针对TL1a的抗体及其用途

针对TL1a的抗体及其用途
【专利摘要】本公开内容提供包含抗体的抗原结合结构域的TNF-样配体1a(TL1a)-结合蛋白，其特异性结合到TL1a上并抑制TL1a与死亡受体3(DR3)的相互作用并且不抑制TL1a与诱饵受体3(DcR3)的相互作用。本公开内容还提供所述TL1a-结合蛋白的用途。
【专利说明】针对TL1 a的抗体及其用途
[0001] 相关申请数据
[0002] 本申请要求2011年9月30日提交的题为"针对TLla的抗体及其用途"的澳大利 亚专利申请号2011904042和2011年9月30日提交的题为"针对TLla的抗体及其用途"的 美国专利申请号61/541，590的优先权。这些申请的全部内容都通过引用结合到本文中。
[0003] 序列表
[0004] 本申请与电子形式的序列表一起提交。该序列表的全部内容通过引用结合到本文 中。
[0005] 领域
[0006] 本公开内容涉及与TLla结合的蛋白质及其用途，例如在治疗、预防、诊断或预后 中的用途。
[0007] 背景
[0008] TNF-样配体la(TLla，同义词：TNF超家族成员15(TNFSF15) ;TL1和VEGI)是肿 瘤坏死因子超家族成员，其由抗原呈递细胞（包括树突细胞、B细胞和巨噬细胞）、CD4+和 CD8+T细胞和内皮细胞表达并且可以表达在细胞表面或以可溶性细胞因子形式分泌。TLla 受体，死亡受体3 (DR3)由包括CD4+和CD8+T细胞、NK细胞、NKT细胞和F0XP3+调节T (Treg) 细胞在内的多种细胞表达。
[0009] TLla还可结合诱饵受体（DcR3)，其是DR3的竞争性抑制剂。DcR3亦起到Fas-配 体（Fas-L)和淋巴毒素-样诱导蛋白的诱饵受体的作用，其与糖蛋白D竞争结合T细胞上 的疱疹病毒侵入介体（LIGHT)。因此，DcR3是若干信号转导途径的重要调节剂。
[0010] TLla/DR3信号转导途径涉及到与人类疾病相关的若干生物学系统。例如，已经证 明TLla在免疫和血管生成中起作用。
[0011] 使用TLla和/或DR3缺陷型小鼠，研究人员还已证明抑制该途径在若干免疫介导 的病况中可提供预防性或治疗性益处，所述病况例如实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE ;多 发性硬化模型）、结肠炎、炎性肠病、哮喘和关节炎。还已证明TLla促进泡沫细胞和动脉粥 样硬化斑块的形成。
[0012] 根据前述，技术人员显而易见的是TLla在涉及若干重要的人类疾病的生物学过 程中起到重要作用。因此，抑制TLla活性的化合物是合乎需要的，例如对于其治疗、预防、 诊断和预后用途而言。
[0013] 概述
[0014] 本发明人已经制备了包含抗体的抗原结合结构域的TLla-结合蛋白，其能够特异 性结合到TLla上并抑制TLla与DR3的相互作用（从而中和TLla活性），而不抑制TLla与 DcR3的相互作用。不受任何理论或作用方式的束缚，本发明人推断这样的TLla-结合蛋白 可能能够降低或阻止TLla通过DR3的信号转导，而不显著地干扰DcR3和TLla的稳态相互 作用。这保留了 DcR3对TLla-DR3相互作用的天然拮抗效应，其可能是有利的，因为DcR3 也调节可用于结合到它们的受体（分别是Fas和H-VEM)上的游离Fas-L和LIGHT的数量。 因为Fas-介导的杀伤在癌症监测中起作用，增加结合到Fas-L的DcR3的量的可能的下游 结果可包括增加对癌症的敏感性。此外，不受任何理论或作用方式的束缚，特异性抑制TLla 和DR3(而非DcR3)的相互作用的蛋白质，在治疗疾病而不损害安全性中可为有利的。
[0015] 还发现了由本发明人鉴定的TLla-结合蛋白亚类在低浓度时抑制或预防由人 TLla所诱导的TF-1细胞的细胞凋亡，即所述抗体具有低的有效浓度或EC5(I。能抑制或预防 TLla活性（例如TLla-诱导的TF-1细胞的细胞凋亡）的TLla-结合蛋白在本文中有时称 为高效力TLla-结合蛋白。
[0016] 本发明人还已经鉴定了被高效力TLla-结合蛋白结合的TLla的一个区域，所述高 效力TLla-结合蛋白特异性结合到TLla上并抑制TLla与DR3的相互作用，而不抑制TLla 与DcR3相互作用的能力。
[0017] 由本发明人鉴定的TLla-结合蛋白构成了多种治疗性/预防性/诊断性/预后性 用途的基础。本发明人已证明了本公开内容的TLla-结合蛋白治疗公认的结肠炎模型的用 途，所述蛋白显示出功效至少等于用于该病况的现有治疗标准。
[0018] 因此，本公开内容提供分离的或重组的包含抗体的抗原结合结构域的TLla-结合 蛋白，其中所述抗原结合结构域特异性结合到TLla上，并且其中所述TLla-结合蛋白抑制 TLla与DR3的相互作用，而不抑制TLla与DcR3的相互作用。
[0019] 在一个实例中，所述TLla-结合蛋白不能可检测地降低TLla与DcR3的相互作用。 例如，使用竞争酶联免疫吸附测定（ELISA)评价TLla-结合蛋白对TLla和DcR3相互作用 的效应。例如，将所述TLla-结合蛋白与TLla(例如人TLla) -起孵育，然后与包含融合到 抗体Fc区的DcR3(例如人DcR3(hDcR3))的多肽（"DcR3/Fc"）接触并检测结合的TLla水 平。在一个实例中，在所述蛋白存在或不存在时结合的TLla水平并非显著不同和/或差异 不足以允许计算EC 5(i。
[0020] 在一个实例中，在TLla-结合蛋白存在时对TLla和DcR3(或DcR3/Fc)相互作用 的抑制水平（表示为所述蛋白不存在时的结合水平的百分率）为25%或更少、或22%或更 少、或20%或更少、或18%或更少、或15%或更少、或12%或更少、或10%或更少、或7%或 更少、或5%或更少。
[0021] 在一个实例中，通过将浓度大约2 μ g/ml的DcR3/Fc或包含融合到抗体Fc区的 DR3(例如人DR3(hDR3))的多肽（DR3/Fc)固定在固体或半固体表面（例如ELISA板）上， 评价TLla-结合蛋白对TLla和DR3或DcR3相互作用的抑制能力。再使所述TLla-结合蛋 白与生物素化人TLla (浓度大约1 μ g/ml)接触大约30分钟，然后加入到固定化的DcR3/ Fc或DR3/Fc上。洗涤之后，检测结合的TLla。为了测定结合或抑制百分率，通过表示为在 TLla-结合蛋白不存在时的TLla与固定化DcR3/Fc或DR3/Fc的最大结合的百分率，将数据 标准化。通过计算多个浓度的TLla-结合蛋白的抑制水平，可测定EC 5Q。
[0022] 在一个实例中，所述TLla-结合蛋白抑制TLla与DR3(或DR3/Fc)的相互作用，但 不抑制TLla和DcR3 (或DcR3/Fc)的相互作用。
[0023] 例如，所述TLla-结合蛋白抑制DR3/FC和TLla相互作用，其EC5Q为大约20nM至 大约10fM，或EC 5(I为20nM或更少，例如，15nM或更少，例如，llnM或更少，例如5nM或更少。 在一个实例中，EC 5(I为5nM或更少。例如，EC5(I为3nM或更少。例如，EC5(I为2. 5nM或更少。 例如，EC5(I为InM或更少。例如，EC5(I为0. 5nM或更少。在一个实例中，使用竞争酶联免疫吸 附测定（ELISA)评价EC5(I。例如，将不同浓度的TLla-结合蛋白与TLla(例如人TLla)(例 如大约1 μ g/mlTLla) -起孵育，然后与DR3/FC (例如大约2 μ g/mlDR3/Fc)接触并检测结 合的TLla水平。检测到对TLla结合的最大抑制的一半时的蛋白浓度被认为是EC5Q。
[0024] 在一个实例中，所述TLla-结合蛋白通过干扰TLla和DR3相互作用而在细胞内或 细胞上中和TLla活性。
[0025] 在一个实例中，所述TLla-结合蛋白结合到TLla的胞外域、例如人TLla的胞外域 上。
[0026] 在一个实例中，所述TLla-结合蛋白结合到由哺乳动物细胞、例如人细胞产生的 人TLla上。
[0027] 本公开内容的示例性TLla-结合蛋白降低了在人TLla、例如由哺乳动物细胞（例 如人细胞）产生的人TLla (例如，每毫升培养物大约100ng人TLla)和环己酰亚胺存在时 培养的TF-1细胞的细胞凋亡水平。例如，将大约7xl0 4至8xl04TF-l细胞（例如7. 5xl04 细胞）与每毫升培养物大约1 μ g人TLla和环己酰亚胺接触。例如，所述TLla-结合蛋白 降低TF-1细胞的细胞凋亡水平，其EC5(I(即达到由所述TLla-结合蛋白达到的TLla-诱导 的TF-1细胞的细胞凋亡的最大抑制的50%的TLla-结合蛋白浓度）为25nM或更少。在 一个实例中，EC 5Q为5nM或更少。在一个实例中，EC5Q为2nM或更少。在一个实例中，EC5Q 为1.5nM或更少或1.2nM或更少或1. InM或更少。在一个实例中，EC5(i为InM或更少。在 一个实例中，EC5Q为0. 75nM或更少。在一个实例中，EC5Q为0. 3nM或更少。在一个实例中， EC5Q为0. InM或更少。在一个实例中，EC5(I为大约1. 5nM至大约10fM，例如大约InM至大约 50fM，例如大约InM至大约100fM。
[0028] 在一个实例中，所述TLla-结合蛋白结合到细胞表面的TLla上，例如当使用流 式细胞术检测时，其EC 5(I(即达到由所述TLla-结合蛋白达到的最大细胞结合的50%的 TLla-结合蛋白浓度）为大约10nM或更少。在一个实例中，用大约2xl05至3xl05细胞（例 如2. 5xl05细胞）进行流式细胞术。在一个实例中，EC5(i为5nM或更少。在一个实例中，EC 5(i 为2nM或更少。在一个实例中，EC5(i为从大约10. OnM或5. OnM或1. OnM或0. 5nM或0. InM 至大约10fM。
[0029] 本公开内容还提供分离的或重组的包含抗体的抗原结合结构域的TLla-结合蛋 白，其中在竞争ELISA中所述抗原结合结构域特异性结合到TLla上并且抑制生物素化TLla 与DR3/Fc的相互作用，其EC5(I为大约2. 5nM或更少，例如InM或更少或从大约2. 5nM、或大 约1. OnM、或大约0. 5nM、或大约0. InM至大约10fM，
[0030] 其中将浓度大约2μ g/mL的DR3/Fc固定在固体或半固体基质（例如固体基质， 例如ELISA板）上，并且其中使浓度大约1 μ g/mL的所述生物素化TLla与浓度范围大约 10 μ g/mL至大约0. 01 μ g/mL的TLla结合蛋白接触大约30分钟，然后再与固定化的DR3/ Fc接触，
[0031] 并且其中与所述TLla-结合蛋白不存在时的生物素化TLla与DcR3/Fc的结合水 平相比，在竞争ELISA中所述TLla-结合蛋白不能可检测地降低生物素化TLla与DcR3/Fc 的相互作用，其中将浓度大约2μ g/mL的DcR3/Fc固定在固体或半固体基质（例如固体基 质，例如ELISA板）上，其中使浓度大约1 μ g/mL的所述生物素化TLla与浓度大约10 μ g/ mL至0. 1 μ g/mL的所述TLla-结合蛋白接触大约30分钟，然后再与固定化的DcR3/Fc接 触。
[0032] 本公开内容还提供分离的或重组的包含抗体的抗原结合结构域的TLla-结合蛋 白，其中在竞争ELISA中所述抗原结合结构域特异性结合到TLla上并抑制生物素化TLla 与DR3/Fc的相互作用，其EC5(I为大约2. 5nM或更少，例如InM或更少或从大约2. 5nM、或大 约1. OnM、或大约0. 5nM、或大约0. InM至大约10fM，
[0033] 其中将浓度大约2μ g/mL的DR3/Fc固定在固体或半固体基质（例如固体基质， 例如ELISA板）上，并且其中使浓度大约1 μ g/mL的所述生物素化TLla与浓度范围大约 10 μ g/mL至大约0. 01 μ g/mL的TLl-a结合蛋白接触大约30分钟，然后再与固定化的DR3/ Fc接触，
[0034] 并且其中与所述TLla-结合蛋白不存在时的生物素化TLla与DcR3/Fc的结合水 平相比，在竞争ELISA中所述TLla-结合蛋白不能可检测地降低生物素化TLla与DcR3/ Fc的相互作用，并且其中将浓度大约2 μ g/mL的DcR3/Fc固定在固体或半固体基质（例如 固体基质，例如ELISA板）上，其中使浓度大约1 μ g/mL的所述生物素化TLla与浓度大约 10 μ g/mL至0. 1 μ g/mL的所述TLla-结合蛋白接触大约30分钟，然后再与固定化的DcR3/ Fc接触，
[0035] 并且其中所述TLla-结合蛋白降低在由人细胞产生的人TLla和环己酰亚胺存在 时培养的TF-1细胞的细胞凋亡水平，其EC 5Q (即达到由所述TLla-结合蛋白达到的TLla-诱 导的TF-1细胞的细胞凋亡的最大抑制的50%的TLla-结合蛋白浓度）为25nM或更少，或 从大约 1. 5nM 或 1. OnM 或 0. 5nM 或 0. InM 或 0. 05nM 至大约 10fM，
[0036] 其中使大约7. 5xl04TF_l细胞与每毫升培养物大约100ng人TLla和大约10 μ g/ ml环己酰亚胺以及浓度大约5 μ g/mL或更少的所述TLla-结合蛋白接触大约4-5小时。
[0037] 在一个实例中，TLla在一个位点上被生物素化，即生物素连接到TLla中的仅一个 氨基酸上。
[0038] 在一个实例中，与在TLla-结合蛋白不存在时的生物素化TLla与DcR3/Fc的结合 水平相比，所述TLla-结合蛋白在竞争ELISA中不能可检测地降低生物素化TLla与DcR3/ Fc的相互作用，其中使浓度大约1 μ g/mL的所述生物素化TLla与浓度大约100 μ g/mL的所 述TLla-结合蛋白接触大约30分钟，然后再与固定化的DcR3/Fc接触。
[0039] 在一个实例中，与在TLla-结合蛋白不存在时的生物素化TLla与DcR3/Fc的结合 水平相比，所述TLla-结合蛋白在竞争ELISA中不能可检测地降低生物素化TLla与DcR3/ Fc的相互作用，其中使浓度大约1 μ g/mL的所述生物素化TLla与浓度大约10 μ g/mL的所 述TLla-结合蛋白接触大约30分钟，然后再与固定化的DcR3/Fc接触。
[0040] 在一个实例中，所述TLla-结合蛋白降低TF-1细胞的细胞凋亡水平，其EC5Q为 22nM或更少。在一个实例中，EC 5(I为10nM或更少。在一个实例中，EC5(I为5nM或更少。在 一个实例中，EC 5(I为2nM或更少。在一个实例中，EC5(I为1.5nM或更少或1.2nM或更少或 1. InM或更少。在一个实例中，EC5Q为InM或更少。在一个实例中，EC5Q为0. 75nM或更少。 在一个实例中，EC5Q为0. 3nM或更少。在一个实例中，EC5Q为0. InM或更少。
[0041] 另外或备选地，本公开内容提供分离的或重组的包含抗体的抗原结合结构域的 TLla-结合蛋白，其中所述抗原结合结构域特异性结合到TLla上，其中所述TLla-结合蛋白 抑制TLla与DR3的相互作用而不抑制TLla与DcR3的相互作用，并且其中所述TLla-结合 蛋白与包含SEQ ID N0:202中给出的序列的可溶性人TLla的突变形式结合，所述序列中位 置32的精氨酸已被丙氨酸置换和/或位置85的精氨酸已被丙氨酸置换，所述TLla-结合 蛋白的水平与结合到包含SEQ ID NO:202中给出的序列的可溶性人TLla上的TLla-结合 蛋白水平相比至少低75%。
[0042] 在一个实例中，将浓度大约1 μ g/mL的可溶性人TLla的突变形式固定在固体或半 固体基质（例如固体基质，例如ELISA板）上，并且其中再将浓度范围为大约10 μ g/mL至 大约0. 01 μ g/mL的所述TLla结合蛋白与固定化的突变TLla接触。
[0043] 在一个实例中，所述TLla-结合蛋白与包含SEQ ID N0:202中给出的序列的可溶 性人TLla的突变形式结合，所述序列中位置32的精氨酸已被丙氨酸置换和/或位置85的 精氨酸已被丙氨酸置换，所述TLla-结合蛋白的水平不大于结合到包含SEQ ID N0:202中 给出的序列的可溶性人TLla上的TLla-结合蛋白水平的25%。例如，当测试浓度10 μ g/ mL的所述TLla-结合蛋白时，所述TLla-结合蛋白与可溶性人TLla的突变形式的结合水平 不大于结合到可溶性人TLla上的TLla-结合蛋白水平的25%。
[0044] 另外或备选地，本公开内容提供分离的或重组的包含抗体的抗原结合结构域的 TLla-结合蛋白，其中所述抗原结合结构域特异性结合到TLla上，并且其中所述TLla-结 合蛋白抑制TLla与DR3的相互作用而不抑制TLla与DcR3的相互作用，并且其中所述 TLla-结合蛋白与包含SEQ ID N0:202中给出的序列的可溶性人TLla的突变形式结合， 所述序列中位置32的精氨酸已被丙氨酸置换和/或位置85的精氨酸已被丙氨酸置换，所 述TLla-结合蛋白水平与结合到包含SEQ ID N0:202中给出的序列的可溶性人TLla上的 TLla-结合蛋白水平相比至少低75%，
[0045] 其中将浓度大约1 μ g/mL的TLla的突变形式固定在固体或半固体基质上，并且其 中再将浓度为10 μ g/mL的所述TLla结合蛋白与固定化的突变TLla接触。
[0046] 在一个实例中，可溶性人TLla的突变形式包含其中位置32的精氨酸已被丙氨酸 置换的SEQ ID N0:202中给出的序列。
[0047] 在一个实例中，可溶性人TLla的突变形式包含其中位置85的精氨酸已被丙氨酸 置换的SEQ ID N0:202中给出的序列。
[0048] 在一个实例中，可溶性人TLla的突变形式包含其中位置32的精氨酸已被丙氨酸 置换并且其中位置85的精氨酸已被丙氨酸置换的SEQ ID N0:202中给出的序列。
[0049] 在一个实例中，所述TLla-结合蛋白与可溶性人TLla的突变形式的结合水平与结 合到包含SEQ ID N0:202中给出的序列的可溶性人TLla上的TLla-结合蛋白水平相比低 至少80%或85%或90%或95%。
[0050] 在一个实例中，所述TLla-结合蛋白不能可检测地结合到可溶性人TLla的突变形 式上。
[0051] 在一个实例中，使用表面等离子体共振评价所述TLla-结合蛋白与可溶性人TLla 或其突变形式的结合。例如，将所述可溶性人TLla或其突变形式固定化（例如浓度大约 1 μ g/mL)并且使所述TLla-结合蛋白（例如浓度大约500ng/mL)接触到该固定化的可溶 性人TLla或其突变形式，并通过表面等离子体共振检测结合。通过比较结合到可溶性人 TLla或其突变形式上的水平，可进行比较以确定其结合水平与结合到可溶性人TLla上的 TLla-结合蛋白水平相比低至少75 %的TLla-结合蛋白。
[0052] 在一个实例中，使用ELISA评价所述TLla-结合蛋白与可溶性人TLla或其突变形 式的结合。例如，将可溶性人TLla或其突变形式固定化（例如浓度大约1 μ g/mL)并且使 所述TLla-结合蛋白（例如浓度大约10 μ g/mL)接触到该固定化的可溶性人TLla或其突 变形式，并通过ELISA (例如使用本领域的标准方法）检测结合。
[0053] 在一个实例中，所述TLla-结合蛋白结合到TLla内的表位上，所述表位包含对应 于SEQ ID N0:202的位置32的精氨酸和SEQ ID N0:202的位置85的精氨酸的残基。在一 个实例中，所述表位是构象表位。
[0054] 在一个实例中，所述TLla-结合蛋白至少结合在人TLla的位置32的精氨酸和位 置85的精氨酸的氨基酸残基上，所述人TLla包含SEQ ID N0:202所给出的氨基酸序列。
[0055] 根据本文的描述，具有以上段落给出的结合特征的示例性TLla-结合蛋白将是技 术人员显而易见的并且包括包含以下成对V H和 '的那些：
[0056] (i)包含SEQ ID N0:94中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:95中给出的序列的 VL;
[0057] (ii)包含SEQ ID NO: 137中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 138中给出的序 列的' ;
[0058] (iii)包含SEQ ID N0:162中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:172中给出的序 列的 ' ;或
[0059] (iv)包含SEQ ID N0:173中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:174中给出的序 列的
[0060] 根据本文的描述，落入前述序列中的vH和 '将是技术人员显而易见的，并且在加 以必要的修改后应用于本公开内容的实例。
[0061] 在一个实例中，本公开内容的TLla-结合蛋白抑制来自人、食蟹猴或恒河猴的 TLla与DR3的相互作用。这样的TLla-结合蛋白可用于在人类疾病的动物模型中表征。
[0062] 在一个实例中，本公开内容的TL1 a-结合蛋白不能可检测地抑制来自小鼠、猪、兔 或豚鼠的TLla与DR3的相互作用，例如，所述TLla-结合蛋白不能可检测地抑制在相关的 TLla存在时培养的TF-1细胞的细胞凋亡水平，例如当使用本文所述的测定法测定时。
[0063] 在一个实例中，本公开内容的TLla-结合蛋白可检测地抑制来自大鼠的TLla与 DR3的相互作用。例如，所述TLla-结合蛋白可检测地抑制在相关的TLla存在时培养的 TF-1细胞的细胞凋亡水平，例如当使用本文所述的测定法测定时。
[0064] 在一个实例中，本公开内容的TLla-结合蛋白可检测地结合到由SEQ ID N0:123 的氨基酸72-251组成的TLla同种型和/或结合到由SEQ ID NO: 123的氨基酸84-251组 成的TLla同种型上。
[0065] 例如，通过ELISA评价结合，其中将浓度1 μ g/ml的TLla同种型固定化，并且使所 述TLla-结合蛋白与该同种型接触并评价结合水平。
[0066] 另外或备选地，本公开内容提供分离的或重组的包含抗体的抗原结合结构域的 TLla-结合蛋白，其包含以下的任何一个或多个：
[0067] (i)包含SEQ ID N0:94中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:95中给出的序列的 VL;
[0068] (ii)包含SEQ ID NO: 137中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 138中给出的序 列的' ;
[0069] (iii)包含SEQ ID NO:162中给出的序列的VH和包含SEQ ID NO:172中给出的序 列的 ' ;或
[0070] (iv)包含SEQ ID NO: 173中给出的序列的乂11和包含SEQ ID NO: 174中给出的序 列的
[0071] 另外或备选地，本公开内容提供分离的或重组的包含抗体的抗原结合结构域的 TLla-结合蛋白，其包含以下的任何一个或多个：
[0072] (i)包含SEQ ID N0:2中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:6中给出的序列的 VL;
[0073] (ii)包含SEQ ID NO: 10中给出的序列的VH和包含SEQ ID NO: 14中给出的序列 的VL;
[0074] (iii)包含SEQ ID NO: 18中给出的序列的VH和包含SEQ ID NO: 22中给出的序列 的VL;
[0075] (iv)包含SEQ ID NO:26中给出的序列的VH和包含SEQ ID NO:30中给出的序列 的VL;
[0076] (v)包含SEQ ID NO:34中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:38中给出的序列的 VL;
[0077] (vi)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:46中给出的序列 的VL;
[0078] (vii)包含SEQ ID NO: 50中给出的序列的VH和包含SEQ ID NO: 54中给出的序列 的VL;
[0079] (viii)包含SEQ ID N0:58中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:46中给出的序 列的' ;
[0080] (ix)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:62中给出的序列 的VL;
[0081] (x)包含SEQ ID N0:66中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:62中给出的序列的 VL;
[0082] (xi)包含SEQ ID N0:70中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:62中给出的序列 的VL;
[0083] (xii)包含SEQ ID N0:74中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:62中给出的序列 的VL;
[0084] (xiii)包含SEQ ID N0:78中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:62中给出的序 列的' ;
[0085] (xiv)包含SEQ ID NO:58中给出的序列的VH和包含SEQ ID NO:82中给出的序列 的VL;
[0086] (xv)包含SEQ ID N0:86中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:46中给出的序列 的VL;
[0087] (xvi)包含SEQ ID NO:90中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:46中给出的序列 的VL;
[0088] (xvii)包含SEQ ID N0:58中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:62中给出的序 列的';
[0089] (xviii)包含SEQIDN0:154中给出的序列的VH和包含SEQIDN0:164中给出的 序列的Vl ;
[0090] (xix)包含SEQ ID N0:155中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:163中给出的序 列的' ;
[0091] (xx)包含SEQ ID NO: 156中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 165中给出的序 列的' ;
[0092] (xxi)包含SEQ ID N0:157中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:166中给出的序 列的' ;
[0093] (xxii)包含SEQ ID N0:158中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:167中给出的 序列的Vl ;
[0094] (xxiii)包含SEQ ID NO:159中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:168中给出的 序列的Vl ;
[0095] (xxiv)包含SEQ ID NO: 160中给出的序列的VH和包含SEQ ID NO: 169中给出的 序列的Vl ;
[0096] (xxv)包含SEQ ID NO: 161中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 170中给出的序 列的' ;
[0097] (xxvi)包含SEQ ID NO:234中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 169中给出的 序列的Vl ;
[0098] (xxvii)包含SEQ ID N0:154中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:46中给出的 序列的Vl ;
[0099] (xxviii)包含SEQ ID N0:155中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:46中给出的 序列的Vl ;
[0100] (xxix)包含SEQ ID N0:156中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:46中给出的序 列的' ;
[0101] (XXX)包含SEQ ID NO: 157中给出的序列的VH和包含SEQ ID NO:46中给出的序 列的' ;
[0102] (xxxi)包含SEQ ID N0:158中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:46中给出的序 列的' ;
[0103] (xxxii)包含SEQ ID N0:159中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:46中给出的 序列的Vl ;
[0104] (xxxiii)包含SEQ ID N0:160中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:46中给出的 序列的Vl ;
[0105] (xxxiv)包含SEQ ID N0:161中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:46中给出的 序列的Vl ;
[0106] (xxxv)包含SEQ ID NO:234中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:46中给出的序 列的' ;
[0107] (xxxvi)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:164中给出的 序列的Vl ;
[0108] (xxxvii)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:165中给出的 序列的Vl ;
[0109] (xxxviii)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:166中给出 的序列的';
[0110] (xxxix)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:167中给出的 序列的Vl ;
[0111] (xl)包含SEQ ID NO:42中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:168中给出的序列 的VL;
[0112] (xli)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:169中给出的序 列的' ;
[0113] (xlii)包含SEQ ID NO:42中给出的序列的乂11和包含SEQ ID NO:170中给出的序 列的' ;
[0114] (xliii)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:171中给出的 序列的Vl ;
[0115] (xliv)包含SEQ ID NO:42中给出的序列的乂11和包含SEQ ID NO:172中给出的序 列的' ;
[0116] (xlv)包含SEQ ID NO:175中给出的序列的乂11和包含SEQ ID NO:188中给出的序 列的' ;
[0117] (xlvi)包含SEQ ID NO: 176中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 189中给出的 序列的Vl ;
[0118] (xlvii)包含SEQ ID NO:177中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:190中给出的 序列的Vl ;
[0119] (xlviii)包含SEQ ID NO: 178中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 191中给出 的序列的';
[0120] (xlix)包含SEQ ID N0:179中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:192中给出的 序列的Vl ;
[0121] (1)包含SEQ ID NO:180中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:193中给出的序列 的VL;
[0122] (li)包含SEQ ID NO: 181中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 194中给出的序 列的' ;
[0123] (lii)包含SEQ ID N0:182中给出的序列的乂11和包含SEQ ID N0:195中给出的序 列的' ;
[0124] (liii)包含SEQ ID N0:183中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:196中给出的 序列的Vl ;
[0125] (liv)包含SEQ ID NO:184中给出的序列的乂11和包含SEQ ID NO:197中给出的序 列的' ;
[0126] (lv)包含SEQ ID N0:185中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:198中给出的序 列的' ;
[0127] (lvi)包含SEQ ID N0:186中给出的序列的乂11和包含SEQ ID N0:199中给出的序 列的 ';或
[0128] (lvii)包含SEQ ID N0:187中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:200中给出的 序列的八。
[0129] 在一个具体的实例中，提供了分离的或重组的包含抗体的抗原结合结构域的 TLla-结合蛋白，其包含VH和 '，其中所述VH和 '分别包含选自以下的序列：
[0130] (i)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:46中给出的序列的 VL;
[0131] (ii)由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID NO: 106中给出的序列具有至少大 约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编码 的 '，所述核酸包含与SEQ ID N0:107中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者 所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；
[0132] (iii)包含SEQ ID N0:175中给出的序列的乂11和包含SEQ ID N0:188中给出的序 列的' ;
[0133] (iv)由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID N0:222中给出的序列具有至少大 约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编码 的'，所述核酸包含与SEQ ID N0:228中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者 所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；
[0134] (v)包含SEQ ID N0:176中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:189中给出的序列 的VL;
[0135] (vi)由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID NO:223中给出的序列具有至少大 约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编码 的'，所述核酸包含与SEQ ID N0:228中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者 所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；
[0136] (vii)包含SEQ ID N0:177中给出的序列的乂11和包含SEQ ID N0:190中给出的序 列的' ;
[0137] (viii)由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID N0:224中给出的序列具有至少 大约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编 码的'，所述核酸包含与SEQ ID N0:229中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或 者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；
[0138] (ix)包含SEQ ID N0:178中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:191中给出的序 列的' ;
[0139] (X)由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID N0:224中给出的序列具有至少大 约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编码 的'，所述核酸包含与SEQ ID N0:230中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者 所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；
[0140] (xi)包含SEQ ID N0:179中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:192中给出的序 列的' ;
[0141] (Xii)由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID N0:224中给出的序列具有至少 大约95 %同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编 码的'，所述核酸包含与SEQ ID NO: 231中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或 者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；
[0142] (xiii)包含SEQ ID N0:180中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:193中给出的 序列的Vl ;
[0143] (xiv)由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID NO:224中给出的序列具有至少 大约95 %同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编 码的'，所述核酸包含与SEQ ID N0:228中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或 者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；
[0144] (xv)包含SEQ ID N0:181中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:194中给出的序 列的' ;
[0145] (xvi)由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID N0:225中给出的序列具有至少 大约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编 码的'，所述核酸包含与SEQ ID N0:230中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或 者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；
[0146] (xvii)包含SEQ ID N0:183中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:196中给出的 序列的Vl ;
[0147] (xviii)由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID NO:226中给出的序列具有至 少大约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸 编码的\，所述核酸包含与SEQ ID N0:230中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列 或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；
[0148] (xix)包含SEQ ID N0:185中给出的序列的乂11和包含SEQ ID N0:198中给出的序 列的' ;
[0149] (XX)由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID N0:226中给出的序列具有至少大 约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编码 的'，所述核酸包含与SEQ ID N0:232中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者 所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；
[0150] (xxi)包含SEQ ID N0:186中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:199中给出的序 列的' ;
[0151] (xxii)由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID N0:227中给出的序列具有至少 大约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编 码的'，所述核酸包含与SEQ ID N0:232中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或 者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；
[0152] (xxiii)包含SEQ ID N0:187中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:200中给出的 序列的Vl ;和
[0153] (xxiv)由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID N0:227中给出的序列具有至少 大约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编 码的'，所述核酸包含与SEQ ID N0:233中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或 所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交。
[0154] 另外或备选地，本公开内容提供分离的或重组的包含抗体的抗原结合结构域的 TLla-结合蛋白，其含有包含SEQ ID N0:42中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:46中给 出的序列的 '，其中所述VH和/或 '包含以下的置换或置换组的一个或多个：
[0155] ⑴所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置16的丙氨酸；
[0156] (ii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置100的丙氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0157] (iii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置100的丝氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0158] (iv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置100的组氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0159] (v)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置100的亮氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0160] (vi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置100的天冬氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0161] (vii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置100的酪氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0162] (viii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置100的脯氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0163] (ix)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置100的谷氨酰胺和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0164] (X)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置100的赖氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0165] (xi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置101的丙氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0166] (xii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置101的丝氨酸和所述八包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0167] (xiii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置101的组氨酸和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0168] (xiv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置101的亮氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0169] (xv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置101的天冬氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0170] (xvi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置101的酪氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0171] (xvii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置101的谷氨酰胺和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0172] (xviii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置101的赖氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0173] (xix)所述VH包含s在SEQ ID N0:42的位置102的丙氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0174] (xx)所述VH包含在SEQ ID NO:42的位置102的丝氨酸和所述八包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0175] (xxi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置102的组氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0176] (xxii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置102的亮氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0177] (xxiii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置102的酪氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0178] (xxiv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置102的脯氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0179] (XXV)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置102的谷氨酰胺和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0180] (xxvi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置102的赖氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0181] (xxvii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的丙氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0182] (xxviii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的丝氨酸和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0183] (xxix)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的组氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0184] (XXX)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的亮氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0185] (xxxi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的天冬氨酸和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0186] (xxxii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的酪氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0187] (xxxiii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的脯氨酸和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0188] (xxxiv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的谷氨酰胺和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0189] (xxxv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的赖氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0190] (xxxvi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置104的丝氨酸和所述 ' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0191] (xxxvii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置104的组氨酸和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0192] (xxxviii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置104的亮氨酸和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0193] (xxxix)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置104的天冬氨酸和所述'包含在SEQ ID NO :46的位置76的苏氨酸；
[0194] (xl)所述VH包含在SEQ ID NO:42的位置104的酪氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0195] (xli)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置104的脯氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0196] (xlii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置104的谷氨酰胺和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0197] (xliii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置104的赖氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0198] (xliv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置105的丙氨酸和所述\包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0199] (xlv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置105的组氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0200] (xlvi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置105的亮氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0201] (xlvii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置105的天冬氨酸和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0202] (xlviii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置105的酪氨酸和所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0203] (xlix)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置105的脯氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0204] (1)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置105的谷氨酰胺和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0205] (li)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置105的赖氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0206] (lii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的丙氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0207] (liii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的丝氨酸和所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0208] (liv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的组氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0209] (lv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的亮氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0210] (lvi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的天冬氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0211] (lvii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的酪氨酸和所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0212] (lviii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的脯氨酸和所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0213] (lix)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的谷氨酰胺和所述' 包含在SEQ ID NO :46的位置76的苏氨酸；
[0214] (lx)所述VH包含在SEQ ID NO:42的位置107的赖氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0215] (lxi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置23的丙氨酸；
[0216] (lxii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述八包含在SEQ ID NO :46的位置28的天冬氨酸；
[0217] (lxiii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置33的酪氨酸；
[0218] (lxiv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述八包含在SEQ ID NO :46的位置34的天冬氨酸；
[0219] (lxv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO :46的位置53的天冬酰胺；
[0220] (lxvi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述八包含在SEQ ID NO:46的位置54的丝氨酸；
[0221] (lxvii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置82的丙氨酸；
[0222] (lxviii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述\包含在SEQ ID N0:46的位置95的丝氨酸；
[0223] (lxix)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述八包含在SEQ ID NO:46的位置96的丝氨酸；
[0224] (lxx)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0225] (lxxi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置47的丝氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置23的苏氨酸；
[0226] (lxxii)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置 72的丙氨酸、位置73的天冬氨酸、位置74的精氨酸和位置76的苏氨酸，并且所述\包含 在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0227] (lxxiii)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置 51的亮氨酸和位置102的谷氨酸，并且所述 '包含在各自相对于SEQ ID N0:46而言的位 置24的丝氨酸和位置76的苏氨酸；
[0228] (lxxiv)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置 51的亮氨酸和位置102的谷氨酸，并且所述 '包含在各自相对于SEQ ID N0:46而言的位 置23的苏氨酸、位置24的丝氨酸和位置76的苏氨酸；
[0229] (lxxv)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置51 的亮氨酸和位置102的谷氨酸，并且所述 '包含在各自相对于SEQ ID N0:46而言的位置 23的苏氨酸和位置76的苏氨酸；
[0230] (lxxvi)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置 51的亮氨酸和位置102的谷氨酸，并且所述八包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0231] (lxxvii)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置 51的亮氨酸、位置102的谷氨酸和位置105的丙氨酸，并且所述\包含在各自相对于SEQ ID N0:46而言的位置23的苏氨酸、位置24的丝氨酸和位置76的苏氨酸；
[0232] (lxxviii)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位 置51的亮氨酸、位置102的谷氨酸和位置105的丙氨酸，并且所述'包含在SEQ ID N0:46 的位置76的苏氨酸；
[0233] (lxxix)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置 72的丙氨酸、位置73的天冬氨酸、位置74的精氨酸和位置76的苏氨酸，并且所述 '包含 在各自相对于SEQ ID N0:46而言的位置23的苏氨酸、位置24的丝氨酸和位置76的苏氨 酸；
[0234] (lxxx)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置72 的丙氨酸、位置73的天冬氨酸、位置74的精氨酸和位置76的苏氨酸，并且所述' 包含在 各自相对于SEQ ID N0:46而言的位置23的苏氨酸、位置24的丝氨酸、位置76的苏氨酸和 位置51的谷氨酸；
[0235] (lxxxi)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置 51的亮氨酸、位置72的丙氨酸、位置73的天冬氨酸、位置74的精氨酸、位置76的苏氨酸、 位置102的谷氨酸和位置105的丙氨酸，并且所述 '包含在各自相对于SEQ ID N0:46而 言的位置23的苏氨酸、位置24的丝氨酸、位置76的苏氨酸和位置51的谷氨酸；和
[0236] (lxxxii)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置 51的亮氨酸、位置72的丙氨酸、位置73的天冬氨酸、位置74的精氨酸、位置76的苏氨酸、 位置102的谷氨酸和位置105的丙氨酸，并且所述 '包含在各自相对于SEQ ID N0:46而 言的位置23的苏氨酸、位置24的丝氨酸、位置76的苏氨酸和位置51的甘氨酸。
[0237] 在一个实例中，所述TLla-结合蛋白包含抗体的抗原结合结构域，其包含以下的 任何一个或多个：
[0238] ⑴包含SEQ ID N0:26中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:30中给出的序列的 VL;
[0239] (ii)包含SEQ ID NO:34中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:38中给出的序列 的 ' ;和
[0240] (iii)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:46中给出的序列 的VL。
[0241] 在一个具体的实例中，提供了分离的或重组的包含抗体的抗原结合结构域的 TLla-结合蛋白，其包含VH和 '，其中所述VH和 '分别包含选自以下的序列：
[0242] (i)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:46中给出的序列的 VL;
[0243] (ii)包含SEQ ID NO: 175中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 188中给出的序 列的' ;
[0244] (iii)包含SEQ ID N0:176中给出的序列的乂11和包含SEQ ID N0:189中给出的序 列的' ;
[0245] (iv)包含SEQ ID NO: 177中给出的序列的VH和包含SEQ ID NO: 190中给出的序 列的' ;
[0246] (v)包含SEQ ID NO: 178中给出的序列的VH和包含SEQ ID NO: 191中给出的序列 的VL;
[0247] (vi)包含SEQ ID NO: 179中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 192中给出的序 列的' ;
[0248] (vii)包含SEQ ID NO: 180中给出的序列的乂11和包含SEQ ID NO: 193中给出的序 列的' ;
[0249] (viii)包含SEQ ID NO: 181中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 194中给出的 序列的Vl ;
[0250] (ix)包含SEQ ID NO: 183中给出的序列的VH和包含SEQ ID NO: 196中给出的序 列的' ;
[0251] (X)包含SEQ ID NO: 185中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 198中给出的序列 的VL;
[0252] (xi)包含SEQ ID NO: 186中给出的序列的VH和包含SEQ ID NO: 199中给出的序 列的;和
[0253] (xii)包含SEQ ID NO: 187中给出的序列的乂11和包含SEQ ID NO:200中给出的序 列的
[0254] 在一个实例中，本公开内容的TLla-结合蛋白包含抗原结合结构域，其包含上述 抗体的可变区的⑶R3。例如，⑶R3依据Kabat编号系统来定义并且包含SEQ ID N0:5、9、 13、17、21、25、29、33、37、41、45、49、53、57、61、65、69、73、77、81、85、89、93 的任何一个中给 出的序列；或者在图1A至1H或在图9B或9C中标记为"⑶R3"并以黑体文本显示的序列； 或者包含SEQ ID N0:175-187的任何一个的氨基酸99-108或SEQ ID N0:188-200或234 的任何一个的氨基酸91-100的序列。
[0255] 例如，CDR3依据Kabat编号系统来定义并且包含SEQ ID N0:45或49中给出的序 列；或者包含SEQ ID N0:175-181、183或185-187的任何一个的氨基酸99-108或SEQ ID NO: 188-194、196或198-200的任何一个的氨基酸91-100的序列。
[0256] 在另一实例中，⑶R3(例如HCDR3)依据增强的Chothia编号系统来定义并且包含 在图1A、1C、1D或1E或9B的任何一个中标记为"⑶R3"并以下划线文本显示的序列。
[0257] 在一个实例中，CDR3包含序列EVPXJAX2FEY(SEQ ID勵：143)，其中乂1为天冬氨酸 或谷氨酸，χ2为丝氨酸或丙氨酸。
[0258] 在一个实例中，CDR3 包含序列 EX^XAAXJXJ (SEQ ID N0:235)，其中：
[0259] Xi为选自以下的氨基酸：缬氨酸、丙氨酸、丝氨酸、组氨酸、天冬氨酸、亮氨酸、酪氨 酸、脯氨酸、谷氨酰胺或赖氨酸；
[0260] X2为选自以下的氨基酸：丙氨酸、丝氨酸、组氨酸、赖氨酸、谷氨酸或天冬氨酸；
[0261] X3为选自以下的氨基酸：丙氨酸、丝氨酸、天冬氨酸、酪氨酸或苏氨酸；
[0262] X4为选自以下的氨基酸：丝氨酸、丙氨酸、组氨酸、亮氨酸、天冬氨酸或酪氨酸；和
[0263] X5为选自以下的氨基酸：丙氨酸、丝氨酸、组氨酸、亮氨酸、天冬氨酸、脯氨酸、谷氨 酰胺、谷氨酸或赖氨酸。
[0264] 在一个实例中，CDR3(例如LCDR3)包含SEQ ID N0:141中给出的序列（或在图IF 或9C中在标记为"共有序列（Consensus) "的序列的黑体文本中标记为⑶R3的序列）。
[0265] 例如，所述抗原结合结构域包含抗体可变区的3个⑶R。
[0266] 在本公开内容的某些实例中，所述抗原结合结构域是包含可变区的3个CDR的抗 体可变区，其包含 SEQ ID N0:2、6、10、14、18、22、26、30、34、38、42、46、50、54、58、62、66、70、 74、78、82、86、90、94、95、137、138、152-200或234的任何一个所给出的氨基酸序列。
[0267] 在某些实例中，所述抗原结合结构域是包含可变区的3个⑶R的抗体可变区，其包 含：
[0268] (a)VH，其包含SEQ ID N0:42中给出的序列并包含以下置换或置换组的一个或多 个：
[0269] ⑴在SEQ ID N0:42的位置16的丙氨酸；
[0270] (ii)在SEQ ID N0:42的位置100的丙氨酸；
[0271] (iii)在 SEQ ID N0:42 的位置 100 的丝氨酸；
[0272] (iv)在SEQ ID N0:42的位置100的组氨酸；
[0273] (v)在SEQ ID N0:42的位置100的亮氨酸；
[0274] (vi)在SEQ ID N0:42的位置100的天冬氨酸；
[0275] (vii)在 SEQ ID N0:42 的位置 100 的酪氨酸；
[0276] (viii)在 SEQ ID N0:42 的位置 100 的脯氨酸；
[0277] (ix)在SEQ ID N0:42的位置100的谷氨酰胺；
[0278] (X)在SEQ ID N0:42的位置100的赖氨酸；
[0279] (xi)在SEQ ID N0:42的位置101的丙氨酸；
[0280] (xii)在 SEQ ID N0:42 的位置 101 的丝氨酸；
[0281] (xiii)在 SEQ ID N0:42 的位置 101 的组氨酸；
[0282] (xiv)在 SEQ ID N0:42 的位置 101 的亮氨酸；
[0283] (xv)在SEQ ID N0:42的位置101的天冬氨酸；
[0284] (xvi)在 SEQ ID N0:42 的位置 101 的酪氨酸；
[0285] (xvii)在SEQ ID N0:42的位置101的谷氨酰胺；
[0286] (xviii)在 SEQ ID N0:42 的位置 101 的赖氨酸；
[0287] (xix)在 SEQ ID N0:42 的位置 102 的丙氨酸；
[0288] (XX)在SEQ ID N0:42的位置102的丝氨酸；
[0289] (xxi)在 SEQ ID N0:42 的位置 102 的组氨酸；
[0290] (xxii)在 SEQ ID N0:42 的位置 102 的亮氨酸；
[0291] (xxiii)在 SEQ ID N0:42 的位置 102 的酪氨酸；
[0292] (xxiv)在 SEQ ID N0:42 的位置 102 的脯氨酸；
[0293] (xxv)在SEQ ID N0:42的位置102的谷氨酰胺；
[0294] (xxvi)在 SEQ ID N0:42 的位置 102 的赖氨酸；
[0295] (xxvii)在 SEQ ID N0:42 的位置 103 的丙氨酸；
[0296] (xxviii)在 SEQ ID N0:42 的位置 103 的丝氨酸；
[0297] (xxix)在 SEQ ID N0:42 的位置 103 的组氨酸；
[0298] (xxx)在 SEQ ID NO:42 的位置 103 的亮氨酸；
[0299] (xxxi)在SEQ ID NO:42的位置103的天冬氨酸；
[0300] (xxxii)在 SEQ ID NO:42 的位置 103 的酪氨酸；
[0301] (xxxiii)在 SEQ ID NO:42 的位置 103 的脯氨酸；
[0302] (xxxiv)在SEQ ID NO:42的位置103的谷氨酰胺；
[0303] (xxxv)在 SEQ ID NO:42 的位置 103 的赖氨酸；
[0304] (xxxvi)在 SEQ ID NO:42 的位置 104 的丝氨酸；
[0305] (xxxvii)在 SEQ ID NO:42 的位置 104 的组氨酸；
[0306] (xxxviii)在 SEQ ID NO:42 的位置 104 的亮氨酸；
[0307] (xxxix)在SEQ ID NO:42的位置104的天冬氨酸；
[0308] (xl)在SEQ ID NO:42的位置104的酪氨酸；
[0309] (xli)在 SEQ ID NO:42 的位置 104 的脯氨酸；
[0310] (xlii)在SEQ ID NO:42的位置104的谷氨酰胺；
[0311] (xliii)在 SEQ ID NO:42 的位置 104 的赖氨酸；
[0312] (xliv)在 SEQ ID NO:42 的位置 105 的丙氨酸；
[0313] (xlv)在 SEQ ID NO:42 的位置 105 的组氨酸；
[0314] (xlvi)在 SEQ ID NO:42 的位置 105 的亮氨酸；
[0315] (xlvii)在SEQ ID NO:42的位置105的天冬氨酸；
[0316] (xlviii)在 SEQ ID NO:42 的位置 105 的酪氨酸；
[0317] (xlix)在 SEQ ID NO:42 的位置 105 的脯氨酸；
[0318] (1)在SEQ ID NO :42的位置105的谷氨酰胺；
[0319] (li)在SEQ ID NO:42的位置105的赖氨酸；
[0320] (lii)在 SEQ ID NO:42 的位置 107 的丙氨酸；
[0321] (liii)在 SEQ ID NO:42 的位置 107 的丝氨酸；
[0322] (liv)在 SEQ ID NO:42 的位置 107 的组氨酸；
[0323] (lv)在SEQ ID NO:42的位置107的亮氨酸；
[0324] (lvi)在SEQ ID NO:42的位置107的天冬氨酸；
[0325] (lvii)在 SEQ ID NO:42 的位置 107 的酪氨酸；
[0326] (lviii)在 SEQ ID NO:42 的位置 107 的脯氨酸；
[0327] (lix)在SEQ ID NO:42的位置107的谷氨酰胺；
[0328] (lx)在SEQ ID NO:42的位置107的赖氨酸；
[0329] (lxi)在SEQ ID NO:42的位置41的苏氨酸；
[0330] (lxii)在 SEQ ID NO:42 的位置 47 的丝氨酸；
[0331] (lxiii)在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置72的丙氨酸、 位置73的天冬氨酸和位置74的精氨酸和位置76的苏氨酸；
[0332] (lxiv)在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置51的亮氨酸和 位置102的谷氨酸；
[0333] (lxv)在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置51的亮氨酸、位 置102的谷氨酸和位置105的丙氨酸；
[0334] (lxvi)在位置41的脯氨酸、位置51的亮氨酸、位置72的丙氨酸、位置73的天冬 氨酸、位置74的精氨酸、位置76的苏氨酸、位置102的谷氨酸和位置105的丙氨酸；或
[0335] (b)'，其包含SEQ ID N0:46中给出的序列并且包含以下置换或置换组的一个或 多个：
[0336] ⑴在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0337] (ii)在SEQ ID N0:46的位置23的苏氨酸；
[0338] (iii)在SEQ ID N0:46的位置28的天冬酰胺；
[0339] (iv)在SEQ ID N0:46的位置33的酪氨酸；
[0340] (v)在SEQ ID N0:46的位置34的天冬氨酸；
[0341] (vi)在SEQ ID N0:46的位置53的天冬酰胺；
[0342] (vii)在SEQ ID N0:46的位置54的丝氨酸；
[0343] (viii)在 SEQ ID N0:46 的位置 82 的丙氨酸；
[0344] (ix)在SEQ ID N0:46的位置95的丝氨酸；
[0345] (X)在SEQ ID N0:46的位置96的丝氨酸；
[0346] (xi)在各自相对于SEQ ID N0:46而言的位置23的苏氨酸、位置24的丝氨酸和位 置76的苏氨酸；
[0347] (xii)在各自相对于SEQ ID N0:46而言的位置23的苏氨酸和位置76的苏氨酸；
[0348] (xiii)在各自相对于SEQ ID N0:46而言的位置23的苏氨酸、位置24的丝氨酸、 位置76的苏氨酸和位置51的谷氨酸；或
[0349] (xiv)在各自相对于SEQ ID N0:46而言的位置23的苏氨酸、位置24的丝氨酸、位 置76的苏氨酸和位置51的甘氨酸。
[0350] 例如，所述抗原结合结构域是包含 SEQ ID N0:2、10、18、26、34、42、50、58、66、70、 74、78、86、90、94、137、152、154-162、173、175-187 或 234 的任何一个所给出的氨基酸序列 的3个CDR的VH。
[0351] 在一个实例中，⑶R依据Kabat编号系统来定义。
[0352] 例如，所述TLla-结合蛋白包含包括以下⑶R的VH :
[0353] (i)CDRl，其包含SEQ ID N0:3中给出的序列，CDR2,其包含SEQ ID N0:4中给出的 序列（其中CDR2氨基酸序列的5个C-末端氨基酸中的任何一个或多个被任何其它天然存 在的氨基酸置换），和⑶R3,其包含SEQ ID N0:5中给出的序列（或在图1A中在抗体C336 的黑体文本中标记为⑶Rl、2和3的序列）；
[0354] (ii)CDRl，其包含SEQ ID N0:11中给出的序列，CDR2,其包含SEQ ID N0:12中给 出的序列（其中CDR2氨基酸序列的5个C-末端氨基酸中的任何一个或多个被任何其它天 然存在的氨基酸置换），和⑶R3,其包含SEQ ID N0:13中给出的序列（或在图1A中在抗体 C334的黑体文本中标记为⑶Rl、2和3的序列）；
[0355] (iii)CDRl，其包含SEQ ID N0:19中给出的序列，CDR2,其包含SEQ ID N0:20中给 出的序列（其中CDR2氨基酸序列的5个C-末端氨基酸中的任何一个或多个被任何其它天 然存在的氨基酸置换），和⑶R3,其包含SEQ ID N0:21中给出的序列（或在图1A中在抗体 C333的黑体文本中标记为⑶Rl、2和3的序列）；
[0356] (iv)CDRl，其包含SEQ ID N0:27中给出的序列，CDR2,其包含SEQ ID N0:28中给 出的序列（其中CDR2氨基酸序列的5个C-末端氨基酸中的任何一个或多个被任何其它天 然存在的氨基酸置换），和⑶R3,其包含SEQ ID N0:29中给出的序列（或在图1A中在抗体 C323的黑体文本中标记为⑶Rl、2和3的序列）；
[0357] (v)CDRl，其包含SEQ ID N0:35中给出的序列，CDR2,其包含SEQ ID N0:36中给 出的序列（其中CDR2氨基酸序列的5个C-末端氨基酸中的任何一个或多个被任何其它天 然存在的氨基酸置换），和⑶R3,其包含SEQ ID N0:37中给出的序列（或在图1A中在抗体 C321的黑体文本中标记为⑶Rl、2和3的序列）；
[0358] (vi)CDRl，其包含SEQ ID N0:43中给出的序列，CDR2,其包含SEQ ID N0:44中给 出的序列（其中CDR2氨基酸序列的5个C-末端氨基酸中的任何一个或多个被任何其它天 然存在的氨基酸置换），和⑶R3,其包含SEQ ID N0:45中给出的序列（或在图1A中在抗体 C320的黑体文本中标记为⑶Rl、2和3的序列）；
[0359] (vii)CDRl，其包含SEQ ID N0:51中给出的序列，CDR2,其包含SEQ ID N0:52中给 出的序列（其中CDR2氨基酸序列的5个C-末端氨基酸中的任何一个或多个被任何其它天 然存在的氨基酸置换），和⑶R3,其包含SEQ ID N0:53中给出的序列（或在图1A中在抗体 C319的黑体文本中标记为⑶Rl、2和3的序列）；
[0360] (viii)CDRl，其包含 SEQ ID N0:67 中给出的序列，CDR2,其包含 SEQ ID N0:68 中 给出的序列（其中CDR2氨基酸序列的5个C-末端氨基酸中的任何一个或多个被任何其它 天然存在的氨基酸置换），和CDR3,其包含SEQ ID N0:69中给出的序列（或在图1C中在抗 体C320-90的黑体文本中标记为⑶Rl、2和3的序列）；
[0361] (ix)CDRl，其包含SEQ ID N0:71中给出的序列，CDR2,其包含SEQ ID N0:72中给 出的序列（其中CDR2氨基酸序列的5个C-末端氨基酸中的任何一个或多个被任何其它天 然存在的氨基酸置换），和⑶R3,其包含SEQ ID N0:73中给出的序列（或在图1C中在抗体 C320-103的黑体文本中标记为⑶Rl、2和3的序列）；
[0362] (x)CDRl，其包含SEQ ID N0:75中给出的序列，CDR2,其包含SEQ ID N0:76中给 出的序列（其中CDR2氨基酸序列的5个C-末端氨基酸中的任何一个或多个被任何其它天 然存在的氨基酸置换），和⑶R3,其包含SEQ ID N0:77中给出的序列（或在图1C中在抗体 C320-114的黑体文本中标记为⑶Rl、2和3的序列）；
[0363] (xi)CDRl，其包含SEQ ID N0:79中给出的序列，CDR2,其包含SEQ ID N0:80中给 出的序列（其中CDR2氨基酸序列的5个C-末端氨基酸中的任何一个或多个被任何其它天 然存在的氨基酸置换），和⑶R3,其包含SEQ ID N0:81中给出的序列（或在图1C中在抗体 C320-115的黑体文本中标记为⑶Rl、2和3的序列）；
[0364] (xii)CDRl，其包含SEQ ID N0:87中给出的序列，CDR2,其包含SEQ ID N0:88中给 出的序列（其中CDR2氨基酸序列的5个C-末端氨基酸中的任何一个或多个被任何其它天 然存在的氨基酸置换），和⑶R3,其包含SEQ ID N0:89中给出的序列（或在图1C中在抗体 C320-129的黑体文本中标记为⑶Rl、2和3的序列）；
[0365] (xiii)CDRl，其包含 SEQ ID N0:91 中给出的序列，CDR2,其包含 SEQ ID N0:92 中 给出的序列（其中CDR2氨基酸序列的5个C-末端氨基酸中的任何一个或多个被任何其它 天然存在的氨基酸置换），和CDR3,其包含SEQ ID N0:93中给出的序列（或在图1C中在抗 体C320-130的黑体文本中标记为⑶Rl、2和3的序列）；
[0366] (xiv)CDRl，其包含SEQ ID NO: 175-187的任何一个的氨基酸31-35中给出的序 列，CDR2,其包含SEQ ID NO: 175-187的任何一个的氨基酸50-66(其中CDR2氨基酸序列 的5个C-末端氨基酸中的任何一个或多个被任何其它天然存在的氨基酸置换）和SEQ ID NO: 175-187的任何一个的氨基酸99-108 ;和
[0367] (xv)CDRl，其包含SEQ ID N0:175-187的任何一个的氨基酸26-35中给出的序 列，CDR2,其包含SEQ ID N0:175-187的任何一个的氨基酸50-66(其中CDR2氨基酸序列 的5个C-末端氨基酸中的任何一个或多个被任何其它天然存在的氨基酸置换）和SEQ ID NO: 175-187的任何一个的氨基酸99-108。
[0368] 例如，所述TLla-结合蛋白包含包括以下⑶R的VH :
[0369] (i)CDRl，其包含SEQ ID N0:43中给出的序列，CDR2,其包含SEQ ID N0:44中给 出的序列（其中CDR2氨基酸序列的5个C-末端氨基酸中的任何一个或多个被任何其它天 然存在的氨基酸置换），和⑶R3,其包含SEQ ID N0:45中给出的序列（或在图1A中在抗体 C320的黑体文本中标记为⑶Rl、2和3的序列）；
[0370] (ii)CDRl，其包含SEQ ID N0:175-181、183 或 185-187 的任何一个的氨基酸31-35 中给出的序列，CDR2,其包含SEQ ID N0:175-181、183或185-187的任何一个的氨基酸 50-66 (其中CDR2氨基酸序列的5个C-末端氨基酸中的任何一个或多个被任何其它天然存 在的氨基酸置换）和SEQ ID N0:175-181、183或185-187的任何一个的氨基酸99-108;或
[0371] (iii)CDRl，其包含 SEQ ID N0:175-181、183 或 185-187 的任何一个的氨基酸 26-35中给出的序列，CDR2,其包含SEQ ID N0:175-181、183或185-187的任何一个的氨基 酸50-66 (其中CDR2氨基酸序列的5个C-末端氨基酸中的任何一个或多个被任何其它天然 存在的氨基酸置换）和SEQ ID N0:175-181、183或185-187的任何一个的氨基酸99-108。
[0372] 在一个实例中，所述TLla-结合蛋白包含包括以下⑶R的VH :
[0373] (i)⑶R1，其包含SEQ ID N0:43中给出的序列（或者在图1E中在标记为"共有序 列"的序列的黑体文本中标记为⑶R1的序列）；
[0374] (ii) CDR2,其包含序列 WX0PNSGNTGYAQKFQG (SEQ ID N0:142)，其中 Xi 为甲硫氨酸 或亮氨酸（或者在图1E或图9B中在标记为"共有序列"的序列的黑体文本中标记为CDR2 的序列）；和
[0375] (iii)CDR3,其包含序列EVPXJAX2FEY(SEQ ID勵：143)，其中乂1为天冬氨酸或谷氨 酸，X2为丝氨酸或丙氨酸（或者在图1E或图9B中在标记为"共有序列"的序列的黑体文本 中标记为CDR3的序列） ；或包含序列EX1PX2X3AX4FX 5Y(SEQIDN0:235)，其中：
[0376] Xi为选自以下的氨基酸：缬氨酸、丙氨酸、丝氨酸、组氨酸、天冬氨酸、亮氨酸、酪氨 酸、脯氨酸、谷氨酰胺或赖氨酸；
[0377] X2为选自以下的氨基酸：丙氨酸、丝氨酸、组氨酸、赖氨酸、谷氨酸或天冬氨酸；
[0378] X3为选自以下的氨基酸：丙氨酸、丝氨酸、天冬氨酸、酪氨酸或苏氨酸；
[0379] X4为选自以下的氨基酸：丝氨酸、丙氨酸、组氨酸、亮氨酸、天冬氨酸或酪氨酸；和
[0380] X5为选自以下的氨基酸：丙氨酸、丝氨酸、组氨酸、亮氨酸、天冬氨酸、脯氨酸、谷氨 酰胺、谷氨酸或赖氨酸。
[0381] 适合包括在⑶R3中的其它残基描述于本文并且在加以必要的修改后应用于本公 开内容的实例。
[0382] 在一个实例中，⑶R依据增强的Chothia编号系统来定义。例如，所述TLla-结合 蛋白包含包括以下CDR的V H :在图1A中的抗体336、334、333、323、321、320或319或者在图 1C 中的抗体 C320-90、C320-103、C320-114、C320-115、C320-129 或 C320-130 或者在图 1C 或图1E或图9B中标记为"共有序列"的序列的下划线文本中标记为⑶Rl、2和3的⑶R。
[0383] 在一个实例中，所述TLla-结合蛋白还包含以下：
[0384] ⑴包含SEQ ID N0:144所给出的氨基酸序列的重链FR1 ;
[0385] (ii)包含SEQ ID N0:145所给出的氨基酸序列的重链FR2 ;
[0386] (iii)包含SEQ ID N0:146所给出的氨基酸序列的重链FR3 ;和
[0387] (iv)包含SEQ ID N0:147所给出的氨基酸序列的重链FR4。
[0388] 在一个实例中，所述TLla-结合蛋白包含以下：
[0389] ⑴包含SEQ ID N0:144所给出的氨基酸序列的重链FR1 ;
[0390] (ii)包含SEQ ID N0:43中给出的序列的重链CDR1 ;
[0391] (iii)包含SEQ ID N0:145所给出的氨基酸序列的重链FR2 ;
[0392] (iv)包含SEQ ID N0:142中给出的序列的重链CDR2 ;
[0393] (v)包含SEQ ID N0:146所给出的氨基酸序列的重链FR3 ;
[0394] (vi)包含SEQ ID N0:143或235中给出的序列的重链CDR3 ;和
[0395] (vii)包含SEQ ID N0:147所给出的氨基酸序列的重链FR4。
[0396] 例如，所述抗原结合结构域是包含 SEQ ID N0:6、14、22、30、38、46、54、62、82、95、 153、163-172、174或188-200的任何一个所给出的氨基酸序列的3个⑶R的\。在一个实 例中，⑶R依据Kabat编号系统来定义。例如，所述TLla-结合蛋白包含包括以下⑶R的':
[0397] (i)CDRl，其包含SEQ ID N0:7中给出的序列，CDR2,其包含SEQ ID N0:8中给出的 序列，和⑶R3,其包含SEQ ID N0:9中给出的序列（或在图1B中在抗体C336的黑体文本中 标记为⑶Rl、2和3的序列）；
[0398] (ii)CDRl，其包含SEQ ID N0:15中给出的序列，CDR2,其包含SEQ ID N0:16中给 出的序列，和⑶R3,其包含SEQ ID NO: 17中给出的序列（或在图1B中在抗体C334的黑体 文本中标记为⑶Rl、2和3的序列）；
[0399] (iii)CDRl，其包含SEQ ID N0:23中给出的序列，CDR2,其包含SEQ ID N0:24中给 出的序列，和⑶R3,其包含SEQ ID NO:25中给出的序列（或在图1B中在抗体C333的黑体 文本中标记为⑶Rl、2和3的序列）；
[0400] (iv)CDRl，其包含SEQ ID N0:31中给出的序列，CDR2,其包含SEQ ID N0:32中给 出的序列，和⑶R3,其包含SEQ ID NO:33中给出的序列（或在图1B中在抗体C323的黑体 文本中标记为⑶Rl、2和3的序列）；
[0401] (v)CDRl，其包含SEQ ID N0:39中给出的序列，CDR2,其包含SEQ ID N0:40中给出 的序列，和⑶R3,其包含SEQ ID N0:41中给出的序列（或在图1B中在抗体C321的黑体文 本中标记为⑶Rl、2和3的序列）；
[0402] (vi)CDRl，其包含SEQ ID N0:47中给出的序列，CDR2,其包含SEQ ID N0:48中给 出的序列，和⑶R3,其包含SEQ ID N0:49中给出的序列（或在图1B中在抗体C320的黑体 文本中标记为⑶Rl、2和3的序列）；
[0403] (vii)CDRl，其包含SEQ ID N0:55中给出的序列，CDR2,其包含SEQ ID N0:56中给 出的序列，和⑶R3,其包含SEQ ID NO:57中给出的序列（或在图1B中在抗体C319的黑体 文本中标记为⑶Rl、2和3的序列）；
[0404] (viii)CDRl，其包含 SEQ ID N0:83 中给出的序列，CDR2,其包含 SEQ ID N0:84 中 给出的序列，和⑶R3,其包含SEQ ID N0:85中给出的序列（或在图IF中在抗体C320-120 的黑体文本中标记为⑶Rl、2和3的序列）；或
[0405] (ix)CDRl，其包含 SEQ ID N0:188-200 的任何一个的氨基酸 23-36, CDR2,包含 SEQ ID N0:188-200的任何一个的氨基酸52-58,和CDR3,其包含SEQ ID N0:188-200的任何一 个的氨基酸91-100。
[0406] 在一个实例中，所述TLla-结合蛋白包含包括以下⑶R的八：
[0407] (i)CDRl，其包含序列XASSSDIGAGLGVIKSEQ ID勵:139)，其中乂1为丙氨酸或苏氨 酸；X2为甘氨酸或丝氨酸（或在图9C中在标记为"共有序列"的序列的黑体文本中标记为 ⑶R1的序列）；
[0408] (ii)CDR2,其包含SEQ ID N0:140中给出的序列；和
[0409] (iii)CDR3,其包含 SEQ ID N0:141 中给出的序列。
[0410] 在一个实例中，所述TLla-结合蛋白还包含以下：
[0411] ⑴包含SEQ ID N0:148所给出的氨基酸序列的轻链FR1 ;
[0412] (ii)包含SEQ ID N0:149所给出的氨基酸序列的轻链FR2 ;
[0413] (iii)包含SEQ ID N0:150所给出的氨基酸序列的轻链FR3 ;和
[0414] (iv)包含SEQ ID N0:151所给出的氨基酸序列的轻链FR4。
[0415] 在一个实例中，所述TLla-结合蛋白包含以下：
[0416] ⑴包含SEQ ID N0:148所给出的氨基酸序列的轻链FR1 ;
[0417] (ii)包含SEQ ID N0:139中给出的序列的轻链CDR1 ;
[0418] (iii)包含SEQ ID N0:149所给出的氨基酸序列的轻链FR2 ;
[0419] (iv)包含SEQ ID N0:140中给出的序列的轻链CDR2 ;
[0420] (v)包含SEQ ID N0:150所给出的氨基酸序列的轻链FR3 ;
[0421] (vi)包含SEQ ID N0:141中给出的序列的轻链CDR3 ;和
[0422] (vii)包含SEQ ID N0:151所给出的氨基酸序列的轻链FR4。
[0423] 在一个实例中，⑶R依据增强的Chothia编号系统来定义。例如，所述TLla-结合 蛋白包含包括在图1B中的抗体336、334、333、323、321、320或319或者在图1F中的抗体 C320-120或者在图1H和图9中的标记为"共有序列"的序列的下划线文本中标记为⑶R1、 2和3的CDR的八。
[0424] 在一个实例中，所述抗原结合结构域包含以下成对可变区之一的6个⑶R :
[0425] (i)包含SEQ ID N0:2中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:6中给出的序列的 VL;
[0426] (ii)包含SEQ ID NO: 10中给出的序列的VH和包含SEQ ID NO: 14中给出的序列 的VL;
[0427] (iii)包含SEQ ID NO: 18中给出的序列的VH和包含SEQ ID NO: 22中给出的序列 的VL;
[0428] (iv)包含SEQ ID NO:26中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:30中给出的序列 的VL;
[0429] (v)包含SEQ ID NO: 34中给出的序列的VH和包含SEQ ID NO: 38中给出的序列的 VL;
[0430] (vi)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:46中给出的序列 的VL;
[0431] (vii)包含SEQ ID NO:50中给出的序列的VH和包含SEQ ID NO:54中给出的序列 的VL;
[0432] (viii)包含SEQ ID N0:58中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:46中给出的序 列的' ;
[0433] (ix)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:62中给出的序列 的VL;
[0434] (x)包含SEQ ID NO:66中给出的序列的VH和包含SEQ ID NO:62中给出的序列的 VL;
[0435] (xi)包含SEQ ID NO:70中给出的序列的VH和包含SEQ ID NO:62中给出的序列 的VL;
[0436] (xii)包含SEQ ID N0:74中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:62中给出的序列 的VL;
[0437] (xiii)包含SEQ ID N0:78中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:62中给出的序 列的' ;
[0438] (xiv)包含SEQ ID NO:58中给出的序列的VH和包含SEQ ID NO:82中给出的序列 的VL;
[0439] (xv)包含SEQ ID N0:86中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:46中给出的序列 的VL;
[0440] (xvi)包含SEQ ID NO:90中给出的序列的VH和包含SEQ ID NO:46中给出的序列 的VL;
[0441] (xvii)包含SEQ ID N0:58中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:62中给出的序 列的' ;
[0442] (xviii)包含SEQ ID NO:154中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:164中给出的 序列的Vl ;
[0443] (xix)包含SEQ ID NO: 155中给出的序列的VH和包含SEQ ID NO: 163中给出的序 列的' ;
[0444] (xx)包含SEQ ID NO: 156中给出的序列的VH和包含SEQ ID NO: 165中给出的序 列的' ;
[0445] (xxi)包含SEQ ID NO: 157中给出的序列的VH和包含SEQ ID NO: 166中给出的序 列的' ;
[0446] (xxii)包含SEQ ID NO: 158中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 167中给出的 序列的Vl ;
[0447] (xxiii)包含SEQ ID NO:159中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:168中给出的 序列的Vl ;
[0448] (xxiv)包含SEQ ID NO: 160中给出的序列的VH和包含SEQ ID NO: 169中给出的 序列的Vl ;
[0449] (xxv)包含SEQ ID NO: 161中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 170中给出的序 列的' ;
[0450] (xxvi)包含SEQ ID NO:234中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 169中给出的 序列的Vl ;
[0451] (xxvii)包含SEQ ID N0:154中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:46中给出的 序列的Vl ;
[0452] (xxviii)包含SEQ ID N0:155中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:46中给出的 序列的Vl ;
[0453] (xxix)包含SEQ ID N0:156中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:46中给出的序 列的' ;
[0454] (xxx)包含SEQ ID NO: 157中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:46中给出的序 列的' ;
[0455] (xxxi)包含SEQ ID N0:158中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:46中给出的序 列的' ;
[0456] (xxxii)包含SEQ ID N0:159中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:46中给出的 序列的Vl ;
[0457] (xxxiii)包含SEQ ID N0:160中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:46中给出的 序列的Vl ;
[0458] (xxxiv)包含SEQ ID N0:161中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:46中给出的 序列的Vl ;
[0459] (xxxv)包含SEQ ID NO:234中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:46中给出的序 列的' ;
[0460] (xxxvi)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:164中给出的 序列的Vl ;
[0461] (xxxvii)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:165中给出的 序列的Vl ;
[0462] (xxxviii)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:166中给出 的序列的';
[0463] (xxxix)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:167中给出的 序列的Vl ;
[0464] (xl)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:168中给出的序列 的VL;
[0465] (xli)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID NO: 169中给出的序 列的' ;
[0466] (xlii)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:170中给出的序 列的' ;
[0467] (xliii)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:171中给出的 序列的Vl ;
[0468] (xliv)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的乂11和包含SEQ ID N0:172中给出的序 列的' ;
[0469] (xlv)包含SEQ ID N0:175中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:188中给出的序 列的' ;
[0470] (xlvi)包含SEQ ID NO: 176中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 189中给出的 序列的Vl ;
[0471] (xlvii)包含SEQ ID NO:177中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:190中给出的 序列的Vl ;
[0472] (xlviii)包含SEQ ID NO: 178中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 191中给出 的序列的';
[0473] (xlix)包含SEQ ID NO: 179中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 192中给出的 序列的Vl ;
[0474] (1)包含SEQ ID NO: 180中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 193中给出的序列 的VL;
[0475] (li)包含SEQ ID NO: 181中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 194中给出的序 列的' ;
[0476] (lii)包含SEQ ID N0:182中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:195中给出的序 列的' ;
[0477] (liii)包含SEQ ID N0:183中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:196中给出的 序列的Vl ;
[0478] (liv)包含SEQ ID NO:184中给出的序列的VH和包含SEQ ID NO:197中给出的序 列的' ;
[0479] (lv)包含SEQ ID NO: 185中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 198中给出的序 列的' ;
[0480] (lvi)包含SEQ ID N0:186中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:199中给出的序 列的 ' ;或
[0481] (lvii)包含SEQ ID N0:187中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:200中给出的 序列的八。
[0482] 在一个实例中，所述抗原结合结构域包含抗体的6个⑶R，所述抗体含有包含SEQ ID N0:42中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:46中给出的序列的其中所述VjP/或 '包含以下置换或置换组的一个或多个：
[0483] ⑴所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置16的丙氨酸；
[0484] (ii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置100的丙氨酸和所述八包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0485] (iii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置100的丝氨酸和所述八包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0486] (iv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置100的组氨酸和所述\包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0487] (v)所述VH包含在SEQ ID NO:42的位置100的亮氨酸和所述八包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0488] (vi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置100的天冬氨酸和所述\包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0489] (vii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置100的酪氨酸和所述八包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0490] (viii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置100的脯氨酸和所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0491] (ix)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置100的谷氨酰胺和所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0492] (X)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置100的赖氨酸和所述八包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0493] (xi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置101的丙氨酸和所述八包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0494] (xii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置101的丝氨酸和所述八包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0495] (xiii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置101的组氨酸和所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0496] (xiv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置101的亮氨酸和所述VL包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0497] (xv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置101的天冬氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0498] (xvi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置101的酪氨酸和所述VL包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0499] (xvii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置101的谷氨酰胺和所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0500] (xviii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置101的赖氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0501] (xix)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置102的丙氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0502] (XX)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置102的丝氨酸和所述八包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0503] (xxi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置102的组氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0504] (xxii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置102的亮氨酸和所述\包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0505] (xxiii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置102的酪氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0506] (xxiv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置102的脯氨酸和所述\包含在SEQ ID NO :46的位置76的苏氨酸；
[0507] (xxv)所述VH包含在SEQ ID NO:42的位置102的谷氨酰胺和所述' 包含在SEQ ID NO :46的位置76的苏氨酸；
[0508] (xxvi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置102的赖氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0509] (xxvii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的丙氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0510] (xxviii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的丝氨酸和所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0511] (xxix)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的组氨酸和所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0512] (XXX)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的亮氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0513] (xxxi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的天冬氨酸和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0514] (xxxii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的酪氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0515] (xxxiii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的脯氨酸和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0516] (xxxiv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的谷氨酰胺和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0517] (xxxv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的赖氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0518] (xxxvi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置104的丝氨酸和所述 ' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0519] (xxxvii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置104的组氨酸和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0520] (xxxviii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置104的亮氨酸和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0521] (xxxix)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置104的天冬氨酸和所述V?包含在SEQ ID NO :46的位置76的苏氨酸；
[0522] (xl)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置104的酪氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0523] (xli)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置104的脯氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0524] (xlii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置104的谷氨酰胺和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0525] (xliii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置104的赖氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0526] (xliv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置105的丙氨酸和所述八包含在SEQ ID NO :46的位置76的苏氨酸；
[0527] (xlv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置105的组氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0528] (xlvi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置105的亮氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0529] (xlvii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置105的天冬氨酸和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0530] (xlviii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置105的酪氨酸和所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0531] (xlix)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置105的脯氨酸和所述\包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0532] (1)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置105的谷氨酰胺和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0533] (li)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置105的赖氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0534] (lii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的丙氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0535] (liii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的丝氨酸和所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0536] (liv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的组氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0537] (lv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的亮氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0538] (lvi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的天冬氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0539] (lvii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的酪氨酸和所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0540] (lviii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的脯氨酸和所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0541] (lix)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的谷氨酰胺和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0542] (lx)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的赖氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0543] (lxi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置23的丙氨酸；
[0544] (lxii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述八包含在SEQ ID NO :46的位置28的天冬氨酸；
[0545] (lxiii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置33的酪氨酸；
[0546] (lxiv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述八包含在SEQ ID NO :46的位置34的天冬氨酸；
[0547] (lxv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述八包含在SEQ ID NO :46的位置53的天冬酰胺；
[0548] (lxvi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述八包含在SEQ ID NO:46的位置54的丝氨酸；
[0549] (lxvii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置82的丙氨酸；
[0550] (lxviii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述\包含在SEQ ID N0:46的位置95的丝氨酸；
[0551] (lxix)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述八包含在SEQ ID NO:46的位置96的丝氨酸；
[0552] (lxx)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0553] (lxxi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置47的丝氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置23的苏氨酸；
[0554] (lxxii)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置 72的丙氨酸、位置73的天冬氨酸和位置74的精氨酸和位置76的苏氨酸，并且所述 '包含 在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0555] (lxxiii)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置 51的亮氨酸和位置102的谷氨酸，并且所述 '包含在各自相对于SEQ ID N0:46而言的位 置24的丝氨酸和位置76的苏氨酸；
[0556] (lxxiv)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置 51的亮氨酸和位置102的谷氨酸，并且所述 '包含在各自相对于SEQ ID N0:46而言的位 置23的苏氨酸、位置24的丝氨酸和位置76的苏氨酸；
[0557] (lxxv)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置51 的亮氨酸和位置102的谷氨酸，并且所述 '包含在各自相对于SEQ ID N0:46而言的位置 23的苏氨酸和位置76的苏氨酸；
[0558] (lxxvi)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置 51的亮氨酸和位置102的谷氨酸，并且所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0559] (lxxvii)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置 51的亮氨酸、位置102的谷氨酸和位置105的丙氨酸，并且所述\包含在各自相对于SEQ ID N0:46而言的位置23的苏氨酸、位置24的丝氨酸和位置76的苏氨酸；
[0560] (lxxviii)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位 置51的亮氨酸、位置102的谷氨酸和位置105的丙氨酸，并且所述'包含在SEQ ID N0:46 的位置76的苏氨酸；
[0561] (lxxix)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置 72的丙氨酸、位置73的天冬氨酸、位置74的精氨酸和位置76的苏氨酸，并且所述\包含 在各自相对于SEQ ID N0:46而言的位置23的苏氨酸、位置24的丝氨酸和位置76的苏氨 酸；
[0562] (lxxx)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置72 的丙氨酸、位置73的天冬氨酸、位置74的精氨酸和位置76的苏氨酸，并且所述' 包含在 各自相对于SEQ ID N0:46而言的位置23的苏氨酸、位置24的丝氨酸、位置76的苏氨酸和 位置51的谷氨酸；
[0563] (lxxxi)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置 51的亮氨酸、位置72的丙氨酸、位置73的天冬氨酸、位置74的精氨酸、位置76的苏氨酸、 位置102的谷氨酸和位置105的丙氨酸，并且所述 '包含在各自相对于SEQ ID N0:46而 言的位置23的苏氨酸、位置24的丝氨酸、位置76的苏氨酸和位置51的谷氨酸；或
[0564] (lxxxii)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置 51的亮氨酸、位置72的丙氨酸、位置73的天冬氨酸、位置74的精氨酸、位置76的苏氨酸、 位置102的谷氨酸和位置105的丙氨酸，并且所述 '包含在各自相对于SEQ ID N0:46而 言的位置23的苏氨酸、位置24的丝氨酸、位置76的苏氨酸和位置51的甘氨酸。
[0565] 在一个实例中，所述抗原结合结构域包含以下成对可变区之一的6个⑶R :
[0566] (i)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:46中给出的序列的 VL;
[0567] (ii)由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID NO: 106中给出的序列具有至少大 约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编码 的 '，所述核酸包含与SEQ ID N0:107中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者 所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；
[0568] (iii)包含SEQ ID N0:175中给出的序列的乂11和包含SEQ ID N0:188中给出的序 列的' ;
[0569] (iv)由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID N0:222中给出的序列具有至少大 约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编码 的'，所述核酸包含与SEQ ID N0:228中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者 所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；
[0570] (v)包含SEQ ID N0:176中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:189中给出的序列 的VL;
[0571] (vi)由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID NO:223中给出的序列具有至少大 约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编码 的'，所述核酸包含与SEQ ID N0:228中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者 所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；
[0572] (vii)包含SEQ ID N0:177中给出的序列的乂11和包含SEQ ID N0:190中给出的序 列的' ;
[0573] (viii)由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID N0:224中给出的序列具有至少 大约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编 码的'，所述核酸包含与SEQ ID N0:229中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或 者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；
[0574] (ix)包含SEQ ID N0:178中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:191中给出的序 列的' ;
[0575] (x)由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID NO:224中给出的序列具有至少大 约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编码 的'，所述核酸包含与SEQ ID N0:230中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者 所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；
[0576] (xi)包含SEQ ID N0:179中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:192中给出的序 列的' ;
[0577] (xii)由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID N0:224中给出的序列具有至少 大约95 %同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编 码的'，所述核酸包含与SEQ ID N0:231中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或 者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；
[0578] (xiii)包含SEQ ID N0:180中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:193中给出的 序列的Vl ;
[0579] (xiv)由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID NO:224中给出的序列具有至少 大约95 %同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编 码的'，所述核酸包含与SEQ ID N0:228中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或 者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；
[0580] (xv)包含SEQ ID N0:181中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:194中给出的序 列的' ;
[0581] (xvi)由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID N0:225中给出的序列具有至少 大约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编 码的'，所述核酸包含与SEQ ID N0:230中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或 者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；
[0582] (xvii)包含SEQ ID N0:183中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:196中给出的 序列的Vl ;
[0583] (xviii)由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID NO:226中给出的序列具有至 少大约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸 编码的\，所述核酸包含与SEQ ID N0:230中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列 或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；
[0584] (xix)包含SEQ ID N0:185中给出的序列的乂11和包含SEQ ID N0:198中给出的序 列的' ;
[0585] (XX)由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID N0:226中给出的序列具有至少大 约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编码 的'，所述核酸包含与SEQ ID N0:232中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者 所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；
[0586] (xxi)包含SEQ ID N0:186中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:199中给出的序 列的;和
[0587] (xxii)由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID N0:227中给出的序列具有至少 大约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编 码的'，所述核酸包含与SEQ ID NO: 232中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或 者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；
[0588] (xxiii)包含SEQ ID N0:187中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:200中给出的 序列的 ' ;或
[0589] (xxiv)由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID N0:227中给出的序列具有至少 大约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编 码的'，所述核酸包含与SEQ ID N0:233中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或 者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交。
[0590] 在一个实例中，所述TLla-结合蛋白包含以下6个⑶R:
[0591] ⑴重链⑶R1，其包含SEQ ID N0:43中给出的序列（或在图1E中在标记为"共有 序列"的序列的黑体文本中标记为⑶R1的序列）；
[0592] (ii)重链 CDR2,其包含序列 WXiNPNSGNTGYAQKFQGBEQ ID N0:142)，其中 Xi 为甲 硫氨酸或亮氨酸（或在图1E中在标记为"共有序列"的序列的黑体文本中标记为CDR2的 序列）；
[0593] (iii)重链 CDR3,其包含序列 EVPXJAX2FEY(SEQ ID N0:143)，其中 Xi 为天冬氨酸 或谷氨酸，X2为丝氨酸或丙氨酸。（或在图9B中在标记为"共有序列"的序列的黑体文本 中标记为CDR3的序列）或序列EXfXAAXfXjGEQ ID N0:235)，其中：
[0594] Xi为选自以下的氨基酸：缬氨酸、丙氨酸、丝氨酸、组氨酸、天冬氨酸、亮氨酸、酪氨 酸、脯氨酸、谷氨酰胺或赖氨酸；
[0595] X2为选自以下的氨基酸：丙氨酸、丝氨酸、组氨酸、赖氨酸、谷氨酸或天冬氨酸；
[0596] X3为选自以下的氨基酸：丙氨酸、丝氨酸、天冬氨酸、酪氨酸或苏氨酸；
[0597] X4为选自以下的氨基酸：丝氨酸、丙氨酸、组氨酸、亮氨酸、天冬氨酸或酪氨酸；和
[0598] X5为选自以下的氨基酸：丙氨酸、丝氨酸、组氨酸、亮氨酸、天冬氨酸、脯氨酸、谷氨 酰胺、谷氨酸或赖氨酸；
[0599] (iv)CDRl，其包含序列 XASSSDIGAGLGVIKSEQ ID 勵：139)，其中乂1为丙氨酸或苏 氨酸；X2为甘氨酸或丝氨酸（或在图9C中在标记为"共有序列"的序列的黑体文本中标记 为⑶R1的序列）；
[0600] (v)CDR2,其包含SEQ ID N0:48中给出的序列；和
[0601] (vi)CDR3,其包含SEQ ID N0:49中给出的序列。
[0602] 在一个实例中，所述TLla-结合蛋白包含以下：
[0603] ^…，其包含：
[0604] (i)包含SEQIDN0:144所给出的氨基酸序列的重链FRl;
[0605] (ii)包含SEQ ID N0:43中给出的序列的重链CDR1 ;
[0606] (iii)包含SEQ ID N0:145所给出的氨基酸序列的重链FR2 ;
[0607] (iv)包含SEQ ID N0:142中给出的序列的重链CDR2 ;
[0608] (v)包含SEQ ID N0:146所给出的氨基酸序列的重链FR3 ;
[0609] (vi)包含SEQ ID N0:143或235中给出的序列的重链CDR3 ;和
[0610] (vii)包含SEQ ID N0:147所给出的氨基酸序列的重链FR4 ;和
[0611] 〇3)\，其包含：
[0612] ⑴包含SEQ ID NO: 148所给出的氨基酸序列的轻链FR1 ;
[0613] (ii)包含SEQ ID NO: 139中给出的序列的轻链CDR1 ;
[0614] (iii)包含SEQ ID NO: 149所给出的氨基酸序列的轻链FR2 ;
[0615] (iv)包含SEQ ID NO:48中给出的序列的轻链CDR2 ;
[0616] (v)包含SEQ ID NO: 150所给出的氨基酸序列的轻链FR3 ;
[0617] (vi)包含SEQ ID N0:49中给出的序列的轻链CDR3 ;和
[0618] (vii)包含SEQ ID N0:151所给出的氨基酸序列的轻链FR4。
[0619] 适合包括在重链⑶R3中的另外的残基描述于本文并且在加以必要的修改后应用 于本公开内容的实例。
[0620] 在一个实例中，⑶R依据Kabat编号系统来定义。依据Kabat编号系统定义的示 例性的⑶R描述如上和/或描述于图1A至1H、9B或9C中以黑体文本标记为⑶R1至3,并 且在加以必要的修改后应用于本公开内容的实例。
[0621] 在一个实例中，⑶R依据增强的Chothia编号系统来定义。依据增强的Chothia编 号系统定义的示例性的CDR描述如上和/或描述于图1A至1H中以下划线文本标记为CDR1 至3,并且在加以必要的修改后应用于本公开内容的实例。
[0622] 在一个实例中，所述TLla-结合蛋白包含抗体可变区。
[0623] 在一个实例中，所述TLla-结合蛋白包含VH，其包含SEQ ID N0:2、10、18、26、34、 42、50、58、66、70、74、78、86、90、94、137、152、154-162、173、175-187 或 234 的任何一个中给 出的序列或与前述任何一个具有至少大约80 %同一性的序列。在一个实例中，所述VH包含 SEQ ID N0:26、34、42或94的任何一个中给出的序列与前述任何一个具有至少大约80%同 一性的序列。在一个实例中，所述V H包含SEQ ID N0:42、175-181、183或185-187的任何 一个中给出的序列或与前述任何一个具有至少大约80%同一性的序列。
[0624] 在一个实例中，所述TLla-结合蛋白包含VH，其包含SEQ ID N0:94、137、152、162 或173中给出的序列。在一个实例中，所述VH包含SEQ ID勵:42、58、66、70、74、78、86或 90的任何一个中给出的序列。在一个实例中，所述VH包含SEQ ID NO:42中给出的序列。
[0625] 在一个实例中，所述TLla-结合蛋白包含VH，其包含SEQ ID N0:42中给出的序列 并且包含以下置换或置换组的一个或多个：
[0626] ⑴在SEQ ID N0:42的位置16的丙氨酸；
[0627] (ii)在SEQ ID N0:42的位置100的丙氨酸；
[0628] (iii)在 SEQ ID N0:42 的位置 100 的丝氨酸；
[0629] (iv)在SEQ ID N0:42的位置100的组氨酸；
[0630] (v)在SEQ ID N0:42的位置100的亮氨酸；
[0631] (vi)在SEQ ID N0:42的位置100的天冬氨酸；
[0632] (vii)在 SEQ ID N0:42 的位置 100 的酪氨酸；
[0633] (viii)在 SEQ ID N0:42 的位置 100 的脯氨酸；
[0634] (ix)在SEQ ID N0:42的位置100的谷氨酰胺；
[0635] (X)在SEQ ID N0:42的位置100的赖氨酸；
[0636] (xi)在SEQ ID N0:42的位置101的丙氨酸；
[0637] (xii)在 SEQ ID NO:42 的位置 101 的丝氨酸；
[0638] (xiii)在 SEQ ID NO:42 的位置 101 的组氨酸；
[0639] (xiv)在 SEQ ID NO:42 的位置 101 的亮氨酸；
[0640] (xv)在SEQ ID NO:42的位置101的天冬氨酸；
[0641] (xvi)在 SEQ ID NO:42 的位置 101 的酪氨酸；
[0642] (xvii)在SEQ ID NO:42的位置101的谷氨酰胺；
[0643] (xviii)在 SEQ ID NO:42 的位置 101 的赖氨酸；
[0644] (xix)在 SEQ ID NO:42 的位置 102 的丙氨酸；
[0645] (xx)在SEQ ID NO:42的位置102的丝氨酸；
[0646] (xxi)在 SEQ ID NO:42 的位置 102 的组氨酸；
[0647] (xxii)在 SEQ ID NO:42 的位置 102 的亮氨酸；
[0648] (xxiii)在 SEQ ID NO:42 的位置 102 的酪氨酸；
[0649] (xxiv)在 SEQ ID NO:42 的位置 102 的脯氨酸；
[0650] (xxv)在SEQ ID NO:42的位置102的谷氨酰胺；
[0651] (xxvi)在 SEQ ID NO:42 的位置 102 的赖氨酸；
[0652] (xxvii)在 SEQ ID NO:42 的位置 103 的丙氨酸；
[0653] (xxviii)在 SEQ ID NO:42 的位置 103 的丝氨酸；
[0654] (xxix)在 SEQ ID NO:42 的位置 103 的组氨酸；
[0655] (xxx)在 SEQ ID NO:42 的位置 103 的亮氨酸；
[0656] (xxxi)在SEQ ID NO:42的位置103的天冬氨酸；
[0657] (xxxii)在 SEQ ID NO:42 的位置 103 的酪氨酸；
[0658] (xxxiii)在 SEQ ID NO:42 的位置 103 的脯氨酸；
[0659] (xxxiv)在SEQ ID NO:42的位置103的谷氨酰胺；
[0660] (xxxv)在 SEQ ID NO:42 的位置 103 的赖氨酸；
[0661] (xxxvi)在 SEQ ID NO:42 的位置 104 的丝氨酸；
[0662] (xxxvii)在 SEQ ID NO:42 的位置 104 的组氨酸；
[0663] (xxxviii)在 SEQ ID NO:42 的位置 104 的亮氨酸；
[0664] (xxxix)在SEQ ID NO:42的位置104的天冬氨酸；
[0665] (xl)在SEQ ID NO:42的位置104的酪氨酸；
[0666] (xli)在 SEQ ID NO:42 的位置 104 的脯氨酸；
[0667] (xlii)在SEQ ID NO:42的位置104的谷氨酰胺；
[0668] (xliii)在 SEQ ID NO:42 的位置 104 的赖氨酸；
[0669] (xliv)在 SEQ ID NO:42 的位置 105 的丙氨酸；
[0670] (xlv)在 SEQ ID NO:42 的位置 105 的组氨酸；
[0671] (xlvi)在 SEQ ID NO:42 的位置 105 的亮氨酸；
[0672] (xlvii)在SEQ ID NO:42的位置105的天冬氨酸；
[0673] (xlviii)在 SEQ ID NO:42 的位置 105 的酪氨酸；
[0674] (xlix)在 SEQ ID NO:42 的位置 105 的脯氨酸；
[0675] (1)在SEQ ID NO :42的位置105的谷氨酰胺；
[0676] (li)在SEQ ID NO:42的位置105的赖氨酸；
[0677] (lii)在 SEQ ID NO:42 的位置 107 的丙氨酸；
[0678] (liii)在 SEQ ID NO:42 的位置 107 的丝氨酸；
[0679] (liv)在 SEQ ID NO:42 的位置 107 的组氨酸；
[0680] (lv)在SEQ ID NO:42的位置107的亮氨酸；
[0681] (lvi)在SEQ ID NO:42的位置107的天冬氨酸；
[0682] (lvii)在 SEQ ID NO:42 的位置 107 的酪氨酸；
[0683] (lviii)在 SEQ ID NO:42 的位置 107 的脯氨酸；
[0684] (lix)在SEQ ID NO:42的位置107的谷氨酰胺；
[0685] (lx)在SEQ ID NO:42的位置107的赖氨酸；
[0686] (lxi)在SEQ ID NO:42的位置41的苏氨酸；
[0687] (lxii)在 SEQ ID NO:42 的位置 47 的丝氨酸；
[0688] (lxiii)在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置72的丙氨酸、 位置73的天冬氨酸、位置74的精氨酸和位置76的苏氨酸；
[0689] (lxiv)在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置51的亮氨酸和 位置102的谷氨酸；
[0690] (lxv)在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置51的亮氨酸、位 置102的谷氨酸和位置105的丙氨酸；
[0691] (lxvi)位置41的脯氨酸、位置51的亮氨酸、位置72的丙氨酸、位置73的天冬氨 酸、位置74的精氨酸、位置76的苏氨酸位置、102的谷氨酸和位置105的丙氨酸；或
[0692] (lxvii)与前述任何一个具有至少大约80%同一性的序列。
[0693] 在一个实例中，所述TLla-结合蛋白包含由核酸编码的VH，所述核酸包含SEQ ID N0:96、98、100、102、104、106、108、110、112、113、114、115、117、118 或 222-227 的任何一个 中给出的序列或者与其具有至少大约80%同一性的序列，或者所述核酸在中度至高度严格 性条件下与其杂交。
[0694] 在一个实例中，所述TLla-结合蛋白包含由核酸编码的VH，所述核酸包含SEQ ID NO: 106或222-227中给出的序列或者与其具有至少大约80%同一性的序列，或者所述核酸 在中度至高度严格性条件下与其杂交。
[0695] 在一个实例中，所述TLla-结合蛋白包含八，其包含SEQ ID N0:6、14、22、30、38、 46、54、62、82、95、138、153、163或174的任何一个中给出的序列，或与前述任何一个具有至 少大约80%同一性的序列。在一个实例中，所述八包含SEQ ID N0:30、38、46、188-194、196 或198-200的任何一个中给出的序列或者与前述任何一个具有至少大约80%同一性的序 列。
[0696] 在一个实例中，所述TLla-结合蛋白包含八，其包含SEQ ID N0:95、138、153、163 或174中给出的序列。在一个实例中，所述TLla-结合蛋白包含八，其包含SEQ ID N0:46、 62或82的任何一个中给出的序列。在一个实例中，所述TLla-结合蛋白包含 '，其包含SEQ ID NO:46中给出的序列。
[0697] 在一个实例中，所述TLla-结合蛋白包含'，其包含SEQ ID N0:46中给出的序列 并且包含以下置换或置换组的一个或多个：
[0698] ⑴在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0699] (ii)在SEQ ID NO:46的位置23的苏氨酸；
[0700] (iii)在SEQ ID NO:46的位置28的天冬酰胺；
[0701] (iv)在SEQ ID NO:46的位置33的酪氨酸；
[0702] (v)在SEQ ID NO :46的位置34的天冬氨酸；
[0703] (vi)在SEQ ID NO:46的位置53的天冬酰胺；
[0704] (vii)在SEQ ID NO:46的位置54的丝氨酸；
[0705] (viii)在 SEQ ID NO:46 的位置 82 的丙氨酸；
[0706] (ix)在SEQ ID NO:46的位置95的丝氨酸；
[0707] (x)在SEQ ID NO:46的位置96的丝氨酸；
[0708] (xi)在各自相对于SEQ ID N0:46而言的位置23的苏氨酸、位置24的丝氨酸和位 置76的苏氨酸；
[0709] (xii)在各自相对于SEQ ID N0:46而言的位置23的苏氨酸和位置76的苏氨酸；
[0710] (xiii)在各自相对于SEQ ID N0:46而言的位置23的苏氨酸、位置24的丝氨酸、 位置76的苏氨酸和位置51的谷氨酸；
[0711] (xiv)在各自相对于SEQ ID N0:46而言的位置23的苏氨酸、位置24的丝氨酸、位 置76的苏氨酸和位置51的甘氨酸；或
[0712] (xv)与前述任何一个具有至少大约80%同一性的序列。
[0713] 在一个实例中，所述TLla-结合蛋白包含由核酸编码的'，所述核酸包含SEQ ID N0:97、99、101、103、105、107、109、lll、116或228-233的任何一个中给出的序列或者与其 具有至少大约80%同一性的序列，或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交。
[0714] 在一个实例中，所述蛋白包含由核酸编码的'，所述核酸包含SEQ ID N0:107或 228-233中给出的序列或者与其具有至少大约80%同一性的序列，或者所述核酸在中度至 高度严格性条件下与其杂交。
[0715] 在一个实例中，所述TLla-结合蛋白是结构域抗体，其任选地连接到重链恒定区 或Fc或重链恒定结构域（C H) 2和/或CH3或与免疫效应细胞结合的蛋白上。
[0716] 在一个实例中，本公开内容的TLla-结合蛋白至少包含V!^P'，其中所述VH和' 结合以形成包含抗原结合结构域的Fv。例如，所述TLla-结合蛋白包含以下成对V!^P '的 任何一个：
[0717] ⑴包含SEQ ID N0:2中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:6中给出的序列的 VL;
[0718] (ii)包含SEQ ID NO: 10中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 14中给出的序列 的VL;
[0719] (iii)包含SEQ ID NO: 18中给出的序列的乂11和包含SEQ ID NO:22中给出的序列 的VL;
[0720] (iv)包含SEQ ID NO:26中给出的序列的乂11和包含SEQ ID NO:30中给出的序列 的VL;
[0721] (v)包含SEQ ID NO:34中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:38中给出的序列的 VL;
[0722] (vi)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:46中给出的序列 的VL;
[0723] (vii)包含SEQ ID NO:50中给出的序列的乂11和包含SEQ ID NO:54中给出的序列 的VL;
[0724] (viii)包含SEQ ID N0:58中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:46中给出的序 列的' ;
[0725] (ix)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:62中给出的序列 的VL;
[0726] (x)包含SEQ ID NO:66中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:62中给出的序列的 VL;
[0727] (xi)包含SEQ ID N0:70中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:62中给出的序列 的VL;
[0728] (xii)包含SEQ ID N0:74中给出的序列的乂11和包含SEQ ID N0:62中给出的序列 的VL;
[0729] (xiii)包含SEQ ID N0:78中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:62中给出的序 列的' ;
[0730] (xiv)包含SEQ ID NO:58中给出的序列的乂11和包含SEQ ID NO:82中给出的序列 的VL;
[0731] (xv)包含SEQ ID NO:86中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:46中给出的序列 的VL;
[0732] (xvi)包含SEQ ID NO:90中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:46中给出的序列 的VL;
[0733] (xvii)包含SEQ ID N0:58中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:62中给出的序 列的' ;
[0734] (xviii)包含SEQ ID NO:154中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:164中给出的 序列的Vl ;
[0735] (xix)包含SEQ ID NO: 155中给出的序列的乂11和包含SEQ ID NO: 163中给出的序 列的' ;
[0736] (xx)包含SEQ ID NO: 156中给出的序列的VH和包含SEQ ID NO: 165中给出的序 列的' ;
[0737] (xxi)包含SEQ ID NO: 157中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 166中给出的序 列的' ;
[0738] (xxii)包含SEQ ID N0:158中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:167中给出的 序列的Vl ;
[0739] (xxiii)包含SEQ ID NO:159中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:168中给出的 序列的Vl ;
[0740] (xxiv)包含SEQ ID NO: 160中给出的序列的VH和包含SEQ ID NO: 169中给出的 序列的Vl ;
[0741] (xxv)包含SEQ ID NO: 161中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 170中给出的序 列的';
[0742] (xxvi)包含SEQ ID N0:234中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:169中给出的 序列的Vl ;
[0743] (xxvii)包含SEQ ID N0:154中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:46中给出的 序列的Vl ;
[0744] (xxviii)包含SEQ ID N0:155中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:46中给出的 序列的Vl ;
[0745] (xxix)包含SEQ ID N0:156中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:46中给出的序 列的' ;
[0746] (xxx)包含SEQ ID NO: 157中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:46中给出的序 列的' ;
[0747] (xxxi)包含SEQ ID N0:158中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:46中给出的序 列的' ;
[0748] (xxxii)包含SEQ ID N0:159中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:46中给出的 序列的Vl ;
[0749] (xxxiii)包含SEQ ID N0:160中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:46中给出的 序列的Vl ;
[0750] (xxxiv)包含SEQ ID N0:161中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:46中给出的 序列的Vl ;
[0751] (xxxv)包含SEQ ID NO:234中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:46中给出的序 列的' ;
[0752] (xxxvi)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:164中给出的 序列的Vl ;
[0753] (xxxvii)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:165中给出的 序列的Vl ;
[0754] (xxxviii)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:166中给出 的序列的';
[0755] (xxxix)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:167中给出的 序列的Vl ;
[0756] (xl)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:168中给出的序列 的VL;
[0757] (xli)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:169中给出的序 列的' ;
[0758] (xlii)包含SEQ ID NO:42中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:170中给出的序 列的' ;
[0759] (xliii)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:171中给出的 序列的Vl ;
[0760] (xliv)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的乂11和包含SEQ ID N0:172中给出的序 列的' ;
[0761] (xlv)包含SEQ ID N0:175中给出的序列的乂11和包含SEQ ID N0:188中给出的序 列的' ;
[0762] (xlvi)包含SEQ ID N0:176中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:189中给出的 序列的Vl ;
[0763] (xlvii)包含SEQ ID NO:177中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:190中给出的 序列的Vl ;
[0764] (xlviii)包含SEQ ID NO: 178中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 191中给出 的序列的';
[0765] (xlix)包含SEQ ID NO: 179中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 192中给出的 序列的Vl ;
[0766] (1)包含SEQ ID NO: 180中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 193中给出的序列 的VL;
[0767] (li)包含SEQ ID NO: 181中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 194中给出的序 列的' ;
[0768] (lii)包含SEQ ID N0:182中给出的序列的乂11和包含SEQ ID N0:195中给出的序 列的' ;
[0769] (liii)包含SEQ ID N0:183中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:196中给出的 序列的Vl ;
[0770] (liv)包含SEQ ID NO:184中给出的序列的乂11和包含SEQ ID NO:197中给出的序 列的' ;
[0771] (lv)包含SEQ ID N0:185中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:198中给出的序 列的' ;
[0772] (lvi)包含SEQ ID N0:186中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:199中给出的序 列的 ' ;或
[0773] (lvii)包含SEQ ID N0:187中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:200中给出的 序列的八。
[0774] 在一个实例中，所述TLla-结合蛋白包含以下成对VH和 '的任何一个：
[0775] ⑴包含SEQ ID N0:26中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:30中给出的序列的 VL;
[0776] (ii)包含SEQ ID NO:34中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:38中给出的序列 的VL;
[0777] (iii)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的乂11和包含SEQ ID N0:46中给出的序列 的VL;
[0778] (iv)包含SEQ ID NO: 175中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 188中给出的序 列的' ;
[0779] (v)包含SEQ ID N0:176中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:189中给出的序列 的VL;
[0780] (vi)包含SEQ ID NO: 177中给出的序列的VH和包含SEQ ID NO: 190中给出的序 列的' ;
[0781] (vii)包含SEQ ID N0:178中给出的序列的乂11和包含SEQ ID N0:191中给出的序 列的' ;
[0782] (viii)包含SEQ ID N0:179中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:192中给出的 序列的Vl ;
[0783] (ix)包含SEQ ID NO: 180中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 193中给出的序 列的' ;
[0784] (x)包含SEQ ID NO: 181中给出的序列的VH和包含SEQ ID NO: 194中给出的序列 的VL;
[0785] (xi)包含SEQ ID NO: 183中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 196中给出的序 列的' ;
[0786] (xii)包含SEQ ID NO:185中给出的序列的乂11和包含SEQ ID NO:198中给出的序 列的' ;
[0787] (xiii)包含SEQ ID N0:186中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:199中给出的 序列的 ' ;或
[0788] (xiv)包含SEQ ID N0:187中给出的序列的乂11和包含SEQ ID N0:200中给出的序 列的
[0789] 在一个实例中，所述TLla-结合蛋白含有包含SEQ ID N0:94中给出的序列的VjP 包含SEQ ID N0:95中给出的序列的八。
[0790] 在一个实例中，所述TLla-结合蛋白含有包含SEQ ID N0:137中给出的序列的VH 和包含SEQ ID NO: 138中给出的序列的八。
[0791] 在一个实例中，所述TLla-结合蛋白含有包含SEQ ID N0:152中给出的序列的乂11 和包含SEQ ID N0:153中给出的序列的八。
[0792] 在一个实例中，所述TLla-结合蛋白含有包含SEQ ID N0:173中给出的序列的VH 和包含SEQ ID NO: 174中给出的序列的八。
[0793] 在一个实例中，所述TLla-结合蛋白包含以下成对VH和 '的任何一个：
[0794] (i)包含SEQ ID N0:58中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:46中给出的序列的 VL;
[0795] (ii)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:62中给出的序列 的VL;
[0796] (iii)包含SEQ ID N0:66中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:62中给出的序列 的VL;
[0797] (iv)包含SEQ ID N0:70中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:62中给出的序列 的VL;
[0798] (v)包含SEQ ID NO:74中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:62中给出的序列的 VL;
[0799] (vi)包含SEQ ID N0:78中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:62中给出的序列 的VL;
[0800] (vii)包含SEQ ID NO:58中给出的序列的乂11和包含SEQ ID NO:82中给出的序列 的VL;
[0801] (viii)包含SEQ ID N0:86中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:46中给出的序 列的' ;
[0802] (ix)包含SEQ ID N0:90中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:46中给出的序列 的 ' ;或
[0803] (x)包含SEQ ID NO:58中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:62中给出的序列的 \。
[0804] 例如，所述TLla-结合蛋白含有包含SEQ ID N0:42中给出的序列的乂11和包含SEQ ID N0:46中给出的序列的'，其中所述V!^P/或'包含以下置换或置换组的一个或多个：
[0805] ⑴所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置16的丙氨酸；
[0806] (ii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置100的丙氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0807] (iii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置100的丝氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0808] (iv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置100的组氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0809] (v)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置100的亮氨酸和所述八包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0810] (vi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置100的天冬氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0811] (vii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置100的酪氨酸和所述八包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0812] (viii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置100的脯氨酸和所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0813] (ix)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置100的谷氨酰胺和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0814] (X)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置100的赖氨酸和所述八包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0815] (xi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置101的丙氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0816] (xii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置101的丝氨酸和所述八包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0817] (xiii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置101的组氨酸和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0818] (xiv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置101的亮氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0819] (xv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置101的天冬氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0820] (xvi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置101的酪氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0821] (xvii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置101的谷氨酰胺和所述'包含在SEQ ID NO :46的位置76的苏氨酸；
[0822] (xviii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置101的赖氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0823] (xix)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置102的丙氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0824] (XX)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置102的丝氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0825] (xxi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置102的组氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0826] (xxii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置102的亮氨酸和所述\包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0827] (xxiii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置102的酪氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0828] (xxiv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置102的脯氨酸和所述\包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0829] (xxv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置102的谷氨酰胺和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0830] (xxvi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置102的赖氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0831] (xxvii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的丙氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0832] (xxviii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的丝氨酸和所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0833] (xxix)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的组氨酸和所述\包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0834] (XXX)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的亮氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0835] (xxxi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的天冬氨酸和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0836] (xxxii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的酪氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0837] (xxxiii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的脯氨酸和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0838] (xxxiv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的谷氨酰胺和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0839] (xxxv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的赖氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0840] (xxxvi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置104的丝氨酸和所述 ' 包含在SEQ ID NO :46的位置76的苏氨酸；
[0841] (xxxvii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置104的组氨酸和所述'包含在SEQ ID NO :46的位置76的苏氨酸；
[0842] (xxxviii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置104的亮氨酸和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0843] (xxxix)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置104的天冬氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0844] (xl)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置104的酪氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0845] (xli)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置104的脯氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0846] (xlii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置104的谷氨酰胺和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0847] (xliii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置104的赖氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0848] (xliv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置105的丙氨酸和所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0849] (xlv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置105的组氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0850] (xlvi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置105的亮氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0851] (xlvii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置105的天冬氨酸和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0852] (xlviii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置105的酪氨酸和所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0853] (xlix)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置105的脯氨酸和所述\包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0854] (1)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置105的谷氨酰胺和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0855] (li)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置105的赖氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0856] (lii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的丙氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0857] (liii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的丝氨酸和所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0858] (liv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的组氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0859] (lv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的亮氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0860] (lvi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的天冬氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO :46的位置76的苏氨酸；
[0861] (lvii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的酪氨酸和所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0862] (lviii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的脯氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0863] (lix)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的谷氨酰胺和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0864] (lx)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的赖氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0865] (lxi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置23的丙氨酸；
[0866] (lxii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述八包含在SEQ ID NO :46的位置28的天冬氨酸；
[0867] (lxiii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置33的酪氨酸；
[0868] (lxiv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述八包含在SEQ ID NO :46的位置34的天冬氨酸；
[0869] (lxv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO :46的位置53的天冬酰胺；
[0870] (lxvi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置54的丝氨酸；
[0871] (lxvii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置82的丙氨酸；
[0872] (lxviii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述\包含在SEQ ID N0:46的位置95的丝氨酸；
[0873] (lxix)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述八包含在SEQ ID NO:46的位置96的丝氨酸；
[0874] (lxx)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[0875] (lxxi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置47的丝氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置23的苏氨酸；
[0876] (lxxii)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置 72的丙氨酸、位置73的天冬氨酸、位置74的精氨酸和位置76的苏氨酸，并且所述\包含 在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0877] (lxxiii)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置 51的亮氨酸和位置102的谷氨酸，并且所述 '包含在各自相对于SEQ ID N0:46而言的位 置24的丝氨酸和位置76的苏氨酸；
[0878] (lxxiv)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置 51的亮氨酸和位置102的谷氨酸，并且所述 '包含在各自相对于SEQ ID N0:46而言的位 置23的苏氨酸、位置24的丝氨酸和位置76的苏氨酸；
[0879] (lxxv)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置51 的亮氨酸和位置102的谷氨酸，并且所述 '包含在各自相对于SEQ ID N0:46而言的位置 23的苏氨酸和位置76的苏氨酸；
[0880] (lxxvi)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置 51的亮氨酸和位置102的谷氨酸，并且所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[0881] (lxxvii)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置 51的亮氨酸、位置102的谷氨酸和位置105的丙氨酸，并且所述\包含在各自相对于SEQ ID N0:46而言的位置23的苏氨酸、位置24的丝氨酸和位置76的苏氨酸；
[0882] (lxxviii)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位 置51的亮氨酸、位置102的谷氨酸和位置105的丙氨酸，并且所述'包含在SEQ ID N0:46 的位置76的苏氨酸；
[0883] (lxxix)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置 72的丙氨酸、位置73的天冬氨酸、位置74的精氨酸和位置76的苏氨酸，并且所述\包含 在各自相对于SEQ ID N0:46而言的位置23的苏氨酸、位置24的丝氨酸和位置76的苏氨 酸；
[0884] (lxxx)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置72 的丙氨酸、位置73的天冬氨酸、位置74的精氨酸和位置76的苏氨酸，并且所述' 包含在 各自相对于SEQ ID N0:46而言的位置23的苏氨酸、位置24的丝氨酸、位置76的苏氨酸和 位置51的谷氨酸；
[0885] (lxxxi)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置 51的亮氨酸、位置72的丙氨酸、位置73的天冬氨酸、位置74的精氨酸、位置76的苏氨酸、 位置102的谷氨酸和位置105的丙氨酸，并且所述 '包含在各自相对于SEQ ID N0:46而 言的位置23的苏氨酸、位置24的丝氨酸、位置76的苏氨酸和位置51的谷氨酸；或
[0886] (lxxxii)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置 51的亮氨酸、位置72的丙氨酸、位置73的天冬氨酸、位置74的精氨酸、位置76的苏氨酸、 位置102的谷氨酸和位置105的丙氨酸，并且所述 '包含在各自相对于SEQ ID N0:46而 言的位置23的苏氨酸、位置24的丝氨酸、位置76的苏氨酸和位置51的甘氨酸。
[0887] 在一个实例中，所述VH和所述'在单一条多肽链中。例如，所述TLla-结合蛋白 为：
[0888] (i)单链 Fv 片段（scFv);
[0889] (ii)二聚体 scFv (di-scFv);
[0890] (iii)连接到重链恒定区或Fc或重链恒定结构域（CH)2和/或CH3上的（i)或 (ii)之一；或
[0891] (iv)连接到与免疫效应细胞结合的蛋白上的（i)或（ii)之一。
[0892] 在另一实例中，所述'和VH在分开的多肽链中。例如，所述TLla-结合蛋白为：
[0893] ⑴双抗体；
[0894] (ii)三抗体；
[0895] (iii)四抗体；
[0896] (iv)Fab ；
[0897] (v)F(ab, )2 ；
[0898] (vi)Fv ；
[0899] (vii)连接到重链恒定区或Fc或重链恒定结构域（CH)2和/或CH3上的（i)至 (vi)之一；或
[0900] (viii)连接到与免疫效应细胞结合的蛋白上的（i)至（vi)之一。
[0901] 在本公开内容的示例性形式中，所述TLla-结合蛋白是抗体。
[0902] 本公开内容的示例性的TLla-结合蛋白是嵌合的、脱免疫化的（de-immunized)、 人源化的、人的、同人源化的（synhumanized)或灵长类化的。
[0903] 在一个实例中，本公开内容提供包含抗原结合结构域的抗体，其中所述抗原结合 结构域特异性结合到TLla上，并且，其中所述抗体抑制TLla与DR3的相互作用而不抑制 TLla与DcR3的相互作用，所述抗原结合结构域包含以下任何一个：
[0904] (i)包含SEQ ID N0:2中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:6中给出的序列的 VL;
[0905] (ii)包含SEQ ID NO: 10中给出的序列的VH和包含SEQ ID NO: 14中给出的序列 的VL;
[0906] (iii)包含SEQ ID NO: 18中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:22中给出的序列 的VL;
[0907] (iv)包含SEQ ID NO:26中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:30中给出的序列 的VL;
[0908] (v)包含SEQ ID NO:34中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:38中给出的序列的 VL;
[0909] (vi)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:46中给出的序列 的VL;
[0910] (vii)包含SEQ ID NO:50中给出的序列的乂11和包含SEQ ID NO:54中给出的序列 的VL;
[0911] (viii)包含SEQ ID N0:58中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:46中给出的序 列的' ;
[0912] (ix)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:62中给出的序列 的VL;
[0913] (x)包含SEQ ID NO:66中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:62中给出的序列的 VL;
[0914] (xi)包含SEQ ID N0:70中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:62中给出的序列 的VL;
[0915] (xii)包含SEQ ID NO:74中给出的序列的乂11和包含SEQ ID NO:62中给出的序列 的VL;
[0916] (xiii)包含SEQ ID N0:78中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:62中给出的序 列的' ;
[0917] (xiv)包含SEQ ID N0:58中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:82中给出的序列 的VL;
[0918] (xv)包含SEQ ID NO:86中给出的序列的乂11和包含SEQ ID NO:46中给出的序列 的VL;
[0919] (xvi)包含SEQ ID NO:90中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:46中给出的序列 的VL;
[0920] (xvii)包含SEQ ID N0:58中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:62中给出的序 列的' ;
[0921] (xviii)包含SEQ ID NO:154中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:164中给出的 序列的Vl ;
[0922] (xix)包含SEQ ID NO: 155中给出的序列的乂11和包含SEQ ID NO: 163中给出的序 列的' ;
[0923] (xx)包含SEQ ID NO: 156中给出的序列的VH和包含SEQ ID NO: 165中给出的序 列的' ;
[0924] (xxi)包含SEQ ID NO: 157中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 166中给出的序 列的' ;
[0925] (xxii)包含SEQ ID N0:158中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:167中给出的 序列的Vl ;
[0926] (xxiii)包含SEQ ID NO:159中给出的序列的VH和包含SEQ ID NO:168中给出的 序列的Vl ;
[0927] (xxiv)包含SEQ ID NO: 160中给出的序列的VH和包含SEQ ID NO: 169中给出的 序列的Vl ;
[0928] (xxv)包含SEQ ID NO: 161中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 170中给出的序 列的' ;
[0929] (xxvi)包含SEQ ID NO:234中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 169中给出的 序列的Vl ;
[0930] (xxvii)包含SEQ ID N0:154中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:46中给出的 序列的Vl ;
[0931] (xxviii)包含SEQ ID NO:155中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:46中给出的 序列的Vl ;
[0932] (xxix)包含SEQ ID N0:156中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:46中给出的序 列的' ;
[0933] (xxx)包含SEQ ID NO: 157中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:46中给出的序 列的' ;
[0934] (xxxi)包含SEQ ID N0:158中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:46中给出的序 列的' ;
[0935] (xxxii)包含SEQ ID N0:159中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:46中给出的 序列的Vl ;
[0936] (xxxiii)包含SEQ ID N0:160中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:46中给出的 序列的Vl ;
[0937] (xxxiv)包含SEQ ID N0:161中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:46中给出的 序列的Vl ;
[0938] (xxxv)包含SEQ ID NO:234中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:46中给出的序 列的' ;
[0939] (xxxvi)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:164中给出的 序列的Vl ;
[0940] (xxxvii)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:165中给出的 序列的Vl ;
[0941] (xxxviii)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:166中给出 的序列的';
[0942] (xxxix)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:167中给出的 序列的Vl ;
[0943] (xl)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:168中给出的序列 的VL;
[0944] (xli)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:169中给出的序 列的' ;
[0945] (xlii)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:170中给出的序 列的' ;
[0946] (xliii)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:171中给出的 序列的Vl ;
[0947] (xliv)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的乂11和包含SEQ ID N0:172中给出的序 列的' ;
[0948] (xlv)包含SEQ ID NO: 175中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 188中给出的序 列的' ;
[0949] (xlvi)包含SEQ ID NO: 176中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 189中给出的 序列的Vl ;
[0950] (xlvii)包含SEQ ID NO:177中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:190中给出的 序列的Vl ;
[0951] (xlviii)包含SEQ ID NO: 178中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 191中给出 的序列的';
[0952] (xlix)包含SEQ ID N0:179中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:192中给出的 序列的Vl ;
[0953] (1)包含SEQ ID NO: 180中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 193中给出的序列 的VL;
[0954] (li)包含SEQ ID NO: 181中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 194中给出的序 列的' ;
[0955] (lii)包含SEQ ID N0:182中给出的序列的乂11和包含SEQ ID N0:195中给出的序 列的' ;
[0956] (liii)包含SEQ ID N0:183中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:196中给出的 序列的Vl ;
[0957] (liv)包含SEQ ID NO:184中给出的序列的乂11和包含SEQ ID NO:197中给出的序 列的' ;
[0958] (lv)包含SEQ ID NO: 185中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 198中给出的序 列的' ;
[0959] (lvi)包含SEQ ID NO:186中给出的序列的VH和包含SEQ ID NO:199中给出的序 列的 ' ;或
[0960] (lvii)包含SEQ ID N0:187中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:200中给出的 序列的八。
[0961] 在一个实例中，所述抗体包含以下成对VH和 '的任何一个：
[0962] ⑴包含SEQ ID N0:26中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:30中给出的序列的 VL;
[0963] (ii)包含SEQ ID NO:34中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:38中给出的序列 的 ' ;和
[0964] (iii)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:46中给出的序列 的VL。
[0965] 在一个实例中，所述抗体包含以下成对VH和 '的任何一个：
[0966] (i)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:46中给出的序列的 VL;
[0967] (ii)由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID NO: 106中给出的序列具有至少大 约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编码 的 '，所述核酸包含与SEQ ID N0:107中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者 所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；
[0968] (iii)包含SEQ ID N0:175中给出的序列的乂11和包含SEQ ID N0:188中给出的序 列的' ;
[0969] (iv)由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID N0:222中给出的序列具有至少大 约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编码 的'，所述核酸包含与SEQ ID N0:228中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者 所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；
[0970] (v)包含SEQ ID N0:176中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:189中给出的序列 的VL;
[0971] (vi)由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID NO:223中给出的序列具有至少大 约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编码 的'，所述核酸包含与SEQ ID N0:228中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者 所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；
[0972] (vii)包含SEQ ID N0:177中给出的序列的乂11和包含SEQ ID N0:190中给出的序 列的' ;
[0973] (viii)由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID N0:224中给出的序列具有至少 大约95%同一性的序列或所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编码 的'，所述核酸包含与SEQ ID NO: 229中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者 所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；
[0974] (ix)包含SEQ ID N0:178中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:191中给出的序 列的' ;
[0975] (X)由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID N0:224中给出的序列具有至少大 约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编码 的'，所述核酸包含与SEQ ID N0:230中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者 所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；
[0976] (xi)包含SEQ ID N0:179中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:192中给出的序 列的' ;
[0977] (xii)由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID N0:224中给出的序列具有至少 大约95 %同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编 码的'，所述核酸包含与SEQ ID N0:231中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或 者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；
[0978] (xiii)包含SEQ ID N0:180中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:193中给出的 序列的Vl ;
[0979] (xiv)由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID NO:224中给出的序列具有至少 大约95 %同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编 码的'，所述核酸包含与SEQ ID N0:228中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或 者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；
[0980] (xv)包含SEQ ID N0:181中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:194中给出的序 列的' ;
[0981] (xvi)由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID N0:225中给出的序列具有至少 大约95 %同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编 码的'，所述核酸包含与SEQ ID N0:230中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或 者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；
[0982] (xvii)包含SEQ ID N0:183中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:196中给出的 序列的Vl ;
[0983] (xviii)由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID NO:226中给出的序列具有至 少大约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸 编码的\，所述核酸包含与SEQ ID N0:230中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列 或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；
[0984] (xix)包含SEQ ID N0:185中给出的序列的乂11和包含SEQ ID N0:198中给出的序 列的' ;
[0985] (XX)由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID N0:226中给出的序列具有至少大 约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编码 的'，所述核酸包含与SEQ ID N0:232中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者 所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；
[0986] (xxi)包含SEQ ID N0:186中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:199中给出的序 列的' ;
[0987] (xxii)由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID NO:227中给出的序列具有至少 大约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编 码的'，所述核酸包含与SEQ ID N0:232中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或 者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；
[0988] (xxiii)包含SEQ ID N0:187中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:200中给出的 序列的 ' ;或
[0989] (xxiv)由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID N0:227中给出的序列具有至少 大约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编 码的'，所述核酸包含与SEQ ID N0:233中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或 所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交。
[0990] 在一个实例中，所述抗体含有包含SEQ ID N0:94中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 95中给出的序列的
[0991] 在一个实例中，所述抗体包含以下成对VH和 '的任何一个：
[0992] (i)包含SEQ ID N0:58中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:46中给出的序列的 VL;
[0993] (ii)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:62中给出的序列 的VL;
[0994] (iii)包含SEQ ID NO:66中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:62中给出的序列 的VL;
[0995] (iv)包含SEQ ID N0:70中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:62中给出的序列 的VL;
[0996] (v)包含SEQ ID NO:74中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:62中给出的序列的 VL;
[0997] (vi)包含SEQ ID N0:78中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:62中给出的序列 的VL;
[0998] (vii)包含SEQ ID NO:58中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:82中给出的序列 的VL;
[0999] (viii)包含SEQ ID N0:86中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:46中给出的序 列的' ;
[1000] (ix)包含SEQ ID N0:90中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:46中给出的序列 的 ' ;或
[1001] (X)包含SEQ ID NO:58中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:62中给出的序列的 \。
[1002] 本公开内容还提供TLla-结合抗体，其包含SEQ ID N0:42的VjPSEQ ID N0:46 的VL。
[1003] 本公开内容还提供TLla-结合抗体，其包含SEQ ID N0:175的VjPSEQ ID N0:188 的VL。
[1004] 本公开内容还提供TLla-结合抗体，其包含SEQ ID N0:176的VjPSEQ ID N0:189 的VL。
[1005] 本公开内容还提供TLla-结合抗体，其包含SEQ ID N0:177的VjPSEQ ID N0:190 的VL。
[1006] 本公开内容还提供TLla-结合抗体，其包含SEQ ID N0:178的VjPSEQ ID N0:191 的VL。
[1007] 本公开内容还提供TLla-结合抗体，其包含SEQ ID N0:179的VjPSEQ ID N0:192 的VL。
[1008] 本公开内容还提供TLla-结合抗体，其包含SEQ ID N0:180的VjPSEQ ID N0:193 的VL。
[1009] 本公开内容还提供TLla-结合抗体，其包含SEQIDN0:181的V H和SEQIDN0:194 的VL。
[1010] 本公开内容还提供TLla-结合抗体，其包含SEQ ID N0:183的VjPSEQ ID N0:196 的VL。
[1011] 本公开内容还提供TLla-结合抗体，其包含SEQ ID N0:185的VjPSEQ ID N0:198 的VL。
[1012] 本公开内容还提供TLla-结合抗体，其包含SEQ ID N0:186的VjPSEQ ID N0:199 的VL。
[1013] 本公开内容还提供TLla-结合抗体，其包含SEQIDN0:187的V H和SEQIDN0:200 的VL。
[1014] 前述列表中给出的抗体提供一个或多个以下优势：
[1015] (i)抑制TLla与DR3的相互作用而不抑制TLla与DcR3的相互作用，如通过本文 所述的方法测定；
[1016] (ii)与所述TLla-结合蛋白不存在时的细胞凋亡水平相比，降低TF-1细胞（例 如大约7xl0 4细胞至8xl04细胞（例如7. 5xl04细胞））的细胞凋亡水平，其EC5(I小于大约 2nM (例如小于大约1. 5nM或1. 2nM或1. InM ;或InM或更少）；或
[1017] (iii)结合到细胞表面的TLla上，其EC5(I小于大约10nM，例如小于大约5nM或3nM 或2nM，例如，当使用流式细胞术对大约2xl05至3xl05细胞（例如2. 5xl05细胞）进行评价 时。
[1018] 在一个实例中，所述抗体含有包含SEQ ID NO: 137中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:138中给出的序列的Vp
[1019] 在一个实例中，所述TLla-结合蛋白含有包含SEQ ID NO: 152中给出的序列的乂11 和包含SEQ ID N0:153中给出的序列的八。
[1020] 在一个实例中，所述TLla-结合蛋白含有包含SEQ ID N0:162中给出的序列的乂11 和包含SEQ ID N0:172中给出的序列的八。
[1021] 在一个实例中，所述TLla-结合蛋白含有包含SEQ ID N0:163中给出的序列的乂11 和包含SEQ ID N0:174中给出的序列的八。
[1022] 例如，所述抗体含有包含SEQ ID N0:42中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:46 中给出的序列的 '，其中所述VH和/或 '包含以下置换或置换组的一个或多个：
[1023] ⑴所述VH包含在SEQ ID NO:42的位置16的丙氨酸；
[1024] (ii)所述VH包含在SEQ ID NO:42的位置100的丙氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1025] (iii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置100的丝氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1026] (iv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置100的组氨酸和所述八包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1027] (v)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置100的亮氨酸和所述八包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1028] (vi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置100的天冬氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1029] (vii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置100的酪氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1030] (viii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置100的脯氨酸和所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1031] (ix)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置100的谷氨酰胺和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1032] (X)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置100的赖氨酸和所述八包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1033] (xi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置101的丙氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1034] (xii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置101的丝氨酸和所述八包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1035] (xiii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置101的组氨酸和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1036] (xiv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置101的亮氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1037] (xv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置101的天冬氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1038] (xvi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置101的酪氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1039] (xvii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置101的谷氨酰胺和所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1040] (xviii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置101的赖氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1041] (xix)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置102的丙氨酸和所述八包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1042] (XX)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置102的丝氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1043] (xxi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置102的组氨酸和所述八包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1044] (xxii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置102的亮氨酸和所述\包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1045] (xxiii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置102的酪氨酸和所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1046] (xxiv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置102的脯氨酸和所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1047] (XXV)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置102的谷氨酰胺和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1048] (xxvi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置102的赖氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1049] (xxvii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的丙氨酸和所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1050] (xxviii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的丝氨酸和所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1051] (xxix)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的组氨酸和所述\包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1052] (XXX)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的亮氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1053] (xxxi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的天冬氨酸和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1054] (xxxii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的酪氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1055] (xxxiii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的脯氨酸和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1056] (xxxiv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的谷氨酰胺和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1057] (xxxv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的赖氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1058] (xxxvi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置104的丝氨酸和所述 ' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1059] (xxxvii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置104的组氨酸和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1060] (xxxviii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置104的亮氨酸和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1061] (xxxix)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置104的天冬氨酸和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1062] (xl)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置104的酪氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1063] (xli)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置104的脯氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1064] (xlii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置104的谷氨酰胺和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1065] (xliii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置104的赖氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1066] (xliv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置105的丙氨酸和所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1067] (xlv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置105的组氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1068] (xlvi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置105的亮氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1069] (xlvii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置105的天冬氨酸和所述V?包含在SEQ ID NO :46的位置76的苏氨酸；
[1070] (xlviii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置105的酪氨酸和所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1071] (xlix)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置105的脯氨酸和所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1072] (1)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置105的谷氨酰胺和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1073] (li)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置105的赖氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1074] (lii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的丙氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1075] (liii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的丝氨酸和所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1076] (liv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的组氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1077] (lv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的亮氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1078] (lvi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的天冬氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1079] (lvii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的酪氨酸和所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1080] (lviii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的脯氨酸和所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1081] (lix)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的谷氨酰胺和所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1082] (lx)所述VH包含在SEQ ID NO:42的位置107的赖氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1083] (lxi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置23的丙氨酸；
[1084] (lxii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述八包含在SEQ ID NO :46的位置28的天冬氨酸；
[1085] (lxiii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置33的酪氨酸；
[1086] (lxiv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述八包含在SEQ ID NO :46的位置34的天冬氨酸；
[1087] (lxv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述八包含在SEQ ID NO :46的位置53的天冬酰胺；
[1088] (lxvi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述八包含在SEQ ID NO:46的位置54的丝氨酸；
[1089] (lxvii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述八包含在SEQ ID N0:46的位置82的丙氨酸；
[1090] (lxviii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述\包含在SEQ ID N0:46的位置95的丝氨酸；
[1091] (lxix)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述八包含在SEQ ID NO:46的位置96的丝氨酸；
[1092] (lxx)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1093] (lxxi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置47的丝氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置23的苏氨酸；
[1094] (lxxii)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置 72的丙氨酸、位置73的天冬氨酸、位置74的精氨酸和位置76的苏氨酸，并且所述\包含 在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1095] (lxxiii)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置 51的亮氨酸和位置102的谷氨酸，并且所述 '包含在各自相对于SEQ ID N0:46而言的位 置24的丝氨酸和位置76的苏氨酸；
[1096] (lxxiv)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置 51的亮氨酸和位置102的谷氨酸，并且所述 '包含在各自相对于SEQ ID N0:46而言的位 置23的苏氨酸、位置24的丝氨酸和位置76的苏氨酸；
[1097] (lxxv)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置51 的亮氨酸和位置102的谷氨酸，并且所述 '包含在各自相对于SEQ ID N0:46而言的位置 23的苏氨酸和位置76的苏氨酸；
[1098] (lxxvi)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置 51的亮氨酸和位置102的谷氨酸，并且所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1099] (lxxvii)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置 51的亮氨酸、位置102的谷氨酸和位置105的丙氨酸，并且所述\包含在各自相对于SEQ ID NO:46而言的位置23的苏氨酸、位置24的丝氨酸和位置76的苏氨酸；
[1100] (lxxviii)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位 置51的亮氨酸、位置102的谷氨酸和位置105的丙氨酸，并且所述'包含在SEQ ID N0:46 的位置76的苏氨酸；
[1101] (lxxix)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置 72的丙氨酸、位置73的天冬氨酸、位置74的精氨酸和位置76的苏氨酸，并且所述\包含 在各自相对于SEQ ID N0:46而言的位置23的苏氨酸、位置24的丝氨酸和位置76的苏氨 酸；
[1102] (lxxx)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置72 的丙氨酸、位置73的天冬氨酸、位置74的精氨酸和位置76的苏氨酸，并且所述' 包含在 各自相对于SEQ ID N0:46而言的位置23的苏氨酸、位置24的丝氨酸、位置76的苏氨酸和 位置51的谷氨酸；
[1103] (lxxxi)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置 51的亮氨酸、位置72的丙氨酸、位置73的天冬氨酸、位置74的精氨酸、位置76的苏氨酸、 位置102的谷氨酸和位置105的丙氨酸，并且所述 '包含在各自相对于SEQ ID N0:46而 言的位置23的苏氨酸、位置24的丝氨酸、位置76的苏氨酸和位置51的谷氨酸；或
[1104] (lxxxii)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置 51的亮氨酸、位置72的丙氨酸、位置73的天冬氨酸、位置74的精氨酸、位置76的苏氨酸、 位置102的谷氨酸和位置105的丙氨酸，并且所述 '包含在各自相对于SEQ ID N0:46而 言的位置23的苏氨酸、位置24的丝氨酸、位置76的苏氨酸和位置51的甘氨酸。
[1105] 在一个实例中，本公开内容的TLla-结合蛋白包含人或非人灵长类重链免疫球蛋 白恒定区，其选自IgGl、IgG2、IgG3、IgG4、IgD、IgM、IgE和IgA。示例性的重链免疫球蛋白 恒定区是IgG恒定区，例如IgGl恒定区，例如人IgGl恒定区。例如，人IgGl恒定区包含Fc 区，其包含SEQ ID NO: 134中给出的序列。在一个实例中，所述人或非人灵长类重链免疫球 蛋白恒定区缺乏C-末端赖氨酸残基。
[1106] 在另一实例中，本公开内容的TLla-结合蛋白包含人或非人灵长类轻链免疫球蛋 白恒定区，其选自κ或λ。在一个实例中，所述TLla-结合蛋白包含人轻链恒定区，其包含 SEQ ID Ν0:135(κ)或 SEQ ID Ν0:136(λ)中给出的序列。
[1107] 本公开内容还提供分离的或重组的核酸，所述核酸编码本公开内容的TLla-结合 蛋白或者与其具有至少大约80%同一性的序列或者在中度或高度严格性条件下与其杂交 的序列。在这一点上，本公开内容不限于本文所述的具体举例的核酸，而是还包括因为遗传 密码的简并性而编码本公开内容的TLla-结合蛋白的任何核酸。例如，所述核酸可以是为 了在特定细胞类型中表达而优化的密码子。
[1108] 在一个实例中，所述核酸包含SEQ ID NO:96-118的任何一个中给出的序列或者与 其具有至少大约80%同一性的序列或者在中度或高度严格性条件下与其杂交的序列。
[1109] 在一个实例中，所述核酸包含SEQ ID N0:102中给出的序列或者与其具有至少大 约80%同一性的序列或者在中度或高度严格性条件下与其杂交的序列。
[1110] 在一个实例中，所述核酸包含SEQ ID N0:103中给出的序列或者与其具有至少大 约80%同一性的序列或者在中度或高度严格性条件下与其杂交的序列。
[1111] 在一个实例中，所述核酸包含SEQ ID NO: 102中给出的序列和SEQ ID NO: 103中 给出的序列或者与其具有至少大约80%同一性的序列或者在中度或高度严格性条件下与 其杂交的序列。
[1112] 在一个实例中，所述核酸包含SEQ ID NO: 104中给出的序列或者与其具有至少大 约80%同一性的序列或者在中度或高度严格性条件下与其杂交的序列。
[1113] 在一个实例中，所述核酸包含SEQ ID NO: 105中给出的序列或者与其具有至少大 约80%同一性的序列或者在中度或高度严格性条件下与其杂交的序列。
[1114] 在一个实例中，所述核酸包含SEQ ID NO: 104中给出的序列和SEQ ID NO: 105中 给出的序列或者与其具有至少大约80%同一性的序列或者在中度或高度严格性条件下与 其杂交的序列。
[1115] 在一个实例中，所述核酸包含SEQ ID NO: 106中给出的序列或者与其具有至少大 约80%同一性的序列或者在中度或高度严格性条件下与其杂交的序列。
[1116] 在一个实例中，所述核酸包含SEQ ID NO: 107中给出的序列或者与其具有至少大 约80%同一性的序列或者在中度或高度严格性条件下与其杂交的序列。
[1117] 在一个实例中，所述核酸包含SEQ ID NO: 106中给出的序列和SEQ ID NO: 107中 给出的序列或者与其具有至少大约80%同一性的序列或者在中度或高度严格性条件下与 其杂交的序列。
[1118] 在一个实例中，所述核酸包含与SEQ ID NO: 106、107或222-233的任何一个中给 出的序列具有至少95%同一性的序列或者在中度至高度严格性条件下与其杂交的核酸。
[1119] 在一个实例中，所述核酸包含以下的一个或多个：
[1120] (i)核酸，其包含与SEQ ID N0:106中给出的序列具有至少大约95%同一性的序 列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和其包含与SEQ ID N0:107中给出 的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂 交；
[1121] (ii)核酸，其包含与SEQ ID N0:222中给出的序列具有至少大约95%同一性的序 列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和核酸，其包含与SEQ ID N0:228中 给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与 其杂交；
[1122] (iii)核酸，其包含与SEQ ID N0:223中给出的序列具有至少大约95%同一性的 序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和核酸，其包含与SEQ ID N0:228 中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下 与其杂交；
[1123] (iv)核酸，其包含与SEQ ID N0:224中给出的序列具有至少大约95%同一性的序 列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和核酸，其包含与SEQ ID N0:229中 给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与 其杂交；
[1124] (v)核酸，其包含与SEQ ID N0:224中给出的序列具有至少大约95%同一性的序 列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和核酸，其包含与SEQ ID N0:230中 给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与 其杂交；
[1125] (vi)核酸，其包含与SEQ ID NO: 224中给出的序列具有至少大约95%同一性的序 列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和核酸，其包含与SEQ ID N0:231中 给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与 其杂交；
[1126] (vii)核酸，其包含与SEQ ID NO: 224中给出的序列具有至少大约95%同一性的 序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和核酸，其包含与SEQ ID N0:228 中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下 与其杂交；
[1127] (viii)核酸，其包含与SEQ ID N0:225中给出的序列具有至少大约95%同一性的 序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和核酸，其包含与SEQ ID N0:230 中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下 与其杂交；
[1128] (ix)核酸，其包含与SEQ ID NO: 226中给出的序列具有至少大约95%同一性的序 列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和核酸，其包含与SEQ ID N0:230中 给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与 其杂交；
[1129] (X)核酸，其包含与SEQ ID NO: 226中给出的序列具有至少大约95%同一性的序 列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和核酸，其包含与SEQ ID N0:232中 给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与 其杂交；
[1130] (xi)核酸，其包含与SEQ ID N0:227中给出的序列具有至少大约95%同一性的序 列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和核酸，其包含与SEQ ID N0:232中 给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与 其杂交；或
[1131] (xii)核酸，其包含与SEQ ID N0:227中给出的序列具有至少大约95%同一性的 序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和核酸，其包含与SEQ ID N0:233 中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下 与其杂交。
[1132] 示例性的核酸及其组合的序列见表1并且用于为每个序列及其组合提供文字支 持。
[1133] 在一个实例中，这样的核酸包含在表达构建体中，其中所述核酸可操作连接到启 动子上。这样的表达构建体可以是在载体例如质粒中。
[1134] 在涉及单个多肽TLla-结合蛋白的本公开内容的实例中，所述表达构建体可包含 连接到编码该多肽链的核酸的启动子。
[1135] 在涉及构成TLla-结合蛋白的多个多肽的实例中，本公开内容的表达构建体包含 可操作连接到启动子上的编码多肽之一（例如包含V H)的核酸以及可操作连接到启动子上 的编码另一多肽（例如包含')的核酸。
[1136] 在另一实例中，所述表达构建体是双顺反子表达构建体，例如，包含以5'至3'顺 序的以下可操作连接的元件：
[1137] ⑴启动子；
[1138] (ii)编码第一多肽的核酸；
[1139] (iii)内部核糖体进入位点；和
[1140] (iv)编码第二多肽的核酸。
[1141] 例如，所述第一多肽包含VH和所述第二多肽包含 '，或者所述第一多肽包含 '和 所述第二多肽包含VH。
[1142] 本公开内容还考虑了分开的表达构建体，其一编码第一多肽（例如包含VH)，其另 一个编码第二多肽（例如包含八)。例如，本公开内容还提供包含以下的组合物：
[1143] (i)第一表达构建体，其包含编码多肽的核酸（例如包含可操作连接到启动子上 的VH);和
[1144] (ii)第二表达构建体，其包含编码多肽的核酸（例如包含可操作连接到启动子上 的 VL)，
[1145] 其中所述第一和第二多肽缔合在一起构成本公开内容的TLla-结合蛋白。
[1146] 本公开内容还提供表达本公开内容的TLla-结合蛋白的分离的细胞或者经遗传 修饰以表达本公开内容的TLla-结合蛋白的重组的细胞。
[1147] 在一个实例中，所述细胞包含本公开内容的表达构建体或者：
[1148] (i)第一表达构建体，其包含编码可操作连接到启动子上的多肽（例如包含VH)的 核酸；和
[1149] (ii)第二表达构建体，其包含编码可操作连接到启动子上的多肽（例如包含') 的核酸，
[1150] 其中所述第一和第二多肽缔合在一起构成本公开内容的TLla-结合蛋白。
[1151] 本公开内容的细胞的实例包括细菌细胞、酵母细胞、昆虫细胞或哺乳动物细胞。示 例性的细胞是哺乳动物细胞。
[1152] 本公开内容还提供用于制备本公开内容的TLla-结合蛋白的方法。例如，这样的 方法包括在足以制备所述TLla-结合蛋白的条件下维持本公开内容的表达构建体。
[1153] 在一个实例中，用于制备本公开内容的TLla-结合蛋白的方法包括在足以制备、 并任选分泌所述蛋白的条件下培养本公开内容的细胞。
[1154] 在一个实例中，用于制备本公开内容的TLla-结合蛋白的方法还包括分离所述蛋 白。
[1155] 本公开内容还提供组合物，其包含本公开内容的TLla-结合蛋白、核酸、表达构建 体或细胞以及合适的载体。在一个实例中，所述组合物包含本公开内容的TLla-结合蛋白 和合适的载体。在一个实例中，所述载体是药学上可接受的，例如，所述组合物是药物组合 物。
[1156] 本公开内容还提供用于在细胞、组织、器官或受试者中治疗或预防病况（例如 TLla-介导的病况）的症状的方法，所述方法包括将本公开内容的TLla-结合蛋白、核酸、表 达构建体、细胞或组合物给予所述细胞、组织、器官或受试者。在一个实例中，本公开内容提 供在受试者中治疗或预防病况（例如TLla-介导的病况）的方法，所述方法包括将本公开 内容的TLla-结合蛋白、核酸、表达构建体、细胞或组合物给予所述受试者。在这一点上，预 防病况的方法可以预防具有复发-缓解形式的病况（例如多发性硬化）的复发，例如，在缓 解期间给予所述蛋白从而预防复发。
[1157] 本公开内容还提供用于在受试者中诱导或增加血管生成的方法，所述方法包括将 本公开内容的TLla-结合蛋白、核酸、表达构建体、细胞或组合物给予所述受试者。
[1158] 本公开内容也提供本公开内容的TLla-结合蛋白、核酸、表达构建体、细胞或组合 物在医学中的用途。
[1159] 本公开内容还提供所述TLla-结合蛋白、核酸、表达构建体或细胞在制备用于在 受试者中治疗或预防病况（例如TLla-介导的病况）的症状或者治疗或预防病况（例如 TLla-介导的病况）或者诱导或增加血管生成的药物或者预防中的用途。
[1160] 本公开内容还提供所述TLla-结合蛋白、核酸、表达构建体或细胞，其用于在受 试者中治疗或预防病况（例如TLla-介导的病况）的症状或者治疗或预防病况（例如 TLla-介导的病况）或者诱导或增加血管生成。
[1161] 在一个实例中，本公开内容的治疗或预防方法还包括诊断所述病况，例如通过进 行本文所述的方法。
[1162] 在一个实例中，本公开内容的治疗或预防方法还包括在受试者中检测TLla水平， 并且，如果TLla水平未显著降低或未降低至与病况无关的水平时，给予更多剂量的本公开 内容的TLla-结合蛋白、核酸、表达构建体、细胞或组合物。
[1163] 本公开内容还提供在细胞、组织、器官或受试者中抑制TLla与DR3的相互作用 (和在一个实例中，不抑制TLla与DcR3的相互作用）的方法，所述方法包括将本公开内容 的TLla-结合蛋白、核酸、表达构建体、细胞或组合物给予所述细胞、组织、器官或受试者。 在一个实例中，所述受试者患有病况（例如TLla-介导的病况）。
[1164] 本公开内容还提供在样品中检测TLla的方法，所述方法包括使样品与本公开内 容的TLla-结合蛋白接触，从而形成抗原-蛋白复合物并检测该复合物，其中检测该复合物 表明样品中的TLla。
[1165] 本公开内容还提供在受试者中检测TLla的方法，所述方法包括在所述受试者中 检测本公开内容的TLla-结合蛋白，其中将所述蛋白缀合到检测标记上。在一个实例中，所 述方法包括将所述蛋白给予所述受试者。
[1166] 本公开内容还提供在受试者中诊断TLla-介导的病况的方法，所述方法包括进行 本公开内容的方法以检测来自所述受试者的样品中的TLla，其中该样品中TLla的检测表 明TLla-介导的病况症。
[1167] 在一个实例中，所述方法包括在所述样品中测定TLla水平，其中与对照样品相 t匕，所述样品中TLla水平的增加或减少表明TLla-介导的病况。
[1168] 在一个实例中，提供检测TLla或诊断/预测病况的方法的结果，例如，以纸质或机 器可读形式。
[1169] 本公开内容还提供包括获取检测TLla或诊断/预测本公开内容病况的方法的结 果以及给予治疗性或预防性的组合物或推荐这类给予的方法。在一个实例中，所述组合物 是本公开内容的组合物。
[1170] 待治疗、预防、诊断或预后的示例性的病况是TH17-介导的病况、炎性病况、自身免 疫性病况或者与不充分的血管生成相关的或由其引起的病况。合适的病况描述于本文。
[1171] 在一个实例中，待治疗、预防、诊断或预后的病况是自身免疫性疾病。例如，所述病 况是葡萄膜炎、溃疡性结肠炎、克罗恩病（Crohn's disease)、肠易激综合征、类风湿性关节 炎、多关节炎、多发性硬化、哮喘或慢性阻塞性肺病。
[1172] 在一个实例中，所述病况是炎性肠病，例如结肠炎，例如溃疡性结肠炎或克罗恩 病。
[1173] 本公开内容还提供自多种TLla-结合蛋白中选择特异性结合到TLla上并抑制 TLla与DR3的相互作用而不抑制TLla与DcR3的相互作用的TLla-结合蛋白的方法，所述 方法包括：
[1174] 在足以允许TLla-结合蛋白与TLla突变蛋白结合的条件下，使多种TLla-结合 蛋白与所述TLla突变蛋白接触而形成TLla-结合蛋白-TLla突变蛋白复合物和不与所述 TLla突变蛋白结合的排除的多种TLla-结合蛋白，所述突变蛋白中SEQ ID NO:202的氨基 酸位置32的精氨酸已被丙氨酸置换和/或氨基酸位置85的精氨酸已被丙氨酸替代，
[1175] 并且所述排除的多种TLla-结合蛋白中收集不与TLla突变蛋白结合的TLla-结 合蛋白，其中所收集的TLla-结合蛋白特异性结合到TLla上并抑制TLla与DR3的相互作 用，而不抑制TLla与DcR3的相互作用。
[1176] 本公开内容还提供自多种TLla-结合蛋白中分离特异性结合到TLla上并抑制 TLla与DR3的相互作用而不抑制TLla与DcR3的相互作用的TLla-结合蛋白的方法，所述 方法包括自多种TLla-结合蛋白中分离不结合到TLla突变蛋白上的一种或多种TLla-结 合蛋白，所述突变蛋白中SEQ ID NO: 202的氨基酸位置32的精氨酸已被丙氨酸置换和/或 氨基酸位置85的精氨酸已被丙氨酸置换。
[1177] 所述多种TLla-结合蛋白可以存在于抗体或抗原结合结构域的文库中，例如噬菌 体展示文库、核糖体展示文库或酵母展示文库中。所述多种TLla-结合蛋白可以存在于抗 血清中。所述多种TLla-结合蛋白可以存在于杂交瘤培养上清液中。
[1178] 本公开内容还提供分离的多肽，其包含SEQ ID N0:202中给出的序列，其中氨基酸 位置32的精氨酸已被丙氨酸置换和/或氨基酸位置85的精氨酸已被丙氨酸置换。
[1179] 附图简述
[1180] 图1A至1H是显示抗体可变区序列的图示。在图1D至1H中显示的比对中，任何 相同氨基酸用句点（即指示。图1A显示人抗TLla抗体的V Hg的序列。图1B显示 人抗TLla抗体的 '区的序列。图1C显示抗TLla抗体C320及其某些衍生物的VH区的序 列。图1D显示所选人抗体的V H序列的比对，其中移植了 C320的VfDRl、2和3。图1E显示 C320的衍生物的VH区的共有序列。图1F显示抗TLla抗体C320及其衍生物的 '区的序 列。图1G显示抗体的人'序列的比对，其中移植了 C320的V^DR1、2和3。图1H显示C320 的衍生物的 '区的共有序列。框区含有依照Kabat编号系统和增强的Chothia编号系统 定义的⑶R(如所示）。依照Kabat编号系统定义的⑶R以黑体显示。依照增强的Chothia 编号系统定义的⑶R以下划线显示。
[1181] 图2是显示效力测定结果的图示，表明一系列抗TLla抗体对TLla-诱导的TF-1 细胞的细胞凋亡的抑制能力。筛选5 μ g/ml抗TLla抗体对TLla-诱导的TF-1细胞的细胞 调亡的抑制能力。
[1182] 图3是鉴定高效力抗TLla抗体的测定结果的图示。所给出的结果显示不同浓度 的试验抗体（最大试验浓度5 μ g/mL)所达到的对TLla-诱导的TF-1细胞的细胞凋亡的抑 制水平。这些水平允许测定抗TLla抗体对于TLla-诱导的TF-1细胞的细胞凋亡的抑制的 EC5Q，其允许根据相对效力进行功能性比较。
[1183] 图4A是显示不同浓度的试验抗体（最大试验浓度25 μ g/mL)所达到的对TLla与 DR3相互作用的抑制水平的图示。多个浓度的抗体C320、C321和C323抑制TLla与DR3之 间的相互作用。
[1184] 图4B是显示不同浓度的试验抗体（最大试验浓度25 μ g/mL)所达到的对TLla与 DcR3相互作用的抑制水平的图示。抗体浓度为ΙΟμ g/mL或更少时的抗体C320、C321和 C323不能可检测地抑制TLla与DcR3之间的相互作用。
[1185] 图4C是显示不同浓度的试验抗体（最大试验浓度10 μ g/mL)所达到的对TLla与 DR3相互作用的抑制水平的图示。多个浓度的抗体C320-0、C320-168和C320-179抑制TLla 与DR3之间的相互作用。抗体1B4和C300-25包括在内，用于比较目的。
[1186] 图4D是显示不同浓度的试验抗体（最大试验浓度100 μ g/mL)所达到的对TLla 与DcR3的相互作用的抑制水平的图示。抗体C320-0、C320-168和C320-179不能可检测地 抑制TLla与DcR3之间的相互作用。不同浓度的抗体1B4和C300-25抑制TLla与DcR3之 间的相互作用并包括在内，用于比较目的。
[1187] 图5A包括显示不同浓度的试验抗体与可溶性人TLla(SEQ ID N0:202 ;上图）和 其中残基32的精氨酸已被丙氨酸置换的可溶性人TLla(R32A突变蛋白，下图）的结合的 两个图示。不同浓度的抗体C320-0、C320-168和C320-179都结合TLla，但不结合R32A突 变蛋白TLla。不同浓度的抗TLla抗体1B4和16H2(如US20090280116中所述）同时结合 TLla和R32A突变蛋白TLla。同种型对照抗体不结合任何形式的TLla。
[1188] 图5B是显示不同浓度的试验抗体与其中残基85的精氨酸已被丙氨酸置换的可 溶性人TLla(R85A突变蛋白，上图）和其中残基32和残基85的精氨酸已被丙氨酸置换 的可溶性人TLla(R32A+R85A突变蛋白，下图）的结合的图示。抗体C320-0、C320-168和 C320-179不结合R85A或R32A+R85A突变蛋白TLla。不同浓度的抗TLla抗体1B4和16H2 (如 US20090280116所述）结合R85A或R32A+R85A突变蛋白TLla。同种型对照抗体不结合任 何形式的TLla。
[1189] 图5C是显示浓度1μ g/ml的可溶性人TLla、R32A突变蛋白TLla和R85A突变蛋 白TLla与受体DR3和DcR3的结合的图示。TLla同样结合这两种受体。R32A和R85A突变 蛋白TLla与DcR3结合的程度类似于TLla，但结合DR3的水平为TLla与DcR3结合水平的 大约50 %或更低。
[1190] 图是显示三聚体人TLla的X-射线晶体结构（PDB:3K51)(灰色）的图示，每个 单体上的残基R32和R85以黑色突出显示。
[1191] 图6是显示抗体C320、C321、C323和1B4与细胞表面TLla的结合能力的图示。使 用流式细胞术评价结合，其中结果表示为平均荧光强度（MFI)。所有抗体，除了同种型对照 之外，都结合TLla。
[1192] 图7A是显示由促分裂原（伴刀豆球蛋白A)-刺激的外周血单核细胞（PBMC)产生 细胞表面TLla的图示。阴影图表示同种型对照抗体，线图表示细胞表面TLla,当通过嵌合 大鼠/人抗人TLla检测时。
[1193] 图7B是显示当促分裂原（伴刀豆球蛋白A)-刺激增加时在PBMC中分泌的TLla 的产量增加的图示。
[1194] 图8A是显示抗TLla抗体（最大试验浓度50 μ g/mL)对由内源人TLla所诱导的 干扰素 Y (IFN-γ)产生的抑制能力的图示。内源TLla增加了通过受刺激的PBMC的细胞 因子的产生。抗体C320和C323抑制IFN-γ的产生。抗体1B4包括在内，用于比较目的。
[1195] 图8B是显示抗TLla抗体（最大试验浓度50 μ g/mL)对内源人TLla所诱导的 IL-13产生的抑制能力的图示。内源TLla增加了通过受刺激的PBMC的细胞因子的产生。 抗体C320和C323抑制IL-13的产生。抗体1B4包括在内，用于比较目的。
[1196] 图9A是显示C320的轻链序列针对最高同源性的种系序列IGLV1_40*01的比对的 图示。任何相同氨基酸用句点（即指示。鉴定了⑶R区中的氨基酸序列的差异。
[1197] 图9B是显示本文所鉴定的抗体的VH区的比对的图示。
[1198] 图9C是显示本文所鉴定的抗体的 '区的比对的图示。
[1199] 图9D是照片拷贝，显示比较C320-168、C320-163和C320-170的等电聚焦凝胶的 结果。与C320-163和C320-170可见的1-2种同种型相比，C320-168具有5-6种不同的带 电荷的同种型。
[1200] 图9E是显示不同浓度（最大试验浓度10 μ g/mL)的抗体C320-168、C320-179和 C320-183对TLla-诱导的TF-1细胞的细胞凋亡的中和能力的图示。抗体C320-0和1B4包 括在内，用于比较。多个浓度的所有抗体都抑制TLla-诱导的TF-1细胞的细胞凋亡。
[1201] 图10A是显示在DNBS-诱导的结肠炎之后数天内大鼠中溃疡的结肠的总面积 (cm 2)的图示。大鼠在第0天和第4天用抗体C320-168(10mg/kg)、溶媒（阴性对照）治疗 或者用柳氮磺胺吡啶（治疗化合物标准）自第〇天起每天治疗（显示每一治疗组的结果）。 与经溶媒治疗的动物相比，C320-168减少平均溃疡面积至与柳氮磺胺吡啶可比较的程度。
[1202] 图10B是显示在噁唑酮（oxazalone)-诱导的结肠炎后数天内大鼠的体重变化（g) 的图示。大鼠在第0天和第4天用抗体C320-168(10mg/kg)或同种型对照（10mg/kg)治疗 或者用柳氮磺胺吡啶（S 〇C(5-ASA);治疗化合物标准）自第0天起每天治疗（显示每一治 疗组的结果）。相对于同种型对照抗体，C320-168改善体重减轻至与柳氮磺胺吡啶可比较 的程度。
[1203] 图10C是显示在噁唑酮-诱导结肠炎之后的数天内，大鼠的粪便稠度（DAI-疾 病活动指数）的图示。大鼠在第〇天和第4天用抗体C320-168(10mg/kg)或同种型对照 (10mg/kg)治疗或者用柳氮磺胺吡啶（S 〇C(5-ASA);治疗化合物标准）自第0天起每天治疗 (显示每一治疗组的结果）。相对于同种型对照抗体，C320-168改善了疾病的临床征兆（粪 便稠度）。
[1204] 图11A是显示在硫酸葡聚糖钠（DSS)-诱导结肠炎之后的数天内，大鼠的粪 便稠度（DAI-疾病活动指数）的图示。大鼠自疾病诱导后第4天起每周2次用抗体 C320-168(10mg/kg)或同种型对照（10mg/kg)治疗或者用柳氮磺胺吡啶（S〇C(5-ASA);治疗 化合物标准）自疾病诱导后第4天起每天治疗（显示每一治疗组的结果）。相对于同种型 对照抗体，C320-168改善了疾病的临床征兆（粪便稠度）至与柳氮磺胺吡啶类似的程度。
[1205] 图11B是显示在DSS-诱导的结肠炎后数天内大鼠的体重变化（％ )的图示。大鼠 自疾病诱导后第4天起每周2次用抗体C320-168(10mg/kg)或同种型对照（lOmg/kg)治疗 或者用柳氮磺胺吡啶（S〇C(5-ASA);治疗化合物标准）自疾病诱导后第4天起每天治疗（显 示每一治疗组的结果）。相对于同种型对照抗体，C320-168改善了体重减轻至与柳氮磺胺 吡啶类似的程度。
[1206] 图12是显示鉴定抗体与不同的TLla同种型结合的ELISA测定结果的图示。 C320-168和C320-179两者都结合可溶性的裂解TLla的较长（72-251)和较短（84-251)的 同种型。
[1207] 发明详述
[1208] 概要
[1209] 贯穿本说明书，除非另有特定说明或上下文另有需要，否则提到单一步骤、物质组 合物、步骤组或物质组合物组将用以涵盖那些步骤、物质组合物、步骤组或物质组合物组中 的一个（种）或复数个（种）（即，一个（种）或多个（种））。因此，如本文所使用，除非上 下文另外明确指出，否则单数形式"a"、"an"和"the"包括多方面。例如，提到"a"包括单 一个（种）以及两个（种）或更多个（种）；提到"an"包括单一个（种）以及两个（种） 或更多个（种）；提到"the"包括单一个（种）以及两个（种）或更多个（种）等。
[1210] 除非另有特定说明，否则本文所述的本公开内容的各实施例将在加以必要的修改 后适用于每个和所有的其它实施例。
[1211] 本领域技术人员将会理解，本文的公开内容容许除具体描述的那些变化和修改以 外的变化和修改。应当知道，本公开内容包括所有这类变化和修改。本公开内容还包括在 本说明书中单独或共同提到或指出的所有步骤、特征、组合物和化合物及所述步骤或特征 的任何和所有组合或任何两个或更多个。
[1212] 本公开内容在范围上不受本文所述的具体实施例的限制，所述具体实施例仅用于 说明性目的。功能上相当的产物、组合物和方法明确地在本文所述的公开内容的范围内。
[1213] 除非另有说明，否则在没有过度实验的情况下使用分子生物学、微生物学、病 毒学、重组DNA技术、在溶液中的肽合成、固相肽合成和免疫学的常规技术进行本公 开内容。所述程序例如描述在以下文献中：Sambrook, Fritsch&Maniatis, Molecula r Cloning:A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratories, New York,第二 版（1989),第 I, II 和 III 卷全部；Benny K.C.Lo,Antibody Engineering:Methods and Protocols, (2004)Humana Press,第 248 卷；DNA Cloning:A Practical Approach,第 I 和 II 卷（D. N. Glover 编著，1985), IRL Press, Oxford,全部文本；Oligonucleotide Synthesis:A Practical Approach(M.J. Gait 编著，1984) IRL Press, Oxford,全部 文本，尤其是其中的Gait,第1-22页；Atkinson等人，第35-81页；Sproat等人， 第 83-115 页；和 Wu 等人，第 135-151 页的文章；4. Nucleic Acid Hybridization:A Practical Approach (B. D. Hames&S. J. Higgins,编著，1985) IRL Press, Oxford,全部文 本；Immobilized Cells and Enzymes:A Practical Approach (1986) IRL Press, Oxford, 全部文本；Perbal，B·，A Practical Guide to Molecular Cloning (1984) ;Methods In Enzymology(S.Colowick 和 N.Kaplan 编著，Academic Press, Inc.)，全部系列； J. F. Rama 1 ho Ortigao, "The Chemistry of Peptide Synthesis，'载于：通向 Virtual Laboratory 网站的 Knowledge 数据库(Interactiva, Germany) ；Sakakibara Biochem. Biophys. Res. Commun. 73:336-342, 1976 ；Merrifield J. Am. Chem. Soc. 85:2149-2154, 1963 ； Barany和Merrifield(1979)于The Peptides(Gross,E.和Meienhofer,J·编著），第 2卷， 第 1-284 页，Academic Press, New York. 12. Wiinsch，E.编著（1974) Synthese von Peptiden in Houben-Weyls Metoden der Organischen Chemie(MUler，E·编著），第 15卷，第4版， 第 1 和 2 部分，Thieme, Stuttgart ;Bodanszky，M. (1984) Principles of Peptide Synthe sis, Springer-Verlag, Heidelberg ；Bodanszky, M. &Bodanszky, A. (1984)The Practice of Peptide Synthesis, Springer-Verlag, Heidelberg ；Bodanszky Int.J.Peptide Protein Res. 25:449-474, 1985 ；Handbook of Experimental Immunology,第 I-IV 卷(D.M. Weir 和 C.C.Blackwell,编著，1986, Blackwell Scientific Publications);和 Animal Cell Culture:Practical Approach,第 3版（John R.W.Masters 编著，2000),ISBN0199637970， 全部文本。
[1214] 术语"和/或"，例如"X和/或Y"应理解为是指"X和Y"或"X或Y"，并且将用以 对这两种含义或对于任一含义提供明确的支持。
[1215] 贯穿本说明书，术语"包含（comprise) "或变型例如"包含（comprises) "或"包含 (comprising)"应理解为意味着包括所规定的要素、整数或步骤或者要素、整数或步骤组， 但不排除任何其它要素、整数或步骤或者要素、整数或步骤组。
[1216] 序列表的关键点
[1217] SEQ ID N0:1:人TLla胞外域的氨基酸序列，具有N-末端HIS和FLAG标签
[1218] SEQ ID N02:C336VH 的氨基酸序列
[1219] SEQ ID N0:3:C336HCDR1 的氨基酸序列
[1220] SEQ ID N0:4:C336HCDR2 的氨基酸序列
[1221] SEQ ID N0:5:C336HCDR3 的氨基酸序列
[1222] SEQ ID N0:6<3367!^ 的氨基酸序列
[1223] SEQ ID N0:7:C336LCDR1 的氨基酸序列
[1224] SEQ ID N0:8:C336LCDR2 的氨基酸序列
[1225] SEQ ID N0:9:C336LCDR3 的氨基酸序列
[1226] SEQ ID NO: 10:C334VH 的氨基酸序列
[1227] SEQ ID NO: 11:C334HCDR1 的氨基酸序列
[1228] SEQ ID N0:12:C334HCDR2 的氨基酸序列
[1229] SEQ ID N0:13:C334HCDR3 的氨基酸序列
[1230] SEQ ID NO: 14:03347!^ 的氨基酸序列
[1231] SEQ ID N0:15:C334LCDR1 的氨基酸序列
[1232] SEQ ID N0:16:C334LCDR2 的氨基酸序列
[1233] SEQ ID N0:17:C334LCDR3 的氨基酸序列
[1234] SEQ ID NO: 18:C333VH 的氨基酸序列
[1235] SEQ ID N0:19:C333HCDR1 的氨基酸序列
[1236] SEQ ID N0:20:C333HCDR2 的氨基酸序列
[1237] SEQ ID N0:21:C333HCDR3 的氨基酸序列
[1238] SEQ ID N0:22:C333VL 的氨基酸序列
[1239] SEQ ID N0:23:C333LCDR1 的氨基酸序列
[1240] SEQ ID N0:24:C333LCDR2 的氨基酸序列
[1241] SEQ ID N0:25:C333LCDR3 的氨基酸序列
[1242] SEQ ID N0:26:C323V H 的氨基酸序列
[1243] SEQ ID N0:27:C323HCDR1 的氨基酸序列
[1244] SEQ ID N0:28:C323HCDR2 的氨基酸序列
[1245] SEQ ID N0:29:C323HCDR3 的氨基酸序列
[1246] SEQ ID N0:30:C323V L 的氨基酸序列
[1247] SEQ ID N0:31:C323LCDR1 的氨基酸序列
[1248] SEQ ID N0:32:C323LCDR2 的氨基酸序列
[1249] SEQ ID N0:33:C323LCDR3 的氨基酸序列
[1250] SEQ ID N0:34:C321V H 的氨基酸序列
[1251] SEQ ID N0:35:C321HCDR1 的氨基酸序列
[1252] SEQ ID N0:36:C321HCDR2 的氨基酸序列
[1253] SEQ ID N0:37:C321HCDR3 的氨基酸序列
[1254] SEQ ID NO :38: C321八的氨基酸序列
[1255] SEQ ID N0:39:C321LCDR1 的氨基酸序列
[1256] SEQ ID N0:40:C321LCDR2 的氨基酸序列
[1257] SEQ ID N0:41:C321LCDR3 的氨基酸序列
[1258] SEQ ID N0:42:C320V H 的氨基酸序列
[1259] SEQ ID N0:43:C320HCDR1 的氨基酸序列
[1260] SEQ ID N0:44:C320HCDR2 的氨基酸序列
[1261] SEQ ID N0:45:C320HCDR3 的氨基酸序列
[1262] SEQ ID 勵:46:〇320￥!^ 的氨基酸序列
[1263] SEQ ID N0:47:C320LCDR1 的氨基酸序列
[1264] SEQ ID N0:48:C320LCDR2 的氨基酸序列
[1265] SEQ ID N0:49:C320LCDR3 的氨基酸序列
[1266] SEQ ID N0:50:C319V H 的氨基酸序列
[1267] SEQ ID N0:51:C319HCDR1 的氨基酸序列
[1268] SEQ ID N0:52:C319HCDR2 的氨基酸序列
[1269] SEQ ID N0:53:C319HCDR3 的氨基酸序列
[1270] SEQ ID N0:54:C319V L 的氨基酸序列
[1271] SEQ ID N0:55:C319LCDR1 的氨基酸序列
[1272] SEQ ID N0:56:C319LCDR2 的氨基酸序列
[1273] SEQ ID N0:57:C319LCDR3 的氨基酸序列
[1274] SEQ ID N0:58:C320_3V H 的氨基酸序列
[1275] SEQ ID N0:59:C320-3HCDR1 的氨基酸序列
[1276] SEQ ID N0:60:C320_3HCDR2 的氨基酸序列
[1277] SEQ ID N0:61:C320_3HCDR3 的氨基酸序列
[1278] SEQ ID N0:62:C320_5八的氨基酸序列
[1279] SEQ ID N0:63:C320_5LCDR1 的氨基酸序列
[1280] SEQ ID N0:64:C320-5LCDR2 的氨基酸序列
[1281] SEQ ID N0:65:C320-5LCDR3 的氨基酸序列
[1282] SEQ ID N0:66:C320_90VH 的氨基酸序列
[1283] SEQ ID N0:67:C320_90HCDR1 的氨基酸序列
[1284] SEQ ID N0:68:C320_90HCDR2 的氨基酸序列
[1285] SEQ ID N0:69:C320-90HCDR3 的氨基酸序列
[1286] SEQ ID N0:70:C320-103VH 的氨基酸序列
[1287] SEQ ID N0:71:C320_103HCDR1 的氨基酸序列
[1288] SEQ ID N0:72:C320_103HCDR2 的氨基酸序列
[1289] SEQ ID N0:73:C320_103HCDR3 的氨基酸序列
[1290] SEQ ID N0:74:C320_114VH 的氨基酸序列
[1291] SEQ ID N0:75:C320-114HCDR1 的氨基酸序列
[1292] SEQ ID N0:76:C320_114HCDR2 的氨基酸序列
[1293] SEQ ID N0:77:C320_114HCDR3 的氨基酸序列
[1294] SEQ ID N0:78:C320_115VH 的氨基酸序列
[1295] SEQ ID N0:79:C320-115HCDR1 的氨基酸序列
[1296] SEQ ID N0:80:C320_115HCDR2 的氨基酸序列
[1297] SEQ ID N0:81:C320_115HCDR3 的氨基酸序列
[1298] SEQ ID N0:82:C320-120VL 的氨基酸序列
[1299] SEQ ID N0:83:C320_120LCDR1 的氨基酸序列
[1300] SEQ ID N0:84:C320-120LCDR2 的氨基酸序列
[1301] SEQ ID N0:85:C320-120LCDR3 的氨基酸序列
[1302] SEQ ID N0:86:C320_129VH 的氨基酸序列
[1303] SEQ ID N0:87:C320-129HCDR1 的氨基酸序列
[1304] SEQ ID N0:88:C320-129HCDR2 的氨基酸序列
[1305] SEQ ID N0:89:C320-129HCDR3 的氨基酸序列
[1306] SEQ ID N0:90:C320-130VH 的氨基酸序列
[1307] SEQ ID N0:91:C320-130HCDR1 的氨基酸序列
[1308] SEQ ID N0:92:C320-130HCDR2 的氨基酸序列
[1309] SEQ ID N0:93:C320-130HCDR3 的氨基酸序列
[1310] SEQ ID NO :94: C320和衍生物的VH共有序列的氨基酸序列
[1311] SEQ ID N0:95:C320和衍生物的八共有序列的氨基酸序列
[1312] SEQ ID N0:96:编码C336的VH的核苷酸序列
[1313] SEQ ID N0:97:编码C336的八的核苷酸序列
[1314] SEQ ID N0:98:编码C334的VH的核苷酸序列
[1315] SEQ ID N0:99:编码C334的八的核苷酸序列
[1316] SEQ ID N0:100:编码C333的VH的核苷酸序列
[1317] SEQ ID NO: 101:编码C333的八的核苷酸序列
[1318] SEQ ID NO: 102:编码C323的VH的核苷酸序列
[1319] SEQ ID NO: 103:编码C323的八的核苷酸序列
[1320] SEQ ID N0:104:编码C321的VH的核苷酸序列
[1321] SEQ ID N0:105:编码C321的八的核苷酸序列
[1322] SEQ ID N0:106:编码C320的VH的核苷酸序列
[1323] SEQ ID N0:107:编码C320的八的核苷酸序列
[1324] SEQ ID N0:108:编码C319的VH的核苷酸序列
[1325] SEQ ID N0:109:编码C319的八的核苷酸序列
[1326] SEQ ID N0:110:编码C320-3的VH的核苷酸序列
[1327] SEQ ID NO: 111:编码C320-5的八的核苷酸序列
[1328] SEQ ID N0:112:编码C320-90的VH的核苷酸序列
[1329] SEQ ID N0:113:编码 C320-103 的 VH 的核苷酸序列
[1330] SEQ ID N0:114:编码 C320-114 的 VH 的核苷酸序列
[1331] SEQ ID N0:115:编码 C320-115 的 VH 的核苷酸序列
[1332] SEQ ID N0:116:编码C320-120的八的核苷酸序列
[1333] SEQ ID N0:117:编码 C320-129 的 VH 的核苷酸序列
[1334] SEQ ID N0:118:编码 C320-130 的 VH 的核苷酸序列
[1335] SEQ ID N0:119:人源化抗体1B4的VH的氨基酸序列
[1336] SEQ ID N0:120:人源化抗体1B4的' 的氨基酸序列
[1337] SEQ ID N0:121:编码人源化抗体1B4的VH的核苷酸序列
[1338] SEQ ID N0:122:编码人源化抗体1B4的八的核苷酸序列
[1339] SEQ ID N0:123:人TLla 的氨基酸序列（源自 GenBank Gene 检索号 9966,在 2011 年5月8日）
[1340] SEQ ID N0:124:小鼠 TLla胞外域的氨基酸序列
[1341] SEQ ID N0:125:食蟹猴/恒河猴TLla胞外域的氨基酸序列
[1342] SEQ ID N0:126:大鼠 TLla胞外域的氨基酸序列
[1343] SEQ ID N0:127:兔TLla胞外域的氨基酸序列
[1344] SEQ ID N0:128:豚鼠 TLla胞外域的氨基酸序列
[1345] SEQ ID N0:129:人死亡受体3的氨基酸序列（源自GenBank Gene检索号8718, 在2011年5月8日）
[1346] SEQ ID N0:130:人诱馆受体3的氨基酸序列（源自GenBank Gene检索号8771, 在2011年5月8日）
[1347] SEQ ID N0:131:TLla 的区的序列
[1348] SEQ ID NO: 132:TLla 的区的序列
[1349] SEQ ID NO: 133:TLla 的区的序列
[1350] SEQ ID NO: 134:人IgGIFc区的氨基酸序列
[1351] SEQ ID NO: 135:人κ恒定区的氨基酸序列
[1352] SEQ ID NO: 136:人λ恒定区的氨基酸序列。
[1353] SEQ ID N0:137:C320和衍生物的VH*有序列的氨基酸序列
[1354] SEQ ID N0:138:C320和衍生物的八共有序列的氨基酸序列
[1355] SEQ ID N0139:C320和衍生物的LCDR1共有序列的氨基酸序列
[1356] SEQ ID N0140:C320和衍生物的LCDR2共有序列的氨基酸序列
[1357] SEQ ID N0141:C320和衍生物的IXDR3共有序列的氨基酸序列
[1358] SEQ ID N0142:C320和衍生物的HCDR2共有序列的氨基酸序列
[1359] SEQ ID N0143:C320和衍生物的HCDR3共有序列的氨基酸序列
[1360] SEQ ID NO: 144:C320和衍生物的HFR1共有序列的氨基酸序列
[1361] SEQ ID N0:145:C320和衍生物的HFR2共有序列的氨基酸序列
[1362] SEQ ID N0:146:C320和衍生物的HFR3共有序列的氨基酸序列
[1363] SEQ ID N0:147:C320和衍生物的HFR4共有序列的氨基酸序列
[1364] SEQ ID NO: 148:C320和衍生物的LFR1共有序列的氨基酸序列
[1365] SEQ ID N0:149:C320和衍生物的LFR2共有序列的氨基酸序列
[1366] SEQ ID N0:150:C320和衍生物的LFR3共有序列的氨基酸序列
[1367] SEQ ID NO: 151:C320和衍生物的LFR4共有序列的氨基酸序列
[1368] SEQ ID N0:152:C320和衍生物的VH*有序列的氨基酸序列
[1369] SEQ ID N0:153:C320和衍生物的八共有序列的氨基酸序列
[1370] SEQ ID N0:154:包含移植到抗体1TZG的FR上的来自C320的CDR的VH的氨基酸 序列
[1371] SEQ ID N0:155:包含移植到抗体1RHH的FR上的来自C320的CDR的VH的氨基酸 序列
[1372] SEQ ID N0:156:包含移植到抗体2DD8的FR上的来自C320的CDR的VH的氨基酸 序列
[1373] SEQ ID N0:157:包含移植到抗体2JB5的FR上的来自C320的CDR的VH的氨基酸 序列
[1374] SEQ ID N0:158:包含移植到抗体3FKU的FR上的来自C320的CDR的VH的氨基酸 序列。
[1375] SEQ ID N0:159:包含移植到抗体3GBM的FR上的来自C320的CDR的VH的氨基酸 序列
[1376] SEQ ID N0:160:包含移植到抗体3LMJ的FR上的来自C320的CDR的VH的氨基酸 序列
[1377] SEQ ID N0:161:包含移植到抗体3P30的FR上的来自C320的CDR的VH的氨基酸 序列
[1378] SEQ ID N0:162:C320和衍生物的VH*有序列的氨基酸序列
[1379] SEQ ID N0:163:包含移植到抗体1RHH的FR上的来自C320的CDR的八的氨基酸 序列。
[1380] SEQ ID N0:164:包含移植到抗体1TZGL的FR上的来自C320的CDR的\的氨基 酸序列
[1381] SEQ ID N0:165:包含移植到抗体2DD8的FR上的来自C320的CDR的\的氨基酸 序列
[1382] SEQ ID NO: 166:包含移植到抗体2JB5的FR上的来自C320的CDR的八的氨基酸 序列
[1383] SEQ ID NO: 167:包含移植到抗体3FKU的FR上的来自C320的CDR的八的氨基酸 序列
[1384] SEQ ID NO: 168:包含移植到抗体3GBM的FR上的来自C320的CDR的八的氨基酸 序列
[1385] SEQ ID NO: 169:包含移植到抗体3LMJ的FR上的来自C320的CDR的八的氨基酸 序列
[1386] SEQ ID NO: 170:包含移植到抗体3P30的FR上的来自C320的CDR的八的氨基酸 序列
[1387] SEQ ID NO: 171:包含移植到抗体3IYW的FR上的来自C320的CDR的\的氨基酸 序列
[1388] SEQ ID N0:172:C320和衍生物的八共有序列的氨基酸序列
[1389] SEQ ID N0:173:C320和衍生物的VH*有序列的氨基酸序列
[1390] SEQ ID N0:174:C320和衍生物的八共有序列的氨基酸序列
[1391] SEQ ID N0:175:抗体 C320-162 的 VH 的氨基酸序列
[1392] SEQ ID N0:176:抗体 C320-163 的 VH 的氨基酸序列
[1393] SEQ ID N0:177:抗体 C320-164 的 VH 的氨基酸序列
[1394] SEQ ID N0:178:抗体 C320-165 的 VH 的氨基酸序列
[1395] SEQ ID N0:179:抗体 C320-166 的 VH 的氨基酸序列
[1396] SEQ ID N0:180:抗体 C320-167 的 VH 的氨基酸序列
[1397] SEQ ID N0:181:抗体 C320-168 的 VH 的氨基酸序列
[1398] SEQ ID N0:182:抗体 C320-169 的 VH 的氨基酸序列
[1399] SEQ ID N0:183:抗体 C320-170 的 VH 的氨基酸序列
[1400] SEQ ID N0:184:抗体 C320-171 的 VH 的氨基酸序列
[1401] SEQ ID N0:185:抗体 C320-172 的 VH 的氨基酸序列
[1402] SEQ ID N0:186:抗体 C320-179 的 VH 的氨基酸序列
[1403] SEQ ID N0:187:抗体 C320-183 的 VH 的氨基酸序列
[1404] SEQ ID N0:188:抗体 C320-162 的 V。的氨基酸序列
[1405] SEQ ID N0:189:抗体 C320-163 的 Vt 的氨基酸序列
[1406] SEQ ID N0:190:抗体 C320-164 的 V。的氨基酸序列
[1407] SEQ ID N0:191:抗体 C320-165 的 V。的氨基酸序列
[1408] SEQ ID N0:192:抗体 C320-166 的 V。的氨基酸序列
[1409] SEQ ID N0:193:抗体C320-167的' 的氨基酸序列
[1410] SEQ ID N0:194:抗体 C320-168 的 Vt 的氨基酸序列
[1411] SEQ ID N0:195:抗体C320-169的八的氨基酸序列
[1412] SEQ ID N0:196:抗体C320-170的八的氨基酸序列
[1413] SEQ ID N0:197:抗体C320-171的八的氨基酸序列
[1414] SEQ ID NO: 198:抗体C320-172的' 的氨基酸序列
[1415] SEQ ID NO: 199:抗体C320-179的八的氨基酸序列
[1416] SEQ ID N0:200:抗体C320-183的' 的氨基酸序列
[1417] SEQ ID N0:201:种系序列IGLV1_40*1的Vt的氨基酸序列
[1418] SEQ ID N0:202:可溶性人TLla的氨基酸序列
[1419] SEQ ID N0:203:在C320的VH中的N-连接的糖基化位点的氨基酸序列
[1420] SEQ ID N0:204:对应于在C320的VH中的N-连接的糖基化位点的1TZG的VH的 氨基酸序列
[1421] SEQ ID N0:205:来自C320-168的VH的肽的氨基酸序列
[1422] SEQ ID N0:206:来自C320-168的八的肽的氨基酸序列
[1423] SEQ ID N0:207:流感肽的氨基酸序列
[1424] SEQ ID N0:208:来自C320-168的 '的突变肽的氨基酸序列
[1425] SEQ ID N0:209:来自C320-168的 '的突变肽的氨基酸序列
[1426] SEQ ID N0:210:来自C320-168的八的突变肽的氨基酸序列
[1427] SEQ ID N0:211:来自C320-168的八的突变肽的氨基酸序列
[1428] SEQ ID N0:212:来自C320-168的八的突变肽的氨基酸序列
[1429] SEQ ID N0:213:来自C320-168的八的突变肽的氨基酸序列
[1430] SEQ ID N0:214:来自C320-168的八的突变肽的氨基酸序列
[1431] SEQ ID N0:215:来自C320-168的八的突变肽的氨基酸序列
[1432] SEQ ID N0:216:来自C320-168的八的突变肽的氨基酸序列
[1433] SEQ ID N0:217:来自C320-168的八的突变肽的氨基酸序列
[1434] SEQ ID N0:218:来自C320-168的八的突变肽的氨基酸序列
[1435] SEQ ID N0:219:来自C320-168的八的突变肽的氨基酸序列
[1436] SEQ ID N0:220:来自C320-168的八的突变肽的氨基酸序列
[1437] SEQ ID N0:221:来自C320-168的八的突变肽的氨基酸序列
[1438] SEQ ID N0:222:编码抗体C320-162的VH的核苷酸序列
[1439] SEQ ID N0:223:编码抗体C320-163的VH的核苷酸序列
[1440] SEQ ID N0:224:编码抗体 C320-164、C320-165、C320-166 和 C320-167 的 VH 的核 苷酸序列
[1441] SEQ ID N0:225:编码抗体C320-168和C320-169的VH的核苷酸序列
[1442] SEQ ID N0:226:编码抗体C320-170和C320-172的VH的核苷酸序列
[1443] SEQ ID N0:227:编码抗体C320-179和C320-183的VH的核苷酸序列
[1444] SEQ ID N0:228:编码抗体 C320-162、C320-163、C320-167 和 C320-169 的 '的核 苷酸序列
[1445] SEQ ID N0:229:编码抗体C320-164的' 的核苷酸序列
[1446] SEQ ID N0:230:编码抗体 C320-165、C320-168 和 C320-170 的 Vt 的核苷酸序列
[1447] SEQ ID N0:231:编码抗体C320-166的八的核苷酸序列
[1448] SEQ ID N0:232:编码抗体C320-172和C320-179的 ' 的核苷酸序列
[1449] SEQ ID N0:233:编码抗体C320-183的' 的核苷酸序列
[1450] SEQ ID N0:234:C320-13 和 C320-22 的氨基酸序列
[1451] SEQ ID N0:235:C320和衍生物的HCDR3共有序列的氨基酸序列
[1452] 所选择的定义
[1453] 为了命名而非限制的目的，人TLla的氨基酸序列在SEQ ID N0:123中给出。人 TLla的额外序列在GenBank Gene检索号9966中给出。因此，在一个实例中，人TLla的氨 基酸序列包含SEQ ID N0:123中给出的序列。TLla的其它同种型已有描述：72-251 (SEQ ID No :123 的位置 72-251)、84-251 (SEQ ID No :123 的位置 84-251) ; 101-251 或 VEGI-174 (SEQ ID No: 123 的位置 101-251)和 86-251 或 VEGI-192(SEQ ID No: 123 的位置 86-251)。来自 不同物种的TLla的胞外域的序列在SEQ ID NO: 1(氨基酸16-184;人）、SEQ ID NO: 124(小 鼠 ）、SEQ ID NO: l25 (食蟹猴 / 恒河猴）、SEQ ID NO: l26 (大鼠 ）、SEQ ID NO: l27 (兔）和 SEQ ID NO: 128(豚鼠）中给出。TLla在受试者中通常形成同型三聚体并通过DR3转导信 号。本公开内容的示例性TLla-结合蛋白结合到或特异性结合到人TLla(在本文中缩写为 人TLla)(包括其重组形式）上。
[1454] 为了命名而非限制的目的，人DR3的序列在SEQ ID N0:129中给出。人DR3的额 外序列在GenBank Gene检索号8718中给出。在一个实例中，本公开内容涵盖的DR3是人 DR3,其包含SEQ ID N0:129中给出的序列。
[1455] 为了命名而非限制的目的，人DcR3序列在SEQ ID勵：130中给出。人0^?3的额 外序列在GenBank Gene检索号8771中给出。在一个实例中，本公开内容涵盖的DcR3是人 DcR3,其包含SEQ ID N0:130中给出的序列。
[1456] 术语"分离的蛋白"或"分离的多肽"意图指这样的蛋白或多肽：根据其来源或衍 生源，其与处于天然状态时伴随其的天然伴生组分不相关；基本上不含来自相同来源的其 它蛋白质。可通过使用本领域已知的蛋白纯化技术分离而使得蛋白质基本上不含天然的伴 生组分或基本上纯化。"基本上纯化"是指蛋白质基本上不含污染物，例如至少大约70%或 75%或80%或85%或90%或95%或96%或97%或98%或99%不含污染物。
[1457] 术语"重组体"应理解为是指人工遗传重组的产物。因此，在包含抗原结合结构域 的重组蛋白的情况下，该术语不涵盖作为在B细胞成熟期间出现的天然重组产物的在受试 者体内天然存在的抗体。然而，如果这样的抗体被分离，则将其视为包含抗原结合结构域的 分离的蛋白。类似地，如果编码所述蛋白的核酸被分离并使用重组方法表达，则所得蛋白是 包含抗体抗原结合结构域的重组蛋白。当重组蛋白在例如表达该蛋白的细胞、组织或受试 者内时，重组蛋白还涵盖通过人工重组方法表达的蛋白。
[1458] 术语"TLla-结合蛋白"将用于包括单一多肽链（即由肽键连接的一系列毗邻氨基 酸），或彼此共价或非共价连接的一系列多肽链（即多肽复合物），其能够以本文所述的和 /或要求保护的方式结合到TLla上。例如，所述系列多肽链可以使用合适的化学键或二硫 键而共价连接。非共价键的实例包括氢键、离子键、范德华力和疏水相互作用。
[1459] 根据前述段落，术语"多肽"或"多肽链"将理解为指由肽键连接的一系列毗邻氨 基酸。
[1460] 如本文所用，术语"抗原结合结构域"将用于指能够特异地结合抗原的抗体的区 域，即V H或 '或同时包含VH和 '的Fv。抗原结合结构域不需要在整个抗体的情况下，例 如，其可以分离形式（例如，结构域抗体）或以另一形式，例如，如本文所述，例如scFv。
[1461] 为了本公开内容的目的，术语"抗体"包括通过Fv中含有的抗原结合结构域而能 够特异性结合到一种或几种密切相关的抗原（例如TLla)上的蛋白。该术语包括四链抗体 (例如两条轻链和两条重链）、经重组或修饰的抗体（例如嵌合抗体、人源化抗体、人抗体、 CDR-移植抗体、灵长类化抗体、脱免疫抗体、同人源化抗体、半抗体、双特异性抗体）。抗体 通常包含恒定结构域，其可排列成恒定区或恒定片段或可结晶片段（Fc)中。抗体的示例性 形式包含作为其基本单元的四-链结构。全长抗体包含共价连接的两条重链（约50-70kDa) 和两条轻链（各自约23kDa)。轻链通常包含可变区（如果存在的话）和恒定结构域，且在 哺乳动物中，轻链为κ轻链或λ轻链。重链通常包含可变区和由铰链区连接到另外恒定结 构域的一个或两个恒定结构域。哺乳动物的重链具有以下类型之一：α、δ、ε、 Υ或μ。 各轻链也共价连接到所述重链中的一个。例如，两条重链和重链与轻链通过链间二硫键和 通过非共价相互作用连接在一起。链间二硫键的数目在不同类型的抗体中可不同。各条链 具有Ν-端可变区（V H或 '，其中各自的长度为约110个氨基酸）和在C-端的一个或多个 恒定结构域。轻链的恒定结构域（Q，其长度为约110个氨基酸）与重链的第一恒定结构 域（C H1，其长度为330-440个氨基酸）对齐并且以二硫键连接。轻链可变区与重链可变区 对齐。抗体重链可包含两个或更多个额外的G结构域（例如，C H2、CH3等）且可包含在CH1 和CH2恒定结构域之间的铰链区。抗体可以是任何类型（例如，IgG、IgE、IgM、IgD、IgA和 1区幻、类别（例如，186 1、1862、1863、1864、184和184)或亚类。在一个实例中，所述抗体是 鼠（小鼠或大鼠）抗体或灵长类（例如人）抗体。在一个实例中，所述抗体重链丢失c-末 端赖氨酸残基。在一个实例中，所述抗体是人源化抗体、同人源化抗体、嵌合抗体、CDR移植 抗体或脱免疫化抗体。
[1462] 如本文所用，"可变区"是指能够特异地结合到抗原上的如本文定义的抗体的轻链 和/或重链的部分，并且包含互补决定区（CDR)即⑶R1、⑶R2和⑶R3以及框架区（FR)的 氨基酸序列。例如，所述可变区包含三个或四个FR(例如，FR1、FR2、FR3和任选FR4)以及 三个⑶R。￥ 11是指重链可变区。'是指轻链可变区。
[1463] 如本文所用，术语"互补决定区"（同义词：⑶R ;即⑶R1、⑶R2和⑶R3)是指抗体 可变区的氨基酸残基，其存在是特异性抗原结合的主要贡献。各个可变区结构域（％或\) 通常具有三个鉴定为⑶R1、⑶R2和⑶R3的⑶R区。在一个实例中，分配给⑶R和FR的氨 基酸位置是依据Kabat的以下文献来定义：Sequences of Proteins of Immunological Interest, National Institutes of Health, Bethesda，Md·，1987 和 1991(在本文中也 称为"Kabat编号系统"）。在另一实例中，分配给CDR和FR的氨基酸位置是依据增强的 Chothia 编号系统.（http://www. bioinfo· org. uk/mdex. html)来定义。依据 Kabat 编号 系统，VHFR 和 CDR 的位置如下：残基 1-30(FR1)、31-35(CDR1)、36-49(FR2)、50-65(CDR2)、 66-94(FR3)、95-102(CDR3)和 103-113(FR4)。依据 Kabat 编号系统，'FR 和 CDR 的位置如 下：残基 1-23(FR1)、24-34(CDR1)、35-49(FR2)、50-56(CDR2)、57-88(FR3)、89-97(CDR3)和 98-107 (FR4)。本公开内容不限于Kabat编号系统定义的FR和⑶R，而是包括所有编号系 统，包括以下典型编号系统：Chothia 和 Lesk，J. Mol. Biol. 196:901-917, 1987 ;Chothia 等 人，Nature342:877-883, 1989 ;和 / 或 Al-Lazikani 等人，J. Mol. Biol. 273:927-948, 1997 ; Honnegher 和 PliikthunJ. Mol. Biol. 309:657-670, 2001 的编号系统；或在 Giudicelli 等 人，Nucleic Acids Res. 25:206-2111997中论述的頂GT系统。在一个实例中，CDR依据 Kabat编号系统来定义。任选地，依据Kabat编号系统的重链CDR2不包含本文所列出的 5个C-末端氨基酸或这些氨基酸中的任何一个或多个被另一个天然存在的氨基酸置换。 在另外或备选选项中，轻链CDR1不包含本文所列出的4个N-末端氨基酸或这些氨基酸 中的任何一个或多个被另一个天然存在的氨基酸置换。在这一点上，Padlan等人，FASEB J.，9:133-139, 1995确定了重链CDR2的5个C-末端氨基酸和/或轻链CDR1的4个N-末 端氨基酸通常不参与抗原结合。
[1464] "框架区"（FR)是除⑶R残基之外的那些可变区残基。
[1465] 如本文所用，术语"Fv"将用以指任何蛋白，不管由多个多肽组成还是由单一多肽 组成，其中'和V H缔合并构成具有抗原结合结构域（即能够特异地结合抗原）的复合物。 构成抗原结合结构域的'和VH可在单一多肽链中或在不同的多肽链中。另外，本公开内容 的Fv (以及本公开内容的任何蛋白）可具有可能或可能不结合相同抗原的多个抗原结合结 构域。该术语应理解为涵盖直接衍生自抗体的片段以及对应于使用重组方法产生的所述片 段的蛋白质。在一些实例中，V H不与重链恒定结构域（CH) 1连接和/或 '不与轻链恒定结 构域（CJ连接。示例性含有Fv的多肽或蛋白质包括Fab片段、Fab'片段、F(ab'）片段、 scFv、双抗体、三抗体、四抗体或更高阶复合物，或与其恒定区或结构域、例如Ch2或CH3域连 接的前述中的任何一个，例如微抗体。"Fab片段"由抗体的单价抗原结合片段组成，且可通 过用木瓜蛋白酶消化全抗体以产生由完整轻链和一部分重链组成的片段来制备，或者可使 用重组方法制备。抗体的"Fab'片段"可通过用胃蛋白酶处理全抗体、接着还原以产生由完 整轻链和包含V H和单一恒定域的一部分重链组成的分子来获得。通过以此方式处理每个 抗体来获得两个Fab'片段。Fab'片段也可通过重组方法制备。抗体的"F(ab'）2片段"由 通过两个二硫键连接在一起的两个Fab'片段的二聚体组成，且通过用胃蛋白酶处理全抗 体分子而不进行随后的还原来获得。"Fab 2"片段是包含使用例如亮氨酸拉链*CH3结构域 连接的两个Fab片段的重组片段。"单链Fv"或"scFv"是含有抗体的可变区片段（Fv)的 重组分子，其中轻链可变区和重链可变区由合适的柔性多肽接头共价连接。
[1466] 如本文所用，术语"结合"当涉及TLla-结合蛋白或其抗原结合结构域与抗原的相 互作用时，是指该相互作用取决于抗原上的特定结构（例如抗原决定簇或表位）的存在。例 如，抗体识别并结合到特异性蛋白结构上而非广泛的蛋白质上。如果抗体结合到表位"A" 上，则在含有标记的"A"和所述抗体的反应中，含有表位"A"的分子（或游离的、未标记的 "A"）的存在将会减少与所述抗体结合的标记的"A"的量。
[1467] 如本文所用，术语"特异性结合"或"特异性地结合"将用来指，相比于与替换的抗 原或细胞反应或缔合，本公开内容的蛋白以更持久的持续时间和/或以更大的亲和力与特 定抗原或表达所述特定抗原的细胞更频繁、更迅速地反应或缔合。例如，特异性结合到抗原 上的蛋白以比同其它抗原的结合更大的亲和力、亲合力、更容易、和/或更持久的持续时间 与该抗原结合。例如，蛋白结合到TLla (例如人TLla)上，其亲和力比与其它TNF超家族配 体或与通过多反应性天然抗体（即通过已知与人体中天然存在的各种抗原结合的天然存 在的抗体）通常识别的抗原的结合显著更大。通过阅读该定义还应理解，例如，特异性地结 合到第一抗原上的蛋白质可能会或可能不会特异性地结合到第二抗原上。照此，"特异性结 合"未必需要另一抗原的排外结合或不可检测结合，这由术语"选择性结合"释义。在一个 实例中，本公开内容的TLla-结合蛋白与抗原的"特异性结合"是指所述蛋白质与该抗原结 合，其平衡常数（KD)为ΙΟΟηΜ或更低、例如50nM或更低、例如20nM或更低、例如15nM或更 低或者1〇ηΜ或更低或者5nM或更低。
[1468] 如本文所用，术语"不能可检测地结合"应当理解为是指，TLla-结合蛋白，例如抗 体，与候选抗原的结合水平在背景之上小于20 %、或10 %或6 %或5 %。该背景可以是在所 述TLla-结合蛋白不存在时和/或在阴性对照蛋白（例如同种型对照抗体）存在时所检测 的结合信号水平和/或在阴性对照抗原存在时所检测的结合水平。例如使用ELISA检测结 合水平，其中所述抗原是固定化的并与TLla-结合蛋白接触。
[1469] 如本文所用，术语"表位"（同义词："抗原决定簇"）应当理解为是指包含抗体的 抗原结合结构域的蛋白与其结合的TLla的区。该术语未必限于蛋白质与其接触的特定残 基或结构。例如，该术语包括跨越所述蛋白所接触的氨基酸的区域和/或该区域外的至少 5-10或2-5或1-3个氨基酸。在某些实例中，所述表位是线性序列氨基酸。表位还可以包 含一系列非连续氨基酸，当TLla折叠时，所述氨基酸的位置彼此接近，8卩"构象表位"。技术 人员还将意识到该术语"表位"不限于肽或多肽。例如，术语"表位"包括例如糖侧链、磷酰 基侧链或磺酰基侧链等分子的化学活性表面簇，并且，在某些实例中，可具有特定的三维结 构特性和/或特定的电荷特性。可将表位或包含表位的肽或多肽给予动物以产生针对所述 表位的抗体。
[1470] 如本文所用，术语"抑制TLla与DR3的相互作用"应当理解为是指在检测TLla与 DR3结合的测定中，蛋白能够抑制50%结合（即EC5(I为小于大约13nM，例如小于大约10nM， 例如小于大约7nM,例如小于大约5nM,例如小于大约3nM)。
[1471] 如本文所用，术语"不抑制TLla与DcR3的相互作用"应当理解为是指本文所述 的TLla-结合蛋白不抑制TLla与DcR3的相互作用（即使得相互作用不再是可检测的，例 如，使用本文所述的ELISA测定）。例如，在浓度100 μ g/ml时，所述蛋白不完全抑制TLla 与DcR3的相互作用。在某些实例中，所述蛋白降低了 TLla与DcR3的相互作用达小于大约 20 %或15 %或10 %，例如当在浓度为10 μ g/ml或100 μ g/ml时测试时。
[1472] 如本文所用，术语"不能可检测地降低"应当理解为是指本文所述的蛋白降低了 TLla (或其生物素化形式）与DcR3的结合在所述蛋白不存在时的相互作用水平或背景相互 作用水平以上达不超过20%或8%或6%或5%或4%或3%或2%，当在浓度10 μ g/ml或 100 μ g/ml时测试时。背景可以是在所述蛋白不存在和/或在阴性对照蛋白（例如同种型 对照抗体）存在时所检测的结合信号水平。
[1473] 如本文所用，术语"中和"应当理解为是指TLla-结合蛋白在细胞中能够降低或阻 止TLla-介导的活性。测定中和的方法是本领域已知的和/或在本文中描述。例如，在所 述TLla-结合蛋白存在或不存在时，使TF-1细胞与TLla例如人TLla (例如由哺乳动物细 胞表达的）和环己酰亚胺接触。与TLla-结合蛋白不存在时的水平相比，降低细胞的细胞 凋亡水平的TLla-结合蛋白被认为"中和"了 TLla活性。
[1474] 如本文所用，术语"病况"是指破坏或干扰正常功能，并且不限于任何特定病况，并 且包括疾病或病症。
[1475] 如本文所用，"TLla-相关病况"是指由TLla或表达TLla的细胞所致的或与之相 关的任何病况。根据本文的公开内容和/或通过进行测定以诊断本文所述的TLla-相关病 况，技术人员将会容易地确定这样的病况。在这一点上，在某些实例中，所述病况是炎性病 况、自身免疫性病况和可通过增加血管生成而治疗的病况。示例性的病况的描述包括在本 文中。
[1476] 如本文所用，术语"预防（preventing) "、"预防（prevent) "或"预防 (prevention)"包括给予本公开内容的蛋白，从而终止或阻止病况的至少一种症状的发展。 该术语也包括对处于缓解期的受试者的治疗，以预防或阻止复发。例如，在缓解期间治疗患 有复发-缓解多发性硬化的受试者，从而预防复发。
[1477] 如本文所用，术语"治疗（treating) "、"治疗（treat) "或"治疗（treatment) "包 括给予本文所述的蛋白，从而减少或消除指定疾病或病况的至少一种症状。
[1478] 如本文所用，术语"受试者"将用于指任何动物，例如哺乳动物。在一个实例中，所 述哺乳动物是人或非人灵长类。在一个实例中，所述哺乳动物是人。
[1479] 在本文中提到"样品"应理解为指来源于受试者的任何样品，例如但不限于体液 (例如血液或血液部分例如血清或血浆、眼泪、尿、滑液或脑脊液）、细胞材料（例如组织吸 出物）、组织活检标本或手术标本。在某些实例中，"样品"是血清、血浆、PBMC或血沉棕黄 层部分的任何一种或多种。
[1480] 如本文所用，术语"诊断（diagnosis) "及其变体"diagnose"、"diagnosed"或 "diagnosing"包括临床状态的任何初步诊断或复发疾病的诊断。
[1481] 如本文所用的"预后（prognosis) "、"预后（prognosing) "及其变体是指疾病的可 能结果或进程，包括恢复或复发的机会或治疗的结果。
[1482] 术语"表达构建体"以其最宽范围使用并且包括核酸，其包含与本文所述的一个或 多个核酸可操作连接的一个或多个启动子序列。
[1483] 术语"表达载体"是指包含表达构建体的核酸，其还能够以可表达形式维持和或复 制核酸。例如，表达载体可包括质粒、噬菌体、噬菌粒、粘粒、病毒亚基因组或基因组片段。对 合适载体的选择是在本领域技术人员的知识范围之内。
[1484] 如本文所用，术语"启动子"以其最宽范围使用并且包括基因组基因的转录调节序 列，包括TATA盒或起始元件，其是准确转录起始所需，有或无改变核酸表达的额外调节元 件（例如上游活化序列、转录因子结合位点、增强子和沉默子），例如，在响应发育和/或外 部刺激时，或以组织特异性方式。在本文的上下文中，术语"启动子"h还用于描述重组的、 合成的或融合的核酸或衍生物，所述衍生物赋予、活化或增强与其可操作连接的核酸的表 达。示例性的启动子可含有额外拷贝的一个或多个特异性调节元件，以进一步增强表达和 /或改变所述核酸的空间表达和/或时间表达。
[1485] 如本文所用，术语"可操作连接"是指相对于核酸来定位启动子，使得该核酸的表 达受到该启动子的控制。启动子可以可操作连接到多个核酸上，例如，通过内部核糖体进入 位点。
[1486] 包含抗体抗原结合结构域的蛋白
[1487] 抗体
[1488] 基于免疫的方法
[1489] 为了产生抗体，将任选用任何合适或所需的佐剂和/或药学上可接受的载体配制 的TLla或其带有表位的片段或部分或其修饰形式（例如，例如在小鼠 TLla蛋白中包含 人表位的融合蛋白）或其编码核酸，以可注射组合物的形式给予受试者（例如，非人动物 受试者，例如小鼠、大鼠、鸡等）。示例性的非人动物是哺乳动物，例如鼠科动物（例如大 鼠或小鼠）。注射可经鼻内、肌内、皮下、静脉内、皮内、腹膜内或通过其它已知路径。任选 地，多次给予TLla或其带有表位的片段或部分或其编码核酸。用于制备和表征抗体的方 法是本领域已知的（参见例如 Antibodies:A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, 1988)〇
[1490] 多克隆抗体的生产可通过在免疫之后在多个点对已免疫动物的血液取样来监测。 如果需要，可给予第二次加强注射以达到所要的抗体滴度。重复加强和滴定的过程，直至达 到合适的滴度。当达到所需免疫原性水平时，将免疫的动物放血并分离和保存血清，和/或 使用所述动物来产生单克隆抗体（mAb)。
[1491] 单克隆抗体是本公开内容考虑的示例性的抗体。通常，单克隆抗体的生产包括， 在足以刺激抗体产生细胞的条件下用TLla或其带有表位的片段或部分或其编码核酸免 疫受试者（例如，啮齿动物，例如小鼠或大鼠）。在一些实例中，使经遗传工程改造以表达 人免疫球蛋白但不表达鼠免疫球蛋白的小鼠免疫以产生抗体（例如以下文献所述：PCT/ 旧2007/008231和/或1^汕6找等人，恥丨证6368:856-859，1994)。免疫之后，使产生抗体 的体细胞（例如B淋巴细胞）与无限增殖细胞例如无限增殖骨髓瘤细胞融合。用于产生这 样的融合细胞（杂交瘤）的各种方法是本领域已知的并且描述于例如以下文献：Kohler和 Milstein，Nature256:495-497, 1975。然后，可在足以产生抗体的条件下培养杂交瘤细胞。
[1492] 本公开内容考虑了产生抗体的其它方法，例如ABL-MYC技术（例如以下文献所述： Largaespada 等人，Curr. Top. Microbiol. Immunol, 166:91-96, 1990) 〇
[1493] 然后按照本文所述的方法选择合适抗体。
[1494] 基于文库的方法
[1495] 本公开内容还包括包含其抗原结合结构域（例如包含其可变区）的抗体或蛋白文 库的筛选，以鉴定本公开内容的TLla-结合蛋白。
[1496] 本公开内容所考虑的文库的实例包括首次用于实验的文库（来自未经攻击的受 试者）、免疫的文库（来自用抗原免疫的受试者）或合成文库。通过常规技术（例如公开 于 Sambrook 和 Russell 编著，Molecular Cloning:A Laboratory Manual,第 3版，第 1-3 卷，Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2001)克隆编码抗体或其区（例如可变区） 的核酸并使用本领域已知方法将其用于编码和展示蛋白质。产生蛋白质文库的其它技术在 例如 US6300064 (例如 Morphosys AG 的 HuCAL 文库）、US5885793、US6204023、US6291158 或 US6248516 中所述。
[1497] 依据本公开内容的TLla-结合蛋白可以是可溶性分泌蛋白或者可以在细胞表面 或颗粒（例如噬菌体或其它病毒、核糖体或孢子）上以融合蛋白形式存在。不同展示文库 形式是本领域已知的。例如，所述文库是体外展示文库（例如核糖体展示文库、共价展示文 库或mRNA展示文库，例如如US7270969中所述）。在又另一实例中，所述展示文库是噬菌 体展示文库，其中包含抗体的抗原结合结构域的蛋白在噬菌体上表达，例如如US6300064、 US5885793、US6204023、US6291158或US6248516中所述。其它噬菌体展示方法是本领域已 知的并且由本公开内容所考虑。同样，细胞展示方法是本公开内容所考虑的，例如细菌展示 文库，例如US5516637中所述；酵母展示文库，例如US6423538中所述；或哺乳动物展示文 库。
[1498] 筛选展示文库的方法是本领域已知的。在一个实例中，使用亲和纯化筛选本公开 内容的展不文库，例如 Scopes(载于：Protein purification:principles and practice, 第3版，Springer Verlag, 1994)中所述。亲和纯化方法通常包括使包含由所述文库展示 的抗原结合结构域的蛋白质与目标抗原（例如TLla)接触并且在洗涤之后，洗脱保持与所 述抗原结合的那些结构域。
[1499] 如果需要，容易将通过筛选鉴定的任何可变区或scFv修饰成为完全抗体。用于将 可变区或scFv修饰或改造成完全抗体的示例性方法描述在例如Jones等人，J. Immunol. Methods354:85-90, 2010 ;或 Jostock 等人，J. Immunol. Methods, 289:65-80, 2004。备选地 或另外，使用标准的克隆方法，例如，描述在Ausubel等人（载于：Current Protocols in Molecular Biology. Wiley Interscience, ISBN047150338, 1987)和/或Sambrook等人（载 于：Molecular Cloning:Molecular Cloning:A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratories, New York,第 3 版 2001)中。
[1500] 脱免疫化、嵌合、⑶R移棺、人源化、同人源化、灵长类化、人和复合TLla-结合蛋白
[1501] 本公开内容的TLla-结合蛋白可以是⑶R移植蛋白，其包括移植到或插入到来自 人抗体的FR上的来自非人物种（例如小鼠或大鼠或非人灵长类）的抗体的CDR;或者其包 括移植到或插入到来自另一类型抗体（例如另一类型的人抗体）的FR上的来自一种类型 的抗体（例如一种类型的人抗体）的CDR。该术语还包括复合蛋白，其包含例如一个或多个 CDR移植可变区和一个或多个例如人可变区、嵌合可变区、同人源化可变区或灵长类化可变 区。这样的蛋白在本文中以称为C320-16至C320-33的抗体为例。
[1502] 本公开内容的TLla-结合蛋白可以是人源化蛋白。
[1503] 术语"人源化蛋白"应理解为指这样的蛋白：其包含人-样可变区，所述人-样可 变区包括移植到或插入到来自人抗体的FR上的来自非人物种（例如小鼠或大鼠或非人灵 长类）的抗体的CDR(这类抗体也被称为"CDR-移植抗体"）。人源化蛋白质还包括这样的 蛋白：其中人蛋白的一个或多个残基通过一个或多个氨基酸置换而修饰和/或人蛋白的一 个或多个FR残基被相应的非人残基替换。人源化蛋白还可包含在人抗体中或在非人抗体 中都不存在的残基。所述蛋白的任何另外的区域（例如Fc区）通常是人的。可使用本领 域已知方法进行人源化，例如，US5225539、US6054297、US7566771或US5585089。术语"人 源化蛋白"还包括超-人源化蛋白，例如在US7732578中所述。该术语还包括复合蛋白，其 包含例如一个或多个人源化可变区和一个或多个例如人可变区、嵌合可变区、同人源化可 变区或灵长类化可变区。
[1504] 在一个实例中，人源化TLla-结合蛋白包含在本文公开的轻链序列中介于27d和 34、50和55以及89和96之间的区域；和在本文公开的重链序列中介于31和35b、50和 58以及95和101之间的区域（依据Kabat编号系统来编号）。在这一点上，Padlan等 人，FASEBJ.，9:133-139, 1995给出证据表明这些区域是最有可能结合或接触抗原的区域。
[1505] 本公开内容的TLla-结合蛋白可以是人蛋白。如本文所用，术语"人蛋白"是指这 样的蛋白：其具有在人例如在人种系或体细胞中存在的可变抗体区和任选恒定抗体区，或 者来自使用所述区而产生的文库。"人"抗体可包括并非由人序列编码的氨基酸残基，例如 通过体外随机或定点突变而引入的突变（尤其是包括保守置换的突变或在所述蛋白的少 量残基中例如在所述蛋白的1、2、3、4或5个残基中的突变）。这些"人抗体"未必需要因为 人的免疫反应而产生，更确切地讲，它们可使用重组方法（例如，筛选噬菌体展示文库）和 /或通过包含编码人抗体恒定区和/或可变区的核酸的转基因动物（例如小鼠）和/或使 用定向选择（例如在US5565332中所述）而产生。该术语还涵盖所述抗体的亲和力成熟形 式。为了本公开内容的目的，人蛋白还被认为包括这样的蛋白：所述蛋白包含来自人抗体的 FR或包含来自人FR的共有序列的序列的FR，而且其中CDR中的一个或多个是随机或半随 机的，例如在US6300064和/或US6248516中所述。
[1506] 示例性的人TLla-结合蛋白是包含以下成对可变区的抗体：
[1507] ⑴包含SEQ ID N0:2中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:6中给出的序列的 VL;
[1508] (ii)包含SEQ ID N0:10中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:14中给出的序列 的VL;
[1509] (iii)包含SEQ ID NO: 18中给出的序列的乂11和包含SEQ ID NO:22中给出的序列 的VL;
[1510] (iv)包含SEQ ID NO:26中给出的序列的乂11和包含SEQ ID NO:30中给出的序列 的VL;
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[1515] (ix)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:62中给出的序列 的VL;
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[1527] (xxi)包含SEQ ID N0:157中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:166中给出的序 列的' ;
[1528] (xxii)包含SEQ ID N0:158中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:167中给出的 序列的Vl ;
[1529] (xxiii)包含SEQ ID NO:159中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:168中给出的 序列的Vl ;
[1530] (xxiv)包含SEQ ID NO: 160中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 169中给出的 序列的Vl ;
[1531] (xxv)包含SEQ ID NO: 161中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 170中给出的序 列的' ;
[1532] (xxvi)包含SEQ ID N0:234中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:169中给出的 序列的Vl ;
[1533] (xxvii)包含SEQ ID N0:154中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:46中给出的 序列的Vl ;
[1534] (xxviii)包含SEQ ID NO:155中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:46中给出的 序列的Vl ;
[1535] (xxix)包含SEQ ID N0:156中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:46中给出的序 列的' ;
[1536] (xxx)包含SEQ ID NO: 157中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:46中给出的序 列的' ;
[1537] (xxxi)包含SEQ ID N0:158中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:46中给出的序 列的' ;
[1538] (xxxii)包含SEQ ID N0:159中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:46中给出的 序列的Vl ;
[1539] (xxxiii)包含SEQ ID NO:160中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:46中给出的 序列的Vl ;
[1540] (xxxiv)包含SEQ ID N0:161中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:46中给出的 序列的Vl ;
[1541] (xxxv)包含SEQ ID NO:234中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:46中给出的序 列的' ;
[1542] (xxxvi)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:164中给出的 序列的Vl ;
[1543] (xxxvii)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:165中给出的 序列的Vl ;
[1544] (xxxviii)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:166中给出 的序列的';
[1545] (xxxix)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:167中给出的 序列的Vl ;
[1546] (xl)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:168中给出的序列 的VL;
[1547] (xli)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:169中给出的序 列的' ;
[1548] (xlii)包含SEQ ID NO:42中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:170中给出的序 列的' ;
[1549] (xliii)包含SEQ ID N0:42中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:171中给出的 序列的Vl ;
[1550] (xliv)包含SEQ ID NO:42中给出的序列的乂11和包含SEQ ID NO:172中给出的序 列的' ;
[1551] (xlv)包含SEQ ID NO:175中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:188中给出的序 列的' ;
[1552] (xlvi)包含SEQ ID NO: 176中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 189中给出的 序列的Vl ;
[1553] (xlvii)包含SEQ ID NO:177中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO:190中给出的 序列的Vl ;
[1554] (xlviii)包含SEQ ID NO: 178中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 191中给出 的序列的';
[1555] (xlix)包含SEQ ID N0:179中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:192中给出的 序列的Vl ;
[1556] (1)包含SEQ ID NO: 180中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 193中给出的序列 的VL;
[1557] (li)包含SEQ ID NO: 181中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 194中给出的序 列的' ;
[1558] (lii)包含SEQ ID N0:182中给出的序列的乂11和包含SEQ ID N0:195中给出的序 列的' ;
[1559] (liii)包含SEQ ID N0:183中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:196中给出的 序列的Vl ;
[1560] (liv)包含SEQ ID NO:184中给出的序列的乂11和包含SEQ ID NO:197中给出的序 列的' ;
[1561] (lv)包含SEQ ID N0:185中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:198中给出的序 列的' ;
[1562] (lvi)包含SEQ ID N0:186中给出的序列的￥11和包含SEQ ID N0:199中给出的序 列的 ' ;或
[1563] (lvii)包含SEQ ID N0:187中给出的序列的VH和包含SEQ ID N0:200中给出的 序列的八。
[1564] 另外的示例性人TLla-结合蛋白是抗体，其包含SEQ ID N0:42中给出的序列的乂11 和包含SEQ ID N0:46中给出的序列的'，其中所述V!^P/或'包含以下置换或置换组的 一个或多个：
[1565] ⑴所述VH包含在SEQ ID NO:42的位置16的丙氨酸；
[1566] (ii)所述VH包含在SEQ ID NO:42的位置100的丙氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1567] (iii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置100的丝氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1568] (iv)所述VH包含在SEQ ID NO:42的位置100的组氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1569] (v)所述VH包含在SEQ ID NO:42的位置100的亮氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1570] (vi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置100的天冬氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1571] (vii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置100的酪氨酸和所述八包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1572] (viii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置100的脯氨酸和所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1573] (ix)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置100的谷氨酰胺和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1574] (X)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置100的赖氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1575] (xi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置101的丙氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1576] (xii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置101的丝氨酸和所述八包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1577] (xiii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置101的组氨酸和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1578] (xiv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置101的亮氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1579] (xv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置101的天冬氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1580] (xvi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置101的酪氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1581] (xvii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置101的谷氨酰胺和所述'包含在SEQ ID NO :46的位置76的苏氨酸；
[1582] (xviii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置101的赖氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO :46的位置76的苏氨酸；
[1583] (xix)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置102的丙氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1584] (XX)所述VH包含在SEQ ID NO:42的位置102的丝氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1585] (xxi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置102的组氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1586] (xxii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置102的亮氨酸和所述\包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1587] (xxiii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置102的酪氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1588] (xxiv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置102的脯氨酸和所述\包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1589] (xxv)所述VH包含在SEQ ID NO:42的位置102的谷氨酰胺和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1590] (xxvi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置102的赖氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1591] (xxvii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的丙氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1592] (xxviii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的丝氨酸和所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1593] (xxix)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的组氨酸和所述\包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1594] (XXX)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的亮氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1595] (xxxi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的天冬氨酸和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1596] (xxxii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的酪氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1597] (xxxiii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的脯氨酸和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1598] (xxxiv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的谷氨酰胺和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1599] (xxxv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置103的赖氨酸和所述' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1600] (xxxvi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置104的丝氨酸和所述 ' 包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1601] (xxxvii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置104的组氨酸和所述八包含在SEQ ID NO :46的位置76的苏氨酸；
[1602] (xxxviii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置104的亮氨酸和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1603] (xxxix)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置104的天冬氨酸和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1604] (xl)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置104的酪氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1605] (xli)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置104的脯氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1606] (xlii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置104的谷氨酰胺和所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1607] (xliii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置104的赖氨酸和所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1608] (xliv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置105的丙氨酸和所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1609] (xlv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置105的组氨酸和所述八包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1610] (xlvi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置105的亮氨酸和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1611] (xlvii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置105的天冬氨酸和所述V?包含在SEQ ID NO :46的位置76的苏氨酸；
[1612] (xlviii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置105的酪氨酸和所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1613] (xlix)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置105的脯氨酸和所述\包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1614] (1)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置105的谷氨酰胺和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1615] (li)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置105的赖氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1616] (lii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的丙氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1617] (liii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的丝氨酸和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1618] (liv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的组氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1619] (lv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的亮氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1620] (lvi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的天冬氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO :46的位置76的苏氨酸；
[1621] (lvii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的酪氨酸和所述'包含在SEQ ID NO :46的位置76的苏氨酸；
[1622] (lviii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的脯氨酸和所述八包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1623] (lix)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置107的谷氨酰胺和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1624] (lx)所述VH包含在SEQ ID NO:42的位置107的赖氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1625] (lxi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置23的丙氨酸；
[1626] (lxii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述八包含在SEQ ID NO :46的位置28的天冬氨酸；
[1627] (lxiii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置33的酪氨酸；
[1628] (lxiv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述八包含在SEQ ID NO :46的位置34的天冬氨酸；
[1629] (lxv)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO :46的位置53的天冬酰胺；
[1630] (lxvi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置54的丝氨酸；
[1631] (lxvii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述'包含在SEQ ID N0:46的位置82的丙氨酸；
[1632] (lxviii)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述\包含在SEQ ID N0:46的位置95的丝氨酸；
[1633] (lxix)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述八包含在SEQ ID NO:46的位置96的丝氨酸；
[1634] (lxx)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置41的苏氨酸和所述' 包含在SEQ ID NO:46的位置76的苏氨酸；
[1635] (lxxi)所述VH包含在SEQ ID N0:42的位置47的丝氨酸和所述'包含在SEQ ID NO:46的位置23的苏氨酸；
[1636] (lxxii)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置 72的丙氨酸、位置73的天冬氨酸、位置74的精氨酸和位置76的苏氨酸，并且所述\包含 在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1637] (lxxiii)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置 51的亮氨酸和位置102的谷氨酸，并且所述 '包含在各自相对于SEQ ID N0:46而言的位 置24的丝氨酸和位置76的苏氨酸；
[1638] (lxxiv)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置 51的亮氨酸和位置102的谷氨酸，并且所述 '包含在各自相对于SEQ ID N0:46而言的位 置23的苏氨酸、位置24的丝氨酸和位置76的苏氨酸；
[1639] (lxxv)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置51 的亮氨酸和位置102的谷氨酸，并且所述 '包含在各自相对于SEQ ID N0:46而言的位置 23的苏氨酸和位置76的苏氨酸；
[1640] (lxxvi)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置 51的亮氨酸和位置102的谷氨酸，并且所述八包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1641] (lxxvii)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置 51的亮氨酸、位置102的谷氨酸和位置105的丙氨酸，并且所述\包含在各自相对于SEQ ID N0:46而言的位置23的苏氨酸、位置24的丝氨酸和位置76的苏氨酸；
[1642] (lxxviii)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位 置51的亮氨酸、位置102的谷氨酸和位置105的丙氨酸，并且所述'包含在SEQ ID N0:46 的位置76的苏氨酸；
[1643] (lxxix)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置 72的丙氨酸、位置73的天冬氨酸、位置74的精氨酸和位置76的苏氨酸，并且所述\包含 在各自相对于SEQ ID N0:46而言的位置23的苏氨酸、位置24的丝氨酸和位置76的苏氨 酸；
[1644] (lxxx)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置72 的丙氨酸、位置73的天冬氨酸、位置74的精氨酸和位置76的苏氨酸，并且所述' 包含在 各自相对于SEQ ID N0:46而言的位置23的苏氨酸、位置24的丝氨酸、位置76的苏氨酸和 位置51的谷氨酸；
[1645] (lxxxi)所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置 51的亮氨酸、位置72的丙氨酸、位置73的天冬氨酸、位置74的精氨酸、位置76的苏氨酸、 位置102的谷氨酸和位置105的丙氨酸，并且所述 '包含在各自相对于SEQ ID N0:46而 言的位置23的苏氨酸、位置24的丝氨酸、位置76的苏氨酸和位置51的谷氨酸；和
[1646] ⑴所述VH包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸、位置51的 亮氨酸、位置72的丙氨酸、位置73的天冬氨酸、位置74的精氨酸、位置76的苏氨酸、位置 102的谷氨酸和位置105的丙氨酸，并且所述\包含在各自相对于SEQ ID N0:46而言的位 置23的苏氨酸、位置24的丝氨酸、位置76的苏氨酸和位置51的甘氨酸。
[1647] 任选地，所述VH连接到重链恒定区，例如IgGl重链恒定区。在一个实例中，所述 重链恒定区缺乏c-末端赖氨酸残基。
[1648] 任选地，所述 '连接到轻链恒定区。
[1649] 本公开内容的TLla-结合蛋白可以是同人源化蛋白。术语"同人源化蛋白"是指 通过在W02007/019620中描述的方法而制备的蛋白。同人源化TLla-结合蛋白包括抗体的 可变区，其中所述可变区包含来自新世界灵长类抗体可变区的FR和来自非新世界灵长类 抗体可变区的CDR。例如，同人源化TLla-结合蛋白包括抗体的可变区，其中所述可变区包 含来自新世界灵长类抗体可变区的FR和来自小鼠或大鼠抗体的CDR。在一个实例中，所述 同人源化TLla-结合蛋白是TLla-结合抗体，其中所述可变区中的一个或两个是同人源化 的。该术语也包括复合蛋白，其包含例如一个或多个同人源化可变区和一个或多个例如人 可变区或人源化可变区或嵌合可变区。
[1650] 本公开内容的TLla-结合蛋白可以是灵长类化蛋白。"灵长类化蛋白"包含来自在 使非人灵长类动物（例如食蟹猴）免疫之后产生的抗体的可变区。任选地，所述非人灵长 类动物抗体的可变区与人恒定区连接以制备灵长类化抗体。生产灵长类化抗体的示例性方 法描述在US6113898中。该术语也涵盖复合蛋白，其包含例如一个或多个灵长类化可变区 和一个或多个例如人可变区或人源化可变区或嵌合可变区。
[1651] 在一个实例中，本公开内容的TLla-结合蛋白是嵌合蛋白。术语"嵌合蛋白"是指 这样的蛋白：其中抗原结合结构域来自特定物种（例如鼠，例如小鼠或大鼠）或属于特定抗 体类别或亚类，而该蛋白的剩余部分来自衍生自另一物种（例如人或非人灵长类动物）的 蛋白或属于另一抗体类别或亚类。在一个实例中，所述嵌合蛋白是这样的嵌合抗体：其包含 来自非人抗体（例如，鼠抗体）的％和/或'，并且所述抗体的剩余区域来自人抗体。所 述嵌合蛋白的生产是本领域已知的并且可通过标准方法（例如在US6331415、US5807715、 US4816567和US4816397中所述）来实现。该术语也涵盖复合蛋白，其包含例如一个或多个 嵌合可变区和一个或多个例如人可变区或人源化可变区或嵌合可变区。
[1652] 本公开内容也考虑了脱免疫化TLla-结合蛋白，例如在W02000/34317和 W02004/108158中描述。脱免疫化抗体和蛋白具有一个或多个被除去（即突变）的表位，例 如B细胞表位或T细胞表位，从而减少受试者将产生针对所述抗体或蛋白的免疫反应的可 能性。例如，分析本公开内容的TLla-结合蛋白以鉴定一个或多个B或T细胞表位并且使 在所述表位内的一个或多个氨基酸残基突变，从而降低TLla-结合蛋白的免疫原性。本发 明人已经使用所述技术以鉴定经预测与MHCII类分子结合的表位并鉴定较少可能在受试 者中诱导免疫应答的TLla结合蛋白。
[1653] 根据前述公开内容，技术人员显而易见的是"复合"蛋白包含一种形式的VH(例如 人）和另一形式的 '(例如人源化）。本公开内容明确地涵盖VH和 '形式的所有组合。
[1654] 何含抗原结合结构域的其它TLla-结合蛋白
[1655] 本公开内容还考虑了包含抗体的可变区或抗原结合结构域的其它TLla-结合蛋 白，例如：
[1656] (i)单结构域抗体，其为包含抗体的VH或 '的全部或一部分的单一多肽链（参见 例如 US6248516);
[1657] (ii)双抗体、三抗体和四抗体，例如在US5844094和/或US2008152586中所述；
[1658] (iii)scFv，例如在 US5260203 中所述；
[1659] (iv)微抗体，例如在US5837821中所述；
[1660] (v) "钥匙（key)和孔（hole) "双特异性蛋白质，如在US5731168中所述；
[1661] (vi)杂缀合蛋白，例如在US4676980中所述；
[1662] (vii)使用化学交联剂产生的杂缀合蛋白，例如在US4676980中所述；
[1663] (viii)Fab'-SH 片段，例如在 Shalaby 等人，J. Exp. Med.，175:217-225, 1992 中所 述；或
[1664] (ix)Fab3(例如在 EP19930302894 中所述）。
[1665] 恒定结构域融合物
[1666] 本公开内容涵盖TLla-结合蛋白，其包含抗体的抗原结合结构域和恒定区或Fc或 其结构域如C H2和/或CH3结构域。合适的恒定区和/或结构域对技术人员将是显而易见 的和/或所述多肽的序列可容易得自公众可得的数据库。Kabat等人亦提供了一些合适的 恒定区/结构域的描述。
[1667] 恒定区和/或其结构域可用于提供生物活性，例如，二聚化、延长血清半寿期（例 如通过与FcRn结合）、抗体-依赖性细胞毒性（ADCC)、补体依赖性细胞毒性（⑶C)、抗体-依 赖性细胞吞噬（ADCP)。
[1668] 本公开内容还考虑了 TLla-结合蛋白，其包含突变的恒定区或结构域，例如在 US7217797、US7217798 或 US20090041770 (具有延长的半寿期）或 US2005037000 (增加 ADCC)中所述。
[1669] 包含恒定区或Fc的本公开内容的抗体或本公开内容的TLla-结合蛋白的重链恒 定区的C-末端赖氨酸可以被除去，例如，在所述抗体的生产或纯化期间，或通过重组改造 编码所述抗体或蛋白的重链的核酸。因此，完整抗体或蛋白可包含所有C-末端赖氨酸残基 都除去的抗体或蛋白群体、C-末端赖氨酸残基未被除去的抗体或蛋白群体、或者具有有和 无 C-末端赖氨酸残基的抗体混合物的抗体或蛋白群体。在某些实例中，所述抗体或蛋白群 体可以额外地包含其中在重链恒定区之一中C-末端赖氨酸残基被除去的抗体或蛋白。同 样，抗体或蛋白的组合物可包含有或无 C-末端赖氨酸残基的抗体或蛋白群体的相同或类 似混合物。
[1670] 增强效应功能
[1671] 在一个实例中，本公开内容的TLla-结合蛋白可以诱导效应功能或增强的效应功 能。
[1672] 在本公开内容的情况下，"效应功能"是指通过结合到导致细胞杀伤的抗体的Fc区 (天然序列Fc区或氨基酸序列变体Fc区）的细胞或蛋白而介导的那些生物活性。抗体诱导 的效应功能的实例包括：补体依赖性细胞毒性；抗体依赖性细胞介导的细胞毒性（ADCC); 抗体-依赖性细胞吞噬（ADCP);和B-细胞活化。
[1673] 在一个实例中，本公开内容的TLla-结合蛋白以能够诱导效应功能（例如ADCC或 ⑶C)的方式结合到细胞表面的TLla上。
[1674] 例如，所述TLla-结合蛋白保持结合到细胞表面的TLla上足以诱导效应功能（例 如ADCC和/或⑶C)的时间。
[1675] 在一个实例中，本公开内容的TLla-结合蛋白能够诱导增加的效应功能，例如通 过修饰的Fc区或通过包含能够结合免疫效应细胞的区域。例如，与人IgGl或IgG3Fc区所 诱导的水平相比，效应功能水平增加。本公开内容的TLla-结合蛋白所诱导的增加的效应 功能可以导致增加的治疗效果或预防效果，例如通过不仅阻断TLla的作用，而且还杀伤或 耗尽导致病况的细胞，例如，通过杀伤自我反应性T细胞。
[1676] 在一个实例中，与无修饰的Fc区相比，本公开内容的TLla-结合蛋白的Fc区经修 饰以增加其能够诱导的效应功能水平。这样的修饰可以是在氨基酸水平和/或二级结构水 平和/或三级结构水平上和/或对Fc区的糖基化进行。
[1677] 技术人员将会理解，可以以多种方式的任何一种来显示较大的效应功能，例如以 较大的效应水平、更持久的效应或更快速的效应。
[1678] 在一个实例中，所述Fc区包含一个或多个氨基酸修饰，所述修饰增加了其诱导增 强的效应功能的能力。在一个实例中，所述Fc区以更大的亲和力与一种或多种FcyR例 如FcyRIII结合。在一个实例中，所述Fc区包含在选自以下的位置上的至少一个氨基酸 置换：230、233、234、235、239、240、243、264、266、272、274、275、276、278、302、318、324、325、 326、328、330、332 和 335，依据Kabat的EU指数而编号。在一个实例中，所述Fc区包含以 下氨基酸置换：S239D/I332E，依据Kabat的EU指数而编号。该Fc区与野生型Fc区相比对 Fc γ RIIla的亲和力具有大约14倍的增加，并且与野生型Fc区相比具有大约3. 3倍增加的 诱导ADCC的能力。在一个实例中，所述Fc区包含以下氨基酸置换：S239D/A330L/I332E，依 据Kabat的EU指数而编号。该Fc区与野生型Fc区相比对FcYRIIIa的亲和力具有大约 138倍的增加，并且与野生型Fc区相比具有大约323倍增加的诱导ADCC的能力。
[1679] 增加 Fc区诱导效应功能的能力的其它氨基酸置换是本领域已知的和/或描述于 例如 US6737056 或 US7317091。
[1680] 在一个实例中，Fc区的糖基化被改变以增加其诱导增强的效应功能的能力。在 这一点上，由哺乳动物细胞产生的天然抗体通常包含分枝的双触角的（biantennary) 寡糖，其通常经N-连接而结合到Fc区的C H2结构域的Asn297上。寡糖可包括多种碳 水化合物，例如甘露糖、N-乙酰基葡糖胺（GlcNAc)、半乳糖和唾液酸、以及连接到双触 角寡糖结构的"茎"中的GlcNAc的岩藻糖。在某些实例中，依据本公开内容的Fc区包 含碳水化合物结构，其缺乏（直接或间接地）连接到Fc区的岩藻糖，即Fc区是"无岩 藻糖基化（afucosylated)"的。这样的变体可具有改善的诱导ADCC的能力。产生无 岩藻糖基化抗体的方法包括，在不能够表达α-1，6-岩藻糖转移酶（FUT8)的细胞系 中表达所述抗体或其抗原结合片段（例如描述于Yumane-Ohnuki等人，Biotechnol. Bioengineer. 87:614-622, 2004)，在表达针对FUT8的小干扰RNA的细胞中表达所述抗体或 其抗原结合片段（例如描述于 Mori 等人，Biotechnol. Bioengineer·，88:901-908, 2004)， 在不能够表达二磷酸鸟苷（⑶P)-甘露糖4, 6-脱水酶（GMD)的细胞中表达所述抗体或 其抗原结合片段（例如描述于Kanda等人，J. Biotechnol.，130:300-310,2007)。本公 开内容还考虑了具有降低岩藻糖基化水平的蛋白的用途，所述蛋白例如使用经修饰表达 β-(1，4)-Ν-乙酰基葡糖胺转移酶III(GnT-III)的细胞系产生（例如描述于Um0na等 人，Nat. Biotechnol. 17:176-180, 1999)。
[1681] 其它方法包括使用这样的细胞系：所述细胞系固有地产生能够诱导增强的Fc-介 导的效应功能的抗体（例如用于生产病毒疫苗的鸭胚衍生的干细胞，W02008/129058 ;在禽 类EBX_?细胞中的重组蛋白生产，W02008/142124)。
[1682] 本公开内容的TLla-结合蛋白还包括具有等分的寡糖的那些，例如其中连接到Fc 区的双触角的寡糖被GlcNAc等分。这样的蛋白可具有降低的岩藻糖基化和/或改善的ADCC 功能。这样的蛋白的实例描述于例如US6602684和US20050123546。
[1683] 还考虑了在与Fc区连接的寡糖中具有至少一个半乳糖残基的TLla-结合蛋 白。这样的蛋白可具有改善的⑶C功能。这样的蛋白质描述于例如W01997/30087和 W01999/22764。
[1684] TLla-结合蛋白还可包含能够诱导增加的⑶C水平的Fc区。例如，IgGl和IgG3的 杂合体产生具有增加的CDC活性的抗体（Natsume等人，Cancer Res. 68:3863-3872, 2008)。
[1685] TLla-结合蛋白可另外或者备选地融合到或缀合到与免疫效应细胞结合的蛋白 (例如抗体可变区）上，例如，通过结合到⑶3或⑶16上。
[1686] 测定效应功能的方法是本领域已知的。在一个实例中，使用51Cr释放测定法、铕释 放测定法或 35S释放测定法评价ADCC活性水平。在这些测定法的每一个中，在足以使一种 或多种所述化合物被表达TLla的细胞摄取的时间和条件下，将该细胞与所述化合物一起 培养。在 35s释放测定法的情况下，可将细胞与35S-标记的甲硫氨酸和/或半胱氨酸一起培 养，其培养时间足以使该标记氨基酸掺入到新合成的蛋白中。然后在所述蛋白存在或不存 在时和在免疫效应细胞例如PBMC和/或NK细胞存在时培养所述细胞。然后检测细胞培养 基中 51Cr、铕和/或35S的量，与所述蛋白不存在时相比，所述蛋白存在时的增加表明所述结 合分子/试剂具有效应功能。公开用于评价由蛋白所诱导的ADCC水平的测定法的示例性 出版物包括 Hellstrom 等人，Proc. Natl Acad. Sci. USA83:7059-7063, 1986 和 Bruggemann 等人，J. Exp. Med. 166:1351-1361，1987。
[1687] 评价由蛋白所诱导的ADCC水平的其它测定法包括用于流式细胞术的ACTI?非放 射性细胞毒性测定法（Cell Technology，Inc. CA，USA)或Cyto Tox 96?非放射性细胞毒性 测定法（Promega, WI, USA)。
[1688] 备选地或另外，通过测定TLla-结合蛋白对一种或多种Fc γ R的亲和力，评价所述 蛋白的效应功能，例如如US7317091中所述。
[1689] 还可进行Clq结合测定法以证实所述TLla-结合蛋白能够结合Clq并可诱导⑶C。 为了评价补体激活，可进行⑶C测定法（参见例如，Gazzano-Santoro等人，J. Immunol. Methods202:163, 1996)。
[1690] 在另一实例中，所述TLla-结合蛋白包含一个或多个氨基酸置换，这增加了所述 蛋白的半寿期。例如，所述TLla-结合蛋白含有包含一个或多个氨基酸置换的恒定区，所述 置换增加了该恒定区对新生Fc区（FcRn)的亲和力。例如，所述恒定区在较低pH(例如大 约PH6.0)时对FcRn具有增加的亲和力，以在内体中促进Fc/FcRn结合。在一个实例中，与 在大约PH7. 4时的亲和力相比，所述恒定区在大约pH6时对FcRn具有增加的亲和力，这有 助于在细胞再循环后Fc重新释放到血液中。这些氨基酸置换可用于通过减少从血液中的 清除而延长TLla-结合蛋白的半寿期。
[1691] 依据EU编号系统，示例性的氨基酸置换包括T250Q和/或M428L或T252A、T254S 和T266F或M252Y、S254T和T256E或H433K和N434F。另外或备选的氨基酸置换描述于例 如 US20070135620 或 US7083784。
[1692] 稳定的TLla-结合蛋白
[1693] 本公开内容的TLla-结合蛋白可包含IgG4恒定区或稳定的IgG4恒定区。术语 "稳定的IgG4恒定区"将理解为指已经被修饰以减少Fab臂交换或经历Fab臂交换的倾向 或半抗体形成或半抗体形成的倾向的IgG4恒定区。"Fab臂交换"是指对人IgG4的一类蛋 白修饰，其中IgG4重链和连接的轻链（半分子）交换成来自另一 IgG4分子的重-轻链对。 因此，IgG4分子可获得识别两种不同抗原的两个不同的Fab臂（产生双特异性分子）。Fab 臂交换在体内天然存在且可由纯化的血细胞或还原型谷胱甘肽等还原剂在体外诱导。在 IgG4抗体分解以形成各自含有单一重链和单一轻链的两个分子时形成"半抗体"。
[1694] 在一个实例中，稳定的IgG4恒定区包含根据Kabat的系统（Kabat等 人，Sequences of Proteins of Immunological Interest Washington DC United States Department of Health and Human Services, 1987 和 / 或 1991)在绞链区的位置 241 的脯氨酸。该位置对应于根据EU编号系统（Kabat等人，Sequences of Proteins of Immunological Interest Washington DC United States Department of Health and Human Services, 2001 和 Edelman等人，Proc. Natl. Acad. USA, 63:78-85, 1969)的绞链区的 位置228。在人IgG4中，该残基通常为丝氨酸。在丝氨酸置换为脯氨酸之后，IgG4铰链区包 含序列CPPC。在这一点上，技术人员将知道"铰链区"是连接Fc区和Fab区的抗体重链恒 定区的富含脯氨酸部分，其赋予抗体的两个Fab臂的移动性。所述铰链区包括半胱氨酸残 基，其参与重链间的二硫键。根据Kabat编号系统，它通常被定义为自人IgGl的Glu226延 伸至 Pr〇243。其它IgG同种型的铰链区可通过在相同位置放置形成重链间二硫（S-S)键的 第一半胱氨酸残基和最后的半胱氨酸残基来与IgGl序列对齐（参见例如W02010/080538)。
[1695] 突夺的TLla-结合蛋白
[1696] 本公开内容还提供与本文公开的序列具有至少80%同一性的TL1-结合蛋白或其 编码核酸。在一个实例中，本公开内容的TLla-结合蛋白或核酸包含与本文公开的序列具 有至少大约85 %或90 %或95 %或97 %或98 %或99 %同一性的序列，其中所述蛋白特异性 结合到TLla上并抑制TLla与DR3的相互作用而不抑制TLla与DcR3的相互作用。
[1697] 备选地或另外，所述TLla-结合蛋白包含⑶R(例如3个⑶R)，其与依据任何实例 的本文所述的％或\的⑶R具有至少大约80%或85%或90%或95%或97%或98%或 99%同一性，其中所述蛋白能够特异性结合到TLla上并抑制TLla与DR3的相互作用，其中 所述蛋白不抑制TLla与DcR3的相互作用。在这一点上，本发明人已经制备了在其⑶R内 具有不同序列的多种抗体。测定蛋白TLla的结合和测定TLla与DR3或TLla与DcR3的相 互作用的方法描述于本文。
[1698] 例如，本发明人已经鉴定了在依据Kabat编号系统的HCDR1中共享60%同一性的 一组TLla-结合蛋白以及在依据Kabat编号系统的HCDR1中共享80%同一性的另一亚组蛋 白。
[1699] 本发明人还已经鉴定了在依据Kabat编号系统的HCDR2中共享40 %同一性或 47%同一性的一个亚类的TLla-结合蛋白。
[1700] 如本文所讨论，本领域还已知道重链⑶R2的5个C-末端残基可以突变为保守或 非保守的氨基酸置换（31%残基）（Padlan等人，FASEB J.9:133-139，1995)。因此，蛋白可 包含与本文公开的重链CDR2序列具有至少大约69%同一性的CDR2。
[1701] 本发明人也已经鉴定了一类蛋白质，其包含本文所述的抗体C320的可变区的变 体。这些变体允许鉴定在可变区内的可被置换而不损失功能的位点。
[1702] 例如，本发明人已经鉴定了在包含SEQ ID N0:42中给出的序列的￥11中的可被置换 而不损失功能的若干残基。因此，本公开内容涵盖蛋白，其包含与SEQ ID N0:42中给出的 序列具有至少大约86%同一性的￥11。在这一点上，本发明人已经制备了 SEQ ID N0:42的 修饰形式，其具有大约17个氨基酸置换（即与SEQ ID NO:42具有大约86%同一性）并保 留本文所述的功能。在这一点上，本发明人还已经制备了 SEQ ID N0:42的修饰形式，其与 SEQ ID N0:42具有大约90或94%同一性并保留本文所述的功能。在一个实例中，所述序 列与SEQ ID N0:42中给出的序列具有至少大约95%或96%或97%或98%同一性。在这 一点上，本发明人已经制备了蛋白，其与SEQ ID N0:42中给出的序列具有大约97%或98% 或99%同一性。在一个实例中，所述序列与SEQ ID N0:42中给出的序列具有至少大约99% 同一性。在一个实例中，所述序列与SEQ ID N0:42中给出的序列具有至少大约99. 2%同一 性。
[1703] 在一个实例中，与SEQ ID N0:42相比，所述TLla-结合蛋白包含1至17个氨基酸 置换。例如，与SEQ ID N0:42相比，所述TLla-结合蛋白包含1或2或3或4或5或6或 7或8或9或10或11或12或13或14或15或16或17个氨基酸置换。
[1704] 在一个实例中，与SEQ ID N0:42相比，所述TLla-结合蛋白包含在FR中的1至17 个氨基酸置换。例如，与SEQ ID N0:42相比，所述TLla-结合蛋白包含在FR中的1或2或 3或4或5或6或7或8或9或10或11或12或13或14或15或16或17个氨基酸置换。 在一个实例中，所述置换不在SEQ ID N0:42的位置73。
[1705] 在一个实例中，与SEQ ID N0:42相比，所述TLla-结合蛋白包含在CDR3中的1至 3个氨基酸置换。例如，与SEQ ID N0:42相比，所述TLla-结合蛋白包含在⑶R3中的1或 2或3个氨基酸置换。在一个实例中，所述置换不在SEQ ID N0:42的位置99或101或104 或108的一个或多个。
[1706] 在一个实例中，TLla-结合蛋白包含一个或多个置换以阻止或减少所述蛋白的糖 基化，其中所述置换介于SEQ ID N0:42的氨基酸72至76之间。例如，所述蛋白包含代替 SEQ ID N0:42的位置71的精氨酸的丙氨酸和/或代替位置72的天冬酰胺的天冬氨酸和/ 或代替位置73的苏氨酸的精氨酸和/或代替位置75的异亮氨酸的苏氨酸。
[1707] 在一个实例中，所述蛋白的VH未被糖基化和/或不包含用于N-连接的糖基化的 共有位点。
[1708] 在一个实例中，本公开内容的TLla-结合蛋白包含SEQ ID N0:42中给出的序列的 突变体，其中所述突变体序列至少包含SEQ ID N0:42的位置16的丝氨酸。
[1709] 在一个实例中，本公开内容的TLla-结合蛋白包含SEQ ID N0:42中给出的序列的 突变体，其中所述突变体序列至少包含位置41的脯氨酸。
[1710] 在一个实例中，本公开内容的TLla-结合蛋白包含SEQ ID N0:42中给出的序列的 突变体，其中所述突变体序列至少包含位置74的精氨酸。
[1711] 在一个实例中，本公开内容的TLla-结合蛋白包含SEQ ID N0:42中给出的序列的 突变体，其中所述突变体序列至少包含SEQ ID N0:42的位置49的谷氨酸或甘氨酸。
[1712] 在一个实例中，本公开内容的TLla-结合蛋白包含SEQ ID N0:42中给出的序列的 突变体，其中所述突变体序列至少包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨 酸和位置51的亮氨酸和位置102的谷氨酸和位置105的丙氨酸。
[1713] 在一个实例中，本公开内容的TLla-结合蛋白包含SEQ ID N0:42中给出的序列的 突变体，其中所述突变体序列至少包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨 酸和位置51的亮氨酸和位置72的丙氨酸和位置73的天冬氨酸和位置74的精氨酸和位置 102的谷氨酸和位置105的丙氨酸。
[1714] 在一个实例中，本公开内容的TLla-结合蛋白包含SEQ ID N0:42中给出的序列的 突变体，其中所述突变体序列至少包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨 酸和位置51的亮氨酸和位置72的丙氨酸和位置73的天冬氨酸和位置74的精氨酸和位置 76的苏氨酸和位置102的谷氨酸和位置105的丙氨酸。
[1715] 本发明人已经鉴定了在HCDR2内的可以被置换的位点。结合Padlan等人（出处 同上）的观察结果，本公开内容因此提供包含VH的蛋白，所述VH包含与SEQ ID N0:44中给 出的序列具有至少大约65%同一性的序列的CDR2。在一个实例中，所述％同一性为至少大 约70 %或75 %或80 %或90 %。在一个实例中，所述％同一性为至少大约94%。
[1716] 本发明人已经鉴定了在HCDR3内的可以被置换的多个位点。本公开内容因此提供 包含V H的蛋白，所述VH包含与SEQ ID NO:45中给出的序列具有至少大约60%同一性的序 列的⑶R3。在一个实例中，所述％同一性为与SEQ ID NO:45中给出的序列的至少大约70% 同一性，例如如本文所举例。在一个实例中，所述％同一性为至少大约75 %或80 %或90 %。 在一个实例中，所述％同一性为至少大约90%。
[1717] 在一个实例中，SEQ ID NO: 45的突变形式包含SEQ ID NO: 45的位置1的谷氨酸和 /或SEQ ID NO:45的位置3的脯氨酸和/或SEQ ID NO:45的位置6的丙氨酸。任选地，所 述突变形式还包含SEQ ID NO:45的位置8的苯丙氨酸和/或SEQ ID NO:45的位置10的 酪氨酸。
[1718] 可以突变的额外残基在图1C-1E和在SEQ ID N0:94、137、152、162和173中给出。
[1719] 在一个实例中，本发明人已经鉴定了在包含SEQ ID N0:46中给出的序列的'中 的可被置换而不损失功能的若干残基。因此，本公开内容涵盖蛋白，其包含与SEQ ID N0:46 中给出的序列具有至少大约95%同一性的'。例如，本发明人已经突变了在 '中的32个 残基而不损失功能，意味着本公开内容提供蛋白，其与SEQ ID N0:46中给出的序列具有至 少大约71%同一性。在一个实例中，所述％同一性为至少大约75%或80%或90%或95% 或97%。在一个实例中，所述％同一性为至少大约98%。在一个实例中，所述％同一性为 至少大约99%。在一个实例中，所述％同一性为至少大约99. 1%。
[1720] 在一个实例中，与SEQ ID N0:42相比，所述TLla-结合蛋白包含1至17个氨基酸 置换。例如，与SEQ ID N0:46相比，所述TLla-结合蛋白包含1或2或3或4或5或6或7 或8或9或10或11或12或13或14或15或16或17或18或19或20或21或22或23 或24或25或26或27或28或29或30或31或32个氨基酸置换。
[1721] 在一个实例中，与SEQ ID N0:46相比，所述TLla-结合蛋白包含在FR中的1至32 个氨基酸置换。例如，与SEQ ID N0:46相比，所述TLla-结合蛋白包含在FR中的1或2或 3或4或5或6或7或8或9或10或11或12或13或14或15或16或17或18或19或 20或21或22或23或24或25或26或27或28或29或30或31或32个氨基酸置换。
[1722] 在一个实例中，与SEQ ID N0:46相比，所述TLla-结合蛋白包含在⑶R3中的1至 3个氨基酸置换。例如，与SEQ ID N0:46相比，所述TLla-结合蛋白包含在⑶R中的1或2 或3个氨基酸置换。在一个实例中，所述置换不在SEQ ID N0:46的位置34、54、94的一个 或多个。
[1723] 在一个实例中，本公开内容的TLla-结合蛋白包含SEQ ID N0:46中给出的序列的 突变体，其中所述突变体序列至少包含SEQ ID N0:46的位置24的丝氨酸。
[1724] 在一个实例中，本公开内容的TLla-结合蛋白包含SEQ ID N0:46中给出的序列的 突变体，其中所述突变体序列至少包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸。
[1725] 在一个实例中，本公开内容的TLla-结合蛋白包含SEQ ID N0:46中给出的序列的 突变体，其中所述突变体序列至少包含SEQ ID N0:46的位置81的谷氨酰胺。
[1726] 在一个实例中，本公开内容的TLla-结合蛋白包含SEQ ID N0:46中给出的序列的 突变体，其中所述突变体序列至少包含在各自相对于SEQ ID N0:46而言的位置23的苏氨 酸和位置24的丝氨酸和位置76的苏氨酸。
[1727] 在一个实例中，本公开内容的TLla-结合蛋白包含SEQ ID N0:46中给出的序列的 突变体，其中所述突变体序列至少包含在各自相对于SEQ ID N0:46而言的位置23的苏氨 酸和位置24的丝氨酸和位置76的苏氨酸和位置51的谷氨酸。
[1728] 本发明人已经鉴定了在IXDR1内的可以被置换的多个位点。本公开内容因此提供 包含'的蛋白，所述'包含与SEQ ID N0:47中给出的序列具有至少大约60%同一性的序 列的⑶R1。在一个实例中，所述％同一性为至少大约70%或75%或80%或90%。例如， 本发明人已经突变了在包含SEQ ID NO:47中给出的序列的IXDR1中的2个位点，因此制备 了与所述序列具有至少大约86%同一性的蛋白。在一个实例中，所述％同一性为至少大约 90%。
[1729] 在一个实例中，本公开内容的TLla结合蛋白含有包含SEQ ID NO:42中给出的序 列的VH和包含SEQ ID N0:46中给出的序列的'，其中所述或'包含以下置换或置 换组的一个或多个：
[1730] ⑴所述VH至少包含在SEQ ID N0:42的位置16的丝氨酸；
[1731] (ii)所述'至少包含在SEQ ID N0:46的位置76的苏氨酸；
[1732] (iii)所述 '至少包含在SEQ ID N0:46的位置81的谷氨酰胺；
[1733] (iv)所述VH至少包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸和位 置51的亮氨酸和位置102的谷氨酸和位置105的丙氨酸，并且所述'至少包含在各自相 对于SEQ ID N0:46而言的位置23的苏氨酸和位置24的丝氨酸和位置76的苏氨酸；或
[1734] (v)所述￥11至少包含在各自相对于SEQ ID N0:42而言的位置41的脯氨酸和位置 51的亮氨酸和位置72的丙氨酸和位置73的天冬氨酸和位置74的精氨酸和位置102的谷 氨酸和位置105的丙氨酸，并且所述 '至少包含在各自相对于SEQ ID N0:46而言的位置 23的苏氨酸和位置24的丝氨酸和位置76的苏氨酸和位置51的谷氨酸。
[1735] 在另一实例中，本公开内容的核酸包含与本文中给出的序列具有至少大约80%或 85 %或90 %或95 %或97 %或98 %或99%同一性并且编码TLla-结合蛋白的序列，所述蛋 白能够特异性结合到TLla上并抑制TLla与DR3的相互作用，其中所述蛋白不抑制TLla与 DcR3的相互作用。本公开内容还涵盖编码本公开内容的TLla-结合蛋白的核酸，其因为遗 传密码的简并性而不同于本文中举例的序列。
[1736] 通过 GAP(Needleman 和 Wunsch. Mol. Biol. 48, 443-453, 1970)分析（GCG 程序）， 测定核酸或多肽的％同一'I"生，其中空隙产生罚分（gap creation penalty) = 5,空隙延长 罚分（gap extension penalty) =0.3。询问序列的长度为至少50个残基，并且GAP分析 在至少50个残基的区域上比对两个序列。例如，询问序列的长度为至少100个残基，并且 GAP分析在至少100个残基的区域上比对两个序列。例如，在其整个长度上比对两个序列。
[1737] 如上所讨论，本公开内容还考虑了在严格性杂交条件下与编码本文所述的 TLla-结合蛋白的核酸杂交的核酸，例如，与编码以下抗体的VH或 '的核酸杂交：C319、 C320、C321、C323、C333、C334、C336、C320-3、C320-5、C320-90、C320-103、C320-114、 C320-115、C320-120、C320-129、C320-130、C320-135、C320-162、C320-163、C320-164、 C320-165、C320-166、C320-167、C320-168、C320-169、C320-170、C320-171、C320-172、 C320-179或C320-183。"中度严格性"在本文中定义为在以下条件下进行杂交和/或洗涤： 在2xSSC缓冲液，0. 1% (w/v)SDS中，在45°C至65°C的温度范围或同等条件。"高度严格 性"在本文中定义为在以下条件下进行杂交和/或洗涤：在0. lxSSC缓冲液、0. 1 % (w/v) SDS或更低盐浓度中，在至少65°C的温度或同等条件。在本文中提及严格性的具体水平时， 涵盖使用并非本领域技术人员已知的SSC的洗涤/杂交溶液的同等条件。例如，计算双链 核酸的链解离时的温度（也称为解链温度，或Tm)的方法是本领域已知的。类似于（例如 在5°C内或在10°C内）或等于核酸的Tm的温度被认为是高度严格性。中度严格性被认为 是在所计算的核酸Tm的10°C至20°C内或10°C至15°C内。
[1738] 本公开内容还考虑了本公开内容的TLla-结合蛋白的突变形式，其与本文中给出 的序列相比，包含一个或多个保守氨基酸置换。在某些实例中，所述TLla-结合蛋白包含10 个或更少个，例如9或8或7或6或5或4或3或2或1个保守氨基酸置换。"保守氨基酸 置换"是指其中氨基酸残基被具有相似侧链和/或疏水性和/或亲水性的氨基酸残基替换 的置换。
[1739] 在本领域中已经定义了具有类似侧链的氨基酸残基家族，包括碱性侧链（例 如，赖氨酸、精氨酸、组氨酸）、酸性侧链（例如，天冬氨酸、谷氨酸）、不带电荷的极性侧 链（例如，甘氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸、半胱氨酸）、非极性侧 链（例如，丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸、色氨酸）、 支链侧链（例如，苏氨酸、缬氨酸、异亮氨酸）和芳族侧链（例如，酪氨酸、苯丙氨 酸、色氨酸、组氨酸）。亲水（hydropathic)指数例如描述于Kyte和Doolittle J.Mol. Biol.，157:105-132, 1982,疏水指数描述于例如 US4554101。
[1740] 本公开内容还考虑了非保守氨基酸改变。例如，特别值得注意的是带电荷氨基酸 被另一带电荷氨基酸置换和被中性或带正电荷氨基酸置换。在一些实例中，所述TLla-结 合蛋白包含10或更少、例如9或8或7或6或5或4或3或2或1个非保守氨基酸置换。
[1741] 在一个实例中，所述突变发生在本公开内容的TLla-结合蛋白的抗原结合结构域 的FR内。在另一实例中，所述突变发生在本公开内容的TLla-结合蛋白的⑶R内。
[1742] 制备TLla-结合蛋白的突变形式的示例性方法包括：
[1743] · DNA 诱变（Thie 等人，Methods Mol. Biol. 525:309-322, 2009)或 RNA 诱变（Kopsidas 等人，Immunol. Lett. 107:163-168,2006 ;Kopsidas 等人.BMC Biotechnology, 7:18, 2007 ;和 W01999/058661);
[1744] ?将编码所述多肽的核酸引入突变细胞，例如，XL-lRed、XL-mutS和XL-mutS-Kanr 细菌细胞（Stratagene);
[1745] · DNA 改组（shuffling)，例如公开于 Stemmer, Nature370:389-91，1994 ;和
[1746] ?定点诱变，例如描述于Dieffenbach(编著）和Dveksler (编著）（载于：PCR Primer:A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratories, NY, 1995)〇
[1747] 测定本公开内容的突变TLla-结合蛋白生物活性的示例性方法是技术人员显而 易见的和/或描述于本文中，例如，抗原结合。例如，抗原结合、结合的竞争性抑制、亲和力、 缔合、解离和治疗性功效的测定方法描述于本文中。
[1748] 示例性的TLla-结合蛋白
[1749] 本发明人制备的TLla-结合蛋白含有的示例性可变区及其编码核酸描述于表1和 2〇
[1750] 表1:示例性的TLla-结合蛋白和编码核酸的序列
[1751]
【权利要求】
1. 分离的或重组的包含抗体的抗原结合结构域的TNF-样配体la (TLla)-结合蛋白， 其特异性结合到TLla上并抑制TLla与死亡受体3 (DR3)的相互作用并且不抑制TLla与 诱饵受体3 (DcR3)的相互作用。
2. 权利要求1的TLla-结合蛋白，其不能可检测地降低TLla与DcR3的相互作用。
3. 权利要求1或权利要求2的TLla-结合蛋白，其降低在人TLla和环己酰亚胺存在时 培养的TF-1细胞的细胞凋亡水平，其有效浓度（EC 5(I)为大约1. 5nM至大约10fM。
4. 分离的或重组的包含抗体的抗原结合结构域的TLla-结合蛋白，其中在竞争ELISA 中所述抗原结合结构域特异性结合到TLla上并抑制生物素化TLla与包含融合到抗体Fc 区的DR3的多肽（"DR3/Fc"）的相互作用，其EC5(I为大约2. 5nM、或大约Ι.ΟηΜ、或大约 0. 5nM、或大约0. InM至大约10fM， 其中将浓度大约2 μ g/mL的DR3/Fc固定在固体或半固体基质上，并且其中使浓度 大约1 μ g/mL的所述生物素化TLla与浓度范围大约10 μ g/mL至大约0. 01 μ g/mL的 TLla-结合蛋白接触大约30分钟，然后再与固定化的DR3/Fc接触， 并且其中与所述TLla-结合蛋白不存在时的生物素化TLla与包含融合到抗体Fc区的 DcR3的多肽（"DcR3/Fc"）的结合水平相比，在竞争ELISA中所述TLla-结合蛋白不能可 检测地降低生物素化TLla与DcR3/Fc的相互作用，其中将浓度大约2 μ g/mL的DcR3/Fc 固定在固体或半固体基质上，其中使浓度大约1 μ g/mL的所述生物素化TLla与浓度大约10 μ g/mL至0. 01 μ g/mL的所述TLla-结合蛋白接触大约30分钟，然后再与固定化的DcR3/ Fc接触。
5. 分离的或重组的包含抗体的抗原结合结构域的TLla-结合蛋白，其中在竞争ELISA 中所述抗原结合结构域特异性结合到TLla上并抑制生物素化TLla与包含融合到抗体Fc 区的DR3的多肽（"DR3/Fc"）的相互作用，其EC5Q为大约2. 5nM或1. 5nM或1. OnM或0. 5nM 至大约10fM， 其中将浓度大约2 μ g/mL的DR3/Fc固定在固体或半固体基质上，其中使浓度大约1 μ g/mL的所述生物素化TLla与浓度范围大约10 μ g/mL至大约0.01 μ g/mL的TLla结合 蛋白接触大约30分钟，然后再与固定化的DR3/Fc接触， 并且其中与所述TLla-结合蛋白不存在时的生物素化TLla与包含融合到抗体Fc区的 DcR3的多肽（"DcR3/Fc"）的结合水平相比，在竞争ELISA中所述TLla-结合蛋白不能可 检测地降低生物素化TLla与DcR3/Fc的相互作用，并且其中将浓度大约2 μ g/mL的DcR3/ Fc固定在固体或半固体基质上，其中使浓度大约1 μ g/mL的所述生物素化TLla与浓度大 约10 μ g/mL至0.01 μ g/mL的所述TLla-结合蛋白接触大约30分钟，然后再与固定化的 DcR3/Fc 接触， 并且其中所述TLla-结合蛋白降低在由人细胞产生的人TLla和环己酰亚胺存在时培 养的TF-1细胞的细胞凋亡水平，其EC5(I为大约1. 5 nM或1. OnM或0. 5nM或0. InM或0. 05nM 至大约10fM， 其中使大约7. 5xl04 TF-1细胞与每毫升培养物大约100ng人TLla和大约10 μ g/ml环 己酰亚胺以及浓度大约5 μ g/mL或更少的所述TLla-结合蛋白接触大约4-5小时。
6. 权利要求1-5中任一项的TLla-结合蛋白，其结合到细胞表面的TLla上，当使用流 式细胞术检测时，其EC5(I为大约10nM或5. OnM或1. OnM或0. 5nM或0. InM至大约10fM。
7. 分离的或重组的包含抗体的抗原结合结构域的TLla-结合蛋白，其中所述抗原结合 结构域特异性结合到TLla上并且其中所述TLla-结合蛋白抑制TLla与DR3的相互作用 而不抑制TLla与DcR3的相互作用，并且其中所述TLla-结合蛋白与包含SEQ ID NO: 202 中给出的序列的可溶性人TLla的突变形式结合，在所述序列中位置32的精氨酸已被丙氨 酸置换和/或位置85的精氨酸已被丙氨酸置换，所述TLla-结合蛋白的水平与结合到包含 SEQ ID NO: 202中给出的序列的可溶性人TLla上的该蛋白水平相比至少低75%， 其中将浓度大约1 μ g/mL的TLla的突变形式固定在固体或半固体基质上，并且其中 浓度10 μ g/mL的所述TLla结合蛋白然后再与固定化的突变TLla接触。
8. 权利要求1-7中任一项的TLla-结合蛋白，其中所述TLla-结合蛋白至少在人TLla 的位置32的精氨酸和位置85的精氨酸的氨基酸残基上结合，所述人TLla包含SEQ ID NO: 202所给出的氨基酸序列。
9. 权利要求1-8中任一项的TLla-结合蛋白，其中所述抗原结合结构域包含以下成对 可变区之一的6个⑶R : ⑴包含SEQ ID NO: 42中给出的序列的重链可变区（VH)和包含SEQ ID NO: 46中 给出的序列的轻链可变区（'); (ii) 由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID NO: 106中给出的序列具有至少大约 95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编码的'， 所述核酸包含与SEQ ID NO: 107中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所述 核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交； (iii) 包含SEQ ID NO: 175中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 188中给出的序 列的' ; (iv) 由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID NO: 222中给出的序列具有至少大约 95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编码的'， 所述核酸包含与SEQ ID NO: 228中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所述 核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交； (v) 包含SEQ ID NO: 176中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 189中给出的序列 的VL; (vi) 由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID NO: 223中给出的序列具有至少大约 95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编码的'， 所述核酸包含与SEQ ID NO: 228中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所述 核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交； (vii) 包含SEQ ID NO: 177中给出的序列的乂11和包含SEQ ID NO: 190中给出的序 列的' ; (viii) 由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID NO: 224中给出的序列具有至少大 约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编码的 八，所述核酸包含与SEQ ID NO: 229中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所 述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交； (ix) 包含SEQ ID NO: 178中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 191中给出的序列 的VL; (X)由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID NO: 224中给出的序列具有至少大约 95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编码的八， 所述核酸包含与SEQ ID NO: 230中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所述 核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交； (xi) 包含SEQ ID NO: 179中给出的序列的乂11和包含SEQ ID NO: 192中给出的序列 的VL; (xii) 由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID NO: 224中给出的序列具有至少大约 95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编码的'， 所述核酸包含与SEQ ID NO: 231中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所述 核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交； (xiii) 包含SEQ ID NO: 180中给出的序列的乂11和包含SEQ ID NO: 193中给出的序 列的' ; (xiv) 由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID NO: 224中给出的序列具有至少大约 95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编码的'， 所述核酸包含与SEQ ID NO: 228中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所述 核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交； (xv) 包含SEQ ID NO: 181中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 194中给出的序列 的VL; (xvi) 由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID NO: 225中给出的序列具有至少大约 95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编码的'， 所述核酸包含与SEQ ID NO: 230中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所述 核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交； (xvii) 包含SEQ ID NO: 183中给出的序列的乂11和包含SEQ ID NO: 196中给出的序 列的' ; (xviii) 由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID NO: 226中给出的序列具有至少大 约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编码的 八，所述核酸包含与SEQ ID NO: 230中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所 述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交； (xix) 包含SEQ ID NO: 185中给出的序列的乂11和包含SEQ ID NO: 198中给出的序 列的' ; (XX)由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID NO: 226中给出的序列具有至少大约 95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编码的'， 所述核酸包含与SEQ ID NO: 232中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所述 核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交； (xxi) 包含SEQ ID NO: 186中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 199中给出的序 列的;和 (xxii) 由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID NO: 227中给出的序列具有至少大 约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编码的 八，所述核酸包含与SEQ ID NO: 232中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所 述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交； (xxiii) 包含SEQ ID NO: 187中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 200中给出的 序列的 ' ;或 (xxiv) 由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID NO: 227中给出的序列具有至少大 约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编码的 八，所述核酸包含与SEQ ID NO: 233中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所 述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交。
10. 权利要求1-9中任一项的TLla-结合蛋白，其中所述抗原结合结构域包含： (i) 重链可变区（VH)，其包含SEQ IDN0: 42、175-181、183或185-187的任何一个中 给出的序列或者由包含与SEQ ID NO: 222-227的任何一个中给出的序列具有至少大约95% 同一性的序列的核酸编码的序列；和/或 (ii) 轻链可变区（VJ，其包含SEQ ID N0:46、188-194、196或198-200的任何一个中 给出的序列或者由包含与SEQ ID NO: 228-233的任何一个中给出的序列具有至少大约95% 同一性的序列的核酸编码的序列。
11. 包含权利要求1-9中任一项的抗体的抗原结合结构域的TLla-结合蛋白，其中所述 抗原结合结构域至少包含重链可变区（V H)和轻链可变区（VJ，其中所述'形成Fv。
12. 权利要求11的TLla-结合蛋白，其包含以下成对VjP'的任何一个： ⑴包含SEQ ID NO: 42中给出的序列的重链可变区（VH)和包含SEQ ID NO: 46中 给出的序列的轻链可变区（'); (ii) 由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID NO: 106中给出的序列具有至少大约 95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编码的'， 所述核酸包含与SEQ ID NO: 107中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所述 核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交； (iii) 包含SEQ ID NO: 175中给出的序列的￥11和包含EQ ID NO: 188中给出的序列 的VL; (iv) 由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID NO: 222中给出的序列具有至少大约 95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编码的'， 所述核酸包含与SEQ ID NO: 228中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所述 核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交； (v) 包含SEQ ID NO: 176中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 189中给出的序列 的VL; (vi) 由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID NO: 223中给出的序列具有至少大约 95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编码的'， 所述核酸包含与SEQ ID NO: 228中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所述 核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交； (vii) 包含SEQ ID NO: 177中给出的序列的乂11和包含SEQ ID NO: 190中给出的序 列的' ; (viii) 由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID NO: 224中给出的序列具有至少大 约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编码的 '，所述核酸包含与SEQ ID NO: 229中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所 述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交； (ix)包含SEQ ID NO: 178中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 191中给出的序列 的VL; (X)由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID NO: 224中给出的序列具有至少大约 95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编码的八， 所述核酸包含与SEQ ID NO: 230中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所述 核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交； (xi) 包含SEQ ID NO: 179中给出的序列的乂11和包含SEQ ID NO: 192中给出的序列 的VL; (xii) 由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID NO: 224中给出的序列具有至少大约 95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编码的'， 所述核酸包含与SEQ ID NO: 231中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所述 核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交； (xiii) 包含SEQ ID NO: 180中给出的序列的乂11和包含SEQ ID NO: 193中给出的序 列的' ; (xiv) 由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID NO: 224中给出的序列具有至少大约 95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编码的'， 所述核酸包含与SEQ ID NO: 228中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所述 核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交； (xv) 包含SEQ ID NO: 181中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 194中给出的序列 的VL; (xvi) 由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID NO: 225中给出的序列具有至少大约 95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编码的'， 所述核酸包含与SEQ ID NO: 230中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所述 核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交； (xvii) 包含SEQ ID NO: 183中给出的序列的乂11和包含SEQ ID NO: 196中给出的序 列的' ; (xviii) 由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID NO: 226中给出的序列具有至少大 约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编码的 八，所述核酸包含与SEQ ID NO: 230中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所 述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交； (xix) 包含SEQ ID NO: 185中给出的序列的乂11和包含SEQ ID NO: 198中给出的序 列的' ; (XX)由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID NO: 226中给出的序列具有至少大约 95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编码的'， 所述核酸包含与SEQ ID NO: 232中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所述 核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交； (xxi)包含SEQ ID NO: 186中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 199中给出的序 列的;和 (xxii) 由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID NO: 227中给出的序列具有至少大 约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编码的 八，所述核酸包含与SEQ ID NO: 232中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所 述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交； (xxiii) 包含SEQ ID NO: 187中给出的序列的￥11和包含SEQ ID NO: 200中给出的 序列的 ' ;或 (xxiv) 由核酸编码的VH，所述核酸包含与SEQ ID NO: 227中给出的序列具有至少大 约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和由核酸编码的 八，所述核酸包含与SEQ ID NO: 233中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所 述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交。
13. 权利要求1的TLla-结合蛋白，包含： (a) 重链可变区（VH)，其包含以下： (i) 包含SEQ ID NO: 144中给出的氨基酸序列的重链FR1; (ii) 包含SEQ ID NO: 43中给出的序列的重链⑶R1; (iii) 包含SEQ ID NO: 145中给出的氨基酸序列的重链FR2; (iv) 包含SEQ ID NO: 142中给出的序列的重链CDR2; (v) 包含SEQ ID NO: 146中给出的氨基酸序列的重链FR3; (vi) 包含SEQ ID NO: 143中给出的序列的重链CDR3;和 (vii) 包含SEQ ID NO: 147中给出的氨基酸序列的重链FR4;和 (b) 轻链可变区，其包含以下： (i) 包含SEQ ID NO: 148中给出的氨基酸序列的轻链FR1; (ii) 包含SEQ ID NO: 139中给出的序列的轻链⑶R1; (iii) 包含SEQ ID NO: 149中给出的氨基酸序列的轻链FR2; (iv) 包含SEQ ID NO: 140中给出的序列的轻链CDR2; (v) 包含SEQ ID NO: 150中给出的氨基酸序列的轻链FR3; (vi) 包含SEQ ID NO: 141中给出的序列的轻链CDR3;和 (vii) 包含SEQ ID NO: 151中给出的氨基酸序列的轻链FR4。
14. 权利要求11-14中任一项的TLla-结合蛋白，其中所述VH和所述'在单一条多肽 链中，并且所述TLla-结合蛋白为： (i) 单链Fv片段（scFv); (ii) 二聚体 scFv (di-scFv); (iii) 连接到Fc或重链恒定结构域（CH) 2和/或CH3的（i)或（ii);或 (iv) 连接到与免疫效应细胞结合的蛋白的（i)或（ii);或 其中所述 '和VH在分开的多肽链中，并且所述TLla-结合蛋白为： (i) 双抗体； (ii) 三抗体； (iii) 四抗体； (iv) Fab ； (v) F(ab, )2 ; (vi) Fv ； (vii) 连接到Fc或重链恒定结构域（CH) 2和/或CH3上的（i)至（vi)之一； (viii) 连接到与免疫效应细胞结合的蛋白上的（i)至（vi)之一；或 (ix) 抗体。
15. 权利要求1-14中任一项的TLla-结合蛋白，其是嵌合的、脱免疫化的、人源化的、同 人源化的、人的或灵长类化的。
16. 缀合到化合物上的权利要求1-15中任一项的TLla-结合蛋白。
17. 分离的或重组的编码权利要求1-16中任一项的TLla-结合蛋白或编码其多肽的核 酸。
18. 权利要求17的分离的或重组的核酸，所述核酸包含与SEQ ID NO: 106、107或 222-233的任何一个中给出的序列具有至少95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度 严格性条件下与其杂交。
19. 权利要求17或18的分离的或重组的核酸，所述核酸包含以下的一个或多个： (i) 核酸，所述核酸包含与SEQ ID NO: 106中给出的序列具有至少大约95%同一性的 序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和核酸，所述核酸包含与SEQ ID NO: 107中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性 条件下与其杂交； (ii) 核酸，所述核酸包含与SEQ ID NO: 222中给出的序列具有至少大约95%同一性 的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和核酸，所述核酸包含与SEQ ID NO: 228中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严 格性条件下与其杂交； (iii) 核酸，所述核酸包含与SEQ ID NO: 223中给出的序列具有至少大约95%同一 性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和核酸，所述核酸包含与SEQ ID NO: 228中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严 格性条件下与其杂交； (iv) 核酸，所述核酸包含与SEQ ID NO: 224中给出的序列具有至少大约95%同一性 的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和核酸，所述核酸包含与SEQ ID NO: 229中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严 格性条件下与其杂交； (v) 核酸，所述核酸包含与SEQ ID NO: 224中给出的序列具有至少大约95%同一性的 序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和核酸，所述核酸包含与SEQ ID NO: 230中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性 条件下与其杂交； (vi) 核酸，所述核酸包含与SEQ ID NO: 224中给出的序列具有至少大约95%同一性 的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和核酸，所述核酸包含与SEQ ID NO: 231中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严 格性条件下与其杂交； (vii) 核酸，所述核酸包含与SEQ ID NO: 224中给出的序列具有至少大约95%同一 性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和核酸，所述核酸包含与SEQ ID NO: 228中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严 格性条件下与其杂交； (viii) 核酸，所述核酸包含与SEQ ID NO: 225中给出的序列具有至少大约95%同一 性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和核酸，所述核酸包含与SEQ ID NO: 230中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严 格性条件下与其杂交； (ix) 核酸，所述核酸包含与SEQ ID NO: 226中给出的序列具有至少大约95%同一性 的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和核酸，所述核酸包含与SEQ ID NO: 230中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严 格性条件下与其杂交； (X)核酸，所述核酸包含与SEQ ID NO: 226中给出的序列具有至少大约95%同一性的 序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和核酸，所述核酸包含与SEQ ID NO: 232中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性 条件下与其杂交； (xi) 核酸，所述核酸包含与SEQ ID NO: 227中给出的序列具有至少大约95%同一性 的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和核酸，所述核酸包含与SEQ ID NO: 232中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严 格性条件下与其杂交；或 (xii) 核酸，所述核酸包含与SEQ ID NO: 227中给出的序列具有至少大约95%同一 性的序列或者所述核酸在中度至高度严格性条件下与其杂交；和核酸，所述核酸包含与SEQ ID NO: 233中给出的序列具有至少大约95%同一性的序列或者所述核酸在中度至高度严 格性条件下与其杂交。
20. 表达构建体，包含可操作连接到启动子上的权利要求17-19中任一项的核酸。
21. 表达权利要求1-16中任一项的TLla-结合蛋白的分离的细胞，或经遗传修饰以表 达权利要求1-16中任一项的TLla-结合蛋白的重组的细胞。
22. 组合物，包含权利要求1-16中任一项的蛋白或权利要求17-19中任一项的核酸或 权利要求20的表达构建体或权利要求21的细胞和合适的载体。
23. 用于在细胞、组织、器官或受试者中治疗或预防至少一种TLla-介导的病况的症状 的方法，所述方法包括将权利要求1-16中任一项的蛋白或权利要求17-19中任一项的核酸 或权利要求20的表达构建体或权利要求21的细胞或权利要求22的组合物给予所述细胞、 组织、器官或受试者。
24. 权利要求1-16中任一项的TLla-结合蛋白或权利要求17-19中任一项的核酸或权 利要求20的表达构建体或权利要求21的细胞或权利要求22的组合物在医学中的用途。
25. 权利要求1-16中任一项的TLla-结合蛋白或权利要求17-19中任一项的核酸或权 利要求20的表达构建体或权利要求21的细胞在制备用于治疗或预防TLla-介导的病况的 症状的药物中的用途。
26. 用于治疗或预防TLla-介导的病况的症状的权利要求1-16中任一项的TLla-结合 蛋白或权利要求17-19中任一项的核酸或权利要求20的表达构建体或权利要求21的细胞 或权利要求22的组合物。
27. 在样品中检测TLla的方法，所述方法包括使样品与权利要求1-16中任一项的 TLla-结合蛋白接触，使得形成抗原-蛋白复合物并检测所述复合物，其中检测所述复合物 表明所述样品中的TLla。
28. 在受试者中检测TLla的方法，所述方法包括在所述受试者中检测权利要求1-16中 任一项的TLla-结合蛋白，其中所述蛋白缀合到可检测标记上。
29. 在受试者中诊断TLla-介导的病况的方法，所述方法包括进行权利要求27或28的 方法，其中TLla的检测表明TLla-介导的病况。
30. 权利要求29的方法，包括在所述样品中测定TLla水平，其中与对照样品相比，所述 样品中TLla水平的增加或减少表明TLla-介导的病况。
31. 权利要求23、29或30中任一项的方法或权利要求25或26的用途，其中所述 TLla-介导的病况是自身免疫性疾病。
32. 权利要求23、29、30或31中任一项的方法或权利要求25、26中任一项的用途，其中 所述TLla-介导的病况是溃疡性结肠炎、克罗恩病、肠易激综合征、类风湿性关节炎、多关 节炎、多发性硬化、葡萄膜炎、哮喘或慢性阻塞性肺病。
33. 自多种TLla-结合蛋白中选择特异性结合到TLla上并抑制TLla与死亡受体3 (DR3)的相互作用而不抑制TLla与诱饵受体3 (DcR3)的相互作用的TLla-结合蛋白的方 法，所述方法包括： 在足以允许TLla-结合蛋白与TLla突变蛋白结合条件下，使多种TLla-结合蛋白与所 述突变蛋白接触以形成TLla-结合蛋白-TLla突变蛋白复合物和不与所述TLla突变蛋白 结合的排除的多种TLla-结合蛋白，在所述突变蛋白中SEQ ID NO:202的氨基酸位置32的 精氨酸已被丙氨酸置换和/或氨基酸位置85的精氨酸已被丙氨酸置换， 并且自排除的多种TLla-结合蛋白中收集不与TLla突变蛋白结合的TLla-结合蛋白， 其中所收集的TLla-结合蛋白特异性结合到TLla上并抑制TLla与DR3的相互作用，而不 抑制TLla与DcR3的相互作用。 34. TLla-结合抗体，包含 SEQ ID NO:42 的 ％和 SEQ ID NO:46 的八。 35. TLla-结合抗体，包含 SEQ ID NO: 175 的 VH 和 SEQ ID NO: 188 的 VL。 36. TLla-结合抗体，包含 SEQ ID NO: 176 的 VH 和 SEQ ID NO: 189 的 VL。 37. TLla-结合抗体，包含 SEQ ID NO: 177 的 VH 和 SEQ ID NO: 190 的 VL。 38. TLla-结合抗体，包含 SEQ ID NO: 178 的 SEQ ID NO: 191 的八。 39. TLla-结合抗体，包含 SEQ ID NO: 179 的 VH 和 SEQ ID NO: 192 的 VL。 40. TLla-结合抗体，包含 SEQ ID NO: 180 的 VH 和 SEQ ID NO: 193 的 VL。 41. TLla-结合抗体，包含 SEQ ID NO: 181 的 SEQ ID NO: 194 的八。 42. TLla-结合抗体，包含 SEQ ID NO: 183 的 VH 和 SEQ ID NO: 196 的 VL。 43. TLla-结合抗体，包含 SEQ ID NO: 185 的 VH 和 SEQ ID NO: 198 的 VL。 44. TLla-结合抗体，包含 SEQ ID NO: 186 的 VH 和 SEQ ID NO: 199 的 VL。 45. TLla-结合抗体，包含 SEQ ID NO: 187 的 VH 和 SEQ ID NO: 200 的八。
【文档编号】A61K39/395GK104114577SQ201280059383
【公开日】2014年10月22日 申请日期:2012年9月28日 优先权日:2011年9月30日
【发明者】L.D.波尔顿, A.克拉克, A.J.波, D.塔姆瓦基斯, G.科普斯达斯, A.G.多勒, P.A.詹宁斯, M.波拉德 申请人:特瓦制药澳大利亚私人有限公司