合物引起钙的减少，静脉制剂使用依地酸二钠会导致血钙下降，而依地酸钙钠与钙离子不发生螯合，不致产生低钙情况。本发明优点在于采用盐酸半胱氨酸作为抗氧剂，增加了难溶性氨基酸的溶解性。金属螯合剂依地酸钙钠为常用的金属螯合剂，因其不影响血钙浓度而取代了过去常规使用的依地酸二钠。依地酸钙钠与半胱氨酸的协同抗氧作用取代了国家药品标准WS1-XG-004-2011复方氨基酸注射液(18-V)中的亚硫酸氢钠，彻底杜绝了亚硫酸盐类抗氧剂所致的毒副作用。其冲氮水平适当，对生产设备要求不高，非常适合大规模的工业化生产，值得推广应用。以下通过有关试验对本发明的技术方案作进一步说明盐酸半胱氨酸及依地酸钙钠用量筛选试验。按上述组合物复方氨基酸注射液18AA-V(总氨基酸含量11. 4% )配方,按本技术方案制备样品各15瓶,置60°C恒温箱中，分别于0日、5日、10日时取样检测样品的性状、PH值、吸光度，每次检测5个样并取平均值，以10日样品的吸光度结果为判断标准。从结果可知，单独使用半胱氨酸或依地酸钙钠效果均不佳，说明两者确实存在协同抗氧作用，依地酸钙钠作为金属螯合剂，用量超过一定量后并无增效作用，上表结果说明，当依地酸钙钠用量在0. 01 0. lg/L时已经足够，优选0. 05g/L0盐酸半胱氨酸经筛选，用量在0. 6 0. 7g/L时即可，优选0. 65g/L，再增加用量并不能显著提升抗氧效果。因此，本技术方案最终采用了盐酸半胱氨酸0. 6 0. 7g/L，依地酸钙钠0.01 0. lg/L的用量。组合物样品加速试验。按本技术方案中复方氨基酸注射液18AA-V (总氨基酸含量3% )配方及其制备方法，制成样品50瓶，置40°C加速试验箱中，分别于0月、I月、2月、3月、6月时按国家药品标准WS1-XG-004-2011取样检测，结果均符合标准规定，表明本技术方案所制备的产品能达到复方氨基酸注射液18AA-V的标准要求。其具体数据如下表
检测项目~ 国家标准0月I月2月3月6月结论权利要求
1.ー种含十八种氨基酸的组合物，其特征在干，以组合物总量IOOOml计，该组合物包括以下重量份数的组分盐酸精氨酸2. 32 3. 47g、盐酸组氨酸I. 97 2. 96g、亮氨酸3. 04 4. 55g、异亮氨酸I. 36 2. 04g、盐酸赖氨酸2. 67 4. 0g、苯丙氨酸2. 27 3. 4g、苏氨酸I. 58 2. 37g、缴氨酸I. 09 I. 64g、甲硫氨酸O. 85 I. 28g、色氨酸O. 32 O. 47g、甘氨酸2. 60 3. 89g、丙氨酸I. 51 2. 26g、脯氨酸O. 80 I. 2g、酪氨酸O. 09 O. 14g、丝氨酸O. 54 O. 81g、盐酸半胱氨酸O. 6 O. 7g、门冬氨酸O. 92 I. 38g、谷氨酸I. 58 2. 37g、依地酸钙钠O. 01 O. lg、木糖醇45 55g ;该组合物的pH值为5. 0-6. 2。
2.如权利要求I所述的组合物，其特征在干，以总量IOOOml计，其包括以下重量份数的组分盐酸精氨酸2. 6 3. 2g、盐酸组氨酸2. 2 2. 7g、亮氨酸3. 6 4. 4g、异亮氨酸I. 6 2. 0g、盐酸赖氨酸3. O 3. 67g、苯丙氨酸2. 5 3. lg、苏氨酸I. 8 2. lg、纟颜氨酸I. 3 I. 6g、甲硫氨酸O. 9 I. 2g、色氨酸O. 35 O. 43g、甘氨酸2. 9 3. 56g、丙氨酸I. 7 2. 0g、脯氨酸O. 9 I. lg、酪氨酸O. 10 O. 12g、丝氨酸O. 61 O. 75g、盐酸半胱氨酸O. 6 O. 7g、门冬氨酸I. O I. 25g、谷氨酸I. 8 2. lg、依地酸钙钠O. 03 O. 07g、木糖醇45 55g ;该组合物pH值为5. 0-6. 2 ;该组合物中总氨基酸含量为至少3%。
3.如权利要求I或2所述的组合物，其特征在干，以总量IOOOml计，其由以下重量份数的组分组成盐酸精氨酸2. 89g、盐酸组氨酸2. 46g、亮氨酸4. 36g、异亮氨酸I. 96g、盐酸赖氨酸3. 33g、苯丙氨酸2. 83g、苏氨酸L 97g、缴氨酸L 50g、甲硫氨酸I. 06g、色氨酸O. 39g、甘氨酸3. 24g、丙氨酸I. 88g、脯氨酸I. 00g、酪氨酸0. llg、丝氨酸0. 67g、盐酸半胱氨酸0. 65g、门冬氨酸I. 15g、谷氨酸I. 97g、依地酸钙钠0. 05g、木糖醇50. Og ;该组合物中总氨基酸含量为至少5%。
4.如权利要求I 3任一项所述的组合物，其特征在于，该组合物中总氨基酸含量为5 15%。
5.—种权利要求I所述的含十八种氨基酸的组合物的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤在容器中加注射用水，充氮气并加热至沸腾，首先加入1/3量以下依地酸钙钠，再依次投入余量依地酸钙钠、胱氨酸、酪氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、谷氨酸、门冬氨酸、醋酸赖氨酸、苏氨酸、甘氨酸、精氨酸、丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸，搅拌至全溶；降温至50°C，投入盐酸半胱氨酸、组氨酸、色氨酸，搅拌至全溶，加药用炭，脱炭，充氮，加注射用水至全量，经0. 22um过滤，灌装至输液瓶，充氮，加塞，密封、121 °C灭菌。
6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在干，该制备方法的全过程均冲氮气保护，且其注射用水、药液的溶解氧控制在0. 5mg/L以内。
7.如权利要求5或6所述的制备方法，其特征在干，该制备方法所灌装的输液瓶中药液上部的空间的残氧量控制在0.5%以内。
8.如权利要求5所述的制备方法，其特征在干，该方法包括以下步骤加注射用水适量于浓配缸中，充氮气并加热至沸腾并保持15分钟，停止加热，首先加入1/3量以下的依地酸钙钠，再依次投入余量依地酸钙钠、胱氨酸、酪氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、谷氨酸、门冬氨酸、醋酸赖氨酸、苏氨酸、甘氨酸、精氨酸、丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸，搅拌至全溶；降温至50 V，投入盐酸半胱氨酸、组氨酸、色氨酸，搅拌至全溶，加入·0. 05% (w/v)的药用炭并保持15分钟，脱炭循环，泵入稀配缸，充氮，加注射用水至全量，经·0.22um滤器过滤灌装至输液瓶中，输液瓶中药液上部的空间的残氧量控制在0. 5%以内，充氮，加丁基胶塞，加铝盖后轧盖密封、121°C灭菌8-12分钟、灯检、包装；所述的注射用水、药液的溶解氧控制在O. 5mg/L以内。全文摘要
本发明提供了一种含十八种氨基酸的组合物及其制备方法，该组合物为复方氨基酸注射液18AA-V，其由盐酸精氨酸2.32～3.47g、盐酸组氨酸1.97～2.96g、亮氨酸3.04～4.55g、异亮氨酸1.36～2.04g、盐酸赖氨酸2.67～4.0g、苯丙氨酸2.27～3.4g、苏氨酸1.58～2.37g、缬氨酸1.09～1.64g、甲硫氨酸0.85～1.28g、色氨酸0.32～0.47g、甘氨酸2.60～3.89g、丙氨酸1.51～2.26g、脯氨酸0.80～1.2g、酪氨酸0.09～0.14g、丝氨酸0.54～0.81g、盐酸半胱氨酸0.6～0.7g、门冬氨酸0.92～1.38g、谷氨酸1.58～2.37g、依地酸钙钠0.01～0.1g、木糖醇45～55g，水适量至1000ml配制而成；该组合物不含亚硫酸盐类抗氧剂，使所得产品在临床上使用更安全。
文档编号A61K31/197GK102743378SQ20121026509
公开日2012年10月24日 申请日期2012年7月30日 优先权日2012年7月30日
发明者杜勇, 肖云彩 申请人:李慧