一种谷胱甘肽抗癌组合物的制作方法
【专利摘要】本发明涉及一种含有谷胱甘肽的组合物，包括谷胱甘肽和中药提取物，其中中药提取物由10重量份的丹参、10重量份的三七、5重量份的白术、2重量份的防风、1重量份的菟丝子和1重量份的马尾莲制成。本发明组合物具有治疗癌症的用途。
【专利说明】一种谷胱甘肽抗癌组合物
【技术领域】
[0001]本发明涉及药物领域，具体涉及一种谷胱甘肽抗癌组合物及其应用。
【背景技术】
[0002]随着化疗的发展，癌症患者的存活和康复率得到了改善。然而，抗癌制剂存在毒性大并危害正常细胞的弊端。为克服上述副作用，最近开展了很多研究以开发可替代性抗癌物质并选择性地抑制肿瘤细胞的增生，因此得到很多具有抗癌活性的候选药物。然而，新的开发出来的能够特 异性抑制肿瘤细胞增生的抗癌化合物是通过化学合成手段得到，因此在体内可能具有严重的副作用。
[0003]传统抗癌制剂的弊端促使很多研究人员致力于开发副作用小、同时具有良好抗煽活性的抗癌物质。因此，从植物中寻找高效低毒的抗癌药物，成为国内外抗癌药物研究的重点。有效的抗癌化合物和中草药有效部位的抗癌复方制剂都具有重要的临床价值。
[0004]丹参,唇形科植物丹参(salvia miltiorrhiza)的干燥根及根莖，在中国使用已有几百年历史，广泛地用于心血管疾病的治疗。自20世纪30年代以来，国内外学者对丹参的活性成分和药理作用进行了大量研究，并得到了许多化学成分，其药理学研究表明，丹参对心脑血管系统、消化系统、呼吸系统、中枢神经系统、免疫系统等均有保护作用。丹参酮(tanshinone)是丹参的乙醚或乙醇提取物，均含有邻醌或对醌的结构，总称丹参酮类化合物，被认为是丹参中主要活性成分之一。其中主要有丹参酮I(tanshinone I)，丹参酮IIA (tanshinone II A),隐丹参酮(cryptotanshinone), 二氢丹参酮 I (dihydrotanshinoneI)，表现出抗肿瘤、抗炎、心肌保护等多种生物活性。
[0005]三七，五加科人参属植物，具有显著和广泛的药理活性，长期以来一直是科学界研究的热点。目前已明确，人参属植物(如人参、三七、西洋参)的主要药效成分为达玛烷型的人参皂苷类成分。研究表明，三七中的人参皂苷类成分可通过直接杀伤肿瘤细胞、抑制肿瘤细胞生长或转移、诱导肿瘤细胞凋亡等多种方式起到抗肿瘤作用。又有报道指出人参皂苷元的抗肿瘤活性要优于人参皂苷。
[0006]白术,菊科植物白术(Atractylodes macrocephala Koidz.)的干燥根莖，具有健脾益气，燥湿利水，止汗，安胎等功效，主要用于脾虚食少，腹胀泄泻，痰饮眩悸，水肿，自汗，胎动不安等症。现代药理学研究表明，白术有利尿、抗肿瘤、抗炎、抗糖尿病、抗衰老等多种作用。
[0007]防风，伞形科植物防风Saposhnikovia divaricata (Turcz.) Schischk.的干燥根。中医学认为:防风性辛、甘，温。归膀胱、肝、脾经。具有解表祛风、胜湿、止痉的功效。现代药学技术研究表明，防风根含3' -O-当归酰亥茅酹(3' -0-angeloyl-hamaudol)、5-0-甲基齿阿密醇(5-0-methylvisamminol、β _谷留醇、甘露醇以及木腊酸(lignoceric acid)为主的长链脂肪酸。尚含挥发油、前胡素(dacursin)和色原酮甙(chromone)。还含升麻素及升麻素苷等。临床用于感冒头痛、风湿痹痛、风疹瘙痒、破伤风、提高免疫力等。
[0008]英丝子，别名黄丝、黄藤子、豆寄生，为旋花科植物英丝子Cuscuta chinessisLam.的种子。其性温，味甘，具有滋补肝肾、固精缩尿、安胎、明目、止泻的功效。始载于《神农本草经》，其后的历代医书本草专著中均有收录，中国历版药典也均有收载，是一味滋补壮阳的传统中药。目前，菟丝子中化学成分研究较多，主要含黄酮类、植物留醇类、多糖类、脂肪酸、氨基酸及微量元素等化学成分。现代药理研究证实，菟丝子具有促性腺激素样、抗氧化抗衰老、促成骨细胞增生、增强机体免疫功能、抑制肠运动等多方面的作用。
[0009]马尾连，《中国药物植物志》中称为多叶唐松草，又称为马尾黄连、金丝黄连。多叶唐松草(Thacictrum tinstii Boivin)为毛莨科植物,产于云南大理、宾川一带。生于海拔2500米山坡草地。根 据《中国植物志》记载，马尾连在民间被用于治疗痢疾、肠炎、急性肠炎、急性咽喉炎等症。
[0010]谷胱甘肽(GSH)，又名Y -L-谷氨酰-L-半胱氨酸-甘氨酸，是一种具有重要生理功能的活性三肽，是细胞内主要还原物质，能保护细胞免受氧化型、毒害性化合物和辐射的伤害。作为解毒剂、生物活性添加剂及抗氧化剂，广泛应用于医药、保健品、食品加工、动物饲料营养以及化妆品等领域。目前，GSH的用途越来越广泛。
[0011]谷胱甘肽(glutathione)是由Hopkins 发现并命名，1929 年 Hopkins及Kendall等各自独立的发现其为含有甘氨酸的三肽。谷胱甘肽化学名为:N- (N-L-r-Glutamyl-L-cysteninyl) glycine,即 N(N-L_r-谷氨酸-L-半胱氨酸)甘氨酸。谷胱甘肽可分为还原型谷胱甘肽(reduced glutathione, GSH)和氧化型谷胱甘肽(oxidizided glutathione, GSSG)。通常所说的谷胱甘肽是指还原型谷胱甘肽,是由r_谷氨酸、半胱氨酸、甘氨酸组成的三肽。谷胱甘肽是机体内的重要活性物质，它具有消除自由基、解毒、促进铁质吸收及维持红细胞膜的完整性、维持DNA的生物合成、细胞的正常生长及细胞免疫等多种生理功能。
[0012]目前，将中草药与谷胱甘肽联合治疗癌症的应用未见有报道。
【发明内容】
[0013]本发明要解决的技术问题是提供一种抗癌治疗效果明显的抗癌组合物。我们发现，应用中草药与谷胱甘肽的组合是显著提高抗肿瘤治疗作用的有效方法。
[0014]为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是:
[0015]一种谷胱甘肽抗癌组合物，包含谷胱甘肽、中药提取物以及药学上可接受的辅料。
[0016]上述抗癌组合物含有0.1-10重量％的谷胱甘肽以及0.1-10重量％的中药提取物。
[0017]上述谷胱甘肽优选还原型谷胱甘肽。
[0018]上述中药提取物由10重量份的丹参、10重量份的三七、5重量份的白术、2重量份的防风、I重量份的菟丝子和I重量份的马尾莲制成。
[0019]上述中药提取物按照以下方法制成:将各种中药材混合后用30-90%体积比的乙醇加热提取，合并提取液，过滤，滤液浓缩至清膏；加乙醇使含醇量达到70%，静置24小时，过滤，滤液减压回收乙醇浓缩得提取物。
[0020]上述药学上可接受的辅料包括药学领域常规的稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂等。
[0021]上述抗癌组合物的剂型为但不限于片剂、胶囊剂、颗粒剂、注射剂、栓剂、缓控释制剂。
[0022]上述抗癌组合物施用但不限于选自患有肝癌、结肠癌、肺癌、乳腺癌、前列腺癌的个体中。
[0023]本发明具有积极有益的效果:
[0024]本发明意外发现，将中草药与谷胱甘肽配合使用对肿瘤细胞生长具有抑制作用，增强肿瘤细胞凋亡的疗效，并可减轻其毒副作用，提高肿瘤患者生活质量和存活时间。
【具体实施方式】
[0025]下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
[0026]实施例1、中药提取物的制备
[0027]将100g丹参、100g三七、50g白术、20g防风、IOg菟丝子和IOg马尾莲用80%体积比的乙醇加热提取，合并提取液，过滤，滤液浓缩至清膏；加乙醇使含醇量达到70%，静置24小时，过滤，滤液减压回 收乙醇浓缩得提取物。
[0028]实施例2、片剂的制备
[0029]取IOg采用实施例1方法制备的提取物，加入还原型谷胱甘肽10g，以及羧甲基淀粉钠50g,微晶纤维素45g,乳糖35g,柠檬酸3g,微粉硅胶8g,硬脂酸镁3g,滑石粉IOg,充分搅拌混合制成颗粒，在60°C干燥4小时，压制成1000片。
[0030]实施例3、包含中药提取物和谷胱甘肽的组合物在抑制肿瘤细胞生长中的应用
[0031]将肿瘤细胞(人肝癌BEL-7402细胞、人结肠癌HCT-8细胞、人肺癌A-549细胞、人乳腺癌MDA-MB-231细胞和人前列腺癌LNCaP细胞)用0.25%的胰蛋白酶消化，然后用含10% (体积百分含量)胎牛血清的DMEM完全培养基悬浮细胞，制成细胞悬液，并分别将各肿瘤细胞稀释至1.0X 105个/mL，再将其接种至96孔培养板中，每孔200 μ L,各肿瘤细胞分别接种3个孔，于37°C，5% CO2的培养箱内培养24h ;然后倾去各孔培养液。
[0032]取适量实施例1制得的中药提取物溶解于乙醇中，然后用DMEM完全培养基进行稀释，得到中药提取物溶液，使中药提取物的终浓度为50 μ g/mL,使乙醇的浓度为10% (体积百分含量)。
[0033]取适量还原型谷胱甘肽溶解于乙醇中，然后用DMEM完全培养基进行稀释，得到谷胱甘肽溶液，使谷胱甘肽的终浓度为50 μ g/mL,使乙醇的浓度为10% (体积百分含量)。
[0034]取适量实施例1制得的中药提取物和还原型谷胱甘肽按照1:1的重量比溶解于乙醇中，然后用DMEM完全培养基进行稀释，得到联合药物溶液，使联合药物的终浓度为50 μ g/mL,使乙醇的浓度为10% (体积百分含量)。
[0035]同时设谷胱甘肽组、中药组、联合组、对照组和空白组进行实验:
[0036]谷胱甘肽组:将上述谷胱甘肽溶液依次分别加入上述肿瘤细胞BEL-7402、HCT-8、A-549、MDA-MB-231和LNCaP的培养孔内，各自接种3个孔，每孔加入200 μ I ;
[0037]中药组:将上述中药提取物溶液依次分别加入上述肿瘤细胞BEL-7402、HCT-8、A-549、MDA-MB-231和LNCaP的培养孔内，各自接种3个孔，每孔加入200 μ I ;
[0038]联合组:将上述联合药物溶液依次分别加入上述肿瘤细胞BEL-7402、HCT-8、A-549、MDA-MB-231和LNCaP的培养孔内，各自接种3个孔，每孔加入200 μ I ;
[0039]对照组:向上述各肿瘤细胞的培养孔内加入含10% (体积百分含量)乙醇的DMEM完全培养基，各自接种3个孔，每孔加入200 μ I ；
[0040]空白组:向不含肿瘤细胞的空培养孔内加入含10% (体积百分含量)乙醇的200 μ I的DMEM完全培养基；
[0041]将以上各组的培养板同时置于37°C、5% CO2的培养箱内培养2天。
[0042]2天后向每孔加入20μ I新鲜配制的5mg/ml四甲基偶氮唑盐(MTT)溶液，并在37°C、5% CO2的条件下继续培养4h ;小心弃上清液，每孔加入200 μ L乙醇，室温放置15-20min,每5min振荡一次；在酶标仪上测定各孔在波长490nm处的光密度值(0D值)，按公式计算肿瘤细胞生长抑制率。抑制率) = 1_(0D谷胱甘肽/中药/联合-OD空白)/(0D对照-OD空
白)X100%。
[0043]实验设三次重复，结果取平均数。谷胱甘肽组、中药组和联合组对人不同肿瘤细胞的抑制作用的结果如表1所示。
[0044]表1、谷胱甘肽组、中药组和联合组对人不同肿瘤细胞的抑制作用
【权利要求】
1.一种谷胱甘肽抗癌组合物，包含谷胱甘肽、中药提取物以及药学上可接受的辅料。
2.根据权利要求1所述的抗癌组合物，其特征在于，所述组合物含有0.1-10重量％的谷胱甘肽以及0.1-10重量％的中药提取物。
3.根据权利要求1-2所述的抗癌药物组合物，所述中药提取物由10重量份的丹参、10重量份的三七、5重量份的白术、2重量份的防风、I重量份的菟丝子和I重量份的马尾莲制成。
4.根据权利要求1-3所述的抗癌组合物，所述中药提取物按照以下方法制成:将各种中药材混合后用30-90%体积比的乙醇加热提取，合并提取液，过滤，滤液浓缩至清膏；加乙醇使含醇量达到70%，静置24小时，过滤，滤液减压回收乙醇浓缩得提取物。
5.根据权利要求1-4所述的抗癌组合物，所述抗癌组合物的剂型为片剂、胶囊剂、颗粒剂、注射剂、栓剂、缓控释制剂。
6.根据权利要求1-5所述的抗癌组合物，所述抗癌组合物施用选自患有肝癌、结肠癌、肺癌、乳腺癌和前列腺癌 的个体中。
【文档编号】A61K38/06GK103933541SQ201410196349
【公开日】2014年7月23日 申请日期:2014年5月12日 优先权日:2014年5月12日
【发明者】潘宏涛 申请人:潘宏涛