专利名称：乙型脑炎减毒活疫苗冻干保护剂的制作方法
技术领域：
本发明属于疫苗生产工艺技术领域，尤其涉及乙型脑炎减毒活疫苗的冻干保护剂及其制备方法，本发明还涉及一种乙型脑炎减毒活疫苗冻干剂。
背景技术：
目前市场上的乙型脑炎减毒活疫苗皆为冻干产品。2001年，Sakaguchi M等研究发现，接种乙型脑炎疫苗致全身性皮肤过敏反应的接种者体内存在抗明胶的IgG和IgE抗体。1987年Swanson MC等研究者在接种灭活狂犬病疫苗者体内检测到抗人血白蛋白和β -丙内脂的抗IgG和IgE抗体。上述研究结果说明，疫苗接种后过敏反应与疫苗冻干保护剂配方中动物源性成份密切相关。因此，生产无动物源性成份的冻干乙型脑炎减毒活疫苗势在必行。
发明内容
本发明的目的是提供一种乙型脑炎减毒活疫苗冻干保护剂，该冻干保护剂可以在保持乙型脑炎减毒活疫苗冻干剂稳定性的同时，减少乙型脑炎减毒活疫苗冻干剂的副反应发生率。本发明的另一目的是提供一种乙型脑炎减毒活疫苗冻干剂。上述目的是通过以下技术方案实现的一种乙型脑炎减毒活疫苗冻干保护剂，该冻干保护剂以Earl’ s液为溶剂，各成分的浓度为蔗糖6 28g/100ml、海藻糖3 12g/100ml、右旋糖酐5 24g/100ml。所述右旋糖酐为右旋糖酐40。所述的乙型脑炎减毒活疫苗冻干保护剂的制备方法是将蔗糖、海藻糖、右旋糖酐溶解于Earl’ s液后除菌过滤。优选的，所述的除菌过滤是采用O. 22um的微孔滤膜除菌过滤。一种乙型脑炎减毒活疫苗冻干剂，由乙型脑炎减毒活疫苗和冻干保护剂组成，所述冻干保护剂以Earl’ s液为溶剂，各成分的浓度为蔗糖6 28g/100ml、海藻糖3 12g/100ml、右旋糖酐 5 24g/100ml。所述乙型脑炎减毒活疫苗与冻干保护剂的体积比为广3 :1。所述的乙型脑炎减毒活疫苗冻干剂的制备方法是，将所述乙型脑炎减毒活疫苗与冻干保护剂混合后，快速降温至-6(T-40°C，在此温度下维持2飞小时后，抽真空至IOPa以下，然后升温至-2(HrC，14 16小时之后以2 5°C /小时的速度升温至15 25°C，维持6 8小时后即得。微生物因素和冻干保护剂配方因素决定了冻干保护剂的保护功能。本发明涉及的新型乙型脑炎减毒活疫苗冻干保护剂配方成份搭配合理，并经过反复验证，冻干曲线设计合理。产品冻干后，根据样品放置于不同温度和不同保存期条件下的病毒效价测定等结果，冻干曲线不断优化，已达到理想的保护效果。本发明的最大优点是利用糖、醇等成份替代了原有乙脑减毒活疫苗冻干保护剂中存在的明胶、人血白蛋白等动物蛋白等成份。此配方成份能在37°C和2l°C条件下长效保护乙型脑炎减毒活疫苗，并且本发明配方配制方法及成份简单，从而有效节约疫苗生产成本。
具体实施例方式实施例I(I)冻干保护剂的配方及配制方法称取各成份蔗糖12. 5g、海藻糖5g、右旋糖苷40 5g，加入Earl ’ s液至IOOml ;将以上溶液用孔径O. 22um滤器除菌过滤即得本发现的冻干保护剂。(2)乙型脑炎减毒活疫苗毒株经过培养后，进行无菌检测和病毒滴度测定，将合格的疫苗和已配制完成的冻干保护剂I. 5:1混合，充分摇匀，按既定容量分装后立即进行冷冻干燥。·(3)将分装好的疫苗装入冻干机箱体内，在2小时内缓慢降温至_55°C，在此温度下维持3小时，抽真空至IOPa以下开始升温，10小时内升至_25°C，之后每小时2°C的速度升温至10°C，维持8小时加塞出箱，冻干全程在23小时以内。实施例2称取各成份鹿糖6g、海藻糖3g、右旋糖苷9g,加入Earl’s液至IOOml ;将以上溶液用孔径O. 22um滤器除菌过滤即得本发现的冻干保护剂。乙型脑炎减毒活疫苗毒株经过培养后，进行无菌检测和病毒滴度测定，将合格的疫苗和已配制完成的冻干保护剂2:1混合，充分摇匀，按既定容量分装后立即进行冷冻干燥。将分装好的疫苗装入冻干机内，在2小时内缓慢降温至_45°C，在此温度下维持4小时，抽真空至IOPa以下开始升温，10小时内升至-20°C，之后每小时2°C的速度升温至15°C，维持8小时加塞出箱，冻干全程在24小时以内。实施例3称取各成份鹿糖28g、海藻糖12g、右旋糖苷24g、加入Earl’ s液至IOOml ;将以上溶液用孔径O. 22um滤器除菌过滤即得本发现的冻干保护剂。乙型脑炎减毒活疫苗毒株经过培养后，进行无菌检测和病毒滴度测定，将合格的疫苗原液和已配制完成的冻干保护剂3:1混合，充分摇匀，按既定容量分装后立即进行冷冻干燥。将分装好的疫苗装入冻干机箱体内，在2小时内缓慢降温至_45°C，在此温度下维持3小时，抽真空至IOPa以下开始升温，8小时内升至-25°C，之后每小时2°C的速度升温至15°C，维持6小时加塞出箱，冻干全程在19小时以内。冻干产品的测试将实施例广3的乙型脑炎减毒活疫苗冻干剂，置于37°C、2 8°C条件下保存，不同时间抽样，测定病毒滴度及观察物理性状，结果见表1、2、3。表I冻干后产品物理性状及病毒滴度
权利要求
1.乙型脑炎减毒活疫苗冻干保护剂，其特征在于以Earl’s液为溶剂，各成分及其浓度为蔗糖6 28g/100ml、海藻糖3 12g/100ml、右旋糖酐5 24g/100ml。
2.根据权利要求I所述的乙型脑炎减毒活疫苗冻干保护剂，其特征在于所述右旋糖酐为右旋糖酐40。
3.根据权利要求I或2所述的乙型脑炎减毒活疫苗冻干保护剂的制备方法，其特征在于将蔗糖、海藻糖、右旋糖酐溶解于Earl’ s液后除菌过滤。
4.根据权利要求3所述的乙型脑炎减毒活疫苗冻干保护剂的制备方法，其特征在于所述的除菌过滤是采用O. 22um的微孔滤膜除菌过滤。
5.乙型脑炎减毒活疫苗冻干剂，由乙型脑炎减毒活疫苗和冻干保护剂组成，其特征在于所述冻干保护剂以Earl’ s液为溶剂，各成分及其浓度为蔗糖6 28g/100ml、海藻糖3 12g/100ml、右旋糖酐 5 24g/100ml。
6.根据权利要求5所述的乙型脑炎减毒活疫苗冻干剂，其特征在于所述乙型脑炎减毒活疫苗与冻干保护剂的体积比为1 3 :1。
7.根据权利要求5或6所述的乙型脑炎减毒活疫苗冻干剂的制备方法，其特征在于将所述乙型脑炎减毒活疫苗与冻干保护剂混合后，快速降温至-6(T-40°C，在此温度下维持2飞小时后，抽真空至IOPa以下，然后升温至_2(HrC，14 16小时之后以2飞。C /小时的速度升温至15 25°C，维持6 8小时后即得。
全文摘要
本发明公开了一种乙型脑炎减毒活疫苗冻干保护剂，该冻干保护剂以Earl’s液为溶剂，各成分的浓度为蔗糖6～28g/100ml、海藻糖3～12g/100ml、右旋糖酐5～24g/100ml。本发明还公开了一种由上述冻干保护剂制成的乙型脑炎减毒活疫苗冻干剂。本发明利用糖、醇等成份替代了乙脑减毒活疫苗冻干保护剂中存在的明胶、人血白蛋白等动物蛋白等成份，能在37℃和2～8℃条件下长效保护乙型脑炎减毒活疫苗，并且本发明的冻干保护剂配制方法及成份简单，能有效降低疫苗的生产成本。
文档编号A61K47/36GK102921002SQ20121049122
公开日2013年2月13日 申请日期2012年11月28日 优先权日2012年11月28日
发明者李黎, 段凯, 吕文利, 祁春华, 包春雷, 李毅 申请人:武汉生物制品研究所有限责任公司